Đề tài: KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Bệnh sán đơn chủ (Dactylogyrus sp.) ấu trùng sán song chủ (Centrocestus formosanus) gây loại cá nước đặc điểm mô bệnh học Sinh viên thực tập : Lớp : Người hướng dẫn : I Đặt Vấn Đề Nội Dung Phương pháp II Nghiên Cứu III Kết Quả Thảo Luận IV Kết Luận Đề Xuất I ĐẶT VẤN ĐỀ Ngành NTTS nước ta có bước phát triển tốt, chiếm vị trí quan trong kinh tế nước nhà Bệnh thủy sản ngày có nhiều diễn biến phức tạp bệnh ký sinh trùng gây số Phương pháp mô bệnh học có vai trò quan trọng việc tìm hiểu biến đổi mô chủ yếu Góp phần chẩn đoán bệnh “Bệnh sán đơn chủ (Dactylogyrus sp.) ấu trùng sán song chủ (Centrocestus formosanus) gây loại cá nước đặc điểm mô bệnh học” II NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu Thu thập mẫu Hà Nội, Bắc Ninh, Hải Dương … Kiểm tra TLN, CĐN ký sinh trùng Làm tiêu mô cá bị nhiễm KST Quan sát mô tả biến đổi mô bệnh học chủ yếu KST gây 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp thu mẫu kiểm tra KST Phương pháp thu mẫu cá, kiểm tra ký sinh trùng Dogiel (1961), Hà Ký Bùi Quang Tề (2007) 2.3.2 Phương pháp kiểm tra ấu trùng sán ký sinh trùng Nhận dạng cá, cân, đo ghi số liệu loài cá kiểm tra Dùng kéo cắt mang cá, đặt mang cá nên phiến kính nhỏ giọt nước lên Đặt lam kính lên soi KHV Đánh giá CĐN, TLN KST cá Tổng số cá bị nhiễm 2.3.3 Phương pháp đúc mẫu cắt mẫu mô bệnh học Quá trình làm mô tiêu : 2.3.3.1 Thu Mẫu Các cá thể chọn để thu mẫu phải sống Thu mẫu đối chứng: Chọn mẫu mô cá thể khoẻ mạnh, bình thường Đưa hoá chất dụng cụ đến bờ ao để cố định 2.3.3.2 Cố định bệnh phẩm Bệnh phẩm cố định buffer formaline Hình 1: Cố định mẫu bênh phẩm Buffer formaline 2.3.3.3 Xử lý mẫu Bảng 1: Các công đoạn trình xử lý mẫu Công Đoạn Hoá Chất Thời Gian (h) Khử Formaline Nước 24 Cồn I 900 Cồn II 900 Cồn III 1000 Cồn IV 1000 12 Xylen I Xylen II Xylen III 12 Parafin I (560C) Parafin II (560C) Parafin III (560C) 12 Khử Nước Khử Cồn Khử Xylen 3.3.2 Bệnh tích vi thể Tế bào tăng sinh ( H&E 10X) Tế bào tăng sinh ( H&E 40X) Hình 14: Tế bào biểu mô mang tăng sinh tơ mang (mũi tên) 3.3.2 Bệnh tích vi thể A: Tế bào mang cá sưng to đứt gãy B: Tế bào mang cá bình thường, không phân biệt thành phần tế thành phần tế bào rõ ràng bào, Hình 15: Các tế bào sưng to không phân biệt loại tế bào (H&E 40X) 3.3.2 Bệnh tích vi thể b Hiện tượng xuất u nang biến dạng mô sụn Hình 16: Biểu mô sụn mang biến dạng Hình 17: AT sán song chủ hình tác động AT SLSC (theo hướng thành khối u nang, khối viêm bắt màu mũi tên) (H&E 40X) Eosin (H&E 40X) 3.3.2 Bệnh tích vi thể Hình 18: AT sán song chủ làm biểu mô mang tăng sinh (u nang), xuất huyết, mòn cụt sợi mang sơ cấp (H&E, 10X) 1: U nang AT sán song chủ , 2: Mòn cụt sợi mang sơ cấp, 3: Xuất huyết sợi mang thứ cấp 3.3.2 Bệnh tích vi thể Hình 19: U nang AT sán song chủ khối viêm bên (H&E, 10X) 3.3.2 Bệnh tích vi thể Hình 20: Khối u nang AT Hình 21: U nang AT sán SLSC khiến tăng sinh biến đổi song chủ mang cá trắm (H&E, mô sụn (H&E, 40X) 10X) 1: Cấu trúc tế bào sụn bình 1: Đứt gãy tia mang, 2: U nang với thường, 2: U nang phát triển gây khối viêm bắt màu Eosin, 3: Mòn biến dạng sụn cụt biến dạng tia mang 3.3.2 Bệnh tích vi thể c Hiện tượng xuất huyết mòn cụt mang: Hình 22: Hiện tượng xuất huyết mang cá trắm cỏ (H&E, 40X) 1: AT sán ký sinh vào sợi mang thứ cấp, 2: Xuất huyết sợi mang cá sơ cấp 3.3.2 Bệnh tích vi thể Hình 23: AT ký sinh gây xuất Hình 24: Sán đơn chủ huyết phá vỡ sợi mang thứ cấp Dactylogyrus sp bám tơ (H&E, 40X) mang (1) xuất huyết tơ 1: Mòn cụt sợi mang sơ cấp, 2: Xuất mang (2) (H&E, 40X) huyết phá vỡ tia mang 3.4 Thảo luận  C formosanus gây biến đổi bệnh lý mang chủ yếu, triệu chứng rõ rang Dactylogyrus sp biểu rõ ràng  Các triệu chứng biến đổi sán song chủ C formosanus gây nên tăng sinh biểu mô, hình thành bọc u nang, gây biến dạng tế bào sụn, xuất huyết, đứt gãy cấu trúc mang Các biến đổi sán đơn chủ Dactylogyrus sp xuất huyết tăng sinh nhẹ 3.4 Thảo luận  Kết nghiên cứu Bychowsky (1957); Cosgrove (1975); Rohde (1984a 1984b) sán đơn chủ Dactylogyrus sp cho thấy Dactylogyrus sp gây biến đổi mô bệnh học Dactylogyrus sp kích thước bé tập tính hay di động nên gây kích thích  Kết từ nghiên cứu Andrew (2013) cs cho thấy biến đổi AT sán song chủ C formosanus gây triệu chứng mô rõ ràng tăng sinh, xuất u nang, xuất hguyết PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Trong trình theo dõi kiểm tra mẫu cá thu ao thuộc Hà Nội số tỉnh lân cận đến số kết luận sau: 1.Hai loài cá trắm chép TLN CĐN cao.TLN cao ghi nhận 66,66% CĐN cao 6,42 AT/Vi trường Tổng số mẫu cá trắm tiến hành phân tích 35 mẫu, có 27 mẫu có biểu nhiễm KST, đọc kết cho thấy: 4.1 Kết luận  74,28% số mẫu mang xuất hiện tượng xuất huyết  77,14% số mẫu mang xuất hiện tượng sán song chủ ký sinh hình thành khối u nang  66,66% sợi mang bị mòn cụt, đứt gãy tia mang  74,28% số mẫu xuất hiện tượng tăng sinh tế bào biểu mô, tế bào sưng to 4.1 Kết luận  Kèm theo triệu chứng xuất khối viêm  Biểu AT sán C formanus rễ ràng nhận biết xuất khối u nang Trong biểu mô Dactylogyrus sp khó nhận biết triệu chứng biểu không bật 4.2 Đề Nghị  Nhiều trường hợp nhiễm bệnh tác nhân khác có số triệu chứng tương tự Vì vậy, cần nghiên cứu chuyên sâu  Điều kiện phòng thí nghiệm chuyên biệt môn chưa có phòng thí nghiệm chuyên sâu vấn đề mô Kính mong nhà trường, môn tạo điều kiện tốt để nghiên cứu sau chi tiết chuyên sâu Thank You ! LOGO [...]... Thời gian 5-10 phút 5-10 phút 15 s 15 s 15s 15s 2 phút Thao tác nhuộm tiêu bản PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết quả thu mẫu và kiểm tra KST trên cá  Mỗi khi cá bị nhiễm KST các hộ nuôi thường không có cách nhận biết sớm chỉ đến khi cá bị triệu chứng nặng như cá yếu, kênh mang cá lờ đờ các hộ nuôi mới nhận biết được  Bệnh do KST sán tập trung chủ yếu giai đoạn cá hương, cá giống Cá với kích thước... 3.4 Thảo luận  C formosanus gây biến đổi bệnh lý ở mang là chủ yếu, triệu chứng rõ rang Dactylogyrus sp những biểu hiện ít rõ ràng hơn  Các triệu chứng biến đổi do sán lá song chủ C formosanus gây nên như tăng sinh biểu mô, hình thành bọc u nang, gây biến dạng tế bào sụn, xuất huyết, đứt gãy cấu trúc mang Các biến đổi do sán lá đơn chủ Dactylogyrus sp là xuất huyết và tăng sinh nhẹ 3.4 Thảo luận 