Loại thuốc Kháng sinh Chế phẩm Thuốc tiêm CEPHALEXIN Cephalexinum CO H H NH2 H0O C,6H,7N 304 S H2O p.t.l: 365,4 Cephalexin acid (6/ỉ,7i?)-7-[[(27?)-2-amino-2phenylacetyl]amino]-3-niethyI-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo [4.2.0]oct-2-en-2-Garboxylic monohydrat, phải chứa từ 95,0 % đếiì 102,0 % C 16H 17N 3O4S, tính theo chế phẩm khan Tính chất Bột kết tinh màu trắng gần trắng Hơi tan nước, thực tế không tan ethanol 96% Định tính Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại cephalexin chuẩn PH Hòa tan 50 mg chế phẩm «í/ớc không cổ carbon dioxyd (TT) pha loãng thành 10 ml với dung môi pH dung dịch thu phải từ 4,0 đến 5,5 (Phụ lục ) Góc quay cực riêng T +149° đ ế n +158° tính theo chế phẩm khan (Phụ iục 6.4) Hòa tan 0,125 g chế phẩm dung dịch đệm phíalat p H 4,4 (TT) pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Độ hấp thụ ánh sáng Hòa tan 50 mg chế phẩm nước pha loãng thành 100,0 ml với dung môi Độ hâp thụ dung dịch bưỚG sóng 330 nm (Phụ lục 4.1) không lớn 0,05 Pha loãng 2,0 ml dung dịch thành 50,0 ml nước Phổ hấp thụ ánh sáng cửa dung dịch thu khoảng từ 2 nm đến 300 nm có cực đại hấp thụ 262 nm Độ hấp thụ riêng cực đại hấp thụ có giá trị từ 2 đến 245, tính theo chế phẩm khan Tạp chất liên quan Xác định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động A: Dung dịch đệm phosphat p H 5,0 (TT) Ỹha âộn%'Q: Methanol (TT), Dtmg dịch thử: Hòa tan 50,0 mg chế phẩm ữong pha động A pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Dung dịch đổi úhỉếu (1): Hòa tan 10,0 mg D-phenylglycin chuẩn plia động A pha loãng thành 10.0 m! với dung môi Dung dịch đổi chiểu (2): Hòa tan 10,0 mg acid 7aminodesacetoxycephalosporanic chuẩn ml dung dịch đệm phosphat p H 7,0 (TT) pha loãng thành lOịO ml pha động A Dung địch đối chiếu (3): Hút 1,0 ml dung dịch đối chiếu ( 1) 1,0 ml dung dịch đối chiếu (2 ) cho vào bình định mức dung tích 100,0 ml, thêm pha động A vừa đủ đến vạch» lắc Dung dịch đối chiếu (4): Hòa tan 10 mg dimethyl/ormamid (TT) 10 mg dimethylacetamid (TT) pha động A pha loãng thành ỉ 0,0 ml với dung môi Pha loăng 1,0 ml dung dịch thụ thành 1OOịO ml pha động A Dung dịch đổi chiếu (5)' Pha loãng 1,0 ml dung dịeh đối chiếu (3) thảnh 20j0 ml với pha động A Dung dịch đổi chiểu (6): Hòa tan 10 mg ceíotaxim riatri chuẩn pha động A pha loãng thành 10.0 ml với dung môi Hút 1,0 ml dung dịch thu được, thêm 1,0 mi dung dịch thử pha loãng thành 100 ml pha động A Điều kiện sắc kỷ: Cột thép không gỉ (10 cm X 4,6 mm) nhồi pha tĩnh c (5 |um) Chương trình pha động: Thời giaii (min) -1 -2 20 - 23 -3 Pha động A (% tt/tt) 98 98^70 70 98 98 Pha động B (% tữtt) 2 -> 3 -> 2 Detector quang phổ tử ngoại bước sóng 2 nm Tốc độ dồng: 1,5 ml/min Thể tích tiêm: 20 |J,I Cách tiến hành: Tiêm dung dịch thử dung dịch đối chiếu (3), (4), (5) (6 ) Phép thử có giá trị độ phân giải pic tương ứng với tạp chất A (D-phenylglycin) pic tạp chất B (acid -aminodesacetoxỵcephalosporanic) săc ký đô dung dịch đôi chiếu (3) phải 2,0 Độ phân giải pic tương ứng với cephalexin pic tương ứng với cefotaxim sắc ký đồ dung dịch đôi chiêu (6 ) phải 1,5 Trên sắc ký đồ dung dịch thử, diện tích pic phụ tương ứng với pic thứ hai săc ký đô dung dịch đối chiếu (3) (tạp chất B) không lớn diện tích pic thứ hai sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3) (1,0 %) Bất kỳ pic phụ (trừ pic tương ứng với dimethylformamid dimethylacetamid) có diện tích không ló'n diện tích pic thứ sắc ký đồ 'dung dich đối chiếu (3) (1,0 %) Tổng diện tích pic phụ không lớn ba lần diện tích pic thứ sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3) (3,0 %) Bỏ qua picphụ cộ diện tích nhỏ diện tích pic thứ hai săc ký đô cùa dung dịch đối chiếu (5) (0,05 %) „T í NANG CEPHALEXIN Capsulae Cephalexini Là nang cứng chứa cephalexin Chế phấm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận “Thuôc nang” (Phụ lục 1.13) yêu câu sau: J„.^ g cephalexin khan, C,6H|vN304 S, từ 90,0 % J J0 ol so với lượng ghi nhãn Tính chất N a n g n g nhẵn b ón g, k h ô n g m éo m ó, bột th u ốc bên N N-DimetKylanilm Không 20 phân triệu (Phụ lục 10.16; phương pháp B) ^ , ^^ Từ 4,0 % đến % (Phụ lục 10.3) Dùng 0,300 g chê phâm Tro sulfat Khong 0,2 % (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phâm ■ tr o n iZ g S Bảo quản Tránh anh sáng , , Loại thụoc K ang sin Chế phẩm Viênnén, nang, bột pha hỗn dịch uống trường- 900 ml nướci Tổc độ quay \ m rlmìn Thời giam 30 Cách tiến hành Lấy phần dung dịch môitrưòng loãng lượng dịch lọc với nước để dung dịch có nồng độcephalexin khoảng 20 jxg/ml Đo độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) Định tính A Phương pháp sắc ký lóp mỏng (Phụ lục 5.4) Bàn mỏnợ: Silica eỉ, khôns có chất kết dính, đươc ° | V^ ^ p ị n-hexan tetradecan (95 : 5) riễập khoảng 1cm, để dung môi di chuyển theo chiều dài mỏng, sau lấy mỏng khỏi bình sắc ký đế dung môi bay Dung môi khai triên: Dung dịch acid citric 0,1 M Định lượng dung dịch dinatri hydrophosphat 0,1 M - dung dịch Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năngcao (Phụlục 5.3) ninhydrin aceton có nồng độ g 15 mỉ Pha động: Methanol -acetonitril - dung dịch kali (60 : 40 : 1,5) dihydrophosphat 0,136 % - nước ( : : : 83) Dung dịch thừ Lấy lượng bột thuốc nang Z)M«gJ/c/zrtó.'Hòa tan 50,0 mg chế phẩm nwớc tương ứng với khoảng 30 mg cephalexin, hòa tan pha loãng thành 10 ,0 ml với dung môi 10 ml «wớc, lọc Dung dịch đối chiếu: Hòa tan 50,0 mg cephalexin dịch đôi chiêu: Dung dịch cephalexin chuân 0,3 % monohydrat chuân nước pha loãngthành «M-ơc 100,0 mỉ với dung môi Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 1^1 Dung dịch phân giải: Hòa tan 10 mg cefradin chuẩn dung dịch Triển khai sắc ký đến l^i dung môi 20 mí dung dịch đối chiếu pha loãng thành khoảng 3/4 chiều dài mỏng Lấy mỏng 100 ml nươc dâu mức dung môi đê Dieu kien sac ky\ứìông khí, sấy mỏng 110 °c Cột thép không'gỉ (25 cm X 4,6 mm) nhồi pha g phút quan sát ánh sáng thường tĩiih c (5 um) săc ký đô dung dịch thử Detector tử ngoại đặt bước sóng 254 nm djch đối chiếu phải giống vị trí, màu sắc Thể tích t í ê S íl vàỉdchthư^ T0C Ị dòng 1,5 ml/min l; / UX ^1- í l “5 c h t'ến hành' • 'p p có thời gian lưu tương Tiĩm dung dịch phân giải, dung dịch thử dung dịch cephalexin sắc ký đối chiếu Phép thử có giá trị độ phân giải ° ^ hai pic tương ứng với cephalexin cefradin sắc Nước ký đồ dung dịch phân giải phải 4,0 Không 10,0 % (Phụ lục 10.3) Tính hàm lượng cephalexin chế phẩm dựa vào Dùng 0,3 g bột thuôc nang, diện tích pic đáp ứng dung dịch thử dung dịch £)ộ (-pjjụ lục 11 4) đối chiếu jịịịệỊ Ị,ị- Kiểu giỏ quay dung dịch thu bước sóng cực đại 262 nm, cốc đo dày cm, mẫu trấng nước Tính toán hàm lượng cephalexin, C 16H 17N 3O 4S, hòa tan nang dựa vào độ hấp thụ dung dịch cephalexin chuẩn có nồng độ tương đương pha dung môi Yêu cầu: Không 80 % lượng cephalexin, C 16H 17N 3O4S, so với lượng ghi nhãn hòa tan 30 phút Loại thuốc Thuốc kháng sinh Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động' Hòa tan 1,0 g natri pentansuựonat (TT) 1015 ml hỗn hợp nước - acetoniừ-il - methanol triethylamin (850 : 100 : 50: 15), điều chỉnh tới pH 3,0 ± 0,1 acid phosphoric (TT) Dimg dịch chuẩn nội: Cân xác khoảng 300 mg -hydroxy benzotriazol vào bình định mức 1000 ml, hòa tan 10 ml methanol (TT) pha loãng pha động vừa đủ đến vạch, lắc Dung dịch chuẩn' Hòa tan lượng cephalexin chuẩn mtởc để thu dung dịch chuẩn gốc có nồng độ khoảng 1,0 mg/ml Hút xác 10,0 ml dung dịch chuẩn gốc vào bình nón nút mài, thêm xác 15,0 ml dung dịch chuẩn nội trộn Dung dịch thừ Cân xác lượng bột thuốc tương ứng với khoảng 100 mg cephalexin vào bình định mức 100 ml, thêm 75 ml nước lắc siêu âm 15 phút, pha loãng nước vừa đủ đến vạch, lắc đều, lọc Hút xác 10,0 ml dịch lọc vào bình nón nút mài, thêm xác 15,0 ml dung dịch chuẩn nội trộn Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm X mm) nhồi pha tĩnh c (5 |u,m 10 fj.m) Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 254 nm Tốc độ dòng; 1,5 ml/min Thể tích tiêm: 20 ỊLil Cách tiến hành: Kiểm tra khả thích họp hệ thống sắc ký: Tiên hành săc ký dung dịch chuẩn; sắc ký đồ thu được, độ phân giải pic chuẩn nội pic cephalexin không nhỏ 5; độ lệch chuẩn tương đối tỷ số diện tích pic cephalexin diện tích pic chuẩn nội lần tiêm lặp lại không lớn 2,0 % Tiến hành sắc ký dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng cephalexin, C 16H 17N 3O 4S, từ tỷ số diện tích pic cephalexin ,và diện tích pic chuẩn nội sắc ký đồ dung dịch thử, dung dịch chuẩn hàm lượng C 16H 17N 3O4S cephalexin chuẩn Là thuốc bột chứa cephalexin Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận "Thuôc bột" (Phụ lục 1.7) yêu cầu sau: Bảo quản Trong vỉ nhôm chai lọ nút kín Để nơi khô mát, nhiệt độ không 30 °c, tránh ánh sáng Hàm lượng thường dùng 250 mg; 500 mg THUỐC BỘT CEPHALEXIN Pulveres Cephalexini Hàm lượng cephalexin khan, Ct6HnN 304 S, từ 90,0 % đến 110,0 % so với lưọng ghi ừên nhãn Tính chất Bột khô tơi, không bị ẩm, vón, màu sắc đồng Định tính Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu phép thử mô tả mục Định tính chuyên luận “Nang cephalexin” Sử dụng bột thuốc thu từ phép thử Độ đồng khối lượng Nước Không 2,0 % (Phụ lục 10.3) Dùng 0,5 g bột thuốc Độ mịn Thuốc bột cephalexin phải đạt yêu cầu Bột mịn (Phụ lục 3.5) Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động, dung dịch chuân, dung dịch thử, điêu kiện săc ký, cách tiên hành thực mô tả mục Định lượng chuyên luận “Nan§ cephalexin”, thay bột thuốc nang bột thuoc thu từ phép thử Độ đồng khối lượng Bảo quản Trong gói giấy nhôm polyethylen kín Để nơi khô mát, nhiệt độ không 30 °c, fránh ánh sáng Loại thuốc Thuốc kháng sinh Hàm lượng thường dùng 125 mg; 250 mg; 500 mg VIÊN NÉN CEPHALEXIN Tabellae Cephalexini Là viên nén viên nén bao phim chứa cephalexin Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu ữong chuyên luận “Thuốc viên nén” (Phụ lục 1.20) yêu cầu sau: Hàm lương cephalexỉn khan, C 16H 17N 3O4S, từ 90,0 % đen 110,0 % so với lượng ghi nhãn Tính chất Viên màu trắng, có màu đồng Đinh tính Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu phép thử mô tả mục Định tính trong chuyên luận “Nang cephalexin” Sử dụng bột viên thay cho bột thuốc nang Nước Không 9,0 % (Phụ lục 10.3) Dùng 0,3 g bột viên Độ hòa tan (Phụ lục 11.4) Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu tiến hành thử mô tả chuyên luận "Nang cephalexin" Định lượng Phương pháp săc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pỉĩa động, duĩìẸ dịch chum, dung dịch thử, điều kiện sắc kỷ, cách tien hành thực mô tả mục Định lượng chuyên luận “Nang cephalexin”, thay bột thuôc nang băng bột viên sau cân viên đê xác định khối lượng trung bình nghiền mịn Bảo quản Trong vỉ nhôm chai lọ nút kín Đe nơi khô mát, nhiệt độ không 30 °c, tránh ánh sáng Loai thuốc Thuốc kháng sinh Hàm lượng thường dùng 250 mg; 500 mg CETIRIZIN HYDROCLORID Cetirizini hydrochloridum Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Nhóm I: A, D Nhóm II: B, c , D A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại cetirizin dihydro- clorid chuẩn B Hòa tan 20,0 mg chế phẩm 50 ml dung dịch acid hydrocloric 0,1 N (TT) pha loãng thành 100,0 ml với dung dịch acid Lấy 10,0 ml dung dịch pha loãng thành 100,0 ml dung dịch acid hydrocloric 0,1 N (TT) Đo phổ hấp thụ tử ngoại từ 210 nm đến 350 nm (Phụ lục 4.1) Dung dịch có cực đại hấp thụ 231 nm Độ hấp thụ riêng cực đại nằy tìi'359 đếri 381 c Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF254 Dung môi khai triên: Amoniac - methanol - dicloromethan (1 : 10: 90) Dung dịch thừ Hòa tan 10 mg chế phẩm nước pha loãng thành ml với dung môi Dung dịch đôi chiêu (I): Hòa tan 10 mg cetirizin dihydroclorid chuẩn nước pha loãng thành ml với dung môi Dung dịch đối chiểu (2 ): Hòa tan 10 mg clorphenamin maleat chuẩn nước pha loãng thành ml với dung môi Lấy ml dung dịch này, thêm ml dung dịch đối chiếu ( 1) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng dung dịch fil Triển khai sắc ký mép dung môi 15 cm Để mỏng khô luông không khí mát Quan sát mỏng đèn tử nẸoại bước sóng 254 nm Một vết sắc ký đô dung dịch thử có vị trí kích thước tương tự vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) Phép thử có giá trị săc ký đô dung dịch đôi chiếu (2 ) có hai vết tách rõ rệt D Chế phẩm cho phản ứng (A) cùa clorid (Phụ lục 1) 2HCI đồng phân đối quang C2,H27Cl3N203 p.t.l: 461,8 Cetirizin dihydroclorid acid (RS)-2-[2-[4-[(4-clorophenyl)phenylmethyl]piperazin-l-yl] ethoxy] acetic dihydroclorid, phải chứa từ 99,0 % đến 100,5 % C21H27CI3N 2O 3, tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bột kết tinh trắng gần trắng, dễ tan nước; thực tế không tan aceton dicloromethan Độ màu sắc dung dịch Dung dịch S: Hòa tan 1,0 g chế phẩm nước carbon dỉoxyd (TT) pha loãng thành 20 ml với dung môi Dung dịch s phải (Phụ lục 9.2) màu đậm hoTi màu dung dịch đối chiếu VN (Phụ lục 9.3, phưoTig pháp 2) PH Từ 1,2 đến 1,8 (Phụ lục 6.2) Dùng dung dịch s để xác định Tạp chất liên quan Kiểm tra phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động: Dung dịch acid sulfuric 10 % - nước acetonừril {OẠ : 6,6 : 93) Dung dịch thừ Hòa tan 20,0 mg chế phẩm pha động pha loãng thành 0 ,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 5,0 mg Cetirizin dihydrociorid chuẩn; 5,0 mg tạp chất chuẩn A Cetirizin (ÄS)-l-[(4-clorophenyl)phenyl methyl] piperazin) pha động pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Lấy 1,0 ml dung dịch này, pha loãng thành 100,0 ml pha động Dung dịch đổi chiếu (2): Pha loãng 2,0 ml dung dịch thử thành 50,0 ml pha động Lấy 5,0 ml dung dịch này, pha loãng thành ] 00,0 ml pha động Điêu kiện săc ký: Gột thép không gỉ (25 cm X 4,6 mm), chất nhồi sìlỉca geỉ dùng cho sắc ký (5 Ịitn) Tốc độ dòng: ml/min Detector: Quang phổ tử ngoại, đặt ỏ' bước sóng 230 nm Thể tích tiêm: 20 |Li[ Cách tiến hành: Tiêm dung dịch đối chiếu (1) Điều chỉnh độ nhạy hệ thống cho chiều cao pic sắc ký đồ khoảng 50 % thang đo Phép thử có giá trị độ phân giải pic thứ (cetirizin) pic thứ hai (tạp chất A) hệ số bất đối xứng tối đa 2,0 Tiêm riêng biệt dung dịch thử dung dịch đối chiếu (2) Tiến hành sắc ký thời gian iần thời gian lưu pic Cetirizin Trên sắc ký đồ dung dịch thử, diện tích pic nào, trừ pic không lớn diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2 ) (0 ,2 %); tổng diện tích tất pic, trừ pic chính, không lớn 1,5 lần diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) (0,3 %); không tính diện tích cùa pic nhỏ 0,1 lần diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2 ) Kim loại nặng Không 10 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Hòa tan 2,0 g chế phẩm nước pha loãng thành 20,0 ml với nước Lấy 12 ml dung dịch đem thử theo phương pháp Lấy ml dung dịch chì mẫu 10phần triệu (TT) để chuẩn bị mẫu đối chiếu Mất khối lượng làm khô Không 0,5 % (Phụ lục 9.6) (l,000g; 100°Cđen 105°C).’ Tro Sulfat Không 0,2 % (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Lấy 1,0 g chế phẩm đem thử Định lượng Hòa tan khoảng 0,100 g chế phẩm 70 ml hỗn hợp nước - aceton (30 : 70) Chuẩn độ dung dịch natri hydroxyd 0,1 N (CĐ) đến điểm uốn thứ hai Xác định điểm kết thúc phương pháp chuẩn độ đo điện (Phụ lục 10.2) Song song tiến hành chuẩn độ mẫu trắng ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 N (CĐ) tương đương với 15,39 m gC 2iH 27Cl3N Bảo quản Tránh ánh sáng Loại thuốc Kháng receptor Hi histamin VIÊN NÉN CETIRIZIN Tabellae Cetirizini Là viên nén bao phim chứa Cetirizin hydroclorid Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận “Thuốc viên nén”, mục “Viên bao” (Phụ lục 1.20) yêu cầu sau đây: H m lư ợ n g C etirizin h y d r o c io r id , C21H27CI3N2O3, từ 90,0 % đến 110,0 % so với lượng ghi nhãn Tính chất Viên bao bề mặt nhẵn, màu sắc đồng Định tính A Phương pháp sắc ký lóp mỏng (Phụ lục 5.4) Bán mỏng: Silica geỉ GF254 Dung môi khai ừ-iểm Amoniac - methanoỉ - methylen clorid{\ : 10 : 90) Dung dịch thừ Lấy lượng bột viên tương ứng với khoảng 10 mg Cetirizin hydroclorid hòa tan ml nước, lọc Dung dịch đối chiểu (1): Hòa tan 10 mg Cetirizin hydroclorid chuẩn nước pha loãng thành ml với dung môi Dung dịch đối chiểu (2): Hòa tan ío mg clorpheniramin maleat chuân nước, pha loãng thành ml với dung môi Lây ] ml dung dịch thêm ml dung dịch đối chiếu ( 1), trộn Cách tiến hành Chấm riêng biệt lên mỏng |il dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi khoảng 2/3 chiều dài mỏng Lấy mỏng để khô không khí quan sát ánh sáng tử ngoại 254 nm Phép thử có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2 ) có hai vết tách rõ ràng, v ết sắc ký đồ dung dịch thử dung dịch đối chiếu (1) phải giống vị trí, màu sắc kích thước B Trong phần Định lượng, thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng với thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dịch chuẩn Độ hòa tan (Phụ lục 11.4) Thiết bị: Kiểu cánh khuấy Môi trường hòa tan: 1000 ml nước Tốc độ quay: 50 r/min Thời gian: 30 Cách tiến hành: Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động điều kiện sắc ký thực phần Định lượng Dung dịch thừ Lấy phần dung dịch môi trưòng sau hòa tan, lọc Dung dịch chuẩn: Hòa tan lượng Cetirizin hỵdroclorid chuẩn với nước để thu dung dịch có nông độ tương đương với dung dịch thử Yêu cầu: Không 75 % lưọTĩg Cetirizin hydroclorid, C 21H27CI3N 2O 3, so với lượng ghi nhãn hòa tan 30 phút Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Ẩcetoniừ-il - dung dịch kali dỉhydrophosphat Ỡ,Ỡ/M(150:850) Dung dịch thử: Cân 20 viên loại bỏ lớp bao, tính khôi lượng trung bình viên nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên tưong ứng khoảng 20 mg Cetirizin hydroclorid vào bình định mức 100 ml, thêm 50 ml pha động, trộn siêu âm phút, thêm pha động đến định mức, lắc Lọc qua màng lọc 0,45 |um Dung dịch chuẩn: Dung dịch Cetirizin hydroclorid chuẩn 0,02 % ừong pha động, lọc qua màng lọc 0,45 |Lim Điều kiện sắc kỷ: Cột thép không gỉ (25 cm X mm) nhồi pha tĩnh c (5 Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 230 nm Tốc độ dòng: 1,5 ml/min Thể tích tiêm: 10 |J,1 Cách tiến hành: Kiểm tra khả thích hợp hệ thống sắc ký: Tiên hành sắc ký dung dịch chuẩn, độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic Cetirizin hydroclorid lần tiêm lặp lại không lớn 2,0 % Tiến hành sắc ký dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng Cetirizin hydroclorid, C21H27CI3N 2O3, có đơn vị chế phẩm dựa vào diện tích pic thu sắc ký đồ dung dịch thử, dung dịch chuân hàm lượng C21H 27CI3N 2O3 Cetirizin hydroclorid chuẩn Bảo quản Trong bao bì kín, nơi khô mát, tránh ánh sáng Loại thuốc Kháng histamin Đối kháng thụ thể H] Hàm lượng thường dùng mg, 10 mg CETOSTEARYL ALGOL Alcohol cetylicus et stearylicus Cetostearyl alcol hỗn họp aỉcol rắn mạch thẳng, phải chứa không 40,0 % stearyl alcol (CigHssO, p.t.l: 270,5) không 90,0 % tổng lượng cetyl alcol (C 16H34O, p.t.l: 242,4) stearyl alcol Tính chất Hạt, vảy, khối giống sáp, màu ứắng hay vàng Thực tế không tan nước, dễ tan ether, tan ethanol 90 % ether dầu hỏa Khi đun chảy hỗn họp hòa vói dầu béo, parafin lỏng mỡ cừu nóng chảy Định tỉnh Trên sắc ký đồ thu phần định lượng, hai pic sắc ký đồ dung dịch thử phải cỏ thời gian lưu tưofng ứn^ với pic ừên sắc kỷ đồ dung dịch đối chiêu ( 1) dung dịch đối chiếu (2 ) Độ màu sắc dung địch Hoa tan 0,5 g chế phẩm 20 ml ethanol 96 % (TT) sôi Dung dịch thu phải (Phụ lục 9.2) không đậm màu màu mâu Nó (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Nhiệt đô nóng chảy 49 ”C đen 56 °c (Phụ lục 6.7) Chỉ số acid Không 1,0 (Phụ lục 7.2) Chỉ sổ hydroxyl 208 đến 228 (Phụ lục 7.4, phương pháp A) Chỉ số iod Không 2,0 (Phụ lục 7.5) Dùng 2,0 g chế phẩm hòa tan 25 ml cloroform (TT) Chỉ số xà phòng hóa Không qua 2,0 (Phụ lục 7.7) Dùng 2,0 g chế phấm Đinh lương PhưoTig pháp sắc ký khí (Phụ lục 5.2) Dung dịch thử: Hòa tan 0,100 g chế phẩm ethanol (TT) pha loãng đến 10,0 ml với dung môi DuriẸ dịch đối chiếu (1): Hòa tan 60,0 mg cetyl alcol chuân ethanol ỢT) pha loãng đên 10,0 ml yới dung môi Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 40,0 mg stearyl alcol chuẩn ethanol (TT) pha loãng đến 10,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiểu (3): Trộn ml dung dịch đối chiếu ( 1) với ml dung dịch đối chiếu (2 ) pha loãng đến 10,0 ml eí/ỉano/Ỵrĩ;) Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (3 m X mm) nhồi diatomit dùng cho sắc ký khỉ (TT) tẩm 10 % (kl/kl) poỉy(dimethyl)siloxan (TT) Khí mang: Nitrogen dùng cho săc kỷ khỉ (TT) Lưu lượng khí: 30 ml/min Detector ion hóa lửa Nhiệt độ cột 200 °c, nhiệt độ buồng tiêm detector 250 “C Thể tích tiêm: \ú Cách tiến hành: Tiêm riêng rẽ dung dịch Điều chỉnh tốc độ dòng cho hệ số phân giải pic sắc ký đồ dung dịch thử không nhỏ 1,25 Phép thử chi có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3) có pic với tỉ lệ tín hiệu nhiễu Xác định hàm lượng cetyl alcol stearyl alco! từ sắc ký đồ dung dịch thử phương pháp chuẩn hóa Định tính pic cách so sánh với sắc kỵ đồ dung dịch đối chiếu (1) dung dịch đối chiểu (2) Bảo quản Bao bi kín, tránh ánh sáng Công dụng Tá dược CETYL ALGOL Alcohol cetylicus Cetyl alcol hỗn hợp alcol rắn, chủ yếu chứa hexadecanol (CH3-(CH2),4-CH20H; p.t.l: 242,4) Tính chất Khối, bột, vảy hay hạt màu ữắng, nhòn Thực tế không tan ừong nước, tan đến dễ tan ethanol 96 %, dễ tan ether Khi đun chảy, hỗn họp hòa với dầu thực vật, mỡ động vật, parafin lỏng mỡ cừu nóng chảy Định tính A Nhiệt độ nóng chảy 46 “C đến 52 °c (Phụ lục 6.7) B Chỉ số hydroxyl 218 đến 238 (Phụ lục 7.4) Độ màu sắc dung dịch Hòa tan 0,5 g chế phẩm ethanoỉ (TT) sôi, để nguội pha loãng đến 20 ml với dung môi Dung dịch thu phải (Phụ lục 9.2) không đậm màu màu mẫu Nô (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Chỉ số acid Không 1,0 (Phụ lục 7.2) Chỉsốiod Không 2,0 (Phụ lục 7.5) Dùng 2,0 g chế phẩm hòa tan 25 ml cloroform (TT) Chỉ số xà phòng hóa Không 2,0 (Phụ lục 7.7) Dùng 2,0 g chế phẩm Bảo quản Bao bì kín, tránh ánh sáng Loại thuốc Tá dược CHYMOTRYPSIN Chymotrypsinum Chymotrypsin men thủy phân protein kết tinh từ dịch chiết tuyến tụy bò, Bos taurus Linné (Fam Bovidae) Chế phẩm phải chứa không 1000 đơn vị chymotrypsin mg, tính theo chế phẩm làm khô phải chứa từ 90,0 % đến 110,0 % so với hoạt lực ghi nhãn Tính chất Bột kết tinh bột vô định hình màu trắng Hơi tan nước Dạng bột vô định hình dễ hút ẩm Định tính A Lấy khoảng 10 mg chế phẩm, hòa tan 10 ml nước đun sôi để nguội Lấy 0,05 ml dung dịch thu cho vào khay sứ trắng, thêm ,2 ml dung dịch chất Màu đỏ tía xuất vòng phút Cách pha dung dịch chất: Dung dịch đỏ methyl - xanh methylen: Trộn đồng thể tích dung dịch đỏ methyl ,1 % ethanoỉ 96 % dung dịch xanh methylen 0,05 % ethanol 96 % Dung dịch chất: Cân xác 237,0 mg N-acetylL-tyrosin ethyl ester cho vào bình định mức 100 ml, thêm ml ethanol 96 % (TT), lắc đến tan Thêm 20 ml dung dịch đệm phosphat pH 7,0 (chụẩn bị phần định lưọ-ng), thêm ml dung dịch đỏ methyl xanh methylen pha loãng với nước vừa đủ đên vạch B Lấy khoảng 30 mg chế phẩm hòa tan dung dịch acid hydrocloric 0,001 N (TT), pha loãng thành 100 mỉ với dung môi Phổ hấp thụ tử ngoại (Phụ lục 4.1) dung dịch thu khoảng bước sóng từ 220 đến 320 nm phải có CỊVC đại bước sóng khoảng 281 nm cực tiểu bước sóng khoảng 250 nm Mất khối lượng làm khô Không 5,0 % (Phụ lục 9.6) (0,100 g; 60 °C; chân không; h) Tro sulfat Không 2,5 % (Phụ lục 9.9; phưong pháp 2) Dùng 0,100 g chế phẩm Trypsin Không % (kl/kl) Dung dịch thử: Hòa tan 100 mg chế phẩm 10,0 ml «M-ớc Dung dịch đối chiếu: Dung dịch Trypsin nước có nồng độ 0,01 % Dung dịch đệm tris(hydroxymethyl)amỉnomethan p H 8,1 (0,08 M): Hòa tan 294 mg calci clorỉd (TT) 40 ml dung dịch tris (hydroxy methyl) amỉnomethan 0,20 M, điều chỉnh pH đến 8,1 dung dịch acỉd hydrocloric N (TT) pha loãng thành 100 ml với nước Dung dịch chất' Cân 98,5 mg p-toluensuìfonyl-Largỉnỉn methyl ester hydroclorỉd (TT) (loại dùng để định lượng trypsin), cho vào bình định mức dung tích 25 ml Thêm ml dung dịch đệm tris(hydroxy-methyl)aminomethan pH 8,1 lắc hòa tan chất Thêm 0,25 ml dung dịch đỏ methyl - xanh methylen (pha phần định tính) thêm nước vừa đủ đến vạch Cách tiến hành: Dùng micro pipet lấy 50 |Lil đung dịch thử dung dịch đối chiếu cho vào hai khay sứ trắng riêng biệt, thêm 0,2 m! dung dịch chất vào dung dịch Trong vòng phút, khay sứ chứa dung dịch thử màu đỏ tía tạo thành, khay sứ chứa dung dịch đối chiếu cho màu đỏ tía Hút xác 0,2 ml dung dịch thử cho vào cốc đo dày cm, thêm xác 3,0 ml dung dịch chất, trộn Đặt cốc đo vào máy quang phổ tử ngoại đo độ hấp thụ Đo độ hấp thụ sau 30 giây phút Lặp lại thí nghiệm độ pha loãng lần Giá trị tuyệt đối độ hấp thụ không quan trọng tốc độ suy giảm định độ hấp thụ Nếu tốc độ suy giảm độ hấp thụ không đạt định khoảng thời gian phút, phải làm lại thí nghiệm, cần sử dụng dung dịch thử có nồng độ thích họp Vẽ đường biểu diễn độ hấp thụ theo thời gian, lấy giá trị độ hấp thụ làm tung độ thời gian làm hoành độ Chọn đoạn tuyến tính vòng phút để xác định hoạt lực mẫu thử Một đơn vị Chymotrypsin hoạt tính làm thay đôi độ hấp thụ 0,0075 phút với điều kiện quy định phương pháp định lượng Tính hoạt lụrc (đơn v ị) C h y m o try p s in có mg chế phẩm theo công thức: Định lượng Dung dịch đệm phosphat p H 7,0 (0,067 M)\ Hòa tan 4,54 g kalỉ dỉhydrophosphat (TT) 500 ml nước (dung dịch A) Hòa tan 4,73 g dinatrỉ hydrophosphat khan (TT) 500 ml nước (dung dịch B) Trộn 38,9 ml dung dịch A với 61,1 ml dung dịch B Điều chỉnh tới pH 7,0 cách thêm giọt dung dịch B cần Dung dịch chất Hòa tan 23,7 mg N-acetyl-Ltyrosìn ethyl ester (TT) (loại thích họp để dùng định lượng chymotrypsiii) khoảng 50 ml dung dịch đệm phosphat pH 7,0 cách ỉàm ấm Để nguội, thêm dung dịch đệm phosphat pH 7,0 vừa đủ 100 ml Lưu ỷ: Có thể bảo quản đông lạnh dung dịch chất sử dụng sau rã đông, phải làm đông lạnh sau pha Dung dịch thừ Cân xác lượng chế phẩm thích họp (W) hòa tan dung dịch acỉd hydroclorỉc 0,0012 N để thu dung dịch có nồng độ từ 12 - 16 đon vị chymotrypsin ml Dùng dung dịch có nồng độ thấp hon cao hon cần cho trình địiìh lượng thay đổi độ hấp thụ khoảng từ 0,008 đến 0,012 30 giây Cách tiến hành: Định lượng máy quang phổ tử ngoại thích họp, có hệ thống điều nhiệt để trì nhiệt độ buồng chứa cốc đo 25 ± 0,1 ^C Xác định nhiệt độ cốc đo trước sau đo độ hấp thụ để đảm bảo nhiệt độ không thay đổi 0,5 °c Hủt xác 0,2 ml dung dịch acid hydrocloric 0,0012 N 3,0 ml dung dịch chất vào cốc đo dày cm Đặt cốc đo vào máy quang phổ tử ngoại điều chỉnh thiết bị để có độ hấp thụ 0,200 237 nm (Aj-A.JxD r x ,0 x W x ,2 Trong đó: A] độ hấp thụ thời điểm đầu khoảng biến thiên độ hấp thụ tuyến tính; A2 độ hấp thụ thời điểm cuối khoảng biến thiên độ hấp thụ tuyến tính; T khoảng thời gian lần đọc đầu lần đọc cuối (phút); D độ pha loãng dung dịch thử; w khối lưọTig mẫu thử (mg) Giói hạn nhiễm khuẩn Không có Pseudomonas aeruginosa, chủng Salmonella Staphyỉococcus aureus (Phụ lục 13.6) Bảo quản Trong bao bi kín, để nơi khô mát, tránh ánh sáng Loại thuốc Thuốc men thủy phân protein VIÊN NÉN CHYMOTRYPSIN Tabellae Chymotrypsini Là viên nén chứa Chymotrypsin Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận “Thuốc viên nén” (Phụ lục 1.20) yêu cầu sau đây: Hoạt lực Chymotrypsin, từ 90,0 % đến 120,0 % so với hoạt lực ghi nhãn Tính chất Viên nén màu trắng Định tính A Lấy lưọTig bột viên tương ứng với 4,2 mg chymotrypsin, hòa tan ml nước đun sôi để nguội, lọc Lấy 0,05 ml dịch lọc cho vào khay sứ trắng, thêm 0,2 ml dung dịch chất Màu đỏ tía xuất vòng phút Cách pha dung dịch chất: Dung dịch đỏ methyl - xanh methylen: Trộn đồng lượng dung dịch đỏ methyl 0,1 % ethanol (TT) dung dịch xanh methylen 0,05 % ethanol (TT) Dung dịch chất: Cân xác 237,0 mg N-acetylL-tyrosin ethyl ester cho vào binh định mức 100 ml, thêm ml ethanol (TT), lắc đến tan Thêm 20 ml dung dịch đệm phosphat pH 7,0 (chuẩn bị phần định lượng), thêm 10 ml dung dịch đỏ methyl - xanh methylen pha loãng với nước vừa đủ B Lấy lượng bột viên tương ứng với 30 mg chymotrysin hòa tan dung dịch acid hydrocloric 0,001 M, pha loãng thành 100 ml với dung môi, lọc Phổ hấp thụ tử ngoại (Phụ lục 4.1) dịch lọc thu khoảng bưó’c sóng từ 220 đến 320 nm phải có cực đại bước sóng 281 nm cực tiểu 250 nm Định lượng Dung dịch đệm phosphat p H 7,0: Hòa tan 4,54 g kali dihydrophosphat (TT) 500 ml nước (dung dịch A) Hòa tan 4,73 g dỉnatri hydrophosphat khan (TT) 500 ml nước (dung dịch B) Trộn 38,9 mỉ dung dịch A với 61,1 ml dung dịch B Điều chỉnh tới pH 7,0 cách thêm giọt dung dịch B cần Dung dịch chất Hòa tan 23,7 mg N-acetyl-Ltyrosin ethyl ester (loại thích hợp để dùng định lượng chymotrypsin) khoảng 50 m! dung dịch đệm phosphat pH 7,0 cách làm ấm Để nguội, thêm dung dịch đệm phosphat pH 7,0 vừa đủ 100 ml Lưu ý: Có thể bảo quản đông lạnh dung dịch chất sử dụng sau rã đông, phải làm đông lạnh sau pha Dung dịch thủ' Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên thích hợp hòa tan dung dịch acid hydrocloric 0,0012 M để thu dung dịch có nồng độ từ 12 đến 16 đơn vị chymotrypsin USP ml Dùng dung dịch có nồng độ thấp cao (nếu cần) để trình định lượng thay đổi độ hấp thụ khoảng từ 0,008 đến ,0 môi 30 giây Cách tiến hành Lưu ý: Xác định thích hợp chất kiểm tra điều chỉnh máy quang phổ tử ngoại cách tiến hành sử dụng chymotrypsin chuẩn thay mẫu thử Định lượng máy quang phổ tử ngoại thích hợp, có hệ thống điều nhiệt để tri nhiệt độ buồng chứa cốc đo 25 °c ± 0,1 °c Xác định nhiệt độ cốc đo trước sau đo độ hấp thụ để đảm bảo nhiệt độ không thay đổi 0,5 °c Hút xác 0,2 ml dung dịch acid hydrodorìc 0,0012 M 3,0 ml dung dịch chất vào cốc đo dày cm Đặt cốc đo vào máy quang phổ tử ngoại điều chỉnh thiết bị để có độ hấp thụ 0,200 237 nm Hút xác 0,2 ml dung dịch thử cho vào cốc đo dày cm, thêm xác 3,0 ml dung dịch chất Đặt cốc đo vào máy quang phổ tử ngoại (Chú ý: Thực thêm mẫu vào cốc đo theo thứ tự này, bắt đầu ghi thời gian phản ứng sau thêm dung dịch chất) Đo độ hấp thụ sau 30 giây phút Lặp lại thí nghiệm độ pha loãng lần Giá ừị tuyệt đối cùa độ hấp thụ quan trọng tốc độ suy giảm không đổi độ hấp thụ Nếu tốc độ suy giảm không đổi độ hấp thụ không đạt khoảng thời gian phút, phải làm lại thí nghiệm, cần, sử dụng dung dịch thử có nồng độ thích hợp Khi xác, định lại lần thứ hai dung dịch thử có độ pha loãng phải có tốc độ suy giảm cùa độ hấp thụ lần đầu Để xác định thay đổi độ hấp thụ trung bình môi phút, sử dụng giá trị năm đưÒTig biêu diễn suy giảm độ hấp thụ theo thời gian, đoạn có tốc độ suy giảm độ hấp thụ không đôi phút Một đoTi vị Chymotrypsin USP hoạt tính làm thay đổi độ hấp thụ 0,0075 phút với điều kiện quy định phương pháp định lượng Tính hàm lượng (%) Chym otrypsin viên so với hàm lượng ghi nhãn theo công thức; (A i - A ) X D X M X 100 T x ,0 x W x ,2 x 0 Trong đó: Ai độ hấp thụ thời điểm đầu khoảng biến thiên độ hấp thụ tuyến tính; A độ hấp thụ thời điểm cuối khoảng biên thiên độ hấp thụ tuyến tính; T khoảng thời gian lần đọc đầu lần đọc cuối (phút); D độ pha loãng dung dịch thử; w khối lượng bột viên mẫu thử (mg); M khối lượng trung binh viên (mg) Bảo quản Trong bao bi kín, để nơi khô mát, tránh ánh sáng Loại thuốc Men phân giải protein Hàm lượng thường dùng 4,2 mg (tương ứng với 21 microkatal hay 4200 đơn vị chymotrypsin USP) CIMETIDIN Cimetidỉnum CioHióNeS p.t.l: 252,3 Cimetidin 2-cyan -l-methyl-3-[2-(5-methylimidazol4-yl-methyíthio)ethyl]-guanidin, phải chứa từ 98,5 % đến 101,5 % CioHiôNôS, tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bọt frang gần trắng Tan ethanol 96 %, khó tan nước thực tế không tan methylen cỉorid Tan acid vô loãng Có dạng thù hình Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Nhóm I: A Nhóm II; B, c , D A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù họp với phổ hồng ngoại cimetidin chuẩn Nếu phổ chể phẩm có khác so với phổ cimetidin chuẩn hòa tan riêng biệt chế phẩm chuẩn 2-propanol (TT), bốc đến khô ghi lại phổ B Điểm chảy (Phụ lục 6.7) từ 139 °c đến 144 “G Nếu Gần thiết, hòa tan chế phẩm 2-propanol (TT), bốc đến khô xác định điểm chảy lại c Trên sắc ký đồ thu mục thử "Tạp chất liên quan", vết sắc ký đồ dung dịch thử ( ) giống vị trí, màu sắc kích thước với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (4) D Hòa tah mg chế phẩm hỗn hợp gồm ml ethanol (TT) ml dưng dịch acid cỉừic % ữong anhydrid acetic vừa pha Đun nóng ừong cách thủy khoảng từ 10 đến 15 phút xuất màu tím đỏ Độ màu sắc dung dịch Hòa tan 3,0 g chế phẩm 12 ml dung dịch acid hydrocỉoric M v pha loãng thành ml nước carbon dioxyđ (TT) Dung dịch thu phải (Phụ lục 9.2) màu không đậm màu mẫu V (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Tạp chất liên quan Tiến hành phương pháp sắc ký lóp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF254Dung môi khai triển (A): Amoniac đậm đặc - methanol ethylacetat {\5 : 20 : 65) Dimg môi khai ữiến (B): Amonỉac đậm đặc - methanol ethyl acetat (S : s : S4) Dung dịch thừ (1): Hòa tan 0,50 g chế phẩm methanol (TT) pha loãng thành 10 ml với dung môi Dung dịch thử (2): Pha loãng ml dung dịch thử (1) thành 10 ml methanol (TT) Dung dịch đối chiểu (1): Pha loãng ml dung dịch thử (1) thành 100 ml methanol (TT) Pha loãng rril dung dịch thành 100 ml methanol (TT) Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng ml dung dịch đối chiếu (1) thành 10 ml methanol (TT) Dung dịch đối chiếu (3): Pha loãng ml dung dịch đối chiếu (2) thành 10 ml methanol (TT) Dung dịch đối chiếu (4): Hòa tan 10 mg cimetidin chuẩn ml methanol (TT) Cách tiến hành: A Chấm riêng biệt lên mỏng |J,1 dung dịch Để mỏng bình sắc ký bão hòa dung môi khai triển (A) 15 phút, triển khai mỏng dung môi dung mồí 15 cm Lấy mỏng làm khô luồng không khí lạnh Đặt mỏng bình sắc ký bão hòa iod vết xuất rõ quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Trên sắc ký đồ dung dịch thử (1), vết phụ vết màu đậm vết dung dịch đối chiếu (1) (0,2 %) Chỉ phép có hai vết có màu đậm hon vết dung dịch đối chiếu (2) (0,1 %) Phép thử chi có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3) cho vết nhìn thấy rõ B Chấm riêng biệt lên mỏng |U,1 dung dịch Triển khai mỏng dung môi khai triển (B) đến dung môi 15 cm Lấy mỏng làm khô luồng không khí lạnh Đặt mỏng bình sắc ký bão hòa iod vết xuất rõ quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Trên sắc ký đồ dung dịch thử ( 1), vết phụ vết màu đậm vết dung dịch đối chiếu ( 1) (0 ,2 %) có hai vết có màu đậm vết dung địch đối chiểu (2) (0,1%) Phép thử có giá trị ừên sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3) cho vết nhìn thấy rõ Kim loại nặng Không 20 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Lấy 1,0 g chế phẩm tiến hành theo phương pháp Dùng ml dung dịch chì mẫu 10 phần triệu (TT) để chuẩn bị mẫu đối chiếu Mất khối lượng ỉàm khô Không 0,5 % (Phụ lục 9.6) (l,000g; 100"Cđen 105“C) đốt mạnh, có màu vàng xuất hiện, để nguội trở thành màu trắng, cho thêm 10 ml nước \à ml dung dịch acid hydrocloric 10 % (TT) vào cắn, lắc kỹ lọc Thêm đến giọt dung dịch kali ferocyanid 10 % (TT) vào dịch lọc, xuất tủa trắng Calci, tnagnesi chất vô lạ Chuyển g thuốc mỡ vào chén nung, đun nhẹ cho chảy đốt nóng từ từ, tăng dần nhiệt độ toàn khối thuốc chấy thành than Tiếp tục nung cắn có màu vàng đồng Thêm ml dung dịch acid hydrocloric 10 % (TT) vào cắn Đun hỗn họp ừên cách thủy -1 phút, dung dịch phải không màu, Lọc dung dịch thu Pha loãng dịch lọc đến 10 ml với nước thêm dung dịch amoniac 10 % (TT) đến có tủa tạo thành lại tan Thêm tiếp ml dung dịch amoniac oxalat 3,5 % (TT) ml dung dịch dìnaừ-i hydrophosphat 12 % (TT), dung dịch thu phải không thay đổi đục nhẹ vòng phút Định lượng Cân xác lưọfng thuốc mỡ tương ứng với khoảng 75 mg kẽm oxyd, cho vào chén nung, đun nhẹ đến chảy lỏng đốt nóng từ từ, tăng dần nhiệt độ đến toàn khối cháy thành than Tiếp tục nung đến thu cắn có màu vàng đồng đều, để nguội Hòa cắn 10 ml dung dịch acid sulfuric M (TT), đun nóng cần để hòa tan hết cắn vào dung dịch ‘Chuyển dung dịch vào bình nón Rửa chén nung với lượng nhỏ nước gộp nước rửa vào bình nón ừên đến thu khoảng 50 ml dung dịch bình Điều chỉnh pH dung dịch từ đến cách thêm giọt dung dịch amoniac 10 % (TT) Thêm 10 ml đệm amoniac p H 10,0 m\ d m g dịch đen eriocrom T (TT) làm thị chuẩn độ dung dịch Triỉon B 0,05 M (CĐ) ml dung dịch Triỉon B 0,05 M (CĐ) tương ứng với 4,069 mg ZnO Bảo quản Đựng lọ kín, để chỗ mát Định tính Dung dịch S: Hòa tan 2,5 g chế phẩm ữong nước carbon dioxyd (TT), tìĩêm nước vừa đủ 50 ml Dung dịch s phải- cho phản ứng định tính kẽm sulfat (Phụ lục 8.1) Độ màu sắc dung dịch Dung dịch s phải (Phụ lục 9.2) không màu (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) P ? của' dung dịch s phải * pH từ 4,4 đên 5,6 (Phụ lục 6.2) Clorid Không 0,03 % (Phụ lục 9.4.5) Lấy 3,3 ml dung dịch S, pha loãng với nước thành 15 ml để thử Sắt Không 0,01 % (Phụ lục 9.4.13) Lấy ml đung dịch s pha loãng với nước thành 10 ml đê thử Dùng 0,5 ml dung dịch acid mercaptoacetic (TT) phép thử Định lượng Hòa tan 0,200 g chế phẩm ỪOĨIẸ ml acid acetic loãng (TJ) Tiến hành chuẩn độ bang dung dịch naừi edetat 0,1 M (CĐ) theo phương pháp định lượng kẽm chuẩn độ complexon (Phụ lục 10.5) ml dung dịch dịch natri edetat 0,1 M (CĐ) tương đương với 28,75 nig ZnSƠ H 2O Bảo quản Trong lọ kín, để chỗ mát THUỐC NHỎ MẮT KẼM SULFAT Collyrium Zinci sulfatis Là dung dịch vô khuẩn kẽm Sulfat nước Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu frong chuyên luận Thuốc nhỏ mắt” (Phụ lục 1.14) yêu cầu sau đây: Hàm lượng kẽm S u lfa t, ZnS0 H2 , từ 95,0 % đến 105,0 % so với lượng ghi nhãn Hàm lượng thường dùng % Tính chất Dung dịch ừong suốt, không màu KẼM SULFAT Zinci sulfas XnSO ị.lRiO Rất tan nước, dễ tan glycerin, thực tế không tan ethanol 96 % p.t.l: 287,5 Định tính Dung dịch chế phẩm cho phản ứng ion kẽm Sulfat (Phụ lục 8.1) Kẽm Sulfat phải chứa từ 99,0 % đến 104,0 % ZnSOi.THjO P“ Từ 4,5 đến 5,5 (Phụ lục 6.2) Tính chất Bột kết tinh trắng tinh thể suốt không màu, không mùi, dễ lên hoa để không khí khô Định lượng Lẩy xác thể tích thuốc nhỏ mắt chứa 25 mg kẽm Sulfat, thêm 50 ml nước 10 ml đệm amoniac p H 10,0 (TI) Chuẩn độ dung dịch Trilon B 0,01 M (CĐ), dùng hỗn hợp đen eriocrom T (TT) \ầm thị ml dung dịch Trilon B 0,01 M (CĐ) tưoTig đương với 2,875 mg ZnS0 H Bảo quản Trong bao bì kín, nơi khô mát, tránh ánh sáng Hàm lượng thường dùng 0,5 % ’ KETOCONAZOL Ketoconazolum % H 3C đồng phân đối quang C26H28CI2N 4O4 p.t.1:531,4 Ketoconazol l-acetyl-4-[4-[[(2iỉ^,4^i?)-2-(2,4-diclorophenyl)-2-( 1H-imiđazol-1-ylmethyl)-! ,3-dioxơlan4-yl]methoxy]phenyl] piperazin, phải chửa từ 99,0 % đến 101,0 % C 25H 28CI2N 4O 4, tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bột trắng hay gần trắng Thực tế không tan trọng nước, dễ tan dicloromethan, tan methanol, tan ethanol 96 % Dung dịch đối chiểu (2): Hòa tan 30 rag ketoconazol chuẩn 30 mg econazol nitrat chuẩn ữong pha động pha loãng thành ml với dung môi Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng |J,1 dung địch Triển khai sắc ký đến dung môi khoảng 15 cm Làm khô mỏng luồng khí ấm 15 phút để ưong bình bão hòa iod đến vết Quan sát dựới ánh sáng ban ngày, v ế t ừên sắc ký đồ dung dịch thử phải phù họp vị trí, màu sắc kích thước với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu ( 1) Phép thử có giá ừị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu ( ) cho vết tách rõ rệt D Lấy khoảng 30 mg chế phẩm vào chén nung sứ, thêm 0,3 g natri carhonat khan (TT) Đốt lửa ừong 10 phút Để nguội, hỏa taii cắn ml dung dịch acid nitric loãng (TT) lọc Thêm vảo ml địch lọc ml nước Dung dịch thu phải cho phản ứng A ion clorid (Phụ lục 1) Độ màu sắc dung dịch Dung dịch S: Hòa tan 1,0 g chế phẩm dicỉoromethan (TT) pha loãiig thành 10 tnl vởi dung môi Dung dịch s phải (Phụ lục 9.2) không đậm màu mẫu VN (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Góc quay cực Góc quay cực dung dịch s từ -0,10° đến +0,10° (Phụ lục 6.4) Tạp chất liên quan Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Pha động A: Acetonitril (TT) Pha động B: Dung dịch tetrabutyl amoni hydrosulfat Định tính 0,34% Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Dung dịch thử: Hòa tan 0,100 g chế phẩm Nhóm I: A methanol pha loãng thành 10,0 ml vối dung Nhóm II: B, c , D môi A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải Dung dịch đổi chiểu: Pha loãng 5,0 ml dung địch thử phù họp với phổ hổng ngoại ketoconazol chuẩn thành Ị0G,0 mỉ methanol (TT) Pha loãiỊg 1,0 ml B Điểm chảy từ 148 °c đến 152 °G (Phụ lục 6.7) đung dich thu thành ,0 ml c Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) (TT) ' Bản mong: Octadecylsiỉyl silica gel Dung môi khai triển (pha động): Dung dịch amoni Dung dịch phân giải: Hòa tan 2,5 mg ketoconazol chuẩn 2,5 mg loperamid hydroelorid chuẩn acetat 15 % - đioxan - ethanol (20 : 40 : 40) Dung dịch amoni acetat 15 %: Hòa tan 150 g amonì methanol (T ị) pha loãng thành 50,0 ml với acetat (TT) thêm ml acid acetic băng dung môi (77), thêm RM-ỞCvừa đủ 1000 ml Điều kiện sắc kỷ: Dung địch /tó ; Hộa tạn 30 mg chế phẩm pha Cột thép không gỉ (10 cm X 4,6 ram) đưỢc nhồi pha tĩnh c (3 |Lim) động thêm pha động vừa đủ ml Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 30 mg ketoconazol Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 220 nm chuẩn pha động pha loãng thành ml với Tốc độ dòng: ml/min Thể tích tiêm: 10 Ịil dung môi Cách tiến hành: Tiến hành săc ký theo chưong trình dung môi sau: Thời gian (min) ^ 10 10-^ 15 Pha động A (%tứtt) 50 Pha động B (% tt/tt) 95^50 50 50 Gradient tuyén tính Đăng dòng Cân cột acetonitril (TT) 30 phút sau băng hỗn họp pha động A - pha động B (5 : 95) phút Điều chỉnh độ nhạy thống sắc ký cho chiều cao pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu 50 % thang đo Tiêm dung dịch phân giải Với điều kiện sắc ký trên, thời gian lưu ketoconazol khoảng phút loperamid hydroclorid khoảng phút Phép thử có giá trị độ phân giải pic tương ứng với ketoconazol loperamid hydroclorid 15 Nếu cần, điều chỉnh nồng độ cuối acetonitril pha động chưong trình thời gian gradient dung môi tuyến tính Tiêm methanol ỢT) làm mẫu trắng, dung dịch đối chiếu dung dịch thử Trên sắc ký đồ dung dịch thử, tổng diện tích pic, trừ pic chính, không lớn diện tích pic frên sắc ký đo dung dịch đối chiếu (0,5 %) Bỏ qua pic mẫu trắng pic có diện tích nhỏ 0,1 lẩn diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Kim loai Không 20 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Lấy 1,0 g chế phẩm, tiến hành theo phương pháp Dùng ml dunệ dịch chì mẫu 10 phần triệu (TT) để chuẩn bị mâu đôi chiêu Mất khổí lưọiig làm khô Không 0,5 % (Phụ lục 9.6) ( 1,000 g, 100 ° c đen 105 °C) KEM KETOCONAZOL Cremoris Ketoconazoli Là thuốc kem có chứa ketoconazol Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chung chuyên luận “Thuốc mềm dùng ứên da niêm mạc” (Phụ lục 1.12) yêu cầu sau đây: Hàm lưựng ketoconazol, C26H28CI2N4O4, lừ 90,0 % đến 1 ,0 % so với lượng ghi frên nhãn Tính chất Kem màu trắng ngà, đồng Định tính A Phưong pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bàn mỏng' Silica gel GF254 Dung môi khai triển: n-Hexan - ethyl acetat methanol - nước - acid acetic (42 : 40 : 15 : :1) Dung dịch thừ Lắc lượng kem tương ứng với khoảng 50 mg ketoconazol 50 ml cloroform (TT) lọc Dung dịch đối chiểu: Dung dịch ketoconazol chuẩn 0,1 % cloroform (TT) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt 10 |il dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm Lấy mỏng để khô nhiệt độ phòng Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm v ế t sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng vị trí màu sắc với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu B Trong phần Định lượng, ừên sắc ký đồ dung dịch thử pic phải có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu pic ketoconazol sắc ký đồ dung dịch chuẩn Địiih lượng Tiến hành phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Tro Sulfat Pha động' Methanol - dung dịch amoni acetat % Không 0,1 % (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) (90 : 10) Thay đổi tỷ lệ dung môi cần Dùng 1,0 g chế phẩm Dung dịch chuẩn: Cân xác khoảng 30 mg Định lượng ketoconazol chuẩn, hòa tan methanol (TT) Hòa tan 0,200 g chế phẩm 70 ml hỗn hợỊ) acid pha loãng thành 100,0 ml với dung môi Lấy acetic khan - methyl ethyl keton (1 : 7) Chuẩn độ 5.0 ml dung dịch pha loãng với pha động thành dung dịch acid percloric 0,1 N (CĐ) Xác định 50.0 ml , , điểm kết thúc phương pháp chuẩn độ đo điện Dung dịch thừ Cân xác lượng chế phẩm (Phụ lục 10.2) tương ứng với khoảng 30 mg ketoconazol, thêm ml dung dịch acidperclorìc 0,1 N (CĐ) tương đương 40 ml methanol (TT), đặt cách thủy khuấy cho với 26,57 mg C26H 28CI2N 4O tan, để lạnh nước đá 30 phút Gạn lọc Bảo quản qua giấy lọc thấm ướt methanol (TT) Tiếp Tránh ánh sáng tục chiết lần nữa, lần với ml Loai thuốc methanol (TT) Rửa cốc giấy lọc methanol Chồng nấm (TI) Tập ừung dịch lọc dịch rửa, thêm methanol (TT) vừa đủ 100,0 ml Lấy 5,0 ml dịch lọc thu Chế phẩm pha loãng thành 50,0 ml với pha động Viên nén, kem bôi da Điều kiện sắc k ỷ : Cột thép không gỉ (25 cm X 4,6 mm) nhồi pha tĩnh c (10 |xm) (cột Lichrosorb RPl thích hợp) Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 244 nm Tốc độ dòng: ml/min Thể tích tiêm: 20|xl Cách tiến hành' Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lưọTĩg (%) ketoconazol, C 26H 28CI2N 4O4, so với lượng ghi nhãn dựa vào diện tích pic thu từ sắc ký đồ dung dịch thử, dung dịch chuẩn hàm lượng C26H 28CI2N 4O ketoconazol chuẩn Bảo quản Trong bao bì kín, nơi khô mát, tránh ánh sáng Loai thuốc Chổng nấm Hàm lượng thường dùng % VIÊN NÉN KETOCONAZOL Tabellae Ketoconazoli Là viên nén có chứa ketoconazol Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu ừong chuyên luận “Thuốc viên nén” (Phụ lục 1.20) yêu cầu sau đ â y : Hàm lượng ketoconazoi, C26H 28CI2N 4O 4, từ 95,0 % đến 105,0 % so với lưọng ghi nhãn Tính chất Viên nén màu trắng Định tính A Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) B ả n m ỏng: Silica g e l GF254 Dung môi khai triển: n-Hexan - ethyl acetat methanol - nước - acid acetic (42 : 40 ; 15 : : 1) Dung dịch thừ Lắc lượng bột viên tương ứng với khoảng 50 mg ketoconazol với 50 ml cloroform (TT) lọc Dung dịch đối chỉếu' Dung dịch ketoconazol chuẩn 0,1 % cloroform (TT) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt 10 |xl dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm Lấy mỏng để khô nhiệt độ phòng Quan sát ánh sán^ tử ngoại bước sóng 254 nm v ế t sắc ký đồ dung địch thử phải tươtiệ ứng vị trí màu sắc với vết ừên sắc ký đỗ dung dịch đốỉ chiếu B Trong phần Định lượng, pic ừên sắc ký đồ dung dịch thử phải có thời gian lưu tưcmg ứnệ với thời gian lưu pic ketoconazol sắc ký đo dung dịch chuẩn Độ hòa tan (Phụ lục 11.4) Thiết bị: Kiểu cánh khuấy Môi tt-ường hòa tan: 900 ml dm g dịch acid hydrocloric OJMCTT)Tốc độ quay: 50 r/min độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dịch thu bước sóng 270 nm, dùng dung dịch acid hydrocloric 0,1 M (TI) làm mẫu trắng So sánh với dung dịch chuẩn ketoconazol có nồng độ tựoTig đương pha môi trường hòa tan Tính hàm lượng ketoconazol, C26H 2gC!2N 4 , hòa tan dựa vào độ hấp thụ dung dịch thử, dung dịch chuẩn hàm lượng ketoconazol chuẩn Yêu cầu: Không 80 % ketoconazol so với lượng ghi nhãn hòa tan ữong 30 phút Định iượn^ Tiến hành phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Methanol - dung dịch đệm amoni acetat 1,0% (90 ; 10) Thay đổi tỷ lệ dung môi cần D m g dịch chuẩn: Hòa tan 30 mg ketoconazol chuẩn ừong 40 ml methanol (TT), lắc cho tan, thêm methanol (TT) vừa đủ 50,0 ml Lấy 5,0 ml dung dịch pha loãng ứiành 100,0 ml với pha động Dung dịch thử: Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên nghiền mịn tưonng ứng với khoảng 30 mg ketoconazol cho vào bình định mức 50 ml Thêm 40 ml methanol (TT), lắc siêu âm 10 phút, thêm methanol (TT) tới định mức, lắc Lọc qua giấy lọc, loại bỏ 20 ml dịch lọc đầu Lấy xác 5,0 ml dịch lọc pha loãng thành 100,0 ml với pha động Điều kiện sắc kỷ : Cột thép không gỉ (25 cm X 4,6 mm) nhồi pha tĩnh c (10 (im) (Lichrosob RP18 thích hợp) Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 244 nm Tốc độ dòng: 1,0 ml/min Thể tích tiêm: 20 ịiil Cách tiến hành: Kiểm tra khả thích họp cùa hệ thống sắc ký; Tiến hành sắc ký dung dịch chuẩn, phép thử có giá trị độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic lần tiêm lặp lại không lớn hon 2,0 % Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn dung dịch thử Típh hàm lưọfng ketoconazol, C 26H 28CI2N 4Ọ 4, có viên dựa vào diện tích pic sắc ký đồ dung dịch thử, dung dịch chuẩn hàm lượng C26H 28CI2N 4O ketoconazol chuẩn Bảo quản Trong bao bì kín, nơi khô mát, tránh ánh sáng Loại thuốc Chống nấm Hàm lượng thường dùng 0 mg KEM KETOCONAZOL VÀ NEOMYCIN Cremoris Ketoconazoli eí Neomycini Là kem bôi da có chứa ketoconazol neomycin sulfat Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận "Thuốc mềm dùng da niêm mạc" (Phụ lục 12 ) yêu cầu sau: Hàm lượng ketoconazol, C26H 28CI2N 4O 4, từ 90,0 % đến 110,0 %, so với lượng ghi nhãn Hàm lượng neomycin từ 90,0 % đến 120,0 % so với hoạt lực ghi nhãn Tính chất Kem màu trắng đục, đồng Định tính A Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF254 dày 0,25 mm Dung môi khai ừỉển: n-Hexan - ethyl acetat - methanol nước - acid acetic băng (42 : 40 : 15 :2 : 1) Dung dịch thừ Chuyển lưọng chế phẩm tương ứng với 50 mg ketoconazol vào bình gạn 50 ml cloroform (TT) lắc kỹ Thêm ml nước, lắc kỹ để phân lớp hoàn toàn Lấy lớp cloroform lọc Dung dịch đổi chiểu: Dung dịch ketoconazol chuẩn có nồng độ mg/ml clorofortn (TT) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 Ịxl dung dịch Sau triển khai sắc ký, để mỏng khô không khí quan sát mỏng ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm v ế t sắc ký đồ dung dịch thử phải phù hợp với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu vị trí màu sắc B Trong phần Định lượng ketoconazol, pic sắc ký đồ dung dịch thử phải có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dịch chuẩn c PhưoTĩg pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel G dày 0,25 mm Dung môi khai triển' Methanol - amoniac - doroform (6 :4 :2 ) Dung dịch thừ Chuyển lượng chế phẩm tương ứng với 7000 IU neomycin vào bình gạn 10 ml cloroform (TT) thêm ml nước, lắc kỹ để phân lớp hoàn toàn Lấy lớp nước lọc Dung dịch đổi chiểu: Dung dịch neomycin Sulfat chuan 0,2 % Cách tien hành: Cham riêng biệt lên mỏng 10 (J.1 dung dịch Sau triển khai sắc ký, để mỏng khô không khí phát vết cách đặt mỏng bình kín bão hòa iod đến xuất vết phun dung dịch nìnhydrỉn % n-butanol sấy 105 °c phút, v ết sắc ký đồ dung dịch thử phải phù hợp với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu vị trí màu sắc Định lượng Định lượng keioconazol PhưoTig pháp sắc ký ỉỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Methanol - dung dịch amoni acetat % (9:1) Dưng dịch chuẩm Hòa tan lượng ketoconazol chuẩn pha động để thu đung dịch có nồng độ khoảng 30 |j,g/ml Dung dịch thừ Cân xác lượng chế phẩm tương ứng với 15 mg ketoconazol vào cốc có mỏ Thêm khoảng 30 ml pha động, làm nóng cách thủy 60 °c siêu âm khoảng phút Lặp lại trình hòa tan thêm lần Để nguội chuyển hỗn hợp vào bình định mức dung tích 50,0 ml, tráng rửa cốc pha động gộp dịch rửa vào bình định mức trên, thêm pha động đến định mức, trộn Làm lạnh nước đá khoảng 15 phút, lọc bỏ dịch lọc đầu, để dịch lọc nhiệt độ phòng Hút xác 5,0 ml dịch lọc thêm pha động vừa đủ 50,0 ml, trộn Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm X 4,6 mm) nhồi pha tĩnh c (10 Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 244 nm Tốc độ dòng: 1,0 ml/min Thể tích tiêm: 20 fxl Cách tiến hành Kiểm tra khả thích hợp hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký dung dịch chuẩn Phép thử có giá trị độ lệch chuẩn tương đổi diện tích pic ketoconazol lần tiêm liên tiếp nhỏ ,0 % Tiến hành sắc ký dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng ketoccíitei-ol C26H28CI2N 4O4, có đơn vị chế phẩm dựa vào diện tích pic thu từ sắc ký đồ dung dịch thử, dung dịch chuẩn hàm lượng C26H 28CI2N 4O ketoconazol chuẩn Định lượng neomycin Sulfat Dung dịch thủ" Chuyển lượng chế phẩm tương ứng với 16 000 IU neomycin vào bình gạn 50 ml cloroform (TT), lắc kỹ chiết lần, lần với 20 ml dung dịch đệm số Gộp dịch chiết thổi khí nitơ để loại cloroform hòa tan chuyển vào bình định mức dung tích 100 ml, thêm dung dịch đệm số đến định mức Lọc qua giấy lọc bỏ dịch lọc đầu Tiếp tỊic pha loãng dịch lọc dung dịch đệm số để thu dung dịch thử có nồng độ tương đương với nồng độ dung dịch chuấn Tiến hành định lượng theo phương pháp Xác định hoạt lực thuốc kháng sinh phương pháp thử vi sinh vật (Phụ lục 13.9) Bảo quản Trong chai nút kín Để nơi khô mát, tránh ánh sáng Loại thuốc Chống nấm Hàm lượng thường dùng Ketoconazol ,0 % Neomycin Sulfat 3.500 lU/g (0,5 %) KETOPROFEN Ketoprofenum H CHs c Điểm chảy: Từ 94 ° c đến 97 °c (Phụ lục 6.7) D Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bàn mỏng: Silica gel GF254Dung môi khai triển: Acid acetic băng - methylen clorid - aceton (1 : 49 : 50) Dung dịch thừ: Hòa tan 10 mg chế phẩm 10 ml aceton (TT) Dung dịch đổi chiểu (1): Hòa tan 10 mg ketoproíen chuẩn 10 ml aceton (TT) Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 10 mg indometacin chuẩn 10 ml aceton (TT) Thêm vào ml dung dịch ml dung dịch đối chiếu ( 1) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 |il dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm, đê khô mỏng không khí Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm v ết sắc ký đồ dun§ dịch thử phải tứơng ứng với vết sắc ký đô dung dịch đôi chiếu (1) vị trí kích thước Phéj3 thử có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu ( ) cho vết tách riêng biệt Độ màu sắc dung dịch Hòa tan 1,0 g chế phẩm aceton (TT) pha loãng thành 10 ml với dung môi Dung dịch chê phẩm phải (Phụ lục 9.2) màu đậm màu mẫu Ve (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Tạp chất liên quan Tiến hành phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Dung dịch đệm phosphat p H 3,5: Hòa tan 68,0 g kali dihydro phosphat (TT) nước pha loãng thành đồng phân đối quang 1000,0 ml nước Điều chỉnh pH 3,5 acid C 16H 14O p.t.l: 254,3 orthophosphoric (TT) Pha động: Dung dịch đệm p H 5,5 vừa pha Ketoprofen acid (2ŨS)-2-(3-benzoylphenyl)propanoic, acetonitriỉ- nước (2 : 43 ; 55) phải chứa từ 99,0 % đến 100,5 % C 16H 14O 3, tính theo Dung dịch thử: Hòa tan 20,0 mg chế phẩm pha chế phẩm làm khô động pha loãng thành ,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (1): Pha loãng 1,0 ml dung dịch Tính chất Bột kết tinh trắng hay gần trắng, thực tế không thử thành 50,0 ml pha động Pha loãng 1,0 ml tan nước, tan aceton, ethanol 96 % dung dịch thành 10,0 ml pha động Dung dịch đổi chiểu (2): Hòã tan 10,0 mg tạp chất methylen clorid chuẩn A ketoproíen pha động pha loãng Định tính thành 100,0 ml với dung môi Pha loãng 1,0 ml Có thể chọn hai nhóm định tính sau : dung dịch thành 50,0 ml pha động Nhóm I: A Dung dịch đổi chiếu (3): Hòa tan 10,0 mg tạp chất Nhóm II: B, c, D chuẩn c ketoprofen pha động pha loãng A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải thành 100,0 ml dung môi Pha loãng 1,0 ml phù hợp với phổ hồng ngoại ketoprofen chuẩn dung dịch thành 50,0 ml pha động B Hòa tan 50,0 mg chế phẩm ethanol 96 % Dung dịch phân giải: Pha loãng 1,0 ml dung dịch thử (TT) pha loãng thành 100,0 ml với dung môi thành 100,0 ml pha động Thêm vào ml dung Pha loãng 1,0 ml dung dịch thu thành 50,0 ml dịch ml dung dịch đối chiếu (2 ) ethanol 96 %(TT) Phổ hấp thụ tử ngoại (Phụ lục Các dung dịch dùng sau chuấn bị 4.1) dung dịch khoảng từ 230 nm đếnĐiều kiện sắc ký: 350 nm cho cực đại hấp thụ 255 nm Độ hấp thụ Cột thép không gỉ (0,15 m X 4,6 mm) nhồi riêng bước sóng cực đại từ 615 đến 680 octadecylsilyl silica gel hình cầu dùng cho sắc ký (5 |am) có diện tích bề mặt riêng 350 m^/g kích thước lỗ xốp 10 nm Detector quang phổ tử ngoại đặt bươc sóng 233 nm Tốc độ dòng: ml/min Thể tích tiêm: 20 |il Cách tiến hành: Tiêm dung dịch phân giải, pic rửa giải theo trình tự: ketoprofen tạp chất A Điều chỉnh độ nhạy detector cho chiều cao pic sắc đồ không 50 % thang đo Phép thử chi có giá trị độ phân giải pic ketoprofen pic tạp chất A 7,0 Tiêm dung dịch đối chiếu dung dịch thử Tiến hành chạy sắc ký dung dịch thử với khoảng thời gian gấp lần thời gian lưu pic ketoprofen Giới hạn: Trên sắc ký đồ dung dịch thử: Diện tích pic tương ứng với pic tạp chất A pic tạp chất c không lón diện tích pic thu frên sắc ký đồ đung dịch đối chiếu (2) dung dịch đối chiếu (3) (0,2 %) Diện tích pic nào, pic chính, pic tạp chất A tạp chất c , không lón diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu ( ) ( ,2 %) ^ ^ _ Tổng diện tích tất pic trừ pic hai pic tạp chất A c không lớn lần diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) (0,4 %) Bỏ qua pic có diện tích nhỏ 0,1 lần diện tích pic ừên sắc ký đồ dung dịch đối chiếu ( 1) Ghi chú: Tạp chất A: l-(3-benzoylphenyl)ethanon Tạịí chất C: Acid 3-[(lÄ^-l-carboxyethyl]benzoic Kim loại nặng Không 10 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Lấy 2,0 g chế phẩm tiến hành thử tìieo phương pháp Dùng 2,0 ml dung dịch chì mẫu 10 phần triệu (TT) để chuẩn bị dung dịch đối chiếu Mất khối lượng làm khô Không qua 0,5 % (Phụ lục 9.6) ( ,000 g; 60 °C; áp suất không 670 Pa) Tro Sulfat Không 0,1 % (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm Định lượng Hoa tan 0,200 g chế phẩm 25 ml eth a n o l 96 % (TT), thêm 25 ml nước Chuẩn độ d m ệ dịch natrì hydroxyd 0,1 M (CĐ) Xác định điểm kêt thúc phương pháp chuẩn độ đo điện (Phụ lục 10.2) ml dung dịch natri hyảroxyả 0,1 M (CĐ) tưong đương với 25,43 mg CiôHhOs- Bảo quản Đựng đồ bao gói kín, tránh ánh sáng Loai thuốc Chống viêm, giảm đau Chế phẩm Nang, gel NANG KETOPROFEN Capsulae Ketoprofeni Là nang cứng chứa ketoprofen Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận “Thuốc nang” (Phụ lục 1.13) yêu cầu sau đây: Hàm lượng ketoprofen, C 16H 14O3, từ 92,5 % đến 107,5 % so với lượng ghi nhãn Tính chất Là nang cứng, mặt nang nhẵn bóng, không méo mó, bột thuốc bên ừong màu ưắng đồng Định tính Chiết lượng bột thuốc nang nghiền mịn tương ứng với 0,5 g ketoprofen với 50 ml cloroform (TT) phút, lọc bốc dịch lọc ừên cách thủy thu cắn kích thích tạo tinh thể cách cọ liên tục thành đồ đựng đũa thủy tinh Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) cắn thu phải phù họp với phổ hồng ngoại đối chiếu ketoprofen Độ hòa tan (Phụ lục 11.4) Thiểt bị: Kiểu cánh khuấy Tốc độ quay: 50 r/min Thời gian: 45 Mồi trường hòa tan: 900 tnl dung dịch đệm phosphat pH7,5 Cách pha dung dịch đệm phosphat pH 7,5; Hòa tan 1,46 g kali dihydrophosphat (TT) 20,06 g dinatri hydrophosphat (TT) nước vừa đủ 1000 ml, điều chỉnh tới pH 7,5 acidphosphoric (TT) (nếu cần) Cách tiến hành: Lấy phần dung dịch môi trường hòa tan chế phẩm, lọc, bỏ dịch lọc đầu Pha loãng dịch lọc thu với môi trường hòa tan để thu dung dịch có nồng độ ketoprofen khoảng 0,001 % Đo độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dịch bước sóng cực đại 260 nm, dùng môi trường hòa tan làm mẫu trắng Tính lưọng ketoprofen, C 16H 14O 3, hòa tan từ nang theo A (1 %, cm), lấy 662 giá ứị A (1 %, cm) cực đại hấp thụ 260 nm Yêu cảu: Không 70 % lượng ketoprofen, C 16H 14O3, so với lượng ghi nhãn hòa tan 45 phút Định lượng Cân 20 nang, tính khối lượng trung bình bột thuốc nang, trộn nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột thuốc tương ứng với khoảng 50 mg ketoproíen vào bình định mức 500 ml, thêm 300 ml methanol (TT), lắc khoảng 10 phút thêm methanol 75 % đến định mửc Để yên, lấy xác 5,0 ml chất lỏng pha loãng thành 100 ml methanol 75 % Đo độ hấp thụ (Phụ lục 4,1) dung dịch thu cực đại 258 nm, dùng m eth an o l 75 % mẫu trắng Tính hàm lượng ketoprofen, C 16H 14O 3, nang theo A (1 %, cm) Lấy 662 giá trị A ó “/ 0» ĩ cm) cực đại 258 nm Bảo quản Trong bao bì kín Loại thuốc Thuốc kháng viêm, giảm đau Hàm lượng thường dùng 40 mg, 50 mg LACTOSE Lactosum HOCH2 H2O C,2H220n.H20 p t.1:360,3 Lactose 0-P-D-galactopyranosyl-(ì 4)-a-D-ẹlucopyranose monohydrạt No bị thay đổi ve tính chất vật lý chứa tỷ lệ khác lactose vô định hỉnh Tính chất Bột kết tinh trắng gần trắng Dễ tan tan chậm nước, thực tế không tan ethanol 96 % Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Nhóm I: B, c, D, Nhóm II: A, D A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại lactose chuẩn B Phưong pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel G Dung môi khai triển: Nước - methanol - acid acetic khan - ethylen clorìd (10 : 15 : 25 ; 50) (cần đong xác thừa lượng nhỏ nước gây đục) Dung dịch thử: Hòa tan 10 mg chế phẩm hỗn hợp nước - methanol (2 : 3) pha loãng thành 20 ml với dung môi Dung dịch đổi chiếu (1): Hòa tan 10 mg lactose chuẩn hỗn hợp nước - methanol (2 : 3) pha loãng thành ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 10 mg chất chuẩn sau đây: fructose, glucose, lactose sucrose hỗn hợp nước - methanol (2 : 3) pha loãng thảnh ml với dung môi Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng |0.1 dung dịch sấy khô điểm chấm đường xuất phát Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm Sấy khô mỏng luồng khí ấm Thay pha động mới, chạy nhắc lại mỏng ngay, sấy mỏng luồng khí ấm phun lên mỏng dung dịch có chứa 0,5 g thymol (TT) hỗn hợp gồm ml acid sulfuric (FT) 95 ml ethanol 96 % (TT) Sấy mỏng 130 "G frong 10 phút, vết sắc ký đồ dung dịch thử phải giống vị trí, màu sắc kích thước với vết ừong sắc ký đồ dung dịch đổi chiếu (1) Phép thử có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu ( ) cho vết tách rõ ràng c Hòa tan 0,25 g chế phẩm ml nước Thêm ml amoniac (TT) đun nóng nồi cách thủy 80 °c ừong 10 phút, màu đỏ xuất D Phép thử phải đáp ứng yêu cầu giới hạn nước (xem mục Nước) Độ màu sắc dung dịch Hòa tan 1,0 g chế phẩm ntiức cách đun nóng đến 50 °c pha loãng thành 10 ml với dung môi, để nguội Dung dịch phải ữong (Phụ lục 9.2) màu không đậm màu mẫu VN7 (Phụ lục 9.3, phương pháp ) Giới hạn acid - kiềm Hòa tan 6,0 g chế phẩm cách đun sôi 25 ml nước carbon dioxyd (TT), để nguội thêm 0,3 ml dung dịch phenolphtalein (TT), dung dịch không màu Không dùng 0,4 ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 M (CĐ) để làm chuyển màu thị thành màu hồng Góc quay cực riêng Từ +54,4° đen +55,9°, tính theo chế phẩm khan (Phụ lục 6.4) Hòa tan 10,0 g chế phẩm 80 ml nước cách đun nóng đến 50 “c Để nguội thêm 0,2 ml dung dịch amonỉac loãng (TT) Để yên 30 phút pha loãng đến 100,0 ml nước để đo Tính chất Bột kết tinh trắng hoặe gần trắng, tan ừong nước Độ hấp thụ Hòa tan 1,0 g chế phẩm nước sôi pha loãng thành 10,0 ml nước {dung dịch Ả) Độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dịch A đo bước sóng 400 nm không lón hon 0,04 Pha loãng 1,0 mỉ đurig dịch A thành 10,0 ml nước Đo độ hấp thụ đung dịch từ 210 nm đến 300 nm Tại bước sóng từ đến 2 nm, độ hấp thụ không lớn 0,25 Tại bước sóng từ 270 nm đến 300 nm, độ hấp thụ không lớn 0,07 Định tính A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phô hồng ngoại lamivudin chuẩn B Trên sắc ký đồ dung dịch thử phần thử giới hạn đông phân phải cho pic có thời gian lưu tương ứng với pic lamivudin sắc ký đồ dung dịch kiểm tra độ phân giải Kim loại nặng Không phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Hòa tan 4,0 g chế phẩm nước nóng, thêm m! dung dịch acid hydrocloric 0,1 M (TT) thêm nước vừa đủ 20 mỉ Lấy 12 ml dung dịch thử theo phương pháp Dùng dung dịch chì mẫu phần triệu (TT) để chuẩn bị mẫu đối chiếu Nước Từ 4,5 % đến 5,5 % (Phụ lục 10.3) Dùng 0,500 g chế phẩm hỗn hợp formamid methanol ( : ) làm dung môi Tro Sulfat Không đượG 0,1 % (Phụ lục 9.9) Thêm ml acid sulfuric (TT) vào 1,0 g chế phẩm, bốc đến khô cách thủy nung đến khối lượng không đổi Đô nhiễm khuẩn Tong số vi khuẩn hiếu khí sống lại không lón hofti 100 g, xác định phương pháp đĩa thạch E.coli (Phụ lục 13.6) Bảo quản Đựng lọ kín Độ hấp thụ ánh sáng Đo độ hấp thụ dung dịch chế phẩm nước có nồng độ 50,0 mg/ml bước sóng 440 nm cốc đo có độ dày cm (Phụ lục 4.1) Tính độ hấp thụ riêng chế phẩm cách chia độ hấp thụ đo cho nồng độ dung dịch (g/1) chiều dày cốc đo (cm) Không 0,0015 Nước Không 0,2 % (Phụ lục 10.3) Giới hạn đồng phân đối quang lamivudin Không 0,3 % Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động' Dung dịch amoni acetat 0,1 M - methanol ( 95: 5) Dung dịch thử: Cân xác khoảng 25 mg chế phẩm hòa tan nước pha loãng thành 10 ,0 ml với dung m ô i Dung dịch phân giải: Hờa tan bột lọ hỗn hợp phân giải lamivudin A chuẩn với ml nước Chuyển dung dịch thu sang bình định mức dung tích 10 ml, tráng lọ b ằng m l nước, ch u y ển v o bình định m ứ c, thêm nước vừa đủ đến vạch lắc Điều kiện sắc ký: Cột phân tích (25 cm X 4,6 mm) nhồi pha tĩnh silica gel gắn beta cyclodextrin (5 |j.m) Nhiệt độ cột 20 °c LAMIVUDIN Lamỉyudinum NH2 H O H C -— CgHi.NsOaS p.t.1: 229,3 Lamivudin (-)-l-[(2/?,55)-2-(hydroxymethỵl)-l,3-oxathiolan-5-yl]cystosin[, phải chứa từ 98,0 % đến 102,0 % C 8H 11N 3O 3S tính theo chế phẩm khan dung môi Detector quang phổ tò ngoại đặt bước sóng 270 nm Tốc độ dòng; 1,0 ml/min Thể tích tiêm: 10 )0.1 Cách tiến hành: Tiêm dung dịch phân giải, ghi lại sắc ký đồ Thời gian lưu tương đối pic đồng phân đối quang lamivudin so với lamivudin khoảng 1,2 Độ phân giải hai pic phải 1,5 Tiến hành sắc ký với dung dịch thử, ghi lại sắc ký đồ Tính hàm lượng (%) cửa đồng phân đối quang lamivudin chế phẩm dựa diện tích pic tương ứng so với tổng diện tích pic lamivudin đồng phân đối quang lamivudin sắc ký đồ dung dịch thử Dung môi tồn dư Phưong pháp sắc ký khí (Phụ lục 5.2) Dung dịch chuẩn nội: Cân xác khoảng 80 mg 2-pentanon (TT), cho vào bình định mức dung tích 100 ml, thêm hỗn họp gồm dimethyl sulfoxid - nước ( : 1) vừa đủ đến vạch Dung địch thử: Cân xác khoảng g chế phẩm cho vào bình định mức dung tích 100 ml, thêm 10,0 ml dung dịch chuẩn nội, hòa tan ừong hỗn họfp dimethyl sulfoxid - nước (1 : 1), thêm hỗn hợp gồm dimethyl sulfoxid - nước (1 : 1) vừa đủ đến vạch Dung dịch đổi chiếu: Cân xác khoảng 100 mg ethanol khan (TT), 100 mg isopropyỉ acetat (TT), 50 mg methanol (TT) 50 mg trỉethylamỉn (TT) cho vào bình định mức đung tích J 00 ml, pha loãng vừa đủ đến vạch với hỗn hợp Ịệm dimethyl sulfoxid nước (1 : 1) Hút 10,0 ml dung dịch thu cho vào bình định mức dung tích 100 ml, thêm 10,0 ml dung dịch chuan nội, thêm hôn hợp gôm dimethyl sulfoxid - dung dịch đổi chiếu diện tích pic tương ứng với acid salicylic frên sắc ký đồ dung dịch thử Tính hàm lưọfng tạp chất khác dựa vào diện tích pic sắc ký đồ dung dịch thử so với tổng diện tích pic đáp ứng sắc đồ dung dịch thử Hàm lượng acid salicylic không 0,1 %; tạp gồm chất có thời gian lưu tưong đối so với lamivudin khoảng 0,4 không 0,3 %; tạp chất có thời gian lưu tương đối so với lâmivudin khoảng 0,9 không 0,2 % Từng tạp chất khác không 0,1 % tổng tạp chất không 0,6 % Định lượng Ph“ " g pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) amoni acetat 0,025 M: Hòa tan 1,9 g 900 mĩ rmớc, điều chinh pH ¿ên 3,8 ± 0,2 acid acetic (TT), thêm nước vừa đủ 1000 ml Pha động: Dung dịch amonì acetat 0,025 M Điêu kiện săc ký: methanol (95 : 5), điều chỉnh cần thiết Cột phân tích (50 m X 0,53 mm) tráng pha tĩnh Dung dịch thử: Cân xác khoảng 25,0 mg chế dầu dimethylpolysiloxan yới bề dày fxm phẩm hòa tan pha động,pha loãng đếĩi vừa đủ Khí mang hydro với áp suất psi, đặt chế độ chia 100,0 ml với eùng dung môi dòng Dung dịch chuẩn: Cần xác khoảng 25,0 mg Tốc độ dòng khí mang: 320 ml/min lamivudin chuẩn hòa tan pha động, pha loãng Detector ion hóa lửa thành 100,0 mỉ với dung môi Buồng tiêm đặt chê độ chia dòng, thê tích tiêm 0,5 f0,l Dung dịch phãn giải: Hòa tan bột lọ hỗn Chương trình nhiệt độ: Nhiệt độ cột ban đầu 70 °c họp phân giải lamivudin B chuẩn với ml pha động, phút, tăng dần nhiệt độ với tốc độ 30 °c ừong Dung dịch acid salicylic: Cân acid salicylic (TT), hòa phút tới 200 °c, trì nhiệt độ 6,5 phút, tan pha động pha loãng tìmg bước để thu Nhiệt độ buồng tiêm trì 150 “c nhiệt độ dung dịch có nồng độ 60 ng/ml detector trì 250 °c ^ ^ ^ Điều kiện sac ký: Cách tiến hành: Tiêm dung dịch đổi chiếu Cột thép không (25 cm X 4,6 mm) nhồi pha dung dịch thử, ghi lại săc ký đô tĩnh octadecyl silica gel (5 I^m) Nhiệt độ cột 35 °c Tính toán hàm lượng đung môi ton dư Detector tử ngoại đặt bước song 277 nm ‘ chế phấm dựa vào tỵ lệ diện tích pic đáp ứng chất ¿ộ Q ini/in'in cần phân tích chất chuan nội thu từ dung dịch Th t ht •90 I thử dung dịch đối chiếu Không 0,2 % i j; u uu: ; i ethanol; % Lpropyl acetat ofl % methanol ,'-fẲ „ / t : I ’ uĩ 0,1 % trieỉhyíarain Tông d ™ g môi khàng ký tó H| số phân g ài lamh-ud n »à đồ.ng phâi, quáosy không đôi quang lamivudin (có thời gian lưu tương đối so với lamivudin khoảng 0,9) phải Tạp chất liên quan 1,5 Tiêm dung dịch chuẩn vào cột sắc ký, ghi lại Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) sắc ký đồ Độ lệch chuẩn tương đối diẹn tích pic Dung dịch amoni acetaí 0,025 M, pha động, dung lần tiêm lặp lại không lớn 2,0 % dịch phân giải điều kiện sắc kỷ giống phần Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn yà dung dịch Định lượng thử ỴỚi thời gian rửa giải phải thời gian Dung dịch thử: Dung dịch thử phận Định lượng lưu acid salicylic (Thời gian lưu acid salicylic Dung dịch acid salicylic đối chiếu: Cân xác xác định cách tiêm dung dịch acid khoảng 25,0 mg ữcií/ 5a//cy//c hòa tan vừa salicylic) đủ 100,0 ml pha động Pha loãng bước để thu Tính hàm lượng lamivudin, CgHnNsOsS, chế dung dịch có nồng độ 0,25 ỊLi^ml với pha động phẩm dựa vào diện tích pic đáp ứng thu từ dung Cách tiên hành: Tiêm lần lưọt 10 ^1 dung dịch acid dịch thử dung dịch chuẩn dựa vào hàm lượng sa licy lic đối ch iếu d u n g d ịch thử, ghi lại sắc k ỷ đồ Tính hàm lượng acid salicylic dựa vào nồng độ acid salicylic, diện tích pic đáp ứng sắc ký đồ * ” la m iv u d in chuân Bảo quản Đựng đồ bao gói kín, tránh ánh sáng Loại thuốc Kháng virus Chế phẩm Viên nén, lọ bột uống VIÊN NÉN LAMIVUDIN Tabellae Lamivuđini Là viên nén viên nén bao phim chứa lamivudin Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu ữong chuyên luận "Thuốc viên nén" (Phụ lục 1.20) yêu cầu sau; Hàm lượng lamivudin, C8H11N3O3S, từ 90,0 % đến 110,0 % so với lưọng ghi nhãn Tính chất Viên màu trắíig Định tính Có thể chọn nhóm định tính sau; Nhóm I: Phép thử A Nhóm II: Phép thử B c A Cân lượng bột viên nghiền mịn tương ứng với khoảng 50 mg lamivudin, thêm 20 ml methanol (TT), lắc để hòa tan lọc Bổc dịch lọc luồng khí nitơ thu cắn Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) cắn phải phù hợp với phổ hồng ngoại đối chiếu lamivudin hay với phổ lamivudin chuẩn Nếu phổ thu không phù họfp, lặp lại phép thử lamivudin chuẩn cách hòa tan lamivudin chuẩn methanol (TT) bốc đến khô luồng khí nitơ B PhưoTig pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF254 dày 0,25 mm Dung môi khai triển: Dicloromethan - acetonitril methanol - amonỉac đậm đặc (67 : 20 : 10: 3) Dung dịch thừ Lắc kỹ lượng bột viên tưotig ứng với khoảng 50 mg lamivudin với 50 ml methanol (TT)ị lọc sử dụng dịch lọc Dung dịch đổi chiếu: Dung dịch lamivudin chuẩn có nồng độ mg/ml ừong methanol (TT) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 Ị4.1 dung dịch Sau triển khai sắc ký, để mỏng khô không khí quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm vết sắc ký đồ dung dịch thử phải phù hợp với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiểu vị trí, màu sắc kích thước c Trong phần Định lượng, pic frên sắc ký đồ dung dịch thử phải có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu pic lamivudin sắc ký đồ dung dịch chuẩn Tạp chất liên quan Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Hỗn hợp thể tích methcmol (TT) 95 thể tích dung dịch đệm pH 3,8 (dung dịch 1,9 g/ỉ amoni acetat (TT) điều chinh pH 3,8 acid acetic băng (TT)) Dung dịch thừ Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên tưong ứng với khoảng 50 mg lamivudin vào bình định mức 100 ml, thêm 60 ml pha động lắc siêu âm để hòa tan Pha loãng pha động đến định mức trộn Lọc Dung dịch đổi chiểu: Pha loãng 1,0 ml dung dịch thử pha động vừa đủ 100,0 ml Tiếp tục pha loãng 1,0 ml dung dịch pha động vừa đủ 10,0 ml Dimg dịch kiểm tra độ thích hợp cùa hệ thống: Chuẩn bị dung địch pha động có chứa 10 ỊLig tạp lamivudin A 200 ỊLig lamivudin ml Điều kiện sắc ký: Cột thép không gi (25 cm X 4,6 mm) nhồi pha tĩnh c (5 Ịxm) trì nhiệt độ 35 °c Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 277 nm Tốc độ dòng: 1,0 ml/min Thể tích tiêm: 20 fj.1 Cách tiến hành' Tiến hành sắc ký dung dịch kiểm tra độ thích hợp hệ thống, độ phân giải hai pic tạp lamivudin A lamivudin phải lớn 1,5 Tiến hành sắc ký dung dịch đối chiếu, dung dịch thử Thời gian ghi sắc ký đồ dung dịch thử gấp lần thời gian lưu lamivudin Trên sắc ký đồ thu dung dịch thử, diện tích pic trừ pic không lớn lần diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (0,3 %), pic có diện tích lớn lần diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (0 ,2 %), pic có diện tích lớn diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu ( 0,1 %) tổng diện tích tất pic trừ pic không lớn lần diện tích pic sắc ký đồ cùa dung dịch đối chiếu (0,6 %) Loại bỏ pic có điện tích nhỏ 0,5 lần diện tích pie sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (0,05 %) Định Iirợng Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Dung dịch chuẩn: Hòa tan lượng lamivudin chuẩn ừong pha động để thu dung dịch có nồng độ khoảng ,0 % Dung dịch thừ Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên tương ứng với khoảng 50 mg lamivudin vào bình định mức 100 ml, thêm 60 ml pha động lắc siêu âm để hòa tan Pha loãng pha động đến định mức trộn Lọc qua giấy lọc bổ 20 ml dịch lọc đầu Pha loãng 10,0 ml dịch lọc pha động vừa đủ 25 ml Pha động điều kiện sắc kỷ thực nêu phần Tạp chất liên quan Cách tiến hành Kiểm tra khả thích hợp hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký dung dịch chuẩn Phép thử có giá trị độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic lamivudin ừong lần tiên lặp lại nhỏ 2,0 % Tiến hành sắc ký dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượnệ lamivudin, CgHiiNsOaS, có đơn vị chế phẫim dựa vào diện tích pic thu từ dung dịch thử, dung dịch chuẩn hàrti lượng CgHiiNsOsS lamivudin chuẩn Bảo quản Trong vỉ nhôm hay chai lọ nút kín Để nơi khô mát, tránh ánh sáng Loại thuốc Kháng virus Hàm lượng thường dùng 150 mg 300 mg LANOLIN KHAN Lanolinum anhydrícum Lanolin khan chất giống sáp, khan, tinh khiết, thu từ lông loài cừu (Ovis aries), có chứa không 0 phần triệu butylhydroxytoluen Tính chất Chất nhờn màu vàng, có mùi đặc trưng Khi chảy lỏng cho chất lỏng màu vàng, gần Thực tế không tan nước, khó tan ethanol sôi Trong ether dầu hỏa cho dung dịch đục Định tính A Hòa tan 0,5 g chế phẩm ml dicloromethan (TT) thêm ml anhydrid acetic (TT) 0,1 Víủ acid sulfuric (TT), màu xanh lục xuất B Hòa tan 50 mg chế phẩm ml didoromethan (TT), thêm ml acid sulfuric (TT) lắc Màu đỏ xuất có huỳnh quang màu xanh đậm lớp quan sát ánh sáng thường với nguồn sáng rọi từ phía sau người quan sát Chất add - kiềm tan nước Đun chảy 5,0 g chế phẩm nồi cách thủy lắc mạnh phút với 75 ml nước đun nóng trước đến 90 °c đến 95 ”c Để nguội lọc qua giấy lọc rửa trước nước Thêm 0,25 ml dung dịch xanh bromothymol (TT) vào 60 ml dịch lọc (dịch lọc không trong) Màu thị phải thay đổi cho thêm không ,2 ml dung dịch acid hydrocloric 0,02 M (CĐ) 0,15 ml dung dịch natri hydroxyd 0,02 M(CĐ) Điểm nhỏ ẹiọt Từ 38 “C đến 44 °c (Phụ lục 6.7, phương pháp 4) Làm đầy chế phẩm tronệ cốc kim loại cách đụn chảy chế phẫm nồi cách thủy, để nguội đến khoảng 50 “c , rót vào c ố c \ để yên 15 ° c đến 20 ° c 24 K hút nước Chuyển 10 g chế phẩm làm nóng chảy vào cối để nguội đến nhiệt độ phòng Thêm lượng nước một, lần từ 0,2 ml đến 0,5 ml nước buret, khuấy mạnh sau lần thêm để dung nạp hết lượng nước thêm vào Điểm kết thúc đạt quan sát thấy giọt nước lưu lại bị dung nạp tiếp Lượng nước tiêu thụ không ml Chỉ số acid Không 1,0 (Phụ lục 7.2) Xác định 5,0 g chế phẩm hòa tan 25 ml hỗn hợp dung môi Chỉ số peroxyd Không 20 (Phụ lục 7.6, phương pháp A) Trước thêm 0,5 ml dung dịch kali iodid bão hòa (TT), làm nguội dung dịch thu đến nhiệt độ phòng Chỉ số xà phòng hóa Từ 90 đến 105 (Phụ lục 7.7) Xác định 2,00 g chế phẩm Đun nóng ống sinh hàn ngược Chất dễ oxy hóa tan nước Thêm ml dung dịch acid sulfuric 10 % (TT) 0,1 ml dung dịch kali permanganat 0,02 M (CĐ) vào 10 ml dịch lọc thu mục chất acid - kiềm tan nước Sau 10 phút, màu dung dịch không biến hoàn toàn Butylhydroxytoluen Không 0,02 % Xác định phương pháp sắc ký khí (Phụ lục 5.2) Dung dịch nội chuẩn: Hòa tan 0,2 g methyl decanoat (TT) carbon disulfid (TT) pha loãng thành 100,0 ml với dung môi Pha loãng 1,0 ml dung dịch thành 10,0 ml carbon disulfid (TT) Dung dịch thử (1): Hòa tan 1,0 g chế phẩm carbon disulfid ỢT) pha loãng thành 10,0 ml với dung môi Dung dịch thử (2)\ Hòa tan 1,0 g chế phẩm carbon disuựid (TT), thêm 1,0 ml dung dịch nội chuân pha loãng thành 10,0 ml carbon disulfid (TT) Dung dịch đối chiếu: Hòa tan 0,2 g butylhydroxytoluen (TT) carbon disulfid (TT) pha loãng thành 100,0 ml dung môi Pha loãng 1,0 ml dung dịch thành 10,0 ml carbon disulfid (TT) Thêm 1,0 ml dung dịch nội chuẩn vào 1,0 ml dung dịch pha loãng thành 10,0 ml \Àn% carbon disuựidỢTl Điều kiện sắc ký: Cột (1,5 m X mm) nhồi diatomit silan hóa dùng cho sắc ký khí tẩm 10 % (kl/kl) polydimethylsiloxan (TT); cột đặt sau cột có chứa thủy tinh silan hóa Khí mang: Nitrogen dùng cho sắc ký khí, lưu lượng 40 ml/min Detector ion hóa lửa Nhiệt độ: Duy trì nhiệt độ cột 150 “c , nhiệt độ buồng tiêm 180 °c nhiệt độ detector 300 ”c Cách tiến hành' Tiêm thể tích lựa chọn dung địch thử (1), dung dịch thử (2 ) dung dịch đối chiếu Parafin Không 1,0 % Chú ý: Các vòi, khóa dụnẸ cụ dùng phép thừ dâu mỡ Chuân bị cột nhôm oxyd khan có chiều dài 230 mm đường kính mm bătiẸ cách thêm hỗn hợp nhôm oxyd khan (TT) ether dầu hòa có độ sôi từ 40 °c đến 60 "c (TT) vào ống thủy tinh có van khóa chứa ether dầu hỏa có khoảng sôi từ 40 "C đến 60 "C (TT) (Trước dùng, loại nước nhôm oxyd khan cách nung 600 °c giờ) Để lắng !àm giảm chiều dài lớp dung môi Ị)hía cột khoảng 40 mm Hòa tan 3,0 g chê phẩm 50 ml ether dầu hỏa có khoảng sôi từ 40 "c đến 60 "C (TT) ấm, làm nguội, cho dung dịch qua cột tốc độ ml phút rửa với 250 ml ether dầu hỏa có khoảng sôi từ 40 ”c đến 60 °c (TT) Làm đậm đặc dịch rửa giải nướe rửa đến thu khối cắn nhão cách cất, bốc đến khô nồi cách thủy sấy cắn ỏ' 105 °c chu kỳ thời ^ian 10 phút khối lượng thu hai lân cân không khác mg Khối lượng cắn không 30 mg Clorid Không 0,015 % Đun sôi 1,0 g chế phẩm với 20 ml ethanol 90 % (TT) binh cầu đáy tròn ống sinh hàn ngược phút Để nguội thêm 40 ml nước, 0,5 ml acid nitric (TT), lọc Thêm 0,15 mỉ dung dịch bạc nitrat % ethanol 90 % vào dịch lọc Đe yên phút, tránh ánh sáng Dung dịch không đục dung dịch đối chiếu chuẩn bị thời gian cách thêm 0,15 ml dung dịch bạc nitrat % ethanol 90 % v o hỗn hợp gồm 0,2 ml dung d ịc h acid hydrocloric 0,02 M (CĐ), 20 ml e th a n o ỉ 90 % (TT), 40 Xĩú nước 0,5 ml acid nitric (TT) M ất khối lượng làm khô Không 'qua 0,5 % (Phụ lục 9.6) (1,000 g; 100 °c đen 105 °C; h) T r o S u lfa t Không 0,15 % (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Đốt 5,0 g chế phẩm dùng cắn để xác định tro Sulfat Bảo quản Bảo quản nhiệt độ không 25 °c Nhãn Phải quy định trường họp sử dụng, nồng độ chất butylhydroxytoluen thêm vào LEVOM EPROM AZIN MALEAT Levomepromazini maleas XO2H 'CO2H 0CH C 19H 24N 2OS.C4H4O4 p.t.l: 444,6 Levomepromazin maleat (2i?)-3-(2-methoxy-10//phenothiazin-10-y A^,2-trimethylpropan-1-amin(Z)-butendioat, phải chứa từ 98,5 % đến 101,0 % C19H24N2OS.C4H4O4, tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bột kết tinh trắng hay vàng nhạt, khó tan nước ethanol 96 %, tan methylen clorid, thực tế không tan ether Dễ bị phân hủy tiếp xúc với không khí ánh sáng, chảy nhiệt độ khoảng 186 °c kèm theo phân hủy Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau; Nhóm I: A, B Nhóm II: B, c, D A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại levomepromazin maleat chuẩn B Góc quay cực riêng; Chế phẩm phải đáp ứng phép thử Góc quay cực riêng c Phưong pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Tiến hành tránh ánh sáng Bản mỏng' Chất mang kieselguhr G Thấm khô mỏng cách để vào bình eó sẵn lớp mỏng dung dịch có chứa 2-phenoxyethanol 10 % polyethyỉen glycoỉ 300 5,0 % aceton, cho mỏng ngập dung môi khoảng mm, sau để dung môi thấm dần lên khoảng 17 cm Lấy mỏng tiến hành sắc ký Pha động: Lắc hỗn hợp gồm 100 thể tích ether dầu hỏa (nhiệt độ sôi 50 °c đến 70 °C), thể tích diethylamỉn (TT) đến thể tích 2-phenoxyethanol (TT) thấy vẩn đục bền vũng, gạn sử dụng lóp phía ữ ên có vẩn đục Dung dịch thừ Dung dịch chế phẩm 0,2 % doroform (TT) Dung dịch đối chiếu: Dung dịch levomepromazin chi in 0,2 % doroform (TT) Cách tiến hành Tiến hành chạy sắc ký giống chuẩn bị mỏng Chấm riêng biệt lên mỏng |Lil m ỗi d u n g d ịch T riển khai sắc ký, lấy mỏng ra, quan sát ánh sáng tử ngoại 365 nm vài phút, v ế t sắc ký đồ thu dung dịch thử phải giống vị trí, màu sắc, huỳnh quang kích thước với vết thu từ dung dịch đối chiếu Phun lên mỏng dung dịch acid sulfuric 10 % ethanol, mầu củã vết thu từ sắc ký đồ dung dịch thử dung dịch đối chiếu phải giống nhau, giữ nguyên màu vòng phút sau phun D Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF254 Dung môi khai triển: Nước ” acid formic khan - diisopropyl ether {3 : : 90) Dung dịch thử: Hòa tan 0,20 g chế phẩm 10 ml hỗn hợp nước - aceton (10: 90) Dung dịch đổi chiếu: Hòa tan 50 mg acỉd maleic chuẩn 10 ml hỗn hợp nước - aceton (10 : 90) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng ỊLil dung dịch thành dải có kích thước 10 mm X mm Triển khai sắc ký đến dung môi 12 cm, để khô m ỏng không khí s ấ y m ỏng nhiệt độ 120 ừong 10 phút quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Trên sắc ký đồ dung dịch thử phải có dải vạch xuất phát phải có dải tương ứng với vết sắG ký đồ dung dịch đối chiếu vị trí, kích thước, p** Lắc 0,50 g chể phẩm với 25,0 ml nước carbon dioxyd (TT) để lắng pH phần dung dịch phía phải từ 3,5 đến 5,5 (Phụ lục 6.2) Tiến hành phép thử điều kiện tránh ánh sáng Góc quay cực riêng Từ -7,0“ đến -8,5° tính theo chế phẩm làm khô (Phụ lục 6.4) Dùng dung dịch chuẩn bị cách hòa tan 1,25 g chế phẩm dimethyựormamìd (TT) pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Tạp chất liên quan PhưoTig pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ luc 5.4) Tiến hành phép thử điều kiện tránh ánh sáng Bản mỏng: Silỉca gel GP254Dung môi khai triển: Aceton - diethyỉamỉn - cyclohexan ( 10: 10: 80) ^ Dung dịch thử: Hòa tan 0,20 g chế phẩm 10 ml hỗn hợp nước - aceton (10 : 90) Dung dịch đối chiếu: Pha loãng 0,5 ml dung dịch thử thành 100 ml hỗn hợp nước - aceton (10 : 90) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 ỊJ.I dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi hon 15 cm, để khô mỏng không khí Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Bất kỳ vết thứ hai thu vết sắc ký đồ dung dịch thử không đậm màu vết thu sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (0,5 %) M ất khối lượng làm khô Không 'quá 0,5 % (Phụ lục 9.6) (1,000 g; 100 °c đến 105 ”c ; h) Tro sulfat Không 0,1 % (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm Định lượng Hòa tan 0,350 g chế phẩm 50 ml acid acetỉc khan (TT) Chuẩn độ dung dịch acid perdorìc 0,1 N (CĐ) Xác định điểm kết thúc phương pháp chuẩn độ đo điện (Phụ lục 10.2) I ml dung dịch acidpercỉoric 0,1 N (CĐ) tương đương với 44,46 mg C23H28N2O5S Bảo quản Đựng chai lọ nút kín, tránh ánh sáng Loại thuốc Thuốc dùng bệnh loạn thần Chê phẩm Viên nén, thuốc tiêm VIÊN NÉN LEVOMEPROMAZIN Tabellae Levomepromazini Là viên nén chứa levomepromazin maleat Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận “Thuốc viên nén” (Phụ lục 1.20) yêu cầu sau; Hàm lương levomepromazin maleat, C,9H24N20S C4H4O4, tư 90,0 % đến 10,0 % so với lượng ghi nhãn Tính chất Viên màu trắng Định tính A Lấy lượng bột viên tương ứng với 50 mg levomepromazin maleat, thêm 10 ml nước ml dung dịch natri hydroxyd M (TI), lắc Chiết với 15 ml ether (TT) để yên cho tách lớp Rửa lóp ether ml nước, lọc qua giấy lọc có naữi sulfat khan (TT), bay dịch chiết ether đến khô sấy cắn 100 °c ừong Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) cắn thu phải phù họp với phổ hồng ngoại đối chiếu levomepromazin B Phương pháp sắc ký lófp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel p 254Dung môi khai triển: Ethyl acetat - acidformic khan nước (90 ; ; 3) ^ Dung dịch thử: Lấy lượng bột viên chứa 0,2 g levomepromazin maleat, thêm 10 ml hỗn hợp aceton nước (9 ; 1), lắc siêu âm phút, để yên lấy dịch phía Dung dịch đối chiếu: Dung dịch acid maleic chuẩn 0,6 % acidformic khan (TT) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 1^1 dung dịch Sau triển khai sắc ký, lấy mỏng sấy 120 °c 10 phút Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Trên sắc ký đồ thu được, dung dịch thử có vết điểm chấm sắc ký vết tương ứng với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Tạp chất liên quan Phương pháp sắc ký Iófp mỏng (Phụ lục 5.4) Tiến hành ứong điều kiện tránh ánh sáng Bản mỏng: Silica gel GF254 Dung môi khai tt-ỉển: Toluen - aceton - diethylamin (85:10:5) Dung dịch thử: Lấy lượng bột viên tương ứng với 0,1 g levomepromazin maleat, thêm 10 ml hôn hợp methanol - amoniac 18M (99 : 1), lắc siêu âm phút, lọc, bỏ dịch lọc đầu Dung dịch đối chiểu: Pha loãng 200 lần dung dịch thử dung môi Cách tiến hành: Châm riêng biệt lên mỏng 10 |J,1 dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm Lấy mỏng để khô không khí Quan sát đèn tử ngoại bước sóng 254 nm Bất kỳ vết phụ sắc ký đồ dung dịch thử không đậm hoTi vết thu sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (0,5 %) Không tính đến vết điểm chấm sắc ký Độ hòa tan (Phụ lục 11.4) Thiết bị: Kiểu cánh khuấy Môi trường: 500 ml dung dịch acid hydrocỉoric 0,1 M (TT) Tốc độ quay 50 r/min Thời gian: 30 Cách tiến hành' Lấy phần dung dịch môi trường hòa tan mẫu thử, lọc, bỏ 20 m! dịch lọc đầu Pha loãng dịch lọc thu dung dịch acid hydrocloric 0,1 M (TT) để có nồng độ khoảng 0,005 % levomepromazin maleat Đo độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dịch thu bước sóng 311 nm, cốc đo dày Icm, mẫu ứắng d m g dịch acid hydrocloric 0,1 M (TT) So sánh với dung dịch chuẩn levomepromazin maleat có nồng độ tương đương dung môi Tính hàm lượng levomepromazin maleat hòa tan dựa vào nồng độ levomepromazin maleat dung dịch chuẩn Yêu cầu\ Không hofn 60 % lượng levomepromazin maleat, C19H24N2OS.C4H4O4, so với lượng ghi nhãn hòa tan 30 phút Định lượng Tiến hành ứong điều kiện tránh ánh sáng Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình viên nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên tưofng ứng với 50 mg levomepromazin maleat, thêm 15 ml dung dịch amoniac 0,2 M methanol (TT), lắc phút, lọc lấy dịch lọc Tiếp tục chiết lần, lần với 15 ml dung dịch amoniac 0,2 M methanol (TT), dùng đũa thủy tinh nghiền cắn ừước lần chiết Tập họp dịch lọc thêm dung dịch amoniac 0,2 Mtt-ong methanol (FT) vừa đủ 100,0 ml Pha loãng 10 thể tích dung dịch thu thành 100 thể tích methanol (TT) Tiếp tục pha loãng 10 thể tích dung dịch thành 100 thể tích methanol (TT) Đo độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dịch thu bước sóng cực đại 254 nm, mẫu trắng methanol (TT), Song song tiến hành đo dung dịch levomepromazin maleat chuẩn 0,0005 % dung dịch amoniac 0,002 M, methanol (TT) Tính hàm lượng levomepromazin maleat, C19H24N2OS.C4H4O4, có viên dựa vào hàm lưọng C 19H 24N 2OS.C4H4O4 levomepromazin malẹat chuẩn Bảo quản Tránh ánh sáng Loại thuắc An thần Hàm lượng thường dùng 25 mg ... dihydroclorid chuẩn nước pha loãng thành ml với dung môi Dung dịch đối chiểu (2 ): Hòa tan 10 mg clorphenamin maleat chuẩn nước pha loãng thành ml với dung môi Lấy ml dung dịch này, thêm ml dung dịch... dung dịch đối chiếu (1) dung dịch đối chiểu (2) Bảo quản Bao bi kín, tránh ánh sáng Công dụng Tá dược CETYL ALGOL Alcohol cetylicus Cetyl alcol hỗn hợp alcol rắn, chủ yếu chứa hexadecanol (CH3-(CH2),4-CH20H;... hóa Không 2,0 (Phụ lục 7.7) Dùng 2,0 g chế phẩm Bảo quản Bao bì kín, tránh ánh sáng Loại thuốc Tá dược CHYMOTRYPSIN Chymotrypsinum Chymotrypsin men thủy phân protein kết tinh từ dịch chiết tuyến