BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN DƢƠNG THỊ HỒNG DUYÊN NGHIÊN CỨU BỆNH DO ĐƠN BÀO LEUCOCYTOZOON SPP GÂY RA Ở GÀ TẠI TỈNH THÁI NGUYÊN, BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Ký sinh trùng vi sinh vật học thú y Mã số: 62.64.01.04 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y Thái Nguyên, 2016 Luận án hoàn thành tại: TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Thị Kim Lan PGS TS Lê Văn Năm Ngƣời phản biện 1: Ngƣời phản biện 2: Ngƣời phản biện 3: Luận án đƣợc bảo vệ trƣớc Hội đồng đánh giá luân án cấp Đại học Họp tại: TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN Vào hồi giờ, ngày tháng năm 2016 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thƣ viện Quốc gia; - Trung tâm học liệu Đại học Thái Nguyên; - Thƣ viện Trƣờng Đại học Nông Lâm - ĐH Thái Nguyên MỞ ĐẦU Đơn bào Leucocytozoon thuộc nhóm nguyên sinh động vật, thuộc huyết bào tử trùng (Heamosporidia) ký sinh máu quan nội tạng nhiều lồi gia cầm, gà lồi mẫn cảm nhất, đặc biệt gà nuôi theo phương thức thả vườn Đơn bào Leucocytozoon ký sinh hồng cầu gây xuất huyết, tan vỡ hồng cầu, dẫn đến thiếu máu ỉa chảy, phân có màu xanh cây, gà chết với tỷ lệ cao 30 - 50% Trong năm gần đây, chăn nuôi gà tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang phát triển mạnh Đây hai tỉnh trung du miền núi phía Bắc có điều kiện thuận lợi cho chăn ni gà phát triển, đặc biệt chăn nuôi gà thả vườn Tuy nhiên, chưa có cơng trình nghiên cứu nguyên nhân, bệnh học biện pháp phòng trị bệnh đàn gà hai tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang Xuất phát từ nhu cầu cấp bách thực tiễn sản xuất, thực đề tài: "Nghiên cứu bệnh đơn bào Leucocytozoon spp gây gà nuôi tỉnh Thái Nguyên, Bắc Giang biện pháp phòng trị” * Mục tiêu đề tài - Xác định loài Leucocytozoon gây bệnh, đặc điểm dịch tễ bệnh học bệnh đơn bào Leucocytozoon gây đàn gà thả vườn thuộc tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang - Lựa chọn phác đồ điều trị xây dựng biện pháp phịng bệnh, góp phần hạn chế thiệt hại đơn bào Leucocytozoon gây cho đàn gà hai tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang * Ý nghĩa khoa học đề tài Kết nghiên cứu đề tài bổ sung hồn thiện thơng tin khoa học đặc điểm dịch tễ, bệnh lý lâm sàng bệnh, phác đồ điều trị hiệu bệnh đơn bào Leucocytozoon gây gà, đồng thời sở khoa học để xây dựng biện pháp phòng trị bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà có hiệu cao Thái Nguyên, Bắc Giang nói riêng Việt Nam nói chung * Ý nghĩa thực tiễn đề tài Kết đề tài sở để khuyến cáo người chăn nuôi gà áp dụng biện pháp phòng trị bệnh đơn bào Leucocytozoon, nhằm hạn chế tỷ lệ nhiễm Leucocytozoon cho gà, hạn chế thiệt hại Leucocytozoon gây ra, góp phần nâng cao suất chăn nuôi, thúc đẩy chăn ni gà nói riêng chăn ni gia cầm nói chung phát triển * Những đóng góp đề tài - Đề tài cơng trình Việt Nam nghiên cứu tương đối có hệ thống đặc điểm dịch tễ, bệnh lý, lâm sàng biện pháp phòng trị bệnh Leucocytozoon cho gà hai tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang - Đề xuất biện pháp phịng trị bệnh Leucocytozoon cho gà có hiệu quả, khuyến cáo áp dụng rộng rãi nông hộ, trại chăn nuôi gà địa bàn hai tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang * Bố cục Luận án Luận án gồm 170 trang chia thành chương, phần: mở đầu trang; chương 1: Tổng quan tài liệu 36 trang; chương 2: Vật liệu, nội dung phương pháp nghiên cứu 20 trang; chương 3: Kết nghiên cứu thảo luận: 57 trang; Kết luận đề nghị trang; Tài liệu tham khảo 13 trang; Hình ảnh luận án 20 trang; Phụ lục 20 trang Luận án có 30 bảng, 11 hình, 125 tài liệu tham khảo (40 tài liệu tiếng việt, 85 tài liệu tiếng nước ngoài) 40 ảnh mầu (được cấu trúc từ 110 ảnh) Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU Zhao W cs (2014) cho biết, đơn bào Leucocytozoon spp lây nhiễm cho nhiều loài gia cầm gây thiệt hại kinh tế nặng nề cho ngành chăn nuôi gia cầm theo phương thức công nghiệp Theo Levine N D (1985), Phạm Sỹ Lăng cs (2011), Leucocytozoon gây bệnh cho gà có vị trí hệ thống phân loại nguyên bào sau: Ngành Apicomplexa (Levine, 1970), lớp Aconoidasida (Mehlhorn, 1980), Haemosporoda (Jacques Euzéby, 1988), họ Leucocytozoidae (Doflein, 1916), giống Leucocytozoon (Sambon, 1908) Theo Nguyễn Thị Kim Lan cs (1999), thể đơn bào có cấu tạo gồm màng tế bào, chất nguyên sinh, hạt nhân tế bào Khi ký sinh hồng cầu, bạch cầu, quan nội tạng gà loài chim, đơn bào Leucocytozoon có hai dạng: dạng tiểu thể hình dùi trống hình thoi, nhọn hai đầu, có kích thước 15 - 20 µm; dạng bào tử hình trứng, kích thước 20 - 25 µm Theo Lê Đức Quyết cs (2009), tỷ lệ nhiễm Leucocytozoon phụ thuộc vào nhiều yếu tố như: tuổi gia cầm, giống, địa hình, vùng sinh thái, phương thức chăn ni… Mark Pattison (2008) cho biết, triệu chứng lâm sàng gà mắc bệnh đơn bào Leucocytozoon bao gồm: ăn kém, gầy yếu, thiếu máu chết Lee D H cs (2014) cho biết: gà bị bệnh Leucocytozoon có bệnh tích điển hình xuất huyết da cánh chân, xuất huyết ngực đùi, tuyến tụy thận Để phòng ngừa bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà gia cầm khác có hiệu cao, Nguyễn Thị Kim Lan cs (2014) đề nghị áp dụng biện pháp diệt đơn bào Leucocytozoon thể ký chủ, diệt dĩn - ký chủ trung gian truyền bệnh phòng bệnh thuốc Theo Lê Văn Năm (2011), loại thuốc có chứa nguyên liệu như: sulfamonomethoxin, sulfadimethoxin clopidol có tác dụng tốt phòng trị bệnh Leucocytozoon gây Tác giả cho biết, bệnh ký sinh trùng đường máu thường bội nhiễm ghép với nhiều bệnh khác, cần phối hợp phác đồ điều trị đạt hiệu điều trị cao Chƣơng VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng, thời gian, địa điểm nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu - Gà nuôi bán chăn thả hai tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang - Bệnh đơn bào đường máu Leucocytozoon gà 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 2.1.2.1 Địa điểm triển khai: tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang 2.1.2.2 Địa điểm xét nghiệm mẫu - Phịng thí nghiệm Khoa Chăn ni thú y - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên - Khoa Huyết học khoa Giải phẫu bệnh - Bệnh viện đa khoa Trung ương Thái Nguyên 2.1.2.3 Thời gian nghiên cứu: Từ năm 2013 - 2015 2.2 Vật liệu nghiên cứu * Các loại mẫu nghiên cứu: Mẫu máu gà, gà khỏe, gà chết gà bị bệnh đơn bào Leucocytozoon, quan nội tạng có bệnh tích điển hình bệnh Leucocytozoon, mẫu dĩn hút máu * Thiết bị dụng cụ: Máy cắt cúp tổ chức Microtom, máy phân tích huyết học lade tự động, kính hiển vi quang học, kính lúp, đồ mổ tiểu gia súc, kim lấy máu, tube tráng dung dịch EDTA 1% chống đông máu, xi lanh, kim tiêm, lam kính lamen * Hóa chất thuốc: Hệ thống thuốc nhuộm hematoxilin – eosin, thuốc nhuộm giemsa, thuốc điều trị bệnh Leucocytozoon gà, thuốc phun diệt dĩn, dung dịch formol 10% 2.3 Nội dung nghiên cứu 2.3.1 Đặc điểm dịch tễ bệnh đơn bào Leucocytozoon gà Thái Nguyên Bắc Giang * Thực trạng cơng tác phịng bệnh ký sinh trùng cho gà địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang * Tình hình nhiễm đơn bào Leucocytozoon gà tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon gà địa phương - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon gà theo địa hình - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon gà theo mùa vụ - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon theo tuổi gà - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon theo phương thức nuôi gà - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon theo điều kiện vệ sinh thú y chăn nuôi gà - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon theo tính biệt gà - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon theo mật độ chăn thả gà * Nghiên cứu đặc điểm hoạt động loài dĩn - ký chủ trung gian truyền bệnh Leucocytozoon cho gà - Thành phần loài dĩn - ký chủ trung gian truyền Leucocytozoon cho gà địa phương - Tỷ lệ dĩn hút máu có đơn bào Leucocytozoon thể - Biến động số lượng loài dĩn Thái Nguyên Bắc Giang - Một số quy luật hoạt động loài dĩn năm ngày 2.3.2 Nghiên cứu bệnh đơn bào Leucocytozoon gà Thái Nguyên Bắc Giang - Thành phần loài đơn bào Leucocytozoon gây bệnh cho gà Thái Nguyên Bắc Giang - Triệu chứng gà mắc bệnh đơn bào Leucocytozoon - Một số số máu gà mắc bệnh Leucocytozoon so với gà khỏe - Tổn thương đại thể đơn bào Leucocytozoon gây gà - Tổn thương vi thể đơn bào Leucocytozoon gây gà 2.3.3 Nghiên cứu biện pháp phòng trị bệnh 2.3.3.1 Nghiên cứu phác đồ điều trị bệnh Leucocytozoon cho gà Xác định hiệu lực độ an toàn phác đồ điều trị bệnh Leucocytozoon gà diện hẹp diện rộng 2.3.3.2 Thử nghiệm đề xuất biện pháp phòng trị tổng hợp bệnh Leucocytozoon cho gà * Thử nghiệm biện pháp trị đơn bào Leucocytozon cho gà Thái Nguyên - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon gà lơ thí nghiệm lơ đối chứng sau tháng thử nghiệm - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon gà lơ thí nghiệm lơ đối chứng sau tháng thử nghiệm - Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon gà lơ thí nghiệm lơ đối chứng sau tháng thử nghiệm - Khối lượng gà lơ thí nghiệm đối chứng sau 1, tháng thử nghiệm * Đề xuất biện pháp phòng trị đơn bào Leucocytozoon cho gà 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.4.1 Xác định thực trạng áp dụng biện pháp phòng bệnh ký sinh trùng cho gà địa phương nghiên cứu theo phương pháp điều tra vấn trực tiếp quan sát 2.4.2 Phương pháp xác định tỷ lệ, cường độ nhiễm Leucocytozoon gà - Tính dung lượng mẫu tối thiểu phần mềm WinEpiscope 2.0 - Phát Lecocytozoon máu gà phương pháp làm tiêu máu, nhuộm giemsa quan sát kính hiển vi quang học 2.4.3 Bố trí thu thập mẫu dĩn phương pháp nghiên cứu đặc điểm hoạt động dĩn - ký chủ trung gian truyền Leucocytozoon Thái Nguyên Bắc Giang - Thu thập dĩn hút máu vợt - Phân loại dĩn theo khóa định loại Eldridge B F Edman J D (2004) - Xác định tỷ lệ dĩn hút máu có đơn bào Leucocytozoon thể phương pháp nhuộm giemsa, kiểm tra tiêu nhuộm kính hiển vi quang học - Xác định quy luật hoạt động năm ngày dĩn theo phương pháp quan sát 2.4.4 Phương pháp nghiên cứu bệnh đơn bào Leucocytozoon gây gà 2.4.4.1 Định danh đơn bào Leucocytozoon spp ký sinh gà tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang Đơn bào ký sinh hồng cầu, tiêu máu nhuộm giemsa phân loại vào hình thái, kích thước theo khóa định loại Levine N D (1985) 2.4.4.2 Phương pháp theo dõi triệu chứng lâm sàng gà nhiễm Leucocytozoon Trực tiếp quan sát thay đổi màu sắc mào tích, trạng thái thể, màu sắc trạng thái phân, ăn uống, vận động gà, kết hợp thu thập thêm thông tin chủ hộ nuôi gà 2.4.4.3 Phương pháp xét nghiệm số tiêu huyết học gà khỏe gà bị bệnh Leucocytozoon Các tiêu huyết học gà xác định máy Cellta Mek - 6420k - Nihon Kohden (Nhật Bản) 2.4.4.4 Phương pháp xác định tổn thương đại thể vi thể phủ tạng gà đơn bào Leucocytozoon gây - Mổ khám gà theo hướng dẫn Bộ Nông nghiệp & Phát triển nông thôn (2005) để xác định biến đổi đại thể phủ tạng đơn bào Leucocytozoon gây - Nghiên cứu tổn thương vi thể phương pháp làm tiêu tổ chức học theo quy trình tẩm đúc parafin, nhuộm hematoxilin - eosin, đọc kết kính hiển vi quang học (Jones T C Gleiser C A (1954) 2.4.5 Nghiên cứu biện pháp phòng trị bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà Đánh giá hiệu lực, độ an toàn 03 phác đồ điều trị thử nghiệm biện pháp phòng bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà theo phương pháp phân lô so sánh 2.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu Số liệu thu được xử lý phương pháp thống kê sinh học (theo tài liệu Nguyễn Văn Thiện, 2008), phần mềm Excel 2007 phần mềm Minitab 14.0 11 đồng có sai khác rõ rệt (P < 0,05); tỷ lệ nhiễm vùng núi đồng khác rõ rệt (P < 0,001) 3.1.2.3 Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon gà theo mùa vụ Bảng 3.4: Tỷ lệ cƣờng độ nhiễm Leucocytozoon gà theo mùa vụ Mùa Xuân Hè Số gà xét nghiệm (con) 140 154 Thu 141 31 22,14a Cƣờng độ nhiễm (% hồng cầu có đơn bào) ≤5 > - 10 > 10 n % n % n % 15 48,39 10 32,26 19,35 43 27,92a 19 44,19 14 32,56 10 23,26 26 ab 15 57,69 30,77 11,54 b 28,57 Số gà Tỷ lệ nhiễm nhiễm (con) (%) 18,44 Đông 137 14 10,22 64,29 Tính chung 572 114 19,93 58 50,88 36 31,58 20 17,54 7,14 Ghi chú: Theo hàng dọc, tỷ lệ nhiễm mang chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon khác gà nuôi mùa vụ khác Gà nhiễm Leucocytozoon nhiều mùa Xuân mùa Hè, nhiễm mùa Thu mùa Đông Nguyên nhân dẫn đến khác tỷ lệ nhiễm theo mùa do: mùa Xuân mùa Hè khoảng thời gian thời tiết nóng ẩm, mưa nhiều, đồng thời mùa mà dĩn hút máu sinh sản hoạt động mạnh Do đó, vào thời gian gà thường bị nhiễm Leucocytozoon nhiều cường độ nhiễm nặng 3.1.2.4 Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon theo tuổi gà Trong tổng số 482 gà kiểm tra có 96 gà nhiễm đơn bào Leucocytozoon, chiếm 19,92% Tỷ lệ nhiễm đơn bào tăng dần theo tuổi gà Nhiễm thấp gà tháng tuổi (11,02%) cao gà tháng tuổi (27,43%) Như vậy, tỷ lệ nhiễm gà tháng tuổi tháng tuổi khác rõ rệt (P < 0,001) Sở dĩ 12 có khác gà tháng tuổi chăm sóc tốt, vệ sinh chuồng trại đảm bảo Bảng 3.5: Tỷ lệ cƣờng độ nhiễm Leucocytozoon gà theo tuổi ≤2 118 13 11,02a Cƣờng độ nhiễm (% hồng cầu có đơn bào) ≤5 > - 10 > 10 n % n % n % 61,54 30,77 7,69 >2-4 127 24 18,90ab 13 54,17 29,17 16,67 28 b 13 46,43 32,14 21,43 b Tuổi (tháng) Số gà xét Số gà Tỷ lệ nghiệm nhiễm nhiễm (con) (con) (%) >4-6 124 >6 Tính chung 22,58 113 31 27,43 14 45,16 10 32,26 22,58 482 96 19,92 48 50,00 30 31,25 18 18,75 Ghi chú: Theo hàng dọc, tỷ lệ nhiễm mang chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) 3.1.2.6 Tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào Leucocytozoon theo điều kiện vệ sinh thú y chăn nuôi gà Bảng 3.7: Tỷ lệ cƣờng độ nhiễm đơn bào Leucocytozoon gà theo tình trạng vệ sinh thú y Số gà Số gà Tỷ lệ Tình trạng xét nhiễm nhiễm VSTY nghiệm (con) (%) (con) Tốt 15 9,87a 152 Cƣờng độ nhiễm (% hồng cầu có đơn bào) ≤5 > - 10 > 10 n % n % n % 10 66,67 26,67 6,66 Trungbình 149 30 20,13b 16 53,33 30,00 16,67 Kém 143 42 29,37b 19 45,24 13 30,95 10 23,81 Tính chung 444 87 19,59 45 51,72 26 29,89 16 18,39 Ghi chú: Theo hàng dọc, tỷ lệ nhiễm mang chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Gà nuôi điều kiện vệ sinh thú y bị nhiễm đơn bào với tỷ lệ cao (29,37%); gà ni điều kiện vệ sinh thú y tốt có tỷ lệ nhiễm thấp (9,87%) 13 Như vậy, gà nuôi điều kiện vệ sinh thú y tốt có tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào đường máu Leucocytozoon thấp nhiều so với gà nuôi điều kiện vệ sinh thú y kém, tình trạng vệ sinh thú y tạo điều kiện thuận lợi cho dĩn hút máu sinh sản hoạt động 3.1.3 Nghiên cứu đặc điểm hoạt động loài dĩn hút máu truyền bệnh Leucocytozoon cho gà 3.1.3.1 Định danh loài dĩn hút máu truyền đơn bào Leucocytozoon cho gà địa phương Bảng 3.10: Thành phần loài tần suất xuất loài dĩn hút máu địa phƣơng nghiên cứu Địa phƣơng Sông Công Thái Nguyên Bắc Giang Kết định loài dĩn hút máu Culicoides Culicoides Simulium arakawa odibilis slossonae + + Số loài phát Phổ Yên + - + Đồng Hỷ + + + Phú Bình + - + Võ Nhai + + + Định Hóa + - + Yên Thế + - - Tân Yên + - - Sơn Động + + + Lục Ngạn + - + 100 30,00 80,00 Tần xuất suất (%) Ghi chú: (+): Xuất (-): Không xuất Kết xác định loài dĩn thu thập 10 huyện, thành, thị tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang cho thấy: Thái Ngun Bắc Giang 14 có lồi dĩn ký chủ trung gian truyền bệnh Leucocytozoon cho gà, phân bố phổ biến lồi Culicoides arakawa Simulium slossonae, tần suất xuất 100% 80,00% Loài Culicoides odibilis phân bố hẹp (30,00%) 3.1.3.2 Tỷ lệ dĩn hút máu có đơn bào Leucocytozoon thể Bảng 3.11 Tỷ lệ cá thể dĩn hút máu có đơn bào Leucocytozoon thể Số dĩn Số dĩn có đơn Tỷ lệ dĩn Địa phƣơng kiểm bào có đơn tra Leucocytozoon bào (%) Sơng Cơng 25 8,00 Thái Nguyên Bắc Giang Phổ Yên 25 8,00 Đồng Hỷ 25 12,00 Phú Bình 25 20,00 Võ Nhai 25 20,00 Định Hóa 25 12,00 Tổng 150 20 13,33 Yên Thế 25 8,00 Tân Yên 25 12,00 Sơn Động 25 16,00 Lục Ngạn 25 12,00 Tổng 100 12 12,00 250 32 12,80 Tính chung Trong tổng số 250 cá thể dĩn thu thập địa phương tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang, thấy 12,80% số dĩn có đơn bào Leucocytozoon thể Kết cho phép nhận xét: i) Dĩn côn trùng hút máu gà, có gà mắc bệnh đơn bào 15 Leucocytozoon; ii) Sau giải phóng khỏi hồng cầu, đơn bào tiếp tục sinh sản theo hình thức trực phân thể dĩn; sau chúng lên tuyến nước bọt dĩn; iii) Khi dĩn đốt hút máu gà khỏe, động tác co bóp dày tiết nước bọt dĩn mà đơn bào Leucocytozoon truyền vào máu gà khỏe 3.1.3.3 Quy luật hoạt động loài dĩn hút máu * Quy luật hoạt động dĩn năm Bảng 3.12 Quy luật hoạt động dĩn theo tháng năm Địa phƣơng Tháng dĩn năm Thái Nguyên ++ ++ ++ + Sông Công - - - + Phổ Yên - - + ++ ++ +++ ++ + Đồng Hỷ - - + ++ +++ +++ +++ ++ Phú Bình - - + ++ +++ +++ +++ ++ Võ Nhai - - ++ +++ +++ +++ +++ Định Hóa - - + + +++ +++ 10 11 12 + - - - + - - - ++ + - - ++ + - - ++ ++ + - - +++ ++ ++ + - - Bắc Giang Yên Thế - - + ++ +++ +++ +++ + + - - - Tân Yên - - - ++ ++ +++ +++ ++ ++ + - - Sơn Động - - + ++ +++ +++ +++ ++ ++ + - - Lục Ngạn - - + ++ +++ +++ +++ ++ ++ + - - Ghi chú: Theo dõi năm (2013 - 2014) (+++): Hoạt động với cường độ mạnh (++): Hoạt động với cường độ trung bình (+): Hoạt động (-): Khơng hoạt động Kết trình bày bảng 3.12 cho thấy: Trong tháng 11, 12, 1, thời tiết lạnh, khô nên dĩn không hoạt động Sang tháng đến tháng 9, khí hậu ấm áp, mưa phùn, ẩm ướt tạo điều kiện thuận lợi cho dĩn sinh trưởng phát triển, vào 16 khoảng thời gian dĩn hoạt động mạnh hơn, đặc biệt từ tháng - tháng Ngồi ra, tình trạng vệ sinh thú y góp phần làm cho số lượng dĩn tăng lên hoạt động hút máu dĩn diễn mạnh * Quy luật hoạt động dĩn ngày Bảng 3.13 Quy luật hoạt động ngày loài dĩn Thời điểm dĩn hoạt động (giờ) - 11 11 - 13 13 - 16 + ++ + Tháng theo dõi Tháng 6–8 - Tháng + + ++ ++ + Tháng ++ +++ +++ +++ ++ Tháng ++ +++ +++ +++ ++ Tháng ++ +++ +++ +++ ++ Tháng ++ +++ +++ +++ ++ Tháng + + ++ + + Tháng 10 - + ++ + - 16 - 18 - Ghi chú: Theo dõi năm (2013 - 2014) (+++): Hoạt động với cường độ mạnh (++): Hoạt động với cường độ trung bình (+): Hoạt động (-): Khơng hoạt động Kết bảng 3.13 cho thấy: Trong tháng 5, 6, 8, dĩn hoạt động mạnh từ - 16 ngày, khoảng thời gian ngày có cường độ ánh sáng mạnh; từ - sáng 16 - 18 chiều khoảng thời gian có cường độ ánh sáng yếu nên mức độ hoạt động dĩn giảm Các tháng 3, 4, 10 nhiệt độ thấp hơn, có nhiều ngày thời tiết lạnh khô, cường độ ánh sáng yếu thấy số lượng mức độ hoạt động dĩn giảm 17 3.2 Nghiên cứu bệnh đơn bào Leucocytozoon gà Thái Nguyên Bắc Giang 3.2.1 Xác định loài đơn bào Leucocytozoon gây bệnh cho gà Thái Nguyên Bắc Giang Đã định danh 03 loài đơn bào thuộc giống Leucocytozoon gây bệnh cho gà tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang, L caulleryi, L sabrazesi L smithi Loài L caulleryi phân bố rộng rãi phổ biến, xuất 100% số địa phương nghiên cứu Loài L sabrazesi xuất 40% số địa phương nghiên cứu loài L smithi xuất 30% số địa phương nghiên cứu Bảng 3.14 Các loài đơn bào Leucocytozoon gây bệnh cho gà Thái Nguyên Bắc Giang Tỉnh Thái Nguyên (3 loài) Bắc Giang (3 loài) Huyện, thị, thành TX Phổ Yên H Đồng Hỷ Loài Leucocytozoon L caulleryi L smithi L sabrazeis + + - Số loài phát 1 H Phú Bình H Định Hóa H Võ Nhai TP Sông Công H Tân Yên + + + + + + + - + + - 2 1 H Yên Thế H Lục Ngạn H Sơn Động + + + + + + - Tần suất xuất địa phƣơng (%) 10/10 = 100 4/10 = 40,00 3/10 = 30,00 3.2.2 Triệu chứng gà mắc bệnh đơn bào Leucocytozoon Bảng 3.15 cho thấy: 619 gà nhiễm đơn bào Leucocytozoon có 184 gà có triệu chứng lâm sàng, chiếm tỷ lệ 29,73% Các triệu chứng chủ yếu thường thấy gà mắc bệnh đơn bào Leucocytozoon gây là: thiếu máu, mào tích nhợt nhạt, ủ rũ, ăn, gày yếu, ỉa chảy phân màu xanh 18 Bảng 3.15: Tỷ lệ triệu chứng lâm sàng gà Số gà nhiễm (con) 619 mắc bệnh đơn bào Leucocytozoon Kết theo dõi Số gà có Tỷ lệ triệu chứng Số gà (%) Biểu lâm sàng chủ yếu (con) (con) Mào, tích nhợt nhạt 184 Gày yếu 119 Ủ rũ, vận động chậm chạp 151 184 29,73 Kém ăn 129 Ỉa chảy, phân màu xanh 116 Khó thở 69 Có triệu chứng thần kinh 14 Tỷ lệ (%) 100 64,67 82,07 70,11 63,04 37,50 7,61 3.2.3 Nghiên cứu số tiêu huyết học gà mắc bệnh Leucocytozoon so với gà khỏe 3.2.3.1 Sự thay đổi số tiêu huyết học gà bị bệnh đơn bào Leucocytozoon Hình 3.10 Biểu đồ thay đổi số tiêu huyết học gà bị bệnh Leucocytozoon so với gà khỏe Ghi chú: Số lượng hồng cầu (triệu/ mm3 máu) Thể tích trung bình hồng cầu (fl) Dải phân bố kích thước hồng cầu (%) Số lượng bạch cầu (nghìn/ mm3 máu) Số lượng tiểu cầu (nghìn/ mm3 máu) Hàm lượng huyết sắc tố (g%) Thời gian đông máu (phút) 19 3.2.3.2 Sự thay đổi công thức bạch cầu gà bị bệnh so với gà khỏe Hình 3.11 Biểu đồ thay đổi công thức bạch cầu gà bị bệnh Leucocytozoon so với gà khỏe Từ kết hình 3.10 3.11, chúng tơi có nhận xét rằng: gà bị bệnh đơn bào Leucocytozoon có thay đổi rõ rệt số tiêu huyết học so với gà khỏe Các tiêu huyết học gương phản ánh tình trạng sức khỏe thể Sự thay đổi chứng tỏ tình trạng bệnh lý đơn bào ký sinh máu gây cho gà rõ rệt 3.2.4 Tổn thương đại thể đơn bào Leucocytozoon gây gà Bảng 3.18: Tổn thƣơng đại thể gà bị bệnh đơn bào Leucocytozoon Số gà mổ Số gà có Tỷ lệ khám bệnh tích (%) (con) (con) 184 116 63,04 Kết theo dõi Số gà Tỷ lệ Bệnh tích đại thể chủ yếu (con) (%) Cơ ngực, đùi xuất huyết 89 76,72 Gan xuất huyết 64 55,17 Gan sưng, mềm nhũn, dễ vỡ 72 62,07 Máu lỗng, khó đơng 116 100 Thận sưng xuất huyết 63 54,31 Lách sưng xuất huyết 49 42,24 Tụy xuất huyết 21 18,10 Phổi xuất huyết 33 28,45 Niêm mạc ruột xuất huyết 16 13,79 Chất chứa dọc đường tiêu hóa có màu xanh 116 100 20 Mổ khám 184 gà bị bệnh Leucocytozoon, có 116 gà thấy có tổn thương, chiếm 63,04% Bệnh tích chủ yếu tượng máu lỗng khó đơng, thận sưng xuất huyết, đùi ngực xuất huyết, lách sưng xuất huyết, gan xuất huyết 3.2.5 Tổn thương vi thể đơn bào Leucocytozoon gây gà 3.2.5.2 Tổn thương vi thể đơn bào Leucocytozoon gây quan nội tạng gà Bảng 3.21: Tổn thƣơng vi thể quan nội tạng gà Leucocytozoon gây Kết theo dõi Số tiêu Nguồn gốc có Số tiêu Tỷ lệ tiêu Tổn thƣơng vi thể chủ yếu bệnh tích % - Mơ tim xuất huyết 12 100 Tim 12 - Tế bào viêm xâm nhập 75,00 - Mơ gan thối hóa 13 86,67 Gan 15 - Mô gan xuất huyết 15 100 - Các xoang lách giãn rộng, chứa 11 73,33 đầy tế bào máu Lách 15 - Mô lách xuất huyết, thối hóa 14 93,33 - Mơ thận xuất huyết 15 100 Thận 15 - Ống thận giãn rộng 53,33 - Mô phổi xuất huyết 10 90,91 Phổi 11 - Phế quản phổi xuất huyết 54,55 Như vậy, hầu hết quan nội tạng gà bệnh bị tổn thương đơn bào Leucocytozoon gây 3.3 Nghiên cứu biện pháp phòng trị bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà 3.3.1 Biện pháp điều trị bệnh 3.3.1.1 Thử nghiệm phác đồ điều trị Leucocytozoonosis gà phịng thí nghiệm Tiến hành điều trị thử nghiệm cho 15 gà nhiễm đơn bào Leucocytozoon với cường độ nhiễm trung bình 9,73 - 10,07 (% hồng 21 cầu có đơn bào) Sau 10 ngày dùng thuốc, kiểm tra lại máu 15 gà thấy 14/15 gà khơng cịn đơn bào Leucocytozoon hồng cầu Như vậy, hiệu lực điều trị triệt để phác đồ gà phịng thí nghiệm đạt từ 80 - 100% 3.3.1.2 Hiệu lực độ an toàn phác đồ điều trị bệnh Leucocytozoon cho gà thực địa Kết thử nghiệm gà thực địa cho thấy: phác đồ sử dụng điều trị bệnh cho gà Hiệu lực điều trị bệnh đạt từ 93,33 – 96,67% Trong đó, phác đồ với Daimentol soda (2 gam/ lít nước) cho hiệu lực điều trị So với kết điều trị phịng trí nghiệm kết điều trị thực địa thấp 3.3.2 Thử nghiệm đề xuất biện pháp phòng trị tổng hợp bệnh Leucocytozoon cho gà 3.3.2.3 Tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào Leucocytozoon gà sau tháng thí nghiệm Kết sau tháng thí nghiệm, tỷ lệ nhiễm đơn bào Leucocytozoon lô đối chứng cao rõ rệt so với lơ thí nghiệm 12,5% (P < 0,01) Như vậy, việc áp dụng biện pháp phòng trừ tổng hợp tháng làm giảm rõ rệt tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào Leucocytozoon gà thí nghiệm so với đối chứng 3.3.2.4 Khối lượng gà lơ thí nghiệm đối chứng sau 1, tháng thí nghiệm Việc áp dụng biện pháp phịng trừ tổng hợp bệnh đơn bào Leucocytozoon làm giảm tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào, làm tăng khối lượng gà thí nghiệm so với đối chứng, từ góp phần làm tăng suất chăn ni gà 22 Bảng 3.30 Khối lƣợng gà thời điểm thí nghiệm Số Khối lƣợng gà ( X  m ) gam X lƣợng tháng tuổi tháng tuổi gà/ lơ ngày tuổi tháng tuổi Thí nghiệm 100 34,16  0,18 529,90  4,46 1075,3  10,60 1932,30  20,40 Lô Đối chứng 100 P - Thí nghiệm/ Đối chứng 34,36  0,14 510,10  7,17 1021,10  13,70 1815,20  26,90 P > 0,05 P < 0,05 P < 0,01 P < 0,01 99,42% 103,88% 105,31% 106,45% Ghi chú: Ở thời điểm tháng thí nghiệm lơ TN có 99 gà, có ĐC có 97 gà 3.4 Đề xuất biện pháp phịng bệnh Leucocytozoon cho gà 3.4.1 Đề xuất biện pháp phòng Diệt đơn bào Leucocytozoon thể gà Diệt ký chủ trung gian truyền bệnh Vệ sinh chuồng trại vườn chăn thả gà Thực tốt nguyên tắc “cùng vào, ra”, để trống chuồng sau đợt xuất bán gà, tiến hành vệ sinh, sát trùng tiêu độc cẩn thận trước nhập đàn gà Tăng cường chăm sóc, ni dưỡng đàn gà 3.4.2 Khuyến cáo áp dụng biện pháp phòng chống bệnh đơn bào Leucocytozoon Chúng phổ biến biện pháp phòng chống tổng hợp bệnh đơn bào đường máu cho gà huyện Phú Bình, tỉnh Thái Nguyên huyện Yên Thế, tỉnh Bắc Giang Qua điều tra, chúng tơi thấy việc ứng dụng quy trình thu kết khả quan: số gà mắc bệnh Leucocytozoon số gà chết bệnh năm 2015 giảm rõ rệt, từ góp phần tăng suất chăn nuôi gà hai huyện 23 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Về đặc điểm dịch tễ Thực trạng phòng chống bệnh ký sinh trùng nói chung bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà nói riêng địa phương thuộc tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang chưa tốt Tỷ lệ nhiễm đơn bào Leucocytozoon gà tự nhiên tỉnh Thái Nguyên 20,55%, có 20,68% gà nhiễm nặng, tỉnh Bắc Giang 20,80%, có 14,90% gà nhiễm cường độ nặng Tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào Leucocytozoon tăng dần từ vùng đồng lên trung du miền núi (10,14%, 19,01% 29,50%) Tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon gà nuôi mùa Hè mùa Xuân cao nặng so với nuôi mùa Thu mùa Đông (27,92% 22,14% so với 18,44% 10,22%) Gà nuôi thả vườn có lưới quây có tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon thấp so với gà nuôi thả vườn khơng có lưới qy (18,85% so với 21,05%) Tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào Leucocytozoon tăng dần theo tuổi gà đạt cao gà tháng tuổi (27,43%) Gà nuôi điều kiện VSTY tốt có tỷ lệ cường độ nhiễm Leucocytozoon thấp nhẹ nhiều so với gà nuôi điều kiện VSTY Tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào Leucocytozoon gà nuôi mật độ - gà/ m2 cao so với gà nuôi mật độ - gà/ m2 1- gà/ m2 điều kiện Tính biệt không ảnh hưởng đến tỷ lệ nhiễm Leucocytozoon gà Chúng xác định ba loài dĩn C arakawa, C odibilis S slossonae ký chủ trung gian mang, truyền đơn bào Leucocytozoon cho gà tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang Có 12,80% số cá thể dĩn thu thập Thái Nguyên Bắc Giang mang đơn bào Leucocytozoon thể 24 Dĩn hút máu hoạt động mạnh từ tháng - tháng năm từ đến 16 ngày Bệnh đơn bào Leucocytozoon gây gà Định danh loài đơn bào ký sinh gây bệnh cho gà Thái Nguyên Bắc Giang L caulleryi, L sabrazesi L smithi Sốt cao, thiếu máu, mào tích nhợt nhạt, gầy yếu, ủ rũ, ăn, ỉa chảy, phân màu xanh triệu chứng chủ yếu gà bị bệnh Leucocytozoon Số lượng hồng cầu, số lượng tiểu cầu hàm lượng huyết sắc tố giảm; số lượng bạch cầu, đặc biệt bạch cầu toan bạch cầu đa nhân trung tính gà mắc bệnh Leucocytozoon tăng rõ rệt so với gà khỏe Gà bị bệnh đơn bào Leucocytozoon có bệnh tích xuất huyết gan, lách, thận, phổi, tim, tụy, ruột, đùi ngực; gan, thận lách sưng, xuất huyết Các quan nội tạng gà bệnh có tổn thương vi thể rõ rệt: mô tim, mô phổi phế quản phổi xuất huyết, xoang lách giãn rộng, mơ gan thối hóa xuất huyết, mơ thận xuất huyết Biện pháp phòng trị bệnh Leucocytozoon cho gà Hiệu lực điều trị bệnh Leucocytozoon phác đồ đạt từ 85 100% Trong đó, phác đồ gồm daimentol soda (2 gam/ lít nước) kết hợp với thuốc giải độc gan - thận - lách TA doxyvit - thái cho hiệu lực điều trị cao nhất, đồng thời an toàn với gà Việc áp dụng biện pháp phòng trị làm giảm rõ rệt tỷ lệ cường độ nhiễm đơn bào Leucocytozoon đồng thời làm tăng khối lượng gà thí nghiệm so với đối chứng sau tháng thí nghiệm Đề nghị Các địa phương sử dụng phác đồ điều trị bệnh Leucocytozoon cho đàn gà mắc bệnh có nguy mắc bệnh Leucocytozoon Áp dụng rộng rãi biện pháp phòng chống tổng hợp bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà tỉnh Thái Nguyên, Bắc Giang tỉnh khác 25 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Nguyễn Thị Kim Lan, Dƣơng Thị Hồng Duyên (2011), “Nghiên cứu bệnh đơn bào Leucocytozoon gà số địa phương tỉnh Thái Nguyên”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Chăn nuôi, số (149), tr 35 - 39 Nguyễn Thị Kim Lan, Dƣơng Thị Hồng Duyên (2012), “Nghiên cứu số yếu tố liên quan tác động gây bệnh Leucocytozoon thể gà”, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nông thôn, chuyên đề Khoa học công nghệ Nông lâm nghiệp miền núi, tr 124 - 128 N T K Lan, M A Khoa and D T H Duyen (2012), “Studying on Leucocytozoonosis in chickens at Thai Nguyen Province, Viet Nam”, Proceedings of the 15th AAAP Animal Science Congress, pp 1827 - 1837 Dƣơng Thị Hồng Duyên, Nguyễn Thị Kim Lan, Lê Văn Năm, Nguyễn Đình Hải (2015), “Tình hình nhiễm đơn bào đường máu Leucocytozoon spp gà tỉnh Thái Nguyên Bắc Giang”, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nơng thôn, số 273, tr 88 - 92 ... Leucocytozoon spp gây gà nuôi tỉnh Thái Nguyên, Bắc Giang biện pháp phòng trị? ?? * Mục tiêu đề tài - Xác định loài Leucocytozoon gây bệnh, đặc điểm dịch tễ bệnh học bệnh đơn bào Leucocytozoon gây đàn gà thả... tạng gà bệnh bị tổn thương đơn bào Leucocytozoon gây 3.3 Nghiên cứu biện pháp phòng trị bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà 3.3.1 Biện pháp điều trị bệnh 3.3.1.1 Thử nghiệm phác đồ điều trị Leucocytozoonosis... điều trị bệnh Leucocytozoon cho đàn gà mắc bệnh có nguy mắc bệnh Leucocytozoon Áp dụng rộng rãi biện pháp phòng chống tổng hợp bệnh đơn bào Leucocytozoon cho gà tỉnh Thái Nguyên, Bắc Giang tỉnh