Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine H5N1 tại 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh tỉnh Thanh Hóa, biện pháp khống chế (LV thạc sĩ)
I H C TH I NGUY N TRƢỜ ỌC Ê VĂ ƢƠ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ẶC ỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ ÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ỐI VỚI VACCINE H5N1 T I 03 HUYỆN TĨ A, QUẢ XƢƠ , ƢT A TỈNH THANH HÓA, BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y THÁI NGUYÊN - 2015 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn I H C TH I NGUY N TRƢỜ ỌC Ê VĂ ƢƠ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ẶC ỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ ÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ỐI VỚI VACCINE H5N1 T I 03 HUYỆN TĨ A, QUẢ XƢƠ , ƢT A TỈNH THANH HÓA, BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ Ngành: T Mã số: 60 64 01 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Giảng viên ƣớng dẫn: PGS TS ẶNG XUÂN BÌNH THÁI NGUYÊN - 2015 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn i LỜI CẢ Ơ Trong trình thực đề tài, nhận giúp đỡ nhiệt tình, quý báu nhiều cá nhân tập thể tạo điều kiện cho hoàn thành luận văn Trước hết xin bày tỏ cảm ơn trân trọng tới giảng viên hướng dẫn khoa học P S TS ặng Xuân Bình người tận tình hướng dẫn, bảo suốt thời gian thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn góp ý thầy cô giáo khoa Chăn nuôi Thú y, Trường ại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho thực đề tài Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Trung tâm Chẩn đoán Thú y Vùng (Vinh), Cục thú y Trung ương, Ban lãnh đạo Chi cục Thú y tỉnh Thanh Hóa, Ban lãnh đạo Trạm thú y huyện Tỉnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tạo điều kiện giúp đỡ trình học tập thực đề tài Tôi xin cảm ơn gia đình người thân, cán bộ, đồng nghiệp luôn động viên giúp đỡ hoàn thành luận văn Thái Nguyên, ngày 20 tháng năm 2015 TÁC GIẢ LUẬ VĂ ê Văn ƣơng Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ii LỜ CA OA Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực, lần triển khai địa bàn huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh, tỉnh Thanh Hóa chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn Thái Nguyên, ngày 20 tháng năm 2015 TÁC GIẢ LUẬ VĂ ê Văn ƣơng Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iii MỤC ỤC Trang MỞ ẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu 3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn .3 C ƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung cúm gia cầm 1.2 Tình hình dịch cúm gia cầm giới nước .5 1.2.1 Tình hình dịch cúm gia cầm giới 1.2.2 Tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam 1.2.3 Tình hình dịch cúm gia cầm Thanh Hóa 1.3 ặc điểm sinh học virus cúm type A 10 1.3.1 ặc điểm cấu trúc chung virus thuộc họ Orthomyxoviridae 10 1.3.2 ặc điểm hình thái, cấu trúc virus cúm type A 11 1.3.3 ặc tính kháng nguyên virus cúm type A 12 1.3.4 Thành phần hóa học virus .14 1.3.5 Quá trình nhân lên tác động gây bệnh virus 14 1.3.6 ộc lực virus 15 1.3.7 Danh pháp .16 1.3.8 Phân loại virus 16 1.3.9 Nuôi cấy lưu giữ virus cúm gà 17 1.3.10 Miễn dịch chống bệnh cúm gia cầm .17 1.4 Dịch tễ học bệnh cúm gia cầm 23 1.4.1 Phân bố dịch 23 1.4.2 ộng vật cảm nhiễm .23 1.4.3 ộng vật mang virus .24 1.4.4 Sự truyền lây 25 1.4.5 Sức đề kháng virus cúm 26 1.5 Triệu chứng, bệnh tích bệnh cúm gia cầm 26 1.5.1 Triệu chứng lâm sàng bệnh cúm gia cầm 26 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iv 1.5.2 Bệnh tích bệnh cúm gia cầm 27 1.6 Chẩn đoán bệnh 28 1.7 Kiểm soát bệnh 29 1.8 Vaccine phòng bệnh cúm gia cầm .30 1.8.1 Các loại vaccine phòng bệnh cúm gia cầm 31 1.8.2 Một số loại vaccine phòng bệnh cúm gia cầm cách sử dụng .32 1.9 Nghiên cứu nước bệnh cúm gia cầm .34 C ƣơng 2: NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ P ƢƠ P ÁP Ê CỨU .35 2.1 Nội dung nghiên cứu 35 2.1.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm phạm vi nước tỉnh Thanh Hóa giai đoạn 2012-2014 35 2.1.2 Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà, vịt tiêm phòng vaccine H5N1 năm 2014 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa 35 2.1.3 Giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng vaccine type A H5N1 .36 2.1.4 ề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung 36 2.2 ối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 36 2.2.1 ối tượng nghiên cứu .36 2.2.2 Thời gian, địa điểm nghiên cứu .36 2.3 Vật liệu nghiên cứu 36 2.4 Phương pháp nghiên cứu 37 2.4.1 Phương pháp điều tra dịch tễ học 37 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gia cầm sau tiêm vaccine H5N1 .37 C ƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 47 3.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm phạm vi nước tỉnh Thanh Hóa giai đoạn 2012-2014 47 3.1.1 Diễn biến bệnh cúm gia cầm giai đoạn từ 2012 đến 2014 phạm vi nước 47 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn v 3.1.2 Tổng hợp tình hình bệnh cúm gia cầm H5N1 địa phương phạm vi nước năm 2014 49 3.1.3 Tình hình bệnh cúm type A H5N1 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh năm 2014 52 3.1.4 Tình hình bệnh cúm type A H5N6 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh năm 2015 53 3.1.5 Tình hình bệnh cúm gia cầm type A theo phương thức chăn nuôi huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 54 3.1.6 Tình hình gà mắc bệnh cúm gia cầm H5N1 theo quy mô đàn gia cầm năm 2014 57 3.2 Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà, vịt tiêm phòng vaccine H5N1 năm 2014 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa 59 3.2.1 Kết tiêm phòng vaccine cúm cho đàn gia cầm huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh .59 3.2.2 Giám sát lâm sàng đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine cúm H5N1 61 3.2.3 Giám sát huyết học đàn gà sau tiêm phòng vaccine cúm H5N1 .62 3.2.4 Khảo sát đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vaccine cúm A H5N1 .67 3.3 Giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng vaccine type A H5N1 .69 3.4 ề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung 70 3.4.1 Nguyên nhân dịch cúm gia cầm tiếp tục xảy địa phương 70 3.4.2 ề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm 71 KẾT LUẬN VÀ Ề NGHỊ .73 5.1 Kết luận 73 5.2 ề nghị .74 TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn vi DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ARN Acid ribonucleic Ct Cycle threshold Cs Cộng GMT Geometic Mean Titer H Hemagglutinin HPAI High Pathogenicity Avian Influenza KT Kiểm tra N Neuraminidase NNo & PTNN Nông nghiệp phát triển nông thôn OIE Office International Epizooties PBS Phosphate Buffered Saline RT - PCR Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction RTRT - PCR Real time Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction WHO World Health Organization XN Xét nghiệm Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn vii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Trình tự chuỗi mẫu dò Primer cho RTRT - PCR phát cúm gia cầm 41 Bảng 2.2 Chu kỳ nhiệt bước phiên mã ngược (RT) dùng cho Quiagen one step RT - PCR kit .44 Bảng 2.3 Chu kỳ nhiệt cho tổng hợp gen cặp mồi 45 Bảng 3.1: Kết điều tra tình hình bệnh cúm gia cầm giai đoạn 2012 – 2014 phạm vi nước .47 Bảng 3.2: Kết điều tra tình hình bệnh cúm gia cầm H5N1 địa phương năm 2014 .49 Bảng 3.3: Kết điều tra bệnh cúm gia cầm type A H5N1 năm 2014 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 52 Bảng 3.4: Kết điều tra bệnh cúm gia cầm type A H5N6 năm 2015 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 53 Bảng 3.5: Kết điều tra gia cầm mắc bệnh cúm gia cầm type A H5N1 năm 2014 theo phương thức chăn nuôi 55 Bảng 3.6: Kết điều tra gia cầm mắc bệnh cúm gia cầm type A H5N6 năm 2015 theo phương thức chăn nuôi 56 Bảng 3.7: Kết điều tra tình hình gà nuôi Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh năm 2014 mắc cúm gia cầm type A H5N1 theo quy mô đàn .57 Bảng 3.8: Kết điều tra tình hình gà, vịt nuôi Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh năm 2015 mắc cúm gia cầm type A H5N6 theo quy mô đàn .58 Bảng 3.9: Kết tiêm phòng vaccine cúm H5N1 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa năm 2014 59 Bảng 3.10: Kết theo dõi độ an toàn vaccine cúm H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET-Vifluvac) đàn gia cầm tiêm phòng 61 Bảng 3.11: Kết giám sát đàn gia cầm trước tiêm vaccine H5N1 63 Bảng 3.12: Hiệu giá kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET-Vifluvac) 64 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn viii Bảng 3.13: Tần số phân bố mức kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 67 Bảng 3.14: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt tiêm vaccine cúm A H5N168 Bảng 3.15: Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt tỉnh tiêm vaccine cúm A H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET- Vifluvac) qua thời điểm .69 Bảng 3.16: Kết giám sát lưu hành virus cúm type A H5N1 đàn gà tiêm phòng vaccine 70 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 66 Theo quy định 1361/KTY-DT ngày 02 tháng 12 năm 2005 Bộ Nông nghiệp phát triển Nông thôn, tiêu chí đánh giá đàn gia cầm bảo hộ tỷ lệ phải đạt 70% số mẫu có hiệu giá kháng thể HI ≥ 4log2 Như vậy, tính đến thời điểm 120 ngày sau tiêm vaccine đàn gà toàn tỉnh khả bảo hộ ến thời điểm 150 ngày sau tiêm vaccine, đàn gà tỉnh không khả bảo hộ 3.2.3.2 Tần số phân bố mức kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 thời điểm lấy mẫu ã tiến hành lấy mẫu huyết gà sau tiêm vaccine cúm type A H5N1 mũi để xác định tần số phân bố mức kháng thể Kết trình bày bảng 3.13 Từ bảng 3.13, kết thu cho thấy: Tại thời điểm 120 ngày có tới 20% số mẫu đáp ứng miễn dịch (chiếm tỷ lệ cao nhất); so với thời điểm 60 ngày 30 ngày sau tiêm vaccine có 10% số mẫu đáp ứng miễn dịch (tỷ lệ thấp nhất) Tại thời điểm 30 ngày hiệu giá kháng thể mẫu tập trung từ 4log2 đến log2, mẫu đạt tỷ lệ log2 thấp (6,66%) Hiệu giá kháng thể tập trung mức 4-6log2 Theo Tô Long Thành Yến Khanh (2009) [26, 27]: gà tiêm vaccine sau tháng có hiệu giá kháng thể tập trung khoảng từ 5- 7log2 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 67 Bảng 3.13: Tần số phân bố mức kháng thể gà đƣợc tiêm vaccine H5N1 Thời điểm lấy Tỷ lệ mẫu có hiệu giá kháng t ể log2 mẫu sau tiêm vaccine (%) Tổng số mẫu mũi (ngày) (-) ≤3 30 30 60 3 30 90 4 6 30 120 4 30 Tại thời điểm 60 ngày hiệu giá kháng thể mẫu tập trung mức cao từ 4log2 đến log2, mẫu đạt tỷ lệ log2 6,66% Hiệu giá kháng thể tập trung mức 4-7log2 Theo Tô Long Thành Yến Khanh (2009) [26,27]: gà tiêm vaccine sau tháng có hiệu giá kháng thể tập trung 7- 9log2 Có thể nhận thấy gà có hiệu giá kháng thể cao thời điểm tăng cao so với thời điểm 30 ngày sau tiêm vaccine mũi Tại thời điểm 90 ngày hiệu giá kháng thể mẫu tập trung mức cao từ 4log2 đến log2, mẫu đạt tỷ lệ 8log2 6,66% Xử lý thống kê cho thấy gà sau tiêm vaccine có hiệu giá kháng thể thời điểm mức giảm tăng so với thời điểm 60 ngày sau tiêm vaccine mũi không rõ rệt Tại thời điểm 120 ngày hiệu giá kháng thể mẫu tập trung mức từ 3log2 đến log2 Theo Tô Long Thành Yến Khanh (2009) [26, 27]: gà tiêm vaccine sau tháng theo dõi kháng thể đạt mức bảo hộ tập trung 58log2 Xử lý thống kê cho thấy hiệu giá kháng thể gà sau tiêm vaccine đến thời điểm giảm với sai khác có ý nghĩa (rõ rệt) 3.2.4 Khảo sát đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vaccine cúm A H5N1 3.2.4.1 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vaccine Cũng với đàn gà, tiến hành lấy mẫu ngẫu nhiên đàn vịt khác tiêm vaccine H5N1 (Vaccine Navet – Vifluvac) thời điểm 30 ngày, 60 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 68 ngày, 90 ngày, 120 ngày sau tiêm vaccine mũi (chỉ áp dụng với vịt) Mẫu huyết chuyển Trung tâm thú y vùng III - Cục thú y để làm phản ứng HI Số mẫu chuyển đạt yêu cầu xét nghiệm Kết trình bày bảng 3.14 Bảng 3.14: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt đƣợc tiêm vaccine cúm A H5N1 Thời gian lấy Tổng Số Tỷ lệ Số mẫu đạt Tỷ lệ GMT mẫu sau tiêm số mẫu (%) bảo ộ bảo hộ (log2) vaccine mũi mẫu (+ ) (≥ log2 ) (% ) 30 30 28 93,3 25 83,3 5,46 60 30 29 96,6 29 96,6 6,45 90 30 29 96,6 26 86,6 5,38 120 30 26 86,6 23 76,6 4,37 (ngày) Kết bảng 3.14 cho thấy: Tại thời điểm 30 ngày sau tiêm vaccine cúm mũi 2: Hiệu giá kháng thể trung bình (geometric mean titre – GMT) vịt đạt 5,46 log2; 25/30 mẫu có hiệu giá kháng thể trung bình ≥ log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 83,3% Tại thời điểm 60 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt đạt 6,45 log2; 29/30 mẫu có hiệu giá kháng thể trung bình ≥4 log2 , tỷ lệ bảo hộ đạt 96,6% Tại thời điểm 90 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt đạt 5,38 log2; 26/30 mẫu có hiệu giá kháng thể trung bình ≥ log2 , tỷ lệ bảo hộ đạt 86,6% Tại thời điểm 120 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt đạt 4,37 log2; 23/30 mẫu có hiệu giá kháng thể trung bình ≥ 4log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 76,6% 3.2.4.2 Tần số phân bố mức kháng thể vịt tiêm vaccine cúm A H5N1 thời điểm lấy mẫu ể thấy rõ đáp ứng miễn dịch vịt tiêm vaccine Navet – Vifluvac địa bàn tỉnh Thanh Hóa, qua kết phản ứng HI xác định tần số phân bố Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 69 mức kháng thể đàn Kết ghi bảng 3.15 Bảng 3.15: Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt tỉn đƣợc tiêm vaccine cúm A H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt n ũ dầu NAVETVifluvac) qua thời điểm T ời gian lấ Tỷ lệ % mẫu có iệu giá k t ể log2 mẫu sau tiêm vaccine mũi Tổng số (-) ≤3 mẫu 30 7 4 30 60 5 30 90 5 30 120 3 30 (ngày) Từ bảng 3.15, kết thu cho thấy: Tại thời điểm 30 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Có 93,3% số vịt lấy mẫu có kháng thể kháng H5 huyết Tỷ lệ mẫu có hiệu giá kháng thể log2; log2 cao nhất, đạt 23,3% Tại thời điểm 60 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể vịt tiêm vaccine tăng lên, cao log2, đạt 26,6% Tại thời điểm 90 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể cao log2 đạt 23,3% Tại thời điểm 120 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể cao log2 có 16,6% mẫu không phát thấy kháng thể kháng H5 huyết vị khảo sát 3.3 Giám sát lƣu hành virus cúm đàn gia cầm đƣợc tiêm phòng vaccine type A H5N1 ể giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng vaccine, với việc lấy mẫu huyết đàn gia cầm tiêm phòng để đánh giá đáp ứng miễn dịch, tiến hành lấy mẫu dịch ngoáy hầu, họng Mỗi đàn gà Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 70 30 mẫu theo phương pháp ngẫu nhiên thời điểm khác nhau, gộp mẫu làm xét nghiệm Kỹ thuật xét nghiệm thực phòng xét nghiệm virus Trung tâm thú y vùng Kết xét nghiệm nuôi cấy, phân lập virus tìm gen quy định sản sinh kháng nguyên H5 mẫu dịch ngoáy hầu, họng phương pháp RT- PCR trình bày bảng 3.16 Từ bảng 3.16 kết thu cho thấy: Không có cảm nhiễm lưu hành virus cúm A H5N1 đàn gia cầm tiêm phòng vaccine năm 2014 Nói cách khác, đàn gia cầm sau tiêm phòng thải virus môi trường Kết phù hợp với nghiên cứu Yến Khanh (2005) [17], Tô Long Thành (2007) [28] đàn gà, vịt sau tiêm phòng vaccine cúm tiến hành kiểm tra định kỳ không thấy lưu hành virus cúm A H5N1 Bảng 3.16: Kết giám sát lƣu hành virus cúm type A H5N1 đàn gà đƣợc tiêm phòng vaccine ịa phƣơng lấ mẫu Tĩnh Gia Quảng Xương Như Thanh Loại gia Số mẫu số mẫu Số mẫu dƣơng cầm t u t ập xét ng iệm tín với H5 Gà 150 30 Vịt 150 30 Gà 150 30 Vịt 150 30 Gà 150 30 Vịt 150 30 Tỷ lệ (%) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 Từ kết nghiên cứu cho thấy chủ trương tiêm vaccine tạo miễn dịch chủ động cho đàn gia cầm nhằm tiêu diệt mầm bệnh đem lại kết rõ rệt địa bàn huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung 3.4 ề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm huyện Tĩn Quảng Xƣơng, ia, ƣ T an nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung 3.4.1 Nguyên nhân dịch cúm gia cầm tiếp tục xảy địa phương Trong năm 2014, dịch cúm gia cầm A/H5N1 xảy nhiều tỉnh, thành phố Tuy nhiên, dịch có tính chất địa phương, phát rải rác số hộ Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 71 chăn nuôi nhỏ lẻ địa phương phát hiện, xử lý kịp thời nên dịch không lây lan rộng Nguyên nhân do: (a) Thời tiết bất lợi diễn biến bất thường (băng giá tỉnh phía Bắc, thời tiết lạnh bất thường tỉnh phía Nam) làm giảm sức đề kháng đàn gia cầm; (b) Virus cúm H5N1 lưu hành rộng khắp chợ buôn bán gia cầm sống nhiều tỉnh, thành phố lây lan thông qua hoạt động mua bán, vận chuyển gia cầm; (c) Nhánh 2.3.2.1C virus cúm A/H5N1 xuất phát tán rộng phạm vi nước (nhất đàn vịt chạy đồng tỉnh phía Nam); (d) Các hoạt động vận chuyển, giết mổ gia cầm di chuyển người dân gia tăng dịp Tết, hoạt động lễ hội dân gian dịp đầu năm mới; (e) Nhiều đàn gia cầm hết miễn dịch nuôi sau dịp Tết nên dễ bị cảm nhiễm virus; (g) Việc chăn nuôi thủy cầm khu vực giáp ranh Việt Nam Căm-pu-chia diễn phức tạp, tạo thuận lợi cho virus xâm nhập, biến đổi gây bệnh; (h) Hệ thống mạng lưới thú y sở số tỉnh nhiều bất cập như: thú y sở, có cán khôn có chuyên môn xã tự tuyển chọn, chế độ thù lao chưa thỏa đáng ối với chủng virus H5N6 Việt Nam, chủng virus tương đồng 99% so với chủng H5N6 xảy tỉnh Tứ Xuyên, Trung Quốc năm 2014, nhiều khả virus xâm nhập vào Việt Nam thông qua vận chuyển gia cầm, sản phẩm gia cầm bất hợp pháp qua biên giới Hiện tại, ổ dịch cúm H5N6 địa phương khống chế thành công Tuy nhiên, có tượng virus cúm H5N6 lưu hành gia cầm khỏe mạnh số địa phương Nhìn chung, địa phương khống chế tốt ổ dịch, không để lây bệnh cho người, mức độ thiệt hại cho ngành chăn nuôi gia cầm không đáng kể, tạo điều kiện cho phát triển chăn nuôi gia cầm Dự báo trước sau Tết Nguyên đán 2015, ổ dịch xảy rải rác số địa bàn có nguy cao, nơi có ổ dịch cũ 3.4.2 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm ể chủ động ngăn chặn virus cúm A H5N1, H5N6 chủng virus cúm gia cầm khác, hạn chế thấp virus cúm lây nhiễm gây tử vong cho người, ảnh Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 72 hưởng đến sức khỏe cộng đồng, giảm thiểu thiệt hại cho ngành chăn nuôi, cần tập trung đạo biện pháp cụ thể sau: - Các bộ, ban, ngành Trung ương hướng dẫn địa phương tổ chức triển khai thực “Kế hoạch hành động ứng phó khẩn cấp chủng virus cúm gia cầm nguy hiểm có khả lây sang người” - Cần tập trung triển khai thực biện pháp để ngăn chặn xâm nhập lây lan virus A H5N1, H5N6 chủng virus cúm gia cầm khác vào Việt Nam - Tuyên truyền cho người chăn nuôi, buôn bán gia cầm thực tốt công tác vệ sinh, khử trùng tiêu độc, khuyến khích áp dụng mô hình chăn nuôi an toàn dịch bệnh, nâng cao tỷ lệ tiêm phòng vaccine cúm đàn gia cầm nhằm giảm thiểu nguy lây nhiễm phát tán virus - Tăng cường lấy mẫu giám sát gia cầm môi trường nhằm phát virus cúm A/H7N9 chủng virus khác gia cầm nhập lậu, chợ buôn bán gia cầm sống nhằm phát sớm có biện pháp xử lý kịp thời - Khi phát có virus cúm xuất gia cầm môi trường phải báo cáo cho quan Thú y địa phương để tổ chức thực biện pháp xử lý triệt để, kịp thời không để virus phát tán diện rộng - Cần thông tin kịp thời, xác cho người dân diễn biến tình hình dịch cúm gia cầm biện pháp phòng chống dịch Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 73 KẾT LUẬN VÀ Ề NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết nghiên cứu luận văn, rút số kết luận sau: - Năm 2014, huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa vịt mắc cúm gia cầm Có 275 gà mắc bệnh, chiếm tỷ lệ 5,69%; gà bị tiêu hủy có 716 con, chiếm tỷ lệ 12,57% - Năm 2015, dịch cúm gia cầm type A H5N6 xảy xã Hải Lĩnh, huyện Tĩnh Gia làm ốm chết 293 gia cầm, có 103 gà 190 vịt; số gia cầm (gà vịt) bị tiêu hủy 1023 - Bệnh cúm A H5N1 năm 2014 xảy gà nuôi theo phương thức bán chăn thả huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh, tỷ lệ gà mắc bệnh chiếm 5,69%, gà nuôi theo phương thức nuôi nhốt hoàn toàn không xảy bệnh Bệnh cúm A H5N6 xảy huyện (Tĩnh Gia) vào đầu năm 2015 tập trung phương thức bán chăn thả lại xuất gà (103 mắc) vịt (190 mắc) - Bệnh cúm gia cầm H5N1 năm 2014 không xảy đàn có quy mô nhỏ 500 con, gà mắc bệnh có 275 đàn có quy mô 500 đến 1000 gà - Dịch cúm gia cầm type A H5N6 năm 2015 xảy hộ dân có quy mô đàn trung bình, từ 200 đến 500 con; không xảy đàn có quy mô nhỏ quy mô lớn từ 500 đến 1000 - Năm 2015 đợt tiêm vaccine 1, kết tiêm phòng cúm gia cầm đạt 17,7% kế hoạch - Vaccine type A H5N1 sử dụng huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh có tỷ lệ an toàn cao, đạt 94,5% - àn gia cầm nuôi huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh trước tiêm phòng vaccine hoàn toàn khỏe, kháng thể kháng H5 virus cúm gia cầm Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 74 - Không có cảm nhiễm lưu hành virus cúm A H5N1 đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine cúm, tức thải virus môi trường 5.2 ề nghị - Nên tiếp tục nghiên cứu để làm rõ đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm địa bàn huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh nói riêng địa bàn tỉnh Thanh Hóa nói chung - Cần có nghiên cứu chuyên sâu lưu hành virus cúm type A H5N1 H5N6 gia cầm thuộc địa bàn huyện Tĩnh Gia, tỉnh Thanh Hóa nói riêng nước nói chung để có biện pháp khổng chế kịp thời, hiệu Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Bùi Quang Anh, Văn ăng Kỳ (2004), “Bệnh cúm gia cầm: lưu hành bệnh, chẩn đoán kiểm soát dịch bệnh”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (3), tr 69 - 75 Ban Chỉ đạo Quốc gia phòng chống dịch cúm gia cầm (2005), Báo cáo tổng kết công tác năm (2004-2005) phòng chống dịch cúm gia cầm, Hội nghị Tổng kết năm phòng chống dịch cúm gà, ngày 18 tháng năm 2005, Hà Nội Bộ NN PTNT (2005), Tiêu chuẩn ngành - Quy trình chẩn đoán bệnh cúm gia cầm, NXB Nông nghiệp Caroline Yuen (2004), “ ánh giá tiêm chủng vaccine cúm gà H5 năm 2003 Hồng Kông”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (2), tr 79 - 80 Cục thú y ( 2004), Bệnh cúm gia cầm biện pháp phòng chống, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Cục Thú y (2005), Sổ tay hướng dẫn phòng chống bệnh cúm gia cầm bệnh cúm người, Hà Nội Dự án sử dụng vaccine nhằm khống chế toán bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao H5N1 (2005), Bộ Nông nghiệp & PTNT Trương Văn Dung, Nguyễn Viết Không (2004), “Một số hoạt động nghiên cứu khoa học Viện Thú y quốc gia bệnh cúm gia cầm giải pháp khoa học công nghệ thời gian tới”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, (3), tr 62 - 68 Nguyễn Tiến Dũng (2004), Bệnh cúm gà, Hội thảo số biện pháp khôi phục đàn gia cầm sau dập dịch, Hà Nội, tr - 10 Nguyễn Tiến Dũng, Malik Peiris, Robert Webster, Thanh Vân, Bùi Ngọc Anh, Nguyễn Thế Vinh, Ken't Inui, Bùi Nghĩa Vượng, Nguyễn Viết Không Ngô Thành Long (2004), “Nguồn gốc virus cúm gia cầm H5N1 Việt Nam năm 2003 - 2004”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, (3), tr - 11 Nguyễn Tiến Dũng, ỗ Qúi Phương, Thanh Vân, Bùi Ngọc Anh, Bùi Nghĩa Vượng, Nguyễn Thế Vinh, Nguyễn Thuý Duyên (2005), “Giám sát bệnh cúm gia cầm Thái Bình”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, 12(2), tr -12 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 76 12 Nguyễn Tiến Dũng (2008), “Vài nét cúm gia cầm H5N1”, Tạ p chí Khoa học kỹ thuật Thú y, (4), tr 80 - 86 13 Lê Thanh Hoà (2004), Họ Orthomyxoviridae nhóm vi rus cúm A gây bệnh cúm gà người, Viện khoa học công nghệ 14 Ilaria Capua, Stefano Marangon (2004), “Sử dụng tiêm chủng vaccine biện pháp khống chế bệnh cúm gà”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (2), tr 59 - 70 15 Ilaria Capua, Stefano Marangon (2005), DIVA “Một chiến lược ngăn trừ bệnh cúm gia cầm thành công Italia”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tr 80 - 82 16 Maria Serina Beat Robenta De Nardi (2005), Vaccine nhũ dầu vô hoạt thông thường triệt tiêu thải ngăn ngừa khu trú v i r u s vịt thịt Bắc Kinh công cường độc với virus H5N1 Báo cáo khoa học thú y 17 Yến Khanh (2005), Kiểm nghiệm khảo nghiệm vaccine cúm gia cầm ngoại nhập, Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp, ại học Nông nghiệp I, Hà Nội 18 Phạm Sỹ Lăng (2004), “Diễn biến bệnh cúm gia cầm Châu Á hoạt động phòng chống bệnh”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (3), tr 91- 94 19 Phạm Sỹ Lăng (2004), Diễn biến bệnh cúm gà giới, Hội thảo số biện pháp khôi phục đàn gia cầm sau dập dịch, Hà Nội, tr 33 - 38 20 Lê Văn Năm (2004), “Bệnh cúm gà”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (1), tr 8186 21 Lê Văn Năm (2004), “Kết khảo sát biểu lâm sàng bệnh tích đại thể bệnh cúm gia cầm số sở chăn nuôi tỉnh phía Bắc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (3), tr 86 - 90 22 Nguyễn Như Thanh (1997), Miễn dịch học Thú y, Nhà xuất Nông nghiệp 23 Nguyễn Như Thanh (2001), Dịch tễ học Thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 24 Mary J Pantin-Jackwood, Jenny Pfeiffer, Tô Long Thành, Nguyễn Tùng David Suarez (2008), Độc tính vi rus cúm gia cầm thể độc lực cao H5N1 Việt Nam gà vịt, Hội thảo quốc tế Nghiên cứu phục vụ hoạch định sách phòng chống cúm gia cầm, Cục Thú y, 2008 25 Văn ăng Kỳ (2008), “Diễn biến tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam giải pháp phòng chống”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, XV (4), tr 87 - 91 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 77 26 Tô Long Thành (2005), “Kinh nghiệm phòng chống dịch cúm gia cầm sử dụng vaccine cúm gia cầm Trung Quốc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 12(3), tr 87 - 90 27 Tô Long Thành (2006), “Thông tin cập nhật bệnh cúm gia cầm vaccine phòng chống”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 13(1), tr 66 - 76 28 Tô Long Thành (2007), “Các loại vaccine cúm gia cầm đánh giá hiệu tiêm phòng”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 16(2), tr 84 - 90 29 Tô Long Thành (2007), “Hiệu sử dụng liều vaccine vô hoạt toàn thân virus H5N2 vaccine tái tổ hợp H5 có chất bổ trợ vật nuôi”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14(4), tr - 14 30 Tô Long Thành Yến Khanh (2009), “Kiểm nghiệm vaccine cúm gà H5N2 nhập từ Hà Lan Trung Quốc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y 16(1), tr 15-19 31 Tô Long Thành Yến Khanh (2009), “Khảo nghiệm thực địa vaccine cúm gia cầm H5N2 nhập từ Hà Lan Trung Quốc”, Phần 1: ộ an toàn vaccine đáp ứng miễn dịch gà sau tiêm phòng, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 16(1), tr 10 -18 32 ỗ Ngọc Thúy (2008), “Tin khoa học kỹ thuật cúm gia cầm”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y (4), tr 92 - 94 II Tài liệu tiếng An 33 Alexander D J (1993), Orthomyxovi rút Infections In: Viral Infections of Vertebrates, Volume 3: Viral Infections of Birds, The Netherlands, pp 287-316 34 Alexander D J (2000), A review of avian in different bird species, Vet Microbiol, (74), pp - 13 35 Biswas S K, Nayak D P (1996), “Influenza virus polymerase basic protein interacts with influenza virus polymerase basic protein at multiple sites”, J Virol, (70), pp 6716 - 6722 36 Bosch F X, Orlich M., Klenk H D and Rott R (1979), The structure of the hemagglutinin, a determinant for the pathogenicity of influenza viruses, Virology, (95), pp 197 - 207 37 Buckler White, Muphy B R (1998), Nucleotide sequence analysis of the nucleoprotein gene of an avian and a human influenza virus strain identifies two Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 78 classes of nucleoproteins, Virology, (155), pp 345 - 355 38 Capua I., Maragon S., Dalla Pozza M., Santucci U (2000), Vaccination for Avian Influenza in Italy, Vet Rec., pp 147, 751 39 Castrucci M R, Kawaoka Y (1993), “Biologic importance of neuramidase stalk length in influenza A virus”, J.Virology, (67), pp 759-764 40 Collins R A., Ko L S., So K L., Ellis T., Lau L T., Yu A C (2002), “Detection of hyghly pathogenic avian influenza subtype H5 (Euracian lineage) using NASBA”, J Virology Methods, 103(2), pp 213 - 215 41 Holsinger, Nichani L J., Pinto L H., Lamb R A (1994), “Influeza A virus M2 ion chanel protein: a structure function analysis”, J Virology, (68), pp 15511563 42 Horimoto T., Kawaoka Y (1995), “Direct reverse transcriptase PCR to determine virulence potential of influenza A viruses in birds”, J Clin Microbiol, 33(3), pp 748 - 751 43 Ito T., Kawaoka Y (1998), Avian influenza, United Kingdom pp 126-136 Ito T, Couceiro J N., Kelm S., Baum L G., Krauss S., Castrucci M R., Donatel 44 Li I., Kida H., Pauson J C., Webter R G., Kawoaka Y (1998), “Molecular basic for the generation in pigs of influenza A viruses with pandemic potential”, J Virology, (72), pp 7367 - 7373 45 Kawaoka Y (1991), “Difference in receptor specificity among influenza A viurses from different species of animals”, J Vet Med Sci, (53), pp 357 - 358 46 Kawaoka (1988), Is the gene pool of influenza viruses in shorebirds and gulls different from that in wild ducks, Virology, (179), pp 759 -767 47 Kingrbuy (1985), Protective immunity against avian influenza induced by a fowlpox virrus recombinant, Virology, Raven press NewYork, pp.57 - 78 48 Lu X, Tumpey T M., Morken T., Zaki S R., Cox N J., Katz J M (1999), “A mouse model for the evaluation of pathogenesis and immunity to influenza A (H5N1) viruses isolated from human”, J Virology, (73), PP - 5903 - 59 49 Luong G., Palese P (1992), Genetic analysis of influenza virus, Curr Opinion Gen Develop, (2), pp 77 - 81 50 Mo I P, Brugh M., Fletcher O J., Rowland G N., Swayne D E (1997), Comparative pathology of chickens experimentaly inoculated with avian Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 79 influenza viruses of low and high pathogenicity, Avian Dis, (41), pp 125-136 51 Muphy B R., Webter R G (1996), Orthomyxovirus, OIE, Council of European Communities (1992), Council Directive 92/40/EEC of 19 th May 1992 introducing Community measures for the control of avian influenza, Official Journal of Eropean Communities, L167, pp 1-15 52 OIE, Council of European Communities (1992), Council Directive 92/40/EEC of 19 th May 1992 introducing Community measures for the control of avian influenza, Official Journal of Eropean Communities, L167,1-15 53 Seo S., Webter R G (2001), “Cross-reactive cell-mediated immunity and protection of chickens from lethal H5N1 influenza virus infection in the Hong Kong poultry markets”, J Virology, (75), pp 2516 - 2525 54 Swayne D E., Suarez D L (2000), Highly pathogenic avian influenza, Rev sci tech Off Int epiz., (20), pp 463 - 482 55 Vey M, Orlich M., Adle S., Klenk H D., Rott R., Garten W (1992), Hemagglutinin activation of pathogenic avian influenza viruses of serotype H7 requires the protease recognition motif R-X-K/R-R, Virology, (188), pp 408 - 413 56 Webster R G, Bean W J., Gorman O T., Chambers T M., Kawaoka K.(1992), Evolution and ecology of influenza A viruses, Microbiol Rev, (56), PP 152 - 179 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 80 P Ụ ỤC ỘT SỐ Ì Ả ỌA C O KẾT QUẢ Hình 1: Kiểm tra gà nghi mắc cúm Ê CỨU CỦA Ề TÀ Hình 2: Xử lý tiêu độc ổ dịch cúm Hình 3: Chăn nuôi gà bán Hình 4: Vaccine Navet-Vifluvac công nghiệp Thanh Hóa nhũ dầu phòng bệnh cúm gia cầm Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ... Thanh Hóa, biện pháp khống chế Mục tiêu nghiên cứu - Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm type A huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa - Nghiên cứu lưu hành virus cúm. .. Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm đáp ứng miễn dịch gà, vịt vaccine H5N1 03 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn Thanh tỉnh. .. VĂ ƢƠ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ẶC ỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ ÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ỐI VỚI VACCINE H5N1 T I 03 HUYỆN TĨ A, QUẢ XƢƠ , ƢT A TỈNH THANH HÓA, BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ Ngành: T Mã số: