ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM HÀ GIANG PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH VẬT HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TẠI KHU VỰC THÀNH PHỐ CẨM PHẢ, TỈNH QUẢNG NINH VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y THÁI NGUYÊN - 2015 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM HÀ GIANG PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH VẬT HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TẠI KHU VỰC THÀNH PHỐ CẨM PHẢ, TỈNH QUẢNG NINH VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: THÚ Y Mã số: 60 64 01 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: GS TS NGUYỄN QUANG TUYÊN THÁI NGUYÊN - 2015 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Tác giả Phạm Hà Giang Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực tập thực đề tài này, nhận quan tâm, bảo, hướng dẫn, giúp đỡ tận tình thầy cô giáo, đồng nghiệp, bạn bè động viên khích lệ gia đình Nhân dịp xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: Giảng viên hướng dẫn khoa học: GS TS Nguyễn Quang Tuyên trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình suốt trình nghiên cứu hoàn thành Luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Quản lý Đào tạo – Sau Đại học, Ban chủ nhiệm khoa thầy cô giáo Khoa Chăn nuôi Thú y- Trường Đại học Nông lâm - Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ suốt trình học tập Tôi xin trân trọng cảm ơn hộ gia đình nuôi lợn, thú y viên số xã phường thuộc thành phố Cầm Phả, tỉnh Quảng Ninh đồng nghiệp ngành giúp trình thực đề tài Cuối xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ủng hộ, động viên, giúp đỡ gia đình, bạn bè đồng nghiệp suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành tốt luận văn Cẩm Phả, tháng năm 2015 Tác giả Phạm Hà Giang Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iii MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa đề tài Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Hiểu biết hội chứng tiêu chảy 1.1.1 Khái niệm hội chứng tiêu chảy 1.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy lợn 1.1.3 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy 1.1.4 Cơ chế sinh bệnh 1.1.5 Bệnh lý, lâm sàng hội chứng tiêu chảy 1.1.6 Hậu hội chứng tiêu chảy 10 1.1.7 Biện pháp phòng trị tiêu chảy cho lợn 11 1.2 Đặc điểm sinh lý tiêu hóa lợn 15 1.2.1 Đặc điểm tiêu h a lợn 15 1.2.2 Khả đáp ứng miễn dịch lợn 16 1.3 Vi khuẩn escherichia coli 17 1.3.1 Đặc điểm hình thái 17 1.3.2 Đặc điểm cấu trúc 17 1.3.3 Đặc tính sinh vật học vi khuẩn E coli 19 1.3.4 Đặc tính gây bệnh vi khuẩn E coli 20 1.3.5 Khả mẫn cảm với kháng sinh vi khuẩn E coli 23 1.4 Tình hình nghiên cứu nước 24 1.4.1 Tình hình nghiên cứu nước 24 1.4.2 Tình hình nghiên cứu giới 27 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG, NGUYÊN VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 30 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 30 2.1.2 Nguyên vật liệu dùng nghiên cứu 30 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iv 2.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 31 2.2.1 Địa điểm nghiên cứu 31 2.2.2 Thời gian nghiên cứu 31 2.3 Nội dung nghiên cứu 31 2.3.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn số xã, phường thuộc khu vực TP Cẩm Phả, tỉnh Quảng Ninh 31 2.3.2 Phân lập, xác định số đặc tính sinh học chủng E coli phân lập 31 2.3.3 Thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy cho lợn đề xuất biện pháp phòng chống bệnh 32 2.4 Phương pháp nghiên cứu 32 2.4.1 Phương pháp điều tra dịch tễ học 32 2.4.1.1 Chọn mẫu điều tra 32 2.4.1.2 Phương pháp 32 2.4.2 Thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 32 2.4.3 Phương pháp xác định đặc tính sinh hoá vi khuẩn E coli 35 2.4.4 Phương pháp xác định serotype kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập 37 2.4.5 Phương pháp xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập 38 2.4.6 Phương pháp xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli 40 2.4.7 Phương pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 40 2.4.8 Thử nghiệm vaccine phòng bệnh tiêu chảy lợn tháng tuổi 41 2.4.9 Xây dựng phác đồ điều trị tiêu chảy lợn tháng tuổi 41 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 41 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 42 3.1 Kết nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi số xã, phường thuộc khu vực thành phố Cẩm Phả, tỉnh Quảng Ninh 42 3.1.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số xã, phường thuộc khu vực TP Cẩm Phả 42 3.1.2 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 44 3.1.4 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 49 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn v 3.1.5 Triệu chứng lâm sàng lợn mắc tiêu chảy 52 3.1.6 Bệnh tích đại thể lợn bị mắc tiêu chảy 53 3.2 Kết phân lập xác định số đặc tính sinh học chủng E coli phân lập 55 3.2.1 Kết phân lập vi khuẩn E coli lợn mắc tiêu chảy 55 3.2.2 Kết phân lập E coli từ bệnh phẩm lợn chết mắc tiêu chảy 56 3.2.3 Kết xác định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn E coli phân lập 58 3.2.4 Kết xác định serotype chủng E coli phân lập 59 3.2.5 Kết xác định yếu tố gây bệnh (độc tố yếu tố bám dính) vi khuẩn E coli phân lập 60 3.2.6 Kết xác định độc lực chủng E coli phân lập động vật thí nghiệm 63 3.2.7 Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 64 3.3.1 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị hội chứng tiêu chảy cho lợn 65 3.3.2 Kết thử nghiệm vaccine phòng bệnh tiếu chảy cho lợn 67 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 70 Kết luận 70 Đề nghị 71 TÀI LIỆU THAM KHẢO 72 MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA CHO ĐỀ TÀI 82 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn vi DANH MỤC TỪ VÀ CỤM TỪ VIẾT TẮT EPEC : Enteropathogenic Escherichia coli ETEC : Enterotoxigenic Escherichia coli BHI : Brain-heart infusion PBS : Phosphate buffer saline DHL : Deoxycholate Hydrogen sulfide Lactose agar MR : Methyl Red cs : Cộng Nxb : Nhà xuất PCR : Polymerase Chain Reaction SLT : Shiga-like toxin SLT1 : Shiga-like toxin SLT2 : Shiga-like toxin ST (a,b) : Heat- Slable toxin (a,b) LT : Heat-Labile toxin tr : trang pg : page TT : Thể trọng VP : Voges Pros Kaver VT2e : Verotoxin 2e VTEC : Verotoxigenic Escherichia coli Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1: Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số xã, phường thuộc TP Cẩm Phả 42 Bảng 3.2: Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 44 Bảng 3.3: Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 47 Bảng 3.4: Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 50 Bảng 3.5: Triệu chứng lâm sàng lợn bị mắc bệnh tiêu chảy 52 Bảng 3.6: Bệnh tích đại thể lợn bị mắc tiêu chảy 54 Bảng 3.7: Kết phân lập vi khuẩn E coli từ phân lợn mắc tiêu chảy 55 Bảng 3.8: Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh phẩm lợn chết mắc tiêu chảy 56 Bảng 3.9: Kết giám định số đặc tính sinh học chủng E coli phân lập 58 Bảng 3.10: Kết xác định serotype kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập 59 Bảng 3.11: Kết xác định tỷ lệ chủng vi khuẩn E coli mang gen quy định sinh tổng hợp yếu tố gây bệnh 61 Bảng 3.12: Kết xác định độc lực số chủng vi khuẩn E coli chuột bạch 63 Bảng 3.13: Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 64 Bảng 3.14: Kết điều trị thực nghiệm phác đồ điều trị hội chứng tiêu chảy cho lợn tháng tuổi 66 Bảng 3.15: Kết phòng bệnh tiêu chảy cho lợn vaccine 67 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn viii DANH MỤC HÌNH, ĐỒ THỊ Hình 3.1: Biểu đồ tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số xã, phường thuộc khu vực TP Cẩm Phả 43 Hình 3.2: Biểu đồ tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 46 Hình 3.3: Biểu đồ tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 48 Hình 3.4: Biểu đồ tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 50 Hình 3.5: Biểu đồ tỷ lệ quan c bệnh tích lợn bị mắc tiêu chảy 54 Hình 3.6: Biều đồ tỷ lệ mẫu bệnh phẩm dương tính với E coli 57 Hình 3.7: Kết xác định gen yếu tố bám dính 62 Hình 3.8: Kết xác định gen độc tố 62 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 70 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Từ kết nghiên cứu hội chứng tiêu chảy lợn nuôi khu vực thành phố Cẩm Phả, tỉnh Quảng Ninh bước đầu c số kết luận sau: - Lợn nuôi khu vực thành phố Cẩm Phả mắc chết tiêu chảy với tỷ lệ cao (tương ứng 14,51 15,44%) tổng số lợn điều tra - Tỷ lê lợn mắc chết tiêu chảy giảm dần theo lứa tuổi, cao giai đoạn từ sơ sinh đến 20 ngày tuổi (18,84%) thấp 41-60 ngày tuổi (6,90%); mắc cao mùa Đông (18,52%), thấp mùa Thu (10,53%), mắc chủ yếu phương thức chăn nuôi gia trại bán công nghiệp (tương ứng 12,7 20,37%) - Lợn mắc tiêu chảy c bệnh tích điển ruột viêm, xuất huyết, dày chứa thức ăn không tiêu, niêm mạc phủ dịch nhờn, xung huyết hạch lâm ba màng ruột sưng, tụ huyết - Các chủng E coli phân lập từ lợn mắc tiêu chảy mang đầy đủ đặc tính sinh vật học điển hình giống tài liệu mô tả - Đã xác định chủng E coli phân lập thuộc nhóm kháng nguyên O149 chiếm tỷ lệ cao (51,58%), tiếp đến nhóm O139 (17,6%) nhóm O15 (12,45%) - Các chủng E coli phân lập mang yếu tố gây bệnh F4 chiếm tỷ lệ cao (50,0%), tiếp đến F5 (33,33%) thấp F41 (16,67%); độc tố LT, STa STb xuất với tỷ lệ cao STb (50,00% ) thấp LT (16,67%) - Các chủng E coli phân lập c độc lực mạnh, gây chết 100% chuột thí nghiệm từ 12 - 36 sau tiêm canh khuẩn - Các chủng E coli phân lập mẫn cảm cao với nofloxacin ceftiofur (100%), kháng lại với oxacillin (100%) colistin (80%) - Sử dụng ceftiofur nofloxacin kết hợp với điện giải vitamin điều trị tiêu chảy cho lợn cho hiệu tốt địa bàn khu vực thành phố Cẩm Phả, tỷ lệ khỏi tương ứng 93,33 81,61% Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 71 - Tiêm vaccine HANVET TOBACOLI phòng tiêu chảy cho lợn nái vào thời gian tuần trước đẻ làm giảm đáng kể tỷ lệ mắc bệnh tiêu chảy lợn (18%) Đề nghị - Tiếp tục nghiên cứu nhằm lựa chọn chủng vi khuẩn E coli phù hợp để chế vacccine phòng bệnh tiêu chảy vi khuẩn E coli gây - Áp dụng tiêm vaccine HANVET TOBACOLI phòng tiêu chảy phác đồ sử dụng ceftiofur điều trị cho lợn địa bàn thành phố Cẩm Phả để hạn chế hội chứng tiêu chảy lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO I TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Archie H (2000), Sổ tay dịch bệnh động vật, (Phạm Gia Ninh Nguyễn Đức Tân dịch), Nxb Bản đồ, Hà Nội, tr 53, 207 - 214 Bùi Thị Ba, Đào Hoài Thu, Võ Thành Thìn, Đặng Văn Tuấn, Đỗ Văn Tấn, Vũ Khắc Hùng (2012), “Xác định số gen kháng kháng sinh vi khuẩn Escherichia coli O157:H7 phân lập từ trâu bò khỏe mạnh số tỉnh Nam trung bộ”, Tạp chí Khoa học Việt Nam Đặng Xuân Bình (2005), Vi khuẩn E coli Clostridium perfringens bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ, chế tạo sinh phẩm phòng trị, Luận án tiến sỹ Nông nghiệp Nguyễn Nguyệt Cầm (2008), Xác định yếu tố gay bệnh vi khuẩn E coli phân lập từ lợn theo mẹ bị tiêu chảy trung tâm nghiên cứu lợn Thụy Phương thử nghiệm vaccine phòng bệnh, Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp, trường ĐH Nông nghiệp Hà Nội Lê Minh Chí (1995), Bệnh tiêu chảy gia súc, Hội thảo khoa học Nông nghiệp công nghiệp thực phẩm, Hà Nội, tr 20 - 22 Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật y học, Nhà xuất Y học Cù Xuân Dần, Nguyễn Xuân Tịnh, Tiết Hồng Ngân, Nguyễn Bá Mùi, Lê Mộng Loan (1996), Sinh lý học gia súc, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 122 - 141 Huỳnh Kim Diệu (2009), “Thành phần dinh dưỡng xuân hoa, thuốc điều trị bệnh tiêu chảy lợn con”, Tạp chí khoa học kĩ thuật thú y, tập XVI (2), tr 61- 65 Đoàn Kim Dung (2003), Sự biến động số vi khuẩn hiếu khí đường ruột, vai trò E coli hội chứng tiêu chảy lợn phác đồ điều trị, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú Y quốc gia, Hà Nội Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 73 10 Nguyễn Chí Dũng (2013), Nghiên cứu vai trò gây bệnh vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn nuôi tỉnh Vĩnh Phúc biện pháp phòng trị, Luận Văn thạc sĩ Thú y, Trường ĐH Nông Lâm – ĐH Thái Nguyên 11 Lê Văn Dương (2010), Phân lập, xác định vai trò gây bệnh Escherichia coli hội chứng tiêu chảy lợn số huyện tỉnh Bắc Giang biện pháp phòng trị, Luận Văn thạc sĩ khoa học Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm – ĐH Thái Nguyên 12 Thân Thị Đang (2010), “Vai trò ký sinh trùng đường tiêu hoá hội chứng tiêu chảy lợn sau cai cách phòng trị”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, tập 17, số 1, tr 43 - 51 13 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn con, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 44 - 81 14 Bùi Xuân Đồng (2002), “Bệnh phù đầu Escherichia coli gây lợn Hải Phòng biện pháp phòng chống”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập IX, tr 98 - 99 15 Nguyễn Thị Thanh Hà, Bùi Thị Tho (2009), “Nghiên cứu bào chế thử nghiệm cao mật bò ứng dụng phòng bệnh phân trắng lợn con”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập 16 (2), tr 57 - 60 16 Trần Đức Hạnh (2013), Nghiên cứu vai trò E coli, Salmonella Clostridium perfringens gây tiêu chảy lợn tỉnh miền núi phía Bắc biện pháp phòng trị, Luận án Tiến sĩ Thú y, Đại học Thái Nguyên 17 Trần Thị Hạnh, Đặng Xuân Bình, Lưu Quỳnh Hương (2004) “Xác định vai trò E coli C perfringens bệnh tiêu chảy lợn giai đoạn theo mẹ, chế tạo sinh phẩm phòng bệnh”, Viện Thú y 35 năm xây dựng phát triển (1996 - 2004), Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 393 - 405 18 Phạm Khắc Hiếu, Trần Thị Lộc (1998), Stress đời sống người vật nuôi, Nxb nông nghiệp Hà Nội 19 Phạm Khắc Hiếu Bùi Thị Tho (1999), “Một số kết nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh thú y” Kết nghiên cứu KHKT khoa CNTY (1996 - 1998), Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 134 - 138 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 74 20 Hoàng Phú Hiệp (2014), Nghiên cứu phát triển kỹ thuật phát chủng vi khuẩn Escherichia coli O157:H7 tạo kháng thể tái tổ hợp đặc hiệu, Luận án Tiến sĩ sinh học, Đại học Thái Nguyên 21 Nguyễn Xuân Hòa, Đặng Công Tin, Nguyễn Thị Hiền, Lê Văn Phước (2011), “Xác định độc lực tính mẫn cảm kháng sinh vi khuẩn E coli phân lập từ bệnh phẩm lợn sau cai sữa bị bệnh tiêu chảy”, Tạp chi Nông nghiệp Phát triển nông thôn, kỳ 1, số tháng 9, tr 52 - 56 22 Lê Thị Hoài (2008), Xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn E coli, C Perfringén hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Hưng Yên thử nghiệm phác đồ điều trị, Luận Văn thạc sĩ Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên 23 Vũ Khắc Hùng, Lê Văn Tạo, Pilipcinec (2005), “Xác định loại kháng nguyên bám dính thường gặp vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bị tiêu chảy phản ứng PCR”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y,(3) tr 22 - 28 24 Bùi Quý Huy (2003), Sổ tay phòng chống bệnh từ động vật lây sang người Bệnh E coli, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 30 - 34 25 Lâm Thị Thu Hương Đường Chi Mai (2011), “Tỷ lệ nhiễm Rotavirus Escherichia coli K88 heo tiêu chảy”, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, tập 18, số 6, tr 31 - 35 26 Lý Thị Liên Khai (2001), “Phân lập, xác định độc tố ruột chủng E coli gây bệnh tiêu chảy cho heo con”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập VIII, tr 13 - 18 27 Đặng Bá Khánh (2010), Nghiên cứu tính mẫn cảm, tính kháng thuốc E coli Salmonella spp phân lập từ bệnh lợn phân trắng, ứng dụng điều trị, Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp, trường ĐH Nông nghiệp Hà Nội 28 Nguyễn Thị Kim Lan (2004), “Thử nghiệm phòng trị bệnh coli dung huyết cho lợn Thái Nguyên Bắc Giang”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XII (3), tr 35 - 39 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 75 29 Nguyễn Thị Kim Lan, Lê Minh, Nguyễn Thị Ngân (2006), “Vai trò ký sinh trùng đường tiêu hoá hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Thái Nguyên”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, tập 13, số 3, tr 36 - 40 30 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Ngân, Lê Minh (2006), “Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn Thái Nguyên”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập 13, số 4, tr 92 - 96 31 Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, Trương Văn Dung (1997), Bệnh phổ biến lợn biện pháp phòng trị, Nxb nông nghiệp Hà Nội, tr 193 - 195 32 Phạm Sỹ Lăng (2009), “Bệnh tiêu chảy vi khuẩn lợn biện pháp phòng tri”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập 16 (6), tr 80- 85 33 Trần Trung Mỹ (2010), Phân lập xác định vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi số huyện tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị, Luận Văn thạc sĩ Nông nghiệp, Trường ĐH Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên 34 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trương Quang, Phùng Quốc Chướng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thanh (1997), “Bệnh viêm ruột ỉa chảy lợn”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, số 2, tr 39 - 45 35 Nguyễn Thị Nội (1985), Tìm hiểu vai trò E coli bệnh phân trắng lợn vaccine xin dự phòng, Luận án PTS khoa học, Hà Nội 36 Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thị Thu Hà (1989), “Nghiên cứu vaccine đa giá Salco phòng bệnh ỉa chảy cho lợn con”, Kết nghiên cứu KHKT Thú y 1985- 1989, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 54 - 58 37 Nguyễn Thị Ngữ (2005), Nghiên cứu tình hình hội chứng tiêu chảy lợn huyện Chương Mỹ - Hà Tây, xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli Salmonella, biện pháp phòng trị, Luận văn thạc sỹ Nông nghiệp, Hà Nội 38 Vũ Văn Ngữ (1975), Loạn khuẩn đường ruột tác dụng điều trị Colisubtil Nxb Y học, Hà Nội 39 Nguyễn Như Pho (2003), Bệnh tiêu chảy heo, Nxb Nông nghiệp, Thành phố Hồ Chí Minh Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 76 40 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh Đỗ Ngọc Thuý (1999) “Kết phân lập vi khuẩn E coli Salmonella lợn mắc tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hoá học chủng vi khuẩn phân lập biện pháp phòng trị”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tr 47 - 51 41 Phan Thanh Phượng, Đặng Thị Thủy (2008), “Phòng bệnh kháng thể E coli chiết tách từ lòng đỏ trứng gà dạng bột”, Tạp chí Khoa học kĩ thuật Thú y, tập 15, số 5, tr 95 - 96 42 Phan Thanh Phượng, Đặng Thị Thủy (2008), “Nghiên cứu biến động hiệu giá kháng thể thụ động thể lợn sử dụng kháng thể dạng bột dạng đông khô phòng trị bệnh E coli tụ huyết trùng lợn”, Tạp chí Khoa học kĩ thuật Thú y, tập 15, số 6, tr 56 - 59 43 Trương Quang (2005), “Kết nghiên cứu vai trò gây bệnh E coli hội chứng tiêu chảy lợn - 60 ngày tuổi”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XII (1), tr 27 - 32 44 Phạm Thế Sơn, Phạm Khắc Hiếu (2008), “Tác dụng kháng khuẩn chế phẩm EM - TK21 với vi khuẩn E coli, Salmonella, Cl perfringens (in vitro) khả phòng trị tiêu chảy chế phẩm EM - TK21 lợn - 60 ngày tuổi”, tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, tập 15 (1), tr.69 - 72 45 Lê Thị Tài (1997), Ô nhiễm thực phẩm với sức khoẻ người gia súc, thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi, Viện thú y quốc gia, tr 65 - 66 46 Lê Văn Tạo, Khương Bích Ngọc, Nguyễn Thị Vui, Đoàn Băng Tâm (1993), “Nghiên cứu chế tạo vaccine E coli cho uống phòng bệnh ỉa phân trắng lợn con”, Tạp chí khoa học, công nghệ quản lý kinh tế, tr 324 - 326 47 Lê Văn Tạo (1996), “Cấu trúc fimbriae, kháng nguyên bám dính K88 vi khuẩn E coli vai trò n trình gây bệnh phân trắng lợn con” Tạp chí nông nghiệp, công nghê thực phẩm - số 2, Hà Nội, tr 62 - 63 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 77 48 Lê Văn Tạo (1997), Bệnh Escherichia coli gây Những thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi, tài liệu giảng dạy Sau đại học, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội, tr 207- 210 49 Phạm Ngọc Thạch (1996), Một số tiêu phi lâm sàng trâu viêm ruột ỉa chảy biện pháp phòng trị, Luận án tiến sĩ Nông Nghiệp, tr 20 - 32 50 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), Vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 81 - 84 51 Nguyễn Như Thanh, Bùi Quanh Anh, Trương Quang (2001), Dịch tễ học Thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 52 Trịnh Văn Thịnh (1985), Bệnh lợn Việt Nam, Nxb Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 90 - 95 53 Nguyễn Anh Tuấn, Nguyễn Bá Tiếp (2013), “Vai trò Escherichia coli Samonella spp hội chứng tiêu chảy lợn trước sau sai sữa: nghiên cứu mô hình trại nuôi công nghiệp”, Tạp chí Khoa học Phát triển, tập 11, số 3, tr 318 - 327 54 Hoàng Văn Tuấn, Lê Văn Tạo, Trần Thị Hạnh (1998), “Kết điều tra tình hìnhtiêu chảy lợn trại giống hướng nạc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y , Tập 5, số 55 Trịnh Quang Tuyên (2004), “Phân lập xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli từ lợn bị tiêu chảy nuôi trại lợn Tam Điệp”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y (4), tr 22 - 28 56 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Giáo trình vi sinh vật Thú y, NXB Nông nghiệp, tr 72- 81 57 Nguyễn Thị Minh Trang, Nguyễn Huỳnh Nga, Nguyễn Thị Kim Quyên (2011), “Tình hình nhiễm nhạy cảm kháng sinh vi khuẩn E coli gây bệnh tiêu chảy heo từ - 60 ngày tuổi tỉnh Trà Vinh”, Tạp chí Khoa học Công nghệ, số 1, tháng 6/2011, tr 46 - 50 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 78 58 Tạ Thị Vịnh, Đặng Thị Hoè (2002), “Một số kết sử dụng chế phẩm sinh học để phòng trị bệnh tiêu chảy lợn con”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, tập 9, số 4, tr 54 - 56 59 Nguyễn Hữu Vũ, Hoàng Bùi Tiến, Trần Thị Thu Hiền (2010) “Kháng thể HANVET KTEHI phòng trị bệnh tiêu chảy E coli gây lợn”, Tạp chí khoa học kĩ thuật thú y, tập 17 (3), tr 94-95 II TÀI LIỆU TIẾNG NƢỚC NGOÀI 60 Adenipekun E O., Jackson C R., Oluwadun A., Iwalokun B A., Frye J G., Barrett J B., Hiott L M., Woodley T A (2015), “Prevalence and Antimicrobial Resistance in Escherichia coli from Food Animals in Lagos, Nigeria”, Microb Drug Resist 61 Adeyanju G T., Ishola O (2014), “Salmonella and Escherichia coli contamination of poultry meat from a processing plant and retail markets in Ibadan, Oyo State, Nigeria”, Springerplus, 12, pg – 139 62 Boonyasiri A., Tangkoskul T., Seenama C., Saiyarin J., Tiengrim S., Thamlikitkul V (2014), “Prevalence of antibiotic resistant bacteria in healthy adults, foods, food animals, and the environment in selected areas in Thailand”, Pathog Glob Health, 108(5), pg 235 - 245 63 Byun J W., Jung B Y., Kim H Y., Fairbrother J M., Lee M H., Lee W K (2013), “Real-time PCR for differentiation of F18 variants among enterotoxigenic and Shiga toxin-producing Escherichia coli from piglets with diarrhoea and oedema disease”, Vet J., pg 538 - 540 64 Dho-Moulin M , Fairbrother J M (1999), “Avian pathogenic Escherichia coli (APEC)”, Vet Res, 30(2-3), pg 299 - 316 65 Elsinghorst E A., Weitz J A (1994), “Epithelial cell invasion and adherence directed by the enterotoxigenic Escherichia coli tib locus is associated with a 104-kilodalton outer membrane protein”, Infect Immun, 62, pg 3463 - 3471 66 Fairbrother J M (1992), Enteric colibacillosis Diseases of swine, IOWA State University Press/AMES, IOWA U.S.A 7th Edition, pg 489 - 496 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 79 67 Falkow S (1975), Plasmid which contribute to pathogenity In infection multile drug resistance Pion Ltd London 68 Giannella R A., Rout W R., Formal S B., and Collins H (1976), “Role of plasma filtration in the intestinal fluid secretion mediated by infection with Salmonella typhimurium”, Infect Immun, 13, pg 470 - 474 69 Hering J., Hille K., Frömke C., von Münchhausen C., Hartmann M., Schneider B., Friese A., Roesler U., Merle R., Kreienbrock L (2014), “Prevalence and potential risk factors for the occurrence of cefotaxime resistant Escherichia coli in German fattening pig farms-a cross-sectional study”, Prev Vet Med, 116(1-2), pg 129 - 137 70 Ho W S., Tan L K., Ooi P T., Yeo C C., Thong K L (2013), “Prevalence and characterization of verotoxigenic - Escherichia coli isolates from pigs in Malaysia”, BMC Vet Res 71 Jones G W., Rutter J M (1974), “Contribution of the K88 antigen of Escherichia coli to enteropathogenicity; protection against disease by neutralizing the adhesive properties of K88 antigen”, Am J Clin Nutr, 27(12), pg 1441 - 1449 72 Kempf I., Fleury M A., Drider D., Bruneau M., Sanders P., Chauvin C., Madec J Y., Jouy E (2013), “What we know about resistance to colistin in Enterobacteriaceae in avian and pig production in Europe?”, Int J Antimicrob Agents, pg 379 - 383 73 Koláčková I., Házová K., Skočková A., Karpíšková R (2014), “Occurrence of Shiga toxigenic Escherichia coli strains in pigs and cattle at slaughterhouses in the Czech Republic in 2013”, Klin Mikrobiol Infekc Lek, 20(2), pg 36 - 39 74 Lu D., Li Q., Wu Z., Shang S., Liu S., Wen X., Li Z., Wu F., Li N (2014), “High-level recombinant human lysozyme expressed in milk of transgenic pigs can inhibit the growth of Escherichia coli in the duodenum and influence intestinal morphology of sucking pigs”, PloS One Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 80 75 Mainil J G., Gerardin J., Jacquemin E (2000), “Identification of the F17 fimbrial subunit- and adhesin-encoding (f17A andf17G) gene variants in necrotoxigenic Escherichia coli from cattle, pigs and humans”, Veterinary Microbiology, 73 (4), pg 327 - 335 76 Nimri L., Abu Al-Dahab F., Batchoun R (2014), “Foodborne bacterial pathogens recovered from contaminated shawarma meat in northern Jordan”, J Infect Dev Ctries., (11), pg 1407 - 1414 77 Odwar J A., Kikuvi G., Kariuki J N., Kariuki S (2014), “A cross-sectional study on the microbiological quality and safety of raw chicken meats sold in Nairobi, Kenya”, BMC Res Notes, 10, pg 507:627 78 Orskov F (1978), Vilurence Factor of the baterial cell surface, J Infect., pg 630 79 Rajkhowa S., Sarma D K (2014), “Prevalence and antimicrobial resistance of porcine O157 and non-O157 Shiga toxin-producing Escherichia coli from India”, Trop Anim Health Prod, 46(6), pg 931 - 937 80 Randall L P., Lemma F., Rogers J P., Cheney T E., Powell L F., Teale C J (2014), “Prevalence of extended-spectrum-β-lactamase-producing Escherichia coli from pigs at slaughter in the UK in 2013”, J Antimicrob Chemother, 69(11), pg 2947 - 2950 81 Zarfel G., Galler H., Luxner J., Petternel C., Reinthaler F F., Haas D., Kittinger C., Grisold A J., Pless P., Feierl G (2014), “Multiresistant bacteria isolated from chicken meat in Austria”, Int J Environ Res Public Health, 11(12), pg 12582 - 12593 82 Zhang S H., Lv X., Han B., Gu X., Wang P F., Wang C., He Z (2015), “Prevalence of antibiotic resistance genes in antibiotic-resistant Escherichia coli isolates in surface water of Taihu Lake Basin, China”, Environ Sci Pollut Res Int 83 Wang X., Ren W., Nie Y., Cheng L., Tan W., Wang C., Wei L., Zhang R., Yan G (2013), “A novel watery diarrhoea caused by the co-infection of neonatal piglets with Clostridium perfringens type A and Escherichia coli (K88, 987P)”, Vet J Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 81 84 Wyrsch E., Roy Chowdhury P., Abraham S., Santos J., Darling A E., Charles I G., Chapman T A., Djordjevic S P (2015), “Comparative genomic analysis of a multiple antimicrobial resistant enterotoxigenic E coli O157 lineage from Australian pigs”, BMC Genomics, 6, pg 165 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 82 MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA CHO ĐỀ TÀI Ảnh 1: Lấy mẫu xã Dƣơng Huy thuộc thành phố Cẩm Phả Ảnh 2: Đàn lợn điều tra thành phố Cẩm Phả Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 83 Ảnh 3: Mổ khám, lấy bệnh phẩm lợn mâc tiêu chảy Ảnh 4: Hình thái vi khuẩn E coli tiêu nhuộm Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 84 Ảnh 5: Phản ứng xác định khả di động chủng vi khuẩn E coli Ảnh 6: Kháng sinh đồ chủng E coli đƣợc phân lập Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ... Phân lập, xác định số đặc tính sinh vật học vi khu n Escherichia coli hội chứng tiêu chảy lợn khu vực thành phố Cẩm Phả, tỉnh Quảng Ninh biện pháp phòng trị Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số. .. HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM HÀ GIANG PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH VẬT HỌC CỦA VI KHU N ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TẠI KHU VỰC THÀNH PHỐ CẨM... số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn theo mẹ số xã, phường thành phố Cẩm Phả, tỉnh Quảng Ninh - Phân lập, xác định số đặc điểm sinh vật, h a học số yếu tố gây bệnh vi khu n E coli gây hội