Đang tải... (xem toàn văn)
Mô tả được khuynh hướng tồn tại bệnh nhiễm. .2. Mô tả được nhiễm khuẩn, sống ký sinh, các tính chất cơ bản của các tác nhân gây bệnh. .3. Mô tả được các hình thái dịch, nguồn truyền...
NGUYÊN LÝ S N XU T Ả ẤNGUYÊN LÝ S N XU T Ả ẤVACXIN THÚ YVACXIN THÚ Y •Để đảm bảo sức khỏe tốt cho vật nuôi và thực hiện thành công chương trình sức khỏe động vật, cần một nguồn vacxin tinh khiết, an toàn, hiệu lực và có hiệu quả.•Tất cả các vacxin thú y phải được sản xuất trong điều kiện kiểm tra, giám sát cẩn thận. Những yêu cầu và nguyên lý mô tả ở đây phù hợp với những tiêu chuẩn đã phát hành để tạo ra một vacxin có chất lượng cao mà chất lượng vacxin thú y lại dựa vào những nguyên liệu ban đầu của quá trình sản xuất, nhà xưởng, thiết bị và cá nhân con người có liên quan. I. NHÂN SỰ•Tất cả các cá nhân làm việc trong cơ sở sản xuất vacxin phải được đào tạo và nắm được những kiến thức cơ bản cho quá trình sản xuất, sau đó phải tiếp tục được dự học những khóa học nâng cao phù hợp với những yêu cầu kỹ thuật mới (ví dụ GMP).1.1. Cơ cấu tổ chức Ban giám đốc: Cơ sở sản xuất vacxin được lãnh đạo bởi ban giám đốc cơ sở. Mỗi người lãnh đạo có trách nhiệm giám sát một khâu sản xuất hoặc một chế phẩm phải được đào tạo và có kinh nghiệm để thực hiện những chức năng được giao. •Ban giám đốc gồm có:+ Giám đốc sản xuất: Phải được đào tạo đầy đủ và có khả năng thực tiễn tốt về lĩnh vực sản xuất, phải có đầy đủ quyền hạn và trách nhiệm quản lý sản xuất ra các chế phẩm, kiểm tra những nguyên liệu ban đầu và chế phẩm cuối cùng.+ Giám đốc kiểm tra chất lượng: Có đầy đủ quyền hạn và trách nhiệm về mọi nhiệm vụ kiểm tra chất lượng.+ Các giám sát viên: Giám sát viên giúp giám đốc sản xuất và giám đốc kiểm tra chất lượng thực hiện giám sát trực tiếp quá trình sản xuất, những người này phải qua đào tạo, có kinh nghiệm và luôn theo học các khóa nâng cao về GMP định kỳ. Các kỹ thuật viên: •Phải đọc và hiểu được quy trình kỹ thuật và phải được đào tạo đầy đủ về:•Quy trình sản xuất giống gốc (master seed), giống sản xuất (working seed).•Thực hiện những nguyên lý sản xuất.•Số lượng nhân viên: Phải đầy đủ để thực hiện quy trình sản xuất, tạo ra được sản phẩm vacxin có chất lượng.•Tất cả mọi người trong cơ sở sản xuất vacxin phải khỏe mạnh, có ý thức giữ gìn vệ sinh môi trường và vệ sinh cá nhân cao.•Phải có trang bị bảo hộ lao động an toàn, phù hợp để bảo vệ con người và bảo vệ chế phẩm không bị ô nhiễm. •II. CƠ SỞ VẬT CHẤTCác cơ sở sản xuất sử dụng để sản xuất vacxin phải được thiết kế để đảm bảo độ tinh khiết của sản phẩm trong suốt quá trình sản xuất và sự an toàn cho sức khỏe con người.Cấu trúc cần đạt:Có thể dễ dàng rửa sạch.Có đầy đủ các phòng chuẩn bị riêng biệt.Đảm bảo thông gió tốt.Có đầy đủ nước nóng và lạnh sạch.Có phòng thay quần áo và các điều kiện tiện nghi khác để người làm việc có thể không cần đi qua khu vực không cần thiết cho hoạt động sản xuất của mình. Cơ sở vật chất phải đảm bảo đầy đủ cho quá trình sản xuất như:Khu vực bảo quản giống.Khu vực chuẩn bị dụng cụ và trang thiết bị.Khu vực chuẩn bị chất bổ trợ.Khu vực hình thành sản phẩm, ra chai, đông khô, làm nút, dán nhãn, bảo quản sản phẩm cuối cùng.Khu vực kiểm nghiệm .•Mỗi hoạt động yêu cầu những diện tích riêng biệt. Tất cả các phòng và hệ thống thông khí phải được thiết kế để tránh tạp nhiễm từ các sản phẩm khác, từ con người và trang thiết bị.•Các VSV có độc lực hoặc nguy hiểm phải được chuẩn bị và bảo quản ở các phòng tách biệt; những VSV dùng công cường độc cần phải bảo quản hoàn toàn biệt lập với các chủng vacxin. •Tất cả các trang thiết bị tiếp xúc với sản phẩm phải được tiệt trùng theo các quy trình quy chuẩn.•Cơ sở vật chất phải được thiết kế hạn chế tới mức tối đa sự ô nhiễm môi trường.•Tất cả các chất sử dụng trong quá trình sản xuất phải được làm cho an toàn trước khi ra ngoài cơ sở sản xuất.•Nếu cấy chuyển các vi sinh vật có lây nhiễm cao, không khí ô nhiễm cần phải sử lý để tránh làm lây lan mầm bệnh. Con người phải đặc biệt tuân theo quy trình an toàn như tắm, gội, tránh tiếp xúc với động vật mẫn cảm sau khi ra khỏi cơ sở sản xuất.•Chú ý chất liệu và thiết kế cơ sở sản xuất có thể thay đổi nhưng phải tuân thủ, đảm bảo mức tiêu chuẩn của loại vacxin được sản xuất.•Ví dụ: Yêu cầu cơ sở vật chất để sản xuất vacxin qua phôi gà dùng cho uống, nhỏ mũi không giống như sản xuất vacxin bằng nuôi cấy tế bào dùng để tiêm. II. SẢN XUẤT VACXIN Những yếu tố đầu tiên cho việc sản xuất vacxin đạt hiệu quả là:a) Có những quy trình thao tác chung viết bằng văn bản.b) Có hướng dẫn về sản xuất rõ ràng cho từng loại vacxin được sản xuất.c) Sự tôn trọng triệt để các hướng dẫn trên trong quá trình sản xuất.Các bước sản xuất vacxin bao gồm:3.1. Lập kế hoạchMỗi loại vacxin được sản xuất trong một cơ sở phải có kế hoạch sản xuất chi tiết mô tả các bước của quy trình, số lượng sản phẩm cần sản xuất, thời gian tiến hành . Nói chung kế hoạch được lập là tài liệu trong quy trình sản xuất chuẩn được chi tiết hóa. 3.2. Tài liệu của quy trình sản xuất•Cần có quy trình kỹ thuật chi tiết là tài liệu sản xuất cho mỗi loại vacxin. Tài liệu phải nêu rõ nguyên lý sản xuất, các công đoạn sản xuất và phương pháp kiểm tra sản phẩm sau mỗi công đoạn.•Tài liệu nên nêu rõ quá trình giữ và sản xuất giống gốc như: nguồn gốc của giống gốc, quá trình phân lập, phương pháp tạo giống, cách xác định độc lực của giống, các chỉ số sinh học của giống gốc (LD50, EID50, TCID50 .), quy trình giữ giống, môi trường hay hệ thống tế bào sử dụng để nuôi cấy và sản xuất giống gốc .- Quy trình nhân giống sản xuất (working seed);-Trình tự sản xuất;-- Kiểm nghiệm sản phẩm; [...]... 37 0 C trong 4-5 ngày, thay mơi trường bằng mơi trường duy trì có 2-5 % huyết thanh bê. Tiếp tục ni 3-4 ngày để tế bào mọc kín một lớp. • Kiểm tra sự phát triển của tế bào hàng ngày. Tiêu chuẩn chấp nhận: - Tế bào mọc kín 1 lớp; - Khơng nhiễm khuẩn; - Số tế bào trong 1 thai khoảng 3 0-4 0 triệu. 3. Quy trình sản xuất vacxin tụ dấu 3. Quy trình sản xuất vacxin tụ dấu (Swine Erysipelas and Pasteurella... sản xuất của mình. III. Gây nhiễm virus • Gây nhiễm virus là giai đoạn chính, quan trọng nhất trong q trình sản xuất vacxin nói chung. Mỗi chủng virus có một nồng độ gây nhiễm riêng đảm bảo thu được vacxin an toàn, đạt hiệu quả cao nhất. 3.1. Pha lỗng giống vacxin: Tính số lượng virus cần gây nhiễm trong lơ sản xuất. • Dùng chủng gốc virus bại liệt typ I: WHO-IS-90C do viện nghiên cứu bại liệt... lập là tài liệu trong quy trình sản xuất chuẩn được chi tiết hóa. IV. Thu hoạch vacxin: Thu hoạch vacxin đúng quy trình sẽ mang lại hiệu quả cao nhất trong sản xuất. 1.Kiểm tra tế bào đối chứng: Môi trường vàng cam, trong suốt, tế bào bám đều khắp bề mặt chai, tế bào khơng bị thối hóa. 2. Kiểm tra các chai gây nhiễm virus: - Mơi trường có màu vàng sẫm, trong suốt; - Soi trên kính hiển vi thấy... bảo quản 2 -1 0 0 C/2 năm Kiểm nghiệm vacxin Gây nhiễm phôi trứng Ra chai Đông khô dán nhãn bảoquản Pha với nước sinh lý nồng độ 10 -1 hoặc xELD 50 ) Gây giống sản xuất Kiểm tra vô trùng Ấp tiếp ở 37 0 C/x giờ Thu trứng, để lạnh 4 0 C/12h Mổ trứng Thu chất chứa virus Bán thành phẩm Kiểm tra vô trùng chuẩn độ hiệu giá 3.2. Rửa tế bào - Loại bỏ hết môi trường trong chai tế bào; - Cho vào... cấy chuyển. 3.3. Sản xuất vacxin 3.3.1. Quá trình nhân giống và giữ giống (Master seed) • Mỗi loại vacxin được sản xuất từ một giống VSV gốc, giống VSV này qua quá trình tuyển chọn, có đủ các đặc tính sinh học đạt yêu cầu dùng để làm giống cho quá trình sản xuất vacxin, có lý lịch rõ ràng, các thơng số về nguồn gốc, các chỉ số sinh học, có quy trình nhân giống và bảo quản. • Khi sản xuất giống... thiết bị và cá nhân con người có liên quan. Các kỹ thuật viên: • Phải đọc và hiểu được quy trình kỹ thuật và phải được đào tạo đầy đủ về: • Quy trình sản xuất giống gốc (master seed), giống sản xuất (working seed). • Thực hiện những nguyên lý sản xuất. • Số lượng nhân viên: Phải đầy đủ để thực hiện quy trình sản xuất, tạo ra được sản phẩm vacxin có chất lượng. • Tất cả mọi người trong cơ sở sản... bào thối hóa; 4+: tế bào bong hết khỏi thành chai). 3. Thu hoạch – Thời gian thu hoạch khoảng 65 – 90h sau gây nhiễm. – Dùng tay lắc mạnh chai cho tế bào bong hết khỏi thành chai, bảo quản trong tủ -2 0 0 C. – Ta thu được vacxin bán thành phẩm. – Thử vô trùng bán thành phẩm. 2. Quy trình sản xuất vacxin nhiệt thán (Anthrax spore vaccine) • Vacxin nhiệt thán được chế tạo từ nha bào của vi khuẩn... chúng. • Để tránh nhiễm khuẩn từ ngồi vào trong suốt q trình sản xuất nên khuyến khích việc sử dụng các kỹ thuật tiệ trùng nghiêm ngặt để đảm bảo độ thuần khiết. Cấy giống sản xuất vacxin Giống gốc Martine 37 0 C/24h 37 0 C/ 7-1 0 ngày Kiểm tra mức độ hình thành nha bào (≈ 90% thì thu hoạch Kiểm tra thuần khiết Ra chai dán nhãn bảo quản 2 -1 0 0 C/2 năm Kiểm nghiệm Giống sản xuất Tập trung thành... chế phẩm không bị ô nhiễm. II. Ni cấy tế bào • Pha tế bào bằng mơi trường phát triển LHE để đạt nồng độ 70.000 tế bào/1ml. • Mơi trường LHE gồm: 50% LH0,5% + 50% Eargle + NaHCO 3 0,025% + huyết thanh bê 7-1 0% + kháng sinh; ni cấy vào các bình Roux dung tích 1200 ml, diện tích ni cấy 250cm 2 , khối lượng 170ml hỗn dịch tế bào đã pha lỗng. • Ni cố định ở 37 0 C trong 4-5 ngày, thay mơi trường... gà “siêu sạch” SPF (Specific Pathogenic Free) có chứng chỉ kiểm dịch sạch 18 loại virus và các vi khuẩn như Salmonella, Mycoplasma và Mycobacterium. • Trứng dùng cho sản xuất vacxin thành phẩm có thể dùng các đàn gà sạch nuôi trong các trại gà tập trung có theo dõi dịch bệnh và phải được kiểm tra sạch với một số mầm bệnh đặc biệt là H5N1, Newcastle, Mycoplasma, Salmonella và khơng được tiêm . TCID50...), quy trình giữ giống, môi trường hay hệ thống tế bào sử dụng để nuôi cấy và sản xuất giống gốc.. .- Quy trình nhân giống sản xuất (working seed); -Trình. vi sinh vật có lây nhiễm cao, không khí ô nhiễm cần phải sử lý để tránh làm lây lan mầm bệnh. Con người phải đặc biệt tuân theo quy trình an toàn như tắm,