^ , BÀI NGHIÊN CỨU * ^ Nghiên cứu tác dụng chống viêm giảm đau dịch chiết phân đoạn từ củ loài stephania díelsíana Y, c IVuthu hái Ba (ti - Hà Nội Đào Thị Vui, Nguyễn Thùy Dương, Nguyễn Quốc Huy Trường Đại học Dược Hà Nội SUMMARY The anti-inflơmmatory and analgesic activities of Stephaniơ dielsiana fraction (SDF) were investigated in rats and mice The carrageenan induced paw edema and cotton pellet models in rots were used for the evaluation of acute and chronic anti-inflammatory activity, whereas analgesic effects were tested in mice using hot plate and writhing tests to distinguish the central and peripheral effects, respectively SDF at the dose of 9.0 g/kg showed onti-infiommatory activity by inhibiting paw edema (24.37%, 29.51 %, 27.90% and 30.74% at Ih, 3h, 5h and 7h after subplơntar injection) in carrageenan-induced rat pow edema model and reducing granuloma weight (21.5% wet weight and 30.8% dried weight) in the cotton pellet model In the hot plote test, SDF showed a trend to increase the latency time response at doses of 3- 6- g/kg when compared with the control group and the highest potency was seen with dose of g/kg This dose also and showed significant result in the writhing test These results provide scientific validation for the use ofstephania dielsianơ Y c Wu for the treatmentof inflammatory and pain conditions in Vietnamese traditional medicine Từ khóa: Stephonia dielsiana Y CWu, chống viêm, giảm đau Đặt vấn đề Chi Bình vôi (Stephania Lour.) có khoảng 20 loài Việt Nam Nhiều loài thuộc chi nghiên cứu với nhiểu công dụng khác như: an thần, ức chế acetylcholỉnesterase, chống viêm, giảm đau, kháng số dòng tế bào ung thư [2] Củ loài Stephonio dielsiana Y c Wu (củ Dòm) sử dụng nhiều dân tộc miền núi phía Bác Việt Nam để chữa đau lưng, mỏi nhức chân, đau bụng, trị ngủ [1] Để chứng minh sở khoa học cho việc sử dụng thuốc dân gian để làm thuốc chống viêm giảm đau, tiến tới áp dụng thuốc điểu trị rộng rãi hơn, thực nghiên cứu VỚI mục tiêu: đánh giá tác dụng chống viêm, giảm đau cấp mạn phân đoạn dicloromethan ethỵl acetat (pH 4-5) dịch chiết ethanol củ Dòm Nguyên vật liệu phương pháp nghiên cứu Nguyên vật liệu Nguyên liệu Củ loài Stephonio dielsiana Y c Wu, thu hái Ba Vì-Hà Nội Chếphẩm Cân khoảng kg bột củ Sử dụng phương pháp chiết ngấm kiệt với hỗn hợp dung môi ethanol 80°: dung dịch acid acetic 5% (3:2 tt/tt) (pH 4-5), lượng 16 Nghiên Cứu dượcThốngtln th u ố c ; Số 1/2015 dung môi sử dụng lít Dịch chiết thu đem cất thu hổi dung môi đến 500 ml, phân tán thêm 500 mỉ nước cất đem chiết phân đoạn lán lượt với dicloromethan, ethyl acetat Dịch chiết dicloromethan, ethỵl acetat đem cất thu hổi dung môi gộp cắn này, thu 19 gam phân đoạn (PĐ1) đem thử tác dụng Liều dùng nghiên cứu tính theo dược liệu khô Động vật Chuột cống trắng chủng Wistar, khỏe mạnh, hai giổng, khối lượng 140-160 gam, Học viện Quân y cung cấp Chuột nhắt trắng chủng Swiss khối lượng 22-25 gam Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp Chuột sau mua vể, nuôi ổn định phòng thí nghiệm ngày trước thực nghiên cứu thức ăn tiêu chuẩn Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp, uống nước tự Thuốc hóa chất - Indomethacin hàm lượng 99,0% prednisolon hàm lượng 98,5% Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương cung cấp - Các dung môi, hóa chất khác: carrageenan, propylenglycol Sigma, Mỹ Máy móc dụng cụ - Cân phân tích AY220 Shimadzu (Nhật) ầ - Máy đo độ phù chân chuột 7140 Plethysmometer Ugo Basile (Ý) - Máy đo phản xạ đau hot plate 7406 Harvard (Mỹ) Phương pháp nghiên cứu Đánh giá tác dụng chống viêm cấp Tác dụng chống viêm nghiên cứu mô hình gây phù carrageenan theo Winter cộng [6] Chuột chia ngẫu nhiên thành lô, cho uống nước muối sinh lý, thuốc đối chiếu chế phẩm nghiên cứu với thể tích ml/100 gam chuột liên tục ngày Ngày thứ năm sau uống chế phẩm nghiên cứu, chuột tiêm 0,05 ml carrageenan 1% vào gan bàn chân sau phải Đo thể tích bàn chân sau phải chuột thời điểm trước sau gây viêm 1,3,5 Chỉ tiêu đánh giá -Độ phù bàn chân chuột: V -V AV(%)=-^— ^ X100 (1) Trong đó: AV: độ phù bàn chân chuột thời điểm t sau gây viêm V: thể tích bàn chân chuột trước gây viêm V^: thể tích bàn chân chuột thời điểm t sau gây viêm - Phẩn trăm ức chế phù lô thử so với lô chứng: A V -A K |(o/o)= ^ ^xi oo AF (2) Trong đó: I (%): phẩn trăm ức chế phù lô thử so với lô chứng AV: độ phù chân chuột trung bình lô chứng AV^: độ phù chân chuột trung bình lô thử Đành giá tác dụng chống viêm mọn Tác dụng chống viêm mạn thuốc tiến hành theo phương pháp gây u hạt thực nghiệm [3] cách cấy viên tẩm carrageenan 1% sấy khô vào da lưng chuột Sau chia chuột ngẫu nhiên thành lô Các lô chuột cho uống dung môi, thuốc đối chiếu chế phẩm thử hàng ngày, ngày liên tục Ngày thứ tám sau uống thuốc lần cuối giờ, giết chuột bóc tách u hạt Cân khối lượng u hạt tươi Sau sấy khô u hạt đến khối lượng không đổi cân khối lượng u hạt khô Thông số đánh giá - Khối lượng u hạt tươi/khô chuột - Khối lượng dịch gỉ viêm: Được xác định theo công thức ^dịchgỉviêm hạttươi" hạtkhô - Phẩn trám giảm khối lượng u hạt (dịch gỉ viêm) lô thử so với lô chứng tính tương tự công thức (2) Nghiên cứu tác dụng giảm đau phương pháp mâm nóng Tiến hành thí nghiệm đánh giá tác dụng giảm đau phương pháp mâm nóng cải tiến [3L [5] chuột cống trắng Xác định ngưỡng đau trước cho uống chế phẩm nghiên cứu loại bỏ chuột phản ứng trước giây sau 60 giây Chia chuột ngẫu nhiên thành lô, cho uống nước muối sinh lý, thuốc đối chiếu chế phẩm nghiên cứu liên tục ngày Ngày thứ năm sau cho chuột uống chế phẩm nghiên cứu 30 phút tiêm tác nhân gây đau carrageenan 1% với liều 0,05 ml vào gan bàn chân sau chuột Xác định ngưỡng đau thời điểm 150 phút sau tiêm tác nhân gây đau Thông số đánh giá - Ngưỡng đau trước sau dùng thuốc -Độ chênh lệch ngưỡng đau trước sau dùng chế phẩm AT(%)=T^-T (4) AT: độ chênh lệch ngưỡng đau trước sau dùng chế phẩm T : ngưỡng đau (thời gian phản ứng đau) trước dùng chế phẩm T^: ngưỡng đau (thời gian phản ứng đau) sau dùng chế phẩm - Phẩn trăm ức chế phản ứng đau xác định tương tự công thức (2) Đánh giá tác dụng giảm đau quặn Đánh giá tác dụng giảm đau theo phương pháp Koster [4] Chuột nhắt trắng chia ngẫu nhiên thành lô Cho chuột uổng nước muối sinh lý, thuốc đối chiếu chế phẩm nghiên cứu liên tục ngày Ngày thứ năm sau uống chế phẩm nghiên cứu giờ, tiêm vào phúc mạc chuột dung dịch acid acetic ^%, 0,2 ml/con Đếm số quặn đau chuột phút hết phút thứ 30 sau khỉ tiêm acid acetic Thông số đánh giá - Số quặn đau phút đến 30 phút -Tổng số quặn đau 30 phút - Phần trăm ức chế số đau lô thử so với lô chứng (tính tương tự công thức (2)) Xử lý số liệu Kết nghiên cứu xử lý thống kê biểu diễn dạng giá trị trung bình cộng trừ sai số Số 1/20151Nghiên cứu duợcf hổng tin thuõc 17 BÀI NGHIÊN CỨU * chuẩn (M ± SE) So sánh giá trị trung bình lô kiểm định T-student Sự khác lô coi có ý nghĩa thống kê p ... thành mạch, gây phù bàn chân chuột Thu c làm giảm độ phù chân chuột thu c có t c dụng chống viêm Kết nghiên c u cho th y, phân đoạn với m c liều, c liều gam dư c liệu/kg chuột thể t c dụng chống. .. 30,74% T c dụng chống viêm mạn T c dụng chống viêm mạn PĐ1 dịch chiết c Dòm liều g/kg chuột Bâng Tácdụng PĐ 1dịch chiếtcủ Dòm đến khói lượng u hạt Lô nghiên c u KLu hạt tươi (mg) KLuhạtkhô (mg) Chứng... dụng giảm đau mâm nóng Kết t c dụng giảm đau PĐ1 dịch chiết c Dòm Bỏng T c dụng giám âau PĐ 1dịch chiết c Dòm Thời gian phản ứng đau (giây) LÔ nghiên c u % c chế phản ứng đau so với chứng Trước