VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN VIỆN HOÁ HỌC CÁC HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN BÁO CÁO CHUYÊN ĐỀ 3.1 (HĐ số 04/HĐ-VAST.TB ngày 04 tháng năm 2014) Tên chuyên đề: NGHIÊN CỨU, PHÂN TÍCH, ĐÁNH GIÁ CÁC YẾU TỐ SINH THÁI ẢNH HƯỞNG TỚI HÀM LƯỢNG ROTUNDIN TRONG CỦ BÌNH VÔI TRỒNG Ở VƯỜN PILOT Thuộc đề tài: “Nghiên cứu xây dựng quy trình chiết tách hoạt chất rotundin bình vôi trồng qui mô sản xuất thử, áp dụng tỉnh Thái Bình” Mã số: VAST.NĐP.07/14-15 Người báo cáo: TS Nguyễn Văn Dư Hà Nội, 2015 VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN VIỆN HOÁ HỌC CÁC HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN BÁO CÁO CHUYÊN ĐỀ (HĐ số 04/HĐ-VAST.TB ngày 04 tháng năm 2014) Tên chuyên đề: NGHIÊN CỨU, PHÂN TÍCH, ĐÁNH GIÁ CÁC YẾU TỐ SINH THÁI ẢNH HƯỞNG TỚI HÀM LƯỢNG ROTUNDIN TRONG CỦ BÌNH VÔI TRỒNG Ở VƯỜN PILOT Thuộc đề tài: “Nghiên cứu xây dựng quy trình chiết tách hoạt chất rotundin bình vôi trồng qui mô sản xuất thử, áp dụng tỉnh Thái Bình” Mã số: VAST.NĐP.07/14-15 Người báo cáo (Ký, họ tên) Nguyễn Văn Dư Chủ nhiệm đề tài (Ký, họ tên) Xác nhận quan (Ký, họ tên đóng dấu) MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐÊ CHƯƠNG I TỔNG QUAN VẤN ĐÊ NGHIÊN CỨU CHƯƠNG MỤC TIÊU, NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .10 CHƯƠNG KẾT LUẬN, KIẾN NGHI 16 TÀI LIỆU THAM KHẢO .17 ĐẶT VẤN ĐỀ Cây Bình vôi có tên khoa học Stephania spp., họ Tiết dê (Menispermaceae), dược liệu sử dụng phổ biến y học cổ truyền Củ Bình vôi thái lát mỏng phơi khô, sắc uống tinh chế bột, ngâm rượu uống chế dạng chè thuốc với liều 3-6 g/ngày để chữa ngủ, ho hen, kiết lỵ, đau bụng Ngoài Bình vôi dùng để chữa đau dày, đau răng, viêm họng, mụn nhọt, sốt rét, phong thấp, tê đau, phù thận, v.v Có nhiều tác dụng củ Bình vôi có alkaloid Ltetrahydropalmatin (rotundin), stepharin, roemerin, cycleanin, có dược tính cao Trong quan trọng rotundin Tuy nhiên, người ta thấy hàm lượng rotundin khác loài, loài củ rotundin thu vùng khác có hàm lượng rotundin khác Các mẫu Bình vôi tự nhiên nhóm nghiên cứu thu thập mẫu Bình vôi trồng điều kiện sinh thái khác cho giá trị hàm lượng totundin khác Câu hỏi nghiên cứu khoa học có mối quan hệ điều kiện sinh thái hàm lượng rotundin Trong chuyên đề này, bàn luận tới yếu tố sinh thái ánh sáng, thổ nhưỡng, nhiệt độ ảnh hưởng tới hàm lượng rotundin loài Bình vôi trông điều kiện đồng trồng điều kiện miền núi chân núi đá vôi CHƯƠNG I TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Tổng quan Bình vôi 1.1.1 Đặc điểm hình thái của Bình vôi (Stephania spp.) Cây thảo leo thân quấn, sống lâu năm Thân nhẵn, thường có màu xanh, phần gốc hóa gỗ Rễ phình to thành củ to ( nặng 20kg ) vỏ xù xì màu nâu, nâu đen, hình dáng thay đổi tùy theo nơi củ phát triển Lá hình khiên, mọc cách, cuống dài, dính vào phiến khoảng 1/3, phiến hình tim gần tròn có cạnh tam giác tròn, mép nguyên lượn song, hai mặt nhẵn, gân xuất phát từ chổ đính cuống lá, rõ mặt lá.Cụm hoa hình xim tán mọc kẽ cành già rụng lá; hoa đực hoa khác gốc; hoa đực có đài xếp thành hai vòng, cánh hoa màu vàng cam; nhị hàn liền thành tục với bao phấn màu vàng nhạt xếp thành vòng tròn Khi hoa nở bao phấn mở nắp ngang quay xung quanh Hạt phấn nhỏ màu vàng; hoa có đài; hai cánh hoa, bầu hình trứng Quả hạch hình cầu dẹt, chín có màu đỏ da cam, hạt cứng hình móng ngựa, hình trứng hình gần tròn tùy theo loài Mùa hoa: tháng 2-6; mùa vào tháng 7-10 1.1.2 Phân bố, kỹ thuật trồng Bình vôi chế biến Ở Việt Nam miền Bắc Trung Nam có Bình vôi Nhưng phổ biến vùng núi đá vôi Tuyên Quang, Cao Bằng, Thái Nguyên, Phú Thọ, Lạng Sơn, Quảng Ninh, Thanh Hóa, Lâm Đồng, Vũng Tàu, Bà Rịa Riêng loài Stephania pierei Diels tập trung chủ yếu tỉnh ven biển Bình Định, Phú Yên, Ninh Thuận Trên giới, Bình vôi phân bố nhiều nước Ấn Độ, Trung Quốc, Lào, Căm Pu Chia, Thái Lan nước Đông Nam châu Á, … Cây Bình vôi có nơi sống tương đối đa dạng tập trung vùng núi đặc biệt địa hình núi đá vôi Trong tự nhiên, lúc bé thích sống tán lại ưa sáng trưởng thành Phần củ thường phình to lộ mặt đất hay khe đá Người dân tộc Dao Ba Vì trồng nhiều Bình vôi để làm thuốc Ở đây, Bình vôi trồng lớn trồng làm dàn tre cho Bình vôi leo Các thầy thuốc vào rừng, gặp Bình vôi tái sinh, đưa sưu tập vào vườn thuốc, chờ cho hoa, quả, lấy hạt đem gieo Hiện ta thu hái củ Bình vôi chủ yếu từ nguồn mọc hoang dại Khi thu cạo vỏ nâu đen, thái lát mỏng đem phơi sấy khô đem chiết rotundin Có thể trồng Bình vôi hạt phần đầu củ Thu hái chín vào khoảng tháng 8-10, lấy hạt bảo quản cát ẩm rồi gieo hạt vào mùa xuân (tháng 2-3) Ngoài ươm giống từ hạt, cắt phần đầu củ để làm giống Mỗi đầu xẻ làm mảnh trồng vào mùa xuân Thu hoạch trồng sau 2-3 năm, thời gian lâu suất cao 1.2 Các yếu tố sinh thái ảnh hưởng tới sinh trưởng thực vật 1.2.1 Ánh sáng Ánh sáng giúp cho xanh thực chức quang hợp Mỗi loài thực vật có cường độ quang hợp cực đại cường độ ánh sáng khác Người ta phân hai nhóm thực vật: ưa sáng (gồm thực vật có cường độ quang hợp cực đại cường độ chiếu sáng lớn, gỗ rừng thưa, bụi savan, bạch đàn, phi lao, lúa, đậu phọng …); ưa bóng (gồm thực vật có cường độ quang hợp cực đại cường độ chiếu sáng thấp, lim, vạn niên thanh, dong, ràng ràng …) Ánh sáng tác động rõ rệt đến sự sinh sản thực vật Thời gian chiếu sáng dài vùng ôn đới (cây dài ngày) phát triển nhanh, hoa sớm; ngược lại phần lớn nhiệt đới (cây ngắn ngày) hoa muộn Ánh sáng tạo nên đặc điểm thích nghi hình thái, giải phẩu sinh lý sinh vật 1.2.2 Nhiệt độ Sự sống tồn khoảng nhiệt độ từ –200o +100÷C oC, đa số loài tồn phát triển khoảng từ oC đến 50oC Mỗi loài sinh vật sinh sản nhiệt độ tối thiểu gọi nhiệt độ phát triển biên độ nhiệt định Vì vậy, có sinh vật rộng nhiệt, sinh vật hẹp nhiệt, có động vật đẳng nhiệt, động vật biến nhiệt Nhiệt độ trái đất phụ thuộc vào lượng mặt trời thay đổi theo vùng địa lý, theo chu kỳ năm Nhiệt độ tác động trực tiếp gián tiếp đến sự sinh trưởng phát triển sự phân bố cá thể, quần thể, quần xã Nhiệt độ ảnh hưởng đến yếu tố khác môi trường độ ẩm, đất … Sự khác nhiệt độ không gian thời gian tạo nhóm sinh thái có khả thích nghi khác 1.2.3 Nước độ ẩm Căn cứ vào nhu cầu thường xuyên nước, người ta chia thực vật thành bốn nhóm thực vật thủy sinh (sống hoàn toàn nước rong, tảo với thân dài, mảnh, mảnh dài, mô khí phát triển, lỗ khí nhiều); thực vật ưa ẩm (mọc vùng bờ ao, đầm lầy, ruộng lúa …); thực vật cần độ ẩm trung bình (cần nhiệt độ, ánh sáng, dinh dưỡng vừa phải phổ biến rộng); thực vật chịu hạn (những vừa chịu nóng, ưa sáng có khả tự tích lũy nước điều tiết nước, thoát nước, họ xương rồng, họ thầu dầu, họ dầu, họ hòa thảo …) Nước có vai trò quan trọng đời sống sinh vật Trong thể sinh vật khoảng 60-90% khối lượng nước Nước cần cho phản ứng sinh hóa diễn quan, mô tế bào sinh vật, nước nguyên liệu cho quang hợp, phương tiện vận chuyển chất vô cơ, hữu cơ, vận chuyển máu chất dinh dưỡng động vật Nước tham gia vào trình trao đổi lượng điều hòa nhiệt độ thể Độ ẩm tương đối yếu tố định tốc độ nước bay hơi, yếu tố sinh thái quan trọng thực vật cạn Trên thực tế, ảnh hưởng độ ẩm tương đối thường khó tách rời ảnh hưởng nhiệt độ 1.2.4 Không khí-Gió Gió có ảnh hưởng rõ rệt đến nhiệt độ, độ ẩm môi trường dẫn đến sự thay đổi thời tiết, ảnh hưởng đến sự thoát nước thực vật Gió có vai trò quan trọng phát tán vi sinh vật, bào tử, phấn hoa, quả, hạt thực vật … xa Nhân dân ta có câu ca dao "Gió Đông chồng lúa chiêm, gió Bắc duyên lúa mùa" để nói lên mối quan hệ lúa gió Gió Đông Nam thổi từ biển Đông vào làm cho thời tiết ấm, nhiều nước, gây mưa Lúa chiêm theo thời vụ trước (ở đồng Bắc bộ) thứ lúa cấy từ trước tết âm lịch, gặt vào tháng Khi gió Đông thổi tới (cuối mùa xuân), trời ấm, có mưa làm cho lúa chiêm tươi tốt, đẻ nhánh khỏe trổ Gió Bắc gió Đông bắc từ vùng cao áp Xibêri tới mang tính chất lục địa khô lạnh Lúa mùa theo thời vụ cũ thứ lúa cấy từ cuối tháng 6, gặt vào cuối tháng 10, tháng 11 Khi gió Bắc đến sớm (cuối tháng 10) khí hậu trở nên mát mẻ, có lợi cho sinh trưởng phát triển lúa mùa Ngoài ra, có gió lúa thụ phấn Loài cỏ lăn sống bãi biển có xếp tỏa tròn quanh trục, gió thổi mạnh, cụm bị gẫy lăn bãi cát, lăn đến đâu rụng đến đấy, nhờ mà chúng phân bố rộng bãi biển nhiệt đới châu Á, châu Phi, châu Đại dương Gió giúp cho sự vận chuyển nhiều động vật, chồn bay, cầy bay có khả lượn nhờ gió v.v… Tuy nhiên, gió mạnh gây hại cho động vật, thực vật phá hủy môi trường (gió mạnh, bão làm hạn chế khả bay động vật Ong mật bay gió có tốc độ 709 m/giây, muỗi 3,6 m/giây) Không khí cung cấp khí oxy (O2) cho sinh vật hô hấp sinh lượng dùng cho thể Thực vật lấy khí cacbonic (CO 2) từ không khí tác dụng ánh sáng mặt trời tạo chất hữu Không khí chuyển động (gió) có ảnh hưởng đến nhiệt độ, độ ẩm 1.2.5 Các chất khí pH CO2 pH: CO2 với nước tham gia tổng hợp chất hữu cơ, chất đệm giữ pH môi trường nước trung tính Trong môi trường nước, CO2 tồn dạng: Ca(HCO3)2 CaCO↔3 + CO2 + H2O O2 cần cho sự hô hấp sinh vật (trừ sinh vật kị khí bắt buộc) Nguồn oxy thủy vực oxy khuếch tán từ không khí (nhờ gió sự chuyển động nước) Nitơ (N2): Là thành phần bắt buộc protid-chất đặc trưng cho sự sống, cung cấp lượng cho thể, tham gia cấu tạo ADP, ATP Phospho (P): Thiếu phospho, động vật mềm xương, còi xương, liệt nửa thân sau Tỉ lệ thích hợp N/P nước 1/23 Canxi (Ca): Hàm lượng Ca cao ngăn chặn sự rút nguyên tố khác khỏi đất Ca cần cho sự thâm nhập NH 4+ NO3-vào rễ Tôm sống nước lợ nước hoàn toàn phải giàu Ca CHƯƠNG MỤC TIÊU, NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.3 Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu, phân tích yếu tố sinh thái làm ảnh hưởng tới hàm lượng rotundin củ Bình vôi trồng quy mô vườn pilot 1.4 Nội dung nghiên cứu Nội dung 1: Nghiên cứu yếu tố ánh sáng ảnh hưởng tới sinh trưởng hàm lượng Rotundin Bình vôi Nội dung 2: Nghiên cứu yếu tố nước độ ẩm ảnh hưởng tới sinh trưởng hàm lượng rotundin củ Bình vôi Nội dung 3: Nghiên cứu yếu tố nhiệt độ ảnh hưởng tới sinh trưởng hàm lượng Rotundin Bình vôi Nội dung 2: Nghiên cứu yếu tố độ pH ảnh hưởng tới sinh trưởng hàm lượng Rotundin Bình vôi 1.5 Phương pháp nghiên cứu 1.5.1 Thu thập mẫu vât: - Mẫu vật thu thập từ Vườn trồng thí nghiệm vườn Dược liệu Công ty Dược Khải Hà (Thái Bình) công ty dược Bio-Pharm (Hòa Bình) Mỗi nơi lấy 10 mẫu củ 10 cá thể - Các mẫu thu thập loài Stephania glabra (Roxb.) Mier, trồng chăm sóc với chế độ bón phân tưới nước địa điểm 1.5.2 Phương pháp phân tích hóa:  Hóa chất thiết bị - Rotundin chuẩn độ 99,8% Viện kiểm nghiệm thuốc trung ương cung cấp - Hệ thống sắc ký lớp mỏng CAMAG gồm có: máy chấm kính CAMAG – linomat (Thụy Sỹ) + Máy đo mật độ densitometry CAMAG TLC SCANNER 3, sử dụng với sự hỗ trợ phần mềm WinCATS (Thụy Sỹ) + Bản mỏng HP TLC plate silicagel 60 F254 Merck, kích thước 20 × 10cm  Điều kiện phân tích tiến hành  Chuẩn bị mẫu Mẫu củ bình vôi (500 gam củ tươi) sau thu hái, đem băm nghiền nhỏ ngâm dung dịch axit sunfuric nồng độ 3-4% 24h Dịch chiết axít lọc qua vải, vắt kiệt bã Bã lại tiếp tục ngâm dung dịch axít Lặp lại trình lần Các dịch chiết gom lại trung hòa dung dịch NaOH 8-10% đến pH 10 – 11 thu tủa alkaloid toàn phần Để lắng tủa, lọc qua giấy lọc, phơi sấy khô, cân khối lượng nghiền mịn thu bột alkaloid toàn phần - Dung dịch thử: Cân xác khoảng 0,05g bột alkaloid toàn phần cho vào bình tam giác dung tích 50 ml, thêm 40 ml ethanol 96 độ, chiết siêu âm thời gian 30 phút Lọc, thu dịch chiết vào bình định mức 50 ml, tráng giấy lọc ml ethanol 96 độ, bổ sung ethanol 96 độ đến vạch định mức, lắc dung dịch chấm sắc ký -Dung dịch đối chiếu: Hòa tan xác khoảng mg rotundin chuẩn 99,8% 10ml ethanol 96 độ (TT) để dung dịch có nồng độ khoảng 0,2 mg/ml  Điều kiện phân tích - Hệ thống sắc ký lớp mỏng CAMAG gồm có máy chấm kính CAMAG – linomat Máy đo mật độ densitometry CAMAG TLC SCANNER 3, sử dụng với sự hỗ trợ phần mềm WinCATS Bản mỏng HP TLC plate silicagel 60 F254 Merck, kích thước 20 × 10 cm - Hệ dung môi sắc ký: n-hexan - ethyl acetat (2:1) - Phát hiện: Đo TLC scanning, hấp thụ λ=283nm - Chấm thang chuẩn rotundin 99,8% với lượng chấm: 2, 4, 6, 8, 10µl; mẫu thử chấm 4-20 µl tùy mẫu, chấm nhắc lại 2-3 lần mẫu thử - Lớp mỏng triển khai đến 85 mm Kính sau lấy ra, để bay hết dung môi tủ hút, thời gian 15 phút Tiến hành đo scanning bước sóng 283nm, tốc độ quét 20 mm/s Hàm lượng rotundin mẫu thử xác định từ kết đường chuẩn xây dựng Hàm lượng % rotundin mẫu thử tính theo khối lượng khô kiệt tính theo công thức: m.V.100.100 Hàm lượng % = [1] v.1000.P (100-B) đó: m: lượng mẫu thử đo (µg), v: lượng mẫu thử chấm máy (µl), V: thể tích dịch chiết mẫu thử (50 ml), P: Khối lượng mẫu thử đem cân (g), B: Hàm ẩm lược liệu (%) CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 1.6 Điều kiện tự nhiên tỉnh Thái Bình Vị trí địa lý: Tỉnh Thái Bình tỉnh ven biển, nằm phía đông nam đồng châu thổ sông Hồng, từ 20º17´ vĩ Bắc đến 20º49´ vĩ Bắc, từ 106º06´ kinh Đông đến 106°39´ kinh Đông, diện tích tự nhiên 1546 km² (năm 2003) Thủy văn: Tỉnh Thái Bình nằm vùng nhiệt đới gió mùa, nên hàng năm đón nhận lượng mưa lớn (1.700-2.200mm), lại vùng bị chia cắt sông lớn, lưu sông Hồng, trước chạy biển Đặc điểm khí hậu: Khí hậu Thái Bình mang tính chất nhiệt đới ẩm gió mùa Thái Bình có nhiệt độ trung bình 23º-24ºC, tổng nhiệt độ hoạt động năm đạt 8400-8500ºC, số nắng từ 1600-1800h, tổng lượng mưa năm 1700-2200mm, độ ẩm không khí từ 80-90% Gió mùa mang đến Thái Bình mùa đông lạnh mưa ít, mùa hạ nóng mưa nhiều hai thời kỳ chuyển tiếp ngắn Đặc điểm địa hình: Nền địa hình Thái Bình đồng hình thành cách không lâu Đường bờ biển bồi đắp vòng 100-200 năm trở lại Thổ nhưỡng: Đất đai Thái Bình hình thành sự bồi đắp phù sa hệ thống sông lớn: Sông Hồng, sông Trà Lý (1 lưu sông Hồng), sông Luộc (cũng chi nhánh sông Hồng), sông Thái Bình 1.7 Điều kiện tự nhiên tỉnh Hòa Bình Địa hình: Đặc điểm bật địa hình tỉnh Hoà Bình đồi, núi dốc theo hướng Tây Bắc - Đông Nam, chia thành vùng rõ rệt: - Phía Tây Bắc (vùng cao): Bao gồm dải đồi núi lớn, bị chia cắt nhiều, độ cao trung bình so với mực nước biển từ 500-600m, nơi cao đỉnh núi Phu Canh (huyện Đà Bắc) cao 1.373m Độ dốc trung bình từ 30-350, có nơi dốc 400, địa hình hiểm trở, lại khó khăn 10 - Phía Đông Nam (vùng thấp): thuộc hệ thuỷ sông Đà, sông Bôi, sông Bưởi, sông Bùi, gồm huyện Kỳ Sơn, Tân Lạc, Kim Bôi, Lương Sơn, Yên Thuỷ, Lạc Thuỷ, Lạc Sơn, thành phố Hoà Bình Địa hình gồm dải núi thấp, bị chia cắt, độ dốc trung bình từ 20-250, độ cao trung bình so với mực nước biển từ 100-200 m, lại thuận lợi Khí hậu: Nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, độ ẩm trung bình 60%, cao tới 90% vào tháng tháng 9, thấp 75% vào tháng 11 tháng 12 Do khí hậu nhiệt đới gió mùa nên khí hậu chia làm mùa rõ rệt năm: - Mùa mưa: Kéo dài từ tháng đến tháng 10 năm, thời tiết nóng ẩm, mưa nhiều, nhiệt độ trung bình 240C, cao 38-390C vào tháng tháng 7, lượng mưa trung bình từ 1.700-1.800 mm (trên 90% tổng lượng mưa năm) - Mùa khô: Kéo dài từ tháng 11 năm trước đến tháng năm sau, thời tiết lạnh, mưa, nhiệt độ trung bình 15-160C, thấp 50C vào tháng tháng 12, vùng núi cao có nơi nhiệt độ xuống tới 20C, lượng mưa từ 100-200 mm (chiếm 10% lượng mưa năm) Khí hậu Hoà Bình nhìn chung tương đối phức tạp, mưa nắng thất thường tạo vùng tiểu khí hậu khác địa bàn tỉnh, gây ảnh hưởng không nhỏ đến sản xuất nông nghiệp Thổ nhưỡng: - Tài nguyên đất: Diện tích đất tự nhiên tỉnh Hoà Bình tính đến 1/1/ 2009 4.595,2 km2; gồm nhóm chính: Nhóm Feralit phát triển đá trầm tích biến chất kết cấu hạt thô loại đá chủ yếu sa thạch Pocfirit Spilit; nhóm đất phát triển đá trầm tích biến chất có kết cấu hạt mịn loại đá phiến thạch sét, diệp thạch; nhóm Feralit phát triển đá vôi biến chất đá vôi 11 So sánh khác biệt điều kiện sinh thái vùng trồng: Điều kiện tự nhiên Vị trí địa lý Độ cao so với mực nước biển Địa hình Độ ẩm Nhiệt độ Lượng mưa Thái Bình Hòa Bình Ven biển đông bắc Miền núi tây bắc 0-10 m 200-1.340 m Đồng Núi đồi, dốc từ 10-40o 80-90% 60% TB: 23-24oC TB: 24oC Cao nhất: 38-40oC Cao nhất: 38-39oC Thấp nhất: 5-10oC Thấp nhất: 15-16oC 1.700-2.200 mm 2.000 mm Tháng mưa nhiều: 7-8 Tháng mưa nhiều: 6-7 Tháng mưa ít: 11-3 Tháng mưa ít: 11-3 Đất phù sa chủ yếu, Đất Feralit phong hóa nhiểm phèn vùng ven biển Nhìn vào bảng ta thấy ngay, sự khác biệt vùng khí hậu tỉnh, Thổ nhưỡng đặc biệt nơi triển khai mô hình thí nghiệm vùng giáp biển, thổ nhưỡng nơi chủ yếu đất phèn, trũng, thường bị ngập úng vào cuối tháng đầu tháng Các yếu tố sinh thái ảnh hướng lớn tới hàm lượng rotundin củ Bình vôi 1.8 Kết phân tích hàm lượng Rotundin củ Bình vôi 1.8.1 Hàm lượng rotundin củ Bình vôi trồng vườn thuốc công ty Dược Khải Hòa (Thái Bình) 12 STT Kí hiệu mẫu Nơi thu TB-1 Khải Hà (Thái Bình) TB2 Khải Hà (Thái Bình) 10 TB-3 TB-4 TB-5 TB-6 TB-7 TB-8 TB-9 TB-10 Hàm lượng Hàm lượng rotundin rotundin trong alkaloid củ Bình vôi toàn phần tươi (%) (%) 33.56 0.325 33.98 0.333 Khải Hà (Thái Bình) 30.33 0.313 Khải Hà (Thái Bình) 29.06 0.322 Khải Hà (Thái Bình) 31.72 0.309 Khải Hà (Thái Bình) 32.45 0.332 Khải Hà (Thái Bình) 31.36 0.328 Khải Hà (Thái Bình) 33.27 0.319 Khải Hà (Thái Bình) 32.56 0.328 Khải Hà (Thái Bình) 32.43 0.33 Giá trị trung bình 32.072 0.324 Nhận xét: Kết phân tích hàm lượng rotundin 10 mẫu củ Bình vôi trồng Thái Bình cho biết, hàm lượng rotundin alkaloid toàn phần thấp 29,06%, cao 33,98%, trung bình 32,07%; hàm lượng rotundin củ thấp 0,309%, cao 0,333%, trung bình 0,324% 1.8.2 Hàm lượng rotundin củ Bình vôi trồng vườn Bảo tồn thuốc thuộc công ty Bio-Farm (Hòa Bình): STT Kí hiệu mẫu HB-1 HB2 HB-3 Hàm lượng Hàm lượng rotundin rotundin trong alkaloid củ Bình vôi toàn phần tươi (%) (%) Nơi thu Bio-Farm (Hòa Bình) Bio-Farm (Hòa Bình) Bio-Farm (Hòa Bình) 13 40.12 0,409 39.98 0.433 39.33 0.393 Bio-Farm (Hòa 39.06 0.397 Bình) Bio-Farm (Hòa HB-5 41.72 0.409 Bình) Bio-Farm (Hòa HB-6 40.45 0.382 Bình) Bio-Farm (Hòa HB-7 41.36 0.398 Bình) Bio-Farm (Hòa HB-8 39.27 0.41 Bình) Bio-Farm (Hòa HB-9 39.56 0.389 Bình) Bio-Farm (Hòa 10 HB-10 39.43 0.395 Bình) Giá trị trung bình 40.028 0.401 Nhận xét: Kết phân tích hàm lượng rotundin 10 mẫu củ Bình vôi HB-4 trồng Thái Bình cho biết, hàm lượng rotundin alkaloid toàn phần thấp 39,06%, cao 41,72%, trung bình 40,03%; hàm lượng rotundin củ thấp 0,382%, cao 0,433%, trung bình 0,401% 3.4 Phân tích đánh giá yếu tố sinh thái ảnh hưởng chúng tới hàm lượng rotundin củ Bình vôi Nhìn vào bảng kết phân tích hàm lượng rotundin củ Bình vôi trồng địa điểm Thái Bình Hòa Bình thấy rõ sự khác biệt sự ảnh hưởng yếu tố sinh thái Yếu tố nước độ ẩm ảnh hưởng không nhỏ tới có củ, đặc biệt củ chúng cần có thời gian tích lũy alkaloid thời gian định Bình Vôi Chính Bình vôi thiên nhiên thường gặp vùng núi đất cao, nơi thoát nước tốt Nếu Bình vôi đem trồng vùng đồng cần chọn nơi đất cao đánh luống thật cao Nhiệt độ yếu tố ảnh hưởng tới hàm lượng alkaloid rotundin củ bình vôi Thông thường nhiệt độ cao có tác động đến sự giải phóng chuyển 14 hóa số alkaloid Cũng đây, củ Bình vôi trồng Thái Bình có nhiệt độ mùa hè cao hẳn nhiệt độ miền núi Hòa Bình yếu tố làm cho hàm lượng rotundin củ Bình vôi giảm sút Rõ ràng yếu tố thổ nhưỡng, độ ẩm, độ pH ảnh hưởng lớn tới sự hình thành alkaloid Đặc biệt Bình vôi vốn xuất sứ vùng núi cao nơi thổ nhưỡng loại đất feralit phân hóa, đất mùn sườn núi, chân núi đá vôi Việc di thực xuống trồng nơi có thổ nhưỡng đất phù sa, nhiễm phèn gần sát biển làm cho hàm lượng rotundin củ Bình vôi giảm đáng kể 15 CHƯƠNG KẾT LUẬN, KIẾN NGHI 1.9 Kết luận Hàm lượng củ rotundin củ Bình vôi trồng vùng có khí hậu vùng núi cao, nhiệt độ không nóng, thoát nước tốt có độ pH không cao cao trồng vùng đồng bằng, đặc biệt vùng đất nhiễm mặn, đất nhiễm phèn có độ pH cao Các yếu tố sinh thái học độ ẩm, nhiệt độ, trồng đất trống thổ nhưỡng đất phù sa, độ pH cao ảnh hưởng mạnh tới hàm lượng rotundin củ Bình vôi 1.10 Kiến nghị Việc trồng Bình vôi thích hợp trồng vùng núi trung du có khí hậu khô, nhiệt độ không cao, đất thoát nước có độ pH trung bình Nếu trồng vùng đồng cần lưu ý trồng nơi đất cao, thoát nước tốt, đất có độ pH không cao, nên trồng tán khác để làm giảm ánh sáng nhiệt độ 16 TÀI LIỆU THAM KHẢO Đỗ Thị Đào (2008 ), “Ảnh hưởng của số nhân tố tới kết giâm củ cắt Tai chua ” Khoá luận tốt nghiệp 2008, GVHD Kiều Văn Thịnh Phan Nguyên Hồng, Vũ Văn Dũng (1978); Sinh thái thực vật, NXB Giáo dục, Hà Nội Dương Mộng Hùng “ Nhân giống Phi lao Củ cành” ĐH Lâm Nghiệp số 11/1992 Dương Mậu Hùng, Lê Đình Khả (2003) Giáo trình giống rừng Nhà xuất Nông Nghiệp Đoàn Thị Mai cộng sự (2000) Kết bước đầu vê nhân giống Bạch đàn lai phương pháp nuôi cấy mô phân sinh Tạp chí Lâm nghiệp, 10 : 46 – 47 Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhi, Lê Thị Muội (1997) Công nghệ Sinh học thực vật cải tiến giống trồng Nhà xuất Nông Nghiệp Lê Mộng Chân, Lê Thị Huyên Thực vật rừng Lê Văn Chi (1992) Cách sử dụng chất điều hòa sinh trưởng vi lượng hiệu cao Nhà xuất Khoa học – Kỹ thuật, Hà Nội Lê Đình Khả, 1993, “ Nhân giống Keo tràm Keo tai tượng” Tạp chí lâm nghiệp số 5/1993 10 Lê Đình Khả, Dương Mộng Hùng, giáo trình giống rừng, 2003 11 Lê Đình Khả, Đoàn Thị Bích, Trần Cự, “ Nghiên cứu tạo chồi, môi trường giá thể giâm củ cắt Bạch đàn trắng ”, tạp chí Lâm nghiệp dố 10/1996 12 Lê Đình Khả, Trần Cự, Lê Thị Xuân (1996 ), “ Nhân giống Thông đỏ bắng Củ”, tạp chí Lâm nghiệp số 9/1996 13 Lê Đình Khả, Nguyễn Đình Hải, Cấn Thị Lan (1998) “ Nhân giống Sao đen thuốc bột TTG”, tạp chí khoa học lâm nghiệp số 8/1998 17 14 Ngô Kim Khôi (1998), Thống kê toán học Lâm nghiệp, NXB Nông Nghiệp Hà Nội 15 Hoàng Kin Ngũ – Phùng Ngọc Lan: Giáo trình sinh thái rừng, ĐH Lâm nghiệp, NXB nông nghiệp, Hà Nội 16 Lê Đức Thọ (2007 ) “ Nhân giống vô tính chàm (Melaleula caujuputy Powell ) phương pháp giâm củ cắt” Luận văn tốt nghiệp trường ĐH Lâm Nghiệp 17 Nguyễn Hữu Thước cộng sự: “Ảnh hưởng của chế đọ che sáng đến Xà Cừ” Tập san SVĐH III 1964 Tr.35-38 18 Nguyễn Hữu Thước, Lê Văn Khôi: “Nghiên cứu yêu cầu ánh sáng đối với Mỡ giai đoạn tuổi non” Tập san SVĐH III 19 Thái Văn Trừng (2000): “Những hệ sinh thái rừng mưa nhiệt đới Việt Nam”, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội 20 Phạm Văn Tuấn (1997) “ Nhân giống rừng Củ, thành tựu khả áp dụng Việt Nam” Tổng luận chuyên khảo kỹ thuật Lâm nghiệp Việt Nam NXB Viện khoa học Lâm nghiệp Việt Nam 21 Đỗ Tất Lợi, 1991 Những thuốc vị thuốc Việt Nam NXB BNN 22 Mai Phú Quý, Vũ Thị Chi - Về tính đa dạng côn trùng sinh quần rau - Hội nghị côn trùng học toàn quốc lần thứ – Nhà xuất Nông nghiệp 23 Thiên nhiên.net 13-5-2007- Kiểm soát dư lượng hoá chất BVTV- Con đường bền vững cho xuất nông sản Việt Nam 24 Hồ Khắc Tín (1980).- Giáo trình côn trùng nông nghiệp II- Nhà xuất Nông nghiệp 18 [...]... rotundin trong alkaloid toàn phần thấp nhất là 39,06%, cao nhất là 41,72%, trung bình là 40,03%; hàm lượng rotundin trong củ thấp nhất là 0,382%, cao nhất là 0,433%, trung bình là 0,401% 3.4 Phân tích và đánh giá các yếu tố sinh thái và ảnh hưởng của chúng tới hàm lượng rotundin trong củ Bình vôi Nhìn vào bảng kết quả phân tích hàm lượng rotundin trong củ Bình vôi trồng ở 2 địa điểm Thái Bình và Hòa Bình. .. cao hoặc đánh luống thật cao Nhiệt độ cũng là yếu tố ảnh hưởng tới hàm lượng alkaloid và rotundin trong củ bình vôi Thông thường nhiệt độ cao có tác động đến sự giải phóng và chuyển 14 hóa của một số alkaloid Cũng có thể ở đây, củ Bình vôi được trồng ở Thái Bình có nền nhiệt độ mùa hè cao hơn hẳn nền nhiệt độ của miền núi như ở Hòa Bình là yếu tố làm cho hàm lượng rotundin trong củ Bình vôi giảm... biệt của vùng khí hậu của 2 tỉnh, Thổ nhưỡng đặc biệt là nơi triển khai mô hình thí nghiệm là vùng giáp biển, thổ nhưỡng nơi đây chủ yếu là đất phèn, và khá trũng, thường bị ngập úng vào cuối tháng 8 đầu tháng 9 Các yếu tố sinh thái này đã ảnh hướng khá lớn tới hàm lượng rotundin trong củ Bình vôi 1.8 Kết quả phân tích hàm lượng Rotundin trong củ Bình vôi 1.8.1 Hàm lượng rotundin trong củ Bình vôi trồng. .. sự khác biệt và sự ảnh hưởng của các yếu tố sinh thái Yếu tố nước và độ ẩm cũng ảnh hưởng không nhỏ tới các cây có củ, đặc biệt đối với những cây củ của chúng cần có một thời gian tích lũy alkaloid trong một thời gian nhất định như cây Bình Vôi Chính vì thế cây Bình vôi trong thiên nhiên thường gặp ở những vùng núi hoặc đất cao, nơi thoát nước rất tốt Nếu Bình vôi đem trồng ở vùng đồng bằng cần... Hà (Thái Bình) 32.45 0.332 Khải Hà (Thái Bình) 31.36 0.328 Khải Hà (Thái Bình) 33.27 0.319 Khải Hà (Thái Bình) 32.56 0.328 Khải Hà (Thái Bình) 32.43 0.33 Giá trị trung bình 32.072 0.324 Nhận xét: Kết quả phân tích hàm lượng rotundin trong 10 mẫu củ Bình vôi trồng ở Thái Bình cho biết, hàm lượng rotundin trong alkaloid toàn phần thấp nhất là 29,06%, cao nhất là 33,98%, trung bình là 32,07%; hàm lượng. .. hàm lượng rotundin trong củ thấp nhất là 0,309%, cao nhất là 0,333%, trung bình là 0,324% 1.8.2 Hàm lượng rotundin trong củ Bình vôi trồng tại vườn Bảo tồn cây thuốc thuộc công ty Bio-Farm (Hòa Bình) : STT Kí hiệu mẫu 1 HB-1 2 HB2 3 HB-3 Hàm lượng Hàm lượng rotundin rotundin trong trong alkaloid củ Bình vôi toàn phần tươi (%) (%) Nơi thu Bio-Farm (Hòa Bình) Bio-Farm (Hòa Bình) Bio-Farm (Hòa Bình) 13... trồng tại vườn thuốc công ty Dược Khải Hòa (Thái Bình) 12 STT Kí hiệu mẫu Nơi thu 1 TB-1 Khải Hà (Thái Bình) 2 TB2 Khải Hà (Thái Bình) 3 4 5 6 7 8 9 10 TB-3 TB-4 TB-5 TB-6 TB-7 TB-8 TB-9 TB-10 Hàm lượng Hàm lượng rotundin rotundin trong trong alkaloid củ Bình vôi toàn phần tươi (%) (%) 33.56 0.325 33.98 0.333 Khải Hà (Thái Bình) 30.33 0.313 Khải Hà (Thái Bình) 29.06 0.322 Khải Hà (Thái Bình) 31.72... 0.397 Bình) Bio-Farm (Hòa 5 HB-5 41.72 0.409 Bình) Bio-Farm (Hòa 6 HB-6 40.45 0.382 Bình) Bio-Farm (Hòa 7 HB-7 41.36 0.398 Bình) Bio-Farm (Hòa 8 HB-8 39.27 0.41 Bình) Bio-Farm (Hòa 9 HB-9 39.56 0.389 Bình) Bio-Farm (Hòa 10 HB-10 39.43 0.395 Bình) Giá trị trung bình 40.028 0.401 Nhận xét: Kết quả phân tích hàm lượng rotundin trong 10 mẫu củ Bình vôi 4 HB-4 trồng ở Thái Bình cho biết, hàm lượng rotundin. .. các yếu tố về thổ nhưỡng, độ ẩm, độ pH ảnh hưởng lớn tới sự hình thành các alkaloid trong cây Đặc biệt đối với cây Bình vôi vốn xuất sứ tại các vùng núi cao nơi thổ nhưỡng là các loại đất feralit đang phân hóa, hoặc đất mùn trên các sườn núi, chân núi đá vôi Việc di thực xuống trồng tại nơi có thổ nhưỡng là đất phù sa, hơi nhiễm phèn do gần sát biển đã làm cho hàm lượng rotundin trong củ Bình vôi. .. luận Hàm lượng củ rotundin trong củ Bình vôi được trồng ở những vùng có khí hậu vùng núi cao, nhiệt độ không quá nóng, thoát nước tốt và có độ pH không quá cao thì cao hơn trồng ở vùng đồng bằng, đặc biệt những vùng đất nhiễm mặn, đất nhiễm phèn có độ pH cao Các yếu tố sinh thái học như độ ẩm, nhiệt độ, trồng cây ngoài đất trống và thổ nhưỡng đất phù sa, độ pH cao ảnh hưởng mạnh tới hàm lượng rotundin