TRƯỜNG ĐẠI HỌC s PHẠM HÀ NỘI KHOA HÓA HỌC NGUYỄN THỊ TẤN NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP • CHÁT • • FLAVONOIT TỪ CÂY BÀN CHUA (SONNERRATIA CASEOLARIS) KHÓA LUẬN • TỐT NGHIỆP • ĐẠI • HỌC • Chuyên ngành: Hóa học hữu Người hướng dẫn khoa học TS Nguyễn Hoài Nam HÀ NỘI - 2015 Trường Đ ại Học Su’ Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp LỜI CẢM ƠN Khoá luận tốt nghiệp hoàn thành Viện Hoá sinh biển Với lòng biết ơn chân thành, em xin cảm ơn giúp đỡ quý báu TS Nguyễn Hoài Nam, trực tiếp hướng dẫn em hoàn thành khoá luận Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới tập thể cán phòng Dược liệu biển, Viện Hoá sinh biển, tạo điều kiện giúp đỡ em hoàn thành khoá luận tốt nghiệp Em xin bày tỏ lòng biết ơn tới PG S.TS Nguyễn Văn Bằng thầy cô giáo khoa Hoá học trường Đại học sư phạm Hà Nội tận tình dạy dỗ bảo cho em suốt bốn năm học trường Hà Nội, tháng 05 năm 2015 Sinh viên Nguyễn Thị Tấn Sinh viên: Nguyễn Thị Tẩn Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà Nội Khóa Luận Tốt Nghiệp MỤC LỤC MỞ Đ Ầ U CHƯƠNG 1: TỔNG Q U A N 1.1 Tổng quan Bần c h u a 1.1.1 Giới thiệu Bần c h u a 1.1.2 Sinh học, sinh t h i 1.1.3 Công d ụ n g 1.1.4 Thành phần hóa h ọ c 1.2 Giới thiệu lớp chat flavonoid [6 , 7] .7 1.2.1 Giới thiệu c h u n g 1.2.2 Các nhóm fla v o n o id 1.3 Các phương pháp chiết mẫu thực v ậ t 12 1.3.1 Chọn dung môi c h i ế t 12 1.3.2 Quá trình c h iết 14 1.4 Các phương pháp sắc kí phân lập hợp chất hữu c 16 1.4.1 Đặc điểm chung phương pháp sắc k í 16 1.4.2 Cơ sở phương pháp sắc k í 16 1.4.3 Phân loại phương pháp sắc k í 17 1.5 Một số phương pháp hóa lý xác định cấu trúc hợp chất hữu c .21 1.5.1 Phổ hồng ngoại (Infrared Spectroscopy, I R ) .21 1.5.2 Phổ khối lượng (Mass Spectroscopy, M S ) 22 1.5.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy N M R ) 23 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 26 2.1 Mầu thực v ậ t 26 2.2 Phương pháp phân lập hợp chất 26 2.2.1 Sắc ký lớp mỏng (T L C ) 26 Sinh viên: Nguyễn Thị Tẩn Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà Nội Khóa Luận Tốt Nghiệp 2.2.2 Sắc ký lớp mỏng điều c h ế 27 2.2.3 Sắc ký cột ( C C ) 27 2.3.1 Điểm nóng chảy (M p) .27 2.3.2 Phổ khối lượng (ESI - M S ) 27 2.3.3 Phổ cộng hưởng từ nhân (N M R ) 27 2.4 Dụng cụ thiết b ị 27 2.4.1 Dụng cụ thiết bị tách c h i ế t 27 2.4.2 Dụng cụ thiết bị xác định cấu trú c 28 2.5 Hoá c h ấ t 28 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ KÉT Q U Ả 29 3.1 Thu mẫu, xử lý mẫu phân lập hợp c h ấ t 29 3.2 Các số vật lý số liệu p h ổ 30 3.2.1 Hợp chất 1(BCW7): Chrysoeriol - glucopyranoside 30 3.2.2 Hợp chất 2(BCW5): luteolin - rutinoside 31 3.2.3 Hợp chất 3(BCW6): apigenin - o - rutinoside 32 CHƯƠNG THẢO L U Ậ N .33 4.1 Biện luận cấu trúc cho hợp chất 33 4.2 Biện luận cấu trúc cho hợp chất 38 4.3 Biện luận cấu trúc cho hợp chất 43 KẾT L U Ậ N 48 TÀI LIỆU THAM K H Ả O 49 Sinh viên: Nguyễn Thị Tẩn Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà Nội Khóa Luận Tốt Nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG, HÌNH VẼ VÀ BIỂU ĐỒ Bảng 4.1; D ữ liệu phô B C W 36 Bảng 4.2: D ữ liệu phô B C W 41 Bảng 4.3: liệu phổ NMR hợp chất B C W 46 Hình 1.1 : Flavan (2 - Phenyl chrom an) Hình 1.2: Flavon flavonol Hình 1.3: Flavanonol - Hình 1.4: C h a c o l Hình 1.5: A u r o n 10 Hình 1.6: Antoxianidin 10 Hình 2.1: Bần chua - Sonneratia caseolaris (L.) Engl 26 Hình 3.1.a: Sơ đồ chiết phân đoạn mẫu Bần chua Sonneratia caseolaris 29 Hình 3.1 b: Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn dịch chiết nước mẫu Bần c h u a 30 Hình l.a: Phổ ' h - NMR B C W 33 Hình 4.1.b: Cấu trúc hợp chất B C W 34 Hình 4.1.c: Phổ l3C - NMR B C W 34 Hình 4.1 d: Phổ HSQC B C W 35 Hình 4.1.e: Phổ HMBC B C W 37 Hình 4.1.f: Một số tương tác HMBC B C W 38 Hình 4.2.a: c ấ u trúc hợp chất B C W 38 Hình 4.2.b: Phổ l3C - NMR B C W 38 Hình 4.2.c: Phổ ' h - NMR B C W 39 Hình 4.2.d: Phổ HSQC B C W 10 Hình 4.2.e: Phổ HMBC B C W 42 Hình 4.2.f: Một số tương tác HMBC B C W 42 Sinh viên: Nguyễn Thị Tẩn Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà Nội Khóa Luận Tốt Nghiệp Hình 4.3.a: c ấ u trúc hợp chất B CW 43 Hình 4.3.b: Phổ ' h - NMR B CW 44 Hình 4.3.c: Phổ l3C - NMR BCW 44 Hình 4.3.d: Phổ HSQC B CW 45 Hình 4.3.e: Phổ HSQC HMBC B CW 47 Hình 4.3.f: Một số tương tác HMBC B CW 47 Sinh viên: Nguyễn Thị Tẩn Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà Nội Khóa Luận Tốt Nghiệp DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT 13c - NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Cacbon 13 Carbon - 13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy ' h - NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton Proton Magnetic Resonance Spectroscopy ' H-'H ' h - ' h Chemical Shift Correlation Spectroscopy COSY 2D - NMR Phố cộng hưởng từ hạt nhân hai chiều Two - Dimensional NMR cc Sắc ký cột Column Chromatography DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer El - MS Phổ khối lượng va chạm electron Electron Impact Mass Spectroscopy FAB - MS Phố khối lượng ban phá nguyên tử nhanh Fast Atom Bombardment Mass Spectrometry HMBC Heteronuclear Multiple Bond Connectivity HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Coherence ESI - MS Electron Sprayt Ionization Mass Spectroscopy GC - MS Sac kí khí - phổ khoi LC - MS Sac kí lỏng - phổ khoi IR Phổ hong ngoại Infrared Spectroscopy Me Nhóm metyl MS Phổ khối lượng Mass Spectroscopy NOESY Nucler Overhauser Effect Spectroscopy TLC Sac ký lớp mỏng Thin Layer Chromatography Sinh viên: Nguyen Thị Tan Lớp: K37A - Hóa học Trường Đ ại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp M Ở ĐẦU Các sản phẩm thiên nhiên ngày người quan tâm ứng dụng rộng rãi đặc tính độc, dễ hấp thụ không làm tốn hại đến môi sinh Theo tài liệu công bố nay, có khoảng 60% - 70% loại thuốc chữa bệnh lưu hành giai đoạn thử nghiệm lâm sàng có nguồn gốc tự nhiên Bằng phương pháp thử hoạt tính sinh học đại, có kết cao, người ta tiến hành nghiên cứu mẫu dịch chiết thực vật, nghiên cứu chất tách từ dịch chiết Nhờ mà phát nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học quý báu, tạo điều kiện vô thuận lợi cho việc phát triển ngành y dược công chữa bệnh cứu người Nằm khu vực nhiệt đới gió mùa, lượng mưa lớn, độ ẩm cao (khoảng 80%), Việt Nam có hệ thực vật phong phú với khoảng 12000 loài, có tới 4000 loài nhân dân ta dùng làm thảo dược mục đích khác phục vụ sống người Cùng với bề dày phát triển 4000 năm lịch sử dân tộc, ngành đông y dành thành tựu rực rỡ, nhiều phương thuốc cỏ động vật ứng dụng hiệu lưu truyền ngày Đó sở quan trọng cho việc phát triển ngành hoá học hợp chất thiên nhiên Tuy nhiên đất nước hạn chế nguồn vốn sở vật chất Việt Nam vấn đề đặt làm để khai thác sử dụng nguồn tài nguyên cách hiệu cho xã hội Vì tiến hành nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu thành phần flavonoit từ Bần chua - Sonneratia caseolaris Cây Bần chua - Sonneratia caseolaris thuộc họ Lythraceae loại phổ biến quần thể ngập mặn Tuy nhiên, chưa có nhiều tài liệu công bố thành phần hoá học ứng dụng dược lý loài Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp Khoá luận tập trung nghiên cứu thành phần ílavonoit Bần chua tạo sở cho nghiên cứu lĩnh vực tìm kiếm thuốc mới, giải pháp điều trị bệnh Nhiệm vụ đề tài: Phân lập hợp hợp chất flavonoit từ Bần chua phương pháp sắc ký Xác định cấu trúc hoá học hợp chất phân lập phương pháp phổ Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Bần chua 1.1.1 Giới thiệu Bần chua • Tên khoa học : Sonneratia caseolaris (Tên đông nghĩa - Sonneratia acida L.f., Rhizophora caseolaris L.) • Tên Việt Nam : Bần chua Ngoài có tên : Hải Đồng, Thủy Liễu, Bằng Lăng Tía • Mô tả : Cây gỗ rừng ngập mặn, cao khoảng - m, đường kính thân đến 30 cm; xung quanh gốc thường mọc lên rễ thở cao đến 50 cm Lá đơn, mọc đối; phiến dày, ròn, hình trứng ngược đến bầu dục, chóp tròn, mép nguyên, gân bên - đôi, cuống - mm Hoa đơn độc đỉnh Đài hình ống cao - cm, thùy đài , hình tam giác; cánh hoa , hình đường, dài đến 2,5 cm; nhị nhiều, nhị dài đến cm; bầu hình cầu dẹt, vòi nhụy dài Quả có đài tồn tại; hình cầu dẹt, đường kính - cm 1.1.2 Sinh học, sinh thái Ở Vườn Quốc gia Xuân Thủy, hoa tháng - 5, có tháng - Chúng phân bố khu vực rừng ngập mặn thuộc c n Lu c n Ngạn Nhưng tập trung chủ yếu gần cửa Ba Lạt khu vực c n Lu (Bồng Trắng) 1.1.3 Công dụng Người ta lấy ăn sống hay nấu canh cá Cũng sử dụng làm thuốc đắp vào chỗ viêm tay bong gân Ở Ấn Độ dùng dịch lên men làm thuốc ngăn chặn chứng xuất huyết Còn dịch ép từ hoa thành phần thuốc chữa đái máu Ớ ta dùng giã ra, thêm tí muối, làm thuốc Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn Lớp: K37A - Hóa học Trường Đ ại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp o' Hình 4.1.b: Cấu trúc hợp chất BCW7 B C W 7-D M S O -C C P D Hình 4.1.C: Phổ 13c - NMR BCW7 Phổ l3C - NMR BCW7 xuất tín hiệu 22 carbon, có nhóm carbonyl ỏc 181.99, 14 carbon lai hóa sp vùng từ ỏc 94 164, nhóm methoxi ôc 55.94 tín hiệu đặc trưng cấu tử đường glucose 5C 100.00, ôc 73.10, 5C 76.43, 5C 69.58, ôc 77.23, 5C 60.60 Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn 34 Lớp: K37A - Hóa học Trường Đ ại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp 0; M J h h h h h h h Ĩ U N N H H O O « « J I O ) > l > l # № l | I U Ỉ O U i O U I O U I C Ũ l O U I O U O U I O U C I * f c W U I O Ũ I ĩ Hình 4.1.d: Phổ HSQC BCW7 Sinh viên: Nguyễn Thị Tẩn 35 Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp Bảng 4.1: D ữ liệu p h ổ B C W s: a,b ÔHacơ = Hz) ÖC TT #5J a ÖC 164.2 164.18 103.4 103.30 182.0 181.99 161.1 161.07 99.5 99.47 163.0 162.93 95.0 94.99 156.9 156.89 10 105.3 105.31 r 100.0 121.17 2’ 110.3 110.29 3’ 148.2 148.10 4’ 150.9 151.05 5’ 115.8 6’ HMBC 6.96 (1H, s) 4; 2; 1’; 10 6.44 (1H, d, 2.0) 5; 7; 10; 6.86 (1H, d, 2.0) 7; 9; 10; 7.58 (1H, br s) 3’; ’; ’;2 115.82 6.93 (1H, d, 8.0) 4’; ’; r 121.4 120.54 7.59 (1H, dd, 2.0; 8.0) 2’; 4’; 56.4 55.94 3.89 (3H, s) 3’ 1” 97.5 100.00 5.06 (1H, d, 7.5) 2” 73.1 73.10 3.29 (1H, dd, 7.5; 9.0) 1” ; 3” 3” 76.5 76.43 3.31 (lH,m) 4” ; 2” 4” 69.6 69.58 3.17 (1H, t, 8.8) 5” ; ” 5” 77.2 77.23 3.44 (lH,m) 3” ; 6” ; 1” 6” 60.6 60.60 3’ Ome 3.47 (1H, dd, 6.0; 12.0) 3.72 (1H, d, 11.5) 4” ; 5” đo DMSO - dỗ, b J25MHZ, c 500MHZ, # số liệu phổ chrysoeriol glucopyranoside theo tài liệu [8] Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn 36 Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp mắm Co r TI 0 0 0 0 0 0 0 0 Hình 4.1.e: Phổ HMBC BCW7 Từ dấu hiệu nhận dạng trên, kết hợp với phân tích phổ cộng hưởng từ chiều HSQC, hợp chất xác định ílavone glycoside So sánh với liệu phổ tài liệu công bố cho thấy số liệu phổ NMR BCW7 hoàn toàn phù hợp với Chrysoeriol - glucopyranoside [8 ] Cấu trúc làm sáng tỏ nhờ tương tác xa phổ HMBC Trên phổ tương tác H - với c - r , H - ’ H - ’ với c cho thấy vòng thơm c liên kết với vị trí c - Gốc đường glucose gắn vào c - với tương tác H - 1” với c - Tương tác proton ’ - OMe với c - ’ khắng định vị trí nhóm oximethyl Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn 37 Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp Hình 4.1.f: Một số tương tác HMBC BCW7 4.2 Biện luận cấu trúc cho hợp chất Hình 4.2.a: cấu trúc hợp chất BCW5 B C W -D M S O -C 3C PD Hình 4.2.b: Phổ 13c - NMR BCW5 Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn 38 Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp B C W -D M S O -1 H Hình 4.2.c: Phổ !H - NMR BCW5 Hợp chat BCW5 phân lập từ phân đoạn dịch chiết nước mẫu bần chua, có dạng bột vô định hình màu vàng, c ấ u trúc BCW5 hoàn toàn tương tự với BCW7 ngoại trừ xuất thêm gốc đường rhamnose liên kết với vị trí c - ” đường glucose nhóm hydroxy vị trí c ’ thay nhóm methoxi BCW7 Phổ l3C - NMR hợp chất cho tín hiệu cộng hưởng 27 carbon, có nhóm carbonyl 181.74 ppm, 14 carbon lai hóa sp vùng từ ô 94 - 164 thuộc khung flavone, carbon cấu tử đường glucose ô 99.94 (carbon anome), ô 73.11, ô 76.27, 69.58, ô 75.57, 66.08, carbon gốc đường rhamnose 100.54 (carbon anome), 70.76, 70.30, ô 72.09, 68.33, ô 17.83 Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn 39 Lớp: K37A - Hóa học Trường Đ ại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp Hình 4.2.d: Phổ HSQC BCW5 Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn 40 Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà N ội Băng 4.2: D ữ liệu p h ổ BCW Sĩ a,b ÔHac(J = Hz) ÖC 164.88 a ÖC 163.5 103.6 102.28 182.6 181.74 161.6 161.22 100.2 99.46 165.2 162.81 95.6 94.70 157.6 156.89 10 106.0 105.34 1’ 121.7 120.01 2’ 113.8 112.89 3’ 146.4 146.54 4’ 150.9 151.48 5’ 116.7 6’ TT Khóa Luận Tốt Nghiệp HMBC 6.70 (1H,S) 10 ; F ;2 ;4 6.43 (1H, d, 2.0) 8; 10; 7; 6.73 (1H, d, 2.0) ; 10; 9; 7.38 (1H, d, 2.0) 6*;3’; ’;2 115.86 6.85 (1H, d, 8.0) 3’ 120.0 119.21 7.41 (1H, dd, 2.0; 8.0) 2’; 4’; 1” 101.1 99.94 5.06 (1H, d, 7.5) 2” 73.6 73.11 3.27 (1H, dd, 7.5; 9.0) 1” ; 3” 3” 77.6 76.27 3.31 (1H, t, 9.0) 2” ; 4” 70.2 69.58 3.36 (lH,m) 5” 76.8 75.57 3.60 (1H, m) 6” 66.06 66.08 3.61 (1H, m) r „ 3.85 (1H, d, 10.0) ’” 100.4 100.54 4.54 (1H, d, 1.0) 2” ’ 71.3 70.76 3.47 (lH,m) ” ; 2’” ; 3” ’; 5” ’ 4” ’ 3’” 4„, 70.8 70.30 3.67 (lH,m) 4,„ 72.7 72.09 3.16 (lH,m) 2’” ; 3” ’; ố’” 5’” 68.9 68.33 3.42 (1H, m) 6’” 18.9 17.83 1.07 (3H, d, 6.0) 5” ; 4” “đo DMSO - cỉỗ, b 125MHZ, c 500MHZ, # số liệu phổ luteolin rutinosicle theo [9] Sinh viên: Nguyễn Thị Tấn 41 Lớp: K37A - Hóa học Trường Đại Học S Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp •j-i [...]... Hà N ội 2 Khóa Luận Tốt Nghiệp 1.4 Các phương pháp sắc kí trong phân lập các họp chất hữu cơ Phương pháp sắc kí (Chromatography) là một phương pháp phổ biến và hữu hiệu nhất hiện nay, được sử dụng rộng rãi trong việc phân lập các hợp chất hữu cơ nói chung và các hợp chất thiên nhiên nói riêng 1.4.1 Đặc điểm chung của phương pháp sắc kí Sắc kí là phương pháp tách, phân tích, phân li các chất dựa vào sự... là chất rắn hoặc chất lỏng + Pha tĩnh là chất rắn: Thường là alumin hoặc silica gel đã được xử lý, nó có thể nạp nén vào trong một cột + Pha tĩnh là chất lỏng: Có thế là một chất lỏng được tấm lên bề mặt một chất mang - Pha động: Có thể là chất lỏng hoặc chất khí + Pha động là chất khí: Thí dụ trong kỹ thuật sắc kỷ khí Trong truờng hợp này chất khí được gọi là khí mang hay khí vectơ + Pha động là chất. .. 10% 1.5 Một số phương pháp hóa lý xác định cấu trúc của các họp chất hữu cơ Cấu trúc hoá học các hợp chất hữu cơ được xác định nhờ vào phương pháp phổ kết hợp Tuỳ thuộc vào cấu trúc hoá học của từng chất mà người ta sử dụng phương pháp phố cụ thế c ấ u trúc càng phức tạp thì yêu cầu phối hợp các phương pháp phổ càng cao Trong một số trường hợp, để xác định chính xác cấu trúc hoá học của các hợp chất, ... oxi hóa [3] Luteolin Luteolin 7 - rutinoside Năm 2009 nhóm nghiên cứu của Shi Biao Wu (Trung Quốc) tách được 9 hợp chất từ quả cây Bần chua, trong đó 2 hợp chat nor - lignans (1, 2) và 2 dẫn xuất 6 H - benzo[b,d]pyran - 6 - one (3, 4) được phần lập lần đầu tiên từ chi Sonneratia có thế coi là các các chất “chỉ dấu” (taxonomic markers) cho việc phân loại chi này Ket quả đánh giá hoạt tính gây độc tế bào... Khóa Luận Tốt Nghiệp rioo.b.c n " 1+b.c n : Lượng chất bị hấp phụ lên pha tĩnh lúc đạt cân bằng n oo : Lượng cực đại của chất có thể bị hấp phụ lên một chất hấp phụ nào đó b : Hằng số c : Nồng độ của chất bị hấp phụ 1.4.3 Phân loại các phương pháp sắc kí Trong phương pháp sắc kí: Pha động là các chất ở trạng thái khí hay lỏng, còn pha tĩnh có thế là các chất ở trạng thái lỏng hoặc rắn * Theo bản chất. .. hiệu khi phân tích thành phần của hỗn hợp chất (nhất là phân tích thuốc trong ngành dược) 1.5.3 Phố cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy N M R ) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân là một phương pháp phổ hiện đại và hữu hiệu nhất hiện nay Với việc sử dụng kết hợp các kỹ thuật phổ N M R một chiều và hai chiều, các nhà nghiên cứu có thể xác định chính xác cấu trúc của hợp chất, kể cả... ß - D - glucopyranoside Năm 2009, hai mươi bốn hợp chất trong đó có tám Steroid (1 - 8 ), chín triterpenoids (9 - 16, 24), ba flavonoids (20 - 22), và bốn dẫn xuất benzenecarboxylic (17 - 19, 23) được phân lập và xác định từ thân và cành của cây ngập mặn Sonneratia caseolarỉs Trong số này các hợp chất 1, 4 - 20 và 22 - 24 đã được phân lập lần đầu tiên từ loài này Các thử nghiệm in vitro gây độc tế... của cột Tỉ lệ L/D phụ thuộc vào yêu cầu tách, tức là phụ thuộc vào hỗn hợp chất cụ thể Trong sắc kí, tỉ lệ giữa quãng đường đi của chất cần tách so với quãng đường đi của dung môi gọi là R f , với mỗi một chất sẽ có một Rf khác nhau Nhờ vào sự khác nhau về Rf này mà ta có thể tách từng chất ra khỏi hỗn hợp Tỉ lệ chất so với tỉ lệ chất hấp phụ cũng rất quan trọng Tuỳ theo yêu cầu tách mà ta có tỉ lệ... Khóa Luận Tốt Nghiệp CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PH ƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 2.1 Mẩu thực vật Cây Bần chua được thu hái vào tháng 07 năm 2013 tại Vườn Quốc gia Xuân Thủy (Cồn Ngạn) - Giao Thủy - Nam Định Tọa độ: N: 20.25807; E: 106.57592 Mau tiêu bản được lưu giữ tại Viện Hóa sinh biến, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam Hình 2.1: Bần chua - Sonneratia caseolaris (L.) Engl 2.2 Phương pháp phân lập. .. tan được những chất chuyến hoá thứ cấp đang nghiên cứu, dễ dàng được loại bỏ, có tính trơ (không phản ứng với chất nghiên cứu) , không dễ bốc cháy, không độc Neu dung môi có lẫn các tạp chất thì có thể ảnh hưởng đến hiệu quả và chất lượng của quá trình chiết Vì vậy những dung môi này nên được chưng cất để thu được dạng sạch trước khi sử dụng Thường có một số chất dẻo lẫn trong dung môi như các diankyl ... Khóa Luận Tốt Nghiệp Khoá luận tập trung nghiên cứu thành phần ílavonoit Bần chua tạo sở cho nghiên cứu lĩnh vực tìm kiếm thuốc mới, giải pháp điều trị bệnh Nhiệm vụ đề tài: Phân lập hợp hợp chất. .. Phạm Hà N ội Khóa Luận Tốt Nghiệp CHƯƠNG THẢO LUẬN 4.1 Biện luận cấu trúc cho hợp chất BCW7 —DMSO—1 H Ả ■) o o o ppm ƠI 00 n Hình 4.1.a: Phổ *H - NMR BCW7 Hợp chat BCW7 phân lập từ phân đoạn dịch... 10 Hình 2.1: Bần chua - Sonneratia caseolaris (L.) Engl 26 Hình 3.1.a: Sơ đồ chiết phân đoạn mẫu Bần chua Sonneratia caseolaris 29 Hình 3.1 b: Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn dịch