Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ðỖ TUẤN ANH NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA CHẾ PHẨM MOLDTEX VÀ BAO BÌ ðẾN CHẤT LƯỢNG THỨC ĂN CHĂN NUÔI CÔNG NGHIỆP TRONG QUÁ TRÌNH BẢO QUẢN TẠI CÔNG TY CỔ PHẦN TẬP ðOÀN DABACO VIỆT NAM CHUYÊN NGÀNH : CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Mà SỐ : 60.54.01.04 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGÔ XUÂN MẠNH HÀ NỘI - 2014 Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây ñề tài nghiên cứu riêng tôi, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa ñược sử dụng nghiên cứu Tôi xin cam ñoan, giúp ñỡ cho việc thực luận văn ñã ñược cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn ñều ñã ñược rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Tác giả ðỗ Tuấn Anh Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp i Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành ñề tài tốt nghiệp, cố gắng thân ñã nhận ñược nhiều quan tâm giúp ñỡ nhiệt tình thầy cô, gia ñình, bạn bè người thân Trước hết xin gửi ñến Ban Giám hiệu Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, Khoa Công nghệ thực phẩm kính trọng niềm tự hào ñược học tập nghiên cứu trường năm qua Tôi xin ñược bày tỏ biết ơn sâu sắc ñến thầy, cô giáo ñã dạy dỗ suốt thời gian qua ðặc biệt xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Ngô Xuân Mạnh - Khoa Công nghệ thực phẩm - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã tận tình hướng dẫn, giúp ñỡ trình thực ñề tài hoàn thành luận văn Tôi xin gửi lời chân thành cảm ơn: - Công ty Cổ phần Tập ñoàn DABACO Việt Nam Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Tác giả ðỗ Tuấn Anh Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp ii Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi MỤC LỤC LỜI CAM ðOAN Error! Bookmark not defined LỜI CẢM ƠN Error! Bookmark not defined MỤC LỤC .Error! Bookmark not defined DANH MỤC CÁC BẢNG .Error! Bookmark not defined DANH MỤC CÁC HÌNH Error! Bookmark not defined DANH MỤC TỪ VIẾT TĂT viii MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề .1 1.2 Mục ñích – yêu cầu .2 1.2.1 Mục ñích .2 1.2.2 Yêu cầu 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tình hình sản xuất sử dụng nguyên liệu TACN Việt Nam .3 2.2 Giới thiệu chế phẩm Moldtex 2.3 Những ảnh hưởng ñộc tố nhiễm nấm mốc gây chăn nuôi .5 2.4 Những kết nghiên cứu sử dụng acid hữu TACN .6 2.4.1 Ảnh hưởng PA ñến sinh trưởng phát triển gia cầm 2.4.2 Ảnh hưởng PA ñến khả ăn vào chuyển hóa thức ăn 10 2.5 Hiệu việc sử dụng PA 10 2.5.1 Hiệu kháng khuẩn PA 10 2.5.2 Hiệu làm chất kháng nấm bảo quản TACN .12 2.6 Sử dụng chất hóa học có khả gắn kết dính, hấp phụ ñộc tố sản xuất TACN 14 2.7 Màng bao gói 16 VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Vật liệu nghiên cứu .18 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp iii Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 3.1.1 ðối tượng – ñịa ñiểm thời gian nghiên cứu 18 3.1.2 Thiết bị, dụng cụ, hóa chất 18 3.2 Nội dung nghiên cứu 20 3.3 Phương pháp nghiên cứu .20 3.3.1 Phương pháp ñiều tra, thu mẫu 20 3.3.2 Phương pháp xác ñịnh thành phần nấm hại TACN .21 3.3.3 Phương pháp phân lập nấm 22 3.3.4 Phương pháp phân loại nấm 23 3.3.5 Phương pháp ñịnh tên nấm kỹ thuật sinh học phân tử 23 3.3.6 Phương pháp bố trí thí nghiệm ñánh giá hiệu sử dụng chế phẩm Moldtex phòng chống nấm môi trường PDA TACN D42 27 3.3.7 Khảo sát hiệu Moldtex ñến chất lượng TACN D42 trình bảo quản 33 3.3.8 Nghiên cứu ảnh hưởng ñộ dày bao bì ñến chất lượng TACN thời gian bảo quản 33 3.3.9 Phương pháp lấy mẫu phân tích 34 3.3.10 Phương pháp phân tích 34 3.3.11 Phương pháp xử lý số liệu 37 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 4.1 Thành phần ñặc ñiểm hình thái nấm gây hại TACN D42 trình bảo quản Công ty Cổ Phần Tập ðoàn DABACO Việt Nam 38 4.1.1 Thành phần nấm gây hại TACN D42 38 4.1.2 PCR giải trình tự .41 4.1.3 Tìm kiếm trình tự tương ñồng GenBank .41 4.1.4 Phân tích phả hệ 42 4.1.5 ðặc ñiểm hình thái số loài nấm gây hại TACN D42 bảo quản kho 43 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp iv Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 4.2 Tỉ lệ nhiễm nấm TACN D42 bảo quản kho công ty cổ phần tập ñoàn DABACO Việt Nam, Bắc Ninh 2013 47 4.3 Thí nghiệm ñánh giá ảnh hưởng chế phẩm Moldtex ñối với Aspergillus flavus phân lập ñược môi trường PDA .48 4.4 Hiệu sử dụng chế phẩm Moldtex phòng trừ nấm nhiễm TACN D42 50 4.4.1 Hiệu chế phẩm Moldtex ñối với TACN D42 (không lây nhiễm nấm Aspergillus flavus) 50 4.4.2 Hiệu việc xử lý chế phẩm Moldtex ñối với TACN D42 sau nhiễm nấm Aspergillus flavus (hiệu chống nấm) 52 4.4.3 Hiệu việc xử lý chế phẩm Moldtex ñối với TACN D42 trước nhiễm nấm Aspergillus flavus (hiệu phòng nấm) 53 4.5 ðánh giá hiệu sử dụng chế phẩm Moldtex ñến chất lượng TACN D42 trình bảo quản 55 4.6 Xác ñịnh ñộ dày bao bì thích hợp ñể bảo quản TACN D42 56 4.6.1 Ảnh hưởng ñộ dày bao bì tới ñộ ẩm TACN sau thời gian bảo quản 57 4.6.2 Ảnh hưởng ñộ dày bao bì tới hàm lượng protein TACN sau thời gian bảo quản .58 4.6.3 Ảnh hưởng ñộ dày bao bì tới hàm lượng lipid TACN sau thời gian bảo quản .59 4.6.4 Ảnh hưởng ñộ dày bao bì tới ñộc tố aflatoxin B1 TACN D42 sau thời gian bảo quản 60 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ .62 5.1 Kết luận .62 5.2 ðề nghị 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO 63 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp v Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng 2.1 Nhu cầu thức ăn chăn nuôi Việt Nam ñến 2020 Bảng 2.2 Nồng ñộ ức chế tối thiểu PA ñối với nhóm vi sinh vật 13 Bảng 2.3 ðộ thấm khí O2 CO2 bao bì thông dụng 17 Bảng 4.1 Thành phần nấm phân lập từ TACN dựa vào ñặc ñiểm hình thái 38 Bảng 4.2 Thành phần nấm hại TACN D42 bảo quản kho Công ty CP tập ñoàn DABACO Việt Nam, năm 2013 40 Bảng 4.3 Giải trình tự tìm kiếm chuỗi gần gũi Ngân hàng Gen (GenBank) .41 Bảng 4.4 Ảnh hưởng thời gian bảo quản TACN D42 ñến tỉ lệ nhiễm số loài nấm kho Công ty cổ phần tập ñoàn DABACO Viêt Nam năm 2013 47 Bảng 4.5 Ảnh hưởng chế phẩm Moldtex ñến phát triển nấm Aspergillus flavus môi trường PDA có bổ sung chế phẩm 49 Bảng 4.6 Hiệu chế phẩm Moldtex ñối với TACN D42 không lây nhiễm nấm Aspergillus flavus .51 Bảng 4.7 Hiệu việc xử lý chế phẩm Moldtex ñối với TACN D42 sau nhiễm nấm Aspergillus flavus (hiệu chống nấm) 52 Bảng 4.8 Hiệu việc xử lý chế phẩm Moldtex ñối với TACN D42 trước nhiễm nấm Aspergillus flavus (hiệu phòng nấm) .54 Bảng 4.9 Chất lượng TACN D42 sau 60 ngày bảo quản 55 Bảng 4.10 Ảnh hưởng ñộ dày bao bì tới ñộ ẩm (%) TACN D42 thời gian bảo quản 57 Bảng 4.11 Ảnh hưởng ñộ dày bao bì tới hàm lượng protein (%) TACN D42 sau thời gian bảo quản 58 Bảng 4.12 Ảnh hưởng ñộ dày bao bì tới hàm lượng lipid (%) TACN D42 sau thời gian bảo quản 59 Bảng 4.13 Ảnh hưởng ñộ dày bao bì tới hàm lượng aflatoxin B1 (ppb) TACN D42 sau thời gian bảo quản .60 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp vi Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên hình Trang Hình 2.1 Sơ ñồ minh họa cụm gen ITS sinh vật nhân thật 26 Hình 4.1 Hình thái tản nấm loại nấm phân lập ñược từ TACN D42 38 Hình 4.2 Hình thái bào tử, quan sinh sản vô tính mẫu nấm 39 Hình 4.3 Phả hệ dựa trình tự toàn vùng ITS mẫu nấm 42 Hình 4.4 ðặc ñiểm hình thái nấm N1 43 Hình 4.5 ðặc ñiểm hình thái của nấm Lichtheimia corymbifera 44 Hình 4.6 ðặc ñiểm hình thái của nấm Rhizopus sp1 45 Hình 4.7 ðặc ñiểm hình thái nấm Aspergilus flavus 46 Hình 4.8 ðặc ñiểm của nấm Penicilium simplicissimum 46 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp vii Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC TỪ VIẾT TĂT Chữ viết tắt BB Từ viết tắt Bao bì BQ Bảo quản Ca Tỉ lệ hạt nhiễm công thức ñối chứng CT Công thức D42 Thức ăn dành cho lợn từ 30kg ñến xuất bán ðC ðối chứng HQ Hiệu ITS Internal Transcribed Spacer KDTV Kiểm dịch thực vật PA Axit propionic PDA Potato dextrose agar TACN Thức ăn chăn nuôi Ta Tỉ lệ hạt nhiễm công thức thí nghiệm TLN Tỷ lệ nhiễm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp viii Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề Trong xã hội nay, phát triển người gắn liền với nhu cầu thiết yếu ăn mặc, vui chơi, giải trí, khám phá,…và nhu cầu phát triển kinh tế Trong ñó, nhu cầu ăn uống phát triển kinh tế ñược ưu tiên hàng ñầu Thực phẩm phục vụ cho việc ăn uống người phần lớn từ trồng trọt, chăn nuôi, từ ñánh bắt thủy hải sản Song chăn nuôi nguồn thực phẩm chủ yếu Vì ñể ñáp ứng tốt nhu cầu người ngành chăn nuôi ñã ñược trọng phát triển Thị trường thức ăn chăn nuôi Việt Nam phát triển mạnh mẽ Bằng chứng có nhiều công ty sản xuất thức ăn chăn nuôi công nghiệp ñời công ty cũ mở rộng sản xuất ñể ñáp ứng nhu cầu thị trường Mặt khác, trình ñộ kỹ thuật chăn nuôi nước ta ngày phát triển Trước chủ yếu chăn nuôi nhỏ lẻ hộ gia ñình ngày ñã chuyển thành trang trại, công ty chăn nuôi với sản phẩm ña dạng gia súc, gia cầm thủy cầm Ngày nay, với phát triển kinh tế thị trường ngành chăn nuôi phát triển theo xu hướng hàng hóa Do vậy, suất chất lượng thịt ñược quan tâm ñặc biệt Nhờ việc áp dụng tiến khoa học kỹ thuật (lai tạo giống, dinh dưỡng, thú y,…) ngành chăn nuôi nước ngày phát triển ðể theo kịp ñược phát triển ngành chăn nuôi việc tạo sản phẩm thức ăn chăn nuôi (TACN) công nghiệp (CN) cần thiết giúp làm tăng nhanh suất, tạo sản phẩm có chất lượng cao ñồng thời giảm chi phí cho ñơn vị sản phẩm từ ñó ñạt ñược hiệu kinh tế cao Khó khăn trình bảo quản TACN CN vấn ñề chất lượng thức ăn suy giảm thời gian bảo quản Trong nguyên nhân gây làm giảm chất lượng thức ăn nấm mốc nguyên nhân chủ yếu Nấm mốc phát triển làm biến ñổi chất lượng thức ăn, sản sinh ñộc tố, dẫn ñến thiệt hại kinh tế uy tín nhà sản xuất Chế phẩm Moldtex Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi MỨC Ý NGHĨA P = 0.001 NỒNG ðỘ ðC 250 500 750 1000 1250 ðỔ ẨM 12.92a 12.88a 12.76a 12.62b 12.6b 12.6b LIPID 4.68a 4.7a 4.71a 4.74a 4.75a 4.76a PROTEIN 14.24a 14.26a 14.27a 14.32a 14.24a 14.34a Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp AFATOXIN 60.8a 55.14b 48.02c 30.11d 29.95d 29.87d 84 Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO DO AM 21:58 Thursday, January 16, 2014 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels NONGDO Values 1000 1250 250 500 750 DC Number of Observations Read 18 Number of Observations Used 18 PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO DO AM 21:58 Thursday, January 16, 2014 The ANOVA Procedure Dependent Variable: DOAM Source DF Squares Sum of Mean Square F Value Pr > F Model 0.31620000 0.06324000 3.94 0.0240 Error 12 0.19260000 0.01605000 Corrected Total 17 0.50880000 R-Square Coeff Var Root MSE DOAM Mean 0.621462 0.995197 0.126689 12.73000 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NONGDO 0.31620000 0.06324000 3.94 0.0240 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 85 Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 21:58 Thursday, January 16, 2014 DO AM The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for DOAM NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha Error Degrees of Freedom Error Mean Square Number of Means Critical Range 2254 2359 0.05 12 0.01605 2423 2465 2494 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NONGDO A A A A A 12.9200 DC 12.8800 250 12.7600 500 12.6200 750 12.6000 1000 12.6000 1250 B B B B B B B Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 86 Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 21:58 Thursday, January 16, 2014 LIPID The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels NONGDO Values 1000 1250 250 500 750 DC Number of Observations Read Number of Observations Used PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 18 18 21:58 Thursday, January 16, 2014 LIPID The ANOVA Procedure Dependent Variable: LIPID Source DF Squares Sum of Mean Square F Value Pr > F Model 0.01396111 0.00279222 0.22 0.9473 Error 12 0.15266667 0.01272222 Corrected Total 17 0.16662778 R-Square Coeff Var Root MSE LIPID Mean 0.083786 2.387711 0.112793 4.723889 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NONGDO 0.01396111 0.00279222 0.22 0.9473 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 87 Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 21:58 Thursday, January 16, 2014 LIPID The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for LIPID NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.012722 Number of Means Critical Range 2007 2100 2157 2195 2221 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NONGDO A A A A A A A A A A A 4.76000 1250 4.75000 1000 4.74000 750 4.71000 500 4.70000 250 4.68333 DC Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 88 Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 21:58 Thursday, January 16, 2014 PROEIN The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels NONGDO Values 1000 1250 250 500 750 DC Number of Observations Read 18 Number of Observations Used 18 PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 10 PROEIN 21:58 Thursday, January 16, 2014 The ANOVA Procedure Dependent Variable: PROTEIN Source DF Squares Sum of Mean Square F Value Pr > F Model 0.02665000 0.00533000 0.33 0.8831 Error 12 0.19180000 0.01598333 Corrected Total 17 0.21845000 R-Square Coeff Var Root MSE PROTEIN Mean 0.121996 0.885434 0.126425 14.27833 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F NONGDO 0.02665000 0.00533000 0.33 0.8831 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 89 Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 11 21:58 Thursday, January 16, 2014 PROEIN The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for PROTEIN NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.015983 Number of Means Critical Range 2249 2354 2418 2460 2489 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N NONGDO A A A A A A A A A A A 14.3400 1250 14.3200 750 14.2700 500 14.2600 250 14.2400 1000 14.2400 DC Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 90 Ket-noi.com Ket-noi.com Kho Kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 12 21:58 Thursday, January 16, 2014 AFATOXIN The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels NONGDO Values 1000 1250 250 500 750 DC Number of Observations Read 18 Number of Observations Used 18 PHAN TICH PHUONG SAI YEU TO 13 AFATOXIN 21:58 Thursday, January 16, 2014 The ANOVA Procedure Dependent Variable: AFATOXIN Source DF Squares Sum of Mean Square F Value Pr > F Model 2986.368450 597.273690 633.61 F NONGDO 2986.368450 597.273690 633.61