A /, _ _ _ /? NGHIÊN CỨU - TRAO ĐOI ẢNH H Ư Ở N G CỦA NƯ ỚC BIỂN T ự N HIÊN VÀ NGUỒN DƯỠNG CHẤT BỔ SUNG ĐẾN S ự SINH TỔ NG H Ợ P PR O T E IN CỦA SPIRULINA PLATENSIS Ở PH Ò N G t h í n g h i ệ m ThS Phạm Thi Kim Ngọc Khoa Hóa học CNTP Trường Đại học Bà Rịa - Vũng Tàu Tóm tắt Trong nghiên cứu này, tiến hành khảo sát số tính chất hóa lý nguồn nước biển bãi biển Thủy Tiên, vùng biển tỉnh Bà Rịa - Vũng Tàu từ dùng nước biển tự nhiên để nuôi Spirulina platensis Sau tiến hành khảo sát tối ưu hóa yếu tố điều kiện hàm lượng dưỡng chất bổ sung có ảnh hưởng đến tổng hợp sinh khối Spirulina platensis môi trường nước biển, xác định thông số tối ưu sau: tỉ lệ nước biển 29%, tỉ lệ giống 0,35 g/l, p H môi trường 8,5, hàm lượng dưỡng chất bổ sung NaHCO3, NaNO3 KH2PO4 17; 3,0 0,0307 (g/l) Khi nuôi Spirulinaplatensis nước biển điều kiện kỹ thuật kết nghiên cứu cho thấy hàm lượng protein sinh khối thu cao (ở mức ý nghĩa a = 0,05) so với sinh khối nuôi môi trường Zarrouk điều kiện tỉ lệ giống, nhiệt độ, cường độ chiếu sáng tốc độ sục khí Kết nghiên cứu xem xét sử dụng nguồn nước biển tự nhiên để nuôi trồng sản xuất Spirulina platensis Từ khóa: dưỡng chất bổ sung, nuôi tảo, nước biển, Spirulina platensis (Spirulina) Abstract In this research, I examined some basic physicochemical properties o f seawater at Thuy Tien beach, Ba Ria - Vung Tau Sea and then used the natural seawater to cultivate Spirulina platensis After surverying the standard condition and optimizing the conditions and supplements fo r the growth o f Spirulina platensis in seawater, we have identified some technical parameters, such as the algae ratio was 0.35 g dry biomass/l; the rate o f 29% seawater; p H 8.5; the concentration (g/l) o f supplements NaHCO3, NaNO3 and KH2PO4 were 17, 3.0 and 0.0307, respectively When cultivating Spirulina platensis in the seawater at the optimized condition, we fo u n d that the protein content o f algae biomass is significantly higher than (P < 0.05) o f that on Zarrouk medium at the same conditions (algae ratio, temperature, light intensity and continuous aeration speed in pilot scale) The results o f this research can be applied to cultivate o f Spirulina platensis using natural seawater Keywords: algae biomass, protein o f algae, seawater, Spirulina platensis, supplements G IỚ I TH IỆU CHUNG Spirulina platensis vi khuẩn lam từ thời cổ đại sử dụng nguồn cung cấp protein ngày quan tâm chúng có khả tổng hợp nhiều hợp chất sinh hóa thiết yếu cho người Spirulina platensis nuôi trồng sử dụng nguồn thực phẩm (Vonshak, 1997), dùng 78 TẬP SAN KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO sản xuất protein đơn bào (Anupama, 2000), chống oxy hóa (Estrada et al., 2001) phòng bệnh (Belay et al., 1993) Đã có nhiều công bố phương pháp nuôi trồng Spirulina (Torzillo et al., 1986; Hu, 1996; Lee, 1997) Đã có nghiên cứu nuôi Spirulina platensis nước biển qua xử lý hóa chất (Leema et al., 2010) hay nước biển tự nhiên A /, _ _ /? NGHIÊN CỨU - TRAO ĐOI (Bharat, 2011) Trong nghiên cứu xác định tỉ lệ nước biển tự nhiên dưỡng chất bổ sung có ảnh hưởng đến tổng hợp sinh khối Spirulina platensis nuôi phòng thí nghiệm PH Ư Ơ N G PH Á P N G H IÊN CỨU 2.1 Nguyên vật liệu: Giống Spirulina platensis Viện Sinh học Nhiệt đới, phân viện miền Nam - Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam cung cấp Nước biển dùng nghiên cứu lấy từ bãi biển Thủy Tiên, thuộc thành phố Vũng Tàu, tỉnh Bà Rịa - Vũng Tàu 2.2 Phương pháp: 2.2.1 Phương pháp nuôi Spirulina Giống hoạt hóa nhân giống môi trường Zarrouk vô trùng thời gian ngày Spirulina nuôi thau nhựa dung tích 10 lít Quá trình hoạt hóa, nhân giống nuôi Spirulina thực nhiệt độ phòng, chiếu sáng với cường độ 4Klux, sục khí với tốc độ 2l/s (riêng hoạt hóa thực máy lắc ngang với tốc độ 250 vòng/phút) Tỉ lệ giống khối lượng sinh khối xác định dựa vào phương trình biểu diễn mối liên hệ hàm lượng sinh khối Spirulina có ẩm độ 83,7% mật độ quang OD420nm Từ phương trình tìm tính khối lượng sinh khối khô 2.2.2 Phương pháp toán học Dùng phương pháp khảo sát luân phiên biến để khảo sát ảnh hưởng yếu tố xác định thí nghiệm tâm cho toán quy hoạch thực nghiệm Xây dựng mô hình thí nghiệm theo phương pháp qui hoạch thực nghiệm toàn phần Y (N=23) với thí nghiệm tâm phương án vừa tìm Phương trình hồi quy xây dựng có dạng Y = bo + b1x1 + b2x2 + b3x3 + b12x1x2 + b13x1x3 + b23x2x3 + b123x1x2x3, với hàm mục tiêu Y khối lượng sinh khối khô (g/l) Tính toán tìm khối lượng sinh khối cực đại, xác định điểm tối ưu công cụ optimizer phần mềm Statgraphics Centurion XV So sánh sai khác giá trị trung bình LSD phân tích phương sai nhân tố ANOVA kết thí nghiệm phần mềm Excell K ẾT QUẢ N G H IÊN CỨU 3.1 Phân tích số tiêu hóa lý nước biển khảo sát Tiến hành phân tích số tiêu nước biển, thu kết sau: pH 7,867 ± 0,04; độ muối 33,90 ±Ẩ0,5770/00; hàm lượng H C O -và CO32- 0,147 ± 0,035 g/l; nitrat 0,53 ± 0,057 mg/l; phospho 0,45 ± 0,036 mg/l, kim loại nặng (As, Hg, Pb) không phát Kết phân tích cho thấy nước biển có độ muối cao, hàm lượng dưỡng chất thấp so với môi trường Zarrouk nên khó nuôi trực tiếp Spirulina nước biển tự nhiên Tuy nhiên để tận dụng tối đa thành phần dưỡng chất tự nhiên sẵn có nước biển cần xác định tỉ lệ sử dụng hàm lượng dưỡng chất bổ sung 3.2 Nghiên cứu điều kiện nuôi cấy ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp sinh khối Các điều kiện nuôi ban đầu có định, nghiên cứu đề cập đến yếu tố là: tỉ lệ nước biển sử dụng, tỉ lệ giống pH môi trường 3.2.1 Khảo sát tỉ lệ nước biển sử dụng Dùng tỉ lệ giống 0,3 (g/l), bổ sung NaHCO3 16 g/l; NaNO3 2,5 g/l phospho 90 mg/l, thay đổi tỉ lệ (v/v) nước biển: nước cất từ 1:2 - 1:6 Kết thí nghiệm sau xử lý số liệu biểu diễn đồ thị hình TẬP SAN KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO 79 A /, _ _ _ /? NGHIÊN CỨU - TRAO ĐOI khác khác có ý nghĩa mức a = 0,05) Hình Đường cong sinh trưởng Spirulina tỉ lệ nước biển sử dụng khác Qua hình thấy ngày đầu Spirulina tăng trưởng chậm chưa thích nghi với môi trường Từ ngày thứ trở đi, Spirulina thích nghi, phát triển tổng hợp sinh khối đạt cực đại vào ngày thứ tỉ lệ 1:3, 1:5 1:6 ngày thứ tỉ lệ 1:4 Khi tỉ lệ nước biển: nước cất =1: 2, hàm lượng natri muối cao ức chế gây đông tụ protein làm cho Spirulina bị kết tụ xuống đáy bình Ở tỉ lệ 1:4 khối lượng sinh khối suất thu hồi sinh khối đạt cực đại (lần lượt 1,0489 ± 0,012 0,083 ± 0,001 g/l/ngày) khác biệt có ý nghĩa (ở mức ý nghĩa a = 0,05) so với tỉ lệ khác Do chọn tỉ lệ 1:4 thời gian xác định khối lượng sinh khối ngày thứ để khảo sát thí nghiệm 3.2.2 Khảo sát tỉ lệ giống Spirulina ban đầu Tiến hành tương tự nghiên cứu 3.2.1, dùng tỉ lệ nước biển: nước cất = 1: (v/v), khảo sát trình tổng hợp sinh khối thay đổi tỉ lệ giống Spirulina ban đầu từ 0,1- 0,4 (g /l) Kết thí nghiệm trình bày bảng Tỉ lệ giống Khối lượng sinh ban đầu (g/1) khối khô cực đại (g/1) 0,1 0,7774 ± 0,0045“ 0,2 0,8901 ± 0,0083c 0,3 1,1158 ± 0,0263” 0,4 1,2078 ± ,0 l a TN Bảng Ảnh hưởng tỉ lệ giống cấy ban đầu đến khối lượng sinh khối (Các giá trị cột có số mũ 80 TẬP SAN KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO Bảng cho thấy tỉ lệ giống khác lượng sinh khối cực đại thu khác có ý nghĩa So sánh cho thấy tăng lượng giống 0,1 g/l lượng sinh khối cực đại thu khác biệt đáng kể, tỉ lệ giống tăng từ 0,2 lên 0,3 g/l khối lượng sinh khối tăng 0,2257 g/l từ 0,3 lên 0,4 g/l tăng 0,092 g/l Điều giải thích mức tỉ lệ giống 0,4 g/l tương đối cao nên hàm lượng dưỡng chất môi trường không đủ cung cấp cho lượng lớn Spirulina phát triển mạnh Đồng thời xét hiệu kinh tế, chọn tỉ lệ giống ban đầu 0,3 g/l làm thí nghiệm tâm cho thí nghiệm khảo sát 3.2.3 Khảo sát ảnh hưởng pH môi trường Nuôi Spirulina với tỉ lệ nước biển: nước cất = 1:4, tỉ lệ giống 0,3 g/l, pH thay đổi từ 8-11 Kết khảo sát tổng hợp sinh khối Spirulina theo thời gian hình Hình Đường cong sinh trưởng Spirulina p H môi trường khác Hình cho thấy khoảng pH từ đến 10 Spirulina phát triển mạnh, pH 11 Spirulina có phát triển với tốc độ chậm Kết phù hợp với pH thích hợp công bố loài (Vonshak,1997) Khả tổng hợp sinh khối pH khác biệt có A /, _ _ /? NGHIÊN CỨU - TRAO ĐOI ý nghĩa so với pH khác, sinh khối khô đạt 1,1189 ± 0,0176 (g/l) với suất 0,102 ± 0,0022 (g/l/ngày) Chúng chọn pH để tiến hành thí nghiệm 3.2.4 Xác định phương trình hồi quy tối ưu hóa yếu tố điều kiện nuôi tảo Chọn tâm quy hoạch thực nghiệm yếu tố: tỉ lệ nước biển (ký hiệu Z1), tỉ lệ giống (Z2), pH môi trường (Z3) Từ tâm quy hoạch chọn, tiến hành thí nghiệm khoảng giới hạn yếu tố sau: 0,25< Z1< 0,35; 21< Z < 29 8,5< Z2 < 9,5 Kết chọn mô hình thực nghiệm thí nghiệm theo mô hình trình bày bảng (trong bảng 2, TN có số thứ tự 9-11 thí nghiệm tâm phương án) Bảng Khối lượng sinh khối Spirulina thu đươc từ thự c nghiêm tối ưu điều kiên nuôi cấy z r Tỉ lệ z 2- Tỉ lệ TN 10 11 giống nước biển (g/l) 0,25 (%) 21 21 29 29 21 21 29 29 25 25 25 0,35 0,25 0,35 0,25 0,35 0,25 0,35 0,3 0,3 0,3 z 3pH Sinh khối khô (g/1) 8,5 8,5 8,5 8,5 9,5 9,5 9,5 9,5 9,0 9,0 9,0 1,026 1,046 0,976 1,1102 0,765 0,843 0,828 1,1049 1,0423 1,0068 1,0071 hợp sinh khối Spirulina phụ thuộc vào yếu tố Khi tăng tỉ lệ nước biển, tỉ lệ giống khối lượng sinh khối khô tăng ngược lại pH môi trường có ảnh hưởng âm (-) pH tăng làm giảm lượng sinh khối thu Tuy nhiên ảnh hưởng pH bị ràng buộc thông qua tương tác với tỉ lệ nước biển, tỉ lệ giống Khả tổng hợp sinh khối chịu ảnh hưởng thông qua tương tác lẫn cặp yếu tố theo phương trình (1) Như chứng tỏ tăng tỉ lệ nước biển, tỉ lệ giống pH, lượng sinh khối thu lớn điều có ý nghĩa thực tiễn cao Tuy nhiên lượng sinh khối thu đạt giá trị tối ưu pH môi trường thay đổi giới hạn khảo sát Tiến hành tối ưu theo phương pháp tìm cực trị nhận điểm tối ưu điều kiện nuôi ảnh hưởng đến khối lượng sinh khối Y1 max = 1,1216 g/l, thông số ảnh hưởng sau: tỉ lệ nước biển sử dụng 29 %, tỉ lệ giống 0,35 g/l, pH môi trường 8,5 3.3 Nghiên cứu hàm lượng dưỡng chất bổ sung đến khả sinh tổng hợp sinh khối Tôi khảo sát nguồn dưỡng chất sau: NaHCO3, NaNO3 phospho 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng NaHCO3 bổ sung Nuôi Spirulina nước biển điều kiện tối ưu vừa tìm nghiên cứu 3.2, bổ sung vào môi trường NaNO3 2,5 g/l phospho 90 mg/l, hàm lượng NaHCO3 bổ sung thay đổi từ 12 - 18 g/l Kết khảo sát tổng hợp sinh khối thể hình 1.30 „ 10 Giải phương pháp ma trận trực giao có hệ số hồi quy sau: bo = 0,9624; b1 = 0,063; b2 = 0,0424; b3 = - 0,0772; b12 = 0,039; b13 = 0,025; b23 = 0,038 Tính phương sai tái hiện, kiểm định tiêu chuẩn Student tiêu chuẩn Fisher xác định phương trình hồi quy Y1 = 0,9624 + 0,0636x1 + 0,0424x2 - 0,0772x3 + 0,039x1x2 + 0,025x1x3 + 0,038x2x3 (1) Phương trình (1) cho thấy khả tổng SU 90 Ễ [>™ iễ 50 i U30 Hình Đường cong sinh trưởng Spirulina hàm lượng NaHCO3 bổ sung khác Theo hình 3, NaHCO3 bổ sung 16 g/l TẬP SAN KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO 81 A /, _ _ _ /? NGHIÊN CỨU - TRAO ĐOI khối lượng sinh khối thu cao lượng Khối lượng sinh TN Hàm (đạt 1,1054 ± 0,018 g/l) khác biệt có ý phospho khối khô cực đại nghĩa so với nghiệm thức khác Chúng (g/1) chọn hàm lượng NaHCO3 16 g/l thích hợp bổ sung (mg/1) để thu sinh khối cao khảo sát 60 1,1044 ± ,0 c 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng NaNO3 bổ sung 90 1,131 ± ,0 a Tiến hành tương tự thí nghiệm 3.3.1, 120 1,1168 ± ,0 b với hàm lượng NaHCO3 phospho bổ sung 16 g/l 90 mg/l, hàm lượng (Các giá trị cột có chi sô mũ khác NaNO3 bổ sung thay đổi từ 1,5 - 3,5 g/l khác có ỷ nghĩa mức a = 0,05) Bảng Ảnh hưởng hàm lượng NaNO3 bổ sung đến khối lượng suất sinh khối TN Hàm lượng N aN 03 Khôi lượng sinh bổ sung (g/1) khối khô cực đại (g/1) 1,5 1,0262 ±0,0058c 2,5 1,1064 ±0,0029“ 3,5 1,0817 ±0,0148b (Các giá ừỊ có chi sô mũ khác cột khác có ỷ nghĩa mức a = 0,05) Theo Abuzer Mehmet (2009) nitrate có ảnh hưởng đến sinh khối nên dùng nguồn nitơ vô bổ sung dạng NaNO3 Kết trình bày bảng cho thấy hàm lượng NaNO3 bổ sung mức 2,5 g/l khối lượng sinh khối suất sinh khối thu cao khác biệt có ý nghĩa so với nghiệm thức khác Chúng định chọn hàm lượng NaNO3 bổ sung thích hợp 2,5 g/l để khảo sát thí nghiệm 3.3.3 Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng phospho bổ sung Cố định hàm lượng NaHCO3 NaNO3 bổ sung 16 2,5 g/l, thay đổi hàm lượng phospho bổ sung từ 60-120 mg/l Kết thí nghiệm thu bảng Bảng Ảnh hưởng hàm lượng phospho 82 TẬP SAN KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO bổ sung đến khối lượng sinh khối Bảng cho thấy phospho tăng khối lượng sinh khối thu tăng Tuy nhiên phospho tăng đến giá trị định tiếp tục tăng khối lượng sinh khối giảm Điều K2HPO4 sử dụng cung cấp phospho cung cấp kali nên gây bất lợi cho tế bào, Spirulina bị ức chế phát triển Kết tương tự với suất Do chọn hàm lượng phospho bổ sung thích hợp 90 mg/l 3.3.4 Xác định phương trình hồi quy tối ưu hóa hàm lượng dưỡng chất bổ sung Từ kết nghiên cứu thí nghiệm 3.3.1, 3.3.2 3.3.3 chọn tâm quy hoạch yếu tố sau: NaHCO3 16g/l; NaNO3 2,5 g/l; phospho 90 mg/l Trình tự thực tương tự thí nghiệm 3.2.4 Kết thực nghiệm tối ưu trình bày bảng Bảng Khối lượng sinh khối khô thu từ thự c nghiệm tối ưu hàm lượng dưỡng chất bổ sung Dùng phương pháp ma trận trực giao tính hệ số hồi quy, tính phương sai tái kiểm định tiêu chuẩn Student, tiêu chuẩn Fisher nhận phương trình hồi A /, _ _ /? NGHIÊN CỨU - TRAO ĐOI quy cần xác định có dạng: Y2 = 1,1344 + 0,0032x1 + 0,0061x2 - 0,0013x3 (2 TN 10 11 NaHCOs NaNOj (g/1) 15 17 (g/1) 2,0 2,0 15 17 15 3,0 3,0 2,0 17 15 2,0 3,0 3,0 17 16 16 16 2,5 2,5 2,5 Phospho (rng/1) 70 70 Sinh khối khô (g/1) 1,1265 1,1336 70 70 110 110 1,1392 1,1432 1,1215 1,1315 110 110 90 90 90 (Y2 = 1,1448 g/l so với Y1 = 1,1216 g/l) 3.4 So sánh thành phần sinh khối nuôi nước biển môi trường Zarrouk Tiến hành nuôi Spirulina theo thông số tối ưu tìm nước biển có bổ sung dưỡng chất môi trường đối chứng Zarrouk (theo Bharat et al.,2011) Kết khảo sát tổng hợp sinh khối Spirulina hai môi trường thể hình 1,1375 1,1419 1,1393 1,1438 1,1407 lu iu u ■I — ■— / í i r i u u k I 10 ơ* s t)0 ĩ í ' 0.90 ^ ft SO Phương trình (2) cho thấy dưỡng chất khảo sát ảnh hưởng đến khả tổng hợp sinh khối của Spirulina Kết phù hợp với công bố Bharat đồng tác giả (2011) nuôi Spirulina nước biển NaHCO3, NaNO3 có ảnh hưởng đến tổng hợp sinh khối Theo kết NaHCO3 NaNO3 tăng khối lượng sinh khối tăng ngược lại Trong phospho lại có ảnh hưởng tỉ lệ nghịch ảnh hưởng phospho thấp Như giới hạn khảo sát NaHCO3, NaNO3 tăng phospho giảm sinh khối thu tăng, điều có ý nghĩa khoa học cao Tiến hành tối ưu theo phương pháp tìm cực trị, nhận lượng sinh khối tối ưu Y2max=1,1448 g/l hàm lượng dưỡng chất bổ sung: NaHCO3 17g/l; NaNO3 3,0 g/l; phospho 70 mg/l (tương ứng 0,0307 g/l KH2PO4) Khi kiểm tra bề mặt đáp ứng phù hợp với hàm lượng dưỡng chất bổ sung Sau tối ưu hàm lượng dưỡng chất bổ sung cho thấy lượng sinh khối khô thu cao tối ưu điều kiện nuôi I 0./U £ 0.60 Í1Í) 0.40 0.30 ; A Th ^ g ia n ímgẽẶ1? I Hình Đường cong sinh trưởng Spirulina môi trường nước biển môi trường Zarrouk Kết xử lý số liệu đồ thị hình cho thấy khối lượng sinh khối thu môi trường nước biển (đạt 1,143 ± 0,0026 g/l) cao có ý nghĩa so với môi trường tổng hợp Zarrouk (1,138 ± 0,001 g/l) Điều chứng tỏ nước biển có bổ sung dưỡng chất thích hợp cho trình tổng hợp sinh khối Spirulina môi trường tổng hợp Zarrouk Tiến hành phân tích số thành phần sinh hóa sinh khối thu từ môi trường trên, kết bảng Bảng cho thấy hàm lượng chlorophyll carotenoid khác biệt có ý nghĩa môi trường Quá trình sinh tổng hợp sắc tố chủ yếu phụ thuộc vào trình quang hợp (nguồn carbon ánh sáng) Trong thực tế thí nghiệm, điều kiện ánh sáng TẬP SAN KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO 83 A /, _ _ _ /? NGHIÊN CỨU - TRAO ĐOI nghiệm thức cố định (chiếu sáng liên tục với cường độ Klux) nên kết thu nghiên cứu hợp lý Bảng T hành phần sinh khối Spirulina từ môi trư n g nước biển môi trư ng Z a rro u k Thành phần (% chất khô) Protein Lipid Chlorophyll Carotenoid Tro Môi trường nước biển 53,3i±o,or 9,95 ± 0,01 l b 1,847 ± 0,006a 0,58 ± 0,01a 2,147 ±0,015a Môi trường Zarrouk 53,25±0,01b 10,02 ±0,0153a 1,857 ±0,006a 0,59 ± 0,01a 2,01 ± 0,02b (Các giá trị hàng có sô mũ khác khác có ỷ nghĩa mức a = 0,05) Các thành phần protein, lipid tro sinh khối có khác biệt hai môi trường Khi nuôi Spirulina nước biển sinh khối thu có tỉ lệ protein, tro cao lipid thấp so với môi trường Zarrouk Hàm lượng protein cao môi trường nước biển theo lượng NaNO3 bổ sung cao (3,0 g/l so với 2,5 môi trường Zarrouk) Kết lần khẳng định vai trò NaNO3 nghiên cứu Abuzer Mehmet (2009) Hàm lượng tro sinh khối thu nhận từ môi trường nước biển cao có ý nghĩa so với môi trường Zarrouk thành phần khoáng phong phú nước biển tự nhiên K ẾT LUẬN Các kết nghiên cứu cho thấy tỉ lệ nước biển tự nhiên sử dụng dưỡng chất bổ sung có ảnh hưởng đến tổng hợp sinh khối đặc biệt hàm lượng protein Spirulina platensis sinh tổng hợp 84 TẬP SAN KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO TÀ I LIÊ U THAM KHẢO [1] Abuzer Çelekli, Mehmet Yavuzatmaca (2009), Predictive modeling of biomass production by Spirulina platensis as function of nitrate and NaCl concentration, Biosoure Technology 100: 1847-1851 [2] Anupama PR (2000), Value-added food: single cell protein, Biotechnology Advances 18: 459-479 [3] Belay A, Ota Y, Miyakawa K, ... lệ nước biển tự nhiên dưỡng chất bổ sung có ảnh hưởng đến tổng hợp sinh khối Spirulina platensis nuôi phòng thí nghiệm PH Ư Ơ N G PH Á P N G H IÊN CỨU 2.1 Nguyên vật liệu: Giống Spirulina platensis. .. thấy dưỡng chất khảo sát ảnh hưởng đến khả tổng hợp sinh khối của Spirulina Kết phù hợp với công bố Bharat đồng tác giả (2011) nuôi Spirulina nước biển NaHCO3, NaNO3 có ảnh hưởng đến tổng hợp sinh. .. số ảnh hưởng sau: tỉ lệ nước biển sử dụng 29 %, tỉ lệ giống 0,35 g/l, pH môi trường 8,5 3.3 Nghiên cứu hàm lượng dưỡng chất bổ sung đến khả sinh tổng hợp sinh khối Tôi khảo sát nguồn dưỡng chất