NGHIÊN CỨU TÂC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA SAPONIN CHIẾT XUẤT Từ GIẢÕ CỔ LAM iGynostemma pentaphyllum (Thunb.) Markino Cucurbinaceae) Thân Thị Kiều My*, Phạm Thanh Kỳ* Nguyễn Trọng Thông**, Phạm Thị Vân Anh** * Trường Đại học Dược Hà Nội, ** Trường Đại học Y Hà Nội SU M M ARY H ep atoprotective effects o f saponin o f G ynostem m a pentaphyllum were stu died In term o f liver- protective effects on p a ce­ tam ol- po iso n ed m ice The results sh o w e d the sa pon in s a t doses o f 200 m g/kg a n d 600 mg/kg b o d y w eight o f m ice decreased serum concentrations o f AST, A LT a n d declied considerably the liver histopa tholog yca l injuries In paracetam ol- p o iso n ed m ice Saponlns o f G pentaphyllum sh o w ed a n tio xidan t effect through decreasing MDA concentration o f the hom ogenized m ass o f m ou se liver That effect Is sim ilar with the effect o fsilym a rin a t se o f7 m g /kg b o d y w eight o f m ice Đặt vấn để Giảo cổ lam gọi c ổ yếm Theo Võ Văn Chi [1], dược liệu có tác dụng tiêu viêm, giải độc, chửa ho long đờm Trên giới Giảo cổ lam biết đến với tác dụng tăng lực, hạ đường huyết, hạ lipid máu Từ năm 1998 đến đâ có nhiều đề tài nghiên cứu vé thành phần hóa học [2] [3] [4] tác dụng sinh học Giảo cổ lam [5] [6] [7] để có sở khoa học cho việc sử dụng dược liệu làm thuốc chữa bệnh Tuy nhiên, nghiên cứu tác dụng sinh học chủ yếu đối tượng dịch chiết toàn phần, chưa có nghiên cứu tác dụng saponin chiết xuất từ Giảo cổ lam Bài báo trình bày kết nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan saponin chiết xuất từ Giảo cổ lam Chuột nuôi điéu kiện phòng thí nghiệm với đầy đủ thức ăn nước uống tự môn Dược lý- trường Đại học Y Hà Nội Hóa chất thiết bị: - Silymarin dạng viên nén 70mg, paracetamol (PAR) hóa chất đủ tiêu chuẩn thí nghiêm - Máy xét nghiệm sinh hóa Screen- Master hãng Hospitex Diagnostic (Italỵ) Kit định lượng AST, ALT hãng Hospitex Diagnostic (Italy) - Máy định lượng ELISA LX800 (Nhật) - Kính hiển vi quang học để đọc tiêu giải phẫu vi thể gan Phương pháp nghiên cứu: - Đánh giá tác dụng bảo vệ gan saponin Giảo cổ lam mô hình gây tổn thương gan paracetamol [8] Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu Nguyên liệu: Saponin chiết xuất từ Giảo cổ lam thu hái ỞSapa (Lào Cai) vào tháng 7/2010 Dược liệu sau thu hái phơi khô chiết với methanol, loại bỏ tạp chất, cuối két tủa saponin aceton Saponin thô tinh chế, sấy khô bảo quản lọ kín tránh hút ẩm Động vật thí nghiệm: Chuột nhát trắng chủng Swiss, giống, khỏe mạnh, cân nặng từ 18-22g Viện vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp - Chuột nhắt trắng chia ngẫu nhiên thành lô, lô 10 Chuột uống nước thuốc thử liên tục ngày Ngày thứ 8, sau uống thuốc 3h, chuột nhịn đói 16-18 trước đó, gây tổn thương gan chuột lô từ lô đến lô uống paracetamol (PAR) liều 400mg/kg thể trọng với thể tích 0,2ml/10g 48 sau uống PAR, lấy máu động mạch cảnh chuột để định lượng enzym AST ALT, đóng thời lấy gan để xác định khối lượng quan sát mô bệnh học (đại thể, vi thể) hiện khả ức chế trình peroxy hóa lipid chất thử gọi hoạt tính chống oxy hóa thuốc Tách gan chuột nghiền thể dung Lô (gây m ô hình viêm Uổng nước cẩt+ uổng PAR dịch KCI 1,15% theo tỷ lệ 1:10 nhiệt độ O-S^c gan): Lấy 2ml dịch đóng thể + 1ml đệm Tris 25mM, ủ Lô (chứng dương): Uống PAR + uống Silym arin 37“C 60 phút Thêm vào 1ml acid tricloacetic 70m g/kg (TCA) 10%, ly tâm lấy dịch trong, cho phản ứng với Im l acid thiobarbituric (TBA) 0,8% 100"C Uống PAR + saponin Giảo cổ Lô (thuố c th liễu th ấp ) 15 phút đo màu x= 532 nm lam 0 m g/kg Tính kết quả: Hàm lượng MDA (nM/ml dịch nghiền thể Uống PAR + saponin G iảo cổ Lô (thuố c th liéu cao): gan) tính theo phương trình hói quy tuyến lam 600m g/kg tính chất chuẩn MDA Thiết lập đường chuẩn MDA: - MDA chuẩn Im l nóng độ từ 0,3045 - 0,609 nM/ml Chuột giết cách lấy máu động -TCA 10% ml mạch cảnh, mổ bụng để bộc lộ gan, bóc tách toàn -TBA 0,8% Im l gan ngâm vào dung dịch nước muối - Hiện màu 00 °c 15 phút Đo quang sinh lý Lọc tổ chức xung quanh, dùng gạc thấm khỏ rói đem cân Ghi lại khối lượng gan ỞẰ- 532nm Phương pháp xử lý số liệu chuột Khối lượng gan tương đối tỷ lệ khối só liệu sử lý thống kê theo phương pháp lượng quan so với trọng lượng thống kê sinh học (t-test Student test trước chuột tương ứng Phương pháp xác định MDA dịch thểsau) sử dụng công cụ Data Analysis Microsoft Excel 2003 Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê p gan < 0,05 Khối lượng g a n (g) X Qui ước phẩn kết quả: số liệu biểu 0 (%o) diễn dạng: Khối lượng gan tương đối (%o) Kí hiệu: Thể trọng ch uột (g) - p so với lò chứng sinh học * ; ... chiét xuất từ Giảo cổ lam- G, pentaphyllum (Thunb. ) Markino, Tạp chí thông tin Y dược số 11, trang 36-39 Phạm Thị Vân Anh, Nguyễn Trọng Thông, Nguyễn Thiện Ngọc cs (200 7), Nghiên cứu tác dụng. .. thể trọng chuột So sánh tác dụng saponin Giảo cổ lam liéu 200 mg/kg liều 600mg/kg thấy liéu 200mg/kg thể trọng chuột saponin giảo cổ lam có tác dụng bảo vệ tế bào gan, chống oxy hóa tốt liều 600mg/kg... saponin Giảo cổ lam có giá trị điều trị phòng ngừa nhiều bệnh xơ vữa động mạch, bệnh gan triệu chứng viêm Kết luân Saponin Giảo cổ lam liều 200mg/kg 600mg/kg có tác dụng bảo vệ gan qua hạn chết