ĐỒ ÁN MÔN HỌC LỜI MỞ ĐẦU TỔNG QUAN KẾT LUẬN .38 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 ĐỒ ÁN MÔN HỌC Đề tài : Tổng quan thành phần hóa học hoạt tính sinh học Bạch Trinh Biển (Hymenocallis litoralis) thuộc họ Thủy Tiên ( Amaryllidaceae) LỜI MỞ ĐẦU Đất nước Việt Nam vào vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, thiên nhiên ban tặng cho thảm thực vật phong phú có 3.800 loài dùng làm thuốc để chữa bệnh phục vụ sức khỏe nhân dân Trong 200 loài bào chế thành thuốc thầy thuốc Đông y dùng chữa bệnh Khoảng 400 loài nhân dân dùng mà gọi thuốc Nam Còn 3000 loài cộng đồng dân tộc thiểu số biết sử dụng để chữa bệnh, lại chưa có điều kiện nghiên cứu đầy đủ Thực vật họ Thủy Tiên với đa dạng chủng loài nguồn nguyên liệu lớn hợp chất tự nhiên Dịch chiết chúng thường có hoạt tính sinh học cao Vì từ lâu, thực vật họ Thủy Tiên dùng làm thuốc chữa bệnh [1] Ở Việt Nam, số loài họ thực vật Thủy Tiên nghiên cứu phân lập hoạt tính sinh học Trong thời gian gần đây, hầu hết người biết đến Trinh nữ hoàng cung với tác dụng điều trị bệnh ung bướu, u xơ có hiệu Cây Bạc trinh biển loài thuộc họ Thủy Tiên di thực vào nước ta, thường trồng làm cảnh gần nghiên cứu hợp chất có hoạt tính chống ung thư, gây độc tế bào, ngăn chặn chép virut HIV….Với đặc tính quý báu trên, em làm đề tài …… TỔNG QUAN Giới thiệu thực vật họ Thủy tiên (Amaryllidaceae) Họ Thủy Tiên (danh pháp khoa học: Amaryllidaceae) họ thực vật có hoa Họ chủ yếu loại thân thảo sống lâu năm, mọc từ thân hành, thông thường có hoa sặc sỡ Họ chứa khoảng 60 – 70 chi, với khoảng 800 loài Một vài chi hay trồng vườn, chẳng hạn hoa loa kèn đỏ, huệ đỏ thuộc chi Amryllis, trinh nữ hoàng cung thuộc chi Crinum [2]… Trừ số giống mọc miền ôn đới, lại đại diện họ chủ yếu phân bố miền thảo nguyên vùng nhiệt đới cận nhiệt đới hai bán cầu [3] Lá xếp làm hàng, mọc xung quanh thân Hoa sặc sỡ thường mọc từ tán gốc thuôn dài Cuống hoa bọc bắc có màu sặc sỡ Hoa có cánh tương tự thường có nhị, bầu nhị có ngăn Quả nang, có mọng Một số loài đặc biệt có hạt có cánh mỏng số khác có hạt nhiều màu quanh góc, bảo quản phải trồng vừa chín [4] Giới thiệu thực vật chi Bạch trinh (Hymenocallis) 2.1 Giới thiệu chung 2.1.1 Vị trí chi phân loại thực vật Chi Bạch trinh thuộc : Giới : plantae Phân giới : tracheobionta Ngành : spermatophyta Division : magnoliophita –mộc lan Lớp : liliopsida Phân lớp : liliiae Order : liliales Họ : Amaryllidaceae - thực vật - thực vật bậc cao - hạt kín - có hoa - mầm - thủy tiên 2.1.2 Đặc điểm hình thái chung thuộc chi Hoa lớn, mùi thơm, hoa hình miệng núi lửa phù hợp để loài sâu bướm thụ phấn Củ hình tròn thuôn, bao phủ vỏ, rễ dày màu trắng Củ lên đến 15cm loài lớn chi nhỏ loài Ismene Leptochiton Ismene Leptochiton rụng sớm Hymenocallis vùng nhiệt đới thường xanh vùng khô cằn thường sớm rụng Các khác số lượng chiều dài thường xếp theo hàng nhiên H eucharidifolia có xếp theo hình hoa thị Lá thường rộng khoảng 5-7mm, không cuống, thẳng hàng có màu lục lam Riêng H.graminifolia rộng 15cm, có cuống, H.speciosa hình mũi mác màu xanh tươi sáng Trong Ismene gốc hình ý, cao lên đến 50cm Hoa có nhiều mọc thân lên từ bên Thân bị kẹp hai viền vững chắc, chúng sinh vào đầu mùa sinh trưởng sớm 2.2 Phân bố Hymenocallis có khoảng 70 loài phân phối toàn Đông Nam Hoa Kỳ, Mexico, Trung Mỹ, Tây Ấn miền bắc Nam Mỹ Mexico khu vực có số lượng lớn loài khu vực có số lượng loài lớn thứ Mỹ Có loài loài đặc hữu Nam Mỹ H.littoralis, H.pedalis H.tubiflora Các loài chia thành liên minh dựa đặc tính hình thái học Traub (1962) 2.3 Một số loài thuộc chi Hymenocallis acutifolia có nguồn gốc từ Mexico Nó có tán hẹp hoa nở từ cuối mùa hè qua mùa thu (hình 2.3.1) Hình 2.3.1 Hymenocallis acutifolia Hymenocallis azteciana nguồn gốc từ tây Mexico (hình 2.3.2) Hình 2.3.2: Hymenocallis azteciana Hymenocallis caribaea ‘variegata’ có tán xanh xám hấp dẫn, rộng viền màu trắng kem (hình 2.3.3) Hình 2.3.3: Hymenocallis caribaea ‘variegata’ Hymenocallis eucharidifolia có nguồn gốc từ Mexico Một hoa xinh đẹp đẹp Nở rộ lúc H sonorensis (hình 2.3.4) Hình 2.3.4: Hymenocallis eucharidifolia Hymenocallis durangoensis loài từ Mexico (hình 2.3.5) Hình 2.3.5: Hymenocallis durangoensis Hymenocallis harrisiana loài rụng từ Mexico Các hình dải có màu lục lam, xuất phát từ khu vực khô cằn Hoa có vầng hào quang nhỏ có mùi thơm (vương miện).Mỗi hoa nở thời gian đêm (hình 2.3.6) Hình 2.3.6: Hymenocallis harrisiana Hymenocallis liriosme phát triển trung tâm Lady Bird Johnson Wildflower Nó có nguồn gốc Texas số tiểu bang khác phía Nam Ảnh nở hoa chụp vào tháng năm 2004 Lee Poulsen Thêm hình ảnh củ hạt giống (hình 2.3.7b) Texas Hai số hạt giống nảy mầm (hình 2.3.7a) Hình 2.3.7a: Hymenocallis liriosme Hình 2.3.7 b: củ loài Hymenocallis liriosme Hymenocallis littoralis loài có màu xanh mạnh mẽ, nguồn gốc từ Mexico Guatemala Chúng phát triển mạnh mẽ nước vùng khí hậu ấm áp Nó cần phải bảo vệ mùa đông lạnh Những hoa trắng đáng yêu có cánh hoa dài hẹp núp đằng sau cốc trung tâm Hoa mọc 70-90 cm thân (hình 2.3.8) Hình 2.3.8 : Hymenocallis littoralis Hymenocallis maximillianii (syn hymenocallis maximiliani) có nguồn gốc từ Mexico Nó có nhỏ gọn hẹp, dựng đứng hoa duyên dáng cân đối (hình 2.3.9) Hình 2.3.9 : Hymenocallis maximillianii Hymenocallis occidentalis có nguồn gốc từ phía Đông Mỹ nở hoa vào cuối mùa hè Tùy thuộc vào môi trường phát triển mà vắng mặt, giống Lycoris, chụp ảnh vào thời điểm nở hoa (hình 2.3.10) Hình 2.3.10 : Hymenocallis occidentalis Hymenocallis riparia có nguồn gốc từ Mexico Đó nhỏ với tán hẹp (hình 2.3.11) Hình 2.3.11: Hymenocallis occidentalis Hymenocallis Sister of Tropical Giant có tán rộng xám màu xanh thay màu xanh đậm (hình 2.3.12) Hình 2.3.12: Hymenocallis Sister Hymenocallis sonorensis tìm thấy ven suối khắp thung lũng Sonora, Mexico Bức ảnh chụp tháng chín năm 2003, tăng trưởng chí lớn có vài cánh hoa vào tháng Chín năm 2004 (hình 2.3.13) Hình 2.3.13: Hymenocallis sonorensis Hymenocallis traubii loài nở hoa vào mùa xuân có nguồn gốc từ Florida Nó nhỏ với hoa lớn (hình 2.3.14) 10 11 Hippadine 12 Galanthamine Tính chất giảm đau alkaloid họ Thủy tiên cho có tương tự khung với khung morphine codeine Các alkaloid thuộc nhóm pyrrolo[de]phenanthridine galanthine, nhóm lycorenine pretazettine có tính ưu việt alkaloid nhóm dibenzofuran galanthamine 12 nhóm 5, 10b-ethanophenanthridine độc [18] Những nghiên cứu sớm số alkaloid có khả làm giảm huyết áp tạm thời Sau nhà nghiên cứu không tiết lộ tầm quan trọng trọng ảnh hưởng tới huyết áp Amaryllidaceae alkaloid Tuy nhiên , (+)- narwedine, galanthamine, epi- galanthamine có tác dụng lên hiệu làm giảm huyết áp chuột Điều thú vị người ta khả kháng emzym cholinesteraza galanthamine, có khả khuếch đại hệ thần kinh tốt epi- galanthamine chất khác có tác dụng dược lý đáng ý [18] Quercetin- 3- O- glucoside flavonoid phân lập từ họ Thủy tiên có khả gây độc tế bào, gây độc thực vật, chống vi trùng tác dụng chống oxy hóa [19] Các hợp chất Narciclasine 13, Lycoricidine 14, Pancratistatine Isocarbostyril Alkaloids loài Narcissus có tiềm gây độc tế bào ung thư có hoạt tính chống ung thư in vivo với chuột M-5076 bệnh bạch cầu P388 [20] 24 13 Narciclasine 14 Lycoricidine 4.2 Hoạt tính Bạch trinh biển 4.2.1 Hoạt tính chung Chi Bạch trinh nghiên cứu lần vào năm 1920 cho kết phân lập hợp chất lycorine Mặc dù có loạt tác động sinh học kèm theo ankaloid chi chưa khoa học quan tâm năm 1993 Pancratium littorale Jacq phân lập ankaloid pancratistatin có hoạt tính chống ung thư Từ lâu,trong dân gian, dịch chiết từ Trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium ) –một loài thuộc họ Amaryllidaceae với Bạch trinh biển- sư dụng để chữa ung thư dày,ung thư tử cung ung thư tuyến tiền liệt Theo khảo sát gần đây, dịch chiết giàu ankaloid có khả gây độc tế bào ức chế khả phát triển tế bào ung thư Khi nghiên cưu ankaloid chiết xuất từ loài H.littoralis ,Long-ze Lin cộng Trường Đại học Illinois phát dịch chiết từ thân hành loài có hoạt tính sinh học cao đặc biệt khả gây độc tế bào,trị sốt rét ưc chế trình chép virus HIV.[3] Cũng thời gian trên, G.Pettit cộng trường Đại học Arizona với giúp đỡ NCI tiến hành nghiên cứu độc lập rằng: dịch chiết phần thân hành từ H.littoralis có khả ức chế phát triển tế bào ung thư mạnh Bởi số hợp chất chiết xuất từ H.littoralis Pancratistatin, Lycoridine, Narcislasine dẫn xuất bán tổng hợp chúng nghiên cứu để sử dụng làm thuốc chữa ung thư [4].Nghiên cứu sâu hoạt tính chữa ung thư, năm 2008 nhà khoa học Bỉ 25 tiến hành thử in Vitro hoạt tính này.Kết thu lạc quan hợp chất tự nhiên Pancratistatin, Lycoridine, Narcislasine có hoạt tính mạnh dòng tế bào thử hợp chất bán tổng hợp lại có hoạt tính cao,hơn hẳn loại thuốc chữa Ung thư dùng Cisplatin,Doxorubicin.[5] Comp Cancer Cell Lines ounds Leu Pan B C L Col Pr kem cre re N u on ost ia as as S n KM ate P38 BX t S g 20L Du PC M F - - C N 14 F- S C Narcic 0.04 0.0 0 0.0 0.0 lasine 11 0 11 11 1 0 Lycori 0.06 0.2 0 0.2 0.1 cidine 4 1 Pancra 0.05 0.0 0 0.0 0.0 tistatin 61 0 77 49 26 Trans- 0.00 0.0 0 0.0 0.0 dihydr 78 39 0 49 21 o Narcic lasine Trans- 0.09 0.1 0 0.1 0.1 dihydr o Lycori cidine Bảng 1: Bảng giá trị IC50(µM) ankaloid chiết xuất từ H.littoralis Sau tín hiệu khả quan kết thử in vitro sô dòng tế bào ung thư,một số hợp chất đem thử in vivo độc tính bán trường diễn trường diễn.Pancratistatin Narciclasine hợp chất cho kết tôt nhất.Tuynhiên hợp chất lại tan nước gây khó khăn trường hợp dùng để tiêm tĩnh mạch.Đặc tính tăng lên dung môi hữu Dimethylformamide, dimethylsulfoxide hay rượu mạch thẳng cacbon MeOH,EtOH làm giảm hoạt tính thuốc xuất thêm tính chất không mong đợi.Do xu hướng ngày bán tổng hợp dẫn xuất dễ tan chúng có hoạt tính mạnh để làm thuốc điều trị ung thư.Trong thời gian gần Pancratistatin Narciclasine sư dụng hợp chất “tiền thuốc’’ thu hút quan tâm ,nghiên cứu giơi Ngoài hoạt tính tuyệt vời kể trên,năm 2008,Khi nghiên cứu thành phần hóa học dịch chiết từ hoa H.littoralis nhà khoa học Ai Cập mà đứng đầu Shawky Eman phát hoạt tính kháng khuẩn số dòng vi khuẩn gram (+) Staphylococcus aureus gram(-) Pseudomonas 27 aeruginosa.Hoạt tính cao so với số thuốc kháng sinh,kháng khuẩn dùng Cephalosporin, Ciprofloxacine 4.2.2 Một số ankaloid phân lập Trong trình phân tích hợp chất có củ Bạch trinh biển, người ta phân lập Lycorine (1) , hippeastrine (2) , 11 – hydroxyvittatine (3) , (+)-8-O-demethylmaritidine (4) Ngoài ra, hai chất flavonoid tiếng phân lập từ hoa : quercetin 3'-O-glucoside (5) rutin (6) O OH OH 10a H O 6a N 28 Dịch chiết ether H littoralis cho thấy hoạt tính kháng khuẩn Staphylococcus aureus Gram dương Gram âm, Pseudomonas aeruginosa, hoạt động chống lại Escherichia coli Candida albicans ( Bảng ) Tương ứng với nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) nồng độ diệt khuẩn tối thiểu (MBC) giá trị 15,6 62,5 mg / ml (S aureus), 250 500 mg / ml (P aeruginosa), tương ứng, DMF ampicillin làm kiểm soát tiêu cực tích cực, tương ứng Phương pháp chiết phân lập chất Bạch trinh biển (Hymenocallis litoralis) Để chiết phân lập chất Bạch trinh biển, ta áp dụng nhiều cách biết chiết nóng máy chiết liên tục Shoxlet chiết hồi lưu; chiết nóng chiết nhiệt độ thường; chiết liên tục chiết phân đoạn…sau kết hợp phương pháp lọc, kết tinh để thu sản phầm tinh; dựa vào phương pháp đại sắc kí lớp mỏng, phân tích cấu trúc phổ để xác định thành phần chất tách Với alkaloid chiết từ dược liệu khô tán bột Nguyên liệu chiết cần làm sạch, sau tán bột ta ngâm với ete dầu ete vài đến ngày, sau chiết liên tục Shoxlet hồi lưu với ete dầu – Có thể dùng dung môi hữu clorofoc, ete, etyl clorua chiết dung 29 dịch nước axit cồn axetic, sunfuric, nitric, tùy theo loại alkaloid Sau tách riêng alkaloid phân bố pha dung môi có độ phân cực khác không tan lẫn nhau, phân đoạn tách riêng tiếp tục tinh chế kết tinh phân đoạn Để phân tích alkaloid ta dùng phương pháp như: Dùng thuốc thử cho phản ứng màu kết tủa với alkaloid thuốc thử Dragendorft, thuốc thử Mayer…; Dùng phân tích phổ hồng ngoại, phổ cộng hưởng từ hạt nhân… Với flavonoid, tách sơ hỗn hợp chứa nhiều flavonoid cách dùng dung môi có độ phân cực khác không hòa lẫn để tách phân đoạn tách phân đoạn dung dịch có độ kiềm khác Ngoài có phương pháp đại khác dùng sắc kí cột với chất hấp phụ thường dùng polyamide, silicagel, xenlulozo, sau dùng dung môi rửa giải ete dầu, benzene, CHCL3 Để tinh chế flavonoid thu ta lọc qua cột chất hấp phụ, kết tinh cồn ( EtOH, MeOH) cồn axeton, hạn chế dùng than hoạt than hoạt hấp phụ mạnh flavonoid Phân tích flavonoid dựa vào phản ứng màu flavonoid với ammoniac, hay phản ứng Xianidin Wilstatter, phản ứng Marini – Bettolo…., áp dụng sắc kí lớp mỏng, phân tích cấu trúc phổ… 5.1 Phân lập từ củ Bạch trinh biển Phương pháp Long-ze Lin cộng [8]: Băm nhỏ 8.5kg củ hành tươi cây, đem chiết với 95% EtOH làm lần, lần đầu dùng 15l EtOH, lần dùng 10l EtO Gộp tất dịch lọc làm một, cô đặc 125ml dịch Băng hóa dịch thu 56g chất rắn thô Tán nhỏ chất rắn với 1% HCl dung dịch thu có phản ứng yếu với thuốc thử Dragendorff Dung dịch axit thu sau chiết với CHCl ( chiết lần, lần 2l), bazo hòa dung dịch NH đến pH=9 lại chiết tiếp với dung dịch CHCl3 (5 lần, lần 1l) Gộp tất dịch chiết lại rửa lần với nước, sau làm khan với Na2SO4, hóa dung môi thu hỗn hợp bazo thô Hỗn 30 hợp đưa lên cột chạy sắc ký hỗn hợp dung môi CHCl 3:MeOH theo độ phân cực tăng dần cuối rửa giải hoàn toàn dd acid HCl 1%.Quá trính sắc ký cột kiểm tra phân đoạn TLC với pha động hệ dung môi CHCl3:MeOH = 9:1 (or 49:1) hệ Cyclohexan: EtOAc: Et 2NH2 = 6:4:1.Các phân đoạn có Rf thích hợp gom lại với để tinh chế số chất từ 1-14 bảng Phương pháp Amina H Abou – Donia cộng [7] Phương pháp hóa lý đại phân tích chất tinh khiết phân lập từ họ Thủy tiên (Amaryllidaceae) 6.1 Các phương pháp phổ 6.1.1 Các loại phổ thông dụng thường dùng Đây phương pháp thông thường hay sử dụng để xác định cấu tạo hợp chất hóa học Để xác định cấu trúc hợp chất ta phải sử dụng kết hợp phương pháp phổ: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (H 1NMR, C13, DEPT), Phổ khối ( MS), Phổ hồng ngoại (IR) Nhưng chủ yếu dùng phổ cộng hưởng từ hạt nhân phổ khối a Phương pháp phổ khối (MS / GC-MS) Nguyên tắc dựa vào phân mảnh ion phân tử bắn phá chùm ion bên Phổ EI-MS: Dựa vào phân mảnh ion bắn phá chùm ion với lượng khác nhau.Thường 70ev Phổ ESI-MS: gọi phổ khối phun mù điện tử.Đây phương pháp chủ yếu sử dụng Việt Nam.Phổ thực với lượng bắn phá thấp nhiều so với EI-MS nên phổ thu chủ yếu pic ion phân tử, píc đặc trưng cho phá vỡ liên kết có lượng thấp,dễ bị phá vỡ (Peak bản) Phổ GC-MS: phương pháp tích hợp sắc ký khí khối phổ Phương pháp sử dụng để xác định thành phần hỗn hợp, khả phân tách thành phần hỗn hợp công thức cấu tạo số chất hỗn hợp 31 b Phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) H-NMR: Phổ proton: Trong phổ này,độ dịch chuyển hóa học proton xác định thang đo 0-14ppm.Chất chuẩn sừ dụng thường TMS.Dựa vào độ dịch chuyển hóa học đặc trưng tương tác spin mà ta xác định công thức hóa học chất 13 C-NMR: Phổ cacbon: Phổ cho ta tín hiệu cacbon nhóm khác nhau.Độ dich chuyển hóa học C xác định thang đo 0230ppm DEPT: thường sử dụng DEPT-90 DEPT-135.Phổ cho ta tín hiệu để phân biệt C bậc khác dựa vào độ mạnh tín hiệu,độ dịch chuyển hóa học C phía píc Ví dụ phổ DEPT-90 xuất tín hiệu nhóm CH trong phổ DEPT-135 tín hiệu CH, CH3 nằm phía trục dịch chuyển hóa học,các tín hiệu CH nằm phía tín hiệu C bậc biến 2D-NMR: Phổ chiều cộng hưởng từ hạt nhân, thường sử dụng chất cần xác định có cấu trúc phức tạp cần kiểm định xác công thức cấu tạo dự đoán.Các dạng phổ hay sử dụng COSY, HMQC, HMBC, NOESY c Phổ hồng ngoại (IR) Đây phương pháp để xác định nhóm chức dựa vào tần số hấp thụ vạch dao động hóa trị dao động biến dạng gây ra.Đây phương pháp đơn giản để xác định lại nhóm chức phân tử nhiều ý nghĩa việc xác định công thức cấu tạo hợp chất 6.1.2 Một số hoạt chất xác định cấu trúc Alcaloit cô lập từ Zephyranthes concolor chlidanthine (1), galanthamine (2) có cấu trúc xác định sau: 32 Chlidanthine (1) Tinh thể không màu hình kim (kết tinh từ acetone) [α]D20 = −129° (EtOH, c 3.0 mg/mL) IR (CCl4 , film) νmax cm-1 2923, 2853, 1604, 1460, 1254, 1088 EI-MS m/z (%): 287(100) M+( C17H21NO ), 272(9) M+ −Me, 256(65) M+−OMe, 244(10), 230(6), 225(14), 212(29), 202(45) (C17H21NO2), 115(42), 77(39) Đối với phổ 1H 13 C-NMR liệu phổ xem bảng : C17H21NO2 Bảng 1: liệu quang phổ chlidanthine (1) Vị trí 1H (J, Hz) NOESY 13 C HMBC 4.5(td,J=3.3,1,2) H(2α),H(2β), H(11α) 87.2.s C(11) 2α 1.99(ddd,J=-15.9,5.8,3.3) H(1),H(3) 28.1 t 2β 2.59(ddd,J=15.9,3.3,1.5) H(1) 3.79(m,J=5.8,1.5) H(2α) 70.0 s 5.98(ddd,J=10.4,4.5,1.2) H(4a) 124.3 s C(2),C(10b) 4a 6.17(dt,J=10.4,1.2) H(4),H(6β),H(12β) 129.4 s C(1),C(3),C(10b) 6α 3.62(d,J= -15.0) H(7),H(12α),NMe 60.6 t C(4),C(1),OMe C(10a),C(6a),C(7), C(12),NMe 6β 4.09(d,J= -15.0) H(4a),H(12β) C(10a),C(6a),C(7), 33 C(12),NMe 6a 128.7s 6.47(d,J= 8.0) H(6α),H(8) 121.9d C(10),C(10a),C(6) 6.47(d,J= 8.0) H(7) 115.3d C(9),C(10),C(6a) 145.4s 10 140.1s 10a 132.1s 10b 48.6s 11α 2.10(dt,J= -13.3,3.0 H(1) 11β 1.52(ddd,J=13.3,3.8,1.6) H(12α) 12α 3.03(d,J= -14.3) H(6α),H(11β), NMe 12β 3.28(d,J= -14.3,1.4) H(4a),H(6β) 34.6t C(10b) 54.0t OMe 3.37s 56.8q NMe 2.36s H(6α),H(11α), H(12 α) 41.9q C(3) C(6),C(12) Phổ 1H thể sau: 34 Phổ C13 thể sau : Galanthamine (2) Phổ 1H- 13C-NMR liệu phổ báo cáo Carrol et al [27] Galanthamine N-oxide (3) Phổ 1H- 13 C-NMR liệu phổ báo cáo Kobayashi et al [30] 35 Ankaloid Lycorine (3) phân lập từ Bạch trinh biển xác định cấu trúc sau: Dữ liệu phổ H: 36 Dữ liệu phổ C13 37 6.2 Các phương pháp khác KẾT LUẬN TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 [...]... (1 4), 5,6-hihydrobicolorine (1 5), secoisolariciresinol (1 6) [8] 18 19 4 Các nghiên cứu về hoạt tính của họ Thủy tiên (Amaryllidaceae) và cây Bạch trinh biển (Hymenocallis litoralis) 4.1 Hoạt tính của họ Thủy tiên 4.1.1 Hoạt tính chung Các cây thuộc họ Thủy Tiên có củ chứa rất nhiều alkaloid Những alkaloid này có cả những chất có lợi và có hại cho con người Các chất chiết suất từ họ thực vật này ở Nam Phi... C(4),C(1),OMe C(10a),C(6a),C(7), C(12),NMe 6β 4.09(d,J= -15.0) H(4a),H(12β) C(10a),C(6a),C(7), 33 C(12),NMe 6a 128.7s 7 6.47(d,J= 8.0) H(6α),H(8) 121.9d C(10),C(10a),C(6) 8 6.47(d,J= 8.0) H(7) 115.3d C(9),C(10),C(6a) 9 145.4s 10 140.1s 10a 132.1s 10b 48.6s 11α 2.10(dt,J= -13.3,3.0 H(1) 11β 1.52(ddd,J=13.3,3.8,1.6) H(12α) 12α 3.03(d,J= -14.3) H(6α),H(11β), NMe 12β 3.28(d,J= -14.3,1.4) H(4a),H(6β) 34.6t C(10b)... liệu quang phổ của chlidanthine (1 ) Vị trí 1H (J, Hz) NOESY 13 C HMBC 1 4.5(td,J=3.3,1,2) H(2α),H(2β), H(11α) 87.2.s C(11) 2α 1.99(ddd,J=-15.9,5.8,3.3) H(1),H(3) 28.1 t 2β 2.59(ddd,J=15.9,3.3,1.5) H(1) 3 3.79(m,J=5.8,1.5) H(2α) 70.0 s 4 5.98(ddd,J=10.4,4.5,1.2) H(4a) 124.3 s C(2),C(10b) 4a 6.17(dt,J=10.4,1.2) H(4),H(6β),H(12β) 129.4 s C(1),C(3),C(10b) 6α 3.62(d,J= -15.0) H(7),H(12α),NMe 60.6 t C(4),C(1),OMe... Quả nang.[6] 3.2 Phân bố cây Cây Bạch trinh biển có nguồn gốc ở các vùng ven biển ở miền nam Mexico và Trung Mỹ, và hai quần thể hoang dã được báo cáo đã được tìm thấy trên bờ biển phía Tây của Florida [6] Chúng phát triển rất tốt ở những vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới với khi hậu ấm áp 3.3 Thành phần hóa học của cây Nghiên cứu thực vật học của củ và hoa của cây Bạch trinh biển ở Ai Cập đã được thực... với 4 nhóm alkaloid: lycorine (1 ), hippeastrine (2 ), 11-hydroxyvittaine (3 ), và (+ )-8-O-demethylaritidine (4 ); và 2 chất flavonoids: quercetin 3’-O-glucoside (5 ), và rutin (6 ) Các thành phần dễ bay hơi của cây hoa đã được phân tích lần đầu tiên bằng GC/MS cho thấy có 26 hợp chất đã biết (Bảng 1) Từ đó, hoạt tính kháng vi sinh vật trong dịch chiết của hoa cây Bạch trinh biển đã được phát hiện [7] 14... xanh đậm và hoa độc đáo cân đối (hình 2.3.15) Hình 2.3.15: Hymenocallis 'Tropical Giant' 2.4 Loài ở Việt Nam Ở Việt Nam, theo tác giả Ngô Tiến Bân và Nguyễn Thị Đỏ,chi này có 2 loài Đó là H littoralis.Salisb (Bạch Trinh biển) và H speciosa.Salisb (Bạch Trinh đẹp).[2] 11 Bạch trinh biển có tên khoa học là Hymenocallis littoralis Salisb ,thuộc: Giới : Plantae (Thực vật) Họ : Amaryllidaceae (Thủy Tiên) Ngành... Indonexia và Việt Nam Hiện nay ,Bạch trinh biển được trồng chủ yếu để làm cây cảnh.Tuy nhiên trong một số nghiên cứu gần đây đã phát hiện trong Bach trinh biển có một số ankaloid quý hiếm và có thể sử dụng để làm thuốc.Bởi vậy việc sử dụng Bạch trinh biển như là dược liệu đang được nghiên cứu trong thời gian gần đây 3 Giới thiệu về cây Bạch trinh biển (Hymenocallis litoralis) 3.1.Mô tả cây 13 Cây thân... (MIC) và nồng độ diệt khuẩn tối thiểu (MBC) giá trị là 15,6 và 62,5 mg / ml (S aureus), và 250 và 500 mg / ml (P aeruginosa), tương ứng, DMF và ampicillin làm kiểm soát tiêu cực và tích cực, tương ứng 5 Phương pháp chiết và phân lập các chất trong cây Bạch trinh biển (Hymenocallis litoralis) Để chiết và phân lập các chất trong cây Bạch trinh biển, ta có thể áp dụng nhiều cách đã biết như chiết nóng bằng... chlidanthine (1 ), và galanthamine (2 ) có cấu trúc đã được xác định như sau: 32 Chlidanthine (1 ) Tinh thể không màu hình kim (kết tinh từ acetone) [α]D20 = −129° (EtOH, c 3.0 mg/mL) IR (CCl4 , film) νmax cm-1 2923, 2853, 1604, 1460, 1254, 1088 EI-MS m/z (% ): 28 7(1 00) M +( C17H21NO ), 27 2(9 ) M+ −Me, 25 6(6 5) M+−OMe, 24 4(1 0), 23 0(6 ), 22 5(1 4), 21 2(2 9), 20 2(4 5) (C17H21NO2), 11 5(4 2), 7 7(3 9) Đối với phổ 1H và 13 C-NMR... trùng và tác dụng chống oxy hóa [19] Các hợp chất Narciclasine 13, Lycoricidine 14, Pancratistatine là các Isocarbostyril Alkaloids của loài Narcissus có tiềm năng gây độc tế bào ung thư và có hoạt tính chống ung thư in vivo với chuột M-5076 và bệnh bạch cầu P388 [20] 24 13 Narciclasine 14 Lycoricidine 4.2 Hoạt tính của cây Bạch trinh biển 4.2.1 Hoạt tính chung Chi Bạch trinh được nghiên cứu lần đầu tiên