Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Luận văn tốt nghiệp Ngành: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BƯỚC ĐẦU PHÂN LẬP NẤM MEN TỪ KHÓM TRỒNG Ở HẬU GIANG (LONG MỸ, VỊ THANH) VÀ KIÊN GIANG (GÒ QUAO) Giáo viên hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Minh Thủy Sinh viên thực hiện: Phạm Kiều Thư MSSV: 2071842 Lớp: CNTP2 K33 Cần Thơ, 2011 Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang1 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 LỜI CAM ĐOAN Luận văn đính kèm theo với đề tài “Bước đầu phân lập nấm men từ khóm trồng Hậu Giang (Vị Thanh, Long Mỹ) Kiên Giang (Gò Quao)” sinh viên Phạm Kiều Thư thực báo cáo hội đồng chấm luận văn thông qua Giáo viên hướng dẫn PGS TS Nguyễn Minh Thủy Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang ii Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 LỜI CẢM ƠN Luận văn tốt nghiệp hoàn thành nhờ nỗ lực thân, giúp đỡ gia đình, thầy cô bạn bè Con xin gửi đến ba mẹ - người thân yêu lòng biết ơn sâu sắc mà người làm cho con, để có đầy đủ điều kiện học tập nghiên cứu Xin chân thành cảm ơn cô Nguyễn Minh Thủy tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành luận văn Xin cảm ơn thầy cô cán Bộ môn Công nghệ Thực phẩm, Khoa Nông nghiệp & Sinh học Ứng dụng, cán quản lý phòng thí nghiệm Công nghệ sinh học thực phẩm, Viện nghiên cứu phát triển Công nghệ sinh học, Trường Đại học Cần Thơ giảng dạy, truyền đạt kiến thức, nhiệt tình hỗ trợ giúp đỡ em suốt thời gian học tập hoàn thành luận văn Xin gửi lời cảm ơn đến chị Trần Thị Quế, anh Nguyễn Phú Cường anh chị lớp Cao học Công nghệ sinh học K15 K16 bạn lớp công nghệ thực phẩm K33 giúp đỡ, động viên, đóng góp ý kiến thực luận văn Chân thành cảm ơn! Cần Thơ, ngày tháng năm 2011 Học viên thực Phạm Kiều Thư Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang iii Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ TÓM LƯỢC Với mục đích tìm dòng nấm men chủng giống khóm Queen, nghiên cứu phân lập nấm men từ khóm Kiên Giang (Gò Quao) Hậu Giang (Long Mỹ, Vị Thanh) thực Nước ép khóm sau chuẩn hóa pH 4,5 22oBrix ủ nhiệt độ phòng khoảng 24 Pha loãng dịch khóm nước cất tiệt trùng cấy gạt lên đĩa Petri có sẵn môi trường PGA (Potato Glucose Agar) Chọn khuẩn lạc tách rời để cấy chuyền Quan sát hình dạng, kích thước, màu sắc khuẩn lạc hình dạng, kích thước nấm men thu dòng chủng Kết nghiên cứu thu nhận 15 dòng nấm men từ khóm địa điểm: Gò Quao – Kiên Giang, Vị Thanh – Hậu Giang, Long Mỹ - Hậu Giang với hình dạng hình ống lớn, ống nhỏ, ovan lớn, ovan nhỏ, elip lớn, elip nhỏ, elip dài, elip nhọn Từ khóa: nấm men, khóm, phân lập Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang iv Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii TÓM LƯỢC iii MỤC LỤC .iv DANH SÁCH BẢNG vi DANH SÁCH HÌNH vii DANH SÁCH KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT .viii CHƯƠNG MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục tiêu nghiên cứu .1 CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU .2 2.1 Giới thiệu khóm 2.2 Nấm men .4 2.2.1 Hình thái cấu tạo nấm men 2.2.2 Sinh lý nấm men 2.2.3 Sự sinh sản nấm men 2.3 Hệ vi sinh vật nước 2.3.1 Giống Saccharomyces Meyen .7 2.3.2 Một số nấm men gây hại cho sản phẩm lên men 10 2.3.3 Nấm mốc vầ vi khuẩn 12 2.4 Yêu cầu chọn nấm men chủng 12 2.5 Phân lập giống vi sinh vật 12 2.6 Nghiên cứu hình thái tế bào nấm men 13 2.6.1 Quan sát đặc tính nuôi cấy 13 2.6.2 Quan sát hình thái tế bào nấm men đo kích thước 13 2.7 Một số nghiên cứu phân lập nấm men 14 CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Phương tiện nghiên cứu 16 Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang v Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ 3.1.1 Địa điểm, thời gian 16 3.1.2 Thiết bị dụng cụ 16 3.1.3 Nguyên liệu hóa chất 16 3.2 Phương pháp nghiên cứu .17 CHƯƠNG KẾT QUẢ - THẢO LUẬN 20 4.1 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm xã Vĩnh Hòa Hưng Nam Gò Quao – Kiên Giang .20 4.2 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm xã Vĩnh Viễn A - Long Mỹ Hậu Giang 22 4.3 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm xã Hỏa Tiến - Vị Thanh Hậu Giang 25 CHƯƠNG KẾT LUẬN - ĐỀ NGHỊ 30 5.1 Kết luận 30 5.2 Đề nghị .30 TÀI LIỆU THAM KHẢO 31 Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang vi Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ DANH SÁCH BẢNG Bảng Tựa bảng Trang Các quốc gia có sản lượng khóm đứng đầu giới 2 Một số đặc tính trái khóm giống phổ biến Việt Nam 3 Thành phần hóa học 100g khóm tươi Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang vii Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 DANH SÁCH HÌNH Hình Tựa hình Trang Ba giống khóm khóm phổ biến Việt Nam Cấu tạo tế bào nấm men Tế bào nấm men Saccharomyces cerevisiae Tế bào nấm men Saccharomyces uvarum Tế bào nấm men (a) Saccharomyces chevalieri (b) Saccharomyces oviformis 10 Tế bào nấm men Hanseniaspora 10 Tế bào nấm men Pichia 11 Tế bào nấm men Candida 11 Một số thiết bị sử dụng đề tài 17 10 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 18 11 Tế bào nấm men phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang, (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 21 12 Khuẩn lạc dòng nấm men phân lập từ khóm Gò Quao– Kiên Giang 22 13 Tế bào nấm men phân lập từ khóm Long Mỹ - Hậu Giang, 24 (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 14 Khuẩn lạc nấm men phân lập từ khóm Long Mỹ - Hậu Giang 25 15 Tế bào nấm men phân lập từ khóm Vị Thanh - Hậu Giang, (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 27 16 Khuẩn lạc nấm men phân lập từ khóm Vị Thanh - Hậu Giang 28 Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang viii Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 DANH SÁCH KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Nội dung GQ1 Dòng nấm men hình ống phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang GQ2 Dòng nấm men hình ovan, khuẩn lạc láng khô phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang GQ3 Dòng nấm men hình ovan, khuẩn lạc láng ướt phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang GQ4 Dòng nấm men hình elip nhọn phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang LM1 Dòng nấm men hình ống phân lập từ khóm Long Mỹ - Hậu Giang LM2 Dòng nấm men hình ovan, khuẩn lạc rìa nguyên phân lập từ khóm Long Mỹ -Hậu Giang LM3 Dòng nấm men hình ovan, khuẩn lạc rìa cưa phân lập từ khóm Long Mỹ -Hậu Giang LM4 Dòng nấm men hình elip dài phân lập từ khóm Long Mỹ Hậu Giang LM5 Dòng nấm men hình elip nhọn phân lập từ khóm Long Mỹ Hậu Giang VT1 Dòng nấm men hình ống lớn phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang VT2 Dòng nấm men hình ovan nhỏ phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang VT3 Dòng nấm men hình ống nhỏ phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang VT4 Dòng nấm men hình elip lớn phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang VT5 Dòng nấm men hình elip nhỏ phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang VT6 Dòng nấm men hình elip dài phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang PGA Môi trường nuôi cấy Potato – Glucose – Agar Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang ix Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 CHƯƠNG 1- MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Khóm loại ăn trái quan trọng trồng rộng rãi vùng nhiệt đới bán nhiệt đới giới Quả khóm có mùi thơm mạnh, vị chua hài hòa, trái đẹp kể bên bên (Vũ Công Hậu, 2000) Khóm dễ trồng, cho suất cao, trồng thích hợp để phát triển nông nghiệp bền vững thích nghi với biến đổi khí hậu Nghiên cứu chế biến đa dạng sản phẩm từ khóm giúp ổn định đầu ra, tăng thu nhập cho bà nông hộ giảm tổn thất sau thu hoạch cho loại trồng Một sản phẩm triển vọng rượu vang khóm Ích lợi rượu vang nhắc đến chất hỗ trợ tiêu hóa, giúp ăn ngon miệng, giảm nguy mắc bệnh tim ung thư Nghiên cứu gần cho rượu vang có khả ngăn ngừa chứng suy não nữ giới Tuy nhiên sản xuất rượu vang khóm chủ yếu sử dụng men thị trường nên dẫn đến nhiều hạn chế độ cồn thấp, lượng đường sót cao,… Nấm men phân lập từ nguyên liệu sản xuất rượu vang cho sản phẩm có chất lượng ổn định, mùi vị đặc trưng với độ cồn cao đường sót thấp rượu lên men từ men thị trường (Bùi Thị Thúy Ngân, 2010) Vì việc phân lập cho dòng nấm men chủng từ khóm biện pháp nhằm nâng cao chất lượng rượu vang khóm, giúp cho sản phẩm với thương hiệu địa phương vươn rộng sánh vai với sản phẩm có thị trường 1.2 Mục tiêu nghiên cứu Phân lập chủng nấm men diện giống khóm Queen trồng Kiên Giang (Gò Quao) Hậu Giang (Long Mỹ, Vị Thanh) Với nội dung tách riêng chủng nấm men đưa dạng khiết từ quần thể vi sinh vật giống khóm Queen Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang1 Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ ngày Quan sát khuẩn lạc diện, dựa vào khác màu sắc, hình dạng, kích thước khuẩn lạc hình dạng, kích thước tế bào nấm men để phân loại dòng nấm men khác Cấy chuyền nhiều lần dòng nấm men lên môi trường PGA đạt dòng nấm men chủng Khi cấy chuyền áp dụng phương pháp cấy ria pha loãng khuẩn lạc nước cất tiệt trùng cấy gạt Khi thu dòng nấm men chủng, làm tiêu giọt ép để chụp hình đo kích thước tế bào Pha loãng khuẩn lạc nước cất tiệt trùng lần cấy gạt để tạo đĩa có khuẩn lạc tách rời Sau 48 nuôi cấy quan sát hình dạng, màu sắc đo kích thước khuẩn lạc Phương pháp chuẩn bị môi trường: • PGA (Potato Glucose Agar): khoai tây 20%, glucose 2%, agar 2%, (NH4)2SO4 0,2%, KH2PO4 0,2%, nước vừa đủ 100% Khoai tây xắt lát mỏng luộc nước cất khoảng 10 phút Sau đó, ta lọc lấy phần nước trong, cho agar, đường khoáng vào khuấy đều, microwave dịch agar tan hết Tiệt trùng môi trường 121oC 15 phút • Môi trường bảo quản giống: sử dụng môi trường Sabouraud tổng hợp, cân 65g môi trường lít nước cất, phối trộn hòa tan với nhau, phân phối vào 1/3 thể tích ống nghiệm, khử trùng 115oC 10 phút, để nghiêng ống nghiệm tạo ống thạch nghiêng Trữ nấm men 4-10oC, cấy chuyền tháng/lần d Chỉ tiêu theo dõi: • Quan sát hình dạng, màu sắc, kích thước khuẩn lạc diện môi trường dinh dưỡng mắt thường • Quan sát hình dạng, kích thước tế bào nấm men kính hiển vi Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 19 Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Với đặc điểm phát triển khuẩn lạc môi trường PGA cho thấy sau lần cấy gạt có khác biệt rõ khuẩn lạc nấm mốc, nấm men vi khuẩn Khuẩn lạc nấm mốc thường to có sợi lan mạnh có màu đen, trắng ; khuẩn lạc vi khuẩn láng ướt, nhỏ, màu vàng, đỏ Trong khuẩn lạc nấm men thường có màu trắng, tròn, trương cao, bề mặt trơn láng Tuy nhiên chọn khuẩn lạc để cấy chuyền, không nên bỏ qua khuẩn lạc có hình dạng đặc biệt bề mặt sần khô, lan rộng thành mảng lớn, Sau khuẩn lạc đĩa tương đối đồng đều, tiến hành quan sát tế bào nấm men kính hiển vi để loại bớt dòng giống nhau, chọn đĩa có dòng men lẫn vào để dễ tách ròng Quan sát hình dáng tế bào khuẩn lạc thường xuyên để tránh dòng 4.1 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm xã Vĩnh Hòa Hưng Nam - Gò Quao – Kiên Giang Kết cho thấy phân lập dòng nấm men từ khóm Gò Quao – Kiên Giang (hình 11 hình 12) với đặc điểm hình thái: GQ1: nấm men hình ống có kích thước 3,4 x 10,2 µ m với khuẩn lạc tròn, trắng mốc, sần khô, tâm nhô cao, rìa cưa có sợi lan ra, 4,8 mm GQ2: nấm men hình ovan, 6,8 x 10,2 µ m với khuẩn lạc tròn, trắng đục, láng khô, rìa nguyên, tâm nhô có vòng tròn đồng tâm, mm GQ3: nấm men hình ovan, 5,1 x 8,5 µ m với khuẩn lạc tròn, trắng kem, láng ướt, rìa nguyên, trương cao 2,75 mm GQ4: nấm men hình elip nhọn 3,4 x 8,5 µ m với khuẩn lạc tròn, rìa cưa, trắng sữa, tâm đục, láng ướt, 3,4 mm Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 20 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 GQ1a GQ1b GQ2a GQ2b GQ3a GQ3b GQ4a GQ4b Hình 11 Tế bào nấm men phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang, (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 21 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 GQ1 GQ3 GQ2 GQ4 Hình 12 Khuẩn lạc dòng nấm men phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang Như từ khóm Gò Quao – Kiên Giang phân lập dòng nấm men hình ống, hình ovan, hình elip nhọn, kích thước trung bình từ 3,4-6,8 x 8,5-10,2 µ m Hình dáng kích thước nấm men thu tương đồng với tài liệu mô tả dòng nấm men Lương Đức Phẩm (2006) Theo Nguyễn Xuân Thành (2007), khuẩn lạc dòng tế bào sinh môi trường đặc nhờ sinh sản vô tính từ tế bào ban đầu GQ2 GQ3 có hình dạng kích thước tế bào tương tự khuẩn lạc GQ2 láng khô GQ3 láng ướt, ghi nhận dòng nấm men khác hình ovan 4.2 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm xã Vĩnh Viễn A - Long Mỹ - Hậu Giang Với nguồn khóm thu hoạch xã Vĩnh Viễn A - Long Mỹ - Hậu Giang phân lập dòng nấm men (hình 13 hình 14) với đặc điểm hình thái: LM1: nấm men hình ống 3,4 x 11,9 µ m với khuẩn lạc tròn, trắng kem, rìa cưa có sợi lan ra, tâm đục nhô cao, sần khô, 5,3 mm LM2: nấm men hình ovan 5,1 x 8,5 µ m với khuẩn lạc tròn, rìa nguyên, láng khô, trắng đục, trương cao 3,2 mm Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 22 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 LM3: nấm men hình ovan 6,8 x 8,5 µ m với khuẩn lạc tròn, trắng kem, rìa cưa, láng khô kích thước 2,5 m LM4: nấm men hình elip dài 5,1 x 13,6 µ m với khuẩn lạc tròn, rìa cưa, trắng đục, láng khô, kích thước 2,75 mm LM5: nấm men hình elip nhọn 1,7 x 8,5 µ m với khuẩn lạc tròn, rìa cưa, trắng trong, láng ướt 2,75 mm LM1a LM1b LM2a LM2b LM3a LM3b Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 23 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 LM4a LM4b LM5a LM5b Hình 13 Tế bào nấm men phân lập từ khóm Long Mỹ - Hậu Giang, (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 Với khóm Long Mỹ - Hậu Giang phân lập dòng nấm men hình ống, ovan, elip dài, elip nhọn, kích thước trung bình 1,7- 6,8 x 8,5-13,6 µ m Khuẩn lạc dòng LM2 có rìa nguyên, khuẩn lạc dòng LM3 có rìa cưa nên ghi nhận dòng nấm men hình ovan Kết thu nhiều khóm Gò Quao – Kiên Giang dòng nấm men hình elip dài Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 24 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 LM1 LM2 LM3 LM4 LM5 Hình 14 Khuẩn lạc nấm men phân lập từ khóm Long Mỹ - Hậu Giang 4.3 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm xã Hỏa Tiến - Vị Thanh Hậu Giang Khác với địa điểm trên, phân lập nấm men từ khóm xã Hỏa Tiến - Vị Thanh - Hậu Giang phân lập dòng nấm men (hình 15 hình 16): VT1: nấm men hình ống, 3,4 x 11,9 µ m, khuẩn lạc tròn, rìa cưa, trắng kem, sần khô, tâm tâm đục nhô cao, kích thước mm VT2: nấm men hình ovan nhỏ, 3,7 x 4,4 µ m, khuẩn lạc tròn, rìa nguyên, trắng kem, láng ướt, tâm đục 3,2 mm Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 25 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 VT3: nấm men hình ống nhỏ, x 7,4 µ m, khuẩn lạc tròn, rìa cưa, trắng kem, khô, tâm đục nhỏ không trương, 6,7mm VT4: nấm men hình elip lớn, 3,7 x 7,4 µ m, khuẩn lạc tròn, rìa cưa, trắng đục, có vòng tròn đồng tâm, tâm đục nhô cao, 5,5 mm VT5: nấm men hình elip nhỏ, 2,2 x 5,2 µ m, khuẩn lạc tròn, rìa nguyên, trắng đục, láng khô, tâm đục nhỏ nhô cao, 2,2 mm VT6: nấm men hình elip dài, 2,2 x 7,4 µ m, khuẩn lạc tròn, rìa cưa, trắng đục, láng khô, tâm đục nhô cao 4,5mm VT1a VT1b VT2a VT2b VT3a VT3b Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 26 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 VT4a VT5a VT6a VT4b VT5b VT6b Hình 15 Tế bào nấm men phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang, (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 Kết phân lập cho thấy từ khóm Cầu Đúc Vị Thanh, Hậu Giang thu dòng nấm men hình ống lớn, ống nhỏ, ovan nhỏ, elip lớn, elip nhỏ, elip dài kích thước trung bình 2,2-3,7 x 4,4-11,9 µ m Như so với địa điểm nấm men khóm Cầu Đúc không khác nhiều kích thước, nấm men nhọn đầu lại có nhiều dòng hình elip Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 27 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 VT1 VT2 VT3 VT4 VT5 VT6 Hình 16 Khuẩn lạc nấm men phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang Như vậy, từ nguồn khóm thu hoạch địa điểm khác hai tỉnh Hậu Giang Kiên Giang (với nguồn), thu 15 dòng nấm men với với hình dạng hình ống lớn, ống nhỏ, ovan lớn, ovan nhỏ, elip lớn, elip nhỏ, elip dài, elip nhọn Những dòng nấm men có hình dạng tế bào giống thường có vài đặc điểm tương tự (màu sắc bề mặt khuẩn lạc, ) không hoàn toàn trùng khớp tất tiêu Kết phân lập cho thấy địa điểm lấy mẫu có ảnh hưởng lớn đến hình dáng, kích thước số dòng nấm men thu Kết thích hợp với nghiên cứu Pretorius (2000) thực phân lập nấm men nho Tác giả cho số lượng loại nấm men diện nho phụ thuộc vào nhiều Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 28 Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ yếu tố loại nho, độ tuổi vườn nho, đất trồng, ảnh hưởng khí hậu (nhiệt độ, lượng mưa, ), kỹ thuật trồng trọt, kỹ thuật thu hoạch, bảo quản, hư hỏng vật lý nấm mốc, côn trùng lượng loại thuốc hóa học sử dụng (Elena Di Maro et al, 2007) Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 29 Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Tổng hợp kết nghiên cứu cho thấy thu nhận 15 dòng nấm men với hình dạng hình ống lớn, ống nhỏ, ovan lớn, ovan nhỏ, elip lớn, elip nhỏ, elip dài, elip nhọn phân lập nấm men từ giống khóm Queen địa điểm khác nhau: xã Vĩnh Hòa Hưng Nam - Gò Quao - Kiên Giang, xã Vĩnh Viễn A - Long Mỹ Hậu Giang xã Hỏa Tiến - Vị Thanh - Hậu Giang Địa điểm lấy mẫu có ảnh hưởng lớn đến hình dáng, kích thước số dòng nấm men thu 5.2 Đề nghị Phân lập nấm men nước khóm không chuẩn pH, Brix Định danh dòng nấm men tìm tuyển chọn nấm men có hoạt tính lên men tốt So sánh chất lượng rượu vang khóm lên men từ nấm men phân lập khóm nấm men phân lập nước nốt Nghiên cứu kết hợp dòng nấm men phân lập có hoạt tính tốt để nâng cao chất lượng rượu vang Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 30 Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Thị Thúy Ngân (2010), Phân lập tuyển chọn nấm men từ nươc nốt huyện Tịnh Biên, tỉnh An Giang- Luận văn Thạc sĩ, Đại học Cần Thơ Đường Hồng Dật (2003), Cây dứa kỹ thuật trồng dứa, NXB Lao Động Xã Hội Hà Văn Thuyết Trần Quang Bình (2000), Bảo quản rau trái tươi bán chế phẩm, NXB Nông nghiệp Lê Xuân Phương (2001), Vi sinh vật công nghiệp, NXB Xây dựng Lương Đức Phẩm (2006), Nấm men công nghiệp, NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Đức Lượng (2002), Công nghệ vi sinh tập – Vi sinh vật học công nghiệp, NXB Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Đức Lượng (2004), Công nghệ vi sinh vật tập – Cơ sở vi sinh vật công nghiệp, NXB Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Đức Lượng, Phan Thị Huyền, Nguyễn Ánh Tuyết (2003), Thí nghiệm Công nghệ sinh học tập II Thí nghiệm vi sinh vật học, NXB Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Minh Thủy (2010), Kỹ thuật sau thu hoạch rau quả, NXB Nông nghiệp Nguyễn Xuân Thành, Nguyễn Bá Hiên, Hoàng Hải, Vũ Thị Hoàn (2007), Giáo trình Vi sinh vật học công nghiệp, NXB Giáo dục Phạm Trường Thọ (2010), Cải thiện nâng cao chất lượng rượu vang khóm, Luận văn Đại học Cần Thơ Vũ Công Hậu (1996), Trồng ăn trái miền Nam, NXB Nông nghiệp Vũ Công Hậu (2000), Trồng ăn Việt Nam, NXB Nông nghiệp Tiếng Anh A.A Brooks (2008), Ethanol production potential of local yeast strains isolated from ripe banana peels, African Journal of Biotechnology Vol Boze H, Moulin G and Galzy P (1992), Production of fodder and fodder yeast, Review Biotechnology, pp 65-86 Elena Di Maro, Danilo Ecolini, Salvatore Coppola (2007), Yeast dynamics during spontaneous wine fermentation of the Catalanesca grape, International Journal of Food Microbiology Nwachukwu et al (2006), Characterisation of palm wine yeast isolates for industrial ultilization, African Journal of Biotechnology Vol Pretorious (2000), Tailoring wine yeast for the new millennium: Novel approaches to the ancient art of winemaking, pp 675-729 Teramoto Y., Sato R and Ueda S (2005), Characteristics of fermentation yeast isolated from traditionnal Ethiopian honey wine, ogol, African Journal of Biotechnology Vol Trang web Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 31 Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ (http://vietsciences.free.fr/khaocuu/nguyenlandung/nammen01.htm) ( http://www.biomedicalblog.com/transistors-used-to-detect-stds/6100/) ( http://en.wikipedia.org/wiki/Pineapple) ( http://mano.net/img/food/pineapple-Cayenne.jpg ( http://www.britannica.com/eb/art-6933/pineapple (http://www.oakleaf_european.co.uk/gallery.htm) (http://www.fao.org/inpho/content/compend/text/ch33/AE614e01.htm) ( http://www.sciencephoto.com/ =662501355) (http://www.amrita.ac.in/bioprojects/IndusMicroBio/microb%20_cultech/ cerevisiae.jpg) (http://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Beer_Fermentation_Tanks) (http://www.ac-nancy-metz.fr/presetab/…vinauraisin.htm) (http://www.sciencephoto.com/images/ =FUZZY ( http://www.jgi.doe.gov/education/bioenergy/bioenergy_6.html) (http://www.biomedicalblog.com/transistors-used-to-detect-stds/6100/) Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 32 Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trường Đại Học Cần Thơ Trang 33 [...]... Quao – Kiên Giang 1 dòng nấm men hình elip dài Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 24 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 LM1 LM2 LM3 LM4 LM5 Hình 14 Khuẩn lạc nấm men phân lập từ khóm ở Long Mỹ - Hậu Giang 4.3 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm xã Hỏa Tiến - Vị Thanh Hậu Giang Khác với 2 địa điểm trên, khi phân lập nấm men từ khóm ở xã... dòng nấm men khác nhau hình ovan 4.2 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm xã Vĩnh Viễn A - Long Mỹ - Hậu Giang Với nguồn khóm thu hoạch ở xã Vĩnh Viễn A - Long Mỹ - Hậu Giang có thể phân lập được 5 dòng nấm men (hình 13 và hình 14) với các đặc điểm hình thái: LM1: nấm men hình ống 3,4 x 11,9 µ m với khuẩn lạc tròn, trắng kem, rìa cưa có sợi lan ra, tâm đục nhô cao, sần khô, 5,3 mm LM2: nấm men. .. 11 Tế bào nấm men phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang, (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 21 Trường Đại Học Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 GQ1 GQ3 GQ2 GQ4 Hình 12 Khuẩn lạc của các dòng nấm men phân lập từ khóm Gò Quao – Kiên Giang Như vậy từ khóm Gò Quao – Kiên Giang có thể phân lập được 4 dòng nấm men hình... giống nhau, chọn đĩa có ít dòng men lẫn vào nhau hơn để dễ tách ròng Quan sát hình dáng tế bào và khuẩn lạc thường xuyên để tránh mất dòng 4.1 Đặc điểm hình thái nấm men phân lập từ khóm ở xã Vĩnh Hòa Hưng Nam - Gò Quao – Kiên Giang Kết quả cho thấy có thể phân lập được 4 dòng nấm men từ khóm Gò Quao – Kiên Giang (hình 11 và hình 12) với các đặc điểm hình thái: GQ1: nấm men hình ống có kích thước 3,4... bào nấm men phân lập từ khóm ở Vị Thanh – Hậu Giang, (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 Kết quả phân lập cho thấy từ khóm Cầu Đúc ở Vị Thanh, Hậu Giang có thể thu được 6 dòng nấm men hình ống lớn, ống nhỏ, ovan nhỏ, elip lớn, elip nhỏ, elip dài kích thước trung bình 2,2-3,7 x 4,4-11,9 µ m Như vậy so với 2 địa điểm trên thì nấm men trên khóm Cầu Đúc không khác nhiều về kích thước, không có nấm. .. Tế bào nấm men phân lập từ khóm ở Long Mỹ - Hậu Giang, (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 Với khóm ở Long Mỹ - Hậu Giang có thể phân lập được 5 dòng nấm men hình ống, ovan, elip dài, elip nhọn, kích thước trung bình 1,7- 6,8 x 8,5-13,6 µ m Khuẩn lạc của dòng LM2 có rìa nguyên, còn khuẩn lạc dòng LM3 có rìa cưa nên ghi nhận đây là 2 dòng nấm men hình ovan Kết quả thu được nhiều hơn trên khóm. .. Phân lập nhằm tách riêng các chủng nấm men và đưa về dạng thuần khiết từ quần thể vi sinh vật trên giống khóm Queen từ các nguồn khác nhau b Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với 1 nhân tố và 3 lần lặp lại A1: mẫu khóm ở xã Vĩnh Hòa Hưng Nam, huyện Gò Quao, Kiên Giang A2: mẫu khóm ở xã Vĩnh Viễn A, huyện Long Mỹ, Hậu Giang A3: khóm Cầu Đúc thuộc xã Hỏa Tiến, thị xã Vị Thanh,. .. protein, vitamin và lipid Nấm men dùng để sản xuất rượu bia, sản xuất protein, men bánh mì, gây hương nước chấm… (Lê Xuân Phương, 2001) 2.2.1 Hình thái và cấu tạo nấm men Hình thái nấm men Nấm men là vi sinh vật điển hình cho nhóm nhân thật, tế bào nấm men thường lớn gấp 10 lần vi khuẩn Nấm men có cấu tạo đơn bào, hình thái thay đổi tùy thuộc vào từng loài, tùy diều kiện nuôi cấy và trao đổi của ống... cảm quan Teramoto khẳng định rượu vang mật ong lên men từ nấm men phân lập tạo nên sự hài hòa đặc trưng cao hơn Thạc sĩ Bùi Thị Thúy Ngân (2010) phân lập từ nước thốt nốt được 21 dòng nấm men thuộc 3 giống Saccharomyces, Hanseniaspora và Candida, trong đó có 1 dòng thuộc giống Saccharomyces (SM2) có khả năng lên men nhanh, độ cồn cao (13,67 % v/v) và hàm lượng đường sót (1,02%) Kết quả nghiên cứu đã... carbohydrate từ nấm men càng được quan tâm Nhưng năng suất phụ thuộc nhiều vào giống men, cơ chất cho quá trình lên men và quy trình công nghệ A.A Brooks (2008) tiến hành phân lập nấm men Ngành Công nghệ thực phẩm- Khoa Nông nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trang 14 Luận văn tốt nghiệp khóa 33 – 2011 Trường Đại Học Cần Thơ trên vỏ chuối chín thu gom từ các chợ ở Nigeria để sản xuất ethanol Kết quả thu được 5 dòng nấm ... nguyên phân lập từ khóm Long Mỹ -Hậu Giang LM3 Dòng nấm men hình ovan, khuẩn lạc rìa cưa phân lập từ khóm Long Mỹ -Hậu Giang LM4 Dòng nấm men hình elip dài phân lập từ khóm Long Mỹ Hậu Giang LM5... Dòng nấm men hình elip nhọn phân lập từ khóm Long Mỹ Hậu Giang VT1 Dòng nấm men hình ống lớn phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang VT2 Dòng nấm men hình ovan nhỏ phân lập từ khóm Vị Thanh – Hậu Giang. .. dòng nấm men phân lập từ khóm Gò Quao– Kiên Giang 22 13 Tế bào nấm men phân lập từ khóm Long Mỹ - Hậu Giang, 24 (a) hình vật kính 40, (b) hình vật kính 100 14 Khuẩn lạc nấm men phân lập từ khóm Long