Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicilium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau (luận văn thạc sĩ)
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - VŨ XUÂN ĐẠT NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG NẤM LECANICILLIUM KÍ SINH CÔN TRÙNG ĐỂ KIỂM SOÁT RỆP HẠI RAU LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2011 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU .2 1.1 1.1.1 Đặc điểm sinh học 1.1.2 Tình hình rệp hại trồng giới 1.2 Thuốc diệt côn trùng hóa học 1.2.1 Tình hình sản xuất sử dụng 1.2.2 Ưu nhược điểm 1.3 Rệp hại trồng Thuốc diệt côn trùng nguồn gốc sinh học 11 1.3.1 Phân loại 11 1.3.2 Ưu nhược điểm 12 1.3.3 Tình hình nghiên cứu, sản xuất sử dụng .13 1.3.4 Khả kiểm soát rệp hại trồng nấm Lecanicillium 17 1.4 Sản xuất bào tử nấm kí sinh côn trùng 18 1.5 Ảnh hưởng môi trường lên sinh bào tử nấm Lecanicillium 19 1.5.1 Nguồn carbon 19 1.5.2 Nguồn nitơ .20 1.5.3 Nhiệt độ môi trường .21 1.5.4 Độ ẩm không khí độ ẩm chất 21 1.5.5 Một số yếu tố khác 21 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 23 2.1 Vật liệu, hóa chất thiết bị 23 2.1.1 Chủng giống plasmid 23 2.1.2 Hóa chất 23 2.1.3 Dung dịch đệm 24 2.1.4 Môi trường nuôi cấy .24 Trường Đại học KHTN ii Luận văn thạc sĩ Sinh học 2.1.5 2.2 Vũ Xuân Đạt Thiết bị 24 Phương pháp nghiên cứu .25 2.2.1 Sàng lọc chủng nấm có độc lực diệt rệp cao .25 2.2.2 Các phương pháp sinh học phân tử 27 2.2.3 Xác định ảnh hưởng điều kiện môi trường lên sinh bào tử chủng nấm 485 29 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 Sàng lọc chủng nấm có độc lực cao .32 3.2 Định tên chủng nấm 485 34 3.3 Ảnh hưởng điều kiện môi trường lên sinh bào tử L lecanii 485 36 3.3.1 Ảnh hưởng nguồn chất 36 3.3.2 Ảnh hưởng tỉ lệ thành phần chất .37 3.3.3 Ảnh hưởng độ dày chất 37 3.3.4 Ảnh hưởng độ ẩm chất 39 3.3.5 Ảnh hưởng nhiệt độ 40 3.3.6 Ảnh hưởng số nguồn nitơ vô 41 3.3.7 Ảnh hưởng nồng độ (NH4)2SO4 42 3.3.8 Ảnh hưởng nồng độ MgSO4 .43 3.3.9 Ảnh hưởng nồng độ KH2PO4 .44 3.3.10 Ảnh hưởng thời gian chiếu sáng 45 3.3.11 Ảnh hưởng thời gian lên men 46 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 PHỤ LỤC 60 Trường Đại học KHTN iii Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt MỞ ĐẦU Rệp (Aphidoidae) nhóm côn trùng chích hút nhựa phổ biến giới, phân bố rộng rãi vùng ôn đới, cận nhiệt đới nhiệt đới Chúng kí sinh 11000 loài thuộc 243 họ khác nhau, có nhiều trồng quan trọng bông, cải, cải dầu, loại đậu, cà chua, khoai tây, ngũ cốc [39] Rệp không phá hoại trực tiếp cách chích hút nhựa mà truyền virus gây bệnh cho Hàng năm, rệp với côn trùng khác gây thiệt hại 15% sản lượng trồng toàn giới [22] Do tính chất nguy hại rệp, việc sử dụng biện pháp phòng trừ rệp cần thiết Biện pháp phòng trừ rệp phổ biến sử dụng thuốc diệt côn trùng hóa học Mặc dù có ưu điểm phổ tác dụng rộng hiệu tác dụng nhanh, thuốc hóa học ngày bộc lộ rõ nhược điểm nhanh bị kháng côn trùng sau thời gian sử dụng, gây ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng xấu đến sức khỏe người Với ưu điểm vượt trội độ thân thiện với môi trường, hệ sinh thái sức khỏe người, thuốc diệt côn trùng sinh học coi lựa chọn có tiềm lớn xu hướng phát triển nông nghiệp bền vững Lecanicillium chi nấm có khả kí sinh tự nhiên rệp nhiều loài côn trùng khác Từ năm 1960, giới có nhiều công trình nghiên cứu ứng dụng Lecanicillium để diệt rệp bảo vệ trồng, nhiều sản phẩm sản xuất thương mại hóa Tuy nhiên, kết đạt nghiên cứu sử dụng thuốc diệt côn trùng sinh học hạn chế Năm 2000, giá trị thương mại thuốc diệt côn trùng sinh học sử dụng toàn giới chiếm 1,8% tổng giá trị loại thuốc diệt côn trùng Vì vậy, việc tăng cường nghiên cứu phát triển chế phẩm diệt rệp từ nấm Lecanicillium cần thiết Trong khuôn khổ đề tài hợp tác quốc tế Phòng Công nghệ Sinh học Enzyme, viện Công nghệ Sinh học, viện KH CN Việt Nam năm 2010-2013 Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn làm chủ quản, thực đề tài: "Nghiên cứu sử dụng nấm Lecanicillium kí sinh côn trùng để kiểm soát rệp hại rau" Trường Đại học KHTN Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Rệp hại trồng 1.1.1 Đặc điểm sinh học Rệp (Aphidoidae) họ lớn thuộc lớp côn trùng, động vật không xương sống, thể chia thành ba phần (đầu, ngực, bụng), có ba cặp chân phân đốt, mắt kép cặp râu, thể bao bọc khung kitin, chiều dài từ đến 10 mm (hình 1.1) Khoảng 3700 loài rệp biết đến giới [39] Râu Đầu Ống tiết Đuôi Ngực Bụng Mắt Mắt kép chân chân Vòi chích hút chân Hình 1.1 Cấu tạo rệp Rệp nhóm côn trùng chích hút nhựa phổ biến giới, phân bố tập trung vùng ôn đới [51], rệp phân bố phổ biến vùng nhiệt đới cận nhiệt với độ đa dạng thấp Khoảng 250 loài rệp côn trùng phá hoại nguy hiểm nông, lâm nghiệp cần kiểm soát Tuy nhiên, đứng quan điểm động vật học, rệp nhóm động vật thích nghi tốt với môi trường nhờ khả sinh sản vô tính [67] Phần lớn rệp có thân mềm, màu xanh, đen, nâu, hồng không màu (hình 1.2) Phương thức dinh dưỡng rệp chích hút nhựa miệng có cấu tạo kiểu chích hút Khi chất dinh dưỡng trở nên nghèo nàn mật độ rệp đông, số loài rệp sinh có cánh để phát tán nơi khác Nhiều loài rệp kí sinh loài nhất, số khác chẳng hạn Myzus Trường Đại học KHTN Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt persicae (rệp đào) kí sinh hàng trăm loài thuộc nhiều họ khác Khi chích hút, chúng truyền virus từ bệnh sang khỏe mạnh số trồng như: khoai tây, ngũ cốc, củ cải đường, cam, quýt [36] Những vết chích hút rệp trở thành nơi bị tổn thương dễ dàng bị nấm xâm nhập gây bệnh cho A B C D Hình 1.2 Rệp hại trồng Myzus persicae (A B), Aphis gossypii (C) Aphis illinoisensis (D) Ở rệp có hai kiểu sinh sản đơn tính hữu tính Nhiều loài có thay đổi kiểu sinh sản đơn tính hữu tính phức tạp Sự thay đổi hai kiểu sinh sản để sinh trứng ấu trùng, thay đổi chủ thân gỗ chủ thân thảo Khoảng 10% loài rệp thay đổi kiểu sinh sản để thích nghi với thay đổi chủ [51] Mặc dù số loài rệp có đực cái, có quần thể Vào mùa đông, nhiệt độ thấp trứng sinh ra, mùa xuân trứng nở thành rệp Dạng sinh sản phổ biến rệp đơn tính sinh con, rệp sinh có đặc điểm giống hệt rệp mẹ ngoại trừ kích thước Quá trình sinh lặp lặp lại suốt mùa hè, sinh nhiều hệ, thời gian sống hệ từ 20 đến 40 ngày, từ rệp nở vào mùa xuân sinh hàng nghìn rệp Chẳng hạn, rệp bắp cải (Brevicoryne brassicae) sinh 41 lứa rệp mùa sinh sản Trường Đại học KHTN Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt Mùa Xuân Mùa Đông Mùa Hè Trứng đình dục Rệp ban đầu Rệp đực * Rệp không cánh * có cánh không cánh Rệp vô tính Rệp vô tính không cánh có cánh Rệp vô tính sinh rệp hữu tính Mùa Thu Hình 1.3 Vòng đời rệp [75] Vào mùa thu, có thay đổi cường độ chiếu sáng, nhiệt độ, giảm sút nguồn thức ăn chất lượng thức ăn, rệp sinh rệp đực rệp Đặc điểm di truyền rệp đực giống hệt rệp mẹ ngoại trừ việc nhiễm sắc thể giới tính Rệp hữu tính thiếu cánh, chí thiếu vòi chích hút [51] Khi trưởng thành, rệp giao phối với rệp đực đẻ trứng Trứng sống sót qua mùa đông khắc nghiệt nở thành rệp có cánh không cánh (hình 1.3) Tuy nhiên, môi trường ấm áp vùng nhiệt đới nhà kính, rệp sinh sản vô tính qua nhiều năm [36] Một số loài rệp sinh rệp có cánh vào mùa hè nguồn thức ăn chất lượng thức ăn giảm sút Rệp có cánh di cư để sinh quần thể chủ mới, thường khác loài với chủ ban đầu Ví dụ rệp táo (Aphis pomi), sau sinh nhiều hệ rệp không cánh chủ điển hình sinh dạng có cánh bay kí sinh cỏ ngô Đặc biệt, số loài có Trường Đại học KHTN Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt thể sinh sản "lồng", rệp mẹ sinh rệp rệp chuẩn bị sinh hệ có thể Cách sinh sản ảnh hưởng đến kích thước rệp tốc độ sinh sản tăng lên [28], [59] Phần lớn rệp có thân mềm nên chúng dễ dàng bị giết nhiều kẻ thù tự nhiên bọ rùa ăn rệp, ong bắp cày kí sinh, ấu trùng muỗi kí sinh, nhện cua, vi khuẩn, virus, loài nấm kí sinh côn trùng Neozygites fresenii, Entomophthora, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae Lecanicillium lecanii 1.1.2 Tình hình rệp hại trồng giới Sản lượng nông nghiệp giới hàng năm bị thiệt hại khoảng 15% côn trùng [22], Mỹ 13% [63] Mặc dù chưa có thống kê thức thiệt hại nông nghiệp rệp số 300 loài côn trùng gây hại nghiêm trọng [54] có đến 250 loài rệp Chúng tác nhân gây hại nhiều loại trồng quan trọng bông, đậu tương, hướng dương, củ cải đường, khoai tây, ngô, ngũ cốc rau cải Nhiều loài rệp có khả kí sinh nhiều loại khác Aphis gossypii, Myzus persicae Aphis craccivora Theo thống kế Tatchell (1989), rệp phá hoại nhiều loại trồng Vương quốc Anh Sản lượng bị thiệt hại thường mức 4-10%, lên đến 46% đậu (bảng 1.1) Ước tính giá trị thiệt hại lên đến 70 triệu bảng Anh Aphis gossypii (rệp bông) kí sinh 700 loại khác toàn giới, bao gồm nhiều quan trọng dưa hấu, dưa chuột, bí xanh, bí ngô, ớt, cam quýt Một chủ bị A gossypii phá hoại nhiều vải (Gossypium hirsutum), thuộc nhóm công nghiệp quan trọng giới Theo Xia (1997), sản lượng hàng năm Trung Quốc bị thiệt hại 10-15% chủ yếu A gossypii [83] Với sản lượng Trung Quốc năm 2011 7,4 triệu (http://www.cotton.org/econ/cropinfo/cropdata/rankings.cfm) số thiệt hại lên đến 0,8-1,2 triệu Bảng 1.1 Thiệt hại số trồng rệp Vương quốc Anh [78] Trường Đại học KHTN Luận văn thạc sĩ Sinh học Loại Lúa mì đông Vũ Xuân Đạt Rệp gây hại Dạng gây hại Sản lượng bị thiệt hại (%) Sitobion avenae Phá hoại 9,7-12,5 Metopolophium dirhodum Phá hoại 13 Lúa mạch đông Rhopalosiphum padi Truyền bệnh 0-86 Lúa mạch xuân M dirhodum Phá hoại 8,8 Củ cải đường Myzus persicae Truyền bệnh 6,5 Khoai tây Macrosiphum euphorbiae Phá hoại 5,7 Myzus persicae Phá hoại 4,4 Các loại đậu Aphis fabae Phá hoại 16,4-46,3 Đậu Hà Lan Acyrthosiphon pisum Phá hoại 8,0-15,8 Cây hoa bia Phorodon humuli Phá hoại 9,2 Đậu tương loại hạt dầu trồng nhiều giới [5], suất bị đe dọa nghiêm trọng A glycines (rệp đậu tương) Sản lượng hạt bị thiệt hại ước tính khoảng 34% [72], theo tính toán Catangui cộng (2009), số thiệt hại chí lên đến 48-72% Nguyên nhân rệp chích hút làm giảm 50% tốc độ quang hợp [18] Đậu đũa (Vigna unguiculata) loại trồng nhiều châu Phi, ước tính sản lượng hàng năm khu vực khoảng 3,36 triệu Không giống vải bị phá hoại chủ yếu A gossypii, đậu đũa bị phá hoại nhiều loại rệp A craccivora, A leguminosae, A laburni, A fabae, Myzus persicae A gossypii Ở khu vực biện pháp bảo vệ, sản lượng thiệt hại lên đến 20-100% [60] Lipaphis erysimi (rệp cải dầu) kí sinh số loài chủ yếu loại cải cải dầu Ngoài kí sinh cà chua bí xanh Ở phía đông miền trung Ấn Độ, L erysimi với M persicae Brevicoryne brassicae ba loài rệp nguy hiểm cải dầu (Brassica juncea) Trong L erysimi Trường Đại học KHTN Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt phá hoại nhiều nhất, riêng gây thiệt hại 35,4-91,3% sản lượng [15], [76] Theo nghiên cứu Patel cộng (2004), biện pháp bảo vệ, L erysimi gây thiệt hại 80,6-97,6% sản lượng cải dầu [61] Trong nghiên cứu khác, Razaq cộng (2011) rằng, Brevicoryne brassicae L erysimi gây thiệt hại 75,1-81,9% sản lượng cải dầu Multan, Punjab, Pakistan [69] Ngoài cải dầu, B brassicae phá hoại nhiều quan trọng khác như, súp lơ, cà rốt củ cải Myzus persicae kí sinh hàng trăm loại thuộc 40 họ khác Các phân bố rộng khắp giới, nhiều phân bố vùng lạnh atisô, củ cải, bắp cải, cà rốt, súp lơ, ngô, su hào, cải dầu Củ cải đường, cà chua, khoai tây chủ bị M persicae phá hoại [35] Aphis craccivora (rệp đậu lăng) loại rệp kí sinh nhiều chủ khác Ngoài đậu đũa, chúng phá hoại nhiều khác bông, táo, cà rốt, rau diếp, lúa mì, đậu lăng Hossain cộng (2006) nghiên cứu thiệt hại A craccivora gây đậu lăng, sản lượng bị thiệt hại cao lên đến 9% [40] Cũng nghiên cứu này, sản lượng đậu lăng tăng 0,91-9,89% áp dụng biện pháp diệt rệp gieo trồng tránh rệp Ước tính A craccivora gây thiệt hại 12,8-61,1% sản lượng đậu ngựa (Vicia faba) Sids ARS, Beni-Suef Governorate, miền Trung Ai Cập [25] Rệp làm giảm suất trồng không phá hoại trực tiếp mà truyền virus gây bệnh A craccivora truyền virus gây bệnh rụng đậu lăng, đậu ngựa, đậu gà [44], [58] M persicae loại nguy hiểm 10 loại rệp truyền virus gây bệnh rụng khoai tây [57], [77] Rệp truyền virus gây bệnh khảm làm thiệt hại 60% suất dưa chuột [79] Không phá hoại rau công nghiệp, rệp côn trùng nguy hiểm lương thực Diuraphis noxia (rệp lúa mì Nga) chuyên phá hoại lúa mì, lúa mạch đen, lúa mạch trắng, yến mạch Theo nghiên cứu Akhtar cộng (2010), suất lúa mì bị giảm 7,9-34,2% D noxia phá hoại [7] Trường Đại học KHTN Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt 12 Số lượng bào tử (x10 /g chất) 13 11 10 0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 Nồng độ KH2PO4 (%) Hình 3.13 Ảnh hưởng nồng độ KH2PO4 lên sinh bào tử chủng L lecanii 485 Shi cộng (2009) dùng phương pháp tối ưu toán học để tìm nồng độ phù hợp số muối vô với sinh bào tử nấm V lecanii, kết cho thấy nấm V lecanii sinh bào tử cao KH2PO4 bổ sung vào môi trường với nồng độ 0,163% [74] Mặc dù sinh bào tử chủng L lecanii 485 môi trường bổ sung không bổ sung MgSO4 khác biệt ý nghĩa thống kê, MgSO4 với nồng độ 0,1% sử dụng để sản xuất bào tử chủng L lecanii 485 3.3.10 Ảnh hưởng thời gian chiếu sáng Trong ba chế độ chiếu sáng khảo sát, chủng L lecanii 485 sinh bào tử cao chế độ chiếu đáng thông thường (12 giờ/ngày) chế độ tối hoàn toàn với số lượng bào tử đạt (1,326 ± 0,050)×1010 (1,296 ± 0,028)×1010 bào tử/g chất, chế độ chiếu sáng 24 giờ/ngày số lượng bào tử đạt (1,191 ± 0,020)×1010/g chất (P < 0,01) (hình 3.14) Trường Đại học KHTN 45 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt Số lượng bào tử (x109/g chất) 14 12 10 12 24 Thời gian chiếu sáng (giờ/ngày) Hình 3.14 Ảnh hưởng thời gian chiếu sáng lên sinh bào tử chủng L lecanii 485 Từ kết thu được, chế độ chiếu sáng thông thường (12 giờ/ngày) chọn để sản xuất bào tử chủng L lecanii 485 Với chế độ chiếu sáng này, điện chiếu sáng không cần thiết phải sử dụng, trình lên men tận dụng ánh sáng tự nhiên, làm giảm chi phí điện cho trình lên men Võ Thị Thu Oanh cộng (2007) nghiên cứu ảnh hưởng ba chế độ chiếu sáng giờ/ngày, 12 giờ/ngày 24 giờ/ngày lên sinh trưởng sinh bào tử nấm Metarhizium anisopliae, kết cho thấy nấm sinh bào tử cao chế độ chiếu sáng 24 giờ/ngày [2] 3.3.11 Ảnh hưởng thời gian lên men Số lượng bào tử đạt phụ thuộc nhiều vào thời gian lên men trước sinh bào tử nấm cần có thời gian để phát triển hệ sợi Khi thời gian lên men để đạt số lượng bào tử tối đa ngắn chi phí sản xuất thấp Trong nghiên cứu này, sau ngày lên men, số lượng bào tử nấm L lecanii 485 đạt tối đa với (1,353 ± 0,019)×1010 bào tử/g chất Tiếp tục kéo dài thời gian lên men đến 10, 12 14 ngày, số lượng bào tử đạt (1,326 ± 0,050)×1010, (1,330 ± 0,038)×1010, (1,327 ± 0,012)×1010/g chất, tương đương với số lượng bào tử đạt sau ngày lên men Sau ngày lên men, Trường Đại học KHTN 46 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt số lượng bào tử thấp, đạt (1,257 ± 0,033)×1010 bào tử/g chất, 93% số lượng bào tử tối đa đạt sau lên men (P < 0,05) (hình 3.15) 14 13 Số lượng bào tử (x10 /g chất) 15 12 11 10 10 12 14 Thời gian lên men (ngày) Hình 3.15 Ảnh hưởng thời gian lên men lên sinh bào tử chủng L lecanii 485 Thời gian lên men ngày tương đương với thời gian nghiên cứu Shi cộng (2009) (8 ngày), tác giả lên men nấm V lecanii thu bào tử [74] Feng cộng (2000) cần ngày để lên men thu bào tử nấm V lecanii [26] Vu cộng (2008) cần đến 12 ngày để lên men chủng L lecanii 41185 đạt số lượng bào tử tối đa [81] Như vậy, sau lên men chủng nấm L lecanii 485 với điều kiện tối ưu, cụ thể: ngày lên men 30°C, chế độ chiếu sáng 12 giờ/ngày với chất bột lõi ngô/bột ngô (1:1, w/w) có độ dày 27,5 mm (tương đương 22g chất/bình lên men 250 ml), bổ sung lượng nước bổ sung 70% chất (tương đương độ ẩm môi trường chất 41%), nồng độ (NH4)2SO4 tương đương 0,1 mol N/1000 g chất, MgSO4 0,035% chất, KH2PO4 0,1% chất, đạt số lượng (1,353 ± 0,019)×1010 bào tử/g chất Trường Đại học KHTN 47 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt So với kết lên men chủng L lecanii 485 với chất bột lõi ngô/bột ngô (tỉ lệ 1:1, w/w), số lượng bào tử đạt sau tối ưu điều kiện nuôi cấy tăng 2,69 lần, từ (5,03 ± 0,26)×109 lên (1,353 ± 0,019)×1010 bào tử/g chất Số lượng bào tử đạt tương đối cao so sánh với số nghiên cứu sản xuất bào tử nấm Lecanicillium khác Trong nghiên cứu Feng cộng (2000) số lượng bào tử đạt 1,50×109/g chất [26], nghiên cứu Shi cộng (2009) số lượng bào tử đạt 1,1×1010/g chất [74], nghiên cứu Vu cộng (2008) số lượng bào tử đạt 1,8×1010/g chất [81] Với nguồn nguyên liệu chọn bao gồm bột lõi ngô, bột ngô, (NH4)2SO4, MgSO4, KH2PO4, kết tối ưu có tính khả thi cao áp dụng vào thực tế nguyên liệu rẻ tiền sẵn có Bên cạnh đó, phương pháp lên men rắn sử dụng nên dễ vận hành, chi phí đầu tư ban đầu vận hành thấp Trường Đại học KHTN 48 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ KẾT LUẬN Chủng 485 có độc lực cao rệp cải số chủng nấm nghiên cứu Trong điều kiện 21-25°C độ ẩm không khí 75-80%, dung dịch bào tử chủng 485 có mật độ 3×108/ml Tween 80 nồng độ 0,05% sau ngày phun lên rệp cải diệt 67% rệp Chủng 485 thuộc loài Lecanicillium lecanii theo phân tích so sánh trình tự gene 28S rRNA Điều kiện cho sinh bào tử tối đa chủng L lecanii 485 môi trường rắn là: lên men ngày 30°C, chế độ chiếu sáng 12 giờ/ngày với chất bột lõi ngô/bột ngô (1:1, w/w) có độ dày 27,5 mm, độ ẩm môi trường chất 41%, nồng độ (NH4)2SO4 tương đương 0,1 mol N/1000 g chất, MgSO4 0,035% chất, KH2PO4 0,1% chất Chủng L lecanii 485 lên men điều kiện tối ưu, đạt số lượng bào tử (1,353 ± 0,019)×1010/g chất ĐỀ NGHỊ Nghiên cứu phối trộn bào tử L lecanii 485 với chất phụ gia phù hợp để tạo chế phẩm có độc lực diệt rệp cải cao Phun thử nghiệm đồng ruộng với quy mô nhỏ để đánh giá hiệu diệt rệp cải chế phẩm bào tử nấm L lecanii 485 Đánh giá độc lực L lecanii 485 rệp ngô Trường Đại học KHTN 49 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt: Nguyễn Dương Khuê (2005), Sử dụng nấm Metarhizium anisopliae Sorok phòng trừ mối nhà (Coptotetrmes formosanus Shiraki) theo phương pháp lây nhiễm, Hội nghị côn trùng học toàn quốc lần thứ 5, Hà Nội Võ Thị Thu Oanh, Lê Đình Đôn, Bùi Cách Tuyến (2007), “Đặc điểm sinh học khả gây bệnh nấm Metarhizium anisopliae (METSCH.) Sorokin sâu khoang (Spodoptera litura F.) hại rau cải xanh (Brassica juncea L.)”, Tạp chí khoa học kỹ thuật Nông Lâm nghiệp, 1&2, pp 58-63 Phạm Thị Thuỳ, Trần Văn Huy, Nguyễn Duy Mạn (2005), Nghiên cứu hoàn thiện công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi nấm Beauveria Metarhizium để phòng trừ sâu hại đậu tương đậu xanh Hà Tĩnh năm 2003-2004, Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc, Hà Nội Tài liệu tiếng Anh: Abbott W S (1925), “A method of computing the effectiveness of an insecticide”, J Econ Entomol, 18, pp 265-267 Agnihotri A., Prem D (2007), Oils Quality Improvement in Rapeseed-Mustard, Souvenir, National Seminar on Changing Global Vegetable Oils Scenario: Issues and Challenges Before India Ahmad S., Ali Khan I., Hussain Z., Ali Shah S I., Ahmad M (2007), “Comparison of a biopesticide with some synthetic pesticides against aphids in rapeseed crop”, Sarhad J Agric, 24(4), pp 1117-1120 Akhtar L H., Hussain M., Iqbal R M., Amer M., Tarig A H (2010), “Losses in grain yield caused by russian wheat aphid Diuraphis noxia (Mordvilko)”, Sarhad J Agric, 26(4), pp 625-628 Andreotti G., Hou L., Freeman L E B., Mahajan R., Koutros S., Coble J., Lubin J., Blair A., Hoppin J A., Alvanja M (2010), “Body mass index, agricultural Trường Đại học KHTN 50 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt pesticide use, and cancer incidence in the agricultural health study cohort”, Cancer Causes Control, 21(11), pp 1759-1775 Angelo I C., Fernandes E K., Bahiense T C., Perinotto W M., Moraes A P., Terra A L., Bittencourt V R (2010), “Efficiency of Lecanicillium lecanii to control the tick Rhipicephalus microplus”, Vet Parasitol, 172(3-4), pp 317-322 10 Arevalo J., Hidalgo-Díaz L., Martins I., Souza J F., Castro J M C., Carneiro R M D G., Tigano M S (2009), “Cultural and morphological characterization of Pochonia chlamydosporia and Lecanicillium psalliotae isolated from Meloidogyne mayaguensis eggs in Brazil”, Trop Plant Pathol, 34(3), pp 158-163 11 Aspelin A L., Grube A H (1999), Pesticides industry sales and usage 1996 and 1997 market estimates, United States EPA 12 Barson G (1976), “Laboratory studies on the fungus Verticillium lecanii, a larval pathogen of the large elm bark beetle (Scolytus scolytus)”, Ann Appl Biol, 83, pp 207-214 13 Baysal Z., Uyar F., Aytekin C (2003), “Solid state fermentation for production of α-amylase by a thermotolerant Bacillus subtilis from hot-spring water”, Process Biochem, 38, pp 1665-1668 14 Blair A., Freeman L B (2009), “Epidemiologic studies of cancer in agricultural populations: observations and future directions”, J Agromed, 14, pp 125-131 15 Brar N S., Bakhetia D R C., Sekhon B S (1987), “Estimation of losses in yield of rapeseed and mustard due to mustard aphid, Lipaphis erysimi (Kalt.)”, J Oilseeds Res, 4(2), pp 261-264 16 Bukhari T., Takken W., Koenraadt C J M (2011), “Development of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana formulations for control of malaria mosquito larvae”, Parasit Vectors, 4(23), pp 1-14 Trường Đại học KHTN 51 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt 17 Carrasco-Tauber C (1989), Pesticide Productivity Revisited, MA, University of Massachusetts 18 Catangui M A., Beckendorf E A., Riedell W E (2009), “Soybean aphid population dynamics, soybean yield loss, and development of stage-specific economic injury levels”, Agron J, 101(5), pp 1080-1092 19 CEQ (1980), The Global 2000 Report to the President of the US Entering the 21st Century, Pergamon Press, New York 20 Colborn T., Myers J P., Dumanoski D (1996), Our Stolen Future: How We Are Threatening Our Fertility, Intelligence, and Survival: A Scientific Detective Story, Dutton, New York 21 Cuthbertson A G S., Blackburn L F., Northing P., Luo W., Cannon R J C., Walters K F A (2010), “Chemical compatibility testing of the entomopathogenic fungus Lecanicillium muscarium to control Bemisia tabaci in glasshouse environment”, Int J Environ Sci Tech, 7(2), pp 405-409 22 Damalas C A (2009), “Understanding benefits and risks of pesticide use”, Sci Res Essay, 4(10), pp 945-949 23 De Faria M R., Wraight S P (2007), “Mycoinsecticides and Mycoacaricides: A comprehensive list with worldwide coverage and international classification of formulation types”, Biol Control, 43, pp 237-256 24 Diaz B M., Oggerin M., Lopez Lastra C C., Rubio V., Fereres A (2009), “Characterization and virulence of Lecanicillium lecanii against different aphid species”, Bio Control, 54, pp 825–835 25 El-Defrawi G M., El-Harty E H (2009), Injury levels and yield loss model for the cowpea aphid (Aphis craccivora Koch) on Vicia faba L., 6th International Symposium of Mediterranean Group on Pesticide Research, Cairo, Egypt 26 Feng K C., Liu B L., Tzeng Y M (2000), “Verticillium lecanii spore production in solid-state and liquid-state fermentations”, Bioprocess Biosyst Eng, 23, pp 25-29 Trường Đại học KHTN 52 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt 27 Gao L., Liu X Z (2009), “A novel two stage cultivation method to optimize carbon concentration and carbon to nitrogen ratio for sporulation of biocontrol fungi”, Folia Microbiol, 54(2), pp 142-146 28 Gary C J., Liberty P A., Jocelyn B P (2005), “Effect of nitrogen fertilizer on the intrinsic rate of increase of the rusty plum aphid, Hysteroneura setariae (Thomas) (Homoptera: Aphididae) on rice (Oryza sativa L.)”, Environ Entomol, 34(4), pp 938-943 29 Gindin G., Levski S., Glazer I., Soroker V (2006), “Evaluation of the entomopathogenic fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana against the Red Palm Weevil Rhynchophorus ferrugineus”, Phytoparasitica, 34(4), pp 370-379 30 Gopalakrishnan C (1989), “Susceptibility of cabbage diamondback moth Plutella xylostella L to the entomofungal pathogen Verticillium lecanii (Zimmerman)”, Viegas Current Science, 58(22), pp 1256-1257 31 Grube A., Donaldson D., Kiely T., Wu L (2011), Pesticides industry sales and usage, 2006 and 2007 market estimates, United States EPA 32 Guclu S., Ak K., Eken C., Akyol H., Sekban R., Beytut B., Yildirim R (2010), “Pathogenicity of Lecanicillium muscarium against Ricania simulans”, Bull Insectol, 63(2), pp 243-246 33 Hall R A (1981), “A new insecticide against greenhouse aphids and whitefly: the fungus Verticillium lecanii”, Ohio Florists’ Assoc Bull, 626, pp 3-4 34 Hart K., Pimentel D (2002), “Public health and costs of pesticides”, Encyclopedia of Pest Management, Marcel Dekker, New York, pp 677-679 35 Heathcote G D (1962), “The suitability of some plant hosts for the development of the peach-potato aphid, Myzus persicae (Sulzer)”, Entomol Exp Appl, 5(2), pp 114-118 36 Henry G S (1997), “Aphid”, McGraw-Hill Encyclopedia of Science and Technology, McGraw-Hill, New York Trường Đại học KHTN 53 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt 37 Ho Q T., Tran T P., Nguyen T., Tran V H., Trinh T X., Bui X H., Dang T C., Tran T B (2010), Rearing Metarhizium anisopliae fungi at the household level for management of brown planthoppers in rice fields, 28th International Rice Research Conference, Hanoi, Vietnam 38 Hohenadel K., Harris S A., Mclaughlin J R., Spinelli J J., Pahwa P., Dosman J A., Demers P A., Blair A (2011), “Exposure to multiple pesticides and risk of non-Hodgkin lymphoma in men from six Canadian provinces”, Int J Environ Res Public Health, 8, pp 2320-2330 39 Holman J (2009), Host Plant Catalog of Aphids: Palaearctic Region, Springer Verlag, Berlin, Germany 40 Hossain A., Ferdous J., Salim M M R (2006), “Relative abundance and yield loss assessment of Lentil aphid, Aphis craccivora Koch in relation to different sowing dates”, J Agric Rural Dev, 4, pp 101-106 41 Howard T D., Hsu F C., Grzywacz J G., Chen H., Quandt S A., Vallejos Q M., Whalley L E., Cui W., Padilla S., Arcury T A (2010), “Evaluation of candidate genes for cholinesterase activity in farmworkers exposed to organophosphorus polymorphisms pesticides: in BCHE”, Association Environ of Health single Perspect, nucleotide 118(10), pp 1395-1399 42 Jenkins N E., Heviefo G., Langewald J., Cherry A J., Lomer C J (1998), “Development of mass production technology for aerial conidia for use mycopesticides”, Biocontrol News Inf, 19(1), pp 21-31 43 Johnson D L., Huang H C., Harper A M (1988), “Mortality of grasshoppers (Orthoptera: Acrididae) inoculated with a Canadian isolate of the fungus Verticillium lecanii”, J Invertebr Pathol, 52, pp 335-342 44 Kaiser W J., Danesh D (1971), “Biology of four viruses affecting Cicer arietinzrm in Iran”, Phytopathology, 61, pp 372-375 45 Kiely T., Donaldson D., Grube A (2004), Pesticides industry sales and usage, 2000 and 2001 market estimates, United States EPA Trường Đại học KHTN 54 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt 46 Kim H Y., Lee H B., Kim U C., Kim I S (2008), “Laboratory and field evaluations of entomopathogenic Lecanicillium attenuatum CNU-23 for control of green peach aphid (Myzus persicae)”, J Microbiol Biotechnol, 18(12), pp 1915-1918 47 Kim J J., Lee M H., Yoon C S., Kim H S., Yoo J K., Kim K C (2001), “Control of cotton aphid and greenhouse whitefly with a fungal pathogen”, Biological Control of Greenhouse Pests, Food & Fertilizer Technology Center, Taipei, Taiwan, pp 8-15 48 Kleespies R G., Zimmermann G (1992), “Production of blastospores by three strains of Metarhizium anisopliae (Metch.) Sorok In submerged culture”, Biocontrol Sci Technol, 2, pp 127-135 49 Kope H H., Alfaro R I., Lavallée R (2008), “Effects of temperature and water activity on Lecanicillium spp conidia germination and growth, and mycosis of Pissodes strobi”, BioControl, 53, pp 489-500 50 Le V V., Nguyen D D., Le K A., Pham K S., Tetsu A (2011), “Sex pheromone components and control of the citrus pock caterpillar, Prays endocarpa, found in the Mekong Delta of Vietnam”, J Chem Ecol, 37(1), pp 134-140 51 Mcgavin G C., Preston-Mafham K (1993), Bugs of the World, Of the World Series, Facts on File, New York 52 Miller G T (2002), Living in the Environment: Principles, Connections, and Solutions (12th Ed.), Wadsworth/Thomson Learning, Belmont, Califorlia 53 Milner R J (1997), “Prospects for biopesticides for aphid control”, Biocontrol, 42(1-2), pp 227-239 54 Moazami N (2002), “Biopesticides production”, Encyclopedia of Biological physiological and Health Sciences, Encyclopedia Of Life Support Systems, pp 1-52 55 Moo Y., Moreira M A R., Tengerdy R P (1983), “Principles of solid substrate fermentation”, Fungal Technology, Edward Arnold, London, pp 117-144 Trường Đại học KHTN 55 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt 56 Mussen E (1990), “California crop pollination”, Gleanings in Bee Culture, 118, pp 646-647 57 Nault L R (1997), “Arthropod transmission of plant viruses: a new synthesis”, Ann Entomol Soc Amer, 90, pp 521-541 58 Nene Y L., Reddy M V (1976), “Preliminary information on chickpea stunt”, Tropical Grain Legume Bulletin, 5, pp 31-32 59 Nevo E., Coll M ( 2001), “Effect of nitrogen fertilization on Aphis gossypii (Homoptera: Aphididae): variation in size, color, and reproduction”, J Econ Entomol, 94(1), pp 27-32 60 Ofuya T T (1997), “Control of cowpea aphid, Aphis craccivora Koch (Homoptera: Aphididae), in cowpea, Vigna unguiculata (L.) Walp.” Integr Pest Manag Rev, 2(4), pp 199-207 61 Patel S R., Awasthi A K., Tomar R K S (2004), “Assessment of yield losses in mustard (Brassica juncea L.) due to mustard aphid (Lipaphis erysimi Kalt.) under differrent thermal environments in Eastern Central India”, Appl Eco Environ Res, 2(1), pp 1-15 62 Pham T A., Kim J J., Kim K (2010), “Optimization of solid-state fermentation for improved conidia production of Beauveria bassiana as a mycoinsecticide”, Mycobiology, 38(2), pp 137-143 63 Pimentel D (1997), “Pest management in agriculture”, Techniques for Reducing Pesticide Use: Environmental and Economic Benefits, John Wiley & Sons, Chichester, UK, pp 1-11 64 Pimentel D (2005), “Enviromental and economic costs of the application of pesticides primarily in the United States”, Environ Dev Sustain, 7, pp 229252 65 Pimentel D., Acquay H., Biltonen M., Rice P., Silva M., Nelson J., Lipner V., Giordana S., Horowitz A., D’amore M (1993), “Assessment of environmental and economic impacts of pesticide use”, The Pesticide Trường Đại học KHTN 56 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt Question: Environment, Economics and Ethics, Chapman & Hall, New York, pp 47-84 66 Pimentel D., Stachow U., Takacs D A., Brubaker H W., Dumas A R., Meaney J J., O’neil J A S., Onsi D E., Corzilius D B (1992), “Conserving biological diversity in agricultural/forestry systems”, Bioscience, 42, pp 354-362 67 Piper R., Shanahan M (2007), Extraordinary Animals: An Encyclopedia of Curious and Unusual Animals, Greenwood Press, United States 68 Raimbault M (1998), “General and microbiological aspects of solid substrate fermentation”, Electron J Biotechnol, 1(3), pp 1-15 69 Razaq M., Mehmood A., Aslam M., Ismail M., Afzal M., Ali-Shad S (2011), “Losses in yield and yield components caused by aphids to late sown Brassica napus L., Brassica juncea L and Brassica carrinata A at Multan, Punjab (Pakistan)”, Pak J Bot, 43(1), pp 319-324 70 Richter E D (2002), “Acute human pesticide poisonings”, Encyclopedia of Pest Management, Dekker, New York, pp 3-6 71 Ridgway R L., Tinney J C., Macgregor J T., Starlert N J (1978), “Pesticide use in agriculture”, Environ Health Perspect, 27, pp 103-112 72 Riedell W E., Catangui M A., Beckendorf E A (2009), “Nitrogen, fixation, ureide, and nitrate accumulation responses to soybean aphid injury in Glycine max”, J Plant Nutr, 32(10), pp 1674-1686 73 Rombach M C (1989), “Production of Beauveria bassiana [Deuteromycotina: Hyphomycetes] sympoduloconidia in submerged culture”, Entomophaga, 34, pp 45-52 74 Shi Y., Xu X., Zhu Y (2009), “Optimization of Verticillium lecanii spore production in solid-state fermentation on sugarcane bagasse”, App Microbiol Biotechnol, 82, pp 921-927 Trường Đại học KHTN 57 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt 75 Shingleton A W., Sisk G C., Stern D L (2003), “Diapause in the pea aphid (Acyrthosiphon pisum) is a slowing but not a cessation of development”, BMC Dev Biol, 3(7), pp 1-12 76 Singh C P., Sachan G C (1994), “Assessment of yield losses in yellow sarson due to mustard aphid, Lipaphis erysimi (Kalt)”, J Oilseeds Res, 11(2), pp 179-184 77 Sylvester E S (1980), “Circulative and propagative virus transmission by aphids”, Ann Rev Entomol, 25, pp 257-286 78 Tatchell G M (1989), “An estimate of the potential economic losses to some crops due to aphids in Britain”, Crop Prot, 8, pp 25-29 79 Thackray D J., Diggle A J., Berlandier F A., Jones R A (2004), “Forecasting aphid outbreaks and epidemics of Cucumber mosaic virus in lupin crops in a Mediterranean-type environment”, Virus Res, 100(1), pp 67-82 80 Vu V H., Hong S I., Kim K (2007), “Selection of entomopathogenic fungi for aphid control”, J Biosci Bioeng, 104(6), pp 498-505 81 Vu V H., Hong S I., Kim K (2008), “Production of aerial conidia of Lecanicillium lecanii 41185 by solid-state fermentation for use as mycoinsecticide”, Mycobiology, 36(3), pp 183-189 82 Weiner B P., Worth R M (1972), “Insecticides: household use and respiratory impairment”, Adverse Effects of Common Environmental Pollutants, MSS Information Corporation, New York, pp 149-151 83 Xia J (1997), Biological control of cotton aphid (Aphis gossypii Glover) in cotton (inter) cropping systems in China: a simulation study, S.L Xia, Florida 84 Xu X., Yu Y., Shi Y (2011), “Evaluation of inert and organic carriers for Verticillium lecanii spore production in solid-state fermentation”, Biotechnol Lett, 33, pp 763-768 85 Zare R., Gams W (2001), “A revision of Verticillium sect Prostrata III Generic classification”, Nova Hedwigia, 72, pp 329-337 Trường Đại học KHTN 58 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt 86 Zhang M., Tang Q., Chen Z., Liu J., Cui H., Q S., Xia Y., Altosaar I (2009), “Genetic transformation of Bt gene into sorghum (Sorghum bicolor L.) mediated by Agrobacterium tumefaciens”, Sheng Wu Gong Cheng Xue Bao, 25(3), pp 418-423 87 Zhou P., Zhao Y., Li J., Wu G., Zhang L., Liu Q., Fan S., Yang X., Li X., Wu Y (2011), “Dietary exposure to persistent organochlorine pesticides in 2007 Chinese total diet study”, Environ Int, Epub ahead of print, available at http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0160412011001632 Trường Đại học KHTN 59 [...]... chứa cả nấm kí sinh côn trùng và vi khuẩn, tác dụng lên các côn trùng chích hút, sâu đục thân và côn trùng thân cứng Biomite: chứa hỗn hợp của V lecanii và một số sinh vật kí sinh khác, tác dụng lên ve bét phá hoại mùa màng Cơ chế diệt côn trùng của các chế phẩm này: Nấm tiết ra enzyme phân giải biểu bì côn trùng, sợi nấm đâm vào cơ thể côn trùng, kí sinh, hình thành bào tử và giết chết côn trùng sau... giết bởi nấm Beauveria bassiana Đó chính là cơ sở khoa học vững chắc cho việc nghiên cứu sản xuất các chế phẩm sinh học diệt côn trùng A Thế giới Sự đóng góp đặt nền móng cho xu hướng kiểm soát côn trùng bằng vi sinh vật là của Mechnikoff (1879) và Krassilnikow (1888), khi lần đầu tiên trình bày các nghiên cứu về khả năng sử dụng nấm kí sinh côn trùng Metarrhizium anisopliae để diệt côn trùng gây hại ngũ... Tech là chế phẩm chiết từ hạt neem, tác dụng lên hơn 400 loài côn Trường Đại học KHTN 13 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt trùng khác nhau nhưng không ảnh hưởng đến côn trùng có lợi Các chất này kiểm soát sự sinh trưởng và do đó kiểm soát số lượng côn trùng Bacillus thuringensis là một trong những vi khuẩn được sử dụng để kiểm soát côn trùng sớm nhất Năm 1901, Ishiwatari phát hiện ra một loại vi...Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân Đạt Như vậy, với nguy cơ làm giảm năng suất cây trồng của rệp, yêu cầu phải có biện pháp kiểm soát rệp để bảo vệ mùa màng là cấp thiết Biện pháp kiểm soát rệp và các loại côn trùng khác được áp dụng chủ yếu trong nhiều thập kỷ qua là sử dụng hóa chất diệt côn trùng tổng hợp Cho đến nay, đây vẫn là biện pháp được sử dụng chủ yếu, đặc biệt là ở... diệt côn trùng tổng hợp có độc lực mạnh, phổ tác dụng rộng cũng có nghĩa là có tính chọn lọc kém Chúng không chỉ tiêu diệt các côn trùng gây hại mà còn tiêu diệt cả những loài có ích như động vật ăn côn trùng, các loài kí sinh côn trùng hại cây trồng [65], tiêu diệt ong mật và côn trùng thụ phấn cho cây làm cho nhiều cây trồng thụ phấn nhờ côn trùng giảm năng suất và chất lượng [56] Thuốc diệt côn trùng. .. diệt côn trùng hóa học, xu hướng chung trên thế giới hiện nay là không sử dụng thuốc diệt côn trùng hoặc sử dụng thuốc có nguồn gốc sinh học để thay thế dần nhằm phát triển nền nông nghiệp bền vững 1.3 Thuốc diệt côn trùng nguồn gốc sinh học 1.3.1 Phân loại Thuốc diệt côn trùng, thuốc diệt cỏ, thuốc trừ bệnh được gọi chung là thuốc diệt hại Thuốc diệt hại sinh học là các chế phẩm có nguồn gốc sinh. .. chứa yếu tố diệt côn trùng là vi sinh vật có khả năng duy trì hiệu quả kéo dài, chúng không chỉ tiêu diệt lứa côn trùng đang phá hoại mà còn lây nhiễm trên côn trùng từ thế hệ này sang thế hệ khác Do có tác dụng chọn lọc đến côn trùng gây hại, các chế phẩm sinh học sẽ không được sử dụng tràn lan, do vậy nguy cơ kháng thuốc của côn trùng sẽ được Trường Đại học KHTN 12 Luận văn thạc sĩ Sinh học Vũ Xuân... 24,4% so với sử dụng hóa chất tổng hợp [37] Phạm Thị Thùy và cộng sự (2005) đã nghiên cứu hoàn thiện công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi nấm sử dụng Beauveria và Metarhizium để phòng trừ sâu hại đậu tương và đậu xanh [3], Nguyễn Dương Khuê (2005) đã sử dụng M anisopliae để phòng trừ mối nhà [1] Mặc dù đã được nghiên cứu từ gần 100 năm qua, nhưng việc ứng dụng các chế phẩm diệt côn trùng sinh học trong... Khả năng kiểm soát rệp hại cây trồng của nấm Lecanicillium Lecanicillium là chi nấm kí sinh côn trùng thuộc ngành nấm túi Ascomycota, lớp Sordariomycetes, bộ Hypocreales, họ Clavicipitaceae Lecanicillium trước đây được gọi là Verticillium lecanii [85] Cùng trong họ Clavicipitaceae với chi nấm Lecanicillium còn có một chi nấm kí sinh côn trùng khác là Metarhizium Lecanicillium có khả năng kí sinh tự... sợi nấm tiết các enzyme (proteinase, lipase, chitinase) thủy phân các mô, tiết các độc tố nấm gây độc thần kinh cho côn trùng Kết quả là côn trùng bị tổn thương, bị đa nhiễm bởi Lecanicillium và các vi sinh vật gây bệnh khác Sau khi côn trùng chết, nấm tiếp tục phát triển và sinh bào tử bên ngoài cơ thể côn trùng và có thể lây truyền bệnh cho côn trùng khác [54] Vu và cộng sự (2007) đã nghiên cứu sử dụng ... phun [32] Nấm kí sinh không nghiên cứu để diệt côn trùng gây hại trồng, mà nghiên cứu để diệt côn trùng kí sinh truyền bệnh cho người vật nuôi Angelo cộng (2010) nghiên cứu khả kiểm soát rận Rhipicephalus... hướng kiểm soát côn trùng vi sinh vật Mechnikoff (1879) Krassilnikow (1888), lần trình bày nghiên cứu khả sử dụng nấm kí sinh côn trùng Metarrhizium anisopliae để diệt côn trùng gây hại ngũ cốc... hình nghiên cứu, sản xuất sử dụng .13 1.3.4 Khả kiểm soát rệp hại trồng nấm Lecanicillium 17 1.4 Sản xuất bào tử nấm kí sinh côn trùng 18 1.5 Ảnh hưởng môi trường lên sinh bào tử nấm