B GIÁO D C VÀ ÀO T O B YT VI N S T RÉT - KÝ SINH TRÙNG - CÔN TRÙNG TRUNG -* NG CÔNG TRÌNH Ã C HOÀN THÀNH T I VI N S T RÉT-KÝ SINH TRÙNG-CÔN TRÙNG TRUNG NG Ng TH C TR NG NHI M N M PH I B NH NHÂN HIV/AIDS, LAO PH I VÀ HI U QU I U TR C HI U T I CÁC B NH VI N T NH NGH AN (2013-2014) Chuyên ngành: Ký sinh trùng Côn trùng y h c Mã s : 62.72.01.16 TÓM T T LU N ÁN TI N S Y H C ih ng d n khoa h c: TS PGS.TS Ph n bi n 1: Ph n bi n 2: Ph n bi n 3: Lu n án s c b o v tr c H i ng ch m lu n án c p Vi n t i Vi n S t rét - Ký sinh trùng - Côn trùng TW vào h i gi , ngày .tháng .n m Có th tìm hi u lu n v n t i: Th vi n Qu c gia Th vi n Vi n S t rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung HÀ N I, 2015 ng DANH M C CÁC T AIDS VI T T T Acquired Immune Deficiency Syndrome (H i ch ng suy gi m mi n d ch m c ph i) BN B nh nhân CS C ng s HIV Human Immunodeficiency Virus (vi rút gây suy gi m mi n d ch ng i) NXB Nhà xu t b n PCR Polymerase Chairn Reaction (Ph n ng chu i Polymerase) PV Preventive value (hi u qu can thi p) TL T l TLM T l m c Tr Trang TT Tình tr ng XN Xét nghi m YTNC Y u t nguy c BV B nh vi n TV N B nh n m ph i ch y u loài Aspergillus spp Candida spp B nh ph bi n n c phát tri n nh : ông Nam Á, Châu Phi n c có i u ki n v sinh kém, môi tr ng s ng ch t ch i, m t, t l m c t -10%, có n i > 10% dân s B nh th ng g p ng i có h i ch ng suy gi m mi n d ch s d ng thu c c ch mi n d ch dài ngày, ng i nhi m HIV/AIDS v y vi c phòng b nh i u tr h t s c khó kh n ph c t p T i Ngh An, cho n ch a có m t công trình nghiên c u v b nh n m ph i, nh ng y u t nguy c (YTNC) m c b nh n m ph i r t cao t i c ng ng V i nh ng lý tài: Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS, lao ph i hi u qu i u tr c hi u t i b nh vi n t nh Ngh An (2013-2014), ã c th c hi n nh m m c tiêu nghiên c u sau: Xác nh th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS t i B nh vi n H u ngh a khoa, b nh nhân lao ph i t i B nh vi n Lao Các b nh ph i t nh Ngh An (2013 -2014) ánh giá hi u qu i u tr c hi u nhi m n m ph i b ng Fluconazol Amphotericin B tài g m 112 trang: t v n trang; T ng quan tài li u 31 trang; i t ng ph ng pháp nghiên c u 21 trang; K t qu nghiên c u 30 trang; Bàn lu n 26 trang; K t lu n trang; Ki n ngh trang G m: 20 b ng s li u 21 hình, 12 ph l c CH NG I: T NG QUAN TÀI LI U 1.1 Khái ni m v n m y h c N m (fungi) nh ng sinh v t có nhân thành t bào th c s , d d ng (heterotrophic), sinh s n b ng bào t T bào n m di p l c t , kh n ng di chuy n có thành vách t bào N m phân b r ng rãi t nhiên, ph n l n s ng ho i sinh t, s có kh n ng ký sinh gây b nh cho ng i ng v t N m y h c (Medical mycology) nghiên c u n m ký sinh ng i, nghiên c u v sinh b nh h c Hi n nay, nhà khoa h c n c u th ng nh t phân chia n m thành hai nhóm là: Nhóm 1: N m da n m ngo i biên; Nhóm 2: N m n i t ng nh n m máu, n m ph i, n m d ch não t y Ngoài có m t s cách phân lo i b nh n m b ng t n th ng lâm sàng v trí ký sinh, nh : N m da niêm m c, n m tóc, n m ph i, n m sinh d c, n m tiêu hóa, n m máu 1.2 S l c l ch s nghiên c u b nh n m ph i 1.2.1 Trên th gi i B nh n m ã c bi t n t lâu, t th i Hypocrat ã mô t tri u ch ng b nh n m da gây nên, hi u bi t v sinh, b nh h c v n m h t s c s khai Cu i th k 20, u th k 21, v i s phát tri n v t b c v khoa h c k thu t, nhà khoa h c th gi i ã nghiên c u v nhi u l nh v c chuyên sâu v n m nh : K thu t mi n d ch, k thu t PCR, mi n d ch h c ã b sung kho tàng ki n th c h t s c sâu s c v c n nguyên gây b nh n m ph i Argunov D.A CS (2015), ã tìm c ch nhi m n m Aspergillus spp Barrs V.R CS (2014), nghiên c u phát hi n n m Aspergillus spp b ng k thu t mi n d ch kháng nguyên kháng th Barrs V.R CS (2014), Dubey CS (2015), phát hi n IL-1 IL-1 có kh n ng ng n ch n xâm nh p c a n m Aspergillus spp i v i t bào hô h p Wei X CS (2015), ng i s d ng thu c c ch mi n d ch dài ngày ã làm t ng kh n ng nhi m n m Aspergillus fumigatus ng hô h p h n nh ng ng i không s d ng Ozkan S., Cotts R.H.(2015), ã phát hi n c ch mi n d ch ch ng l i Aspergillus fumigatus xâm nh p gây b nh ng i, S.H Mirhendi n m 2001, ã s d ng k thu t PCR v i gen m i ITS1 ITS4, phát hi n c loài n m Candida spp Margit Hummel CS (2004), ã s d ng k thu t PCR l ng ch n oán A fumigatus K t qu nghiên c u c a ông ã m ng cho nhà khoa h c sau s d ng ph ng pháp PCR l ng phát hi n ADN c a A fumigatus nh : Skladny CS (1999), Becker CS (2000), Loeffler CS (2002) Hi n nay, k t qu c a nhi u công trình nghiên c u nhà khoa h c ã cho th y c n nguyên ch y u gây n m ph i Aspergillus fumigatus Candida albicans, b nh nhân HIV/AIDS có th nhi m m t s loài khác 1.2.2 T i Vi t Nam T i Vi t Nam, công trình nghiên c u v n m ph i m i ch xu t hi n t u th k 20 b i nhà khoa h c Pháp m t s công trình c a ng i Vi t Vi c nghiên c u nhi u h n ch n c ta, ngày k thu t cao ã c ng d ng ngày nhi u ch n oán nhi m n m ng i b nh c ng nh s n ph m nông nghi p, ch ph m ông d c nh : K thu t PCR gi i trình t gen nh nghiên c u c a Thi n v i nghiên c u mô hình hóa v i lo i n m m c, Cao Bá L i, Nguy n Kh c L c Ng c Ánh ã s d ng k thu t PCR v i gen m i ITS1, ITS4 v i Enzyme phân c t h n ch MSP I gi i trình t gen nh loài n m ng sinh s n, n m máu, n m d ch não t y 1.3 D ch t h c b nh n m ph i Tác nhân gây b nh n m ph i th ng g p Aspergillus spp, Histoplasma capsulatum, Candida spp, Cryptococcus spp nh ng ph bi n nh t b nh n m ph i A fumigatus, A niger C albicans Hình th c lây b nh có th ti p xúc tr c ti p, có th theo ng hô h p hít th không khí có bào t n m N m Aspergilus spp ch y u qua ng hô h p hít th không khí có bào t n m Bình th ng không khí có nhi u bào t n m nh t khu v c ch n nuôi chim, v t, gà Kh i c m th ng i, th ng g p ng i nhi m HIV/AIDS, tháo ng, sau i u tr lao ph i, ng i s d ng Corticoid kéo dài, ng i có c u trúc ng hô h p b d d ng b t th ng, ng i s ng môi tr ng m t ch t ch i m t v sinh, thi u ánh sáng m t tr i 1.4 Ch n oán nhi m n m ph i - D a vào tri u ch ng lâm sàng nh : Ho th ng ho máu khan, ho máu t i, s t, khó th , t c ng c Ti n s có ti p xúc v i y u t nguy c nh ch n nuôi gà v t, gia c m - Xét nghi m nuôi c y n m môi tr ng Saboraud chon l c, b nh ph m d ch r a ph qu n, tìm th y khu n l c n m ây tiêu chu n vàng ch n oán V i u n m ph i k t h p v i ch p Xquang có hình nh kh i u hình l c l c i n hình, không xâm l n 1.5 i u tr phòng b nh n m ph i 1.5.1 i u tr V i c i m c a t bào n m có thành vách ng n cách v i nhân n m loài d d ng v y thu c i u tr r t khó xâm nh p vào bên t bào n m Vi c i u tr ph i theo nguyên t c: M t là: Ch i u tr xác nh rõ nguyên nhân gây b nh; Hai là: i u tr tri t , ti t c n; Ba là: K t h p i u tr n i khoa ngo i khoa n u c n thi t i v i t t c b nh nhân n m ph i, tr c i u tr c n c n c vào: K t qu kháng sinh ch n lo i thu c có tác d ng t t nh t; Th tr ng c a ng i b nh, h u h t lo i thu c kháng n m u r t c v i gan th n, n u th tr ng ng i b nh g y y u không th ch n Amphotericin B thu c r t c hay có tác d ng ph 1.5.2 Phòng b nh n m ph i Vi c phòng b nh n m ph i c n tuân th nguyên t c sau: - C t t m t m t xích d ch t h c c a b nh: i u tr tri t , ti t c n ca b nh n m ph i Tránh l m d ng kháng sinh, l m d ng Corticoid Kh c ph c y u t b t l i không cho n m phát tri n - Ngoài bi n pháp v y t n u trên, c n ph i h p ng b bi n pháp v xã h i h c nh : Giáo d c s c kh e, cung c p ki n th c c n thi t c b n v b nh n m ph i k c ph ng pháp phòng b nh ch ng c a ng i dân Nâng cao n ng l c phát hi n b nh cho c s y t Nghiên c u sâu v lo i thu c kháng n m có hi u qu hi u l c i u tr cao, c cho ng i s d ng CH NG II: IT NG VÀ PH NG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 i t ng, a i m, th i gian nghiên c u 2.1.1 i t ng nghiên c u: B nh nhân HIV/AIDS ang i u tr t i B nh vi n H u ngh a khoa t nh Ngh An B nh nhân i u tr lao ph i, xét nghi m BK (-) ang i u tr t i B nh vi n Lao b nh ph i t nh Ngh An B nh nhân có k t qu nuôi c y n m môi tr ng Sabouraud (+) Các m u b nh ph m n m ph i (+) b ng ph ng pháp nuôi c y n m môi tr ng Sabouraud 2.1.1.1 Tiêu chu n ch n m u - Tiêu chu n ch n m u b nh nhân HIV/AIDS: B nh nhân có tên danh sách i u tr HIV/AIDS t i B nh vi n H u ngh a khoa t nh Ngh An Có y tiêu chu n ch n oán c a m t b nh nhân HIV/AIDS , c th : V i b nh nhân nhi m HIV ng i l n c s xét nghi m kháng th kháng HIV: M t ng i c xác nh nhi m HIV có m u huy t d ng tính c ba l n xét nghi m kháng th kháng HIV b ng ba lo i sinh ph m khác v i nguyên lý ph n ng ph ng pháp chu n b kháng nguyên khác (theo quy nh c a B Y t ) Thông th ng nhi m HIV d a vào tiêu chu n ch n oán lâm sàng c n lâm sàng - Tiêu chu n ch n b nh nhân i u tr lao ph i có BK (-) t i B nh vi n Lao b nh ph i t nh Ngh An: B nh nhân có tri u ch ng lâm sàng lao ph i i n hình nh : Ho, s t nh , s t v chi u, g y y u sút cân ã lo i tr c n nguyên nhi m khu n khác nh : Ph c u khu n, viêm ph i mãn tính, viêm ph i thùy Xét nghi m BK (-), hi n ang i u tr b ng phác ch ng lao - Tiêu chu n ch n oán b nh nhân nhi m n m ph i Hi n nay, vi c xét nghi m ch n oán nhi m n m có r t nhi u k thu t nh ng k thu t nuôi c y môi tr ng Sabouraud (+) v n tiêu chu n vàng Vì v y, tài c ng s d ng k thu t M t b nh nhân c ch n oán n m ph i có i u ki n sau: Có y tiêu chu n ch n oán b nh nhân HIV/AIDS, b nh nhân lao ph i có BK (-) Nuôi c y n m môi tr ng Sauboraud ch n l c, v i b nh ph m d ch r a ph qu n mà (+) 2.1.1.3 Tiêu chu n lo i tr : i v i b nh nhân tham gia nghiên c u: B nh nhân không t nguy n tham gia nghiên c u; Ng i m c b nh tâm th n, ng i có c a d ng, b nh lý v tim m ch; Không ch n nh ng b nh nhân y u (HIV/AIDS giai o n cu i tiên l ng x u, không s c kh e n i soi l y d ch r a ph qu n, b nh nhân lao ph i có BK (-) ã suy hô h p tiên l ng x u n tính m ng) không th l y d ch r a ph qu n c; Không ch n nh ng b nh nhân lao ph i mà tr c ó có BK (+) ã c i u tr phác ch ng lao m t th i gian d n n BK (-) - V i m u n m nuôi c y môi tr ng Saboraud: Lo i tr m u n m t p nhi m n m không khí trình v n chuy n, b o qu n m u 2.1.2 a i m nghiên c u - Ch n b nh nhân t i B nh vi n H u ngh a khoa t nh Ngh An, B nh vi n Lao Các b nh ph i t nh Ngh An - Nuôi c y n m: T i Labo vi sinh B nh vi n H u ngh a khoa t nh Ngh An, Labo t tiêu chu n an toàn sinh h c c p II - Th c hi n k thu t PCR gi i trình t gen nh danh loài n m: T i Labo công ngh cao Vi n Công ngh sinh h c, Vi n Hàn lâm Khoa h c Vi t Nam 2.1.3 Th i gian nghiên c u Nghiên c u c th c hi n n m, t 2013 2014 2.2 Ph ng pháp nghiên c u Nghiên c u c thi t k b ng ph ng pháp: Nghiên c u mô t có phân tích nghiên c u th nghi m lâm sàng (th nghi m phác i u tr n m ph i i t ng nhi m n m ph i) 2.2.1 Ph ng pháp nghiên c u mô t có phân tích C m u t i thi u cho i u tra c t ngang m t t l nhi m n m ph i i t ng HIV/AIDS i t ng i u tr lao ph i có BK (-) [7] n= Z /2 p (1 p ) d Trong ó: n: C m u t i thi u; P: T l nhi m n m ph i c tính c a qu n th , ch n p = 0,20 (theo Bùi Th Tám 1999, t l nhi m n m ph i i t ng HIV/AIDS b nh nhân lao có BK (-) dao ng 20,0%); Z1- /2: H s tin c y, ng v i tin c y 95% Z1- /2 = 1,96; d: Sai s t i mong mu n c a p, ch n d = (0,05) 5% V i giá tr ã ch n, c m u tính toán cho m t nhóm i t ng nghiên c u 245, làm tròn 250, g m 250 b nh nhân HIV/AIDS 250 BN lao ph i có BK (-), t ng s 500 b nh nhân cho c hai nhóm i t ng Trong th c t ã th c hi n c 501 m u nghiên c u Cách ch n m u Ch n s b nh nhân có tiêu chu n ch n oán, cho c m u nghiên c u: 250 b nh nhân HIV/AIDS, 250 ng i lao ph i có BK (-) 2.2.2 Ph ng pháp nghiên c u can thi p th nghi m lâm sàng không i ch ng - C m u nghiên c u : Toàn b s b nh nhân m u nghiên c u mô t c t ngang, n u có nhi m n m ph i u c ch n vào m u nghiên c u th nghi m lâm sàng - Phác i u tr n m ph i: + Phác s d ng thu c Fluconazol: Áp d ng cho t t c b nh nhân nhi m n m ph i Li u s d ng Fluconazol, li u 150 mg/24 ngày x 14 ngày Thu c Công ty Standa VN J,V, Co, Utd s n xu t S lô 050213; Ngày s n xu t: 150213; H n s d ng: 150516 B o qu n n i khô ráo, kho ng -24ºC - Phác s d ng thu c Amphotericin B: Áp d ng cho b nh nhân tái nhi m b nh nhân i u tr phác th t b i: Amphotericin B, li u 0,7 mg/kg/24 gi x 14 ngày Thu c Công ty Cipla Ltd, India s n xu t S lô V30030 Ngày s n xu t: 01/2013; H n s d ng: 12/2015 B o qu n n i khô ráo, kho ng -24ºC - V t li u nghiên c u: D ng c khám n i khoa, kính hi n vi, lam kính, la men, máy n i soi l y d ch r a ph qu n, kính hi n vi, t l nh, t m Máy PCR (GeneAmp PCR system 9700 AB Applied Biosystem, M ), máy ly tâm l nh Mikro 22R (Hettech, c), máy soi ch p gel Dolphin Doc (Wealtec, M ), b i n di, ng ng d ch r a ph qu n dung tích 30 ml B kít tách ADN t ng s (QIAGEN, M ), gel agarose, dung d ch TBE 0.5%, dung d ch Enzyme gi i h n MSP I (Fermentas) Dung d ch NaCL hóa ch t c n thi t khác Thu c i u tr Fluconazol, Amphotericin B; H s b nh án c a b nh nhân t i b nh vi n; Labo vi sinh m b o labo an toàn sinh h c c p II 2.3 Các k thu t c s d ng nghiên c u 2.3.1 K thu t khám sàng l c b nh nhân i v i b nh nhân HIV/AIDS, c n c k t qu khám lâm sàng ánh giá tình tr ng nhi m trùng c h i c quan ph t ng B t bu c ph i có k t qu l n xét nghi m máu, nh l ng t bào TCD4 m b o ch c ch n b nh nhân HIV/AIDS, có danh sách i u tr HIV/AIDS b ng ARV i v i b nh nhân lao ph i có BK (-), c n có y tiêu chu n ch n oán lao ph i, nh ng BK (-) ã lo i tr h t nguyên nhân khác gây b nh ph i C n k t h p v i khai thác b nh s 2.3.2 K thu t nuôi c y n m môi tr ng Sabouraud - K thu t l y d ch r a ph qu n; K thu t nuôi c y n m môi tr ng Saboraud; K thu t PCR-RFLP v i gen m i ITS1-ITS4 enzyem phân c t h n ch MSP I gi i trình t gen nh danh loài n m - D ng c : Máy PCR (GeneAmp PCR system 9700 AB Applied Biosystem, M ), máy móc thi t b v t t c n thi t khác C p m i s d ng IT1 ITS4 ã c ch n t ng ng v i t ng loài n m 2.3.3 Ti n hành k thu t PCR Theo quy trình c ak thu t PCR 2.3.4 Gi i trình t x lí s li u S n ph m PCR sau ki m tra c tinh s ch b ng ph ng pháp gel (DNA elution) s d ng b kit AccuPrep Gel Purification Kit (Bioneer, Hàn Qu c) N u m u có b ng DNA s n ph m PCR ti n hành gel m i m t b ng DNA riêng r thu t ng b ng gi i trình t S n ph m PCR sau tinh s ch c gi i trình t tr c ti p, s d ng m i ITS1 Trình t chu i nucleotide c x lý b ng ph n m m chuyên bi t, g m SeqEd1.03, AsemblyLIGNv1.9c h ch ng trình MacVector8.2 (Accelrys Inc) máy tính Macintosh So sánh i chi u x lý s li u chu i thu nh n Ngân hàng gen (Genbank) b ng ch ng trình GENEDOC2.7 Trình t nucleotide vùng ITS c a ch ng n m Candida spp c so sánh thành ph n nucleotide, xác nh loài b ng cách truy c p Ngân hàng gen (BLAST: http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) xem xét m i quan h ph h ngu n g c, s d ng ch ng trình MEGA5.0 ph ng pháp k t n i li n k NJ (Neighbor-JoiningNJ) v i h s tin t ng 1000 bootstrap (Tamura et al., 2011) 2.4 i u tr n m ph i T t c b nh nhân c ch n oán nhi m n m ph i u c i u tr b ng phác phù h p B Y t ban hành c th : Phác s d ng Fluconazol li u 150 mg/24 gi x 14 ngày Phác s d ng Amphotericin B: Áp d ng cho b nh nhân tái nhi m b nh nhân i u tr phác Fluconazol th t b i: 2.5 Các ch s ánh giá 2.5.1 ánh giá tình tr ng nhi m n m ph i - T l nhi m n m ph i chung; T l nhi m nhóm b nh nhân HIV/AIDS, b nh nhân i u tr lao ph i có BK (-); T l nhi m b nh nhân giai o n HIV, giai o n AIDS; T l nhi m theo gi i; Theo nhóm tu i; Theo ngh nghi p; T l nhi m t ng loài n m ph i - Sau ánh giá tình tr ng nhi m n m ph i có phân tích ánh giá s t ng quan gi a y u t nguy c (YTNC) có liên quan v i tình tr ng n m ph i, thông qua l p b ng 2x2 tính toán t su t chênh OR, v i OR = a.d/b.c, OR 2, p < 0,05 s k t h p có ý ngh a th ng kê gi a YTNC nhi m n m ph i và tình tr ng nhi m n m ph i 2.5.2 Các ch s v hi u qu i u tr tình tr ng tái nhi m n m ph i PV% = p1 p2 p1 x 100(%) Trong ó : PV (Preventive value - PV) Hi u qu i u tr ; pt: T l nhi m n m tr c i u tr ; p2: T l nhi m n m sau i u tr 15 ngày - Các ch s ánh giá tình tr ng tái nhi m n m ph i: ánh giá hi u qu i u tr sau s d ng phác 15 ngày, ánh giá tình tr ng tái nhi m n m ph i sau 3, 12 tháng i u tr 2.6 Ph ng pháp x lý phân tích s li u S li u nh l ng thu th p c nh p b ng ph n m m EPIDATA, phân tích b ng ph n m m Stata 8.0 2.7 o c nghiên c u Tuân th nghiêm ng t quy nh nghiên c u y sinh, nh : Nói rõ m c ích nghiên c u cho ng i b nh Ch c nghiên c u ng i t nguy n Gi bí m t v tình tr ng s c kh e c a ng i b nh i u tr tri t cho i t ng tham gia tài c thông qua H i ng Y c c a b nh vi n tri n khai nghiên c u Ch ng 3: K T QU NGHIÊN C U 3.1 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS, b nh nhân lao ph i có BK (-) t i B nh vi n t nh Ngh An (2013 -2014) 3.1.1 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS 88,9% 11,1% 11,1% Có khu n l c Không có khu n l c Hình 3.1 T l m u n m (+) nuôi c y môi tr ng Sabouraud b nh nhân HIV/AIDS Nh n xét: T l m u nuôi c y có k t qu (+) (có khu n l c) 11,1% (t c t l nhi m n m ph i 11,1%) B ng 3.3 T l nhi m n m ph i theo gi i b nh nhân HIV/AID Tình tr ng nhi m n m ph i Gi i S m u nuôi c y S m u (+) T l (%) Nam 187 20 10,7 N 64 08 12.5 Chung 251 28 11,1 Giá tr p > 0,05 Nh n xét: Không có khác bi t v t l nhi m n m ph i gi a nam n b nh nhân HIV/AIDS (10,7% so v i 12,5%, p > 0,05) - T l nhi m theo ngh nghi p B ng 3.4 T l nhi m n m ph i theo ngh nghi p b nh nhân HIV/AIDS Nh n xét: S n ph m PCR thu c t p trung vào lo i có kích th c kho ng 300 bp Nh v y, c p m i ITS1-ITS4 ã cho k t qu s n ph m PCR thu c t DNA t ng s tách chi t t m u n m nghiên c u phù h p - K t qu gi i trình t phân tích chu i gen ITS c a loài n m gây nhi m Danh sách m u, k t qu PCR, chu i gen gi i trình t , k t qu truy c p Ngân hàng gen xác nh k t qu cu i xác nh loài, c th ng kê trình bày B ng 3.7, Hình 3.3 - Th ng kê t l , thành ph n loài n m ph i Tình tr ng nhi m n m ph i S m u nuôi c y S m u (+) T 10 01 241 27 251 28 > 0,05 Nh nghi p l (%) Làm nông nghi p 10,0 Cán b 11,2 Chung 11,1 Giá tr p Nh n xét: Không có khác bi t t l nhi m b nh nhân cán b v i b nh nhân làm nông nghi p, v i (10,0% so v i 11,2%, p > 0,05) - T l nhi m n m ph i b nh nhân giai o n nhi m HIV giai o n AIDS B ng 3.5 T l nhi m n m ph i b nh nhân giai o n nhi m HIV giai o n AIDS Nhóm giai o n nhi m HIV Nhóm giai o n AIDS S m u S T l S m u S T l Giá tr p nuôi c y (+) (%) nuôi c y (+) (%) 180 03 1,8 71 25 35,2 < 0,01 Nh n xét: Có s khác bi t v t l nhi m n m ph i gi a nhóm nhi m HIV nhóm giai o n AIDS (1,8% so v i 35,2%, p < 0,01) - K t qu tách chi t DNA t ng s t m u n m nghiên c u: T 28 m u n m, DNA t ng s c a t t c m u ã c tách chi t theo ph ng pháp ã mô t , k t qu cho th y có hi n th v t sáng th ch agarose 1% nhu m ethidium bromide, ch ng t m u tách chi t có DNA thu nh n t h gen c a m u n m nuôi c y M u nghiên c u DNA t ng s c a m u nghiên c u c kí hi u nh li t kê B ng 3.7 - K t qu th c hi n PCR thu o n DNA c a vùng gen ITS M M H -0 H -0 H -0 71,4% 28,6% M TL4 H1-01 H2-02 H3-01 H4-01 H5-01 H6-01 kb kb 0,54kb ,5 k b kb ~300bp ~ 300b p 0,54kb Hình 3.2 K t qu i n di s n ph m PCR vùng gen ITS t m u n m nghiên c u, thu nh n b ng c p m i ITS1-ITS4 nh c tên loài S chu i b r i ho c s n ph m H -0 H -0 K T H1-02 H1-04 H1-05 H2-01 H2-03 H2-04 H3-02 H3-03 H3-04 H4-02 H4-03 H4-05 S xác ~300bp Hình 3.3 T l m u n m có k t qu xác nh tên loài Nh n xét: T l m u n m cho k t qu xác nh tên loài sau gi i trình t gen phân tích ph h 71,4% (20/28 m u) K t qu c th c a t ng m u nh B ng 3.7 B ng 3.7 T l , thành ph n loài n m ph i b nh nhân HIV/AIDS Tên gi ng, loài S T l l ng (%) Penicillium spp 07 25,0 Nigrospora spp 04 14,3 Aspergillus spp (02 A fumigatus, 01 A cristatus) 03 10,7 Cladosporium spp (01Cladosporium 02 7,2 sphaerospermum, 01 Cladosporium halotolerans) Candida glabrata 01 3,56 Fusarium solani 01 3,56 Scopulariopsis brevicaulis 01 3,56 Arthrinium arundinis 01 3,56 Chu i b r i, không xác nh 07 25,0 Không có s n ph m 01 3,56 T ng 28 100 Nh n xét: Trong t ng s 20/28 m u ã giám nh loài, ch y u t p trung là: Penicillium oxalicum (07 m u); Aspergillus fumigatus (02 m u); S l i c giám nh thu c v loài khác - K t qu phân tích ph h loài n m phân l p t i Vi t Nam d a chu i gen ITS H -0 -A -fu m i 87 98 64 78 100 49 H -0 -A -fu m i A -fu m i-F J 1 9 F u s a r-s o la n i-K C 7 H -0 -F -s o la n i H -0 -P -o x a l H -0 -P -o x a l H -0 b -P -o x a l 99 H -0 -P -o x a l H -0 b -P -o x a l H -0 -P -o x a l P -o x a l-K P H -0 -P -o x a l 100 H -0 -A -c ris A -c ris t-K M 8 100 H -0 -S -b re v i S c o p -b re v i-K P A rt-s a c c h -K F 4 9 A rt-p h a e o -K J 100 A rt-a ru n -K F 4 9 H -0 -A -a ru n 87 N ig ro s p o L H -H Q 8 H -0 -N ig ro s p o H -0 -2 b p H -0 -N ig ro s p o H -0 -N ig ro s p o 89 H -0 -C la -h a lo to le r 100 C la d o -s p J A -K F 7 90 K T -C la -s p h a e ro C la d o -s p h a e -J X 6 T L -C -g la b ta 69 83 57 56 100 75 0.02 Hình 3.4 K t qu phân tích ph h loài n m i t ng HIV/AIDS Nh n xét: Hình 3.4 trình bày ph h bi u th m i quan h gi a loài n m gây nhi m cho th y: Các ch ng n m phân l p phân tích nghiên c u này, tùy theo m c khác v m t phân lo i mà có nh ng s s p x p khác ph h , cho phép s b k t lu n chúng thu c v 10 loài n m khác nhau, ó có m t s ch ng thu c v chi Aspergillus spp; Fusarium spp; Arthrinium spp; Penicillium spp; Candida spp loài n m gây b nh nguy hi m ng i th ng xu t hi n v i s suy gi m mi n d ch virus HIV (Yew CS 2014) 3.1.3 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân lao ph i BK (-) - T l nhi m n m ph i b ng ph ng pháp nuôi c y môi c y n m môi tr ng Sabouraud: Vi c theo dõi, ghi chép c i m khu n l c n m m c c ti n hành liên t c 27 ngày, m i ngày c ghi k t qu l n, t ng h p k t qu t ng h p nh Hình 3.5 sau: 80,8% 19,2% Có khu n l c Không có khu n l c 19,2% Hình 3.5 T l m u nuôi c y n m có khu n l c (k t qu +) Nh n xét: T l m u nuôi c y n m môi tr ng Sabouraud có khu n l c m c 19,2% (48/250) - T l nhi m n m theo nhóm tu i B ng 3.10 T l nhi m n m ph i theo nhóm tu i Tình tr ng nhi m n m ph i Nhóm tu i S m u nuôi c y S m u (+) T l (%) < 60 135 21 15,6 60 115 27 23,5 Chung 250 48 19,2 Giá tr p < 0,05 Nh n xét: T l nhi m n m ph i nhóm < 60 tu i th p h n nhóm tu i 60, (15,6% so v i 23,5% p < 0,05) - T l nhi m theo ngh nghi p B ng 3.11 T l nhi m n m ph i theo ngh nghi p Ngh nghi p Tình tr ng nhi m n m ph i S m u nuôi S m u (+) T l (%) cy Nông, lâm 205 41 20,0 nghi p Cán b 45 07 15,6 Chung 250 48 19,2 Giá tr p > 0,05 Nh n xét: T l nhi m n m ph i i t ng cán b th p h n i t ng làm nông, lâm nghi p (15,6% so v i 20,0%, p > 0,05) - T l nhi m n m theo gi i Nh n xét: Các m u xét nghi m cho k t qu rõ nét - i n di gel acrylamid 8% B ng 3.12 T l nhi m n m ph i theo gi i Tình tr ng nhi m n m ph i S m u nuôi c y S m u (+) T l (%) Nam 150 30 20,0 N 100 18 18,0 Chung 250 48 19,2 Giá tr p > 0,05 Nh n xét: Không có s khác bi t v t l nhi m n m ph i b nh nhân nam n (20,0% so v i 18,0%, p > 0,05) - M t s y u t liên quan n tình tr ng n m ph i: B ng cách tính toán OR, k t qu Có liên quan gi a ti p xúc tr c ti p v i gia c m ti n s i u tr lao ph i v i nhi m n m ph i v i (OR = 2,24, p < 0,05), (OR = 1,97, p < 0,05) - T l , thành ph n loài n m ph i qua xét nghi m b ng k thu t PCR RFLP Gi i 005 008 010 016 018 020 020 024 025 026 027 030 104 105 108 125 127 128 137 139 140 142 146 147 bp 10000 1000 500 250 bp 10000 1000 500 250 Hình 3.6 K t qu Tách chi t DNA genome c a m u ã c nuôi c y môi tr ng Sabouraud Nh n xét: DNA h gen c a dòng t bào u ã tách chi t, th hi n ng ch y u có m t b ng DNA kích th c l n, rõ nét - K t qu xét nghi m PCR b ng m i ITS1 ITS4 bp 10000 1000 500 250 Hình 3.7 Hình nh i n di gel th ch b ng m i ITS1 ITS4 Hình 3.8 Hình nh i n di gel acrylamid 8% Nh n xét: Các m u u thu c s n ph m PCR b ng DNA rõ nét, i u ch ng t DNA genome có ch t l ng t t, m i ch ng trình ch y PCR phù h p T t c s n ph m PCR u c c t ki m tra b ng Enzyme c t h n ch MSP I xem xét chúng thu c loài n m Candida nào? B ng 3.15 T l , thành ph n loài n m ph i sau phân c t b ng Enzyme MSP I l n Tên loài S l ng T l (%) C albican 15 31,91 C tropical 05 10,64 Lên b ng không c t 04 8,51 Không xác nh 22 46,81 Không lên b ng 02 2,13 T ng 48 100 Nh n xét: T l C albican 31,94%, C tropical 10,64%, l i không lên b ng ho c lên b ng không c t, không xác nh - K t qu so sánh gi i trình t gen v i gen m u Candida spp Ch ng 18 454 ATCCGCAAAATAAAAGAAGAAGAAAAGGGTAACCAAGTCGTTAAATTTCCGTTTCCC GGTAGGAGAGGAAAGAATTCAAACAACCTAGCGTATTGTCAACACCAACCC GGGGGTTTGAGGG AGAAATGACGCTCTTTCAGGCCTGCCCTTTGGAATACCAAAAGGCGCAATGTGCGTTCCAAGATT TATGATTCACGAATATCTGCGATTCATATTACTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCATGCGAGAA CCAAGAAATCCGTTGTTGAAAATTTTGACTATTGTAATAATAAATCAAGTTTGACTGGAAATAAA AAGTTTGGTTTTTTATAACCTCTGGCGGAGGATTGCTCCCGCCACCAAAAAAATTTGTTCCATAAA AAACACCTGTGGTGCCATTAAACAAATCATAATGATCCTTCCGCAGTTCCCTACCGAAGGTTGTTG TTTT Ch ng 20 - 485 TTGAATTTGAGGTCAAACTTTGAGATATACTGGGGAGTCGCCGCGGAGGGAAAGAATGGTAGACA AGCATTGCTCAGCGATCCC GGGGGGGAAAAATACCGTCTTTCAGCAAACCCAAGTCGTATTGCTC AACACCAAACCCAGCGGTTTGAGGGATTTTGACCCTCAAACAGGCATGCCCTCGGGAATACCAGA GGGCGCAATGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACGAATATTGCAATTCATATTACGTATCGCATT TCGCTGCGTTCTTCATCGATGCAAGAACCAAAAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGACTATTAAGTAA TAATCTGGTGTGACAAGTTGATAAAAAATTGGTTGTAAGTTTAGACCTCTGGCGGCAGGCTGGGC CCACCGCCAAAGCAAGTTTGTTTCAAAGAAAAACACATGTGGTGCAATTAAGCAAATCAGTAATG ATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAG Ch ng 27- 498 GATCATCGACGTCGCAGAGAGAATAAAAGCCTATCCATTAGTTTATACCTGCTTTCTTTCAAGG AAAGAAACCAGCGTATCGCTCAACACCAAACCCGAAGGTTTGAGGGAGAAATGACGCTCAAAC AGGCATGCCTTTTCCCAATACCAAAGGGCGCAATGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACGAAT ATCTGCAATTCATATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAACCAAGAGATC CGTTGTTGAAAGTTTTGACTATTAGTTAATCAAGTTGACAATTAAATAAAAATTTGGTTGAGTTT AATCTCTGGCAGGCCGTGGGCCCACCAAAGCAAAGTTTTCAAAAAAAAGAAAAACACATGTGT AGAAAGAAAAGGGTCGCAGTTAAGCGCCCTTTCCCCTATTCC GGAAATGACCCTCCCCAGGGT TCACCTACGAAGGGTTCGGTTTTGGGGGAGGGGGCGCGGGCTTTTGATGT Ch ng 50 - 517 ATTTCACGGGTAGTCCTACCTGATTTGAGGTCAAAGTTTGAAGATATACGTGGTGGACGTCGGC CGCAAGGAAAGTTTTTGGTTAGACCTAAGCCATTGTTCCGCGATCCCGCCTTAACACTACCGTCT TTCAAGCAAACCCAAGTCGTATTGCTCAACACCAAACCCAGCGGTTTGAGGGAGAAACGACCC TCAAACAGGCATGCCCTCC GGAATACCAGAGGGCGCAATGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTC ACGAATATCTGCAATTCATATTACGTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAACCAA GAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGACTATTAAGTAATAATCTGGTGTGACAAGTTAATAAAAAAT TGGTTGTAAGTTTAGACCTCTGGCGGCAGGCTGGGCCCACCGCCAAAGCAAGTTTGTTTCAAAG AAAAACACATGTGGTGCAATTAAGCAAATCAGTAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAG GATTTTTTTTTTTTT Nh n xét: i v i m u 48 v n tìm th y trình t dành cho v trí c t c a enzyme c t h n ch MSP I CC GG Nh ng th c t s n ph m PCR l i không b c t b i Enzyme m c dù s n ph m PCR ã c làm s ch tr c c t i u có th d trình t dành cho i m c t c a MSP I có th b methyl hóa ho c b t bi n nh , kh ng nh i u c n có nghiên c u sâu h n - K t qu so sánh gi i trình t gen v i gen m u Aspergillus spp T ng s có 28/48 m u lên b ng không c t không xác nh, ã c ti n hành ch y PCR l n th v i gen m i ITS1- ITS4 c a Aspergillus spp phân c t b ng Enzyme MSP I k t qu nh sau: B ng 3.16 T l , thành ph n loài n m ph i sau phân c t b ng Enzyme MSP I l n Tên loài S l ng T l (%) Aspergillus spp 0,0 Lên b ng không c t 04 14,3 Không xác nh 22 78,6 Không lên b ng 02 7,1 T ng 28 100,0 Nh n xét: Trong t ng s 28 m u m u lên b ng b phân c t b i enzyme MSP I Nh v y m u nhi m Aspergillus spp 3.2 Hi u qu i u tr c hi u 3.2.1 Hi u qu i u tr n m ph i b ng Fluconazol B ng 3.17 Hi u qu sau 15 ngày i u tr b ng Fluconazol b nh nhân HIV/AIDS b nh nhân lao BK (-) Tình tr ng b nh n m ph i tr c sau Gía tr p i u tr 15 ngày b ng Fluconazol Nhóm i t ng Tr c Sau i u Hi u qu i u tr tr (%) HIV/AIDS 28 09 67,9 < 0,01 Lao ph i có BK (-) 45 00 100,0 < 0,01 Chung 73 09 87,67 < 0,01 Giá tr p < 0,01 Nh n xét: nhóm b nh nhân HIV/AIDS t l kh i b nh 19/28, hi u qu i u tr 67,9% Nhóm b nh nhân lao ph i có BK (-), t l kh i b nh r t cao 45/45, hi u qu i u tr 100,0% Hi u qu i u tr b ng Fluconazol chung cho c hai nhóm HIV/AIDS nhóm lao ph i có BK (-) 87,67% Có s khác bi t v t l kh i gi hai nhóm i t ng lao ph i có BK (-) HIV/AIDS (100,0% so v i 67,9% v i p < 0,01) - Tình tr ng tái nhi m n m ph i sau 3, 12 tháng i u tr b ng Fluconazol b nh nhân lao ph i có BK (-) B ng 3.18 Tình tr ng tái nhi m n m ph i sau 3, 12 tháng i u tr b ng Fluconazol b nh nhân lao ph i có BK (-) Th i gian sau i u tr Sau i Sau i Sau i Giá tr Tình tr ng tái nhi m n m ph i b nh nhân lao ph i có BK (-) S nhi m 0 T l (%) 0,0 (0/45) 0,0 (0/45) 0,0 (0/45) u tr 15 ngày u tr tháng u tr 12 tháng p > 0,05 Nh n xét: Sau i u tr 3, 12 tháng b nh nhân tái nhi m n m ph i (0/45), v i t l tái nhi m tái nhi m 0,0% 0,0% 3.2.2 Hi u qu i u tr n m ph i b ng Amphotericin B Sau i u tr 15 ngày b ng Fluconazol, có 09 b nh nhân th t b i i u tr , c chuy n sang i u tr b ng phác s d ng thu c Amphotericin B S b nh nhân hoàn toàn b nh nhân HIV/AIDS, b nh nhân lao ph i có BK (-) Hi u qu i u tr b ng Amphotericin B t i B ng 3.19 nh sau: B ng 3.19 Hi u qu i u tr n m ph i sau 15 ngày b ng Amphotericin B b nh nhân HIV/AIDS Th i gian sau i u Tình tr ng n m ph i Hi u qu i u tr tr PV (%) S nhi m (n= 09) T l (%) Tr c i u tr 09 100 (09/09) 0,0 Sau i u tr 15 ngày 02 22,2 (02/09) 87,8 Giá tr p < 0,01 Nh n xét: Sau 15 ngày i u tr phác nhóm b nh nhân HIV/AIDS, có 07/09 b nh nhân kh i b nh, hi u qu i u tr 87,8% B ng 3.20 T l tái nhi m n m ph i sau 3, 12 tháng i u tr b ng Amphotericin B b nh nhân HIV/AIDS Tình tr ng tái nhi m n m ph i Th i gian sau i u tr S b nh nhân (n = 09) T l nhi m (%) Sau i Sau i Sau i Giá tr u tr 15 ngày 02/09 22,2 u tr tháng 09/09 100,0 u tr 12 tháng 09/09 100,0 p < 0,01 Nh n xét: T l tái nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS sau 3, 12 tháng i u tr b ng Amphotericin B u 100% (09/09) Ch ng 4: BÀN LU N 4.1 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS t i B nh vi n H u ngh a khoa, b nh nhân lao ph i có BK (-) t i B nh vi n Lao Các b nh ph i t nh Ngh An (2013 -2014) 4.1.1 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS t i B nh vi n H u ngh a khoa t nh Ngh An 2013 2014 B ng 3.4 cho th y: T l m u nuôi c y n m có k t qu (+) (có khu n l c) 11,1%, ó, t l nhi m nhóm b nh nhân ã giai o n AIDS r t cao 35,2% (25/71), nhóm b nh nhân giai o n nhi m HIV 1,8% (03/180) K t qu nghiên c u c a c ng t ng t nh nghiên c u c a m t s tác gi n c nh : Tr n Ph M nh Siêu CS (2013), Pauline Jolly CS (2013), m t s nhà khoa h c khác ã phát hi n có m i liên quan gi a t c phát tri n HIV/AIDS v i m c nhi m n m Không có s khác bi t v t l nhi m n m ph i gi a ng i cán b ng i làm nông nghi p (10,0% so v i 11,2%, p > 0,05), i u kh ng nh HIV/AIDS g p m i i t ng, m i thành ph n c a xã h i n u có ti p xúc v i y u t nguy c b ph i nhi m v i y u t nguy c K t qu t i B ng 3.3, ph n ánh: Không có s khác bi t v t l nhi m n m ph i gi a nam n b nh nhân HIV/AIDS, v i t l (10,7% so v i 12,5%, p > 0,05) K t qu ph n ánh m t th c t là: Nguy c nhi m n m ph i nam n nh nhau; Nhi m n m ph i không ph thu c vào gi i tính; Nhi m n m ph i có th g p t t c b nh nhân HIV/AIDS n u có ti p xúc v i m m b nh n m ph i tình tr ng mi n d ch ã suy x p K t qu xét nghi m PCR: T ng s 27/28 m u có s n ph m PCR, c thu b ng ph ng pháp gel (elution), m t s thu b ng ph ng pháp tinh s ch (purification) s d ng b sinh ph m c a Bioneer (Hàn Qu c) T t c s n ph m PCR c gi i trình t tr c ti p; Sau phân tích, thu c 20 chu i nucleotide có ch t l ng t t, s d ng truy c p Ngân hàng gen phân tích giám nh loài K t qu gi i trình t phân tích chu i gen ITS c a loài n m b nh ph m: Có 28 m u c tách chi t DNA t ng s , th c hi n PCR k t qu có 01 m u âm tính không cho s n ph m, 27 m u có s n ph m PCR, c thu b ng ph ng pháp gel (elution), m t s thu b ng ph ng pháp tinh s ch (purification) s d ng b sinh ph m c a Bioneer (Hàn Qu c) T t c s n ph m PCR c gi i trình t tr c ti p; sau phân tích, thu c 20 chu i nucleotide có ch t l ng t t, s d ng truy c p Ngân hàng gen (genbank) phân tích giám nh loài K t qu truy c p Ngân hàng gen xác nh loài b ng ph ng pháp so sánh chu i gen cho th y, s 20 chu i gen phân tích, ã xác nh c m t s loài B ng (3.5), bao g m: Arthrinium arundinis m u (H1-01); Cladosporium halotolerans m u (H104); Aspergillus fumigatus m u (H1-05; H3-04); Aspergillus cristatus m u (H2-01); Fusarium solani m u (H2-02); Scopulariopsis brevicaulis m u (H3-01); Penicillium oxalicum (H4-02; H4-05; H6-01; H6-01b; H6-02; H6-02b; H6-03) m u; Cladosporium sphaerospermum m u; Candida glabrata m u; Nigrospora spp m u h - Th ng kê k t qu gi i trình t gen, phân tích, so sánh ph Sau có k t qu gi i trình t gen so sánh v i ngân hàng gen c a ch ng gen m u c a th gi i, ông Nam Á k t qu th ng kê B ng (3.6), (3.7) nh sau: Trong t ng s 20/28 m u ã giám nh loài, k t qu cho th y: Penicillium oxalicum (07 m u); Aspergillus fumigatus (02 m u); S l i c giám nh thu c v loài khác nhau, ó: Arthrinium arundinis; Cladosporium halotolerans; Aspergillus cristatus; Fusarium solani; Scopulariopsis brevicaulis; Cladosporium sphaerospermum; Candida glabrata Nigrospora spp (04 m u) Nh v y, k t qu xác nh loài cho th y n m gây b nh ph i b nh nhân HIV/AIDS nghiên c u có thành ph n loài h t s c a d ng Trong 20 m u phân tích có n 10 loài gây nhi m c phát hi n, c bi t s m u nghiên c u có m t s loài nguy hi m thu c chi Aspergillus spp ( ó là: Aspergilus fumigatus) n m Candida glabrata, Candida alcicans ây loài n m gây nhi m c h i r t nguy hi m b nh nhân suy gi m mi n d ch 4.1.2 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân i u tr lao có BK (-) t i B nh vi n Lao Các b nh ph i t nh Ngh An K t qu nghiên c u c a tài t i Hình 3.5 B ng 3.9 cho th y: Trong t ng s 250 m u nuôi c y có 48 m u (+), t l m u nuôi c y có khu n l c m c 48/250 (19,2%) a s khu n l c n m có màu tr ng tr ng ngà, m t s có màu nâu, m n nh nhung, khu n l c có hình tròn, ho c b u d c, kích th c trung bình 2,5 mm (t 1- mm) K t qu nghiên c u t i Hình 3.5, cho th y: T l nhi m n m ph i chung i t ng ang i u tr lao có BK (-) 19,2%, K t qu nghiên c u t i B ng 3.1 B ng 3.10 c ng cho th y: Tu i trung bình ng i lao ph i có BK (-) 56,1 ± 7,2 tu i, t l nhi m ng i < 60 th p h n l a tu i 60, s khác bi t có ý ngh a th ng kê, v i t l t ng ng 15,6% so v i 23,5% v i p < 0,05 i u hoàn toàn phù h p v i th c t t i Ngh An c ng nh n c ta, k t qu có th m t s y u t nh sau: - b nh nhân m c b nh ph i mãn tính th ng có tính ch t tích l y theo th i gian ti p xúc v i y u t nguy c B nh ch bùng phát tình tr ng mi n d ch c a c th gi m sút Tu i cao tình tr ng mi n d ch gi m sút - B nh n m ph i c ng th ng g p b nh nhân sau i u tr b nh lao ph i nh t lao hang Sau i u tr lao ph i tình tr ng s c kh e mi n d ch c a ng i b nh c ng gi m sút làm thay i gi i ph u c quan hô h p, t n th ng lao t o thành hang thông v i ph qu n, m m b nh có khí hít th r dàng xâm nh p c trú phát tri n ký sinh hang lao c ph i - T l nhi m n m ph i ng i cao tu i ph bi n h n ng i tr tu i Ng i cao tu i th ng m c b nh x ng kh p, nguyên nhân t i n y t c s th ng l m d ng thu c ch ng viêm, gi m au dài ngày nh : Corticoide d n n suy gi m mi n d ch K t qu c ng phù h p v i nhi u nghiên c u n c nh : Nghiên c u c a V CS (2010), ã nghiên c u c i m lâm sàng, X-quang i u tr ngo i khoa b nh u n m ph i t i B nh vi n Lao b nh ph i Trung ng t 2005 -2009, Wei X CS (2015), nghiên c u tình tr ng nhi m n m ng hô h p nh ng ng i s d ng thu c c ch mi n d ch dài ngày Argunov D.A CS (2015), ng i ghép t ng có nguy c nhi m n m r t cao, nh t nh ng ng i ghép ph i K t qu t i Hình 3.5, B ng 3.10 cho th y t l nhi m n m ph i (t l m u có khu n l c (+) nuôi c y môi tr ng Sabouraud 19,2% (48/250) K t qu cho nh n nh: T l nhi m n m ph i b nh nhân lao có BK (-) t i B nh vi n Lao b nh ph i t nh Ngh An t ng i cao, k thu t xét nghi m phát hi n n m ch a c tr ng M t t l l n b nh nhân nhi m n m ph i v n ph i i u tr b ng phác ch ng lao ã gây r t nhi u t n h i v s c kh e th i gian cho ng i b nh - K t qu t i B ng 3.10, cho th y: T l nhi m nam cao h n n , nhiên s khác bi t 20% so v i 18% (1,1/1) v i p > 0,05 K t qu nghiên c u c a tài khác v i k t qu nh n nh c a tác gi n c nh : Nghiên c u c a Thái H u D ng CS (2011), nghiên c u ch n oán i u tr viêm qu n n m b ng k thu t PCR t i B nh vi n Tai m i h ng TP H Chí Minh 2009 -2010: T l b nh nhân nam/n 2,3/1 c a (1,1/1), V CS (2010), ã nghiên c u c i m lâm sàng, X-quang i u tr ngo i khoa b nh u n m ph i t i B nh vi n Lao b nh ph i Trung ng t 2005 -2009, k t qu cho th y: T l m c nam/n 77/23 (3,5/1) c a (1,1/1) 4.1.3.3 T l nhi m n m ph i theo ngh nghi p Ngh nghi p c ng y u t nh h ng r t l n n tình tr ng nhi m n m ph i K t qu nghiên c u c a t i B ng 3.11, cho th y: T l nhi m n m ph i i t ng cán b th p h n i t ng làm nông, lâm nghi p, nhiên s khác bi t ch a có ý ngh a th ng kê, v i k t qu 15,6% so v i 20,0%, v i p > 0,05 K t qu c ng phù h p v i nh n nh c a tác gi n c v i y v n, u có chung nh n nh t l nhi m n m ph i nông dân cao h n cán b nh nghiên c u c a: - Thái H u D ng CS (2011), nghiên c u ch n oán i u tr viêm qu n n m b ng k thu t PCR t i B nh vi n Tai m i h ng TP H Chí Minh 2009 -2010, k t qu cho th y: Nông dân có t l m c cao nh t, chi m 38,7% s b nh nhân - Liên quan gi a tình tr ng nhi m n m ph i m t s y u t nguy c K t qu t i B ng 3.13 cho th y: Có liên quan giwuax tình tr ng nhi m n m ph i ch n nuôi gia c m, ti n s s d ng Corticoid kéo dài: v i (OR = 2,24, p[...]... cao nh t 25% (7/28 m u) và 2 loài n m ph i b nh nhân lao ph i có BK (-) là C albican chi m 31,91% (15/48), C tropical 10,64% (5/48) DANH M C CÁC CÔNG TRÌNH KHOA H C Ã CÔNG B 1 2 Qu Anh Trâm, Cao Bá L i (2015), ng d ng k thu t RFLPPCR và gi i trình t gen nh danh loài n m ph i b nh nhân lao BK (-) t i B nh vi n lao và Các b nh ph i t nh Ngh An, T p chí Phòng ch ng b nh S t rét và các b nh ký sinh trùng,... MSP I b methyl hóa Do các b nh nhân ã có th i gian dài s d ng các thu c ch ng lao d n n hi n t ng ph n ng c a n m là thay i 1 v trí nucleotid trên gen nh m kháng l i thu c i u tr Vì v y, khi gi i trình t v trí CC GG là v trí bám m i không th b t c p K t qu này cho ta xác nh b nh nhân i u tr lao ph i có BK (-) t i B nh vi n Lao và B nh ph i ngh An ch nhi m Candida albicans và Candida tropicalis kh ng... gi m sút và làm thay i gi i ph u c quan hô h p, các t n th ng lao t o thành các hang thông v i ph qu n, m m b nh có trong khí hít th r dàng xâm nh p và c trú phát tri n ký sinh trong các hang lao c ph i - T l nhi m n m ph i ng i cao tu i ph bi n h n ng i tr tu i Ng i cao tu i th ng m c các b nh x ng kh p, nguyên nhân chính là t i các tuy n y t c s th ng l m d ng các thu c ch ng viêm, gi m au dài ngày... k t qu và nh n nh c a các tác gi trong và ngoài n c nh : Nghiên c u c a Thái H u D ng và CS (2011), nghiên c u ch n oán và i u tr viêm thanh qu n do n m b ng k thu t PCR t i B nh vi n Tai m i h ng TP H Chí Minh 2009 -2010: T l b nh nhân nam/n 2,3/1 trong khi c a chúng tôi là (1,1/1), V và CS (2010), ã nghiên c u c i m lâm sàng, X-quang và i u tr ngo i khoa b nh u n m ph i t i B nh vi n Lao và b nh... b nh nhân m c các b nh ph i mãn tính th ng có tính ch t tích l y theo th i gian ti p xúc v i các y u t nguy c B nh ch bùng phát khi tình tr ng mi n d ch c a c th gi m sút Tu i càng cao thì tình tr ng mi n d ch càng gi m sút - B nh n m ph i c ng th ng g p b nh nhân sau i u tr các b nh lao ph i nh t là lao hang Sau i u tr lao ph i thì tình tr ng s c kh e và mi n d ch c a ng i b nh c ng gi m sút và làm... nguy hi m các b nh nhân suy gi m mi n d ch 4.1.2 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân i u tr lao có BK (-) t i B nh vi n Lao và Các b nh ph i t nh Ngh An K t qu nghiên c u c a tài t i Hình 3.5 và B ng 3.9 cho th y: Trong t ng s 250 m u nuôi c y có 48 m u (+), t l m u nuôi c y có khu n l c m c là 48/250 (19,2%) a s các khu n l c n m có màu tr ng và tr ng ngà, m t s ít có màu nâu, m n nh nhung, các khu... nhân HIV/AIDS t i B nh vi n H u ngh a khoa, b nh nhân lao ph i có BK (-) t i B nh vi n Lao và Các b nh ph i t nh Ngh An (2013 -2014) 4.1.1 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS t i B nh vi n H u ngh a khoa t nh Ngh An 2013 2014 B ng 3.4 cho th y: T l m u nuôi c y n m có k t qu (+) (có khu n l c) là 11,1%, trong ó, t l nhi m nhóm b nh nhân ã giai o n AIDS r t cao là 35,2% (25/71), nhóm b nh nhân. .. B là 100,0% và 100,0% K t qu t i B ng 3.18, cho th y: T l tái nhi m sau 3, 12 tháng là 0,0% và 0,0%, t c là t l kh i b nh v n là 100,0% và 100,0%, các tri u ch ng lâm sàng và xét nghi m u (-) Nh v y 100% s b nh nhân i u tr n i khoa 45/45 ã kh i b nh hoàn toàn K T LU N 1 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS, b nh nhân i u tr lao ph i có BK (-) 1.1 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân HIV/AIDS... 19,2% (48/250) K t qu này cho chúng ta nh n nh: T l nhi m n m ph i b nh nhân lao có BK (-) t i B nh vi n Lao và các b nh ph i t nh Ngh An t ng i cao, trong khi k thu t xét nghi m phát hi n n m ch a c chú tr ng M t t l l n b nh nhân nhi m n m ph i v n ph i i u tr b ng phác ch ng lao ã gây r t nhi u t n h i v s c kh e và th i gian cho ng i b nh - K t qu t i B ng 3.10, cho th y: T l nhi m nam cao h n... nhân - Liên quan gi a tình tr ng nhi m n m ph i và m t s y u t nguy c K t qu t i B ng 3.13 cho th y: Có liên quan giwuax tình tr ng nhi m n m ph i và ch n nuôi gia c m, ti n s s d ng Corticoid kéo dài: v i (OR = 2,24, p ... m Candida glabrata, Candida alcicans ây loài n m gây nhi m c h i r t nguy hi m b nh nhân suy gi m mi n d ch 4.1.2 Th c tr ng nhi m n m ph i b nh nhân i u tr lao có BK (-) t i B nh vi n Lao Các. .. b nh nhân sau i u tr b nh lao ph i nh t lao hang Sau i u tr lao ph i tình tr ng s c kh e mi n d ch c a ng i b nh c ng gi m sút làm thay i gi i ph u c quan hô h p, t n th ng lao t o thành hang... nh nhân i u tr lao ph i có BK (-) t i B nh vi n Lao B nh ph i ngh An ch nhi m Candida albicans Candida tropicalis kh ng nh rõ i u c n có nghiên c u thêm, v i c m u l n h n nhi u b nh vi n lao