TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM NGUYỄN THỊ LÝ HẰNG LT08175 KHẢO SÁT MỘT SỐ YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP ENZYME PECTIN METHYLESTERASE TRÊN MÔI TRƯỜNG LỎNG TỪ Aspergillus niger LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Cần Thơ, 2010 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Luận văn tốt nghiệp Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Tên đề tài: KHẢO SÁT MỘT SỐ YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP ENZYME PECTIN METHYLESTERASE TRÊN MÔI TRƯỜNG LỎNG TỪ Aspergillus niger Giáo viên hướng dẫn: Ts Lý Nguyễn Bình Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Lý Hằng MSSV: L08175 Lớp: CNTP 34 LT Cần Thơ, 2010 Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ Luận văn đính kèm đây, với tựa đề tài: “Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase môi trường lỏng từ Aspergillus niger” Nguyễn Thị Lý Hằng thực báo cáo hội đồng chấm luận văn thông qua Giáo viên hướng dẫn Ts Lý Nguyễn Bình Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm i Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ LỜI CẢM ƠN Xin gửi lòng biết ơn đến thầy Lý Nguyễn Bình tận tình hướng dẫn giúp đỡ hoàn thành luận văn tốt nghiệp Xin chân thành cảm ơn quí thầy cô Trường Đại học Cần Thơ, đặc biệt quý thầy cô Bộ môn Công nghệ Thực phẩm tận tình giảng dạy truyền đạt cho kiến thức kinh nghiệm bổ ích suốt trình học tập Trường Chân thành cảm ơn tập thể cán phòng thí nghiệm Bộ môn Công nghệ Thực phẩm tạo điều kiện cho hoàn thành đề tài nghiên cứu Xin gửi lời cảm ơn chân thành đến anh chị cao học, đặc biệt chị Mai Thiên Hương giúp đỡ truyền đạt cho nhiều kinh nghiệm quí báu suốt thời gian thực luận văn Cảm ơn bạn lớp Công nghệ Thực phẩm hỗ trợ, góp ý học tập, chia sẻ kinh nghiệm quý báu trình học tập Trường Chân thành cảm ơn! Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm ii Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ TÓM LƯỢC Enzyme pectin methylesterase (PME) enzyme ứng dụng nhiều ngành thực phẩm nhờ khả phân cắt pectin Với mục tiêu nghiên cứu để tìm điều kiện thích hợp để sản xuất PME từ nguồn vi sinh vật, đề tài tiến hành “Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase môi trường lỏng từ Aspergillus niger” Thí nghiệm tiến hành khảo sát ảnh hưởng mật số nấm mốc Aspergillus niger (102, 103, 104, 105 CFU/ml); điều kiện môi trường nuôi cấy pH (3,0; 3,5; 4,0; 4,5 5,0) khoảng thời gian khác (64, 88, 112, 136 giờ) ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase Qua trình nghiên cứu kết thu được: mật số nấm mốc ban đầu 105 CFU/ml, pH môi trường nuôi cấy 4,0 ÷ 4,5 thời gian 88 thu chế phẩm enzyme có hoạt tính cao Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm iii Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ii TÓM LƯỢC iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH HÌNH vi DANH SÁCH BẢNG vii CHƯƠNG I GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu CHƯƠNG II LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung 2.1.1 Enzyme pectinmethylesterase 2.1.2 Cấu trúc pectin methylesterase 2.1.3 Trung tâm hoạt động PME 2.2 Tính chất kiểu hoạt động pectin methylesterase 2.2.1 Tính chất 2.2.2 Cơ chế hoạt động thủy phân 2.3 Nguồn tổng hợp pectin methylester từ vi sinh vật 2.4 Hoạt độ enzyme 2.4.1 Phương pháp xác định hoạt độ enzyme 2.4.2 Đơn vị hoạt độ enzyme 2.4.3 Một số lưu ý xác định hoạt độ hay thực phản ứng enzyme 2.4.4 Ý nghĩa việc nghiên cứu động học enzyme 10 2.5 Sản xuất pectin methylesterase từ nấm mốc Aspergillus niger 10 2.5.1 Giới thiệu sơ lược giống vi sinh vật 10 2.5.2 Môi trường nuôi cấy 11 2.5.3 Cơ chất cảm ứng (pectin) 12 2.5.4 Phương pháp nuôi cấy chìm (phương pháp nuôi cấy bề sâu) 14 2.5.5 Thu nhận enzyme 15 2.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến khả tổng hợp enzyme pectin methylesterase 16 Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm iv Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ 2.6.1 Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng nuôi cấy 16 2.6.2 pH môi trường 16 2.6.3 Thời gian nuôi 16 2.6.4 Nhiệt độ 17 2.6.5 Nguồn khoáng dinh dưỡng 17 2.6.6 Hàm lượng oxy hòa tan 17 2.7 Một số nghiên cứu sản xuất enzyme pectin methylesterase 17 2.8 Ứng dụng enzyme pectin methylesterase 19 2.8.1 Ứng dụng chế biến thực phẩm 19 2.8.2 Ứng dụng ngành công nghiệp khác 20 CHƯƠNG III PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 3.1 Phương tiện nghiên cứu 22 3.1.1 Địa điểm thời gian thực 22 3.1.2 Nguyên liệu hóa chất 22 3.1.3 Dụng cụ thiết bị 22 3.2 Nội dung nghiên cứu 25 CHƯƠNG IV KẾT QUẢ THẢO LUẬN 28 4.1 Kết khảo sát ảnh hưởng mật số nấm mốc Aspergillus niger ban đầu đến khả sinh tổng hợp pectin methylesterase 28 4.2 Kết khảo sát pH môi trường nuôi cấy ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp pectin methylesterase 29 4.3 Kết khảo sát thời gian nuôi cấy ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp pectin methylesterase 30 4.4 Kết tổng hợp ảnh hưởng mật số nấm mốc Aspergillus niger điều kiện môi trường nuôi cấy (pH thời gian) đến khả tổng hợp PME 32 CHƯƠNG V KẾT LUẬN – ĐỀ NGHỊ 36 5.1 Kết luận 36 5.2 Đề nghị 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 PHỤ LỤC viii Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm v Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Sơ đồ thủy phân pectin PME Hình 2.2 Sự phân cắt nhóm carboxyl tự Hình 2.3 Cấu trúc bậc II PME từ E chrysanthemi, cà chua cà rốt Hình 2.4 Trung tâm hoạt động PME cà rốt, chất đơn vị acid methyl-ester Dgalacturonic gắn vào trung tâm hoạt động Hình 2.5 Sự thủy phân pectin xúc tác PME Hình 2.6 Hình dạng nấm Aspergillus niger 10 Hình 2.7 Mô tả vách tế bào thực vật 12 Hình 2.8 Cấu tạo pectin… 13 Hình 3.1 Máy khuấy từ gia nhiệt 23 Hình 3.2 Tủ cấy 23 Hình 3.3 Máy chuẩn độ acid-bazơ 785 TITRINO 23 Hình 3.4 Thiết bị trùng Autoclave 23 Hình 3.5 Tủ ủ 24 Hình 3.6 Máy lắc 24 Hình 3.7 Máy vortex 24 Hình 3.8 Cân điện tử 24 Hình 3.9 Qui trình thí nghiệm sản xuất chế phẩm enzyme pectin methylesterase 27 Hình 4.1 Mẫu sau trùng 31 Hình 4.2 Chế phẩm enzyme thô 31 Hình 4.3 Đồ thị thể hoạt tính PME trung bình theo mật số nấm mốc ban đầu, pH thời gian nuôi cấy 35 Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm vi Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ DANH SÁCH BẢNG Bảng 4.1: Hoạt tính PME trung bình theo mật số nấm mốc ban đầu 28 Bảng 4.2: Hoạt tính PME trung bình theo pH môi trường nuôi cấy 29 Bảng 4.3: Hoạt tính PME trung bình theo thời gian nuôi cấy 30 Bảng 4.4: Hoạt tính PME trung bình theo mật số nấm mốc ban đầu, pH thời gian nuôi cấy 32 Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm vii Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ CHƯƠNG I GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề Enzyme chất xúc tác sinh học, có chất protein có ý nghĩa đặc biệt quan trọng cho trình sinh trưởng, sinh sản sinh vật Hơn enzyme có nguồn gốc tự nhiên không độc giúp cho phản ứng xảy với vận tốc nhanh gấp 108 - 1011 lần tạo tiện lợi tối đa trình sản xuất nên ứng dụng rộng rãi chế biến thực phẩm Nghiên cứu sản xuất enzyme ứng dụng enzyme phát triển mạnh từ kỷ XX đến Ngày nay, với phát triển mạnh mẽ công nghệ sinh học, chế phẩm enzyme sản xuất nhiều sử dụng hầu hết lĩnh vực như: công nghiệp, nông nghiệp, chăn nuôi, y tế… số đó, ngành công nghiệp thực phẩm lĩnh vực có lượng tiêu thụ enzyme nhiều Đối với nước nông nghiệp Việt Nam việc ứng dụng enzyme vào ngành công nghiệp thực phẩm vấn đề cần quan tâm Và enzyme pectin methylesterase xem enzyme then chốt trình sản xuất sản phẩm từ rau Đặc biệt enzyme pectin methylesterase (PME) có tác dụng to lớn ngành công nghiệp đồ uống sản xuất rượu vang, sản xuất nước nước uống cồn, sản xuất nước giải khát, sản xuất cà phê cà phê hòa tan… PME thu từ động vật, thực vật vi sinh vật Tổng hợp enzyme từ vi sinh vật lựa chọn hàng đầu so với từ động vật thực vật có nhiều ưu điểm: - Tốc độ sinh sản mạnh - Enzyme thu có hoạt tính cao - Nguồn nguyên liệu dùng sản xuất enzyme từ vi sinh vật rẻ tiền dễ kiếm, phế phẩm số trình sản xuất - Tổng hợp enzyme từ vi sinh vật thích hợp cho sản xuất theo quy mô công nghiệp - Một loại vi sinh vật tổng hợp lúc nhiều loại enzyme khác Với hi vọng đề qui trình sản xuất theo qui mô công nghiệp nguồn enzyme có hoạt tính cao giá thành thấp đáp ứng nhu cầu thị trường nước xuất khẩu, tiến hành thực đề tài “Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase môi trường lỏng từ Aspergillus niger” Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ Kết Bảng 4.3 cho thấy, hiệu thu nhận enzyme tăng dần theo thời gian nuôi Sau thời gian nuôi cấy 88 giờ, 112 136 hoạt tính enzyme PME thu cao (lần lượt 1,56, 1,61 1,54 U/ml) không khác biệt ý nghĩa mức 5% Ở 64 giờ, hoạt tính enzyme thấp (1,25 U/ml), khác biệt có ý nghĩa mức 5% so với mẫu thời gian khác Thời gian nuôi cấy nhân tố định hoạt tính enzyme cao hay thấp, hoạt tính enzyme thu phụ thuộc vào phát triển tế bào nấm mốc Ứng với thời gian nuôi 64 giờ, nấm mốc Aspergillus niger giai đoạn bắt đầu thích nghi với điều kiện môi trường nên chúng chưa tăng mật số đáng kể, trình sinh tổng hợp enzyme giai đoạn khởi đầu nên hiệu suất hoạt tính PME thu thấp Ứng với thời gian 88 nấm mốc giai đoạn tăng trưởng mạnh chúng hoàn toàn thích nghi với điều kiện môi trường gia tăng mật số mức tối đa đồng thời việc tổng hợp enzyme tăng thời điểm tốt thu chế phẩm enzyme Ngoài ra, để thu enzyme hoạt tính cao người ta thường ngưng thời kỳ nấm mốc bắt đầu tạo bào tử, thời kỳ bào tử già hoạt tính enzyme thường giảm rõ rệt (Nguyễn Đức Lượng, 2001) Nếu thời gian kéo dài nấm mốc chuyển sang giai đoạn suy vong, số bào tử chết lớn số bào tử hình thành điều kiện chất cạn kiệt nên tăng trưởng (Lê Xuân Phương, 2007) Do tiếp tục kéo dài thời gian nuôi cấy nấm mốc không khả sinh enzyme theo mong muốn làm hoạt tính PME có xu hướng giảm Ở mức thời gian 112 hoạt tính enzyme tăng không đáng kể Do mục đích kinh tế nên rút ngắn thời gian nuôi để giảm chi phí Vì vậy, thời gian nuôi cấy 88 thích hợp Hình 4.1 Mẫu sau trùng Hình 4.2 Chế phẩm enzyme thô Hình 4.1 Hình 4.2 thể thay đổi mẫu sau trùng qua khoảng thời gian nuôi cấy nấm mốc Aspergillus niger thu chế phẩm enzyme thô Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm 31 Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ 4.4 Kết tổng hợp ảnh hưởng mật số nấm mốc Aspergillus niger điều kiện môi trường nuôi cấy (pH thời gian) đến khả tổng hợp PME Quá trình sinh tổng hợp PME Aspergillus niger phụ thuộc vào nhiều yếu tố, yếu tố có ảnh hưởng riêng lượng hoạt tính enzyme tạo thành Bảng 4.4 thể ảnh hưởng yếu tố tương tác yếu tố đến trình sinh tổng hợp enzyme Bảng 4.4 Hoạt tính PME trung bình theo mật số nấm mốc ban đầu, pH thời gian nuôi cấy Mật số (CFU/ml) pH 3,0 3,5 102 4,0 4,5 5,0 103 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 Thời gian (giờ) 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm Mẫu 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 Hoạt tính PME trung bình (U/ml) 0,51qr 0,58 pqr 0,63 opqr 0,29 r 0,38 r 0,36 r 0,51 qr 0,36 r 0,48 qr 0,33 r 0,39 r 0,41 r 0,35 r 0,28 r 0,43 qr 0,39 qr 0,24 r 0,47 qr 0,53 qr 0,57 pqr 0,72 opqr 0,43 qr 0,55 qr 0,51 qr 0,55 pqr 0,36 r 0,63 opqr 0,45 qr 0,97 nopqr 0,41 r 0,41 r 0,48 qr 0,59 pqr 0,50 qr 0,35 r 0,38 r 0,32 r 32 Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 3,0 3,5 104 4,0 4,5 5,0 3,0 3,5 105 4,0 4,5 5,0 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 64 88 112 136 Đại học Cần Thơ 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 0,47 qr 0,42 r 0,32 r 0,57 pqr 0,42 r 0,47 qr 0,56 pqr 1,43mnopq 1,83 iklmn 1,61 klnmo 0,73 opqr 2,55 fghik 2,98 ef 4,66 abc 3,73 cde 1,76 klnm 2,39 fghiklm 3,23 def 4,11 bcd 1,89 hiklmn 2,61 fghik 1,96 ghiklmn 2,81 efghi 0,53 qr 0,54 qr 0,59 pqr 0,60 pqr 2,29 fghiklm 2,86 efgh 1,55 lmnop 1,11 nopqr 2,86 efgh 4,09 bcd 5,01 ab 4,22 abcd 3,08 ef 4,85 ab 5,22 a 4,60 abc 2,86 efgh 4,49 abc 2,96 efg 4,22 abcd Ghi chú: số mang chữ số mũ khác cột sai khác có ý nghĩa thống kê (P[...]...Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ 1.2 Mục tiêu nghiên cứu Đề tài nghiên cứu nhằm khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng tổng hợp enzyme pectin methylesterase trên môi trường lỏng từ Aspergillus niger với các mục tiêu sau: - Xác định mật số nấm mốc Aspergillus niger thích hợp trên một khối lượng mẫu cho quá trình sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase là cao nhất... đích: Xác định mật số nấm mốc Aspergillus niger thích hợp trên một khối lượng mẫu cho quá trình sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase là cao nhất Xác định điều kiện môi trường pH nuôi cấy thích hợp cho quá trình sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase từ Aspergillus niger Xác định thời gian nuôi cấy thích hợp cho quá trình sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase từ Aspergillus niger - Chỉ tiêu... vào nhiều yếu tố, mỗi yếu tố có những ảnh hưởng riêng đối với lượng cũng như hoạt tính enzyme tạo thành Các yếu tố bao gồm mật số vi sinh vật ban đầu, pH môi trường nuôi cấy, thời gian nuôi cấy… có vai trò quyết định hoạt tính của enzyme PME Thí nghiệm: Khảo sát ảnh hưởng của mật số nấm mốc Aspergillus niger và điều kiện môi trường nuôi cấy (pH và thời gian) đến khả năng tổng hợp enzyme pectin methyleterase... Các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng tổng hợp enzyme pectin methylesterase 2.6.1 Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng nuôi cấy Đặc điểm chung của mọi môi trường nuôi vi sinh vật thu pectinase là có mặt chất cảm ứng: pectin từ vỏ bưởi hoặc từ nguồn khác Ngoài ra, tỷ lượng giữa carbon và nitơ trong môi trường, tính cân bằng của môi trường dinh dưỡng về carbon và nitơ có ý nghĩa lớn đối vối sinh tổng hợp sinh. .. điều kiện môi trường pH nuôi cấy thích hợp cho quá trình sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase từ Aspergillus niger - Xác định thời gian nuôi cấy thích hợp cho quá trình sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase từ Aspergillus niger Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm 2 Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ CHƯƠNG II LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung 2.1.1 Enzyme pectinmethylesterase... phần môi trường và các tế bào vi sinh vật không lắng nhằm làm tăng khả năng tiếp xúc của vi sinh vật và thành phần môi trường, từ đó làm tăng khả năng trao đổi chất của trao đổi chất của vi sinh vật góp phần làm tăng lượng enzyme tổng hợp Mặt khác, khuấy trộn làm tăng khả năng hòa tan oxy không khí vào trong môi trường (Nguyễn Đức Lượng et al., 2004) 2.7 Một số nghiên cứu về sản xuất enzyme pectin methylesterase. .. một thời gian, vi sinh vật có thể tổng hợp một lượng enzyme hơn hẳn so với động - thực vật Chuyên ngành Công nghệ Thực phẩm 6 Luận văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ - Hoạt tính enzyme được tổng hợp từ vi sinh vật cao hơn hoạt tính enzyme được tổng hợp từ động vật và thực vật Ưu điểm này gắn liền với tốc độ chuyển hóa cơ chất và tốc độ tăng sinh khối của vi sinh vật - Tổng hợp enzyme từ. .. tố đa vi lượng có ảnh hưởng lớn tới sinh trưởng và tổng hợp enzyme của vi sinh vật Phospho cần để tổng hợp các hợp phần quan trọng của sinh chất (acid nucleic phospholipide) và nhiều coenzyme, đồng thời để phosphoril hoá glucid trong quá trình oxy hoá sinh học Phospho ảnh hưởng trực tiếp tới sinh sản của nấm sợi và các vi sinh vật khác Mg2+ có ảnh hưởng đến độ bền nhiệt của enzyme MgSO4 sẽ có ảnh hưởng. .. cacboxylic 2.3 Nguồn tổng hợp pectin methylester từ vi sinh vật Nguồn PME được sử dụng nhiều nhất trong các chế phẩm pectinase thương mại là PME từ vi sinh vật Sinh tổng hợp enzyme từ vi sinh vật có những ưu thế như sau: - Vi sinh vật có tốc độ sinh sản rất nhanh Nhiều nghiên cứu cho thấy trong một ngày đêm, tốc độ tạo sinh khối của vi sinh vật cao gấp hàng ngàn lần so với tốc độ tăng sinh khối của động... sinh tổng hợp sinh khối vi sinh vật và sự tạo thành enzyme, đồng thời các nguồn khoáng dinh dưỡng phải phù hợp đảm bảo cho sự sinh enzyme ở mức tối ưu 2.6.2 pH môi trường Độ pH môi trường có một ý nghĩa rất lớn nên chọn pH phù hợp với chủng vi sinh vật và sự tổng hợp enzyme theo mong muốn pH ban đầu của môi trường có ảnh hưởng không nhỏ tới sự phát triển của nấm mốc và sự tạo ra enzyme (Trần Xuân Ngạch, ... Kết khảo sát ảnh hưởng mật số nấm mốc Aspergillus niger ban đầu đến khả sinh tổng hợp pectin methylesterase 28 4.2 Kết khảo sát pH môi trường nuôi cấy ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp pectin. .. cứu nhằm khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến khả tổng hợp enzyme pectin methylesterase môi trường lỏng từ Aspergillus niger với mục tiêu sau: - Xác định mật số nấm mốc Aspergillus niger thích hợp khối... văn tốt nghiệp Đại học năm 2010 Đại học Cần Thơ Luận văn đính kèm đây, với tựa đề tài: Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp enzyme pectin methylesterase môi trường lỏng từ Aspergillus