Header Page of 123 M Đ U B ch đàn (Eucalyptus) loài b n địa c a Australia đư c tr ng ph bi n th gi i v i 700 loài khác T i Việt Nam, B ch đàn loài đư c tr ng ph bi n đ l y nguyên liệu, nhiên thực t cho th y loài khác phát tri n dư i tán rừng B ch đàn r t ch m, đặc biệt loài c d i Đ ng th i nghiên cứu cho th y có nghèo nàn tính đa d ng sinh học dư i tán rừng B ch đàn, đặc biệt m t s loài côn trùng Do có r t nhiều quan m khác c a nhà khoa học nư c gi i thích v n đề cho đ n quan m v n chưa th t th ng nh t Trong B ch đàn đư c bi t loài có hàm lư ng tinh d u l n V y ph i tinh d u c a có liên quan đ n v n đề trên, có tác đ ng th đ i v i sinh v t hệ sinh thái? Các tính ch t c a tinh d u ph thu c hoàn toàn vào thành ph n ch t có mặt tinh d u Thành ph n, hàm lư ng c a ch t tinh d u r t khác loài B ch đàn, tu i c a điều kiện tự nhiên Do việc thực đề tài: “Đánh giá đặc tính thành thành phần tinh dầu số loài Bạch đàn (Eucalyptus) trồng Việt Nam mối liên hệ với số vấn đề sinh thái môi tr ờng điển hình’’ r t c n thi t, góp ph n gi i quy t v n đề nêu M c tiêu c a đề tài nhằm đánh giá vai trò c a ch t có mặt tinh d u m t s loài B ch đàn tr ng Việt Nam đ i v i môi trư ng sinh thái; đ ng th i s m t s ho t tính sinh học c a ch t s đề xu t hư ng sử d ng loài B ch đàn theo hư ng thân thiện v i môi trư ng Đ thực đư c m c tiêu trên, lu n văn t p trung gi i quy t n i dung sau: - Kh o sát phương pháp tách chi t tinh d u từ B ch đàn; Footer Page of 123 Header Page of 123 - Xác định đánh giá ho t tính sinh học c a ch t có tinh d u loài B ch đàn nghiên cứu; - Bư c đ u đánh giá m t s nh hư ng c a tinh d u B ch đàn đ n môi trư ng sinh thái Footer Page of 123 Header Page of 123 Ch ng T NG QUAN 1.1 M t vƠi nét cơy B ch đƠn B ch đàn gọi Khuynh diệp, tên khoa học Eucalyptus thu c họ Sim (Myrtaceae) Tên B ch đàn tên có từ lâu vùng Nghệ An, Hà Tĩnh, tên Khuynh diệp mùi tinh d u có mùi tinh d u Tràm Hiện tên B ch đàn đư c dùng ph bi n [β] B ch đàn m t chi có s lư ng loài l n, theo Lã Đình M i c ng sự, B ch đàn c có kho ng 500 loài, theo Dairy R.Batish c ng B ch đàn có kho ng 700 loài khác nhau, theo Lê Văn Truyền c ng B ch đàn có t i 800 loài khác H u h t s loài chi đặc hữu c a Australia Chỉ có hai loài phân b tự nhiên khu vực Malesian (New Guinea, Moluccas, Sulawesi, qu n đ o Lesser Sunda Philippin) M t vài loài có biên đ sinh thái r ng, phân b khu vực kéo dài từ miền B c Australia đ n miền Đông Malesian Những nghiên cứu g n phát đư c kho ng 10 loài có phân b miền Nam New Guinea Ngư i ta cho rằng, việc điều tra, nghiên cứu, khai thác th m thực v t rừng gió mùa savan t i khu vực r ng l n phía Đông Nam c a vùng Đông Nam Ễ ch c ch n s phát thêm nhiều loài m i thu c chi B ch đàn Tính d ng c a chi B ch đàn t i vùng ven bi n c a New Sounth Wales miền Tây Nam Australia đư c đánh giá cao [γ] Hiện r t nhiều loài đư c đưa tr ng vùng phân b tự nhiên c a chúng Nhiều d i rừng B ch đàn đư c hình thành nư c ta; nư c l c địa châu Ễ; nư c nhiệt đ i, c n nhiệt đ i châu Phi, khu vực Địa Trung H i miền Nam châu Âu đ n khu vực Nam Trung châu Mỹ [β] Việt Nam, l n đ u tiên B ch đàn đư c Brochet tìm th y C cL u tỉnh Lào Cai vào năm 1904 (Hoàng Hòe, 1996) Ngày có kho ng β0 Footer Page of 123 Header Page of 123 loài B ch đàn đư c tr ng Việt Nam B ch đàn tr ng (Eucalyptus camaldulensis Dehn) đư c coi loài có giá trị kinh t cao, đư c tr ng r ng rãi c vùng đ t th p cao, trừ đỉnh núi có đ cao 1000 mét so v i mực nư c bi n [10] Theo Lã Đình M i m t s loài B ch đàn đư c nh p tr ng tương đ i r ng rãi Việt Nam như: - B ch đàn tr ng (Eucalyptus camaldulensis Dehnl., 18γβ Tên đ ng nghĩa: E rostrata Sch., 1847) M t vài địa phương khác gọi B ch đàn camal, B ch đàn Úc, Khuynh diệp đ ; - B ch đàn chanh (Eucalyptus citriodora Hook., 1848) Còn có tên đ ng nghĩa khác: E melissiodara Lindley, 1848; E variegata E v Mueller, 1859; E maculata Hook var citriodora (Hook.) Bailey, 1990; Corymbia citriodora (Hook.) Có nơi nư c ta gọi B ch đàn đ ; - B ch đàn uro (Eucalyptus urophylla S.T Blake, 1977 Còn có tên đ ng nghĩa: E alba auct non Reinw.ex Blume, E decaisneana auct Non Blume); - B ch đàn long duyên (Eucalyptus exserta F v Muell.,1859) Có nơi nư c ta gọi B ch đàn li u; - B ch đàn nh (Eucalyptus tereticornis J E Smith, 1795 Tên đ ng nghĩa: E subulata Cunn ex Schauer, 1843); - B ch đàn v dày (Eucalyptus robusta Smith, 1849 Các tên đ ng nghĩa: E multiflora Rich ex A Gray non Poir (1854); E naudiniana F v Mueller, 1886; E schlechteri Diels, 1992) Hiện v i phát tri n c a công nghệ sinh học nên có r t nhiều dòng B ch đàn nuôi c y mô đư c đưa vào tr ng t i lâm trư ng c a tỉnh Footer Page of 123 nư c ta v i m c đích v n dùng đ l y nguyên liệu cho Header Page of 123 s n xu t gi y, g cho xây dựng Các giá trị khác v n chưa đư c nghiên cứu quan tâm mức G B ch đàn thu c lo i có tỉ trọng nhẹ nặng vừa ph i, g silica, không mùi vị, d gia công ch bi n G B ch đàn đư c sử d ng r ng rãi xây dựng v i c u trúc nhẹ nặng trung bình (khung cửa, trang trí n i th t, làm sàn nhà) Những năm qua g B ch đàn đư c coi ngu n nguyên liệu quan trọng công nghiệp gi y s i [3] M t đặc m quan trọng c a loài B ch đàn thu c loài chứa tinh d u Tinh d u đư c chứa c a r t nhiều loài thu c chi B ch đàn 1,8-cineol thư ng thành ph n tinh d u c a nhiều loài B ch đàn Đây m t nguyên liệu có giá trị công nghiệp dư c ph m, mỹ ph m Tinh d u c a m t s loài đư c dùng làm cao xoa, làm thu c sát trùng Nhiều lo i tinh d u l i đư c dùng làm nguyên liệu đ s n xu t thu c trừ sâu bệnh th o m c [3] Các loài cung c p tinh d u ch y u chi B ch đàn là: Eucalyptus globulus Labil., Eucalyptus polybractea R T Backer, Eucalyptus citriodora Hook Trung Qu c nư c s n xu t tinh d u B ch đàn l n nh t, ti p đ n B Đào Nha, Nam Phi Tây Ban Nha Về sinh thái, sinh trư ng phát tri n c a B ch đàn: H u h t loài thu c chi B ch đàn thích nghi v i điều kiện khí h u gió mùa R t nhiều loài l i có th sinh trư ng khu vực có m t mùa khô kh c nghiệt năm B ch đàn v dày (E deglupta) loài nh t chi thích nghi v i vùng đ t th p sinh trư ng tự nhiên ki u rừng mưa núi th p E deglupta sinh trư ng t t khu vực có t ng lư ng mưa hàng năm l n (β500 ậ 5000 mm) Do loài đư c đưa tr ng r ng rãi kh p khu vực có điều kiện nhiệt đ i m Th i kỳ 1960 ậ 1975, m t s loài B ch đàn B ch đàn long duyên (E exserta), B ch đàn nh (E tereticornis), B chddàn đ (E robusta), Footer Page of 123 Header Page of 123 B ch đàn chanh (E citriodora) B ch đàn tr ng (E camaldulensis) đư c nh p tr ng t i nhiều khu vực miền núi trung du phía B c nư c ta Riêng rừng B ch đàn long duyên (E exserta) có th i kỳ lên t i hàng v n hecta su t th p, th m chí có nơi không t o thành rừng Nhiều nh n định trái chiều B ch đàn xu t su t rừng tr ng th p v n cao từ 1,5 đ n γ l n so v i Thông nhựa th i kỳ khai thác ng n, 10 - 1β năm Rừng B ch đàn thư ng làm khô đ t, c n ngu n nư c diệt l p b i, c dư i tán, ) M t s k t qu nghiên cứu c a Hoàng Xuân TỦ c ng (1997) cho bi t B ch đàn nh (E tereticornis) B ch đàn long duyên (E exserta) có th sinh trư ng bình thư ng đ t feralit vùng đ i có ngu n g c đá mẹ r t khác (như: phi n th ch sét, sa th ch, gownai, phi n th ch mica, phù sa c , acgilit, phylit, rhiolit) n u t ng đ t dày cung c p đ nư c B ch đàn m t chi l n thu c nhóm chi có d ng qu nang họ Sim (Myrtaceae) M t s tác gi đưa nh n xét đề nghị chia tách chi B ch đàn thành phân chi nhiều nhóm loài khác (có th t i 7-10 nhóm loài tùy thu c vào quan m c a tác gi ) Ngư i ta cho chi B ch đàn có quan hệ họ hàng r t g n gũi v i chi Angophora, Arillastrum Eucalyptopsis họ Myrtaceae K t qu nghiên cứu hệ th ng phát sinh chi B ch đàn cho th y, chi B ch đàn (Eucalyptus) đa d ng chi có nhiều ngu n g c (polyphyletic) Nói cách khác, loài chi B ch đàn (Eucalyptus) có th có lịch sử ti n hóa khác Cũng v y mà m t s tác gi đề nghị tách chi B ch đàn thành m t s chi khác Hill K.D Johnson L.A.S (1995) chuy n B ch đàn chanh (E citriodora Hook.) vào m t chi m i Corymbia citriodora (Hook) [3] Footer Page of 123 Header Page of 123 B ch đàn có th nhân gi ng d dàng từ h t cành giâm H t n y m m vòng - 20 ngày sau gieo H t B ch đàn thư ng r t nh nhiều lo i tr thành thương ph m Australia T i Thái Lan m i năm s n xu t m t lư ng l n cho việc gây tr ng rừng Theo Lã Đình M i B ch đàn sinh trư ng r t nhanh ch đ chăm sóc, qu n lỦ có quan hệ t i m c đích sử d ng N u tr ng đ l y nguyên liệu cho công nghiệp gi y s i có th thu ho ch giai đo n - 10 năm tu i Trư ng h p đ làm g xẻ c n tr ng thưa thu ho ch mu n Hiện việc hái đ c t tinh d u thư ng t n d ng Trư ng h p hái ch y u c n t o tán cho th p, sinh cành nhiều đ cho kh i lư ng l n [γ] Như v y ngu n gen c a loài chi B ch đàn r t phong phú, đa d ng nhiều loài có hàm lư ng tinh d u cao, r t có giá trị Hiện xu t nhiều công trình nghiên cứu th gi i b t đ u sâu vào ứng d ng c a tinh d u B ch đàn đ s n xu t hóa mỹ ph m đặc biệt ch bi n thu c trừ sâu có ngu n g c thực v t Như v y tinh d u B ch đàn có r t nhiều tính ch t khác nhau, có đ c tính ch ng l i loài vi sinh v t, côn trùng Xét m t khía c nh khác l i nguyên nhân có th d n t i suy gi m đa d ng sinh học, tác đ ng kìm hãm phát tri n c a loài dư i tán có tác đ ng x u đ n môi trư ng đ t Việc nghiên cứu m t cách th u đáo tinh d u c a loài s khoa học r t quan trọng đ gi i thích v n đề đặt 1.2 Tình hình nghiên c u tinh d u B ch đƠn th giới Tinh d u c a B ch đàn đư c bi t đ n sử d ng từ hàng trăm năm Hiện th gi i có m t s nghiên cứu thành ph n ho t tính c a tinh d u B ch đàn tác đ ng c a đ n môi sinh Trong nghiên cứu ph i k đ n công trình nghiên cứu c a Daizy R Batish c ng (2008) Trong nghiên cứu tác gi tinh Footer Page of 123 Header Page of 123 d u B ch đàn có tính ch t m t lo i thu c trừ sâu tự nhiên có kh tiêu diệt đư c nhiều loài sâu bệnh h i tr ng, nhiều loài vi khu n n m, mu i [6] Tuy nhiên tác gi chưa đư c đâu ho t ch t có tinh d u B ch đàn có kh Tác gi liệt kê m t s h p ch t tinh d u c a m t s loài B ch đàn chưa rõ hàm lư ng ph n trăm có tinh d u, đ ng th i công trình tác gi chưa mô t rõ phương pháp tách chi t, chưng c t đ đ t đư c hiệu su t cao nh t M t s tác gi khác Duke (2004), Brooker Kleinig (2006), Liu, (2008), t p trung nghiên cứu thành ph n hóa học tinh d u m t s loài B ch đàn v i m t s tính ch t c a Các tác gi đư c m t s h p ch t hóa học tinh d u m t s loài B ch đàn nhiên chưa th y tác gi mô t phương pháp tách chi t phân tích tinh d u Trong m t y u t nh hư ng đ n k t qu nghiên cứu Đặc biệt tác gi thừa nh n thành ph n hàm lư ng tinh d u ph thu c r t l n vào tu i c a cây, khí h u, lo i đ t tr ng, ch đ tr ng chăm sóc, ngu n g c gi ng, 1.2.1 Các h p ch t tự nhiên c a tinh d u B ch đƠn Theo nghiên cứu c a Brooker Kleinig (2006), tinh d u B ch đàn m t h n h p phức t p c a nhiều monoterpenes sesquiterpenes khác nhau, v i phenol oxit, este, rư u, ete, andehyt keton Thành ph n ph thu c vào loài, khu vực tr ng, khí h u, lo i đ t tu i c a lá, ch đ phân bón, đ ng th i ph thu c vào phương pháp tách chi t tinh d u Ho t tính trừ sâu h i c a tinh d u B ch đàn thành ph n 1,8cineole, citronellal, citronellol, citronellyl acetate, p-cymene, eucamalol, limonene, linalool,  -pinene,  -terpinene,  -terpineol, alloocimene aromadendrene (Watanable, 1993; Li, 1995, 1996; Cimanga, 2002; Deke, 2004; Batish., 2006; Liu., 2008) [6] Các h p ch t tinh d u B ch Footer Page of 123 Header Page of 123 đàn v i ho t tính trừ sâu tách chi t từ r t nhiều lo i B ch đàn khác cho B ng [6] Bảng Thành phần tinh dầu tách chiết từ số loài Bạch đàn Loài b ch đàn STT Thành ph n Tác gi E camaldulensis Eucamalol Watanabe c ng sự, 199γ E citriodora Citronella Ramezani c ng sự, β00β E globulus 1,8-Cineole Yang etal, 2004 E grandis α-Pinene, 1,8-cineole Lucia etal, 2007 E robusta α-Pinene Sartorelli c ng sự, β007 E urophylla E urophylla Su c ng sự, 2006 -Terpin, Alloocimene,α-pinene Liu etal, 2008 Các nghiên cứu t i Trung Qu c hàm lư ng tinh d u tươi c a B ch đàn chanh thay đ i từ 0,5 - 2,0 % Tinh d u thư ng có màu vàng nh t, tỉ trọng 150C từ 0,915 - 0,9β5; s chi t quang β00C từ -10 đ n -50C Tinh d u có thành ph n ch y u citronellal (65 ậ 80 %), citronellol (15 ậ 20 %) m t lư ng nh geraniol [3] Nghiên cứu thành ph n hóa học tinh d u B ch đàn chanh tr ng Australia, Boland c ng (1991) cung c p d n liệu sau: citronellal (80,1 %), isoisopulegol (3,4 %), linalool (0,7 %), ß-caryophyllen (0,4 %), ßpinene (0,4 %), α-pinene (0,1 %) α-para-dimethylstyren (0,1 %) Các h p ch t l i α-terpineol, geraniol, 1,8-cineole, globulol viridiflorol d ng v t [11] Các thành ph n khác c a tinh d u B ch đàn có tác d ng b tr cho ho t tính sinh học trừ sâu bệnh (Cimanga et al., β00β) Trong t ng s thành ph n khác c a tinh d u B ch đàn 1,8-cienole thành ph n quan trọng nh t m t h p ch t đặc trưng cho chi B ch đàn (Duke, β004) Footer Page of 123 Header Page 10 of 123 1.2.2 Ho t tính kháng n m vƠ vi khuẩn c a tinh d u B ch đƠn Theo Fiori c ng sự, (2000), Oluma Garba (2004), tinh d u B ch đàn v i thành ph n c a có đ c tính kháng r t nhiều loài vi khu n, n m c m m bệnh đ t Chúng làm gi m phát tri n c a n m s i [6] M t vài nghiên cứu hiệu qu ch ng n m c a tinh d u B ch đàn đư c mô t B ng β Năm β00β, Ramezani c ng d u bay c a B ch đàn chanh v i thành ph n monoterpene citronelle có m t ph ho t tính r ng ch ng n m, ức ch phát tri n có tác d ng làm khô m ch rây c a lo i n m G n Lee c ng (2007) k t lu n d u thơm c a B ch đàn chanh có kh ki m soát đư c bệnh m c xám táo đ n 70% Các nghiên cứu k t lu n tinh d u B ch đàn có th đư c sử d ng đ h n ch kh hô h p c a vi khu n [6] Su c ng (2006) chứng minh ho t tính ch ng n m c a tinh d u m t s loài B ch đàn E grandis, E camaldulensis E citriodora kháng l i n m Mildew n m gây th i g Aspergillus clavatus, A.niger, Chaetomium alobosum, Penicillium citrinum, Trichoderma viride, Theo nghiên cứu tác gi cho tinh d u B ch đàn chanh có th lựa chọn tuyệt v i m t ch t b o qu n g , đ da v t d ng g [6] Tzortzakis (2007) chứng minh tinh d u B ch đàn xanh m t lựa chọn t t cho b o qu n dâu tây cà chua su t trình v n chuy n, không làm thay đ i đ ngọt, axit hữu hàm lư ng t ng s phenolic [6] Kh kháng n m vi khu n c a m t s loài B ch đàn đư c mô t B ng [6] Footer Page 10 of 123 10 Header Page 70 of 123 Qua k t qu nghiên cứu thành ph n hóa học tinh d u B ch đàn cho th y chúng chứa hàm lư ng cao ch t thu c nhóm phenolic terpenoid Các h p ch t có th gây đ c cho sinh v t môi trư ng Trong h p ch t tiêu bi u eucalyptol, citronellal, α-pinene, -pinene, ậ caryophyllene, ậeudesmol, isopulegol, H u h t k t qu nghiên cứu ch t có ph n ứng b t l i đ i v i th sinh v t, đư c chứng minh loài gặm nh m M t s trư ng h p có nghiên cứu ph n ứng b t l i nhằm hư ng t i th ngư i Khi liều lư ng tinh d u vư t ngư ng th ngư i s gây tư ng nóng rát thành d dày, đau nhức khoang b ng, gây nôn mửa co gi t, suy c hệ hô h p hệ th n kinh trung ương d n đ n hôn mê ch t Tuy nhiên liệu việc gây tử vong ngư i nu t ph i d u b ch đàn chưa đư c khẳng định ch c ch n Có th d n đ n tử vong nu t ph i lư ng tinh d u từ ml đ n ml có nghiên cứu khác cho th ngư i tr lên m y u có th ph c h i n u nu t ph i từ 1β0 ậ β00 ml tinh d u Nghiên cứu loài gặm nh m cho th y giá trị LD50 (v i th i gian ti p xúc m t ngày quan sát) qua đư ng tiêu hóa r t cao, giá trị 4,44 g/kg trọng lư ng th đ i v i chu t đ ng 3,33 g/kg đ i v i chu t nh t Khi có 1-8 cineole tinh d u giá trị LD50 s th p β,48 g/kg đ i v i chu t đ ng Giá trị LD50 cho th l n nh t đ n 5g/kg trọng lư ng th Đ i v i ch t ậeudesmol giá trị LD50 cho chu t qua đư ng tiêu hóa > β g/kg trọng lư ng th đư c x p vào nhóm ch t gây dị ứng kích thích da m t Isopulegol m t h p ch t đư c tìm th y tinh d u loài E citriodora, m t ch t đư c x p vào nhóm ch t gây h i tránh nu t ph i ti p xúc trực ti p v i da m t, không đư c ăn, u ng hay hít th ph i Giá trị LD50 cho chu t qua đư ng Footer Page 70 of 123 70 Header Page 71 of 123 miệng 10γ0 μl/kg, đ i v i th qua da γ000 μl/kg H u h t h p ch t tìm th y tinh d u b ch đàn tan t t dung môi hữu cơ, mô m đ ng v t l i tan r t nư c Do v y h p ch t s có kh tích lũy sinh học r t l n, hòa tan t n lưu l i mô m c a loài đ ng v t m t th i gian dài gây b t l i đ i v i th sinh v t [1β, 13, 14, 17] Tinh d u B ch đàn l i cho bào thai làm nhi m b n sữa M t vài nghiên cứu citronellal phellandrene có d u B ch đàn có th làm suy y u t bào [14] Bên c nh tác đ ng b t l i đ i v i m t s v n đề môi trư ng, m t s ho t tính c a m t s h p ch t có tinh d u B ch đàn qua nghiên cứu trên, xét m t khía c nh l i tr lên r t có giá trị cu c s ng ho t tính kháng n m, kháng vi khu n gây bệnh nên có tác d ng làm s ch môi trư ng Đặc biệt v i ho t tính kháng Salmonella - m t lo i khu n làm nhi m b n thực ph m, kháng sinh, kháng vi rút, kháng di căn, trị viên đ t s ng cứng kh p, c a h p ch t Eucaluptol s r t có giá trị nghiên cứu ch t o dư c ph m đ trị bệnh V i ho t tính có kh ức ch r t nhiều lo i men th sinh v t việc nghiên cứu tính kháng l i m t s loài sâu bệnh c a tinh d u B ch đàn s hứa hẹn cho l i ích to l n b o vệ môi trư ng Do h n ch th i gian nghiên cứu nên việc ti n hành nghiên cứu thử nghiệm sinh v t ho t tính sinh học c a h p ch t đ i v i m t thực th sinh học điều tra tính đa d ng sinh học dư i tán rừng tr ng B ch đàn t i địa m nghiên cứu chưa đư c thực Hàm lư ng tỉ lệ ch t tinh d u m i đư c nghiên cứu điều kiện nghiên cứu Footer Page 71 of 123 m t c p đ tu i c a cây, chưa có c p tu i khác điều kiện th ng, khí 71 Header Page 72 of 123 h u vùng miền khác c a nư c ta Đó đề c n đư c ti p t c nghiên cứu th i gian t i nghiên cứu c p đ cao hơn 3.5 M t s gỉi pháp gỉm thiểu tác đ ng x u đ n môi tr ờng vƠ sử d ng hi u qủ ngu n tinh d u B ch đƠn n ớc ta Căn vào k t qu nghiên cứu, k t h p v i điều kiện thực t nư c ta nay, việc tr ng rừng B ch đàn c n tính toán cho có hiệu qu nh t c l i ích kinh t l n môi trư ng Tr ng rừng B ch đàn thu n loài thư ng d n đ n làm khô suy kiệt đ t đai Do v y c n ph i có ch đ ph c h i, b sung dinh dư ng cho đ t trình tr ng chăm sóc Bên c nh làm suy kiệt đ t đai, tinh d u B ch đàn chứa nhiều ch t có ho t tính sinh học cao v i hàm lư ng l n, tiêu bi u Citronellal Đây h p ch t hóa học có ngu n g c tự nhiên đư c quan b o vệ môi trư ng Mỹ (US EPA) sử d ng làm thu c trừ sâu sinh học có tính xua đu i nhiều loài mu i côn trùng khác, có kh ch ng n m r t t t Trong nghiên cứu hàm lư ng ch t Citronellal có tinh d u loài E citriodora r t l n, chi m 84,γ %, đ ng th i hàm lư ng tinh d u thu đư c c a loài đ t giá trị l n nh t s ba loài B ch đàn nghiên cứu Bên c nh tinh d u loài E citriodora chứa m t s h p ch t khác có ho t tính diệt trừ côn trùng isopulegol, ậ caryophyllene Trong tinh d u loài B ch đàn xanh B ch đàn tr ng có chứa h p ch t Eucalyptol (1-8 cineole), α-pinene, - pinene, ậcaryophyllene, ậeudesmol, isopulegol v i tỉ lệ cao T t c h p ch t có ho t tính sinh học diệt trừ xua đu i côn trùng, th m chí có th tiêu diệt c d i m t s qu c gia khác ch t o thành công thu c trừ sâu sinh học từ tinh d u B ch đàn đ thay th thu c trừ sâu hóa học v n r t đ c h i v i môi trư ng Như v y n u t n d ng đư c ph n lo i b khai thác g B ch đàn s thu đư c m t lư ng s n ph m r t l n có Ủ nghĩa thân thiện v i môi trư ng Footer Page 72 of 123 72 Header Page 73 of 123 thu c trừ sâu sinh học Bên c nh việc thu đư c thu c trừ sâu sinh học có th nh n đư c s n ph m đ u vào đ t o m t s lo i thu c xoa bóp, thông mũi điều trị n m da đ u Footer Page 73 of 123 73 Header Page 74 of 123 K T LU N VÀ KHUY N NGH K t lu n Từ k t qu nghiên cứu c a đề tài, có th rút m t s k t lu n sau: Đã đánh giá đư c hiệu qu , th i gian chi t t i ưu B ch đàn hai phương pháp tách chi t tinh d u phương pháp chi t dòng ngưng liên t c phương pháp c t lôi cu n nư c thông qua kh i lư ng thành ph n hoá học c a tinh d u; + Phương pháp c t lôi cu n nư c: th i gian chi t gi v i nhiệt đ 980C nh n đư c kh i lư ng tinh d u l n nh t từ m u nghiên cứu; + Phương pháp chi t dòng ngưng liên t c: th i gian chi t β gi nhiệt đ 1000C nh n đư c toàn diện thành ph n h p ch t hoá học tinh d u; Đã xác định đư c thành ph n hóa học có tinh d u c a ba loài B ch đàn: E camaldulensis E globulus tr ng t i Xuân Mai, Chương Mỹ, Hà N i E citriodora tr ng t i L c Lam, B c Giang + Loài E camaldulensis xác định đư c có mặt c a 39 h p ch t hoá học, ch t Eucalyptol (32,6%); + Loài E globulus xác định đư c có mặt c a 50 h p ch t hoá học, ch t α-pinene (27,3%); + Loài E citriodora xác định đư c có mặt c a γ5 h p ch t hoá học, ch t Citrolelal (84,γ %) Đã sử d ng chương trình tính toán PASS đ dự đoán đư c ho t tính sinh học c a m t s ch t n hình tinh d u B ch đàn Eucalyptol, αPinene , ậCaryophyllene, Limonene Các ho t tính b n c a ch t là: kháng n m, kháng sinh, kháng vi khu n, kháng vi rút; ức ch men th sinh v t, ức ch chlorophill thực v t; kh trị bệnh long đ m, trị r i lo n gan, viêm k t m c, Footer Page 74 of 123 74 Header Page 75 of 123 Trên s k t qu dự đoán ho t tính sinh học c a ch t có mặt tinh d u B ch đàn kh o sát thực t nêu lên m t s nh hư ng x u liên quan B ch đàn v i môi trư ng sinh thái t i khu vực tr ng rừng B ch đàn V i k t qu nghiên cứu đ t đư c m m t hư ng nghiên cứu m i việc đánh giá nh hư ng c a h p ch t có mặt tự nhiên đ n môi trư ng sinh thái; hư ng nghiên cứu làm s khoa học rút k t lu n đ c học môi trư ng c a h p ch t tự nhiên, t o tiền đề cho việc lựa chọn ch t có ho t tính sinh học có ngu n g c tự nhiên ph c v nghiên cứu thử nghiệm m t thực th sinh học c th ; Những k t qu nghiên cứu v y s giúp tìm ki m lo i thu c trừ sâu bệnh có ngu n g c tự nhiên, thay th lo i thu c hóa học t ng h p v n r t đ c h i đ i v i môi trư ng sinh thái Khuy n ngh - C n có đánh giá thực tr ng quy ho ch l i vùng tr ng rừng B ch đàn nư c ta s b o đ m gi m thi u t i đa nguy làm suy thoái môi trư ng đ t tác đ ng có h i đ n đ ng thực v t - Lựa chọn m t s hệ sinh thái rừng B ch đàn n hình đ nghiên cứu tính đa d ng sinh học, từ có điều kiện đánh giá m t cách toàn diện tác đ ng c a B ch đàn đ n môi trư ng sinh thái; - C n ti p t c nghiên cứu tinh d u B ch đàn c p cao thành ph n hóa học c p tu i, tr ng địa phương khác mùa khác đ tìm m t s m i tương quan chúng v i ch t lư ng tinh d u c a B ch đàn Lựa chọn m t s ch t n hình tinh d u B ch đàn đ thử nghiệm ho t tính sinh học, từ có th lựa chọn loài B ch đàn cho ch t có ho t tính sinh học t t nh t, thân thiện v i môi trư ng đ gieo tr ng diện r ng Footer Page 75 of 123 75 Header Page 76 of 123 - C n ti p t c nghiên cứu m t cách sâu r ng thành ph n hóa học tinh d u B ch đàn c p tu i khác nhau, tr ng địa phương khác mùa khác đ tìm m i tương quan chúng v i ch t lư ng tinh d u c a B ch đàn; - Lựa chọn m t s ch t n hình tinh d u B ch đàn đ thử ho t tính sinh học từ có th lựa chọn loài B ch đàn cho ch t có ho t tính sinh học t t nh t, thân thiện v i môi trư ng đ gieo tr ng diện r ng Footer Page 76 of 123 76 Header Page 77 of 123 TÀI LI U THAM KH O Ngô Kim Chi (2000), Mô hình định l ợng, ph ơng pháp thống kê nghiên cứu t ơng quan cấu trúc – hoạt tính dẫn xuất Protoberberin, Lu n án ti n sĩ hóa học, Viện hóa học, Việt Nam Đ T t L i (β001), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xu t b n Y học, Hà N i Nguy n Văn Minh (β010), ắCác phương pháp s n xu t tinh d u”, Bản tin khoa học công nghệ, Viện nghiên cứu d u có d u, (1), βγ-30 Lã Đình M i (β00β), Tài nguyên thực vật có tinh dầu Việt Nam, tập II, Nhà xu t b n Nông nghiệp, Hà N i Nguy n Đình Triệu (β006), Các ph ơng pháp vật lý ứng dụng hóa học, Nhà xu t b n Đ i học Qu c gia Hà N i, Hà N i Dairy R Batish, Harminder pal Singh, Ravinder Kumar Kohli, Shalinder Kaur (β008), ắEucalyptus essential oil as a natural pesticide”, Forest Ecology and Management, (256), 2166-2174 European commission (β009), ắEucalyptus essential oil as an alternative to chemistry pesticide”, Science for Environment policy, Special issue 13 Filimonov D A., Poroikov V V (2006), Prediction of biological activity spectra for organic compounds, Russian Chemical Journal, 50 (2), 66-75 H P Singh, D R Batish , N Setia R K Kohli (β005), ắHerbicidal activity of volatile oils from Eucalyptus citriodora against Parthenium hysterophorus”, Annals of Applied Biology, (146, issue 1), 89-94 10 LIU Yu-Qing1 and et (2010), ắToxicity of -Caryophyllene from Vitex negundo (Lamiales: Verbenaceae) to Aphis gossypii Glover (Homoptera: Aphididae) and its action mechanism”, CNKI journal Footer Page 77 of 123 77 Header Page 78 of 123 11 National institute of materia medica Hanoi ậ Vietnam (2001), Selected medicinal plants in Vietnam, Vol I, Science and technology publishing house, Hanoi 12 Rab M A (1994), ắChanges in physical properties of a soil associated with logging of Eucalyptus regnans forest in sountheastern Australia”, Forest Ecology and Management, (70), 215-229 13 Mouhssen Lahlou (β004), ắMethod to stuty the phytochemistry and Bioactivity of Eucalyptus oil”, Phytotheapy reasearch, (18), 435-448 14 P A Morrow and Laurel R Fox (1980), ắEffects of variation in Eucalyptus Essential Oil yeild on insect growth and garazing damage”, Oecologia, (45), 209-219 15 Poroikov V V., Filimonov D A., Borodina Yu V., Lagunin A.A., Kos A (2000), ắRobustness of biological activity spectra predicting by computer program PASS for non-congeneric sets of chemical compounds”, J Chem Inform Comput Sci., 40 (6), 1349-1355 16 Soto M., Field J A., Lettinga G., Méndez R and Lema J M (1991), ắAnaerobic biodegradability and toxicity of eucalyptus fiber board manufacturing wastewater”, Journal of Chemical Technology & Biotechnology, (52), 163ậ176 17 Sukontason, Boonchu, Choochote (β004), ắEffective of Eucalyptol on house fly and blow fly”, Rev Inst Med Trop S Paulo, 46 (2), 97-101 18 Yang Y.C., Choi H C., (2004), ắOvicidal and adulticidal activity of Eucalyptus globulus leaf oil terpenoids against Pediculus humanus capitis”, Agric Food Chem, (52), 2507-2511 Footer Page 78 of 123 78 Header Page 79 of 123 PH N PH L C Footer Page 79 of 123 79 Header Page 80 of 123 PH L C M T S CH T CHÍNH TRONG TINH D U LỄ B CH ĐÀN Tên thông TT thư ng α -pinene Tên qu c t (1S,5S)-2,6,6-Trimethyl Công thức Công thức phân tử c ut o C10H16 CASS # 80-56-8 bicyclo[3.1.1]hept-2-ene -pinene 6,6-dimethyl- 2-methylenebicyclo C10H16 127-91-3 [3.1.1] heptane -cymene (1S,5S)-2,6,6-Trimethyl C10 H14 123-35-3 2- C10H18O 470-82-6 bicyclo[3.1.1]hept-2-ene eucalyptol (1-8 cineole) Footer Page 80 of 123 1,3,3-trimethyloxabicyclo[2,2,2]octane 80 Header Page 81 of 123 (E)-betaocimene (E)-3,7-Dimethyl-1,3,6-octatriene C10 H16 3779-61-1 Linalool 3,7-dimethylocta-1,6-dien-3-ol C10H18O 78-70-6 citrolellal 3,7-dimethyloct-6-en-1-al C10 H18 O 470-82-6 isopulegol 5-methyl-2-prop-1-en-2ylcyclohexan-1-ol C10H18O Glyoxime glyoxal dioxime C2H4N2O2 557-30-2 C10 H18 O 7540-51-4 C10 H18 O 498-16-8 C15 H24 87-44-5 10 -citronellol 11 (-)-lavandulol 12 caryophyllene Footer Page 81 of 123 -Rhodinol, (S)-3,7-Dimethyl-6octen-1-ol 2-isopropylpentyl-5-methyl-4hexen-1-ol 4,11,11-trimethyl-8-methylenebicyclo[7.2.0]undec-4-ene 81 50 Footer Page 82 of 123 13 4.183 12 100 Time 82 28 29 8.057 6.640 8.667 26 37 200 8.147 32 8.873 38 7.860 30 31 8.213 33 8.350 34 8.427 35 8.533 36 7.130 7.260 27 150 6.897 19 25 250 5.063 6.030 18 2.727 10 11 3.380 4.003 24 31 7.890 18 8.170 32 8.243 33 8.377 34 8.560 35 8.690 36 8.880 28 29 30 6.927 7.210 7.283 6.393 25 6.550 26 6.670 27 6.060 4.543 13 4.677 14 4.770 15 4.893 16 5.000 17 5.080 5.177 19 5.387 20 5.503 21 5.580 22 5.750 23 12 2.960 4.223 2.620 100 4.510 14 4.647 15 4.743 16 4.837 17 4.980 5.160 20 5.367 21 5.483 22 5.613 23 5.730 24 11 3.967 10 3.777 3.343 2.043 1.657 1.387 37 2.470 1.940 1.463 2.743 [mV] 2.930 2.597 2.460 [mV] 1.923 1.453 200 50 1.633 Voltage 250 2.020 1.363 Voltage Header Page 82 of 123 PH L C S C Đ PHÂN TÍCH CÁC M U TINH D U LÁ B CH ĐÀN 8 10 CỄC TH I GIAN CHI T KHỄC NHAU S c đ m u tinh d u loài E camaldulensis chi t th i gian gi D:\Nang\NCKH2010\EC-S2-11-8-L1 150 Time 10 12 [min.] β S c đ m u tinh d u loài E camaldulensis chi t th i gian γ gi D:\Nang\NCKH2010\ES1-16.8L3 12 [min.] 50 Footer Page 83 of 123 3.950 10 5.827 11 100 Time 10 83 34 15.177 14.483 50 49 14.023 47 45 46 48 12.793 11.890 40 11.173 36 10.447 29 33 10 13.697 12.910 13.147 12.180 41 12.367 42 12.487 43 35 44 10.873 25 9.693 8.880 11.300 37 11.413 38 11.570 39 10.720 22 250 10.003 30 10.123 31 32 10.187 21 8.130 18 26 9.357 27 9.497 28 8.033 7.343 12 13 14 11.856 13.814 14.124 10 11 65 10.634 9.469 9.182 8.528 8.627 8.658 8.707 8.2108.140 7.857 50 9.213 19 200 8.453 23 8.583 24 7.627 20 150 7.797 14 6.900 15 7.017 16 7.180 17 6.200 12 6.377 13 6.573 5.590 4.490 4.663 4.767 67 5.007 5.1038 2.637 1.447 1.647 Voltage 8.848 Voltage Header Page 83 of 123 PH L C S C Đ PHÂN TÍCH CÁC M U TINH D U R B CH ĐÀN CỄC TH I GIAN CHI T KHỄC NHAU 1.S c đ tinh d u chi t từ m u r loài E camaldulensis thời gian [mV] D:\Nang\NCKH2010\Re-ECI-S1-L5 250 200 150 100 Time 12 14 [min.] β S c đ tinh d u m u r loài E camaldulensis th i gian chi t γ gi i [mV] D:\Nang\NCKH2010\Re-EC-S5-L1 15 [min.] Header Page 84 of 123 PH L C PH MS C A M T S H P CH T TRONG TINH D U B CH ĐÀN A b u n d a n c e S c a n (2 9 m in ) : S T 3 T D \ d a t a m s 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 7 0 5 0 0 0 0 0 0 0 m 0 1 0 / z - -> Ph m/z c a beta- -caryophyllene A b u n d a n c e S c a n (2 m in ) : S T T D \ d a t a m s 1 0 0 0 0 0 0 1 1 0 3 0 0 1 9 0 0 0 9 0 5 0 0 0 0 0 0 0 1 m / z > Ph m/z c a aromadendren Footer Page 84 of 123 84 0 2 ... c t nh bên c a ch t ph thu c vào c u trúc đặc bi t c a M t ch t có th có r t nhiều ho t t nh sinh học khác M t s ho t t nh có th đư c t m th y nghiên cứu lỦ thuy t, m t s ho t t nh đư c ph t thử... trùng c a tinh d u m t s loài B ch đàn đư c mô t B ng [6] Bảng Ho t t nh trừ côn trùng tinh dầu số loài Bạch đàn Loài B ch đàn Sinh v t thử nghiệm Ngu n Xua đu i mu i vằn trư ng thành Erler et al... ch t tinh d u B ch Footer Page of 123 Header Page of 123 đàn v i ho t t nh trừ sâu t ch chi t từ r t nhiều lo i B ch đàn khác cho B ng [6] Bảng Thành phần tinh dầu t ch chi t từ số loài Bạch đàn