Chương Giới thiệu Thực tế chuyên nghành môn học quan trọng nghành công nghệ sinh học Đối với sinh viên chúng em thực tế mơn học thú vị bổ ích Chuyến thực tế dịp để sinh viên chúng em ôn lại kiến thức mà học qua giáo trình, tài liệu truyền đạt nhiệt tình thầy giáo Bên cạnh đó, chúng em tiếp xúc với môi trường thực tế công ty, học hỏi thêm nhiều hay Chuyến dịp sinh viên ngành công nghệ sinh học có định hướng nghề nghiệp tương lai nghiệp nghiên cứu khoa học sau Nhóm sinh viên ngành cơng nghệ sinh học nông nghiệp hướng dẫn giảng viên môn bắt đầu chuyến thực tế đến viện, sở trung tâm nghiên cứu từ ngày 12/11/2011 đến 19/11/2011 Chúng em học tham quan số địa điểm tỉnh thành phố: tỉnh Tiền Giang, thành phố Hồ Chí Minh, tỉnh Bình Dương, tỉnh Bình Thuận thành phố Đà Lạt – tỉnh Lâm Đồng Trong có địa điểm Trung Tâm Nghiên cứu Ứng dụng Dịch vụ Khoa học Công nghệ Tiền Giang.3 Trung tâm khoa học nông nghiệp công nghệ cao4 Viện Khoa học kỹ thuật Nông nghiệp Miền Nam5 công ty ajnomoto6 công ty trách nhiệm hữu hạn Tân hiệp Phát7 6.Công ty cổ phần sữa Lâm Đồng.8 Công ty organik9 Viện nghiên cứu hạt nhân Đà Lạt.10 Hợp tác xã rau Xuân Hương11 10 Cơ sở sản xuất giống trồng Phan Sinh.12 Chương Tổng quan vùng miền 2.1 Thành phố Long Xuyên tỉnh An Giang Thành phố Long Xuyên thành phố thuộc tỉnh tỉnh lỵ tỉnh An Giang, đồng thời trung tâm trị, kinh tế, văn hóa khoa học kỹ thuật vùng đồng sông Cửu Long Thành phố Long Xuyên đô thị loại II, nằm bên hữu ngạn sông Hậu Cách Thành phố Hồ Chí Minh 189 km phía Tây Nam, cách biên giới Campuchia 45 km đường chim bay Long Xun có diện tích tự nhiên 106, 87km Dân số khoảng 253.048 người (Cục Thống kê tỉnh An Giang, 2010) Long Xuyên thành phố phát triển thương mại, chủ yếu mua bán lúa gạo công nghiệp chế biến thủy sản… 2.2 Thành phố Mỹ Tho – tỉnh Tiền Giang Thành phố Mỹ Tho đô thị loại II, trực thuộc tỉnh Tiền Giang, đô thị tỉnh lỵ, nằm bờ bắc hạ lưu sông Tiền, cách thành phố Hồ Chí Minh 70km phía Nam Diện tích tự nhiên: 81.54 km2 Dân số khoảng 215.000 người (Tổng cục thống kê, 2009) Thành phố vùng kinh tế trọng điểm tỉnh mạnh cơng nghiệp, thương mại dịch vụ tiềm du lịch, đặc biệt du lịch xanh miệt vườn, sông nước 2.3 Thành phố Hồ Chí Minh Thành phố Hồ Chí Minh thành phố đông dân nhất, đồng thời trung tâm kinh tế, văn hóa, giáo dục quan trọng Việt Nam Nằm vùng chuyển tiếp miền Đông Nam Bộ Tây Nam Bộ, Thành phố Hồ Chí Minh ngày bao gồm 19 quận huyện, tổng diện tích 2.095,01 km² Dân số: 7.382.287 người (Tổng cục thống kê, 2010) Thành phố Hồ Chí Minh giữ vai trò đầu tàu kinh tế Việt Nam Nền kinh tế Thành phố Hồ Chí Minh đa dạng lĩnh vực, từ khai thác mỏ, thủy sản, nông nghiệp, công nghiệp chế biến, xây dựng đến du lịch, tài Về thương mại, Thành phố Hồ Chí Minh có hệ thống trung tâm mua sắm, siêu thị, chợ đa dạng Thu nhập bình quân đầu người thành phố đạt 2.800 USD/năm (Tổng cục thống kê, 2010) 2.4 Tỉnh Bình Dương Bình Dương tỉnh thuộc vùng Đông Nam Bộ Tỉnh lỵ thị xã Thủ Dầu Một, cách trung tâm thành phố Hồ Chí Minh 30 km, phía Bắc Diện tích tự nhiên 2.681,01 km2 Dân số Dân số: 1.481.550 người (Tổng cục thống kê, 2009) Bình Dương địa phương động kinh tế, thu hút đầu tư nước ngồi Với chủ trương tạo mơi trường đầu tư tốt Việt Nam Bình Dương có 28 khu cơng nghiệp hoạt động, nhiều khu cơng nghiệp cho th gần hết diện tích, Với tốc độ tăng giá trị sản xuất công nghiệp mức cao Bình Dương sớm trở thành tỉnh cơng nghiệp theo hướng đại 2.5 Tỉnh Bình Thuận Bình Thuận tỉnh duyên hải Nam Trung Bộ, với bờ biển dài 192 km từ mũi Đá Chẹt giáp Cà Ná (Ninh Thuận) đến bãi bồi Bình Châu (Bà Rịa-Vũng Tàu) Tỉnh lỵ thành phố Phan Thiết, cách Thành phố Hồ Chí Minh 198 km, phía Đơng Bắc Diện tích tồn tỉnh: 7.828 km² Dân số: Dân số: 1.169.450 người (Tổng cục thống kê, 2009) Bình Thuận tỉnh mạnh đánh bắt thủy hải sản, vùng có diện tích chun canh cơng nghệp ăn lớn: long, tiêu, cao su… Bên cạnh đó, tỉnh ven biển, khí hậu quanh năm nắng ấm, nhiều bãi biển đẹp, cảnh quan tự nhiên thơ mộng, giao thông thuận lợi, Bình Thuận trung tâm du lịch lớn Việt Nam 2.7 Thành phố Đà Lạt – tỉnh Lâm Đồng Đà Lạt đô thi loại 1, thành phố tỉnh lỵ tỉnh Lâm Đồng, nằm cao nguyên Lâm Viên, thuộc vùng Tây Nguyên Với độ cao 1.500 m so với mực nước biển dãy núi hệ thực vật rừng bao quanh, Đà Lạt thừa hưởng khí hậu miền núi ôn hòa dịu mát quanh năm Lịch sử kỷ để lại cho thành phố di sản kiến trúc giá trị, ví bảo tàng kiến trúc châu Âu kỷ 20 Diện tích tự nhiên thành phố: 393,29 km² Dân số: 206.105 người (Niên giám thống kê, 2009) Phần lớn cư dân thành phố người Kinh, phần nhỏ lại gồm người Hoa, người Cơ Ho dân tộc thiểu số khác Tày, Nùng, Chăm (Trần Sỹ Thứ, 2008) Đà Lạt từ lâu thành phố du lịch tiếng, khí hậu mát mẻ, tài nguyên thiên nhiên nhân văn phong phú giúp thành phố năm thu hút hàng triệu du khách tới thăm viếng nghỉ dưỡng Bên cạnh nhờ thổ nhưỡng khí hậu thuận lợi, Đà Lạt có điều kiện để phát triển nhiều loại ôn đới, hầu hết giống rau thành phố nhập từ Pháp, Đức, Hà Lan, Nhật Bản, Hoa Kỳ Cây rau chiếm diện tích canh tác chủ yếu Đà Lạt cải bắp, xà lách…(Trần Sỹ Thứ, 2008) Chương Trung tâm nghiên cứu ứng dụng dịch vụ khoa học công nghệ Tiền Giang Hình 3.1: Trung tâm Nghiên cứu Ứng dụng Dịch vụ Khoa học công nghệ Tiền Giang 3.1 Tổng quan Trung Tâm Nghiên Cứu Ứng Dụng Dịch Vụ Khoa Học Công Nghệ Tiền Giang đơn vị nghiệp hoạt động theo chế độ tự túc tài chính, trực thuộc Sở Khoa học Cơng nghệ Tiền Giang Địa chỉ: 555 đường Ấp Bắc, phường 5, thành phố Mỹ Tho, tỉnh Tiền Giang Trung tâm có văn phịng ba nhà xưởng sản xuất: Nhà xưởng khí vật liệu mới: sản xuất sơn tĩnh điện, carboxit… Nhà xưởng chế biến thực phẩm: Nước uống sơng Tiền, bọc xử lí nước… Xưởng Cơng nghệ sinh hóa 3.2 Chức Trung tâm sử dụng 100% nguồn vốn tư nhân nên hoạt động chủ yếu trung tâm sản xuất sản phẩm bán thị trường, phục vụ cho nghiên cứu Nghiên cứu kĩ thuật nuôi trồng nấm; kinh doanh dịch vụ meo giống sản phẩm kèm từ nấm bịt phôi, nấm tươi, nấm khô… Sản xuất sản phẩm men sinh hóa từ chủng VSV có lợi để phục vụ cho xử lí mơi trường phục vụ chăn nuôi gia súc gia cầm Là đầu mối tổ chức nghiên cứu, ứng dụng thành tựu khoa học kỹ thuật chuyển giao công nghệ phục vụ sản xuất đời sống 3.3 Các loại nấm trồng trung tâm Trung tâm trổng nhiều loại nấm, chủ yếu nấm Linh chi nấm Bào ngư 3.3.1 Nấm linh chi (Ganoderma spp.) Là loại nấm dược liệu Nấm linh chi điều trị số bệnh như: cao huyết áp, tiểu đường, thấp khớp 3.3.2 Nấm bào ngư Là tên dùng chung cho loài thuộc giống Pleurotus Gồm nhóm lớn: Nhóm chịu nhiệt (ra thể nhiệt độ từ 200C – 30oC) Nhóm chịu lạnh (ra thể nhiệt độ từ 15oC – 25oC) Nấm bào ngư cịn có tên nấm sị, nấm hương trắng, nấm dai Nấm bào ngư loài nấm dễ trồng, cho suất cao, có nhiều đặc tính tốt, loại thực phẩm giàu dinh dưỡng Nấm bào ngư trồng nhiều chất khác như: rơm, bã mía, mạt cưa…Tuy nhiên trồng rơm suất đạt khơng cao Trong thực phẩm nấm bào ngư đùi gà ngon nấm bào ngư khác 3.3.3 Nấm trân châu (Pholiota nameko) Là loại nấm Tiền Giang Quy trình trồng khó, lồi nấm hướng lạnh nên trồng vào mùa mưa hay mùa lạnh 3.3.4 Nấm mèo đen (Auricularia auricula) Là loài nấm nhiệt đới Mộc nhĩ loại thực phẩm tốt, dinh dưỡng cao có giá trị dược liệu 3.3.5 Nấm hầu thủ (Hericium erinaceus) Là lồi nấm dược liệu Nấm hầu thủ thích nghi tốt Đồng sông Cửu long, sản lượng cao, dễ trồng Nấm hầu thủ ăn uống ngon thơm 3.3.6 Nấm rơm (Volvariella volvacea) Gồm có loại nấm rơm trắng, nấm rơm đen nấm rơm chân trắng đầu đen Nấm rơm trắng hay đen phụ thuộc vào cách trồng nơi trồng Trồng nhà nấm trắng trồng trời Nấm rơm trắng dễ tiêu thụ phẩm chất khơng nấm rơm đen 3.4 Kỹ thuật trồng nấm Bào ngư Linh chi 3.4.1 Chuẩn bị nguyên vật liệu Ngun liệu làm mơi trường ni nấm loại phế thải nông nghiệp giàu chất cenlulose như: chủ yếu mạc cưa cao su, sua đủa bã mía lấy từ nhà máy đường (cũng tùy thuộc vào thời vụ) Trung tâm thường lấy khoảng 3200 bịt mạc cưa Meo giống: trung tâm tự phân lập từ giống gốc Que cấy thân khoai mì Nguyên liệu qua xử lý: Gỗ mềm dung máy sàn lấy dạng mịn đem ủ chín 48 - 72h Phối trộn chất dinh dưỡng cộng với tỉ lệ 6:4 (mạc cưa: bã mía), cho vào túi nilon Lị sấy khử trùng túi nilon chứa phôi đốt than đá sau đem ngồi cấy meo giống bã mía, gỗ mềm( khơng có tinh dầu48h độc tố) mạc cưasàn máy dạng mịn làm ẩm + ủ đống 0.5-1%0 DAP ủ nước vôi chất trồng nấm phối trộn phụ gia đóng túi để kệ nước trực tiếp khoảngliệu 35 Hình 3.2: Sơ đồ xửnguội lý nguyên cấy giống 3.4.2 Chuẩn bị nhà nấm Nhà nấm làm tre sắt, máy lợp lá, xung quanh nhà bao lưới cấy giống cước để che chắn côn trùng giữ độ ẩm Nhà trồng nấm phải sẽ, cao ráo, thống khí, nước giữ độ ẩm Các bịt phôi nấm xếp đặt bệ (bằng tre hay sắt) treo ngang, hàng cách 20 – 30cm, dây cách 20 – 25cm, dây treo từ đến 10 bịt phơi Tốt bố trí dàn treo theo khối một, khối rộng từ 1,4 - 1,6 chiều dài tùy theo nhà trồng Mỗi khối chừa lối để tiện chăm sóc thu hái Đưa bịt phơi nấm vào nhà trồng chăm sóc Chọn bịt có sợi tơ nấm mọc trắng đều, sau tiến hành tháo nút bơng phía miệng bịt phơi dùng dao lam rạch từ – đường dài khoảng – 4cm bịt phôi, sau rạch bịt để ngày hôm sau phun tưới nước Nước tưới nấm phải sạch, không phèn, không chứa chất độc hại nấm nên tưới bình phun sương hay vịi phun thật mịn Tưới nước nhiều hay tùy theo ẩm độ khơng khí nhà ni nấm Bình qn lần/ngày, khơ từ – lần/ngày Sao cho độ ẩm mơi trường khơng khí nơi trồng nấm đạt 60-65% (bào ngư), 75-85% (linh chi) điều kiện thích hợp để tạo thể nấm phát triển Khử trùng nhà nấm trước treo bịt nấm 3.4.3 Cấy giống ủ sợi tơ nấm: Sau chuẩn bị bịt phôi, dùng que cấy, cấy truyền phơi nấm sau cho vào túi nilon chuẩn bị trước Giai đoạn ni ủ tơ nấm: Sạch thoáng mát Định kỳ làm vệ sinh formol, khử nước vơi Ít ánh sáng không tối Không bị mưa nắng chiếu Không để chung với đồ đạc sinh hoạt gia đình, vật liệu, sách Không ủ chung với giàn nấm tưới thu hoạch xong Bịt ủ xếp kệ treo giàn Không chồng chất lên nhiều lớp Không xếp vào ngăn, tủ kín làm tơ bị ngộp Cứ ngày ta kiểm tra lần nhằm phát bịt nhiễm mốc xanh để huỷ bỏ, không để lây nhiễm sang bịt khác Trong thời gian nuôi ủ tơ nấm, không cần tưới thường xuyên mà tưới nền, xung quanh vách cho đảm bảo nhiệt độ ẩm độ Thời gian nuôi ủ tơ nấm bào ngư khoảng 25 – 30 ngày 3.4.4 Chăm sóc 3.4.4.1 Nấm Bào ngư Sau ủ tơ lan trắng đến đáy bịt, để loại bỏ bụi bám bên bịch ta cần nhúng bịt vào xô nước lạnh đến cổ rút cho bụi tạo sốc nhiệt trước treo nhà trồng nấm để tưới đón Gần nguồn nước tưới có chổ nước Khơng gần nơi khói bụi nguồn nước nhiễm ổ rác, mương cống, chuồng gà, chuồng heo, bịt nấm hư, nấm nhạy cảm với mơi trường Nhiệt độ thích hợp: 20 – 30oC, độ ẩm khơng khí cần khoảng 80 – 90% Bịt phơi sau làm nói phần treo lên giàn để tưới đón nấm, nhớ rút gòn cổ bịt để nấm mọc từ Cách tưới: khơng tưới thẳng lên bịt phơi mà phun xịt tạo mưa nhẹ rơi từ xuống, tưới ướt vách, nhà để tạo độ ẩm khơng khí cần thiết cho nhà trồng nấm Tuỳ theo thời tiết mà tưới nhiều hay để tạo ẩm cho nhà trồng nấm, ngày tưới – lần (khi mưa dầm ẩm ướt, không cần tưới) Không để giọt nước bắn thẳng vào nụ nấm làm hư hỏng 3.4.4.2 Nấm Linh chi Rạch túi tưới nước: sau 25 - 30 ngày, kể từ ngày cấy giống, sợi nấm ăn kín ¾ túi Rạch vết rạch sâu vào túi 0,2-0,5cm, đối xứng bề mặt túi nấm Đặt túi nấm giàn cách - 3cm để nấm không chạm vào Từ - 10 ngày đầu chủ yếu tiến hành tưới nước nhà, đảm bảo độ ẩm 80 - 90%, thơng thống vừa phải Khi thể nấm bắt đầu mọc từ vết rạch qua nút bơng ngồi việc tạo độ ẩm, tưới phun sương nhẹ vào túi nấm từ 1-3 lần/ ngày, tuỳ theo điều kiện thời tiết 3.4.5 Thu hoạch, sơ chế, bảo quản 3.4.5.1 Nấm Bào ngư Việc thu hái nấm bào ngư nên tiến hành giai đoạn trưởng thành, sau rạch bịt phôi nấm khoảng từ – 10 ngày lúc tai nấm chuyển từ dạng phễu lệch sang dạng lục bình (mũ nấm mỏng lại căng rộng ra, mép quằn xuống – mép cong lên nấm già) Nấm thu giai đoạn này, chất lượng dinh dưỡng cao, bị hư hỏng (khơng gãy bìa mép thu hái) dễ bảo quản (giữ lâu dạng tươi) Thường thu hoạch nấm vào buổi sáng sớm, hái nấm nên hái hết cụm, không nên tách tai lẽ để sót lại phần chân nấm dễ gây nhiễm, làm lần thu hoạch không cho tai nấm tốt, suất giảm Lưu ý làm vệ sinh gốc nấm cịn sót lại bịt nấm Nấm hái xong, nên cắt gốc cho cho vào túi nilon có đục nhiều lỗ nhỏ (thơng khí, tế bào nấm không bị ngộp chết) Thu hoạch đợt cổ bịt xong, ta dùng dao lam rạch bịt đáy bên hông nơi đường dài chừng – cm Lần lượt thu hoạch nấm nơi Kết thúc đợt thu hái (chừng – ngày) ngưng tưới khoảng ngày để tơ nấm phục hồi Nếu thấy bịt xốp nhẹ dồn nén bịt lại Chế độ chăm sóc giống ban đầu Tuỳ theo giống nấm, thu hoạch khoảng – 12 đợt, đợt cách chừng 15 – 20 ngày khoảng – tháng (giống bào ngư Nhật khoảng tháng) bịch đen tóp lại ngưng Năng suất thu hoạch nấm dao động khoảng 40 – 60% so với trọng lượng bịt 3.4.5.2 Nấm Linh chi Dùng kéo sắc cắt chân nấm lật ngửa nấm, tránh bào tử rớt ngoài, thu hái xong cần rửa mũ nấm chân nấm Vớt ra, để nước đem phơi đến săn sấy nhiệt độ 40 – 45 oC, đến bẻ nấm thấy giòn cứng Độ ẩm nấm khô 13%, khoảng 3kg nấm tươi 1kg nấm khô Để bảo quản nấm, chọn túi nilon lớp, sau dùng tay vuốt ngược từ đáy túi lên miệng túi để khơng khí hết, cho nấm vào buộc kín lớp Dùng bao tải chứa bảo quản nơi khơ Thời gian bảo quản từ 12-18 tháng 10 Đất cày xới tiến hành bón bao vơi (30 kg) cho sào đất (1000 m 2), tác dụng việc bón vơi để làm tăng pH đồng thời để xử lý đất Sau đó, lên luống bón tiếp kg phân hữu cơ, 60 kg gel phân dinomic kết hợp với phân vi sinh, tưới qua lần trải bạc Tác dụng việc trải bạc để làm tăng ẩm độ đất diệt mầm bệnh, làm cho phân không bị trôi, hạn chế cỏ dại 11.4.3 Trồng chăm sóc Sau làm đất xong, tiến hành trồng cây, mật độ khoảng cách khoảng 30 – 35 cm Một tuần sau, phun thuốc trừ sâu để diệt sâu bệnh gây hại chủ yếu đất bón thêm phân chậm phát triển Một xào đất trồng 20.000 11.4.4 Nước tưới Hợp tác xã đầu tư xây dựng hệ thống tưới tự động Chế độ tưới cho khoảng ngày tưới lần Trời nắng tưới từ g – 10 g sáng đủ ướt 11.4.5 Thu hoạch Khoảng thời gian từ gieo hạt đến đem trồng 25 ngày Khoảng thời gian từ trồng luống đến thu hoạch 35 ngày Mỗi năm hợp tác xã trồng vụ Sản phẩm sau thu hoạch vận chuyển đến siêu thị, metro, Sài Gịn, Cần Thơ, Nha Trang… Hình 11.2: Vường rau hợp tác xã Xuân Hương – Đà Lạt 49 Chương 12 Công ty giống trồng Phan Sinh - Đà Lạt 12.1 Giới thiệu Hình 12.1: Sơ lược cơng ty giống trồng Phan Sinh Địa chỉ: 16, Huyền Trân Công chúa, thành phố Đà Lạt, tỉnh Lâm Đồng Cơ sở có diện tích Nghiên cứu hai đối tượng cẩm chướng cúc Cung cấp giống cho vườn hoa nước Đà Lạt, Huế, Sa Đéc… Trung tâm chuyên nghiên cứu nhân nhanh, giống cúc Đồng tiền, Cẩm chướng, Địa Lan, Cúc… Công ty chuyên cung cấp loại cung cấp cho thị trường Nhân nhanh giống kỹ thuật ni cấy mơ 12.2 Lịch sử hình thành phát triển Công ty giống trồng Phan Sinh có trụ sở số 16 Huyền Trân, phường 5, thành phố Đà Lạt Cơng ty có thời gian hoạt động gần 20 năm Lúc đầu công ty nhân giống loại khoai tây, rau, hoa lan, địa lan, đồng tiền Hiện công ty tập trung nhân giống loại hoa cúc cẩm chướng để cung cấp giống theo đơn đặt hàng khách hàng nơi Công ty đầu tư hệ thống phịng thí nghiệm ni cấy mơ tiện nghi hoàn chỉnh phục vụ từ đầu cuối quy trình nhân giống Mục đích cơng ty tạo việc làm cho người nghèo địa phương Hiện cơng ty có 80 cơng nhân làm việc công ty 12.3 Kỹ thuật vô trùng Vô trùng dụng cụ thuỷ tinh, nút đậy môi trường: 50 Dụng cụ thuỷ tinh Thông thường dụng cụ thủy tinh dùng thí nghiệm thường xử lý dung dịch sulfocromate lần đầu trước đưa vào sử dụng; sau cần rửa xà phòng, tráng nước cất để thật trước sử dụng Hoặc khử trùng tủ sấy nhiệt độ cao nhiều phút nhiều Các dụng cụ ln gói giấy nhôm hộp kim loại để tránh bị nhiễm trở lại sau khử trùng Nút đậy thường sử dụng túi nilon Môi trường Môi trường nuôi cấy thường hấp khử trùng nồi hấp, khử trùng áp suất nước bão hòa Thời gian hấp khoảng 1h30 phút áp suất nước bão hịa với nhiệt độ 121oC Khử trùng mơ thực vật Mơ cấy hầu hết phận khác thực vật hạt giống, phơi, nỗn, đế hoa, lá, đầu rễ, thân củ… Tuỳ theo tiếp xúc với mơi trường bên ngồi, phận chứa nhiều hay vi khuẩn nấm Phương pháp vô trùng mô cấy thông dụng dùng chất hố học có hoạt tính diệt nấm, vi khuẩn Tùy theo mục đích loại mà sử dụng hóa chất với nồng độ khác để khử trùng 12.4 Kỹ thuật cấy vô trùng Để mẫu cấy không bị nhiễm suốt thao tác cấy mô thực vật nên làm việc tủ cấy vô trùng (laminar) 12.5 Môi Trường Sử dụng chủ yếu môi trường MS (Murashige Skoog, 1962) Đường, Aga ( tùy loại môi trường tùy loại aga mà có liều lượng khác nhau) Bổ sung thêm khoáng đa lượng vi lượng với nồng độ khác tùy theo loại Có thể bổ sung than môi trường tạo rễ 12.6 Ánh sáng nhiệt độ Tận dụng ánh sáng mặt trời, với mái che nhựa Tùy theo mùa có ngày ngắn, ngày dài Vào thời gian ngày ngắn đêm dài cần sử dụng đèn để hỗ trợ Điều kiện khí hậu thích hợp (20-25oC) 12.7 Khu vực ni cấy trữ mẫu Phịng cấy mẫu phải vơ trùng, có sáu tủ cấy thiết bị cần thiết khác Phòng trữ mẫu: Được thiết kế với mái tôn trắng để sử dụng ánh sáng mặt trời Trên mái nhà có quạt hút Có gắn thêm đèn Dưới mái tơn có gắn xốp dày, nhằm giữ nhiệt độ phịng ln mát mẻ 51 Xung quanh kính để ánh sáng chiếu vào Có nhiều kệ để chứa mẫu Phòng tắm nắng: Thiết kế đơn giản, xung quanh làm kính 12.8 Kỹ thuật ni cấy 12.8.1 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy Môi trường sử dụng nuôi cấy mô thường dùng môi trường MS Công việc chuẩn bị gồm bước: Chuẩn bị hóa chất để pha mơi trường gồm có đa lượng MS, vi lượng MS, vitamin chất điều hịa sinh trưởng Sau đó, nấu mơi trường, mơi trường đặc có bổ sung agar thành phần tạo gel Khi mơi trường nấu chảy hồn toàn tiến hành đo chỉnh pH khoảng 5.5 – trước cho vào keo, ống nghiệm bình tam giác 12.8.2 Tạo chồi Giai đoạn tiến hành cấy đỉnh sinh trưởng cấy đỉnh chồi cấy mắt Phương pháp cấy mắt công ty áp dụng giống phương pháp giâm cành cổ điển, tức từ mẫu cấy bệnh cắt thành nhiều mắt mắt tiếp tục trồng môi trường in vitro Như cách làm giúp gia tăng số lượng chồi nhanh 12.8.3 Kéo dài kích thích tạo rễ Sự kéo dài yêu cầu cho tạo rễ đầy đủ Môi trường kéo dài thường không chứa cytokinin Để kích thích rễ người ta thường sử dụng Auxin Các rễ phát triển in vitro ln khơng thích nghi với điều kiện nhà lưới rễ dài gặp khó khăn trồng 12.8.4 Thuần dưỡng trồng Các giống sau tạo từ kỹ thuật ni cấy mơ phịng thí nghiệm chuyển vuờn uơm để tiếp tục đuợc chăm sóc nuôi duỡng Cành giâm xử lý gốc thuốc kích thích rễ sau cắm vào giá thể cát đất sàng mịn, giữ ẩm 70 - 75% rễ 12.8.5 Làm đất 52 Đất trồng cúc cần tơi xốp, thơng thống nhằm tạo điều kiện cho rễ non phát triển thuận lợi giai đoạn đầu Vì thế, bồ sung thêm rơm, rạ, cỏ khô, trấu lúa, xơ dừa…trộn lẫn vào đất để tăng độ thơng thống Bón lót: Phân chuồng: 1000 - 1500 kg (tương đương 1,5 - 2m 3), Phân lân 20 - 30 kg/100m2 Bón vơi bổ sung để điều chỉnh pH đất đạt 6,5 - 7,2 12.8.6 Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng Rửa mẫu vòi nước chảy Dùng dao mổ lột hết non bao xung quanh mẫu chồi để lộ chồi bên chồi Ngâm chồi nước xà phịng lỗng dùng gịn lau nhẹ lên thân chồi Rửa cho xà phòng vòi nước chảy Lắc chồi cồn 70 % phút Sau xử lý với dung dịch javel thương phẩm theo tỉ lệ 1:5 vòng 25-30 phút Trong tủ cấy, dùng kẹp vô trùng cho chồi vào bécher có chứa nước cất vơ trùng, lắc 3-5 lần cho hết mùi Javel Đặt chồi lên giấy vô trùng, dùng dao cắt (đã trùng) chồi bên chồi khỏi chồi mẹ ban đầu Cắt bỏ hết mô chết bị chất khử trùng làm trắng phần gốc chồi Cấy chồi vào chai có chứa mơi trường chuẩn bị Ở sử dụng chai có miệng nhỏ nhằm hạn chế mẫu nhiễm Ni phịng sáng Ghi rõ ngày cấy, giống vào tất chai 12.8.7 Các thao tác cấy truyền mẫu Cẩn thận dùng kéo cắt in-vitro gắp khỏi bình ni cấy Tránh kẹp mạnh làm dập mẫu cấy Một cắt 10 mắt (mỗi mắt khoảng 25-30 cm), cắt bỏ già, héo Cấy mắt vào chai chứa môi trường chuẩn bị, chai khoảng 25 mắt Cấy vào chai chứa mơi trường dạng đứng để cấy truyền tiếp, cịn chai chứa môi trường nằm để xuất giống vườn Ni phịng sáng Ghi rõ ngày cấy truyền Số lần cấy truyền tuỳ thuộc vào loại cây, khỏe phát triển tốt cấy truyền tiếp Những mẫu giống chuẩn bị xuất vườn chọn khỏe Trong môi trường nuôi có bổ sung NAA kích thích rễ Sau rễ chuyển sang phòng tắm nắng khoảng 1-2 tuần tiến hành trồng sang khu vực vườn nguyên liệu (cây mẹ) Vị trí 53 vườn mẹ phải cao ráo, kín gió mái nhà che nilon đơn giản có lưới che để điều chỉnh cường độ ánh sáng 12.8.8 Quy trình nhân giống phương pháp giâm cành 12.8.8.1 Giai đoạn Chọn Cây mẹ chọn cấy mô lứa tuổi sinh trưởng phát triển giống, rễ nhiều không bị sâu bệnh 12.8.8.2 Giai đoạn Chuẩn bị luống trồng Chuẩn bị đất: 50 % xơ dừa + 50 % đất + Trichoderma Hoặc sử dụng phân rơm + đất xốp; phân dơi Có thể bổ sung thêm rơm, rạ, cỏ khô, trấu luá… trộn lẫn vào đất để tăng độ thơng thống Bón lót: Phân chuồng: 1000-1500 kg (tương đương 1,5-2m3), Phân lân 20-30 kg/100m2 Bón vơi bổ sung để điều chỉnh pH đất đạt 6,5-7,2 Lên luống cao phải thoát nước 12.8.8.3 Giai đoạn Trồng vào khu vực sản xuất Những mầm mẹ chọn để đem trồng rễ nhiều, khoẻ mạnh, không sâu bệnh Trồng với khoảng cách 15x15 cm (mật độ 400.000 cây/ha) Chọn ngày râm mát, trồng vào buổi chiều mát Trước trồng 1-2 ngày dùng Viben-C nồng độ 0,3 % tưới lên mặt luống Những ngày đầu cần tưới nước nhẹ nhàng béc phun, vòi sen để tránh lay gốc, trôi không để bị dính vào đất bùn 12.8.8.4 Giai đoạn Kỹ thuật nhân giống phương pháp giâm cành Chuẩn bị nhà giâm: Nhà giâm đơn giản, mái nhà che phủ hai lớp Lớp lớp ni lông, loại lưới che có tác dụng hạn chế cường độ ánh sáng làm giảm nhiệt độ Kỹ thuật giâm cành: Cành giâm cắt từ 8-10 cm, xử lý gốc thuốc kích thích rễ ( IBA, NAA), sau cắm vào giá thể cát đất sàng mịn, giữ ẩm 70-75 % rễ Lưu ý điều khiển lần bấm thứ thứ hai sau vài ngày bấm lần có nhiều nhánh xuất Khi chúng dài từ 12-15 cm, ta lấy ba nhánh phát triển tốt nhất, số cịn lại loại bỏ hết 54 Sau 25 ngày kể từ bấm lần thứ , ta tiến hành cắt cành lần Như mẹ cắt 3-4 cành Sau tiếp tục cắt lần hai, lần ba, lần cách khoảng 25 ngày Chú ý, sau bấm cần xử lý chất kích thích rễ Chế phẩm kích thích rễ thường dùng chất IBA NAA nồng độ 500-1000 ppm, nhúng gốc cành giâm vào dung dịch chất kích thích 3-5 giây, sau để khoảng phút giâm cành vào vườn giâm vĩ giâm chuẩn bị trước Sau 12 ngày vườn vĩ giâm mang bán Với kỹ thuật vụ ( thời gian khoảng bốn tháng) thu 4.000.000 cành giâm có chất lượng tốt, lượng cành giống đủ trồng cho 10 vườn sản xuất Sau 3-4 lần cắt vậy, mẹ già ta có thay chăm sóc cải tạo để làm trẻ hố vườn mẹ Các ưu điểm quy trình: Giảm giá thành giống xuống thấp (80 đ/cành giâm) Tỷ lệ sống sau ươm đạt gần 100 % Chủ động giống phục vụ sản xuất hoa thương phẩm Thời gian từ trồng đến hoa rút ngắn lại khoảng 7-10 ngày so với cấy mô đem trồng sản xuất hoa thương phẩm Quy trình ni cấy ống nghiệm đến sản phẩm: Phịng thí nghiệm→ phịng ươm→ vườn ươm cấp 1→ vườn ươm cấp 2→ vườn ươm cấp 3→ vườn ươm cấp 4→sản phẩm đem bán Môi trường sử dụng chủ yếu môi trường MS Cơ sở thường áp dụng dạng nuôi cấy mô nuôi cấy cụm chồi, nuôi cấy đốt nuôi cấy tạo rễ Ở phịng ươm, kích thích tạo rễ đưa vườn ươm cấp Ở giai đoạn phịng cấy cấy chai lọ đứng hay nằm ( giúp tăng diện tích cấy) Đầu tiên cấy vào chai lọ đứng cho phát triển chiều cao với nhiều đốt thân Sau cấy truyền sang chai lọ nằm nghiêng nhằm tăng diện tích ni cấy đảm bảo chi phí Cấy truyền cách cắt thành đốt nhỏ đặt vào mơi trường có bồ sung than hoạt tính để kích thích tạo rễ 12.8.9 Chăm sóc 12.8.9.1 Tưới nước Sau trồng cần tưới nhẹ - lần/ngày để nhanh hồi phục Sau cần tưới đủ ẩm, - ngày/lần 12.8.9.2 Bảo vệ thực vật 55 Hoa cúc trồng nhà có mái che hạn chế số nấm bệnh khơng có biện pháp phịng chống thường xun bị thất thu sản phẩm bị giảm giá trị nấm bệnh gây hại Bệnh virus: Hiện chưa có thuốc phịng Biện pháp tốt loại bỏ bị nhiễm bệnh virus từ vuờn giống thường xuyên phun thuốc phòng ngừa để loại bỏ vectơ lây truyền Bệnh nấm - khuẩn: Các dạng bệnh thường gặp là: Gốc cành giâm bị thối ướt có màu đen nhạt, Pythium debaryanum gây Vết chết hoại có màu nâu: Rhizoctonia solanii Phytophtora cryptoyea Vết thối gốc thân, có xuất màng tơ trắng: Sclerotinia minor Sclerotinia sclerotiorum Trên xuất bột phấn trắng, Erysiphe cichoracearum gây Mặt có đốm màu vàng sau chuyển sanh màu nâu đen, bị khơ héo Bệnh Septoria chrysanthemi gây Mặt có mụn tập trung, màu nâu: Puccinia chrysanthemi Mặt xuất mụn trắng nhạt: Puccinia horiana Vết tổn thương bị loét, gây nứt thân, khô héo lây nhiễm mạnh Bệnh gây Erwinia chrysanthemi Biện pháp phòng chống tốt xử lý đất canh tác, bổ sung dinh dưỡng cân đối thời gian để tăng sức chống chịu, giữ ẩm độ vừa phải (không khô ẩm), phun phòng định kỳ loại thuốc chống nấm bệnh với liều lượng khuyến cáo 56 (a) (b) (c) (d) (e) (f) Hình 12.2: Cơng ty giống trồng Phan Sinh Nồi hấp trùng (a), keo chứa mẫu cấy (b), môi trường dưỡng (c), dưỡng (d), đưa vào giá thể (e), chuẩn bị bán thi trường (f) 57 Chương 13 Kết luận Chuyến thực tế giúp em rút nhiều học bổ ích Bởi chuyến tạo điều kiện cho sinh viên có hội tiếp xúc với thực tế Từ đó, giúp sinh viên hiểu rõ lý thuyết nhận thấy tính ứng dụng lý thuyết mơn học chun ngành học lớp vào đời sống sản xuất Mỗi địa điểm, sở có quy mơ cách ứng dụng Công nghệ Sinh học khác vào lĩnh vực khác như: Trung tâm Nghiên cứu Ứng dụng Dịch vụ Khoa học Công nghệ Tiền Giang ứng dụng Công nghệ Sinh học trồng nấm; Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp miền Nam ứng dụng Công nghệ Sinh học chọn giống động vật, chọn giống trồng; công ty giống trồng miền Nam ứng dụng Công nghệ Sinh học lai tạo giống; công ty giống trồng Phan Sinh ứng dụng Công nghệ Sinh học thông qua nuôi cấy mô tạo giống trồng Mỗi địa điểm học thiết thực ứng dụng Công nghệ Sinh học thực tế Điều giúp ích nhiều cho sinh viên chuyên ngành Công nghệ Sinh học, giúp sinh viên nhận thấy tầm quan trọng, tính ứng dụng thiết thực việc ứng dụng Công nghệ Sinh học vào đời sống Từ đó, giúp sinh viên xác định hướng đắn cho nghề nghiệp sau Khả ứng dụng kiến thức học vào thực tế Như trình bày trên, nhận thấy tầm quan trọng khả ứng dụng kiến thức chuyên môn Công nghệ Sinh học vào thực tế sản xuất phát triển địa phương ngày phát triển rộng rải Qua chuyến tham quan học tập sở ứng dụng số lĩnh vực sản xuất vào phát triển địa phương công nghệ sản xuất nấm; sản xuất, chọn tạo giống trồng, vật nuôi; ứng dụng Công nghệ Sinh học chẩn đốn, điều trị bệnh, phịng chống dịch… Do đó, nói phát triển lâu dài bền vững địa phương việc ứng dụng Công nghệ Sinh học sản xuất thiếu đặc biệt quan trọng địa phương xác định nông nghiệp chủ lực 58 ... 2.3 Thành phố Hồ Chí Minh Thành phố Hồ Chí Minh thành phố đông dân nhất, đồng thời trung tâm kinh tế, văn hóa, giáo dục quan trọng Việt Nam Nằm vùng chuyển tiếp miền Đông Nam Bộ Tây Nam Bộ, Thành. .. nhập bình quân đầu người thành phố đạt 2.800 USD/năm (Tổng cục thống kê, 2010) 2.4 Tỉnh Bình Dương Bình Dương tỉnh thuộc vùng Đông Nam Bộ Tỉnh lỵ thị xã Thủ Dầu Một, cách trung tâm thành phố Hồ Chí. .. biển, khí hậu quanh năm nắng ấm, nhiều bãi biển đẹp, cảnh quan tự nhiên thơ mộng, giao thông thuận lợi, Bình Thuận trung tâm du lịch lớn Việt Nam 2.7 Thành phố Đà Lạt – tỉnh Lâm Đồng Đà Lạt đô thi