ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN VĂN MINH XÁC ĐỊNH MỘT SỐ LOẠI VI KHUẨN, KHÁNG SINH TỒN DƢ TRONG SỮA BÒ NUÔI TẠI TỈNH VĨNH PHÚC VÀ ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: GS.TS NGUYỄN QUANG TUYÊN THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, công trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chƣa đƣợc sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan, giúp đỡ cho việc thực luận văn đƣợc cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn đƣợc rõ nguồn gốc Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Tác giả luận văn Nguyễn Văn Minh Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu thầy cô giáo khoa Sau Đại học khoa Chăn nuôi Thú y - Trƣờng Đại học Nông lâm Thái Nguyên giành nhiều thời gian, công sức giúp đỡ trình học tập thực đề tài Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn GS.TS Nguyễn Quang Tuyên - Phó viện trƣởng Viện khoa học sống – Đại học Thái Nguyên, TS Phạm Thị Ngọc Phó trƣởng Bộ môn Vệ sinh thú y – Viện Thú y Quốc gia tận tình giúp đỡ, hƣớng dẫn trình thực hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn cán bộ, công nhân viên chức Bộ môn Vệ sinh thú y – Viện Thú y Quốc gia, lãnh đạo, cán công nhân viên Chi cục Thú y tỉnh Vĩnh Phúc tạo điều kiện giúp đỡ trình học tập thực đề tài Tôi xin gửi lời cám ơn tới ngƣời thân gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên giúp đỡ hoàn thành luận văn Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Tác giả luận văn Nguyễn Văn Minh Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỤC LỤC Trang 1.1 MỞ ĐẦU Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Tác hại tồn dƣ vi sinh vật kháng sinh sữa tƣơi 1.1.1 1.1.2 1.2 1.2.1 Tác hại tồn dƣ vi sinh vật sữa tƣơi Tác hại tồn dƣ kháng sinh sữa tƣơi Nguyên nhân tồn dƣ vi sinh vật kháng sinh sữa tƣơi Nguyên nhân tồn dƣ vi sinh vật sữa tƣơi 10 10 1.2.2 1.3 1.3.1 1.3.2 1.3.3 Nguyên nhân tồn dƣ kháng sinh sữa tƣơi Đặc điểm số loại vi sinh vật gây viêm vú bò Vi khuẩn Staphylococcus aureus (Sta aureus) Vi khuẩn Streptococcus agalactiae (Strep agalactiae) Mycoplasma bovis (M bovis) 14 17 18 20 21 1.3.4 1.3.5 Corynebacterium bovis (C bovis) Nhóm vi khuẩn môi trƣờng 22 22 1.3.6 1.3.7 Nhóm vi khuẩn hội Nhóm vi khuẩn khác 24 24 1.4 1.4.1 1.4.2 1.4.3 Đặc điểm số loại kháng sinh có sữa tƣơi Penicillin họ β – lactam Streptomycin nhóm Aminoglycoside (AG) Nhóm sulfamid 25 25 28 29 1.4.4 1.4.5 1.4.6 1.5 1.5.1 Nhóm chloramphenicol Hoạt phổ, chế tác dụng kháng sinh, kháng thuốc Những tác hại thuốc Tình hình nghiên cứu nƣớc Tình hình nghiên cứu bệnh viêm vú bò sữa 30 31 31 32 32 1.5.2 Tình hình nghiên cứu tồn dƣ kháng sinh sữa bò tƣơi Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 3 42 http://www.lrc-tnu.edu.vn 2.1 Đối tƣợng, nội dung, vật liệu địa điểm nghiên cứu 42 2.1.1 2.1.2 2.2 Đối tƣợng nghiên cứu Địa điểm nghiên cứu Nội dung nghiên cứu 42 42 42 2.2.1 2.2.2 Khảo sát, điều tra thực trạng chăn nuôi bò sữa Vĩnh Phúc Kiểm tra số tiêu vệ sinh ảnh hƣởng đến chất lƣợng sữa tƣơi 42 42 2.2.3 2.2.4 2.2.5 Phân lập giám định loại vi khuẩn có mẫu sữa Phân loại số vi khuẩn có mẫu sữa Kiểm tra độc lực số chủng vi khuẩn phân lập đƣợc 42 42 43 2.2.6 Kiểm tra tồn dƣ kháng sinh mẫu sữa thu thập bò nuôi tập trung 43 2.2.7 Nghiên cứu đề xuất số giải pháp cải thiện tình trạng ô nhiễm 2.3 2.3.1 chăn nuôi bò sữa khai thác sữa Nguyên liệu dùng nghiên cứu Mẫu kiểm nghiệm 2.3.2 2.3.3 Thiết bị dụng cụ thí nghiệm Môi trƣờng hoá chất 43 43 2.4 2.4.1 Phƣơng pháp nghiên cứu Phƣơng pháp điều tra 44 44 2.4.2 Phƣơng pháp kiểm tra số tiêu vệ sinh ảnh hƣởng đến chất lƣợng toàn sữa tƣơi 44 2.4.3 2.4.4 2.4.5 Phƣơng pháp thu thập mẫu sữa Phƣơng pháp xử lý mẫu sữa Phƣơng pháp kiểm tra nhanh bệnh viêm vú thuốc thử CMT 44 45 45 2.4.6 2.4.7 2.4.8 2.4.9 Phƣơng pháp phân lập vi khuẩn Phƣơng pháp định loại số vi khuẩn Phƣơng pháp phân biệt số chủng Streptococcus Phƣơng pháp phân loại số chủng Staphylococcus 47 48 49 50 43 43 2.4.10 Xác định tồn dƣ kháng sinh sữa phƣơng pháp vi sinh vật 2.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết điều tra tình hình chăn nuôi bò sữa tỉnh Vĩnh Phúc Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 43 52 55 56 56 http://www.lrc-tnu.edu.vn 3.2 Kết điều tra thực trạng chăn nuôi bò sữa Vĩnh Phúc 3.2.1 3.2.2 Kết điều tra vệ sinh thức ăn, nguồn nƣớc, chuồng trại kiểm tra sức khoẻ đàn bò Kết điều tra trạng vệ sinh vắt sữa 3.2.3 3.2.4 Kết điều tra tình tình hình bò sữa bị viêm vú thể lâm sàng Kết điều tra tình hình sử dụng khán g sinh điều trị bò sữa 3.3 3.3.1 Kết kiểm tra số tiêu vệ sinh ảnh hƣởng đến chất lƣợng sữa tƣơi Kết kiểm tra số vi khuẩn hiếu khí chuồng nuôi bò sữa 3.3.2 Kết kiểm tra số vi khuẩn hiếu khí da bầu vú bò sữa 70 3.3.3 Kết kiểm tra bò viêm vú phi lâm sàng phƣơng pháp CMT 71 3.4 3.5 3.5.1 Kết phân lập giám định loại vi khuẩn có mẫu sữa Kết phân loại số vi khuẩn có mẫu sữa Kết phân loại vi khuẩn Staphylococcus spp theo sở lấy mẫu 73 74 74 3.5.2 3.6 Kết phân loại vi khuẩn Streptococcus spp theo sở lấy mẫu Kết kiểm tra độc lực số chủng vi khuẩn phân lập đƣợc 75 76 3.7 Kết kiểm tra tồn dƣ kháng sinh mẫu sữa thu thập bò nuôi tập trung 77 3.8 Đề xuất số giải pháp nhằm cải thiện tình trạng tồn dƣ vi sinh vật, kháng sinh sữa tƣơi 78 3.8.1 3.8.2 3.8.3 Con giống Chuồng trại bãi chăn thả Vệ sinh môi trƣờng chăn nuôi thú y 78 78 78 3.8.4 Điều trị loại thải bò sữa 80 82 82 83 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 4.2 Kết luận Đề nghị TÀI LIỆU THAM KHẢO I II Tài liệu tiếng việt Tài liệu tiếng nƣớc Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 59 59 62 64 66 68 68 84 84 87 http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AG Aminoglycoside BA Bacillus spp BsDA Bacillus stearothemophilus Disc Assay CAMP Christie – Atkins – Munch – Peterson CFU Conoly Forming Unit CMT California mastitis tets CNS Coagulase Negative Staphylococcus CO Coliforms dd dung dịch 10 FPT Four plate Test 11 HPLC Hight performanece Liquid Chromatography 12 MRL Maxinum residue level 13 OS Other Streptococcus 14 PABA Acid para amino benzoic 15 Sal Salmonella 16 SCC Somatic cell count 17 Sta Staphylocccus 18 Strep Streptococcus 19 TB Trung bình 20 TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam 21 TSVK Tổng số vi khuẩn hiếu khí yếm khí tùy tiện Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG SỐ LIỆU Số TT Bảng Nội dung Trang Bảng 3.1 Số lƣợng sản lƣợng sữa đàn bò sữa Vĩnh Phúc 56 Bảng 3.2a Kết điều tra vệ sinh thức ăn, nguồn nƣớc 59 Bảng 3.2b Bảng 3.3 Kết điều tra trạng vệ sinh vắt sữa 63 Bảng 3.4 Tình hình bò sữa bị viêm vú thể lâm sàng 64 Bảng 3.5 Tình hình sử dụng kháng sinh điều trị bệnh cho bò sữa 66 Bảng 3.6 Bảng 3.7 Bảng 3.8 10 Bảng 3.9 11 Bảng 3.10 Kết phân loại vi khuẩn Staphylococcus spp 74 12 Bảng 3.11 Kết phân loại vi khuẩn Streptococcus spp 75 13 Bảng 3.12 Kết kiểm tra độc lực mốt số chủng vi khuẩn phân lập 76 14 Bảng 3.13 Kết kiểm tra tồn dƣ kháng sinh sữa 77 Kết điều tra vệ sinh chuồng trại dung dịch sát trùng kiểm tra sức khoẻ đàn bò Kết kiểm tra số vi khuẩn hiếu khí chuồng nuôi bò sữa Kết kiểm tra số vi khuẩn hiếu khí da bầu vú bò sữa Kết kiểm tra bò viêm vú phi lâm sàng phƣơng pháp CMT Kết phân lập loại vi khuẩn mẫu sữa núm vú Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 61 69 71 72 73 http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Số TT Hình ảnh Nội dung Trang Hình ảnh 01 Đồ thị biểu diễn sản lƣợng sữa TB 01 bò/năm (tấn) Hình ảnh 02 Hình ảnh 03 Hình ảnh 04 Hình ảnh 05 Hình ảnh 06 Đồ thị biểu diễn tần xuất sử dụng loại kháng sinh Hình ảnh 07 Đồ thị biểu diễn kết điều tra chất lƣợng vệ sinh nguồn nƣớc Đồ thị biểu diễn kết điều tra vệ sinh chuồng trại dd sát trùng Đồ thị biểu diễn kết điều tra sát trùng núm vú sau vắt sữa Đồ thị biểu diễn kết điều tra bò sữa bị viêm vú thể lâm sàng Đồ thị biểu diễn kết kiểm tra bò viêm vú phƣơng pháp CMT Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 58 60 62 64 65 67 72 http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Số TT Hình ảnh Ảnh 01 Kiểm tra khuẩn lạc Ảnh 02 Vi khuẩn Sta.aureus môi trƣờng thạch máu Ảnh 03 Vi khuẩn Sta.aureus môi trƣờng Bair packer Ảnh 04 Thử phản ứng CAMP Ảnh 05 Phản ứng CMT Ảnh 06 Tồn dƣ kháng sinh sữa Nội dung Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read ... Tác hại tồn dƣ vi sinh vật kháng sinh sữa tƣơi 1.1.1 1.1.2 1.2 1.2.1 Tác hại tồn dƣ vi sinh vật sữa tƣơi Tác hại tồn dƣ kháng sinh sữa tƣơi Nguyên nhân tồn dƣ vi sinh vật kháng sinh sữa tƣơi... lực số chủng vi khuẩn phân lập đƣợc 75 76 3.7 Kết kiểm tra tồn dƣ kháng sinh mẫu sữa thu thập bò nuôi tập trung 77 3.8 Đề xuất số giải pháp nhằm cải thiện tình trạng tồn dƣ vi sinh vật, kháng sinh. .. trạng chăn nuôi bò sữa Vĩnh Phúc Kiểm tra số tiêu vệ sinh ảnh hƣởng đến chất lƣợng sữa tƣơi 42 42 2.2.3 2.2.4 2.2.5 Phân lập giám định loại vi khuẩn có mẫu sữa Phân loại số vi khuẩn có mẫu sữa Kiểm