ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI BÁO CÁO TỔNG KẾT KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI KH&CN CẤP ĐẠI HỌC QUỐC GIA Tên đề tài: Phân tích đa hình gen điều hòa đáp ứng thuốc corticoids điều trị hen phế quản trẻ em Việt Nam Mã số đề tài: QG.14.59 Chủ nhiệm đề tài: Dương Thị Ly Hương Hà Nội, 2016 PHẦN I THÔNG TIN CHUNG 1.1 Tên đề tài: Phân tích đa hình gen điều hòa đáp ứng thuốc corticoids điều trị hen phế quản trẻ em Việt Nam 1.2 Mã số: QG.14.59 1.3 Danh sách chủ trì, thành viên tham gia thực đề tài TT Chức danh, học vị, họ tên Đơn vị công tác Vai trò thực đề tài TS Dương Thị Ly Hương Khoa Y Dược Chủ nhiệm đề tài, điều hành chung TS Trần Thị Tôn Hoài Khoa Y Dược Thư ký, hỗ trợ tham gia thực nhóm nội dung PGS Đinh Đoàn Long Khoa Y Dược Thành viên, tư vấn thực nhóm nội dung TS Vũ Thị Thơm Khoa Y Dược Thành viên, tham gia thực nhóm nội dung BS Nguyễn Hoàng Long Khoa Y Dược Thành viên, tham gia thực nhóm nội dung DS.Trịnh Ngọc Dương Khoa Y Dược Thành viên, tham gia thực nhóm nội dung GS.TSKH Dương Quý Sỹ Đại học Y Khoa Penn State Đại học Y Paris Descartes Trường Cao đẳng y tế Lâm Đồng Thành viên, tư vấn thực nhóm nội dung PGS.TS Lê Thị Minh Hương Bệnh viện Nhi Trung ương Thành viên, tham gia thực nhóm nội dung NCS Nguyễn Thị Bích Hạnh Bệnh viện Nhi Trung ương Thành viên, tham gia thực nhóm nội dung 1.4 Đơn vị chủ trì: 1.5 Thời gian thực hiện: 1.5.1 Theo hợp đồng 1.5.2 Gia hạn 1.5.3 Thực thực tế : : : từ tháng 04 năm 2014 đến tháng 04 năm 2016 Không từ tháng 04 năm 2014 đến tháng 04 năm 2016 1.6 Những thay đổi so với thuyết minh ban đầu: Không 1.7 Tổng kinh phí phê duyệt đề tài: 300 triệu đồng PHẦN II TỔNG QUAN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Đặt vấn đề Hen phế quản bệnh viêm mãn tính đường hô hấp thường gặp người lớn trẻ em Cho đến toàn giới có khoảng 300 triệu người bị hen Ước tính đến năm 2025, có thêm khoảng 100 triệu người mắc hen toàn giới [1] Để trì, kiểm soát dự phòng hen tốt, thuốc lựa chọn gồm: corticoid dạng hít (ICS – inhaler corticosteroid), thuốc cường β2 - adrenegic tác dụng kéo dài (LABA), thuốc tác động lên hệ leucotrien, corticoid đường uống, thuốc khác thuốc hủy phó giao cảm ipratropium, theophylin, thuốc kháng IgE v.v…[2], [3] Trong nhóm thuốc này, corticoid sử dụng phổ biến Vai trò corticoid giảm viêm, giảm tính kích ứng biểu mô đường hô hấp nên thuốc dùng để dự phòng kiểm soát hen tốt Corticoid chứng minh làm giảm triệu chứng hen, làm giảm số hen từ nặng đến tối thiểu, kiểm soát tình trạng viêm đường thở, giảm gia tăng đáp ứng mức đường thở với yếu tố gây hen, cải thiện chất lượng sống bệnh nhân hen [2], [3] Tuy nhiên, corticoid thuốc gây nhiều tác dụng không mong muốn hạn chế phát triển thể, teo cơ, loãng xương, loét dày tá tràng, [4] Có khác đáp ứng với corticoid điều trị hen phế quản chủng tộc, quốc gia, cá thể Tỷ lệ thay đổi từ 5% đến 10% [5], [6] 40% [7] Việc tìm nguyên nhân đáp ứng với thuốc có vai trò quan trọng việc điều chỉnh điều trị, nhằm giảm bớt giá thành, nâng cao hiệu điều trị hạn chế tác dụng không mong muốn thuốc CRHR1 FCER2 gen liên quan đến đáp ứng corticoid nhiều nghiên cứu Đột biến thay G T rs242941 CRHR1 cho có liên quan đến đáp ứng với điều trị corticoid dạng hít [5] làm giảm tăng thể tích thở tối đa giây (FEV1) so với dự đoán [9], nhiên nghiên cứu trước lại ghi nhận rs242941 có liên quan đến đáp ứng tốt với corticoid [10], [11] FCER2 gen mã hóa protein, có vai trò quan trọng điều hòa sản xuất IgE, chất trung gian hen phế quản dị ứng Nhiều nghiên cứu đột biến thay T C rs28364072 gen FCER2 có liên quan đến đợt nặng lên hen phế quản, số lần nhập viện cấp cứu hen thời gian nằm viện [6], [12], [13], [14] Ở Việt Nam, chưa có nghiên cứu đề cập đến ảnh hưởng yếu tố di truyền hen phế quản, đặc biệt đáp ứng thuốc hen phế quản Đề tài thực nhằm bước đầu xác định tính đa hình gen CRHR1 FCER2 mối liên quan đa hình gen với đáp ứng corticoids điều trị hen phế quản trẻ em Việt Nam Mục tiêu - Xác định tính đa hình gen CRHR1 FCER2 liên quan đến đáp ứng corticoids điều trị hen phế quản trẻ em - Xác định mức độ đáp ứng với corticoids điều trị hen phế quản trẻ em - Xác định mối liên quan tính đa hình di truyền với mức độ đáp ứng corticoids điều trị hen phế quản trẻ em Phương pháp nghiên cứu Để thực mục tiêu trên, đề tài sử dụng phương pháp sau: - Quy trình phân tích gen xác định tính đa hình SNP quan tâm: Nguyên lý quy trình: DNA tổng số bao gồm DNA nhân DNA ty thể tách từ máu ngoại vi, sử dụng kit hoạt động dựa hấp thụ chọn lọc axit nucleic với màng silica-gel [15] Chất lượng DNA tổng số đánh giá qua số đo hấp thu quang bước sóng 260nm (A260) 280 nm (A280) Đoạn gen cần phân tích nhân lên hàng triệu từ DNA tổng số thông qua phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu Kiểu gen rs242941 xác định thông qua giải trình tự sản phẩm PCR cắt sản phẩm PCR enzyme giới hạn Kiểu gen rs28364072 xác định thông qua giải trình tự sản phẩm PCR Mẫu sau giải trình tự đọc kết phần mền tin sinh Các công đoạn quy trình: quy trình phân tích gen gồm bước sau: 1) lấy máu tĩnh mạch cánh tay; 2) tách DNA tổng số từ máu ngoại vi; 3) thiết kế mồi đặc hiệu để nhân dòng gen; 4) Khuếch đại vùng gen quan tâm PCR; 5) Xác định kiểu gen phương pháp giải trình tự chiều hãng First Base (Malaysia) Phân tích thống kê: Xác định tần số kiểu gen tần số allen đoạn gen xác định, so sánh nhóm bệnh nhóm chứng để tìm khác biệt tần số phân bố kiểu gen nhóm, so sánh với tần số lý thuyết quần thể cân theo định luật Hardy-Weinberg với chi-square test Phân tích haplotype sai lệch cân liên kết (LD; Linkage Disequibrium), sử dụng phần mềm SNPAnalyzer2 [16] Trong đó, đánh giá tần số haplotype sử dụng thuật toán EM (Expectation-Maximization) PL-EM (Partition-Ligation–Expectation-Maximization), phân tích cấu trúc haplotype sử dụng phương pháp Gabriels [17] - Nghiên cứu lâm sàng xác định mức độ đáp ứng với corticoids Nghiên cứu tiến cứu, can thiệp, điều trị dự phòng hen cho bệnh nhi corticoid dạng hít theo phác đồ GINA 2014, theo dõi dọc tháng Đánh giá mức độ đáp ứng thuốc sau tháng Thiết kế nghiên cứu: Bệnh nhân nhi đủ tiêu chuẩn lựa chọn loại trừ, sau lựa chọn vào nhóm nghiên cứu, khám lâm sàng, cận lâm sàng, thăm dò chức hô hấp, đo NO khí thở (FENO), sau can thiệp điều trị theo GINA Khám lại sau tháng đánh giá mức độ kiểm soát hen theo GINA ACT (Sơ đồ nghiên cứu: xem phụ lục 1) Cỡ mẫu nghiên cứu: Áp dụng công thức tính cỡ mẫu ước lượng tỷ lệ với sai số tuyệt đối: 𝑝(1 − 𝑝) ∆2 2 𝑛 = 𝑍1− 𝛼 Trong đó: n: cỡ mẫu cần thiết p: tỷ lệ đối tượng không đáp ứng với thuốc (p=0,4 theo nghiên cứu trước [7]) α: Mức ý nghĩa thống kê = 0,05 => Z1-α/2 = 1,96 ∆: sai số tuyệt đối = 0,1  Cỡ mẫu cần thiết cho nghiên cứu n = 93 bệnh nhân Tuy nhiên, để đảm bảo cỡ mẫu nghiên cứu phù hợp sau tháng theo dõi, nhóm nghiên cứu tuyển thêm 20% số bệnh nhân (do đối tượng bệnh nhân dễ bỏ trình nghiên cứu dọc), tổng số bệnh nhân tuyển 112 bệnh nhân Thực tế có 107 bệnh nhân đống ý xét nghiệm gen thời điểm ban đầu 85 bệnh nhân theo dõi đầy đủ sau tháng Phương pháp chọn mẫu: phương pháp chọn mẫu chủ đích áp dụng nghiên cứu Nhóm nghiên cứu tiến hành lựa chọn đến đủ cỡ mẫu Các tiêu chuẩn lựa chọn loại trừ bao gồm: Tiêu chuẩn lựa chọn: Các bệnh nhân từ - 15 tuổi chẩn đoán xác định hen phế quản phòng khám khoa Miễn dịch - Dị ứng bệnh viện Nhi Trung Ương từ tháng 7/2014 - 8/2015, chưa dự phòng hen (bệnh nhi mới) bỏ điều trị dự phòng tháng, đến khám tình trạng hen chưa kiểm soát; thực kỹ thuật thăm dò chức theo hướng dẫn; đồng ý cha mẹ người giám hộ tự nguyện tham gia nghiên cứu Tiêu chuẩn loại trừ: tiêu chuẩn sau: Bệnh nhi bị hen có bệnh nặng toàn thân kèm, có hen kịch phát nặng, có bệnh kèm theo tim bẩm sinh, hội chứng thận hư, viêm cầu thận mãn, đái tháo đường; bệnh nhi không đo chức hô hấp không hợp tác khả đo Đánh giá mức độ kiểm soát hen theo GINA (xem phụ lục 2) Đánh giá mức độ kiểm soát hen theo ACT (xem phụ lục 3) Phân tích thống kê: sử dụng phương pháp thống kê mô tả, với kết biểu dạng tỷ lệ phần trăm (%), giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (MEAN ± SD) Tính đạo đức nghiên cứu: Nghiên cứu tiến hành bệnh viện Nhi trung ương, thông qua chấp thuận Hội đồng đạo đức nghiên cứu y sinh bệnh viện Nhi trung ương (chứng nhận số 954B/BVNTW-VNCSKTE ngày 23/05/2014) Xác định mối liên quan tính đa hình di truyền với mức độ đáp ứng corticoids - Sử dụng kiểm định fisher’s exact cho biến định tính Giá trị p0.05 rs76013233 7690599 C/T 0.724/0.276 >0.05 rs77121754 7690596 T/C 0.724/0.276 >0.05 rs78283814 7690593 C/T 0.724/0.276 >0.05 rs75584211 7690592 A/G 0.724/0.276 >0.05 rs74927160 7690586 C/A 0.724/0.276 >0.05 rs2277995 7690583 A/G 0.724/0.276 >0.05 rs28364072 7690399 T/C 0.724/0.276 >0.05 rs4996972 7690327 G/A 0.762/0.238 0.05 13 rs4996976 7690082 T/C 0.725/0.275 >0.05 14 rs4996977 7690078 A/G 0.721/0.279 >0.05 15 rs4996978 7690056 T/G 0.725/0.275 >0.05 16 rs4996979 7690031 A/G 0.721/0.279 >0.05 17 rs4996980 7690026 C/T 0.716/0.284 >0.05 Nhận xét: Ngoài rs28364072, phát 16 SNP khác với liên kết tương đối chặt chẽ Sự liên kết chặt chẽ SNP gen FCER2 vùng phân tích thể tương đồng tỷ lệ allen phổ biến allen gặp tất SNP Trong SNP phát được, hầu hết allen phân bố theo định luật HardyWeinberg (p>0,05), trừ hai SNP rs4996972 rs4996973 (p 0,8 Rất nhiều cặp SNP có r2 =1, chứng tỏ chúng Rs28364072 nằm gen FCER2 cho có liên quan đến tiến triển nặng lên hen phế quản làm tăng nguy đợt kịch phát bệnh nhân hen phế quản sử dụng ICS [2], [3], đó, tập trung phân tích tính đa hình SNP quần thể bệnh nhân nghiên cứu Kết thể bảng 4.2 Nghiên cứu lâm sàng xác định mức độ đáp ứng với corticoids - Đặc điểm mẫu nghiên cứu Bảng Đặc điểm lâm sàng bệnh nhân thời điểm bắt đầu nghiên cứu Đặc điểm bệnh nhân (n=107) Tuổi, năm Giới nữ (nam), % Chiều cao, cm Cân nặng, kg Có tiền sử dị ứng, % - Chàm, % - Viêm mũi dị ứng, % - Viêm kết mạc dị ứng, % - Mày đay, % - Dị ứng thuốc, % - Dị ứng thức ăn, % Tiền sử gia đình có người bị dị ứng, % Test dị nguyên - Dp (+), % 9,2 ± 2,5 32,7 (67,3) 132,2 ± 13,3 39,9 ± 10,2 17,8 67,3 9,3 25,2 8,4 5,6 72 71,2 - Df (+), % - Blomia (+), % - Lông chó (+), % - Lông mèo (+), % - Gián (+), % Bậc hen - Bậc 2, % - Bậc 3, % Công thức máu - Số lượng bạch cầu - Bạch cầu toan, % - IgE toàn phần, IU/ml Chức hô hấp - FVC, % so với lý thuyết - FEV1, % so với lý thuyết - FEV1/FVC Nồng độ NO khí thở (FENO), ppb - 75,3 60,0 11,9 11,6 27,1 52,3 47,7 10975 ± 4097 5,97 ± 4,97 1091,6 ± 1325,4 87,0 ± 24,1 82,1 ± 26,6 93,1 ± 10,5 27,3 ± 27,4 Mức độ đáp ứng với corticoid hít dự phòng hen phế quản Sử dụng thang đánh giá theo GINA ACT để phân loại mức độ kiểm soát hen Kết trình bày bảng 4, 5, Bảng Mức độ đáp ứng với hen phế quản (theo phân loại GINA) Kiểm soát hoàn toàn Kiểm soát phần Chưa kiểm soát Sau tháng điều trị (n=85) 41 (48,24%) 22 (25,88%) 22 (25,88%) Sau tháng điều trị (n=39) 20 (51,28%) (17,95%) 12 (30,77%) Sau tháng điều trị (n=85) 52 (61,18%) 19 (22,35%) 14 (16,47%) Bảng Mức độ đáp ứng với hen phế quản (theo điểm ACT) Kiểm soát tốt (ACT  20) Chưa kiểm soát (ACT < 20) Sau tháng điều trị (n=85) 65 (76,47%) 20 (23,53%) Sau tháng điều trị (n=39) 28 (71,79%) 11 (28,21%) Sau tháng điều trị (n=85) 70 (82,35%) 11 (12,94%) Bảng Mức độ hòa hợp thang đánh giá mức độ kiểm soát hen Chưa kiểm soát Kiểm soát Theo thang GINA Theo thang ACT Theo thang GINA Theo thang ACT Sau tháng điều trị (n=85) 63 (74,12%) 65 (76,47%) 22 (25,88%) 20 (23,53%) Sau tháng điều trị (n=39) 27 (69,23%) 28 (71,79%) 12 (30,77%) 11 (28,21%) Sau tháng điều trị (n=85) 71 (83,53%) 70 (82,35%) 14 (16,47%) 11 (12,94%) Nhận xét: Tỷ lệ bệnh nhân đáp ứng tốt tăng dần theo thời gian, khác biệt đáng kể đánh giá mức độ kiểm soát hen thang GINA ACT - Phân tích yếu tố ảnh hưởng đến mức độ đáp ứng thuốc o Liên quan bậc hen với mức độ kiểm soát Bảng Ảnh hưởng mức độ hen ban đầu đến mức độ kiểm soát hen sau tháng điều trị Kiểm soát hoàn toàn Kiểm soát phần Chưa kiểm soát p Bậc hen giai đoạn đầu đến khám - Bậc 2, % 35,3 10,6 8,2 - Bậc 3, % 25,9 11,8 8,2 89,1 ± 27,8 90,5 ± 19,3 (n=45) 83,4 ± 15,3 (n=17) 82,1 ± 31,0 81,9 ± 16,4 84,1 ± 19,2 (n = 45) (n=17) (n=14) 91,7 ± 16,4 97,6 ± 9,0 89,7 ± 11,8 (n=44) (n=17) (n=14) > 0,05 Chức hô hấp - FVC, % so với lý thuyết - FEV1, % so với lý thuyết - FEV1/FVC, % (n=14) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Nhận xét: chưa thấy có mối liên quan mức độ hen ban đầu chức hô hấp đến kiểm soát hen Sự khác biệt mức độ hen ban đầu số FVC, FEV1, FEV1/FVC nhóm hen kiểm soát hoàn toàn, kiểm soát phần chưa kiểm soát ý nghĩa thống kê với p > 0,05 o Liên quan mức độ viêm với mức độ kiểm soát Bảng Ảnh hưởng mức độ viêm đến mức độ kiểm soát hen sau tháng điều trị Bạch cầu toan, % IgE toàn phần, IU/ml FENO, ppb Kiểm soát hoàn toàn Kiểm soát phần Chưa kiểm soát 5,9 ± 5,2 7,3 ± 4,7 5,5 ± 5,6 (n=52) (n=19) (n=14) 1045,2 ± 1516,2 1160,2 ± 1096,8 1040,1 ± 646,4 (n=44) (n=17) (n=12) 30,7 ± 31,6 32,5 ± 24,0 (n=49) (n=19) 25,3 ± 23,1 (n=12) p > 0,05 > 0,05 > 0,05 Nhận xét: Không thấy khác biệt tỷ lệ bạch cầu toan, nồng độ IgE toàn phần NO khí thở nhóm bệnh nhân có mức độ kiểm soát hen khác (p>0,05) o Nồng độ Nitric oxide khí thở Nitric oxide (NO) chất khí sinh học với nhiều vai trò sinh lý, NO tăng lên trình viêm xem chất đánh dấu cho biết mức độ viêm thể Trong hen phế quản, nồng độ NO khí thở thường tăng Đo nồng độ NO khí thở (FENO) cho biết mức độ viêm, tăng bạch cầu toan ngày sử dụng rộng rãi tiêu chí để đánh giá viêm hen Thêm vào đó, theo khuyến cáo Hội lồng ngực Mỹ (AST) – 2011: Mức độ FENO giúp chẩn đoán hen, dự báo hen cấp, dự báo tình trạng đáp ứng corticoid bệnh nhân hen Theo khuyến cáo GINA, đo FENO dùng theo dõi bệnh nhân hen [1] Trong nghiên cứu này, tiến hành đo nồng độ FENO xác định mối liên quan FENO với yếu tố bệnh lý bệnh nhân hen Kết cho thấy: Nồng độ FENO cao hẳn nhóm có test lẩy da dương tính với từ dị nguyên hô hấp trở lên so với nhóm không dương tính với dị nguyên (p< 0,01) Có mối tương quan có ý nghĩa nồng độ FENO với số lượng bạch cầu toan máu, theo nồng độ FENO tăng phản ánh gián tiếp tình trạng tăng bạch cầu toan Có mối tương quan tỷ lệ nghịch số nhát xịt Flixotide với nồng độ FENO cho thấy FENO yếu tố điểm đáp ứng chống viêm ICS Ở nhóm bệnh nhân kiểm soát hen phần kiểm soát hoàn toàn có mức FENO giảm dần qua tháng, nhóm không kiểm soát, FENO có xu hướng tăng lên [20] Có thể thấy FENO số quan trọng giúp dự báo tình trạng đáp ứng thuốc bệnh nhân hen Việc theo dõi FENO định kỳ hữu ích nhằm theo dõi, đánh giá, tiên lượng tình trạng viêm suốt tiến trình bệnh lý hô hấp khác nhau, bao gồm bệnh hen thể nhạy corticoid 4.3 Xác định mối liên quan tính đa hình di truyền với mức độ đáp ứng corticoids Bảng Mối liên quan đa hình gen CRHR1 với mức độ kiểm soát hen sau tháng điều trị rs242941 Kiểm soát hoàn toàn Kiểm soát phần Chưa kiểm soát Tổng p 10 GG 42 13 11 66 GT 15 TT 1 Tổng 50 19 13 82 = 0,361 Nhận xét: kiểu gen đồng hợp tử GG chiếm tỷ lệ cao tất nhóm bệnh nhân có mức độ kiểm soát hen khác Kiểu gen đồng hợp đột biến TT gặp trường hợp, bệnh nhân có mức độ kiểm soát hen phần Chưa thấy mối liên quan đa hình gen với mức độ đáp ứng thuốc (p>0,05) Bảng 10 Mối liên quan đa hình gen FCER2 với mức độ kiểm soát hen sau tháng điều trị Kiểm soát hoàn toàn Kiểm soát phần Chưa kiểm soát Tổng TT 26 12 46 TC 20 30 CC Tổng 52 19 14 85 rs28364072 p = 0,432 Nhận xét: có bệnh nhân có kiểu gen đồng hợp đột biến CC, bệnh nhân kiểm soát tốt, bệnh nhân kiểm soát phần Không có bệnh nhân kiểm soát nằm số bệnh nhân đồng hợp tử đột biến Chưa phát mối liên quan đồng hợp đột biến CC rs28364072 với mức độ kiểm soát hen bệnh nhi hen phế quản Đánh giá kết đạt kết luận Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố di truyền đến đáp ứng thuốc nhằm tiên lượng điều trị, điều chỉnh liều lượng thuốc, tiến tới cá thể hóa điều trị xu y học cá thể Hen bệnh phổ biến, thường gặp trẻ em Hen phế quản không điều trị tốt ảnh hưởng đến sức lớn, học tập lâu dài ảnh hưởng đến suất lao động phận không nhỏ lực lượng tham gia sản xuất chính, người trẻ tuổi Đã có nhiều nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố di truyền tới đáp ứng thuốc điều trị hen phế quản CRHR1 gen mã cho thụ thể kết cặp G-protein liên kết với neuropeptide thuộc họ hormon giải phóng corticotropin CRHR1 liên quan đến việc sản xuất corticosteroid nội sinh dự báo ảnh hưởng đến đáp ứng corticosteroid ngoại sinh [5] Rs242941 đột biến thay G T (chr17:41248300, Intron) chứng minh làm tăng đáp ứng với điều trị corticoid dạng hít [10] Tuy nhiên, có số nghiên cứu lại điều ngược lại: allen gặp T rs242941 làm giảm tăng FEV1% theo dự đoán, có liên quan đến đáp ứng với corticoid [5], [9] Nghiên cứu cho thấy số 107 bệnh nhân làm xét nghiệm gen, có bệnh 11 nhân có kiểu gen đồng hợp tử TT, tần suất allen gặp T rs242941 0,125 (bảng 1) Bệnh nhân đánh giá mức độ kiểm soát hen sau tháng kiểm soát phần (bảng 8) Có thể thấy với quy mô cỡ mẫu nhỏ, nghiên cứu chưa mối liên quan đột biến kiểu gen rs242941 với mức độ đáp ứng thuốc sau tháng điều trị FCER2 gen mã hóa cho thụ thể gắn với IgE lực thấp Rs28364072 đột biến nằm vùng intron vị trí 2206 thay T C tính từ nucleotid số theo chiều 3’ exon gen FCER2 [11] Các alen C có liên quan với nồng độ IgE tăng cao bệnh nhân hen suyễn Đột biến thay T C gen FCER2 chứng minh có liên quan với việc tăng nguy đợt kịch phát với bệnh nhân sử dụng ICSs [6], [12], [13], [14] Trong nghiên cứu chúng tôi, tần số mang allen đột biến gặp C rs28364072 0,276 [21], với 10 bệnh nhân có kiểu gen đồng hợp tử CC Trong số bệnh nhân quay lại tái khám đánh giá mức độ đáp ứng thuốc sau tháng điều trị, có bệnh nhân có kiểu gen CC phân bố sau: bệnh nhân kiểm soát hoàn toàn, bệnh nhân kiểm soát phần, bệnh nhân không kiểm soát (bảng 9) Như vậy, nghiên cứu chưa mối liên quan đồng hợp đột biến CC rs28364072 đáp ứng corticoid Trên thực tế, để đánh giá yếu tố ảnh hưởng đến đáp ứng thuốc nhiều khó khăn, nhiều yếu tố ảnh hưởng đến tiên lượng điều trị: yếu tố thuộc bệnh mức độ bệnh, diễn biến bệnh, bệnh mắc kèm, chức gan, thận, v.v…; yếu tố thuộc thuốc chất lượng thuốc, tá dược, dạng bào chế, hấp thu, chuyển hóa, thải trừ thuốc thể v.v…; thân phương pháp đo lường đánh giá mức độ đáp ứng thuốc, hợp tác bệnh nhân v.v… ảnh hưởng đến kết điều trị Nghiên cứu tập trung khai thác yếu tố di truyền Trong trình nghiên cứu, hạn chế tối đa yếu tố gây nhiễu như: lựa chọn bệnh nhân theo tiêu chuẩn nghiêm ngặt, đáp ứng tiêu chuẩn lựa chọn tiêu chuẩn loại trừ; can thiệp điều trị theo hướng dẫn GINA, sử dụng thuốc Flixotide GlaxoSmithKline (là hãng Dược phẩm có uy tín Mỹ), sử dụng thang đánh giá kiểm soát hen GINA ban hành v.v…, nhiên cỡ mẫu nhỏ thời gian nghiên cứu hạn chế nên chưa tìm thấy mối liên quan đột biến CC rs28364072 gen FCER2 với mức độ kiểm soát hen sau tháng điều trị corticoids Rất tăng cỡ mẫu lên, tập trung vào nhóm có mức độ kiểm soát hen kém, tìm thấy số lượng bệnh nhân có đột biến CC tăng lên Qua trình nghiên cứu, đề tài rút số kết luận sau: - Đã xây dựng quy trình phân tích tính đa hình rs242941 gen CRHR1 rs28364072 FCER2 Quy trình xác định đa hình SNP rs28364072 FCER2 đăng ký giải pháp hữu ích chấp nhận đơn hợp lệ - Đã xác định tính đa hình gen FCER2 CRHR1, xác định 17 SNP với haplotype phân đoạn gen FCER2 phân tích, SNP liên kết với chặt chẽ; 11 SNP với haplotype phân đoạn gen CRHR1 phân tích, có rs242941 rs 242940 có tính đa hình, SNP lại 100% đồng hình với kiểu gen - Đã xác định mức độ kiểm soát hen sau 1, 2, tháng điều trị Nhìn chung, mức độ đáp ứng thuốc tốt tăng dần theo thời gian, khác biệt đáng kể việc sử dụng thang GINA hay ACT để đánh giá mức độ kiểm soát hen - Chưa thấy rõ mối liên quan đột biến rs242941 gen CRHR1 đột biến rs28364072 gen FCER2 với mức độ đáp ứng thuốc điều trị hen phế quản 12 Tài liệu tham khảo GINA report (2012) Global Burden of Asthma Bộ y tế, Hướng dẫn chẩn đoán điều trị hen phế quản, Ban hành kèm theo Quyết định số 4776/QĐ-BYT ngày 04/12/2009 Bộ trưởng Bộ Y tế Asthma Diagnosis and Treatment Guideline 2015 Group Health Cooperative Bộ y tế, Dược thư quốc gia Việt Nam, 2015 Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Angela J Rogers, Kelan G Tantisira, Anne L Fuhlbrigge, Augusto A Litonjua, Jessica A LaskySu, Stanley J Szefler, Robert C Strunk, Robert S Zeiger, Scott T Weiss, Predictors of poor response during asthma therapy differ with definition of outcome Pharmacogenomics 2009 August, 10 (8): 12321-1242 Anke Hilse Maitland-van der Zee, Jan AM Raaijmakers, Variation at GLCCI1 and FCER2: one step closer to personalized asthma treatment Pharmacogenomics (2012) 13(3), 243–245 Leung, T.F., et al., Novel Asthma Therapeutics: Insights from Whole-Genome Studies Pharmacogenomics & Pharmacoproteomics, 2013: p 4:1 Kelan Tantisira, and Scott Weiss, The Pharmacogenetics of Asthma Treatment The Pharmacogenetics of Asthma Treatment Current Allergy and Asthma Reports (2009), 9: 10-17 EB Mougey, C Chen, KG Tantisira, KV Blake, SP Peters, RA Wise, ST Weiss and JJ Lima, Pharmacogenetics of asthma controller treatment, The Pharmacogenomics Journal (2012), 1-9 10 Kelan G Tantisira, Stephen Lake, Eric S Silverman, Lyle J Palmer, Ross Lazarus, Edwin K Silverman, Stephen B Liggett, Erwin W Gelfand, Lanny J Rosenwasser, Brent Richter, Elliot Israel, Michael Wechsler, Stacey Gabriel, David Altshuler, Eric Lander, Jeffrey Drazen and Scott T Weiss, Corticosteroid pharmacogenetics: association of sequence variants in CRHR1 with improved lung function in asthmatics treated with inhaled corticosteroids, Human Molecular Genetics, 2004, 13 (13): 1353–1359 11 Kelan Tantisira, Genetic variation in FCER2: implications for children with asthma Pharmacogenomics (2008) 9(7), 805-807 12 Koster S E et al “FCER2 T2206C variant associated with chronic symptoms and exacerbations in steroid-treated asthmatic children”,Allergy 2011, 66: 1546–1552 13 Tantisira K et al “FCER2: A pharmacogenetic basis for severe exacerbations in children with asthma”, J Allergy ClinImmunol 2007.;120:1285-91 14 Tse S.M., Tantisira K., Weiss S.T “The Pharmacogenetics and Pharmacogenomics of Asthma Therapy”, Pharmacogenomics J 2011, 11(6): 383 - 392 15 E.Z.N.A Blood DNA Mini Kit Protocol (2013) of Omega Bio Tek 16 Yoo J, Lee Y, Kim Y, Rha SY, Kim Y SNPAnalyzer 2.0: A web-based integrated workbench for linkage disequilibrium analysis and association analysis BMC Bioinformatics 2008; 9:290 doi:10.1186/1471-2105-9-290 17 Dale R Nyholt, A Simple Correction for Multiple Testing for Single-nucleotide Polymorphisms in Linkage Disequilibrium with Each Other The American Journal of Human Genetics, 2004 74(4), 765-769 18 Phạm Thị Hồng Nhung, Vũ Thị Thơm, Đậu Thế Huy, Nguyễn Thị Thu Hằng, Đinh Đoàn Long, Dương Thị Ly Hương, Xây dựng quy trình phân tích gen CRHR1 FCER2 bệnh nhân nhi hen phế quản Kỷ yếu Hội nghị Khoa học Công nghệ tuổi trẻ Khoa Y Dược lần thứ 2, 2015: 7179 19 1000 Genomes Project Phase 3, rs28364072 SNP: http://www.ensembl.org/Homo_sapiens/Variation/Population?db=core;r=19:77547857755785;redirect=no;v=rs28364072;vdb=variation;vf=8681267#1000genomesprojectphase3 20 H Nguyen Thi Bich, H Duong Thi Ly, T Vu Thi, N Pham Thi Hong, L Dinh Doan, T J Craig, H Le Thi Minh, S Duong-Quy, Study of the correlations between FENO in exhaled breath and atopic status, blood eosinophils, FCER2 mutation, and asthma control in Vietnamese children 13 21 H Duong Thi Ly, N Pham Thi Hong, T Vu Thi, H Nguyen Thi Bich, H Le Thi Minh, S Duong-Quy, The frequency of FCER2 genotype distributions related to corticosteroid response in asthma patients treated at the National Hospital of Paediatrics, J Fran Viet Pneu 2016; 20(7): 58-63 (ISSN: 2264-7899 Print/ 2264-0754 Online; http://doi.dox:10.12699/jfvp.7.20.2016.58) Tóm tắt kết (tiếng Việt tiếng Anh) 6.1 Tóm tắt tiếng Việt Hen phế quản bệnh viêm mãn tính đường hô hấp thường gặp trẻ nhỏ Bệnh ngày gia tăng ảnh hưởng đến hàng trăm triệu người toàn giới Corticoid thuốc giảm viêm mạnh, làm giảm tính kích ứng biểu mô đường hô hấp thuốc dùng để dự phòng, kiểm soát hen tốt Tuy nhiên có tỷ lệ không nhỏ bệnh nhân không đáp ứng với thuốc Nhiều nghiên cứu mối liên quan yếu tố di truyền với mức độ đáp ứng thuốc, đa hình rs242941 gen CRHR1 rs28364072 FCER2 cho có liên quan đến đáp ứng corticoid, đến đợt nặng lên hen phế quản số lần phải nhập viện cấp cứu hen Đề tài tiến hành với mục đích: (i) Xác định tính đa hình di truyền gen liên quan đến đáp ứng corticoids điều trị hen phế quản trẻ em; (ii) Xác định mức độ đáp ứng với corticoids điều trị hen phế quản trẻ em; (iii) Xác định mối liên quan tính đa hình di truyền với mức độ đáp ứng corticoids điều trị hen phế quản trẻ em Kết quả: - Đề tài xây dựng quy trình phân tích tính đa hình rs242941 gen CRHR1 rs28364072 FCER2 Quy trình xác định đa hình SNP rs28364072 FCER2 đăng ký giải pháp hữu ích chấp nhận đơn hợp lệ - Đã xác định tính đa hình gen FCER2 CRHR1, xác định 17 SNP với haplotype phân đoạn gen FCER2 phân tích, SNP liên kết với chặt chẽ; 11 SNP với haplotype phân đoạn gen CRHR1 phân tích, có rs242941 rs 242940 có tính đa hình, SNP lại 100% đồng hình với kiểu gen - Đã xác định mức độ kiểm soát hen sau 1, 2, tháng điều trị Nhìn chung, mức độ đáp ứng thuốc tốt tăng dần theo thời gian, khác biệt đáng kể việc sử dụng thang GINA hay ACT để đánh giá mức độ kiểm soát hen - Chưa thấy rõ mối liên quan đột biến rs242941 gen CRHR1 đột biến rs28364072 gen FCER2 với mức độ đáp ứng thuốc điều trị hen phế quản Kết luận: chưa tìm thấy mối liên quan đa hình rs242941 gen CRHR1 rs28364072 gen FCER2 với mức độ đáp ứng thuốc điều trị hen phế quản 6.2 Tóm tắt tiếng Anh Asthma is a common chronic disease characterized by partially reversible airflow obstruction, airway hyperresponsiveness, and airway inflammation The disease has affected to hundred millions people all over the world, especially to children Corticosteroids are the most powerful antiinflammation drugs, and inhaled corticosteroids (ICS) have become first-line therapy for all patients with persistent symptoms However, asthmatic response to corticosteroids varies widely between individuals, with a significant number of non-responders Studies indicated that the polymorphism of rs242941 in CRHR1 and rs28346072 in FCR2 have been associated with steroid resistance, asthma exacerbations and high risk of asthma-related hospital visits This study aimed to: (i) identify the polymorphism frequency of rs242941 in CRHR1 and rs28346072 in FCR2 that related to ICS response in treatment asthma; (ii) indicate the level of asthma control in asthmatic children after month treated by ICS; (iii) identify the relationship between the polymorphism of rs242941 or rs28346072 and level of asthma control after month treated by ICS 14 Results showed that: - Procedures to identify polymorphism of rs242941 or rs28346072 have been built, in which the procedure for determine rs28346072 in FCER2 has been accepted as a utility solution by the National Office of Intellectual Property of Vietnam We have found 17 different SNPs in FCER2 and 11 SNPs in CRHR1, in which there SNPs link closely together In CRHR1, only rs242941 and rs242940 had different alleles, others had the only one kind of allele These alleles recombined to and haploptypes (according to FCER2 and CRHR1, respectively) - The level of asthma control tended to increase in time Using GINA or ACT scores to evaluate the asthma control did not affect to the final result - The association between rs242941 or rs28346072 polymorphism and the level of asthma control have not been shown in this study Conclusion: We have not found the relationship between rs242941 or rs28346072 polymorphism and the level of asthma control 15 PHẦN III SẢN PHẨM, CÔNG BỐ VÀ KẾT QUẢ ĐÀO TẠO CỦA ĐỀ TÀI 3.1 Kết nghiên cứu TT Tên sản phẩm Quy trình xác định đa hình gen liên quan đến đáp ứng corticoid điều trị hen phế quản Báo cáo số liệu tần suất mang đa hình di truyền gen liên quan đến đáp ứng corticoid điều trị hen phế quản Báo cáo số liệu mức độ đáp ứng với corticoid điều trị hen phế quản trẻ em Yêu cầu khoa học hoặc/và tiêu kinh tế - kỹ thuật Đăng ký Quy trình có độ tin cậy, ổn định, tính lặp lại cao, cho phép xác định nhanh đa hình SNP gen liên quan đáp ứng corticoid điều trị hen phế quản Đạt 02 quy trình xác định tính đa hình SNP gen (FCER2 CRHR1) liên quan đến đáp ứng corticoid điều trị hen phế quản; 01 quy trình đăng ký giải pháp hữu ích (được chấp nhận đơn hợp lệ) 1 Ghi Vượt tiêu Đạt Đạt 1 Báo cáo số liệu mối liên quan tính đa hình gen với đáp ứng corticoid điều trị hen phế quản trẻ em 1 Công bố tạp chí ISI/Scopus 1 Đạt Công bố tạp chí quốc tế (không thuộc hệ thống ISI/Scopus) Vượt tiêu Công bố tạp chí khoa học nước 1 Đạt Tham gia Hội nghị, hội thảo quốc tế (1 hội nghị quốc tế Monaco đạt giải) Vượt tiêu Góp phần đào tạo 02 Thạc sỹ Y học/ Dược học, hỗ trợ đào tạo nghiên cứu sinh - Đào tạo Thạc sỹ Dược học - Hỗ trợ đào tạo nghiên cứu sinh Vượt tiêu Vượt tiêu 10 Đào tạo thạc sỹ/nghiên cứu sinh Đăng ký giải pháp hữu ích (được chấp nhận đơn hợp lệ) Đạt 16 3.2 Hình thức, cấp độ công bố kết Ghi địa Tình trạng cảm ơn (Đã in/ chấp nhận in/ nộp đơn/ tài trợ Sản phẩm chấp nhận đơn hợp lệ/ TT cấp giấy xác nhận SHTT/ xác ĐHQGHN nhận sử dụng sản phẩm) quy định Công trình công bố tạp chí khoa học quốc tế theo hệ thống ISI/Scopus 1.1 H Nguyen Thi Bich, H Duong Thi Ly, T Vu Thi, N Pham Thi Hong, L Dinh Doan, T J Craig, H Le Thi Minh, S Duong-Quy, Study of the correlations between FENO in exhaled breath and Đã chấp nhận in Có atopic status, blood eosinophils, FCER2 mutation, and asthma control in Vietnamese children Journal of Asthma and Allergy Tạp chí ISI/Scopus (Q2, ISSN=1178-6965, IF=3.19) Sách chuyên khảo xuất ký hợp đồng xuất 2.1 2.2 Đăng ký sở hữu trí tuệ 3.1 Đăng ký giải pháp hữu ích quy Đã chấp nhận đơn Có trình phân tích gen FCER2 Bài báo quốc tế không thuộc hệ thống ISI/Scopus 4.1 H Duong Thi Ly, N Pham Thi Hong, T Vu Thi, H Nguyen Thi Bich, H Le Thi Minh, S Duong-Quy, The frequency of FCER2 genotype distributions related to corticosteroid Đã đăng response in asthma patients http://doi.dox:10.12699/jfvp.7.20 Có treated at the National Hospital 2016.58 of Paediatrics, J Fran Viet Pneu 2016; 20(7): 58-63 Đánh giá chung (Đạt, không đạt) Đạt Vượt Vượt (ISSN: 2264-7899 Print/ 22640754 Online; http://doi.dox:10.12699/jfvp.7.20.20 16.58) Bài báo tạp chí khoa học ĐHQGHN, tạp chí khoa học chuyên ngành quốc gia báo cáo khoa học đăng kỷ yếu hội nghị quốc tế 5.1 Phạm Thị Hồng Nhung, Vũ Thị Giải Hội nghị Khoa học tuổi Thơm, Đậu Thế Huy, Nguyễn trẻ Khoa Y Dược lần thứ Thị Thu Hằng, Đinh Đoàn (Dự kiến đăng Tạp chí Y học Long, Dương Thị Ly Hương, Có thực hành số đặc biệt tháng Xây dựng quy trình phân tích đa 6/2016 theo quy định Hội hình gen CRHR1 FCER2 liên nghị KHTT Y Dược toàn quốc) quan đến đáp ứng corticoid Đạt 17 điều trị hen phế quản Kỷ yếu Hội nghị Khoa học tuổi trẻ Khoa Y Dược lần thứ (năm 2015) 5.2 Thi Bich Hanh Nguyen, Thi Ly Huong Duong, Thi Minh Huong Le and Quy Sy Duong, Study of the Correlations Between Đã in Exhaled Nitric Oxide and Atopy (chứng nhận giải poster xuất sắc Status, FCER2 Mutation, and Hội nghị quốc tế bệnh phổi Asthma Control in Children lần thứ 3) COPD, 13, 2016: 277 – 278 (ISSN: 1541-2555 print / 15412563 online DOI: 10.3109/15412555.2016.117051 5) 5.3 Dương Thị Ly Hương, Nguyễn Hoàng Long, Hoàng Minh Tuấn, Đặng Kim Thu, Tổng quan hệ thống: vai trò biến thể di truyền đáp ứng glucocorticoid bệnh Đã in nhân hen phế quản Hội nghị hô hấp phẫu thuật lồng ngực Pháp-Việt lần thứ J Fran Viet Pneu 2013; 05 (16): 1-37 Có Vượt (ISSN: 2264-7899 Print/ 22640754 Online) Báo cáo khoa học kiến nghị, tư vấn sách theo đặt hàng đơn vị sử dụng 6.1 6.2 Kết dự kiến ứng dụng quan hoạch định sách sở ứng dụng KH&CN 7.1 7.2 Ghi chú: - Cột sản phẩm khoa học công nghệ: Liệt kê thông tin sản phẩm KHCN theo thứ tự - Các ấn phẩm khoa học (bài báo, báo cáo KH, sách chuyên khảo…) chấp nhận có ghi nhận địa cảm ơn tài trợ ĐHQGHN theo quy định - Bản phô tô toàn văn ấn phẩm phải đưa vào phụ lục minh chứng báo cáo Riêng sách chuyên khảo cần có phô tô bìa, trang đầu trang cuối có ghi thông tin mã số xuất 18 3.3 Kết đào tạo Thời gian kinh phí tham gia đề Công trình công bố liên quan TT Họ tên (Sản phẩm KHCN, luận án, luận văn) tài (số tháng/số tiền) Nghiên cứu sinh Nguyễn Thị Bích Hạnh năm - Báo cáo khoa học Hội nghị NCS trường Đại học Y Hà Nội 2015 - Báo cáo khoa học Hội nghị quốc tế bệnh phổi lần thứ (tại Monaco) – Giải nhì Poster - Kết học tập năm - Luận văn tốt nghiệp - Bài báo đăng kỷ yếu Hội nghị Đã bảo vệ Học viên cao học Nguyễn Thị Thu Hằng  Ghi chú: - Gửi kèm photo trang bìa luận án/ luận văn/ khóa luận giấy chứng nhận nghiên cứu sinh/thạc sỹ học viên bảo vệ thành công luận án/ luận văn; - Cột công trình công bố ghi mục III.1 PHẦN IV TỔNG HỢP KẾT QUẢ CÁC SẢN PHẨM KH&CN VÀ ĐÀO TẠO CỦA ĐỀ TÀI TT Sản phẩm Số lượng đăng ký Số lượng hoàn thành Bài báo công bố tạp chí khoa học quốc tế theo 1 hệ thống ISI/Scopus 0 Sách chuyên khảo xuất ký hợp đồng xuất Đăng ký sở hữu trí tuệ Bài báo quốc tế không thuộc hệ thống ISI/Scopus Số lượng báo tạp chí khoa học ĐHQGHN, tạp chí khoa học chuyên ngành quốc gia báo cáo khoa học đăng kỷ yếu hội nghị quốc tế Báo cáo khoa học kiến nghị, tư vấn sách theo đặt hàng đơn vị sử dụng 0 0 Kết dự kiến ứng dụng quan hoạch định sách sở ứng dụng KH&CN Đào tạo thạc sĩ Hỗ trợ đào tạo NCS Góp phần đào tạo 02 Thạc sỹ Y học/ Dược học, hỗ trợ đào tạo nghiên cứu sinh 19 PHẦN V TÌNH HÌNH SỬ DỤNG KINH PHÍ TT A B Nội dung chi Chi phí trực tiếp Thuê khoán chuyên môn Nguyên, nhiên vật liệu, Thiết bị, dụng cụ Công tác phí Dịch vụ thuê Hội nghị, Hội thảo, kiểm tra tiến độ, nghiệm thu In ấn, Văn phòng phẩm Chi phí khác Chi phí gián tiếp Quản lý phí Chi phí điện, nước Tổng số Kinh phí duyệt (triệu đồng) 273,00 92,00 139,50 - Kinh phí thực (triệu đồng) 273,00 92,00 139,50 - 7,50 7,50 10,00 24,00 27,00 27,00 10,00 24,00 27,00 27,00 300,00 300,00 Ghi Đạt 100% Đạt 100% Đạt 100% PHẦN V KIẾN NGHỊ (về phát triển kết nghiên cứu đề tài; quản lý, tổ chức thực cấp) Qua trình nghiên cứu, có đề xuất sau: cần tiếp tục có nghiên cứu đối tượng bệnh nhân hen nặng, hen kiểm soát kém, hen không đáp ứng với thuốc điều trị nhằm tìm yếu tố ảnh hưởng mối liên quan đến mức độ đáp ứng Trên sở đó, đưa khuyến cáo, bước có kế hoạch can thiệp kịp thời nhằm cải thiện tỷ lệ đáp ứng thuốc bệnh nhân PHẦN VI PHỤ LỤC (minh chứng sản phẩm nêu Phần III) Hà Nội, ngày 05 tháng 06 năm 2016 Đơn vị chủ trì đề tài (Thủ trưởng đơn vị ký tên, đóng dấu) Chủ nhiệm đề tài (Họ tên, chữ ký) Dương Thị Ly Hương 20 Phụ lục Sơ đồ nghiên cứu Sơ đồ nghiên cứu FeNO: Fractional exhaled nitric oxide (nitric oxide khí thở ra) HPQ: Hen phế quản GINA: Global Initiative for Asthma (Hiệp hội chống hen toàn cầu) SABA: Short-acting beta agonist (thuốc cường beta tác dụng ngắn) ICS: inhaler corticosteroid (Thuốc corticoid đường hít) Trong nghiên cứu, sử dụng Flixotide (Fluticasone propionate) đường hít với mức liều: (theo khuyến cáo GINA)  Liều thấp: ≤ 250 µg (2 liều xịt: sáng nhát, tối nhát)  Liều trung bình: >250  500 µg (3 liều xịt: sáng nhát, chiều nhát ngược lại; liều xịt: sáng nhát, tối nhát)  Liều cao: > 500 µg (5 liều xịt: sáng nhát, chiều nhát ngược lại; liều xịt: sáng nhát, tối nhát) Bệnh nhi phối hợp tốt sử dụng thuốc trực tiếp, bệnh nhi nhỏ phối hợp hít thuốc chưa tốt cho sử dụng buồng đệm 21 Phụ lục Mức độ kiểm soát hen theo GINA Kiểm soát hoàn toàn: tất đặc điểm Kiểm soát phần: ≥ đặc điểm tuần Triệu chứng ban ngày lần/tuần Hạn chế hoạt động Triệu chứng thức giấc ban đêm Không Có Không Có Đặc điểm Nhu cầu dùng thuốc cắt < lần/tuần > lần/tuần Lưu lượng đỉnh Bình thường < 80% giá trị tốt BN Không ≥ lần/năm Đợt kịch phát hen Chưa kiểm soát ≥ đặc điểm mức kiểm soát phần tuần Phụ lục Mức độ kiểm soát hen theo ACT (Asthma control test) Sử dụng bảng câu hỏi để vấn trẻ (với trẻ 12 tuổi), vấn bố mẹ trẻ (với trẻ 4-11 tuổi) Cho điểm vào thang đánh giá, cộng tổng số điểm để đánh giá, phân loại trẻ theo mức kiểm soát hen  Thang đánh giá mức độ kiểm soát hen dành cho trẻ 12 tuổi: Hình 2.1: ACT đánh giá kiểm soát hen với trẻ 12 tuổi Cách tính điểm:    < 20 điểm: Hen chưa kiểm soát 20-24 điểm: Hen kiểm soát tốt 25 điểm: Hen kiểm soát hoàn toàn 22  Thang đánh giá mức độ kiểm soát hen dành cho trẻ từ đến 11 tuổi: phải vấn trẻ bố mẹ o Hỏi trẻ câu hỏi Hình 2.2: Test ACT đánh giá kiểm soát hen với trẻ từ đến 11 tuổi (dành cho trẻ) o Hỏi bố mẹ câu hỏi: Hình 2.3:Test ACT đánh giá kiểm soát hen với trẻ từ đến 11 tuổi (dành cho bố mẹ) Cách tính điểm: Cộng điểm câu hỏi trẻ trực tiếp trả lời (có thể giải thích cho trẻ) câu hỏi cha mẹ người chăm sóc trẻ  Nếu < 20 điểm: Tình trạng hen trẻ chưa kiểm soát,  Nếu 20-27 điểm: Tình trạng hen trẻ kiểm soát tốt Bệnh nhân phân thành hai nhóm: Chưa kiểm soát kiểm soát tốt 23