Bộ môn: Huyết Học NƯỚC TIỂU Tổ – XN 13 Phạm Thị Lành Phạm Nhật Hạ Đỗ Thị Quỳnh Vương Thị Nhài Đỗ Quang Thịnh Vũ Văn Đông Mục Tiêu Mục đích xét nghiệm nước tiểu Cách lấy bảo quản bệnh phẩm Quy trình xét nghiệm Đánh giá kết I MỤC ĐÍCH CỦA XÉT NGHIỆM Nước tiểu dịch tiết quan trọng thể, có nhiệm vụ đào thải bên chất độc, chất cặn bã sinh trình chuyển hóa chất Sự thay đổi tính chất vật lý, hóa học thành phần nước tiểu phản ánh chuyển hóa chất hoạt động quan nội tạng gan, thận, tuyến nội tiết Mục đích xét nghiệm nước tiểu giúp việc chẩn đoán, theo dõi trình điều trị bệnh số quan II CÁCH LẤY VÀ BẢO QUẢN BỆNH PHẨM Cách lấy bệnh phẩm .Bao gồm : o.Lấy nước tiểu 24 o.Lấy nước tiểu dòng o.Lấy nước tiểu buổi sáng o.Lấy nước tiểu qua sonde niệu đạo o.Lấy nước tiểu qua soi bàng quang o.Lấy nước tiểu qua chọc hút bàng quang .Lưu ý: o.Tốt nên lấy vào buổi sáng sớm lúc ngủ dậy o.Lấy nước tiểu vào lọ khô, có nhãn dán ghi tên tên bệnh nhân o.Nên xét nghiệm nước tiểu sau lấy, không để 2h o.Không làm xét nghiệm cặn lắng nước tiểu để tủ lạnh o.Phải quan sát ghi rõ màu sắc, tính chất, số lượng nước tiểu vào phiếu xét nghiệm 2 Bảo quản nước tiểu  Tốt nên làm xét nghiệm sau lấy không  Đối với nước tiểu 24h để tránh lên men làm hư hại tế bào ngăn chặn phát triển tạp khuẩn người ta dùng chất chống thối sau: o Tráng bô vô khuẩn có nắp đậy 5ml dd HCl o Thymol pha cồn tạo dung dịch 10% Cho từ – 10 ml/ nước tiểu 24h o Phenol giọt cho 30 ml nước tiểu  Nước tiểu lần: chưa phân tích nước tiểu bảo quản – C vòng ngày, để lâu ngày phải để ngăn đá III QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM Có kỹ thuật thường dùng huyết học Xét nghiệm tế bào cặn lắng nước tiểu Xét nghiệm tế bào cặn đắng addis XÉT NGHIỆM TẾ BÀO CẶN LẮNG NƯỚC TIỂU SOI TƯƠI  Chuẩn bị dụng cụ, máy móc, thuốc nhuộm o Máy quay ly tâm o Chai lọ bình nón 500 ml o Ống ly tâm đáy nhọn 15 ml o Pipette Pasteur (50 giọt # 1ml ) o Lam kính, phiến kính mỏng (Lammelle) o Kính hiển vi o Formol 10% o Thuốc nhuộm: Sternheiner Malbin Staining  Các thành phần có nước tiểu o Đái trụ hình: trụ hình cấu trúc hình trụ có nước tiểu Bản chất trụ mucoprotein, loại protein tế bào ống thận bị tổn thương tiết gọi protein Tam-Holsfall protein từ huyết tương lọt qua cầu thận vào nước tiểu Người ta phân chia loại trụ sau: - Trụ trong: hay trụ hyalin chất protein chưa thoái hoá hoàn toàn, tế bào - Trụ keo: tế bào thoái hoá - Trụ sáp: protein thoái hoá - Trụ mỡ: chứa giọt mỡ, gặp HCTH - Trụ hạt: chứa protein xác tế bào biểu mô ống thận, hay gặp viêm cầu thận mãn Trụ hạt màu nâu bẩn gặp suy thận cấp - Trụ hồng cầu: chứa hồng cầu từ cầu thận xuống, gặp viêm cầu thận cấp - Trụ bạch cầu: chứa xác tế bào bạch cầu, tổn thương từ nhu mô thận, gặp viêm thận-bể thận cấp mãn o Các thành phần cặn lắng khác nước tiểu: - Tinh thể: phosphat, oxalatcanxi, tinh thể urat, tinh thể cystin Nếu tinh thể có nhiều nguy tạo sỏi - Tế bào ung thư: gặp ung thư thận-tiết niệu - Tế bào biểu mô: thấy nhiều viêm nhiễm đường tiết niệu - Thể lưỡng triết quang: thành phần ester cholesterol dạng hạt mỡ, trụ mỡ gặp hội chứng thận hư  Quy trình : bước Lắc nhẹ bình nón (hoặc lọ) NT để cặn phân tán Rót vào ống ly tâm tới khoảng 2/3 ống ly tâm Ly tâm với tốc độ 1500 vòng / phút / phút Nhẹ nhàng nghiêng ống ly tâm đổ phần NT Nhuộm cặn lắng đáy ống nghiệm cách nhỏ giọt Sternheiner Malbin staining Dùng pipette Pasteur hút vào thổi - lần cho cặn đáy ống đồng Lấy giọt cặn “đồng nhất” để lên lam kính - Đậy lammelle lên lam kính (nơi có giọt cặn) Ghi số lam (Số thứ tự nước tiểu) Có thể xem cặn NT lam kính Dùng KHV với: - Vật kính 10x để nhìn tổng quát quang trường - Vật kính 40x để xác định loại tế bào Có thể hạ thấp tụ quang đủ để thấy yếu tố suốt 2.XÉT NGHIỆM TẾ BÀO CẶN LẮNG ADDIS  Nguyên lý Định lượng nước tiểu thời gian định tiến hành đếm tế bào cho phép xác định số lượng tê bào nước tiểu phút giúp cho chẩn đoán, theo dõi điều trị số bệnh hệ tiết niệu  Cách lấy bệnh phẩm Buổi sáng bệnh nhân dậy sớm tiểu hết, sau uống 300 ml nước đun sôi để nguội nằm nghỉ Trong tiểu bình thưòng vào bô đo mililit ghi vào giấy xét nghiệm Lắc toàn nước tiểu lấy 10ml đem đến phòng xét nghiệm  Dụng cụ, hoá chất o Máy ly tâm o Buồng đếm Nageotte o Pipette Pasteur o Kính hiển vi  Quy trình kỹ thuật o Đem 10 ml nước tiểu ly tâm 1500 - 2000 vòng/ phút phút Bỏ ml phần Lấy ml cặn lác nhỏ lên buồng đếm Nageotte o Đếm số lượng tế bào ỏ ô quy định, từ tính số lượng tế bào hồng cầu bạch cầu phút +Thí dụ: Trong (180 phút) bệnh nhân tiểu 360 ml Trong mm3 đếm bạch cầu o Cách tính sau: N x a x 1000/ 10 hay N x a x 100 = x 360/180 x 1000/10 = 1000 Trong đó: - N số lượng tế bào đếm mm3 - a = V/ t V lượng nước tiểu thu t thời gian 180 phút - 10 10 ml nước tiểu đem ly tâm - 1000 1000 mm3 = ml => Như phút có 1000 bạch cầu nước tiểu IV ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ  Bình thường: hồng cầu, bạch cầu niệu ít, vài tế bào dẹt tế bào dẹt tế bào niệm mạc niệu quản thoái hóa, có vài tinh trùng (ở nam giới) o Soi tươi có - HC, – BC / VT o Cặn addis: < 1000 HC < 2000 BC /phút, trụ HC, trụ niệu, trụ BC  Bất thường: o Đái HC vi thể: - Soi tươi: • HC/VT (++) • HC/VT (+++) - Cặn Addis: < 1000 HC/phút o Đái máu đại thể: - Đái máu với số lượng nhiều, mắt thường không nhìn thấy nước tiểu có màu hồng màu nước rửa thịt màu đỏ, để lâu hồng cầu lắng xuống - Lượng máu tối thiểu bắt đầu làm thay đổi màu sắc nước tiểu vào khoảng 1ml máu lít nước tiểu Soi tươi thấy HC dày dặc vi trường o Đái BC - Soi tươi: 3-5 BC/VT (+) 10 BC/VT (+++) BC/VT (++) 20 BC/VT (++++) - Cặn addis >2000 BC/phút o Đái trụ hình o Đái thành phần lắng cặn khác nước tiểu: tinh thể (phosphat, urat, ), tế bào ung thư (k thận – tiết niệu), tế bào biểu mô (viêm nhiễm đường tiết niệu), thể lưỡng chiết quang (thành eter cholesterol dạng hạt mỡ, trụ mỡ gặp hội trứng thận hư) [...]... thấy nước tiểu có màu hồng như màu nước rửa thịt cho đến màu đỏ, để lâu hồng cầu sẽ lắng xuống - Lượng máu tối thiểu bắt đầu làm thay đổi màu sắc nước tiểu vào khoảng 1ml máu trong 1 lít nước tiểu Soi tươi thấy HC dày dặc vi trường o Đái BC - Soi tươi: 3-5 BC/VT (+) 10 BC/VT (+++) 5 BC/VT (++) 20 BC/VT (++++) - Cặn addis >2000 BC/phút o Đái ra trụ hình o Đái ra các thành phần lắng cặn khác trong nước tiểu: ... bệnh nhân dậy sớm đi tiểu hết, sau đó uống 300 ml nước đun sôi để nguội và nằm nghỉ Trong 3 giờ đi tiểu bình thưòng vào một cái bô sạch và đo được bao nhiêu mililit thì ghi vào giấy xét nghiệm Lắc đều toàn bộ nước tiểu và lấy 10ml đem đến phòng xét nghiệm  Dụng cụ, hoá chất o Máy ly tâm o Buồng đếm Nageotte o Pipette Pasteur o Kính hiển vi  Quy trình kỹ thuật o Đem 10 ml nước tiểu ly tâm 1500 - 2000... phút) bệnh nhân đi tiểu được 360 ml Trong 1 mm3 đếm được 5 bạch cầu o Cách tính như sau: N x a x 1000/ 10 hay N x a x 100 = 5 x 360/180 x 1000/10 = 1000 Trong đó: - N là số lượng tế bào đếm được trong 1 mm3 - a = V/ t V là lượng nước tiểu thu được t là thời gian 180 phút - 10 là 10 ml nước tiểu đem ly tâm - 1000 là 1000 mm3 = 1 ml => Như vậy trong một phút có 1000 bạch cầu trong nước tiểu IV ĐÁNH GIÁ... (Số thứ tự của nước tiểu) 8 Có thể xem 2 cặn NT trên cùng một lam kính Dùng KHV với: - Vật kính 10x để nhìn tổng quát quang trường - Vật kính 40x để xác định loại tế bào Có thể hạ thấp tụ quang đủ để thấy những yếu tố trong suốt 2.XÉT NGHIỆM TẾ BÀO CẶN LẮNG ADDIS  Nguyên lý Định lượng nước tiểu trong một thời gian nhất định và tiến hành đếm tế bào cho phép xác định số lượng tê bào nước tiểu trong một