ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - ĐÀO XUÂN THANH ĐÀO XUÂN THANH NGHIÊN CỨU TẠO VẬT LIỆU KHỞI ĐẦU PHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY BAO PHẤN Ở CÂY LÚA NGHIÊN CỨU TẠO VẬT LIỆU KHỞI ĐẦU PHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY BAO PHẤN Ở CÂY LÚA CHUYÊN NGÀNH: TRỒNG TRỌT MÃ SỐ: 60.62.01 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS.TRẦN NGỌC NGOẠN PGS.TS.NGÔ XUÂN BÌNH THÁI NGUYÊN, NĂM 2009 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên THÁI NGUYÊN, NĂM 2009 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Lêi c¶m ¬n MỞ ĐẦU Để hoàn thành khóa học thực đề tài, nỗ lực thân, nhận đƣợc giúp đỡ, dẫn thầy cô giáo Khoa Nông học, tập thể cán công nhân Trung tâm Thực hành Thực nghiệm - Trƣờng Đại học Nông lâm Thái Nguyên, bạn bè gia đình Nhân dịp xin chân thành gửi lời cảm ơn tới tập thể thầy, cô giáo cán nhân viên: Bộ môn công nghệ sinh học - Khoa Nông học - Trƣờng Đại học Nông lâm Thái Nguyên Bộ môn Giống trồng - Khoa Nông học - Trƣờng Đại học Nông lâm Thái Nguyên Đặc biệt cho phép xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới: PGS.TS.Trần Ngọc Ngoạn – Phó Hiệu Trƣởng - Trƣờng Đại học Nông lâm Thái Nguyên PGS.TS Ngô Xuân Bình - Phó trƣởng khoa Nông học - Trƣờng Đại học Nông lâm Thái Nguyên ThS Phạm Văn Ngọc - Bộ môn trồng - Khoa Nông học - Trƣờng Đại học Nông lâm Thái Nguyên Đã tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ thời gian vừa qua Xin kính chúc thầy cô, anh chị cán bạn bè gia đình mạnh khỏe, hạnh phúc công tác tốt Đặt vấn đề Cây lúa (Oryza sativa L) lƣơng thực giữ vai trò quan trọng hàng đầu Mỗi năm, khoảng 1/2 dân số giới sử dụng lúa gạo làm lƣơng thực Lúa đƣợc trồng phổ biến nƣớc Châu á, Châu Phi, Châu Mĩ La Tinh Đối với nƣớc Châu nhƣ: Ấn Độ, Trung Quốc, Inđônêxia, Băngladesh, Miến Điện, Thái Lan Việt Nam lúa gạo lƣơng thực đặc biệt quan trọng đời sống ngƣời Trong năm gần đây, với đà tăng dân số, phát triển mạnh mẽ công nghiệp đô thị hoá nông thôn làm cho diện tích đất trồng trọt ngày thu hẹp lại Nếu mở rộng diện tích gặp nhiều khó khăn tốn Để đáp ứng đủ nhu cầu lúa gạo ngƣời tiêu dùng an ninh lƣơng thực quốc gia, nhà tạo giống phải tìm cách làm tăng suất, sản lƣợng lúa diện tích đất trồng mở rộng Phƣơng án sử dụng biện pháp kỹ thuật thâm canh giống lúa cao sản, chịu thâm canh thích hợp Bằng phƣơng pháp lai hữu tính, phƣơng pháp chuyển gen bất dục đực mẫn cảm nhiệt độ vào giống lúa thuần, phƣơng pháp xử lý đột biến v.v…các nhà tạo giống có nhiều thành công với giống có Thái Nguyên, ngày 16 tháng 10 năm 2009 Học viên suất sản lƣợng cao Song việc sử dụng phƣơng pháp tạo giống nhƣ nói có tạo tổ hợp lai suất cao nhƣng độ chƣa ổn định Mặt khác, áp dụng phƣơng pháp chuyển gen bất dục đực mẫn cảm nhiệt độ vào giống lúa chọn nhƣ giống lúa Đào Xuân Thanh phải khoảng 10 vụ giống bất dục đực mẫn cảm với nhiệt độ kết hạt điều kiện nhiệt độ < 240C Nhƣ vậy, thời gian từ tạo đƣợc giống đến phổ biến sản xuất thực tiễn đại trà phải 10 năm Trong năm gần đây, việc ứng dụng biện pháp nuôi cấy bao phấn tạo dòng nhị Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn bội, nhanh chóng tạo giống lúa có suất cao, chống chịu tốt, thu đƣợc nhiều kết Đó phƣơng pháp tạo dòng nhanh hiệu - Xác định đƣợc nồng độ chất 2,4 D; NAA thích hợp cho trình tạo mô sẹo mẫu cấy - Xác định đƣợc nồng độ chất Kinetin BAP thích hợp cho Tuy nhiên, dòng lúa với tính trạng di truyền khác nhau, có hàm lƣợng Auxin khác có phản ứng khác với điều kiện nuôi cấy Để thành công việc tạo dòng kỹ thuật nuôi cấy phải xác định đƣợc yêu cầu vật liệu cấy, môi trƣờng dinh dƣỡng, tác nhân vật lý, hoá học…của dòng lúa đánh giá đƣợc khả thích ứng chúng đồng ruộng Xuất phát từ vấn đề trên, tiến hành đề tài: “Nghiên tái sinh chồi từ mô sẹo - Xác định đƣợc nồng độ chất NAA thích hợp cho trình rễ từ chồi xanh - Xác định ảnh hƣởng loại môi trƣờng dƣỡng đến trình sinh trƣởng lúa - Đánh giá sơ suất, yếu tố cấu thành suất số đặc điểm sinh trƣởng phát triển, khả kháng bệnh 20 dòng lúa đƣợc cứu tạo vật liệu khởi đầu phục vụ chọn tạo giống kỹ thuật nuôi cấy tạo phƣơng pháp nuôi cấy bao phấn bao phấn lúa” Ý nghĩa đề tài * Ý nghĩa nghiên cứu khoa học: Mục đích đề tài - Xác định đƣợc mức ảnh hƣởng nhân tố: vật lý, môi trƣờng - Kết nghiên cứu góp phần bổ sung quy trình kỹ thuật tạo lúa nuôi cấy, nồng độ hormon kích thích sinh trƣởng đến khả tạo mô sẹo, tái đồng hợp tử phƣơng pháp nuôi cấy bao phấn Từ làm sở cho sinh chồi rễ trình tạo lúa hoàn chỉnh phƣơng pháp việc chọn dòng tế bào nhƣ: nuôi cấy bao phấn + Chọn dòng kháng sâu bệnh - Tạo đƣợc dòng trình nuôi cấy + Chọn dòng chịu thâm canh… - Bƣớc đầu đánh giá đƣợc dòng có triển vọng cho suất cao, thích - Lựa chọn sơ đƣợc số dòng thuần, làm vật liệu khởi đầu cho nghi với điều kiện sinh thái đồng ruộng Thái Nguyên, có khả làm vật liệu khởi đầu công tác tạo giống lúa ƣu lai công tác tạo giống ƣu lai - Kết nghiên cứu góp phần định hƣớng, làm tăng tính khả thi cho đề tài nghiên cứu bao phấn lúa Yêu cầu đề tài - Xác định đƣợc thời gian xử lý lạnh thích hợp nuôi cấy bao phấn lúa * Ý nghĩa thực tiễn sản xuất: Rút ngắn thời gian tạo giống, giảm giá thành sản xuất giống lúa - Xác định đƣợc nồng độ chất khử trùng hypocloratnatri thích hợp đồng thời nhanh chóng đƣa đƣợc nhiều giống lúa vào sản xuất cho xử lý mẫu cấy - Xác định đƣợc ảnh hƣởng môi trƣờng MS môi trƣờng N6 đến khả tạo mô sẹo Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Năm 1935 Went Thisnamn khám phá auxin IAA có khả CHƢƠNG I kích thích hình thành mô sẹo TỔNG QUAN TÀI LIỆU Năm 1941, hai nhà khoa học ngƣời Mỹ Overbeek Steward với thí 1.1 Tình hình nghiên cứu mô tế bào thực vật nghiệm nuôi cấy họ cà Datura, auxin kích thích sinh trƣởng có 1.1.1 Lịch sử phát triển nƣớc dừa Cũng thời gian hai ông phát tác dụng Nuôi cấy mô tế bào thực vật đƣợc nhà khoa học tiến hành vào cuối kỷ XIX chất kích thích sinh trƣởng nhân tạo thuộc nhóm auxin, đƣợc nghiên cứu tổng hợp thành công nhƣ NAA, 2,4 D có ảnh hƣởng tích cực việc tạo Quá trình phát triển tạm chia thành giai đoạn [12] 1.1.1.1 Giai đoạn khởi xƣớng (1898-1930) mô sẹo gây phân chia tế bào Nhiều nhà khoa học bổ sung Auxin Vitamin vào môi trƣờng nuôi cấy khẳng định vai trò chúng Phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật đƣợc nhà Bác học ngƣời Đức Grottied Haberlandt đề xƣớng năm 1898 Ông tìm cách nuôi cấy tế bào thực vật phân lập nhƣng không thành công Các công trình nuôi cấy mô tế bào nhà khoa học khác nhƣ Winker (1902), Thielman (1924), Kuster (1929), không đạt đƣợc mục tiêu nghiên cứu Năm 1929 Schmacker bƣớc đầu thành công lĩnh vực Sau có Schitterer (1931), Pfeiffer (1931), Lanrue (1933) có thành công bƣớc đầu nuôi cấy đầu rễ phân lập môi trƣờng nhân tạo Điều giúp cho nhà khoa học tiếp tục nghiên cứu nhiều đối tƣợng khác môi trƣờng nuôi cấy mô Năm 1955 Miller Skoog nuôi cấy mô lõi thuốc xác định đƣợc vai trò Kinetin tới việc kích thích phát triển mô Những phát mẻ vai trò chất kích thích sinh trƣởng 2,4D, IAA, NAA, kinetin, vitamin giai đoạn bƣớc tiến quan trọng lịch sử phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.1.1.3 Giai đoạn phát sinh hình thái (1950 - 1960) Năm 1956 Miller Skoog thành công thí nghiệm tạo chồi từ mô thuốc nuôi cấy Chính Skoog phát vai trò kinetin phân hoá quan thuốc 1.1.1.2 Giai đoạn nghiên cứu sinh lý (1930 -1950) Những năm 1958-1959 Reinert (Đức) Steward (Mỹ) nuôi cấy tế Giai đoạn đƣợc bắt đầu công trình nuôi cấy đầu rễ cà chua môi trƣờng nhân tạo, đƣợc thực nhà bác học White (1934) Bằng thí nghiệm ông ngƣời chứng minh đƣợc mô phân sinh trì thời gian sinh trƣởng chúng tiếp tục đƣợc nuôi cấy môi trƣờng dinh dƣỡng Cũng thời gian này, bào cà rôt thu đƣợc phôi soma từ mô chúng Năm 1956 Nickell nuôi cấy thành công tế bào đơn Phaseolus vulgais dung dịch lỏng Năm 1960, kỹ thuật gieo tế bào, Bergman tái sinh thành công tế bào đơn thuốc Gautherets thành công nuôi cấy mô tƣợng tầng tìm đƣợc môi trƣờng dinh dƣỡng thích hợp cho nhiều loại Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Các giống lúa có nguồn gốc họ phụ Indica giống lúa khó tính 1.1.1.4 Giai đoạn nghiên cứu di truyền (1960 đến nay) Các thành tựu giai đoạn thức ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật invitro vào công tác giống nghiên cứu di truyền việc nuôi cấy bao phấn Để tiến tới thành công, nhà khoa học tìm cách xác định ảnh hƣởng yếu tố có tác động trực tiếp Năm 1960 Cooking (Anh) dùng men Cellulose để phân hủy vỏ gián tiếp đến trình nuôi cấy Các yếu tố là: Kiểu gen cho cellulose tế bào thực vật thu đƣợc tế bào vỏ, gọi phấn, giai đoạn phát triển thời điểm lấy mẫu, thành phần môi tế bào trần (protoplast) trƣờng nuôi cấy, yếu tố vật lý nhƣ nhiệt độ, ánh sáng Nitsch (1967), Nakata Tanaka (1968) ngƣời thành công việc tạo thuốc đơn bội kỹ thuật nuôi cấy bao phấn * Ảnh hưởng kiểu gen cho bao phấn: Sự thay đổi tần số tạo mô sẹo khả tái sinh mô sẹo Takabe (1971) tái sinh đƣợc thuốc hoàn chỉnh từ protoplast phấn hoa phụ thuộc phần lớn vào kiểu gen Kết quan sát Melchers(1977) dung hợp protoplast thành công khoai tây cà Oono (1968), Chu (1982), Hu (1985), Zapata (1990) cho thấy khác biệt chua tạo “Pomate” kiểu gen kéo theo khác biệt khả nuôi cấy lúa Kiểu gen loài Năm 1985, thuốc mang gen biến nạp đƣợc công bố Khái niệm chuyển gen trở thành phổ cập thuật ngữ công nghệ sinh học thực vật Ledoux cho gây biến dị di truyền biến dị tế bào, chí hạt giống cách cho chúng hấp thụ ADN ngoại lai.[20] phụ Indica phát triển tạo mô sẹo so với loài phụ Japonica Theo Mathias Fukki (1986) khả tái sinh lúa nuôi cấy tế bào bị chi phối tƣơng tác tế bào chất, nhân * Ảnh hưởng giai đoạn phát triển thời điểm lấy mẫu Từ năm 1980 đến nay, hàng loạt thành công lĩnh vực công Các tác giả Oono (1975), Lin (1976), Chen (1977) cho thấy: mẫu bao nghệ đƣợc công bố Nuôi cấy mô tế bào trở thành công cụ phấn đƣợc lấy vào thời điểm tiểu bào tử bao phấn giai đoạn thiếu công nghệ tạo giống nhân giống đại đơn bào muộn tốt Bao phấn giai đoạn tứ thể khả Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào mang lại sở lý luận mẻ cho phát triển môi trƣờng nuôi cấy invitro, Bao phấn giai đoạn đơn bào sớm phát triển sinh học đại Hạt phấn phát triển tốt tách khỏi tứ tử (giai đoạn 1.1.2 Tình hình nuôi cấy bao phấn lúa giới Năm 1968 Nishi cộng tác giả thành công đơn bào đến đơn bào muộn) lĩnh vực nuôi cấy bao phấn mầm sau công bố kết *Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian xử lý đòng tái sinh lúa hoàn chỉnh từ mô sẹo Sau đó, hàng loạt tác giả Kêt nghiên cứu Zhou Cs (1983) cho thấy rằng: Xử lý công bố kết khả quan nhƣ: Chu et al (1975), Chen (1977), Chalyf anh Stalanrl (1981), Wang et.al (1982), Mich et.al (1985) Kết tạo đơn bội lƣỡng bội thu đƣợc chủ yếu loài phụ Japonica, loài đòng nhiệt độ thấp có hiệu nuôi cấy bao phấn lúa Điều kiện lạnh làm tăng khả tạo xanh + Chaleff Cs (1975) xử lý đòng 60C ngày phụ Indica kết chƣa cao Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn + Hu Cs (1978) xử lý đòng lúa nhiệt độ 100C thời gian - Trong kỹ thuật nuôi cấy bao phấn lúa, chất điều hoà sinh trƣỏng sử dụng dạng đơn hay kết hợp theo tỷ lệ khác ngày + Matitin Drimo Millo (1981) tiến hành xử lý đòng lúa nhiệt độ Năm 1980, Khi nuôi cấy bao phấn lúa Japonica, Yang cộng sử dụng kết hợp NAA 4mg/l + 2,4D 1mg/l + IAA 2mg/l + Kinetin 3mg/l - C thời gian 48h + Gupta Borthakeu (1987) xử lý đòng lúa nhiệt độ 10 C thời gian 11 ngày Kết cho thấy môi trƣờng tạo mô sẹo có chứa 2,4D nồng độ 1mg/l mô sẹo dễ dàng tái sinh thành + Guapta, Quimio Zapata (1990) xử lý đòng 6-80C thời gian ngày Theo Wasakd (1982): IAA xúc tiến trình hình thành rễ, Sự kết hợp auxin: IAA, NAA, Kinetin cách hợp lý xúc tiến mạnh mẽ + Rush cộng (1982) tiến hành xử lý đòng lúa nhiệt độ 400C thời gian 15 phút trình phân hoá tế bào tái sinh xanh Nhìn chung, chất tham gia vào môi trƣờng nuôi cấy bao phấn lúa + Năm 1886, Torrizo xử lý đòng 350C 15 phút cho kết khả quan Nói chung, có nhiều thí nghiệm nghiên cứu ảnh hƣởng nhiệt độ thởi gian xử lý đòng đến kết nuôi cấy bao phấn lúa Kết nghiên cứu tác giả cho thấy xử lý đòng nhiệt độ khác cho kết nuôi cấy khác * Ảnh hưởng nồng độ Cacbon đến trình tạo mô sẹo tái sinh Nồng độ cacbon làm thay đổi tỷ lệ hình thành mô sẹo khả tái sinh nuôi cấy bao phấn lúa Chen (1978) cho biết đƣờng có tác dụng làm thay đổi áp suất thẩm thấu môi trƣờng nuôi cấy Nồng độ đƣờng môi trƣờng nuôi cấy từ - 8% làm tăng hai trình hình thành mô sẹo tái sinh Năm 1988 Kim Paghavan thông báo rằng: Tỷ lệ hình thành mô sẹo từ bao phấn giảm nồng độ đƣờng môi trƣờng nuôi cấy cao (8 -12%) * Ảnh hưởng chất điều hoà sinh trưởng đến trình tạo mô sẹo tái sinh nhƣ chất điều hoà sinh trƣởng, muối, đƣờng, sắt, Vitamin có ảnh hƣởng lẫn ảnh hƣởng chung đến kết trình nuôi cấy * Ảnh hưởng yếu tố vật lý môi trường Các yếu tố vật lý môi trƣờng bao gồm: + Trạng thái vật lý môi trƣờng dạng rắn hay lỏng + Độ pH môi trƣờng + Độ ẩm không khí + Ánh sáng nhiệt độ phòng nuôi cấy Các yếu tố tác dụng trực tiếp đến hình thành mô sẹo khả tái sinh chồi Kết nghiên cứu lúa mỳ Bjarmsta (1989) cho thấy xử lý ánh sáng cƣờng độ cao kìm hãm trình tạo mô sẹo nhƣng lại kích thích trình tạo xanh, ánh sáng yếu ánh sáng khuyếch tán không ảnh hƣởng đến khả tạo mô sẹo mẫu cấy * Ảnh hưởng môi trường khác đến trình nuôi cấy bao phấn Các môi trƣờng khác cho kết nuôi cấy bao phấn khác Năm 1962 Dono thông báo môi trƣờng Murashige and skoog môi trƣờng thích hợp cho nuôi cấy bao phấn Đến năm 1975 Chu Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Cs lại thông báo môi trƣờng N6 môi trƣờng tốt cho nuôi cấy bao phấn lúa - Giữa phôi dinh dƣỡng hạt phấn phôi với luôn có cạnh tranh làm ức chế trình tái sinh Năm 1974, hai nhóm nghiên cứu Chen Wang thành công lớn sử dụng môi trƣờng Miller nuôi cấy bao phấn lúa Rất nhiều tác giả có chung kết luận rằng: môi trƣờng có nồng độ muối vô cao thích hợp cho phân hoá mô sẹo - Trong môi trƣờng nuôi cấy, phôi dinh dƣỡng nhị bội phát triển mạnh hạt phấn tách rời dẫn đến kết mô sẹo nhị bội chiếm ƣu so với mô sẹo đơn bội Để loại bỏ nhân tố cạnh tranh phát triển hạt phấn, nhà nghiên cứu tiến hành nuôi phấn hạt phấn sau tách rời khỏi 1.1.3 Tình hình nuôi cấy bao phấn Việt Nam Ở nƣớc ta, nghiên cứu nuôi cấy mô thực vật năm 1975 [16] Kỹ thuật nhân giống invitro đƣợc tiến hành nhiều đối tƣợng thực vật khác nhƣ: chuối, khoai tây, cà chua, ngô, lúa, phong lan…và đạt đƣợc kết định, làm tăng hệ số nhân giống tạo đƣợc giống bệnh loại mô túi phấn Song kết đạt đƣợc rát khiêm tốn Thực tế cho thấy tỷ lệ mô sẹo hình thành thấp, sức tái sinh từ mô sẹo không cao Cũng thời gian này, tác giả thử nghiệm nuôi cấy bao phấn lúa môi trƣờng lỏng rút kết luân: + Môi trƣờng lỏng thuận lợi cho hấp thu dinh dƣỡng môi trƣờng rắn Kỹ thuật nuôi cấy bao phấn lúa đƣợc ứng dụng sớm vào công tác chọn tạo giống đƣợc tiến hành quan nghiên cứu khoa học, + Các chất độc hạt phấn chết tạo tác động xấu tới hạt phấn khác bị khuyếch tán vào môi trƣờng lỏng trƣờng đại học Phƣơng pháp đƣợc thực có trợ giúp công Năm 1994, Viện di truyền nông nghiệp công bố trình nuôi cấy bao nghệ sinh học nhằm chuyển lạp gen, gây áp lực điều kiện ngoại cảnh bất phấn, nâng cao tỉ lệ tạo mô sẹo khả tái sinh đơn bội (Nguyễn lợi mức độ tế bào (rét, nóng, bệnh hai…), nuôi cấy bao phấn, dung hợp tế Văn Đồng, Vũ Đức Quang, Phạm Ngọc Lƣơng, Trần Duy Quý 1994) bào trần, nuôi cấy phôi lúa Bằng công nghệ sinh học ngƣời ta chủ Từ năm 1994 – 2001, có công trình nghiên cứu nuôi cấy bao phấn động chuyển thêm số gen có lợi đƣợc nghiên cứu kỹ vào lúa lúa để chọn tạo nguồn vật liệu khởi đầu phục vụ phát triển lúa lai đựơc nhƣ gen kháng bạc lá, gen chịu phèn, gen chịu rét, gen chịu mặn…Tuy nhiên công bố (Viện di truyền nồng nghiệp 1997 - 2000) số lƣợng giống lúa đạt suất, chất lƣợng đƣợc tạo chƣa nhiều Các nhà khoa học Việt Nam đạt đƣợc số thành tựu có ý nghĩa to Đỗ Năng Vịnh Lê Thị Diệu Muội [15] nghiên cứu số yếu tố lớn sản suất Tại viện Di Truyền Nông nghiệp, phƣơng pháp nuôi cấy ảnh hƣởng đến khả tạo thành mô sẹo tạo thành lúa từ hạt phấn bao phấn kết hợp với chọn dòng biến dị tạo 50 dòng bất dục phản ứng phƣơng pháp nuôi cấy invitro với nhiệt độ (TGMS) , dòng đƣợc xác định có tính bất dục Sau nhiều năm tiến hành nghiên cứu nuôi cấy bao phấn, năm 1993 Nguyễn Hữu Hổ Nguyễn Văn Uyển có kết luận sau: - Trong mô túi phấn có chất ức chế ảnh hƣởng tới phát triển hạt phấn ổn định, có ƣu lai cao lai tạo đƣợc sử dụng chọn giống lúa lai dòng Bằng phƣơng pháp nuôi cấy bao phấn tạo 12 dòng, giống có ƣu lai gần tƣơng đƣơng với lai F1 dòng giống có triển vọng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 10 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 11 http://www.Lrc-tnu.edu.vn gồm DT26, DT29, DT32, AC22, AC23, AC24, AC25, đƣợc khảo điều kiện thuận lợi định, tế bào phát triển thành nghiệm Nhờ nuôi cấy bao phấn lúa rút ngắn thời gian chọn giống thể hoàn chỉnh [11] xuống từ 4-6 hệ Kỹ thuật đơn bội invitro đƣợc triển khai mạnh Miller Skoog (1956) tạo chồi thành công từ mô thuốc nuôi cấy, chọn giống Viện lúa Đồng sông Cửu Long, Viện công nghệ sinh chứng minh đƣợc tính toàn tế bào Thành công tạo công học [9] nghệ mới: Công nghệ sinh học ứng dụng nhân giống vô tính, tạo giống Những năm gần đây, Vũ Đức Quang cộng tiến hành nghiên trồng dòng chống chịu cứu cải tiến môi trƣờng N6 thành môi trƣờng HD Ông cho môi Tính toàn tế bào mà Haberlandt nêu sở lý luận trƣờng HD có ƣu điểm vƣợt trội so với môi trƣờng N6 môi trƣờng tốt phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật Cho đến nay, ngƣời cho phát triển bao phấn lúa hoàn toàn chứng minh đƣợc khả tái sinh thể thực vật hoàn chỉnh Viện Di truyền nông nghiệp Hà Nội tạo giống lúa quốc gia DT10, A20, DT11 phƣơng pháp gây đột biến từ tế bào riêng rẽ 1.3.2 Sự phân hoá phản phân hoá tế bào Cơ thể thực vật trƣởng thành chỉnh thể thống bao gồm 1.2 Khái niệm nhân giống Invitro Nhân giông vô tính invitro phƣơng pháp sản xuất hàng loạt từ phận (các quan, mô, tế bào) cách nuôi cấy chúng ống nghiệm điều kiện vô trùng tuyệt đối có môi trƣờng nuôi cấy thích hợp đƣợc kiểm soát [1] nhiều quan chức khác nhau, có nhiều loại tế bào khác Mỗi tế bào khác thực chức cụ thể khác Song, tế bào đƣợc tạo thành từ tế bào phôi sinh.[12] Sự phân hoá tế bào chuyển tế bào phôi sinh thành tế bào Mọi thể sinh vật phức tạp gồm nhiều đơn vị nhỏ tế bào hợp thành Các tế bào phân hóa mang thông tin có tế bào tế bào độc lập, từ để xây dựng lại toàn thể 1.3 Cơ sở khoa học nuôi cấy Invitro mô chuyển hoá, đảm nhận chức khác thể Quá trình phân hoá tế bào biểu thị nhƣ sau: Tế bào phôi sinh Tế bào chuyên hoá chức riêng Tế bào giãn 1.3.1 Tính toàn tế bào Haberlandt (1902) ngƣời đề xuất phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật để chứng minh tính toàn tế bào Mặc dù tế bào chuyển hoá thành mô chức nhƣng chúng giữ nguyên khả phân chia Trong điều kiện thích hợp, tế bào lại Haberlandt cho tế bào sinh vật có khả trở dạng tế bào phôi sinh phân chia mạnh mẽ Quá trình đƣợc tiềm tàng để phát triển thành thể hoàn chỉnh Ông nhận thấy rằng, gọi phản phân hoá tế bào, (ngƣợc lại với trình phân hoá tế bào) Tuy tế bào thể đa bào phát sinh từ hợp bào thông qua trình nhiên, tế bào phân hoá thành tế bào có chức chuyên biệt, phân bào nguyên nhiễm Điều có nghĩa tế bào sinh vật chúng không hoàn toàn khả biến đổi Trong điều kiện cần chứa toàn thông tin di truyền cần thiết thể hoàn chỉnh Khi gặp thiết điều kiện thích hợp, chúng lại trở dạng tế bào phôi sinh Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 12 http://www.Lrc-tnu.edu.vn 13 http://www.Lrc-tnu.edu.vn phân chia mạnh mẽ Quá trình gọi phản phân hoá tế bào, ngƣợc lại với thể đảm bảo hoàn toàn chắn Đây trở ngại lớn sinh sản hữu trình phân hoá tế bào tính Ngày phƣơng pháp sinh sản vô tính, ngƣời ta khắc phục Quá trình phát sinh hình thái trình nuôi cấy mô, tế bào thực đƣợc nhƣợc điểm Đặc biệt nhân giống vô tính in vitro vật thực chất kết trình phân hóa phản phân hóa tế bào Kỹ Dựa chế nguyên phân, nhân giống invitro lấy thuật nuôi cấy mô, tế bào xét cho kỹ thuật điều khiển phát sinh phận sinh dƣỡng đem nhân giống phận có thông hình thái tế bào thực vật cách định hƣớng dựa vào phân hóa tin di truyền giống tạo nên thể có thông tin di truyền phản phân hóa tế bào sở tính toàn tế bào thực vật Để giống giống thể mẹ Nhƣ thể mẹ có tính trạng di điều khiển phát sinh hình thái mô nuôi cấy, ngƣời ta thƣờng bổ sung truyền tốt tính trạng đƣợc thể thể [9] vào môi trƣờng nuôi cấy nhóm chất điều tiết sinh trƣởng thực vật auxin 1.3.4 Môi trƣờng nuôi cấy (môi trƣờng dinh dƣỡng) cytokinin Nếu tỷ lệ auxin/cytokinin thấp phát sinh hình thái theo 1.3.4.1 Khái niệm hƣớng tạo chồi; tỷ lệ cao tạo thành rễ, tỷ lệ cân phát sinh theo hƣớng tạo mô sẹo [3] Môi trƣờng nuôi cấy điều kiện vô quan trọng, có tính chất định phân hoá tế bào quan nuôi cấy Theo Street [23] môi trƣờng nuôi cấy môi trƣờng xung quanh 1.3.3 Cơ chế di truyền thông qua hệ tế bào Cơ chế di truyền thông qua hệ tế bào bao gồm công đoạn: nhân tố định thành công thất bại trình nuôi cấy Trong trình nguyên phân, từ tế bào mẹ nhân đôi, tạo tế bào invitro Môi trƣờng nuôi cấy nguồn cung cấp chất cần thiết cho phân giống giống tế bào mẹ ban đầu Nhƣ qua nguyên phân chia phân hoá mô tế bào suốt trình nuôi cấy Vì vậy, môi NST nội thể đƣợc diễn theo chế nguyên phân, trƣờng dinh dƣỡng phải đầy đủ chất dinh dƣỡng, chất cần thiết chế phân bào mà từ tế bào ban đầu phân chia thành hai tế bào Đối với hầu hết loài thực vật, Môi trƣờng nuôi cấy bao gồm có NST giống NST tế bào mẹ truyền nguyên vẹn sang tế bào nguyên tố đa lƣợng, vi lƣợng, nguồn bon, axitamin, chất điều hoà Sở dĩ có tƣợng trƣớc lần giảm phân, phân tử sinh trƣởng số chất phụ gia Thành phần dinh dƣỡng, hàm lƣợng ADN thực trình tái sinh để từ phân tử ADN hình thành chất cần thiết cho tế bào sinh trƣởng tốt thay đổi tuỳ theo loài, phân tử ADN giống giống ADN ban đầu Quá trình đƣợc thực giống, nguồn gốc mẫu cấy hay quan khác thể kỳ trung gian thông qua chế phân ly NST kỳ sau, 1.3.4.2 Một số môi trƣờng sở cho truyền nguyên vẹn thông tin di truyền nội thể Đã có nhiều môi trƣờng dinh dƣỡng lần lƣợt đƣợc tìm sở Giữa hệ thể đƣợc hình thành thông qua chế giảm phân cải tiến môi trƣờng Kotte Robbin (1902) nhƣ: Môi trƣờng White làm cho hệ đời sau có tƣợng phân ly tính trạng, NST (1934), Knudson (1946), Vacin Went (1949), Heller(1953), Murasnige - hệ sau không giống không giống bố mẹ Vì việc trì tính Skoog (1962), Gammborg (B5) (1968), Knop (1974), WMR (1982), Aderson trạng mong muốn bố mẹ sang hệ sau sinh sản hữu tính không (1984),… Tuy nhiên, môi trƣờng thích hợp với loài định Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 14 http://www.Lrc-tnu.edu.vn 15 http://www.Lrc-tnu.edu.vn nhƣ: Môi trƣờng Knudson (1946), Vacin Went (1949), thích hợp cho đƣờng đƣợc sử dụng chủ yếu sacarose glucose với nồng độ thay đổi từ 20 loài Lan, môi trƣờng Murasnige - Skoog (1962) thích hợp cho cácloài – 40g/l tuỳ theo loài thực vật mục đích nuôi cấy thân thảo số loài thân gỗ sinh trƣởng nhanh nhƣ Keo, Bạch - Các vitamin đàn…Môi trƣờng WMP thích hợp cho loài thân gỗ.[9] Trong trình nuôi cấy, invitro tự tổng hợp đƣợc số Tuỳ thuộc vào đối tƣợng cụ thể, giai đoạn nuôi cấy, mà vitamin cần thiết nhƣng chƣa đáp ứng đƣợc nhu cầu sinh trƣởng Do ngƣời lựa chọn loại môi trƣờng thích hợp có kết khả quan Thông ta thƣờng bổ sung số vitamin nhóm B nhƣ: B1, B2, B3, B5, B6 nồng thƣờng, ngƣời ta hay sử dụng môi trƣờng MS môi trƣờng N6 cho nhân độ 1mg/l; Dung dịch vitamin dễ bị hỏng nấm, khuẩn nhiễm tạp bị phân giống Invitro huỷ nhiệt độ cao Vì cần bảo quản điều kiện lạnh dƣới 0C * Môi trƣờng MS: pha chế trƣớc sử dụng Ngoài ra, bổ sung lƣợng tƣơng đối lớn Các thành phần môi trƣờng MS (Murashige- skoog) [1]: myo-inositol : 50 - 500mg/l, để thúc đẩy phân chia mô tế bào bao gồm: - Các chất phụ gia hữu khác - Các nguyên tố đa lượng: Nƣớc dừa, hoạt tính, dịch chiết nấm men có tác dụng kích thích Bao gồm: N, P, K, S, Mg, Ca,… thƣờng đƣợc sử dụng nồng độ sinh trƣởng mô sẹo nên thƣờng đƣợc dùng lam chất phụ gia 30ppm Thành phần, tỷ lệ chất nuôi trƣờng nuôi cấy cụ thể Trong nƣớc dừa có chứa đƣờng, axitamin, axit hữu cơ, đặc biệt khác nhau, môi trƣờng giàu nitro thích hợp cho việc hình thành chồi, môi nƣớc dừa có chứa hợp chất quan trọng cho nuôi cấy mô myo- trƣờng giàu kali có tác dụng xúc tiến mạnh trình trao đổi chất inositol, hợp chất có hoạt tính auxin, gluxit xytokinin Nƣớc dừa - Các nguyên tố vi lượng: tỏ có tác dụng vƣợt trội môi trƣờng nhân nhanh chồi Fe, Cu, Zn, Mn, Mo, Bo, Co, I …là nguyên tố vi lƣợng thƣờng đƣợc dùng môi trƣờng nuôi cấy invitro Các nguyên tố đóng vai trò quan trọng hoạt động Enzim - Các chất điều tiết sinh trưởng Các chất điều tiết sinh trƣởng đóng vai trò quan trọng trình nuôi cấy invitro, yếu tố định thành bại trình nuôi Các nguyên tố vi lƣợng thƣờng đƣợc dùng nồng độ thấp so với nguyên tốa đa lƣợng cấy Các hoormon tự nhiên có tác dụng đến biến đổi sinh lý, sinh hoá cây, đặc biệt quan chồi rễ - Nguồn cacbon Hoormon thực vật hợp chất hữu thực vật sinh sản Mặc dù dƣới ánh sáng nhân tạo, Invitro có khả hình thành nồng độ thấp làm nhiệm vụ điều tiết trình sinh trƣởng Có diệp lục quang hợp Song, khả tổng hợp cacbon chúng nhóm chất điều tiết sinh trƣởng thực vật đƣợc phát hiện, là: auxin, mô thực vật sống theo phƣơng thức dị dƣỡng Các mô tế bào xytokinin, gibberellin, absixic axit ethylen Trong đó, auxin xytokinin sống nhờ nguồn cacbon lấy từ đƣờng môi trƣờng dinh dƣỡng Có hai loại hai nhóm chất đƣợc sử dụng nhiều - Auxin: Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 16 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 17 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus KimA/R17 VARIATE V003 TLSONG VARIATE V003 MSEO LN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 450.027 90.0053 378.54 0.000 * RESIDUAL 12 2.85327 237773 * TOTAL (CORRECTED) 17 452.880 26.6400 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XLLANH 10/10/** 12:13 PAGE Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 3 MSEO 6.13333 8.20000 9.86667 12.6667 20.8667 16.2667 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - MSEO MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XLLANH 10/10/** 12:13 PAGE Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus KimA/R17 GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 12.333 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLSONG 18/ 9/** 0:27 PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua KimA/R278 SE(N= 3) 0.281527 5%LSD 12DF 0.867481 - VARIATE SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1519.91 506.636 295.13 0.000 * RESIDUAL 13.7331 1.71664 * TOTAL (CORRECTED) 11 1533.64 139.422 - STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 5.1614 0.48762 4.0 0.0000 NOS 3 3 TLSONG 15.6000 46.6000 37.2667 32.1333 SE(N= 3) 0.756448 5%LSD 8DF 2.46670 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TLSONG 18/ 9/** 0:27 PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - | | | | VARIATE TLSONG GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 32.900 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 11.808 1.3102 4.0 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLSONG FILE TLSONG 18/ 9/** 0:27 PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua KimA/R278 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLSONG FILE KDTN 18/ 9/** 11: PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua KimA/R17 VARIATE V003 TLSONG LN SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1471.56 490.519 139.75 0.000 * RESIDUAL 28.0801 3.51001 * TOTAL (CORRECTED) 11 1499.64 136.331 - DF TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KDTN 18/ 9/** 11: PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 TLSONG 18.6000 49.3333 37.4667 31.4667 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KDTN 18/ 9/** 11: PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua KimA/R17 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - TLSONG GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 34.217 VARIATE V003 CALLUS STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 11.676 1.8735 5.5 0.0000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MSN6 17/ 9/** 15:55 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao callus cac dong lua thuoc to hop KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 CALLUS 6.00000 19.0500 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MSN6 17/ 9/** 15:55 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao callus cac dong lua thuoc to hop KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CALLUS GRAND MEAN (N= 6) NO OBS 12.525 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 7.1797 0.75581 6.0 0.0003 | | | | | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE MSN6 17/ 9/** 15:55 PAGE Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 255.454 255.454 447.19 0.000 * RESIDUAL 2.28499 571247 * TOTAL (CORRECTED) 257.739 51.5478 - SE(N= 3) 0.436366 5%LSD 4DF 1.71046 - SE(N= 3) 1.08167 5%LSD 8DF 3.52721 - VARIATE tao callus cac dong LN SOURCE OF VARIATION Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang lua thuoc to hop KimA/R278 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE MSN6 17/ 9/** 16: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao calus cac dong lua thuoc to hop KimA/R17 PAGE Thi nghiem anh huong cua 2,4D den kha nang tao callus tu bao phan lua KimA/R278 VARIATE V003 CALLUS VARIATE V003 CALLUS LN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 158.620 158.620 320.98 0.000 * RESIDUAL 1.97668 494169 * TOTAL (CORRECTED) 160.597 32.1194 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MSN6 17/ 9/** 16: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao calus cac dong lua thuoc to hop KimA/R17 SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 391.807 78.3613 296.32 0.000 * RESIDUAL 12 3.17335 264446 * TOTAL (CORRECTED) 17 394.980 23.2341 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAAC 18/ 9/** 1:15 PAGE Thi nghiem anh huong cua 2,4D den kha nang tao callus tu bao phan lua KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ - MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 CALLUS 9.11667 19.4000 SE(N= 3) 0.405861 5%LSD 4DF 1.59089 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MSN6 17/ 9/** 16: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao calus cac dong lua thuoc to hop KimA/R17 CTHUC$ NOS 3 3 3 CALLUS 4.00000 14.2000 16.0000 18.0000 17.1333 14.8667 SE(N= 3) 0.296898 5%LSD 12DF 0.914845 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAAC 18/ 9/** 1:15 PAGE Thi nghiem anh huong cua 2,4D den kha nang tao callus tu bao phan lua KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CALLUS GRAND MEAN (N= 6) NO OBS 14.258 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 5.6674 0.70297 4.9 0.0004 | | | | VARIATE CALLUS GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 14.033 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.8202 0.51424 3.7 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE MSEO 24/ 9/** 15:19 PAGE Thi nghiem anh huong cua 2.4D den kha nang tạo callus từ bao phấn lúa KimA/R17 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE NAAC Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 18/ 9/** 1:15 http://www.Lrc-tnu.edu.vn VARIATE V003 CALLUS Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn VARIATE V003 CALLUS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 399.431 79.8862 506.32 0.000 * RESIDUAL 12 1.89332 157777 * TOTAL (CORRECTED) 17 401.324 23.6073 - LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 247.104 49.4209 241.73 0.000 * RESIDUAL 12 2.45334 204445 * TOTAL (CORRECTED) 17 249.558 14.6799 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MSEO 24/ 9/** 15:19 PAGE Thi nghiem anh huong cua 2.4D den kha nang tạo callus từ bao phấn lúa KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 3 CALLUS 8.06667 14.8667 17.4000 23.5333 19.5333 16.4667 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ SE(N= 3) 0.229330 5%LSD 12DF 0.706643 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MSEO 24/ 9/** 15:19 PAGE Thi nghiem anh huong cua 2.4D den kha nang tạo callus từ bao phấn lúa KimA/R17 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CALLUS GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 16.644 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MSONG 25/ 9/** 9:54 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao callus lua KimA/R278 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.8587 0.39721 2.4 0.0000 CALLUS 5.66667 13.6667 15.6667 17.4667 14.0667 12.6000 SE(N= 3) 0.261053 5%LSD 12DF 0.804392 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE | | | | http://www.Lrc-tnu.edu.vn 25/ 9/** 9:54 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - CALLUS BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE MSONG 25/ 9/** 9:54 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao callus lua KimA/R278 FILE MSONG PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao callus lua KimA/R278 VARIATE Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên NOS 3 3 3 GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 13.189 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.8314 0.45216 3.4 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE MSONG 25/ 9/** 10:25 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao callus lua KimA/R17 VARIATE V003 CALLUS Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 275.807 55.1613 219.67 0.000 * RESIDUAL 12 3.01333 251111 * TOTAL (CORRECTED) 17 278.820 16.4012 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MSONG 25/ 9/** 10:25 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao callus lua KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 3 CALLUS 6.13333 14.0667 15.8667 18.8667 15.2667 12.8000 SE(N= 3) 0.289316 5%LSD 12DF 0.891480 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MSONG 25/ 9/** 10:25 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao callus lua KimA/R17 CTHUC$ 10958.5 1565.50 521.84 0.000 * RESIDUAL 16 47.9996 2.99997 * TOTAL (CORRECTED) 23 11006.5 478.543 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KINETIN 19/ 9/** 4: PAGE Thi nghiem anh huong cua Kinetin den kha nang tao choi xanh lua KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 3 3 CHOIX 44.6667 64.0000 80.0000 76.0000 46.6667 36.0000 34.0000 12.6667 SE(N= 3) 0.999995 5%LSD 16DF 2.99800 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KINETIN 19/ 9/** 4: PAGE Thi nghiem anh huong cua Kinetin den kha nang tao choi xanh lua KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VARIATE CALLUS GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 13.833 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.0498 0.50111 3.6 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHOIX FILE KINETIN 19/ 9/** 4: PAGE Thi nghiem anh huong cua Kinetin den kha nang tao choi xanh lua KimA/R278 CHOIX GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 49.250 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 21.876 1.7320 3.5 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHOIX FILE KINETIN 19/ 9/** 1:37 PAGE Thi nghiem anh huong cua Kinetin den kha nang tao choi xanh lua KimA/R17 VARIATE V003 CHOIX VARIATE V003 CHOIX LN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 10502.5 1500.36 529.53 0.000 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn * RESIDUAL 16 45.3336 2.83335 * TOTAL (CORRECTED) 23 10547.8 458.601 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KINETIN 19/ 9/** 1:37 PAGE Thi nghiem anh huong cua Kinetin den kha nang tao choi xanh lua KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BTANG 21/ 9/** 8:49 PAGE Thi nghiem anh huong cua nong Kinetin den su tao choi bach tang tu mo seo cac dong lua thuoc to hop KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 3 3 CHOIX 52.0000 72.0000 82.6667 76.0000 64.0000 48.6667 36.0000 16.0000 SE(N= 3) 0.971828 5%LSD 16DF 2.91356 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KINETIN 19/ 9/** 1:37 PAGE Thi nghiem anh huong cua Kinetin den kha nang tao choi xanh lua KimA/R17 NOS 3 3 3 3 BTANG 16.0000 14.0000 10.0000 18.0000 28.0000 36.0000 46.0000 60.0000 SE(N= 3) 1.68325 5%LSD 16DF 5.04641 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BTANG 21/ 9/** 8:49 PAGE Thi nghiem anh huong cua nong Kinetin den su tao choi bach tang tu mo seo cac dong lua thuoc to hop KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VARIATE CHOIX GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 55.917 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 21.415 1.6833 3.0 0.0000 | | | | BTANG GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 28.500 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 17.014 2.9155 10.2 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE BTANG FILE BTANG 20/10/** 14:11 PAGE Ty le tao choi bach tang cua cac cong thuc thi nghiem To hop KimA/R17 BALANCED ANOVA FOR VARIATE BTANG FILE BTANG 21/ 9/** 8:49 PAGE Thi nghiem anh huong cua nong Kinetin den su tao choi bach tang tu mo seo cac dong lua thuoc to hop KimA/R278 VARIATE V003 BTANG LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 6522.00 931.714 109.61 0.000 * RESIDUAL 16 136.000 8.49998 * TOTAL (CORRECTED) 23 6658.00 289.478 - Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn VARIATE V003 BTANG LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 5010.67 715.809 138.54 0.000 * RESIDUAL 16 82.6670 5.16669 * TOTAL (CORRECTED) 23 5093.33 221.449 _ TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BTANG 20/10/** 14:11 PAGE Ty le tao choi bach tang cua cac cong thuc thi nghiem To hop KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ - Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn CTHUC$ NOS 3 3 3 3 BTANG 12.0000 12.6667 8.00000 13.3333 26.0000 34.0000 37.3333 51.3333 CTHUC$ SE(N= 3) 1.31234 5%LSD 16DF 3.93441 - NOS 3 3 3 3 CHOIX 50.0000 62.0000 84.0000 75.3333 54.0000 48.0000 44.0000 16.0000 SE(N= 3) 1.97203 5%LSD 16DF 5.91217 - _ ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BTANG 20/10/** 14:11 PAGE Ty le tao choi bach tang cua cac cong thuc thi nghiem To hop KimA/R17 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP 19/ 9/** 10: PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE BTANG GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 24.333 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 14.881 2.2730 9.3 0.0000 | | | | F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CHOIX GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 54.167 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 20.034 3.4157 6.3 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHOIX FILE BAP 19/ 9/** 9:49 PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua KimA/R17 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHOIX FILE BAP 19/ 9/** 10: PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua KimA/R278 VARIATE V003 CHOIX LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 9044.67 1292.10 110.75 0.000 * RESIDUAL 16 186.667 11.6667 * TOTAL (CORRECTED) 23 9231.33 401.362 - VARIATE V003 CHOIX LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 9696.00 1385.14 117.05 0.000 * RESIDUAL 16 189.334 11.8334 * TOTAL (CORRECTED) 23 9885.33 429.797 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP 19/ 9/** 9:49 PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP 19/ 9/** 10: PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn CTHUC$ NOS 3 3 CHOIX 56.6667 72.6667 84.0000 76.0000 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn 3 3 69.3333 57.3333 40.6667 18.0000 SE(N= 3) 1.98607 5%LSD 16DF 5.95426 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP 19/ 9/** 9:49 PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua KimA/R17 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CHOIX GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 59.333 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 20.732 3.4400 5.8 0.0000 3 3 11.4000 9.90000 9.46667 8.70000 SE(N= 3) 0.146566 5%LSD 12DF 0.451619 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA 19/ 9/** 16:48 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao re lua KimA/R278 | | | | F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE MOSEO GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 10.572 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.3957 0.25386 2.4 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SO RE FILE RECAY 12/ 9/** 23:13 PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cua choi xanh to hop KimA/R17 BALANCED ANOVA FOR VARIATE MOSEO FILE NAA 19/ 9/** 16:48 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao re lua KimA/R278 VARIATE V003 SO RE RE VARIATE V003 MOSEO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 32.3428 6.46856 100.37 0.000 * RESIDUAL 12 773334 644445E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 33.1161 1.94801 - LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 32.9378 6.58756 31.96 0.000 * RESIDUAL 12 2.47333 206111 * TOTAL (CORRECTED) 17 35.4111 2.08301 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RECAY 12/ 9/** 23:13 PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cua choi xanh to hop KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA 19/ 9/** 16:48 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao re lua KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 NOS 3 3 3 SO RE 12.1000 13.0333 12.5333 10.6667 9.86667 9.46667 SE(N= 3) 0.262114 5%LSD 12DF 0.807662 - MOSEO 11.3000 12.6667 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RECAY 12/ 9/** 23:13 PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cua choi xanh to hop KimA/R17 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA 19/ 9/** 20:45 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re cua choi xanh lua KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SO RE GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 11.278 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.4433 0.45399 4.0 0.0000 | | | | F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE DAI RE BALANCED ANOVA FOR VARIATE DAI RE FILE NAA 19/ 9/** 20:45 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re cua choi xanh lua KimA/R278 VARIATE V003 DAI RE DAI RE LN DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 10.8117 2.16233 149.70 0.000 * RESIDUAL 12 173334 144445E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 10.9850 646176 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA 19/ 9/** 20:45 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re cua choi xanh lua KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ SE(N= 5%LSD 3) 12DF NOS 3 3 3 DAI RE 6.20000 8.73333 7.56667 7.40000 7.20000 6.80000 | | | | VARIATE V003 DAI RE SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 17.2178 3.44356 206.61 0.000 * RESIDUAL 12 200000 166667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 17.4178 1.02458 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA 19/ 9/** 20:54 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re lua KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 3 DAI RE 6.30000 9.30000 8.46667 7.76667 7.50000 6.93333 SE(N= 3) 0.745357E-01 5%LSD 12DF 0.229670 - 0.693889E-01 0.213811 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.80385 0.12019 1.6 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DAI RE FILE NAA 19/ 9/** 20:54 PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re lua KimA/R17 LN SOURCE OF VARIATION GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 7.3167 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên FILE NAA 19/ 9/** 20:54 http://www.Lrc-tnu.edu.vn PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re lua KimA/R17 cay lua nuoi cay tu bao phan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE DAI RE GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 7.7111 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0122 0.12910 1.7 0.0000 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLSONG FILE TLSONG 14/10/** 10:44 PAGE Anh huong cua moi truong thuan duong den ty le song cua cay lua nuoi cay tu bao phan VARIATE TLSONG VARIATE V003 TDRE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 10000.0 3333.33 57.14 0.000 * RESIDUAL 466.667 58.3333 * TOTAL (CORRECTED) 11 10466.7 951.515 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLSONG 14/10/** 10:44 PAGE Anh huong cua moi truong thuan duong den ty le song cua cay lua nuoi cay tu bao phan MEANS FOR EFFECT CTHUC$ | | | | LN NOS 3 3 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 30.847 7.6376 9.2 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDRE FILE DO DAI RE 19/ 9/** 23:54 PAGE Thi nghiem anh huong moi truong thuan duong den dai re KimA/R278 VARIATE V003 TLSONG CTHUC$ GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 83.333 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DO DAI RE 19/ 9/** 23:54 PAGE Thi nghiem anh huong moi truong thuan duong den dai re KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ TLSONG 100.000 100.000 100.000 33.3333 SE(N= 3) 4.40959 5%LSD 8DF 14.3792 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TLSONG 14/10/** 10:44 PAGE Anh huong cua moi truong thuan duong den ty le song cua Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 71.6223 23.8741 169.77 0.000 * RESIDUAL 1.12500 140625 * TOTAL (CORRECTED) 11 72.7473 6.61339 - NOS 3 3 TDRE 12.8333 16.2167 19.5000 17.6667 SE(N= 3) 0.216506 5%LSD 8DF 0.706005 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DO DAI RE 19/ 9/** 23:54 PAGE Thi nghiem anh huong moi truong thuan duong den dai re KimA/R278 http://www.Lrc-tnu.edu.vn F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn VARIATE TDRE GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 16.554 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.5717 0.37500 2.3 0.0000 | | | | VARIATE TDRE GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 16.738 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.6195 0.21016 1.3 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCAY FILE XONG 20/ 9/** 22: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua KimA/R278 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDRE FILE TLSONG 20/ 9/** 0: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu dai re cua cay lua KimA/R17 VARIATE V003 TDRE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 75.1273 25.0424 567.01 0.000 * RESIDUAL 353326 441658E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 75.4806 6.86187 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLSONG 20/ 9/** 0: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu dai re cua cay lua KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 TDRE 12.7500 16.7333 19.5000 17.9667 VARIATE V003 CCAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 866.047 288.682 314.72 0.000 * RESIDUAL 7.33809 917261 * TOTAL (CORRECTED) 11 873.385 79.3987 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XONG 20/ 9/** 22: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 CCAY 11.3100 24.0533 21.0867 35.1367 SE(N= 3) 0.552950 5%LSD 8DF 1.80311 - SE(N= 3) 0.121334 5%LSD 8DF 0.395658 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XONG 20/ 9/** 22: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TLSONG 20/ 9/** 0: PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu dai re cua cay lua KimA/R17 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn VARIATE CCAY GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 22.897 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 8.9106 0.95774 4.2 0.0000 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên | | | | http://www.Lrc-tnu.edu.vn BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCAY FILE XONG 20/ 9/** 22:55 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua KimA/R17 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CAOCAY FILE CAOCAY 20/ 9/** 3:32 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la cac dong lua duoc tao tu bao phan.KimA/R278 VARIATE V003 CCAY VARIATE V003 CAOCAY LN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 872.053 290.684 951.85 0.000 * RESIDUAL 2.44310 305388 * TOTAL (CORRECTED) 11 874.496 79.4996 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XONG 20/ 9/** 22:55 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 CTHUC$ ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XONG 20/ 9/** 22:55 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua KimA/R17 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - CCAY GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 23.838 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 8.9163 0.55262 2.3 0.0000 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CAOCAY 20/ 9/** 3:32 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la cac dong lua duoc tao tu bao phan.KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ - CCAY 11.7100 25.3200 22.6533 35.6700 SE(N= 3) 0.319055 5%LSD 8DF 1.04041 - VARIATE SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 102.182 34.0608 817.44 0.000 * RESIDUAL 333339 416674E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 102.516 9.31960 - | | | | http://www.Lrc-tnu.edu.vn NOS 3 3 CAOCAY 4.33333 5.00000 5.75000 11.6667 SE(N= 3) 0.117852 5%LSD 8DF 0.384304 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CAOCAY 20/ 9/** 3:32 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la cac dong lua duoc tao tu bao phan.KimA/R278 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 12) NO OBS STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên | | | | http://www.Lrc-tnu.edu.vn CAOCAY 12 6.6875 3.0528 0.20413 3.1 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE SOLA 13/ 9/** 8:41 PAGE Thi nghiem nghien cuu anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la to hop KimA/R17 VARIATE V003 SOLA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 110.854 36.9514 591.20 0.000 * RESIDUAL 500018 625023E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 111.354 10.1231 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SOLA 13/ 9/** 8:41 PAGE Thi nghiem nghien cuu anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la to hop KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 SOLA 4.25000 4.83333 6.16667 11.9167 SE(N= 3) 0.144340 5%LSD 8DF 0.470679 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SOLA 13/ 9/** 8:41 PAGE Thi nghiem nghien cuu anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la to hop KimA/R17 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SOLA Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 6.7917 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.1817 0.25000 3.7 0.0000 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên | | | | http://www.Lrc-tnu.edu.vn BALANCED ANOVA FOR VARIATE DNHANH FILE NHANH 21/ 9/** 13:24 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh cua lua.KimA/R278 VARIATE V003 NHANH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1.93229 644097 61.83 0.000 * RESIDUAL 833334E-01 104167E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.01562 183239 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHANH 21/ 9/** 13:24 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh cua lua.KimA/R278 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 CCAY 0.750000 1.00000 1.16667 1.83333 VARIATE V003 DNHANH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 3.93750 1.31250 63.00 0.000 * RESIDUAL 166667 208333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 4.10417 373106 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHANH 21/ 9/** 13:31 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh.KimA/R17 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHANH 21/ 9/** 13:24 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh cua lua.KimA/R278 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHANH 21/ 9/** 13:31 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh.KimA/R17 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - DNHANH CCAY 0.500000 1.00000 1.25000 2.08333 SE(N= 3) 0.833334E-01 5%LSD 8DF 0.271742 - SE(N= 3) 0.589256E-01 5%LSD 8DF 0.192150 - VARIATE NOS 3 3 GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | 12 1.1875 0.42806 0.10206 8.6 0.0000 DNHANH GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ (N= 12) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | OBS TOTAL SS RESID SS | 12 1.2083 0.61082 0.14434 11.9 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGST FILE TGST 12/10/** 4:58 PAGE Thoi gian sinh truong cua cac dong lua nuoi cay tu bao phan vu mua 2008 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DNHANH FILE NHANH 21/ 9/** 13:31 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh.KimA/R17 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn VARIATE V003 TGST LN SOURCE OF VARIATION DF Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN http://www.Lrc-tnu.edu.vn ============================================================================= CTHUC$ 20 415.714 20.7857 0.53 0.939 * RESIDUAL 42 1662.00 39.5714 * TOTAL (CORRECTED) 62 2077.71 33.5115 - * TOTAL (CORRECTED) 62 6823.88 110.063 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TGST 12/10/** 4:58 PAGE Thoi gian sinh truong cua cac dong lua nuoi cay tu bao phan vu mua 2008 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ - MEANS FOR EFFECT CTHUC$ - 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NSUAT 12/10/** 4:35 PAGE Nang suat cac dong lua nuoi cay tu bao phan vụ mua 2008 CTHUC$ CTHUC$ 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 NOS 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 TGST 115.000 112.000 114.000 117.000 112.000 114.000 119.000 114.000 119.000 116.000 114.000 120.000 115.000 116.000 116.000 114.000 119.000 110.000 116.000 112.000 114.000 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NSUAT 12/10/** 4:35 PAGE Nang suat cac dong lua nuoi cay tu bao phan vụ mua 2008 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - TGST STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 5.7889 6.2906 5.5 0.9387 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSUAT FILE NSUAT 12/10/** 4:35 PAGE Nang suat cac dong lua nuoi cay tu bao phan vu mua 2008 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 63) NO OBS 63 115.14 NSUAT 45.4200 55.0333 45.2333 50.8000 64.6333 54.4667 32.6867 54.2167 40.9533 71.2133 40.6300 54.9133 46.1500 72.9667 65.0133 45.3233 48.0933 49.6133 38.6833 46.0167 52.7500 SE(N= 3) 1.49620 5%LSD 42DF 4.26986 SE(N= 3) 3.63187 5%LSD 42DF 10.3647 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TGST 12/10/** 4:58 PAGE Thoi gian sinh truong cua cac dong lua nuoi cay tu bao phan vu mua 2008 VARIATE NOS 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 NSUAT GRAND MEAN (N= 63) NO OBS 63 51.181 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 10.491 2.5915 5.1 0.0000 | | | | VARIATE V003 NSUAT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 20 6541.82 327.091 48.70 0.000 * RESIDUAL 42 282.064 6.71582 - Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn