BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ XUÂN GIANG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA HAI LOÀI TẦM GỬI TAXILLUS CHINENSIS (DC.) DANS VÀ MACROSOLEN TRICOLOR (LECOMTE) DANS LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, NĂM 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ XUÂN GIANG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA HAI LOÀI TẦM GỬI TAXILLUS CHINENSIS (DC.) DANS VÀ MACROSOLEN TRICOLOR (LECOMTE) DANS LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC Chuyên ngành: Dược học cổ truyền Mã số: 62.72.04.06 Người hướng dẫn khoa học: GS., TS PHẠM THANH KỲ HÀ NỘI, NĂM 2015 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng hướng dẫn GS., TS Phạm Thanh Kỳ Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố công trình nghiên cứu khác Tác giả Vũ Xuân Giang LỜI CẢM ƠN Trong trình nghiên cứu hoàn thành luận án này, nhận nhiều giúp đỡ quý báu Trường Đại học Dược Hà Nội, Thầy Cô giáo, nhà khoa học thuộc nhiều lĩnh vực đồng nghiệp, bạn bè gia đình Trước hết, xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới GS., TS Phạm Thanh Kỳ trực tiếp hướng dẫn, hết lòng bảo tận tình động viên suốt trình học tập nghiên cứu khoa học Tôi xin chân thành cảm ơn: Các cán Phòng Đào tạo - Trường Đại học Dược Hà Nội Các Thầy Cô Bộ môn Dược liệu, Bộ môn Thực vật, Bộ môn Dược học cổ truyền Bộ môn Dược lực - Trường Đại học Dược Hà Nội Các cán Phòng Đào tạo sau đại học - Trường Đại học Dược Hà Nội Các cán Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Các cán Bộ môn Dược lý - Đại học Y Hà Nội Đã giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho thực luận án Nhân dịp xin trân trọng cảm ơn Đảng ủy, Ban Giám hiệu Trường Đại học Dược Hà Nội, cán phòng ban, môn Trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện tốt để hoàn thành luận án Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn chân thành tới người bạn, người đồng nghiệp, người thân gia đình bố, mẹ, vợ, anh, chị, em kịp thời động viên tạo điều kiện thuận lợi Xin trân trọng cảm ơn! Vũ Xuân Giang MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ CÁI VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 VỊ TRÍ PHÂN LOẠI CỦA HỌ TẦM GỬI (LORANTHACEAE) 1.1.1 Vị trí phân loại họ tầm gửi (Loranthaceae) 1.1.2 Khóa phân loại họ Tầm gửi (Loranthaceae) 1.2 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, PHÂN BỐ MỘT SỐ LOÀI TẦM GỬI CHI MACROSOLEN VÀ TAXILLUS 11 1.2.1 Đặc điểm chung họ Tầm gửi 11 1.2.2 Đặc điểm thực vật phân bố số loài tầm gửi chi Taxillus 13 1.2.3 Đặc điểm thực vật phân bố số loài tầm gửi chi Macrosolen 14 1.3 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ LOÀI TẦM GỬI CHI TAXILLUS VÀ MACROSOLEN 16 1.3.1 Thành phần hóa học số loài tầm gửi chi Taxillus 16 1.3.2 Thành phần hóa học số loài tầm gửi chi Macrosolen 18 1.4 TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA MỘT SỐ LOÀI TẦM GỬI CHI TAXILLUS VÀ MACROSOLEN 24 1.4.1 Tác dụng chống oxy hóa số loài tầm gửi chi Taxillus Macrosolen 24 1.4.1.1 Tác dụng chống oxy hóa số loài tầm gửi chi Taxillus 25 1.4.1.2 Tác dụng chống oxy hóa số loài tầm gửi chi Macrosolen 25 1.4.2 Tác dụng bảo vệ gan số loài tầm gửi chi Macrosolen 26 1.4.3 Tác dụng chống viêm số loài tầm gửi chi Taxillus 27 1.4.4 Các tác dụng khác tầm gửi chi Taxillus Macrosolen 27 1.4.4.1 Tác dụng chống ung thư 28 1.4.4.2 Tác dụng giảm đau 28 1.5 CÔNG DỤNG VÀ MỘT SỐ BÀI THUỐC CÓ VỊ TẦM GỬI 30 1.5.1 Công dụng 30 1.5.2 Một số thuốc có vị tầm gửi 31 1.5.2.1 Một số thuốc cổ phương 31 1.5.2.2 Một số thuốc nghiệm phương có vị tầm gửi 32 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 35 2.1.1 Nguyên liệu 35 2.1.2 Hóa chất 35 2.1.3 Dụng cụ thiết bị 36 2.2 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 37 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.3.1 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm thực vật 37 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học 38 2.3.2.1 Định tính nhóm chất hữu phản ứng hoá học 38 2.3.2.2 Định tính sắc ký lớp mỏng 39 2.3.2.3 Định lượng chất phân đoạn ethylacetat 39 2.3.2.4 Chiết xuất phân lập hợp chất từ tầm gửi Gạo Na 40 2.3.2.5 Nhận dạng chất phân lập từ tầm gửi Gạo Na 45 2.3.3 Phương pháp xác định độc tính cấp 45 2.3.4 Phương pháp nghiên cứu hoạt tính chống oxy hóa 45 2.3.5 Phương pháp nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan 46 2.3.6 Phương pháp nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp tính mạn tính 49 2.3.6.1 Nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp tính 49 2.3.6.2 Nghiên cứu tác dụng chống viêm mạn tính 51 2.3.7 Phương pháp nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào 51 2.3.8 Xử lý số liệu 53 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 54 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT CỦA TẦM GỬI CÂY GẠO VÀ CÂY NA 54 3.1.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật tầm gửi Gạo 54 3.1.1.1 Đặc điểm hình thái giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu 54 3.1.1.2 Đặc điểm vi phẫu thân 56 3.1.1.3 Đặc điểm bột dược liệu 59 3.1.2 Nghiên cứu đặc điểm thực vật tầm gửi Na 59 3.1.2.1 Đặc điểm hình thái giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu 59 3.1.2.2 Đặc điểm vi phẫu thân 61 3.1.2.3 Đặc điểm bột dược liệu 63 3.2 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA TẦM GỬI CÂY GẠO VÀ CÂY NA 63 3.2.1 Định tính nhóm chất hữu phản ứng hoá học tầm gửi Gạo Na 63 3.2.2 Hàm lượng chất phân đoạn chiết ethylacetat từ tầm gửi Gạo Na 66 3.2.3 Nhận dạng hợp chất phân lập từ tầm gửi Gạo Na 67 3.2.3.1 Nhận dạng hợp chất phân lập từ tầm gửi Gạo 67 3.2.3.2 Nhận dạng hợp chất phân lập từ tầm gửi Na 93 3.3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP CỦA TẦM GỬI CÂY GẠO VÀ CÂY NA 101 3.3.1 Nghiên cứu độc tính cấp tầm gửi Gạo 101 3.3.2 Nghiên cứu độc tính cấp tầm gửi Na 102 3.4 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA TẦM GỬI CÂY GẠO VÀ CÂY NA 103 3.4.1 Nghiên cứu hoạt tính chống oxy hoá 103 3.4.2 Nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan 103 3.4.3 Nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp tính 109 3.4.3.1 Trên mô hình gây phù chân chuột 109 3.4.3.2 Trên mô hình gây tràn dịch màng bụng chuột cống trắng 110 3.4.4 Nghiên cứu tác dụng chống viêm mạn tính 112 3.4.5 Nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào 113 CHƯƠNG BÀN LUẬN 114 4.1 VỀ ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT 114 4.2 VỀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC 116 4.2.1 Về kết định tính 116 4.2.2 Về hàm lượng chất chiết ethylacetat 116 4.2.3 Về kết phân lập hợp chất 117 4.3 VỀ ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC 121 4.3.1.Về độc tính cấp 121 4.3.2 Về tác dụng sinh học 122 4.3.2.1 Về tác dụng chống oxy hóa 123 4.3.2.2 Về tác dụng bảo vệ gan 126 4.3.2.3 Về tác dụng chống viêm 127 4.3.2.4 Về tác dụng gây độc tế bào 131 4.4 MỐI QUAN HỆ GIỮA THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC 132 KẾT LUẬN 134 KIẾN NGHỊ 136 CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Phổ 1H-NMR hợp chất MT2E1 Phổ 13C-NMR hợp chất MT2E1 Phổ 13C-NMR hợp chất MT2E1 Phổ DEPT hợp chất MT2E1 Phổ DEPT hợp chất MT2E1 PHỤ LỤC 18 Hình ảnh mô bệnh học vi thể gan chuột nhắt trắng mô hình gây độc PAR • Anh huting cua cao Longtlim gui Ggo va Na Len Sf! thay alii mo bfl1,h )))))) )))))) )))))))gan chu{it nhit tring tren mo hinh gay apc bdng PAR ))))) (((((( 00000 hoc vi thi (((((( gan )))))) Hinh anh vi th~ gan chuQt 10 chung sinh hQc Anh 1: cac t~ bao gan co hinh anh binh thuong, HE x 400 Anh 2: cac t~ bao gan co hinh anh binh thirong, HE x 400 18 Anh 3: cac t~ bao gan co hinh anh binh thirong, HE x 400 Hinh anh vi th~ gan chUQt 10uang silymarin Anh 4: cae ti bao gan co hinh anh binh thuong, HE x 400 19 Anh 5: cdc ti bao gan co hinh anh binh thuirng, HE x 400 Anh 6: Viem cfrP duong mat, thoai hoa 20 t~ bao gan nhe, HE x 400 Hinh anh vi th~ gan cbuQt 10 mo hinh Anh 7: viem mire d[...]... số loài tầm gửi đang được dùng theo kinh nghiệm dân gian ở một số địa phương, đề tài Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và tác dụng sinh học của hai loài tầm gửi Taxillus chinensis (DC. ) Dans và Macrosolen tricolor (Lecomte) Dans. ” được thực hiện với 3 mục tiêu: 1 Mô tả đặc điểm thực vật, giám định tên khoa học, xác định đặc điểm vi học loài tầm gửi ký sinh trên cây Gạo (Taxillus chinensis. .. chinensis (DC. ) Dans .) và loài tầm gửi ký sinh trên cây Na (Macrosolen tricolor (Lecomte) Dans .) 2 Nghiên cứu thành phần hóa học của 2 loài tầm gửi trên 3 Xác định độc tính cấp và một số tác dụng sinh học (tác dụng chống oxy hóa, bảo vệ gan, tác dụng chống viêm, tác dụng ức chế một số dòng tế bào ung th ) của 2 loài tầm gửi trên 3 Chương 1 TỔNG QUAN 1.1 VỊ TRÍ PHÂN LOẠI CỦA HỌ TẦM GỬI (LORANTHACEAE) 1.1.1... thức hóa học và tương tác HMBC của TGGT3 74 18 Hình 3.13 Công thức hóa học và tương tác HMBC của TGGT5 76 19 Hình 3.14 Công thức hóa học và tương tác HMBC của TGGT7 79 20 Hình 3.15 Công thức hóa học của TGGT8 81 21 Hình 3.16 Công thức hóa học của TGGT9 84 22 Hình 3.17 Công thức hóa học và tương tác HMBC của TGGT10 86 23 Hình 3.18 Công thức hóa học của TGGT12 90 24 Hình 3.19 Công thức hóa học của TGGT13... phân loại của Takhtajan A (199 7) [105], [106] chi Viscum, Ginalloa và Korthalsella được xếp trong họ Viscaceae (tầm gửi dẹt) 1.2 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, PHÂN BỐ MỘT SỐ LOÀI TẦM GỬI CHI MACROSOLEN VÀ TAXILLUS 1.2.1 Đặc điểm chung của họ Tầm gửi Nhóm cây của họ Tầm gửi (Loranthaceae) là một họ thực vật có hoa Phần lớn tầm gửi phân bố ở xứ nóng Cây ký sinh có diệp lục, mọc trên cành các cây nhỡ và cây to Cây... MACROSOLEN Các nghiên cứu sàng lọc cho thấy ở một số loài thuộc chi Taxillus và chi Macrosolen có chứa carbohydrat, phytosterol, dầu béo và các hợp chất phenolic, saponin, protein và flavonoid… [71], [72], [73], [75] 1.3.1 Thành phần hóa học của một số loài tầm gửi chi Taxillus * Taxillus levinei (Mer .) H S Kiu Ở Trung Quốc, Li Meirong và cs (199 6) [75] nghiên cứu thành phần hóa học lá loài tầm gửi Taxillus. .. của các flavonoid glycosid của loài này ở các cây chủ khác nhau * Taxillus sutchuenensis (Lecomte) Dans Li Meirong và cs (198 8) [73] nghiên cứu flavonoid của loài tầm gửi Taxillus sutchuenensis (Lecomte) Dans thấy có chứa quercetin, quercitrin, D.catechol Chen J T và cs (200 7) [52] sử dụng phương pháp sắc ký và quang phổ để phân tích thành phần hóa học của dịch chiết từ cây Taxillus sutchuenensis (Lecomte). .. phẫu lá tầm gửi cây Gạo 57 9 Hình 3.4 Vi phẫu thân tầm gửi cây Gạo 58 10 Hình 3.5 Đặc điểm bột dược liệu tầm gửi cây Gạo 59 11 Hình 3.6 Một số đặc điểm thực vật của tầm gửi cây Na 60 12 Hình 3.7 Vi phẫu lá tầm gửi cây Na 61 13 Hình 3.8 Vi phẫu thân tầm gửi cây Na 62 14 Hình 3.9 Đặc điểm bột dược liệu tầm gửi cây Na 63 15 Hình 3.10 Công thức hóa học của TGGT1 68 16 Hình 3.11 Công thức hóa học của TGGT2... loài Taxillus chinensis (DC. ) Dans ký sinh trên cây Trúc đào là 1,52% Trong cành, lá Taxillus chinensis có avicularin, quercetin [10] 1.3.2 Thành phần hóa học của một số loài tầm gửi chi Macrosolen * Macrosolen parasiticus (L .) Dans Vijay Sodde và cs (201 1) [109] thu thập Macrosolen parasiticus (L .) Dans từ cây khỏe mạnh ở vùng Manipal, Karnataka (Ấn Đ ) trong tháng 9 năm 2011 để sàng lọc các thành phần. .. động thai, ít sữa sau khi đẻ [10] Gần đây có một số luận văn cao học bước đầu nghiên cứu tầm gửi trên cây Bưởi, trên cây Dâu tằm và trên cây Trúc đào [26], tầm gửi trên cây Mít [20], 2 [21], [44] và một số khóa luận tốt nghiệp đại học sơ bộ nghiên cứu tầm gửi trên cây Nhãn [25], trên cây Quất hồng bì [38], trên cây Cao su [33] Để góp phần tìm hiểu thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của một... paracetamol uống tầm gửi cây Gạo và cây Na 108 30 Bảng 3.26 Tác dụng chống viêm cấp của tầm gửi cây Gạo và cây Na trên mô hình gây phù chân chuột cống trắng 109 31 Bảng 3.27 Tác dụng của tầm gửi cây Gạo và cây Na lên thể tích dịch rỉ viêm 110 32 Bảng 3.28 Tác dụng của cao lỏng tầm gửi cây Gạo và cây Na lên hàm lượng protein trong dịch rỉ viêm 111 33 Bảng 3.29 Tác dụng của tầm gửi cây Gạo và cây Na lên ... (Hance) Dans 19 T chinensis (DC. ) Dans M cochinchinensis (Lour .) Blume 20 T delavayi (van Tiegh .) Dans 10 M robinsonii (Gamble) Dans 21 T kwangtungensis (Merr .) Dans 11 M tricolor (Lecomte) Dans. .. duclouxii (Lecomte) Dans T yadoriki Dans T kaempferi Dans T sutchuenensis (Lecomte) Dans T nigrans (Hance) Dans T kaempferi Dans TL TK [73] [61] [61] [73] [74] [61] T chinensis (DC. ) Dans [10]... duclouxii (Lecomte) Dans T sutchuenensis (Lecomte) Dans [73] [73] Cõy Cõy Cõy Cõy Cõy T kaempferi Dans T yadoriki Dans T kaempferi Dans T sutchuenensis (Lecomte) Dans T sutchuenensis (Lecomte) Dans