BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI DS. LÊ VĂN MẠNH NGHIÊN CỨU BIỆN PHÁP CẢI THIỆN ĐỘ HÒA TAN CỦA AMLODIPIN BESILAT TRONG VIÊN NANG AMLOTHEPHAM LUẬN VĂN DƯỢC SĨ CHUYÊN KHOA CẤP I HÀ NỘI 2015 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI DS. LÊ VĂN MẠNH NGHIÊN CỨU BIỆN PHÁP CẢI THIỆN ĐỘ HÒA TAN CỦA AMLODIPIN BESILAT TRONG VIÊN NANG AMLOTHEPHAM LUẬN VĂN DƯỢC SĨ CHUYÊN KHOA CẤP I CHUYÊN NGÀNH: CN DƯỢC PHẨM VÀ BÀO CHẾ MÃ SỐ: CK 62.72.04.02 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS. Phạm Thị Minh Huệ HÀ NỘI 2015 LỜI CẢM ƠN Với lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc, tôi xin gửi lời chân thành cám ơn tới Cô giáo PGS. TS. Phạm Thị Minh Huệ đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện và hoàn thành khóa luận này. Tôi cũng xin gửi lời cám ơn tới các Thầy, Cô và Kỹ thuật viên Bộ môn Bào chế, Ban lãnh đạo Công ty, các bạn đồng nghiệp công tác tại phòng Nghiên cứu phát triển, phòng Kiểm tra chất lượng, phòng Đảm bảo chất lượng, nhà máy sản xuất thuốc tân dược non-bêtalactam của Công ty cổ phần dược vật tư y tế Thanh Hóa đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi hoàn thành khóa luận này. Tôi cũng xin cám ơn sự quan tâm của Ban giám hiệu, phòng đào tạo và các thầy cô đã dạy dỗ tôi trong suốt thời gian tôi học tập tại trường. Thanh Hóa, ngày 20 tháng 5 năm 2015 Học viên Lê Văn Mạnh MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN .................................................................................................... 3 MỤC LỤC.......................................................................................................... 4 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ........................................ 7 DANH MỤC CÁC BẢNG ................................................................................. 8 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ.......................................................... 10 ĐẶT VẤN ĐỀ .................................................................................................... 1 Chương 1. TỔNG QUAN .................................................................................. 2 1.1. Tổng quan về amlodipin .......................................................................... 2 1.1.1. Công thức hóa học .................................................................................... 2 1.1.2. Tính chất lý hóa ........................................................................................ 2 1.1.3. Dược động học ......................................................................................... 3 1.1.4. Tác dụng dược lý và cơ chế tác dụng ........................................................ 4 1.1.5. Chỉ định, chống chỉ định, liều dùng, tác dụng không mong muốn .............. 5 1.1.6. Độ ổn định ................................................................................................ 5 1.1.7. Đại cương về viên nang chứa amlodipin 5mg ........................................... 7 1.1.8. Một số dạng bào chế trên thị trường ......................................................... 9 1.2. Nghiên cứu các biện pháp làm tăng độ hòa tan cho các dạng thuốc rắn …………………………………………………………………………………..10 1.2.1. Khái niệm độ hoà tan dược chất từ dạng bào chế ................................... 10 1.2.2. Các yếu tố ảnh hưởng đến độ hoà tan ..................................................... 11 1.2.3. Các biện pháp làm tăng độ hòa tan cho các dạng thuốc rắn ................... 14 1.2.4. Một số nghiên cứu về dạng thuốc viên nén, viên nang amlodipin besilat . 20 Chương 2. NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ................................................................................................. 24 2.1. Nguyên liệu và thiết bị ........................................................................... 24 2.1.1. Nguyên liệu ............................................................................................. 24 2.1.2. Thiết bị ................................................................................................... 25 2.2. Nội dung nghiên cứu.............................................................................. 26 2.2.1. Phương pháp bào chế viên nang amlodipin 5mg ..................................... 26 2.2.2. Phương pháp đánh giá ............................................................................ 30 Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ............................................................ 38 3.1. Khảo sát sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang với nồng độ dược chất 38 3.2. Đánh giá độ hòa tan viên nang Amlor® và viên nang Amlodipin 5 mg công ty đang sản xuất ...................................................................................... 41 3.2.1. Đánh giá độ hòa tan viên nang amlodipin 5mg công ty đang sản xuất..... 41 3.2.2. Đánh giá độ hòa tan viên nang amlodipin 5mg công ty đang sản xuất..... 42 3.3. Nghiên cứu các biện pháp cải thiện độ hòa tan của amlodipin từ viên nang … ............................................................................................................. 45 3.3.1. Đánh giá độ tan bão hòa của nguyên liệu amlodipin besilat ................... 45 3.3.2. Đánh giá ảnh hưởng của kích thước tiểu phân nguyên liệu đến tốc độ hòa tan của viên nang amlodipin 5mg ...................................................................... 46 3.3.3. Bào chế viên nang amlodipin 5mg với các công thức tá dược dính khác nhau ……………………………………………………………………………………………..48 3.3.4. Sử dụng tá dược siêu rã .......................................................................... 50 3.3.5. Lựa chọn công thức bào chế viên nang amlodipin bằng cách đánh giá các chỉ tiêu khác của các công thức có tá dược siêu rã khác nhau ........................... 56 3.3.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của phương pháp bào chế đến độ hòa tan của viên………………………………………………………………………………………..57 3.4. Nâng cấp qui trình bào chế viên nang amlodipin 5mg ở qui mô pilot 58 3.5. Theo dõi độ ổn định của viên nang amlodipin 5mg ............................. 70 3.5.1. Theo dõi độ ổn định viên nang amlodipin 5mg ở điều kiện lão hóa cấp tốc…………………………. .................................................................................. 70 3.5.2. Theo dõi độ ổn định viên nang amlodipin 5mg ở điều kiện thường .......... 71 Chương 4. BÀN LUẬN.................................................................................... 73 4.1. Về chất lượng của chế phẩm amlodipin đang sản xuất tại công ty so với sản phẩm Amlor® 5mg ................................................................................... 73 4.2. Về ảnh hưởng của một số tá dược và kỹ thuật bào chế đến độ hoà tan và độ ổn định của viên nang amlodipin .......................................................... 73 4.3. Về tuổi thọ của viên nang amlodipin qua đánh giá thực nghiệm ........ 74 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ......................................................................... 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Cụm từ đầy đủ BP Dược điển Anh CPP Crosspovidon CT Công thức DĐVN IV Dược điển Việt Nam IV EurP Dược điển Châu âu KTMR Kích thước mắt rây LHCT Lão hóa cấp tốc NCC Natri cross carmellose NSG Natri starch glycolat CP Cross povidon PVP Polyvinyl pyrrolidon SKD Sinh khả dụng STT Số thứ tự TB Trung bình TBGH Tinh bột tiền gelatin hóa một phần TBS Tinh bột sắn TC NSX Tiêu chuẩn nhà sản xuất TDSR Tá dược siêu rã TKHH Tinh khiết hóa học TLTK Tài liệu tham khảo USP Dược điển Mỹ DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1: Độ tan của các dạng amlodipin besilat và amlodipin base trong nước ở nhiệt độ phòng ..................................................................................................... 2 Bảng 2: Một số dạng bào chế của amlodipin trên thị trường ............................... 9 Bảng 3: Nguyên liệu sử dụng cho nghiên cứu ................................................... 24 Bảng 4: Tương quan giữa chỉ số nén và khả năng trơn chảy theo USP 37 ......... 31 Bảng 5: Tương quan giữa tỷ số hausner và khả năng trơn chảy ......................... 31 Bảng 6: Mật độ quang của dãy dung dịch chuẩn amlodipin trong môi trường pH 1,2 ..................................................................................................................... 39 Bảng 7: Mật độ quang của dãy dung dịch chuẩn amlodipin trong môi trường pH 4,5 ..................................................................................................................... 39 Bảng 8: Mật độ quang của dãy dung dịch chuẩn amlodipin trong môi trường pH 6,8 ..................................................................................................................... 40 Bảng 9: Kết quả đánh giá viên nang amlodipin 5mg ......................................... 41 Bảng 10: tỷ lệ % amlodipin hòa tan từ viên nang amlodipin theo thời gian ....... 41 Bảng 11: So sánh tỷ lệ phần trăm hòa tan amlodipin từ viên amlor® 5mg và amlodipin 5mg .................................................................................................. 42 Bảng 12: Kết quả đánh giá độ tan bão hòa của nguyên liệu amlodipin besilat ... 45 Bảng 13: Kết quả phân bố kích thước amlodipin trước khi xay và sau khi xay qua các cỡ rây .......................................................................................................... 46 Bảng 14: % amlodipin hòa tan từ viên bào chế từ nguyên liệu nghiền mịn ở pH 1,2 và 6,8 ........................................................................................................... 46 Bảng 15: Các công thức viên nang amlodipin 5mg sử dụng các tá dược dính khác nhau .................................................................................................................. 48 Bảng 16: Độ rã của viên nang amlodipin 5mg bào chế từ các công thức tá dược dính khác nhau .................................................................................................. 49 Bảng 17: % amlodipin hòa tan từ viên nang amlothepham CT1 đến CT3 ở pH 1,2 và 6,8................................................................................................................. 49 Bảng 18: Các công thức viên nang amlodipin 5mg sử dụng tá dược siêu rã khác nhau .................................................................................................................. 50 Bảng 19: Độ rã của viên amlodipin 5 mg từ CT1 đến CT9 ................................ 51 Bảng 20: % amlodipin hòa tan từ các viên nang CT1 đến CT9 thử ở môi trường pH 1,2; pH 4,5 và pH 6,8 ................................................................................... 51 Bảng 21: Tỷ trọng biểu kiến, độ trơn chảy, hệ số carr và hausner của CT1, CT4, CT7 ................................................................................................................... 56 Bảng 22: Kết quả độ rã, độ đồng đều khối lượng, phân bố kích thước hạt ......... 57 Bảng 23: % amlodipin hòa tan từ viên amlodipin 5mg được bào chế thay đổi phương pháp tạo hạt khô bằng dập viên ở môi trường pH 1,2 và 6,8.................. 57 Bảng 24: Công thức bào chế ở qui mô thí nghiệm và pilot ................................ 58 Bảng 25: Các thông số trọng yếu của các giai đoạn sản xuất viên nang ............. 59 Bảng 26: So sánh các thông số trọng yếu của qui mô phòng thí nghiệm và pilot .......................................................................................................................... 60 Bảng 27: % amlodipin hòa tan từ viên được bào chế ở qui mô pilot .................. 62 Bảng 28: Kết quả đánh giá độ phân tán của amlodipin sau khi trộn trộn kép trên máy sau thời gian 5 phút .................................................................................... 64 Bảng 29: Kết quả đánh giá phân tán độ ẩm sau khi cho tá dược dính và nhào ẩm trên máy sau thời gian 4 phút ............................................................................. 65 Bảng 30: Kết quả đánh giá độ ẩm, tỷ trọng biểu kiến, độ trơn chảy, phân bố kích thước hạt sau khi xát hạt, sấy hạt và bao trơn ..................................................... 66 Bảng 31: Xác định phân bố kích thước hạt (%) ................................................. 66 Bảng 32: Kết quả đánh giá độ đồng đều khối lượng sau khi đóng nang ............. 66 Bảng 33: So sánh tỷ lệ phần trăm hòa tan amlodipin từ viên amlor® 5mg và amlodipin 5mg được bào chế ở qui mô pilot ...................................................... 68 Bảng 34: Kết quả đánh giá độ ổn định ở điều kiện lão hóa cấp tốc sau 3 tháng . 71 Bảng 35: Kết quả đánh giá độ ổn định ở điều kiện thường sau 4 tháng.............. 71 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Sơ đồ 1: Sơ đồ bào chế viên nang amlodipin 5 mg theo phương pháp tạo hạt bằng dập viên ............................................................................................................. 27 Sơ đồ 2: Sơ đồ bào chế viên nang amlodipin 5 mg theo phương pháp tạo hạt ướt .......................................................................................................................... 29 Sơ đồ 3: Sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang với nồng độ amlodipin ở pH 1,2 .. 39 Sơ đồ 4: Sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang với nồng độ amlodipin ở ph 4,5 ... 40 Sơ đồ 5: Sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang với nồng độ amlodipin ở pH 6,8 .. 40 Sơ đồ 6: Đồ thị độ hòa tan của viên nang amlor® 5mg và amlodipin 5mg ở môi trường pH 1.2 .................................................................................................... 43 Sơ đồ 7: Đồ thị độ hòa tan của viên nang amlor® 5mg và amlodipin 5mg ở môi trường pH 4,5 .................................................................................................... 43 Sơ đồ 8: Đồ thị độ hòa tan của viên nang amlor® 5mg và amlodipin 5mg ở môi trường pH 6,8 .................................................................................................... 44 Sơ đồ 9: Mẫu viên nang amlodipin 5mg trên giỏ quay sau thời điểm thử 30 phút .......................................................................................................................... 44 Sơ đồ 10: Mẫu viên nang amlor® 5mg trên giỏ quay sau thời điểm thử 30 phút45 Sơ đồ 11: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ mẫu viên có nguyên liệu đã được nghiền mịn, thử ở pH 1,2 .............................................................................................. 47 Sơ đồ 12: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ mẫu viên có nguyên liệu đã được nghiền mịn, thử ở pH 6,8 .............................................................................................. 47 Sơ đồ 13: Đồ thị % amlodipin hòa tan CT1 đến CT3 ở pH 1,2 .......................... 49 Sơ đồ 14: Đồ thị % amlodipin hòa tan CT1 đến CT3 ở pH 6,8 .......................... 50 Sơ đồ 15: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ các mẫu viên CT1 đến CT9 ở pH 1,2 53 Sơ đồ 16: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ các mẫu viên CT1 đến CT9 ở pH 4,5 54 Sơ đồ 17: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ các mẫu viên CT1 đến CT9 ở pH 6,8 55 Sơ đồ 18: Đồ thị % amlodipin hòa tan ở pH 1,2 từ viên sản xuất ở qui mô phòng thí nghiệm và qui mô pilot ................................................................................. 63 Sơ đồ 19: Đồ thị % amlodipin hòa tan ở pH 4,5 từ viên sản xuất ở qui mô phòng thí nghiệm và qui mô pilot ................................................................................. 64 Sơ đồ 20: Đồ thị % amlodipin hòa tan ở pH 6,8 từ viên sản xuất ở qui mô phòng thí nghiệm và qui mô pilot ................................................................................. 64 Sơ đồ 21: Đồ thị % amlodipin hòa tan ở pH 1,2 từ viên sản xuất ở qui mô phòng thí nghiệm và viên amlor® 5mg ........................................................................ 69 Sơ đồ 22: Đồ thị % amlodipin hòa tan ở pH 4,5 từ viên sản xuất ở qui mô phòng thí nghiệm và viên amlor® 5mg ........................................................................ 69 Sơ đồ 23: Đồ thị % amlodipin hòa tan ở pH 6,8 từ viên sản xuất ở qui mô phòng thí nghiệm và viên amlor® 5mg ........................................................................ 70 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong những năm gần đây cùng với sự phát triển chung của nền kinh tế, ngành dược cũng có các bước phát triển nhất định, trong đó việc nghiên cứu, đánh giá độ hòa tan của các viên nén, viên nang nhằm đánh giá sinh khả dụng của sản phẩm là cần thiết. Amlodipin là một hoạt chất thuộc nhóm chẹn kênh calci dẫn chất dihydropyridin, được dùng trong điều trị hạ huyết áp và thiếu máu cơ tim đi kèm với đau thắt ngực. Trên thị trường Việt Nam có rất nhiều chế phẩm chứa amlodipin do các công ty trong nước sản xuất và nhập khẩu từ nước ngoài. Trên thực tế, nhiều chế phẩm thuốc có cùng hoạt chất, cùng dạng bào chế nhưng tốc độ và mức độ hấp thu vào tuần hoàn lại khác nhau nên tác dụng điều trị không hoàn toàn giống nhau. Chất lượng nguyên liệu, thành phần tá dược và kỹ thuật bào chế là những yếu tố có nhiều ảnh hưởng tới độ hòa tan và sự hấp thu của thuốc. Đối tượng nghiên cứu của chúng tôi là viên nang amlothepham (amlodipin 5 mg) CTCPDVTYT Thanh Hóa đăng ký theo tiêu chuẩn cơ sở và USP 37. Tuy nhiên, qua nghiên cứu, sản phẩm viên nang amlothepham của Công ty có độ hòa tan kém (< 70%/30 phút) ở cả 3 môi trường pH thử in vitro (theo qui định của FDA). Theo Thông tư 08/2010/TT-BYT, amlodipin là thuốc nằm trong danh mục bắt buộc phải thử tương đương sinh học trước khi tiến hành triển khai đăng ký thuốc tại Việt Nam. Hướng tới đảm bảo độ hòa tan và đáp ứng thử in vitro, trong đó chỉ tiêu độ hòa tan theo yêu cầu dược điển Mỹ 37 (tham khảo chuyên luận viên nén amlodipin besilat (> 80% sau 30 phút), chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu biện pháp cải thiện độ hòa tan của amlodipin besilat trong viên nang AMLOTHEPHAM” với mục tiêu: 1. Cải tiến công thức và qui trình bào chế viên nang AMLOTHEPHAM (amlodipin 5mg) của công ty Cổ phần dược - VTYT Thanh Hóa ở qui mô pilot đạt tiêu chuẩn hòa tan theo Dược điển Mỹ 37 (tham khảo chuyên luận viên nén amlodipin besilat) và tương đương hoà tan in vitro với viên nang Amlor® 5mg. 2. Bước đầu đánh giá được độ ổn định của viên nang amlodipin 5mg. 1 Chương 1. TỔNG QUAN 1.1. Tổng quan về amlodipin 1.1.1. Công thức hóa học - Công thức cấu tạo: - Công thức phân tử: C20H25ClN2O5.C6H6O3S [4][34]. - Tên khoa học: 3-ethyl 5-methyl (4RS)-2-[(2-aminoethoxy)methyl]-4-(2-clorophenyl)-6-methyl1,4-dihydropyridin-3,5-dicarboxylat benzensulphonat[1] [34]. - Khối lượng phân tử: 567[4] [34]. 1.1.2. Tính chất lý hóa - Cảm quan và độ tan: Bột màu trắng hoặc gần như trắng. Dễ tan trong methanol, hơi tan trong ethanol, khó tan trong nước (2,930,3mg/ml ở 370C và 1,91mg/ml ở 320C) và 2-propanol[4][17] Bảng 1: Độ tan của các dạng amlodipin besilat và amlodipin base trong nước ở nhiệt độ phòng[30] Dạng amlodipin Amlodipin besilat khan Amlodipin besilat monohydrat Amlodipin besilat dihydrat Amlodipin base Độ tan (mg/ml) 2,179±0.068 1,785±0.008 1,305±0.033 0,51±0.002 2 - Góc quay cực riêng: - 0,10° đến + 0,10° [18] (-)-(S)-Amlodipin [ α] 20 [ α] 25 [ α] 25 D D = −19,4 (c = 0,45 trong methanol) = −31,9 (c = 1,0 trong methanol) = −31,2; −26,4 (c = 1,0 trong methanol) (+)-(R)-Amlodipin besilat [ α] (-)-(S)-Amlodipin besilat [ α] (-)-(S)-Amlodipin besilat hemipentahydrate [ α] D = +25,6 (trong methanol) D = −21,0 (trong methanol) D 25 D = −26,54 (1% trong methanol) - Hấp thụ UV - VIS (HCl 1,1N), độ hấp thụ quang cực đại ở bước sóng λ = 213 nm (ε=2,4x10-4); 238 nm (ε=1,9x10-4); 360nm (ε=6,6x10-3). Điểm chảy từ 178 1790C. [4][34] - Amlodipin besilat là một hỗn hợp racemic của cả hai đồng phân (1:1) do có một carbon bất đối [17] - Đặc điểm tinh thể và đa hình: Đối với dạng racemic, dạng amlodipin besilat khan, ngậm một phân tử nước và hai phân tử nước có các cấu trúc tinh thể đặc trưng, khi tác động nhiệt độ lên khoảng 600C cấu trúc tinh thể dạng ngậm nước có thể chuyển thành cấu trúc tinh thể của dạng khan. Đã có những nghiên cứu chỉ ra có sự không ổn định về cấu trúc tinh thể của dạng ngậm nước. [18] - Tính chất hút ẩm: Amlodipin dạng base không hút ẩm, khả năng hấp thụ nước của amlodipin besilat phụ thuộc rất nhiều vào dạng kết tinh. Không có sự hấp thu nước đáng kể khi bảo quản dạng khan ổn định của amlodipin besilat trong gần 2 tháng ở độ ẩm tương đối là 92% và nhiệt độ 25°C. Sự biến đổi từ từ của amlodipin besilat khan hoặc dạng monohydrat thành dihydrat xảy ra nếu tiếp xúc trực tiếp với nước.[18] 1.1.3. Dược động học - Hấp thu: Sinh khả dụng của amlodipin khi uống khoảng 60 - 80% và không bị ảnh hưởng bởi thức ăn. Nồng độ đỉnh trong huyết tương đạt được sau khi uống liều khuyến 3 cáo 6 đến 12 giờ. Nửa đời trong huyết tương từ 30 - 40 giờ. Nồng độ ổn định trong huyết tương đạt được 7 đến 8 ngày sau khi uống thuốc mỗi ngày một lần[5] - Phân bố: Thể tích phân bố xấp xỉ 21 lít/kg thể trọng và thuốc liên kết với protein - huyết tương cao (trên 98%)[5] - Chuyển hóa và thải trừ: Ðộ thanh thải trong huyết tương tới mức bình thường vào khoảng 7ml/phút/kg thể trọng do bài tiết chủ yếu thông qua chuyển hóa trong gan. Các chất chuyển hóa mất hoạt tính và bài tiết qua nước tiểu. Ở người suy gan, nửa đời của amlodipin tăng, vì vậy có thể cần phải giảm liều hoặc kéo dài thời gian giữa các liều dùng[5] 1.1.4. Tác dụng dược lý và cơ chế tác dụng Amlodipin là dẫn chất của dihydropyridin có tác dụng chẹn calci qua màng tế bào. Amlodipin ngăn chặn kênh calci loại L phụ thuộc điện thế, tác động trên các mạch máu ở tim và cơ. Amlodipin có tác dụng chống tăng huyết áp bằng cách trực tiếp làm giãn cơ trơn quanh động mạch ngoại biên và ít có tác dụng hơn trên kênh calci cơ tim. Amlodipin cũng có tác dụng tốt là giảm sức cản mạch máu thận, do đó làm tăng lưu lượng máu ở thận và cải thiện chức năng thận. Amlodipin không có ảnh hưởng xấu đến nồng độ lipid trong huyết tương hoặc chuyển hóa glucose, do đó có thể dùng amlodipin để điều trị tăng huyết áp ở người bệnh đái tháo đường. Amlodipin có thể dùng phối hợp với thuốc chẹn beta cùng với thiazid hoặc thuốc lợi tiểu quai và cùng với thuốc ức chế enzym chuyển đổi angiotensin. Amlodipin có tác dụng tốt cả khi đứng, nằm cũng như ngồi và trong khi làm việc. Tác dụng chống đau thắt ngực: Amlodipin làm giãn các tiểu động mạch ngoại biên, do đó làm giảm toàn bộ lực cản ở mạch ngoại biên (hậu gánh giảm). Người bệnh đau thắt ngực có thể dùng amlodipin phối hợp với thuốc chẹn beta và bao giờ cũng dùng cùng với nitrat (điều trị cơ bản đau thắt ngực)[5]. 4 1.1.5. Chỉ định, chống chỉ định, liều dùng, tác dụng không mong muốn  Chỉ định: điều trị tăng huyết áp, đau thắt ngực ổn định [5].  Chống chỉ định: mẫn cảm với amlodipin, phụ nữ có thai, suy tim mất bù, nhồi máu cơ tim cấp tính, các trường hợp đau thắt ngực không ổn định.  Tác dụng không mong muốn - Thuốc dung nạp tốt. Tác dụng phụ thường gặp là đỏ mặt, phù ngoại biên, đánh trống ngực và mệt mỏi. Tác dụng này thường xuất hiện khi mới điều trị hay khi tăng liều [5].  Liều dùng. - Điều trị tăng huyết áp: liều ban đầu là 5mg/ngày (với người già là 2,5 mg/ ngày) vào buổi sáng. Liều thông thường là 5 – 10 mg/ngày. Hiếm khi sử dụng liều lớn hơn 20 mg/ngày - Điều trị đau thắt ngực: liều 5mg/ ngày, tăng lên 10mg/ ngày nếu cần thiết [5] 1.1.6. Độ ổn định: - Phản ứng của amlodipin và muối của nó được xác định chủ yếu bởi sự hiện diện của vòng dihydropyridin và nhóm amin trong phân tử. - Amlodipin phân hủy chủ yếu do sự oxy hóa dihydropyridin ngay cả trong dung dịch và trạng thái rắn và được thúc đẩy bởi ánh sáng.[18] 5 Phản ứng oxy hóa amlodipin - Amlodipin bị phân hủy bởi các nhóm amin trong phân tử khi có sự hiện diện của đường khử thông qua phản ứng Maillard. Vì vậy, cần chú ý đặc biệt khi thiết kế công thức với đường khử đặc biệt là sự hiện diện của các tá dược và nước. Các sản phẩm cộng hợp của amlodipin besilat với lactose đã được xác định bởi LC / MS Phản ứng ngưng tụ của amlodipin và lactose - Sự phân hủy của amlodipin có thể thông qua phản ứng tạo vòng dưới sự hiện diện của nhóm amino và ở điều kiện nhiệt độ 1100 - 1400C 6 Phản ứng tạo vòng nội phân tử của amlodipin Trong dung dịch amlodipin besilat ổn định nhất trong vùng lân cận của pH 5 dựa trên các nghiên cứu độ ổn định thực hiện trong dung dịch đệm phosphate [18] 1.1.7. Đại cương về viên nang chứa amlodipin 5mg: - Vài nét về viên nang amlothepham: Dược chất amlodipin đang được sử dụng trên thế giới để điều trị cao huyết áp và đau thắt ngực ổn định. Xuất phát từ thực tế đó, năm 2002 công ty CP Dược - VTYT Thanh Hóa đã nghiên cứu và đưa vào sản xuất sản phẩm hoạt chất này với tên thương mại là amlothepham và mới chỉ áp dụng chỉ tiêu độ rã theo qui định của Dược điển Việt Nam III. Từ năm 2007 đến nay sản phẩm này bắt đầu áp dụng chỉ tiêu độ hòa tan. Hiện nay theo quy định tại thông tư số 08/2010/TT-BYT ngày 26/4/2010 dược chất amlodipin yêu cầu bắt buộc phải có số liệu thử tương đương sinh học khi đăng ký thuốc. Vấn đề còn tồn tại là độ hòa tan của amlodipin besilat trong viên nang cứng amlothepham còn thấp: khoảng 70,2% - 74,3%. Vì vậy cần phải cải thiện tăng độ hòa tan của hoạt chất này. - Công thức bào chế: Hàm lượng (mg/1 viên) Thành phần (mg) Amlodipin besilat 6,95 7 Tinh bột mì (Amidon) 66,00 Cellulose vi tinh thể (Comprecel M101) 67,00 Hồ tinh bột sắn 15% 30,00 Magnesi stearat 0,75 - Qui trình sản xuất Tinh bột mì Amlodipin besilat Cellulose vi tinh thể Rây số 250 Trộn bột kép Hồ tinh bột sắn 15% Tạo hạt Xát hạt (kích thước mắt rây 3 mm) Sấy se (50 - 550C) Sửa hạt (kích thước mắt rây 1,25 mm) Sấy khô (50 - 600C) Sửa hạt khô (kích thước mắt rây 1 mm) Magnesi stearat Rây số 180 Bao trơn Kiểm tra hàm lượng và độ ẩm Vỏ nang số 2 Đóng nang Kiểm tra bán thành phẩm Làm sạch vỏ nang 8 Ép vỉ Đóng gói Kiểm tra thành phẩm Xuất xưởng 1.1.8. Một số dạng bào chế trên thị trường Bảng 2: Một số dạng bào chế của amlodipin trên thị trường[14] Tên biệt dược Hoạt chất Hàm lượng Hãng sản xuất Dạng bào chế Norvacs Amlodipin 5 mg Pfizer Viên nén Amlor® 5mg Amlodipin 5 mg Pfizer Amdicor 5 Amlodipin 5mg Mekophar Amlibon Amlodipin 5 mg Sandoz Viên nén 5 mg Converam Perindopril arginin Servier Viên nén Amlodipin 10 mg Amlodipin 5 mg Valsartan 80 mg Exforge 10/160 Amlodipin 10 mg Novartis pharma Viên nén bao phim Valsartan 160 mg Normodipine Amlodipin 5 mg, 10 mg Gedeon Richter Viên nén Amlodipin 5 Amlodipin 5 mg Glomed Viên nang Amdipress Amlodipin 5 mg Traphaco Viên nang Apitim Amlodipin 5 mg Hậu Giang Viên nang Amlodipin Amlodipin 5 mg Bình Định Viên nang Viên nang Viên nén Viên nén Viên nang Exforge 5/80 9 Lodopin Amlocen Lisonorm Amsyn 5 2.5 mg, 5 mg, 10 mg Merck Viên nén Amlodipin 5 mg Công ty TNHH MTV TW 3 Viên nang Amlodipin 5 mg Lisinopril 10 mg Gedeon Richter Viên nang Synmedic laboratories Ấn Độ Viên nang Amlodipin Amlodipin 5 mg Nhận xét: qua bảng 2 cho thấy, hầu hết các dạng bào chế của amlodipin trên thị trường là viên nén và viên nang. 1.2. Nghiên cứu các biện pháp làm tăng độ hòa tan cho các dạng thuốc rắn: 1.2.1. Khái niệm độ hoà tan dược chất từ dạng bào chế - Từ những năm 50, người ta đã bắt đầu nhận thấy có những thuốc tuy đạt yêu cầu về độ rã, nhưng không gây được tác dụng điều trị, đặc biệt với các thuốc chứa dược chất ít tan. - Cùng với sự tiến bộ của khoa học kỹ thuật, nhiều công trình nghiên cứu một cách có hệ thống đã chứng minh mối liên quan chặt chẽ giữa tốc độ hoà tan và tác dụng sinh học của thuốc. Chính điều này đã mở ra tầm nhìn và triển vọng mới cho ngành bào chế. Trắc nghiệm hoà tan giúp cho việc thiết kế các dạng thuốc có tác dụng lâm sàng mong muốn. - Trắc nghiệm hoà tan là phép thử xác định khả năng hoà tan giải phóng của dược chất, từ một dạng bào chế (chủ yếu là các chế phẩm thuốc rắn dùng qua đường uống), bằng những thiết bị và điều kiện thử nghiêm ngặt, được mô phỏng phù hợp với điều kiện cơ thể. Người ta đã chứng minh được sự tương đồng giữa độ hoà tan và SKD. Các thiết bị và điều kiện thử độ hoà tan cũng được qui định nhằm đạt được mục đích này. - Hiện nay độ hoà tan được xem là một chỉ tiêu quan trọng để đánh giá chất lượng của thuốc. Dược điển Mỹ USP 37 đã qui định thử độ hòa tan cho phần lớn viên nén và nang thuốc chứa dược chất ít tan[3][34]. 10 1.2.2. Các yếu tố ảnh hưởng đến độ hoà tan Có rất nhiều yếu tố ảnh hưởng đến độ hoà tan dược chất từ dạng bào chế: 1.2.2.1. Một số yếu tố thuộc về dược chất: Các thông tin về dược chất là cơ sở ban đầu cho việc đưa ra những lựa chọn và giải pháp thích hợp trong quá trình xây dựng một công thức thuốc đảm bảo độ ổn định và sinh khả dụng cao. Vì vậy, cần thu thập đầy đủ các thông tin về dược chất như: tính chất hoá học, tính chất vật lý, cơ học, tương tác - tương kỵ giữa dược chất - tá dược và dược chất - dược chất,... từ các tài liệu chuyên môn hay kết quả thực nghiệm[1] Các dược chất ít tan và tan chậm thường có vấn đề về sinh khả dụng. Vì vậy khi bào chế các dạng thuốc rắn, trong nhiều trường hợp cần phải lựa chọn dạng dược chất có tính chất lý hoá phù hợp hoặc áp dụng các kỹ thuật thích hợp để đảm bảo khả năng giải phóng dược chất từ viên nén. 1.2.2.2. Độ tan của dược chất: Là thông số vật lý quan trọng nhất ảnh hưởng đến độ hoà tan của dạng thuốc rắn, đặc biệt là với dược chất ít tan. Vì độ tan và tốc độ hoà tan của dược chất từ dạng thuốc sẽ ảnh hưởng tới tốc độ và mức độ hấp thu dược chất vào tuần hoàn từ dạng thuốc đó. Người ta nhận thấy rằng nếu một dược chất có độ tan dưới 1% (khối lượng/thể tích) thì khi đưa vào dạng viên SKD của nó có thể không đạt mức độ cần thiết do dược chất hoà tan chậm, nên nồng độ dược chất trong máu tăng chậm, thậm chí không đạt được nồng độ đủ để gây tác dụng điều trị, nhất là với thuốc chuyển hóa nhiều qua gan lần đầu. Chính vì vậy, thông tin về độ tan là rất cần thiết từ đó có biện pháp thích hợp để cải thiện độ tan, cũng như tốc độ hòa tan của dược chất ít tan để đảm bảo SKD của các dạng thuốc rắn dùng theo đường uống [1] 1.2.2.3. Kích thước tiểu phân dược chất rắn Giảm kích thước tiểu phân dược chất làm tăng diện tích bề mặt tiếp xúc giữa tiểu phân chất rắn và môi trường hoà tan [4]. Do đó thường dẫn đến tăng tốc độ hoà tan. Tuy nhiên, giảm kích thước tiểu phân cũng làm tăng diện tích tiếp xúc giữa dược chất với môi trường nên có thể làm cho dược chất kém ổn định hơn[1][3]. 11 1.2.2.4. Dạng thù hình Một dược chất rắn có thể tồn tại ở dạng vô định hình hoặc kết tinh dưới nhiều dạng tinh thể khác nhau, thể hiện tính chất vật lý khác nhau như: điểm chảy, độ tan, tốc độ hoà tan, độ ổn định ... Vì vậy dạng thù hình của dược chất ảnh hưởng đến độ hoà tan của dược chất. Thực tế cho thấy các dạng thù hình có điểm chảy cao hơn thường bền vững hơn nhưng độ tan và tốc độ hoà tan lại kém hơn. Dạng hydrat hoá có độ tan thấp so với dạng khan, ví dụ ampicillin khan có độ tan 10,1 mg/ml và ampicillin trihydrat có độ tan 7,6 mg/ml, trái lại các phân tử dung môi hữu cơ được giữ lại trong dạng sovat của dược chất lại có xu hướng làm tăng độ tan. Dạng vô định hình tan tốt hơn dạng kết tinh. Vì thế, có thể chọn dạng thù hình để cải thiện độ hoà tan của viên. Cần lưu ý trong quá trình bào chế dược chất có thể thay đổi dạng thù hình, ví dụ trong quá trình kết tinh các phân tử dung môi có thể gắn trong cấu trúc mạng tinh thể hình thành các dạng solvat hoặc hydrat, hoặc các chất tủa lại từ dung dịch tạo ra dạng bột vô định hình[1] 1.2.2.5. Một số đặc tính như tính háo ẩm, tính trơn chảy của bột, tính chịu nén và tính thấm ẩm: Cũng là những yếu tố cần quan tâm để đảm bảo độ hoà tan của viên. Với dược chất khi hút ẩm sẽ trở nên bết dính làm ảnh hưởng đến khả năng trơn chảy, khả năng chịu nén của bột và làm tăng tốc độ phân huỷ dược chất. Vì vậy trong xây dựng công thức các dạng thuốc rắn phải quan tâm đến tính háo ẩm của dược chất, tá dược để đưa ra điều kiện sản xuất và bảo quản. Tính thấm ẩm của dược chất rắn ảnh hưởng đến quá trình tạo hạt, tới sự thấm của môi trường hoà tan vào viên, vào hạt. Có thể khắc phục bằng sử dụng tá dược thân nước hoặc sử dụng chất diện hoạt như polysorbat, natri laurylsulfat ...Tính trơn chảy của khối bột ảnh hưởng đến độ đồng nhất về khối lượng và hàm lượng của viên. Tính chất chịu nén của khối bột ảnh hưởng đến độ bền cơ học của viên và lực nén, vì vậy ảnh hưởng đến khả năng rã giải phóng dược chất[1][3]. 12 1.2.2.6. Một số yếu tố thuộc về tá dược Các tá dược có ảnh hưởng đáng kể đến đặc tính của viên, đặc biệt với những viên có hàm lượng dược chất thấp. Do đó, bên cạnh các biện pháp tác động lên dược chất như trên, việc lựa chọn tá dược phù hợp cũng là một giải pháp góp phần tạo ra sản phẩm đảm bảo các tiêu chí: ổn định dược chất và toàn bộ sản phẩm; có mức độ và tốc độ hoà tan hợp lý tuỳ theo mục đích của viên và có khả năng triển khai vào sản xuất. * Tá dược độn: Với các dược chất ít tan thì chọn tá dược độn dễ tan. Dược chất dễ thuỷ phân thì lựa chọn tá dược độn ít ngậm nước hoặc có hàm ẩm thấp[24]. Với dược chất dễ oxy hoá thì lựa chọn các tá dược độn tinh khiết, tránh các tá dược độn có tạp kim loại hay peroxyd[35]. Loại tá dược độn, tỷ lệ giữa dược chất và tá dược độn ảnh hưởng đến tốc độ giải phóng của dược chất. * Tá dược dính Nếu tá dược là những chất có bản chất keo thân nước như HPMC, gelatin,... thì sẽ có xu hướng làm giảm tốc độ hoà tan, một số loại ít ảnh hưởng, một số làm tăng tốc độ hoà tan như PVP có thể làm tăng tính thấm nên tăng tốc độ hoà tan của dược chất sơ nước, nhưng PVP hút ẩm mạnh nên có thể làm giảm độ ổn định của các dược chất dễ bị thuỷ phân. Tá dược dính là yếu tố tạo hình chính của viên, giúp viên đảm bảo độ chắc nhưng sẽ làm viên khó rã nên ảnh hưởng đến độ hoà tan của viên. Vì vậy cần nghiên cứu cẩn thận lượng tá dược dính để xác định lượng vừa đủ trong công thức.[2][3] * Tá dược rã: Rã làm tăng diện tích bề mặt tiếp xúc của dược chất với môi trường hoà tan, do đó làm tăng tốc độ hoà tan của dược chất. Rã là bước khởi đầu đặc biệt quan trọng với dược chất ít tan hoặc khó tan. Với dược chất ít tan có thể tăng độ hoà tan khi phối hợp với tá dược rã có khả năng cải thiện tính thấm của dược chất hoặc sử dụng tá dược siêu rã với hàm lượng thấp 1-5%. Với mỗi loại dược chất sử dụng loại tá dược rã, lượng tá dược rã và cách phối hợp tá dược khác nhau. 13 * Tá dược trơn: Nhìn chung, nhóm tá dược trơn có bản chất sơ nước, ví dụ: magnesi stearat, calci stearat... làm cho bề mặt viên khó thấm nước, do đó làm giảm tốc độ rã của viên và tốc độ hoà tan của dược chất trong viên, thường sử dụng với dược chất thân nước, hoặc hạn chế nhược điểm của tá dược trơn bằng cách cho vào viên một tỉ lệ nhỏ chất diện hoạt. 1.2.2.7. Một số yếu tố thuộc về kỹ thuật bào chế * Phương pháp tạo hạt - Phương pháp tạo hạt khô: tránh được tác động của ẩm và nhiệt lên dược chất. Tuy nhiên, trong quá trình tạo hạt có thể phá vỡ cấu trúc tinh thể, thay đổi tính chất vật lý của nguyên liệu, ảnh hưởng đến hoà tan và độ ổn định của viên. - Phương pháp xát hạt ướt: dược chất bị tiếp xúc với ẩm và nhiệt nên khó áp dụng cho các dược chất không ổn định. * Trình tự phối hợp các thành phần - Trình tự phối hợp tá dược rã sẽ ảnh hưởng đến cơ chế rã của viên và do đó ảnh hưởng đến tốc độ hoà tan dược chất. - Trình tự phối hợp các tá dược cũng có thể ảnh hưởng đến độ ổn định của viên. Nếu trong công thức có tương tác giữa dược chất và tá dược thì cần xát hạt riêng. * Một số thông số kỹ thuật - Kích thước tiểu phân: giảm trong quá trình bào chế có thể làm thay đổi trạng thái tinh thể ảnh hưởng đến độ tan[32]. - Kích thước hạt: nếu hạt nhẹ và dễ rã thì sẽ ít ảnh hưởng, nếu hạt nặng và rã chậm thì tăng kích thước hạt sẽ làm giảm tốc độ hoà tan[33] - Các thông số khác như: nhiệt độ sấy hạt, hàm ẩm hạt,... cũng ảnh hưởng đến độ ổn định và hoà tan của viên[3] 1.2.3. Các biện pháp làm tăng độ hòa tan cho các dạng thuốc rắn Hiện nay, có rất nhiều kỹ thuật làm tăng độ hòa tan của dược chất cho các dạng thuốc rắn, nhưng trong khuôn khổ luận văn này chúng tôi chỉ đề cập đến các kỹ thuật đã được sử dụng trong quá trình nghiên cứu bao gồm: 14 1.2.3.1. Biện pháp tăng độ hoà tan và tốc độ hoà tan dược chất[1] Với những dược chất có độ tan rất nhỏ, lượng thuốc giải phóng, hoà tan không đáp ứng được nồng độ điều trị cần tăng độ hoà tan và tốc độ hoà tan bằng nhiều biện pháp phối hợp sau: - Tạo muối: các dạng muối khác nhau làm thay đổi tính chất lý hoá của dược chất, làm thay đổi tốc độ hoà tan, thay đổi mức độ giải phóng và sinh khả dụng. Trong nhiều trường hợp tạo muối làm giảm khả năng hút ẩm, tăng độ bền cũng như tuổi thọ của chế phẩm. - Thay đổi pH: thêm tá dược đệm vào công thức, với các dược chất có bản chất là acid hoặc base yếu ít tan trong nước, các chất đệm làm thay đổi pH vi môi trường xung quanh tiểu phân dược chất nên sẽ tăng quá trình ion hoá dẫn đến tăng tốc độ hoà tan của chúng. - Lựa chọn dạng thù hình có độ tan cao hơn. - Dùng tá dược độn thân nước như bột đường, lactose, mannitol - Xát hạt với tá dược dính lỏng thân nước như PVP - Biện pháp khắc phục ảnh hưởng của độ xốp: Điều chỉnh độ xốp của hạt bằng cách phối hợp tá dược rã, hạn chế các tá dược có độ nhớt lớn... chỉ nên dùng lượng thích hợp. 1.2.3.2. Giảm kích thước tiểu phân của dược chất: Kỹ thuật thường dùng để giảm kích thước tiểu phân dược chất là: phương pháp kết tủa khi thay đổi dung môi, phương pháp dùng lực cơ học (thường gọi là quá trình xay và nghiền). Mục đích của quá trình là để giảm kích thước tiểu phân và thu được phân đoạn kích thước tiểu phân thích hợp của các nguyên liệu. Khi kích thước tiểu phân giảm, diện tích bề mặt tăng do vậy tốc độ hòa tan của dược chất tăng. 1.2.3.3. Sử dụng chất diện hoạt để tăng tính thấm của dược chất: Một yếu tố ảnh hưởng đến độ tan của các chất tan đó là khả năng thấm ướt bề mặt. Điều này liên quan đến sức căng bề mặt giữa chất tan và dung môi. Sức căng bề mặt càng cao thì chất tan càng khó tan. Vì vậy để làm tăng độ tan của chất khó tan, nhiều tác giả sử dụng chất diện hoạt, dùng hỗn hợp dung môi đồng tan với nước hoặc sử dụng cả hai phương pháp trên. 15 Chất diện hoạt là một nhóm các hợp chất hóa học mà trong phân tử chứa các phần thân dầu và phần thân nước có khả năng hấp phụ lên bề mặt dược chất hay bề mặt phân cách pha làm thay đổi bản chất của bề mặt này. Cơ chế làm tăng độ tan của chất diện hoạt là do cải thiện tính thấm, đồng thời làm giảm sự kết tập của các tiểu phân dược chất, do làm tăng diện tích bề mặt tiếp xúc của tiểu phân dược chất với môi trường hòa tan. ở nồng độ cao, các chất diện hoạt có khả năng hình thành các phức dạng keo trong dung dịch (được gọi là các micel). Nồng độ các chất diện hoạt mà tại đó xuất hiện các micel được gọi là nồng độ micel tới hạn. Các micel có khả năng hòa tan các chất thân dầu, thân nước và lưỡng tính. Do vậy độ hòa tan của chất ít tan tăng mạnh trong các dung dịch micel chất diện hoạt. Phân loại: theo cấu trúc phân tử chất diện hoạt dùng trong dược phẩm được chia làm 4 nhóm: - Chất diện hoạt anion: Natri lauryl sulfat,... - Chất diện hoạt cation: Benzalkonium clorid,... - Chất diện hoạt lưỡng tính: N-dodecyl betain, N-dimethyl betain,... - Chất diện hoạt không ion hóa: Polysorbat 80, Labrasol,... 1.2.3.4. Sử dụng hệ phân tán rắn: Hệ phân tán rắn thường được ứng dụng để cải thiện khả năng hòa tan của các dược chất ít tan. Hệ phân tán rắn là hệ trong đó một hay nhiều dược chất được phân tán trong chất mang hoặc khung (Matrix) trơ về mặt tác dụng dược lý, được chế tạo bằng phương pháp thích hợp. Có nhiều phương pháp để chế tạo hệ phân tán rắn như: phương pháp đun chảy, phương pháp dung môi, phương pháp kết hợp. phương pháp nghiền. Có nhiều chất mang được sử dụng trong hệ phân tán rắn như: các polyme (PEG, PVP, PVA, các dẫn xuất cellulose MC, HPC, HPMC., polymethacrylat, polyacrylat, urea, các loại đường sorbitol. dextrose....Bằng phương pháp phù hợp các chất mang này được dùng để chế tạo hệ phân tán rắn với nhiều loại dược chất khác nhau, phần lớn là các chất ít tan trong nước. 1.2.3.5. Phương pháp tạo hạt rắn lỏng: Là phương pháp chuyển thuốc dạng lỏng, hỗn dịch thuốc hoặc dung dịch thuốc trong dung môi không bay hơi thành hỗn hợp bột khô, không dính, trơn chảy tốt 16 và có độ chịu nén tốt bằng cách độn thêm vào hỗn dịch hoặc dung dịch những chất mang và tá dược bao đã được lựa chọn. Kỹ thuật này áp dụng để cải thiện độ hòa tan cùa các dược chất ít tan với liều thấp. Các tá dược lỏng thường được dùng cho phương pháp tạo hạt rắn – lỏng là PG, các PEG lỏng, polysorbat 80, glyceryl. Các tá dược được dùng để phối hợp với dịch dược chất là các tá dược độn, rã, trơn, bao ... thông thường: lactose, Cellulose, Avicel, Aerosil, silica mịn. Ưu điểm của hệ rắn lỏng là tính thấm ướt của dược chất được cải thiện, diện tích tiếp xúc của dược chất với môi trường hòa tan tăng mạnh dẫn tới cải thiện độ rã, độ hòa tan của dược chất. 1.2.3.6. Sử dụng tá dược siêu rã: Trong những năm gần đây, một vài nhóm tá dược mới xuất hiện gọi là tá dược siêu rã (TDSR), chúng làm giảm thời gian rã của viên, giúp làm tăng tốc độ hòa tan của dược chất, được sử dụng với tỷ lệ thấp (1-5%) trong thành phần viên nhưng vẫn đạt hiệu quả rã nhanh. Cơ chế của TDSR có thể được giải thích theo nhiều cách khác nhau như: hệ vi mao quản, trương nở, phục hồi biến dạng, lí thuyết về lực đẩy, nhiệt làm ướt. Tuy nhiên không có cơ chế nào có thể giải thích đầy đủ về tác dụng của TDSR. Trong hầu hết các trường hợp, có sự kết hợp của các cơ chế nói trên. Cơ chế rã được công nhận phổ biến là cơ chế vi mao quản, trương nở và phục hồi biến dạng. Trong đó cơ chế vi mao quản luôn là cơ chế xuất hiện đầu tiên trong các cơ chế. Sử dụng TDSR viên sẽ rã rất nhanh, tạo ra các hạt tiểu phân, làm tăng bề mặt tiếp xúc giữa dược chất với môi trường, làm tăng tốc độ hòa tan dược chất. Dựa vào cấu trúc hóa học, người ta chia TDSR thành 3 nhóm chính: - PVP liên két chéo: là sản phẩm trùng hợp, được tạo bởi 2 liên kết chéo của Nvinyl-2-pyrrolidone. Tiểu phân hình cầu, độ xốp cao, chịu nén tốt, không tan trong nước nhưng trương nở mạnh, có khả năng tạo phức cải thiện tốc độ hòa tan của các dược chất có độ tan kém. Cơ chế rã của tá dược nhóm này là vi mao quản, trương nở và biến dạng. Làm tá dược rã trong viên với hàm lượng thường dùng từ 1-3%. Sản phẩm thương mại: Polyplasdon, Kollidon .... [16][22] - Polyplasdon có nhiều loại khác nhau phụ thuộc vào kích thước tiểu phân: + Polyplasdon XL: kích thước tiểu phân trung bình 100-130µm 17 + Polyplasdon XL-10: kích thước tiểu phân trung bình 30-5 µm + Polyplasdon INF-10: kích thước tiểu phân trung bình 5-10 µm. Trong đó: + Polyplasdon XL có kích thước tiểu phân trung bình lớn và cho độ rã nhanh nhất. + Polyplasdon XL10 mịn hơn, có khả năng tăng độ đồng đều hàm lượng trong các viên nhỏ và ứng dụng trong quá trình tạo hạt, tạo cảm giác mịn trong miệng nên sử dụng trong viên rã trong miệng. + Polyplasdon INF-10 có kích thước tiểu phân trung bình nhỏ nhất, là tá dược có khả năng hút ẩm cao. - Cellulose biến tính NCC (Natri crosscarmelose): Là polyme có liên kết chéo của natri carboxymcthyl cellulose, các tiểu phân có hình sợi xoắn, có độ dài khác nhau và không có lỗ xốp, độ trơn chảy kém. Cơ chế rã của natri croscarmelose là trương nở mạnh, trương nở gấp 4-8 lần khi phân tán trong nước. Được sử dụng tá dược rã trong viên nén thường với hàm lượng 2% với dập thẳng và 3% với xát hạt ướt. Tương đối ổn định, khá hút ẩm. Natri croscarmelose có tương kỵ với acid mạnh, muối tan của sắt, nhôm, thủy ngân. Sản phẩm thương mại: Mymcel, Primelose, Disolcel.... [16][22] - Tinh bột biến tính NSG (natri starch glycolat): Được sản xuất từ tinh bột bằng biến đổi hóa học, natri starch glycolat là muối natri của carboxylmethyl ether của tinh bột. Tiểu phân hình cầu, trơn chảy, chịu nén và không có lỗ xốp. Có thể trương nở gấp 300 lần thể tích. Hàm lượng sử dụng làm tá dược rã trong viên thường là 2-8%, tốt nhất là 4%. Sản phẩm thương mại có tên là Explotab, Primogel, Explosol, DST... [16][22] 1.2.3.7. Sử dụng các kỹ thuật bào chế: - Phương pháp tạo hạt khô: Với phương pháp tạo hạt khô sẽ giúp hạt nhanh chóng rã thành tiểu phân mịn làm cho dạng bào chế giải phóng nhanh hoạt chất. Ưu điểm của phương pháp này là áp dụng được với dược chất không bền với nhiệt độ và độ ẩm. - Kỹ thuật phun sấy 18 Là một phương pháp loại bỏ dung môi, được ứng dụng nhiều để điều chế bột mịn, đặc biệt là để sản xuất các hỗn hợp tá dược, các nguyên liệu hoặc trong các công thức để dập thẳng. Ưu điểm do dung môi bay hơi nhanh tạo ra được những cấu trúc xốp và bột mịn, nên kỹ thuật này được ứng dụng nhiều để tạo viên nén rã nhanh. Hệ cốt là dung dịch nước chứa tá dược bay hơi và các tá dược khác được phun sấy thành hạt nhỏ có cấu trúc xốp. - Kỹ thuật tạo cốt lỗ xốp Dược chất ít tan được phân phối vào trong cốt lỗ xốp dưới dạng vi tiểu phân, nó tăng khả năng hòa tan của dược chất khi tiếp xúc với môi trường nước. Chế tạo cốt lỗ xốp: hòa tan dược chất vào trong dung môi bay hơi tạo thành dung dịch thuốc, kết hợp một vài chất tạo lỗ xốp với dung dịch thuốc tạo dạng nhũ tương, hỗn dịch hoặc dung dịch thứ hai, làm bay hơi dung môi tạo thành lỗ xốp. - Phương pháp đông khô: Đông khô là phương pháp làm khô sản phẩm một cách nhẹ nhàng nhất. Nguyên tắc của phương pháp đông khô: làm đông lạnh sản phẩm (-5°c đến -50°C). Tiếp theo làm cho nước đá thăng hoa bằng cách hút chân không sâu (khoảng 0,1 mbar). Dung môi thăng hoa từ khối băng tạo nhiều lỗ xốp mao quản. Sản phẩm đông khô là một khối xốp. Giai đoạn cuối cùng nhiệt độ nâng lên 20 - 25°C để giảm nhanh lượng nước trong khối xốp. Ưu điểm của phương pháp bào chế này là được tiến hành trong điều kiện nhiệt độ thấp, áp suất giảm, không qua giai đoạn lỏng trung gian nên hạn chế được sự phân hủy dược chất. Sản phẩm khô xốp, thân nước, đặc biệt dễ dàng hút nước phân tán và giải phóng dược chất. Sau khi đông khô một phần dược chất và tá dược chuyển sang dạng vô định hình nên làm tăng độ hòa tan của dược chất. Kỹ thuật đông khô đã được và ứng dụng để sản xuất thuốc tiêm, thuốc nhỏ mắt và cả dạng thuốc viên nén hòa tan nhanh. Một số dược chất dùng ở dạng viên nén được chế từ bột đông khô như Spironolacton, nicergolin, hydroclorothiazid, danazol,.... Tuy nhiên, chế tạo sản phẩm đông khô có giá thành cao do quá trình 19 chế tạo đòi hỏi thiết bị, tốn nhiều thời gian, mặt khác sản phẩm đông khô dễ bị hỏng cần đóng gói đặc biệt và bảo quản khắt khe. Vì vậy hạn chế khả năng ứng dụng vào sản xuất. 1.2.4. Một số nghiên cứu về dạng thuốc viên nén, viên nang amlodipin besilat 1.2.4.1. Các nghiên cứu trong nước: Viên nén, viên nang amlodipin còn được sản xuất ở một số công ty trong nước như Mekophar, Domesco. Song vẫn chưa được sản xuất rộng rãi ở nhiều công ty, cho dù sản phẩm này được nhập khẩu ở nhiều công ty với giá thành cao hơn rất nhiều so với sản phẩm bán trong nước. Để đẩy mạnh sản xuất trong nước, các công ty cần tập trung trong lĩnh vực nghiên cứu sản phẩm để phục vụ người bệnh. Việc bào chế không chỉ dừng lại ở viên nén, viên nang mà còn bào chế các dạng khác như viên tan nhanh, viên phóng thích kéo dài. Đã có một số nghiên cứu trong nước liên quan đến độ hòa tan cũng như đánh giá tương đương sinh học cụ thể như: - Phạm Anh Kiệt và cộng sự đã xây dựng công thức và quy trình bào chế viên nén chứa Amlodipin với tá dược cellulose vi tinh thể sản xuất trong nước nhằm đáp ứng nhu cầu về thuốc điều trị có chất lượng cao, giá thành hạ và đặc biệt là góp phần thúc đẩy sự phát triển ngành công nghiệp Việt Nam. Qua quá trình nghiên cứu thực nghiệm, kết quả khảo sát tính chất cơ lý hóa và độ giải phóng hoạt chất của các chế phẩm cho thấy có sự khác biệt lớn. Từ kết quả này, công thức và quy trình bào chế, tiêu chuẩn thử nghiệm độ giải phóng hoạt chất viên nén amlodipin hàm lượng 5 mg và 10 mg bằng phương pháp dập viên trực tiếp ở quy mô 5000 viên sử dụng nguyên liệu cellulose vi tinh thể sản xuất trong nước so sánh với nguồn Đài Loan được xây dựng thành công. Kết quả cho thấy không có sự khác biệt giữa hai nguồn này. Chế phẩm nghiên cứu có độ giải phóng hoạt chất tương tự trên thị trường[8]. - Cao Thị Cẩm Tú và cộng sự đã đánh giá tương đương sinh học của viên nang Amlodipin PMP 5 mg do công ty cổ phần Pymepharco sản xuất, so với viên nang Amlor® do công ty Pfizer PGM, France sản xuất. Cả hai chế phẩm đều có hàm lượng amlodipin là 5 mg. Mẫu thử và mẫu đối chứng đều đã được kiểm tra đạt tiêu 20 chuẩn chất lượng theo nhà sản xuất và có hàm lượng trung bình chênh lệch nhau không quá 5 %. Kết quả nghiên cứu cho thấy hai chế phẩm viên nang amlodipin PMP và viên nang Amlor® tương đương sinh học in vivo. Không có phản ứng bất lợi xảy ra trong quá trình nghiên cứu[13]. 1.2.4.2. Các nghiên cứu nước ngoài: Với sự phát triển của các hãng thuốc ở Việt Nam, khi mà nhu cầu của amlodipin trong điều trị là lớn, thuốc trong nước được đánh giá tương đương sinh học không nhiều. Các sản phẩm thuốc chứa amlodipin phát triển khá đa dạng, có rất nhiều biệt dược, nhiều dạng bào chế khác nhau. Có sản phẩm đã chiếm lĩnh được thị trường rộng lớn, như sản phẩm Amlor® 5mg số đăng ký VN-10465-10 do công ty Pfizer PGM của Pháp sản xuất. Tuy nhiên, các biệt dược của nước ngoài giá thành rất cao, có loại giá thành gấp 10 lần sản phẩm trong nước. Trên thế giới có một số nghiên cứu liên quan đến dạng bào chế cũng như độ hòa tan của viên amlodipin như sau: - Margaret Chandira và cộng sự đã thiết kế viên nén Amlodipin 10mg bằng phương pháp tạo hạt ướt và phương pháp dập thẳng, 10 công thức được thí nghiệm với các tá dược thích hợp ở các tỷ lệ khác nhau. Hoạt chất Amlodipin besilat được rây qua rây số 40, các tá dược còn lại được rây qua rây số 60. Amlodipin besilat, cellulose vi tinh thể pH 102, Dicanci phosphat, natri starch glycolat được trộn đều trong 5 phút, sau đó thêm tinh bột và magnesi stearat vào trộn đều trong 3 phút. Hạt sau đó được đem dập thẳng . Trong các giai đoạn bào chế, viên nén dập thẳng được đem so sánh với viên nén bào chế bằng phương pháp tạo hạt ướt ở các chỉ tiêu: tỷ trọng hạt, tỷ số Hausner, cảm quan, độ mài mòn, độ hòa tan, độ rã, hàm lượng. Kết quả cho thấy, các công thức có trị số tỷ trọng hạt, tỷ số Hausner gần như nhau, tuy nhiên công thức thứ 10 có giá trị độ hòa tan cao nhất, hơn 80% sau 30 phút, công thức bào chế bằng phương pháp xát hạt ướt có tá dược dính là propyl – 2 – ol có độ hòa tan thấp nhất. Thành phần của công thức thứ 10 được bào chế bằng phương pháp dập thẳng như sau: Amlodipin besilat: 13,87 mg; cellulose vi tinh thể pH 102: 113 mg; Dicanci phosphat: 62,13 mg; natri starch glycolat: 1 mg; tinh bột: 8 mg; magnesi stearat: 1 mg[19]. 21 - Nirav V. Patel và cộng sự đã nghiên cứu bào chế viên nén Amlodipin rã nhanh trong miệng bằng phương pháp dập thẳng với 3 tá dược siêu rã khác nhau: Natri starch glycolat, Natri Croscarmellose và povidon liên kết chéo XL-10. Tá dược độn được sử dụng là cellulose vi tinh thể, các tá dược tạo mùi vị là manitol, hương tổng hợp và natri saccharin. Viên sau khi dập được đánh giá ở các chỉ tiêu: độ đồng đều khối lượng, độ cứng, độ rã in vitro, độ hòa tan, hàm lượng của thuốc.. So sánh các viên thử nghiệm với viên có trên thị trường đều cho thấy việc phối hợp thêm các tá dược siêu rã vào công thức đã làm tăng khả năng giải phóng hoạt chất của thuốc. Công thức cho kết quả độ rã in vitro thấp nhất có chứa 2 tá dược siêu rã Natri Croscarmellose và Natri starch glycolat với tỷ lệ 1 : 2.[26] - Shobha Krushnan G và cộng sự đã thiết kế và đánh giá viên nén Amlodipin rã nhanh trong miệng với các tá dược siêu rã khác nhau: Natri starch glycolat, Natri Croscarmellose và povidon liên kết chéo. Viên nén được bào chế bằng phương pháp dập thẳng và được đánh giá các chỉ tiêu: độ đồng đều khối lượng, độ mài mòn, độ cứng, hàm lượng, thời gian thấm ướt viên, độ rã in vitro, độ hòa tan in vitro. Kết quả cho thấy viên có tỷ lệ cao tá dược siêu rã Natri starch glycolat và povidon liên kết chéo có độ tan và độ rã tốt hơn các công thức khác, đáp ứng được các yêu cầu kỹ thuật của viên nén rã nhanh trong miệng[23]. - Behin Sundara Raj và cộng sự đã bào chế viên nén Amlodipin 10 mg rã nhanh trong miệng bằng phương pháp dập thẳng với các tá dược siêu rã là povidon liên kết chéo và Natri starch glycolat. Các tá dược siêu rã được sử dụng riêng rẽ và dùng phối hợp. Kết quả cho thấy công thức có sự phối hợp của 2 tá dược siêu rã cho thời gian rã thấp nhất và độ hòa tan nhanh hơn, kết quả độ hòa tan là 87%[27]. - N.Narasimha Rao và cộng sự đã bào chế viên nén giải phóng nhanh chứa Amlodipin besilat bằng phương pháp dập thẳng sử dụng các tá dược siêu rã có nguồn gốc tự nhiên như gôm, thạch biến tính. Kết quả của nghiên cứu cho thấy độ hòa tan của Amlodipin besilat phụ thuộc pH và kích thước phân tử. Tốc độ hòa tan của viên được xác nhận có liên quan đến tỷ lệ của các tá dược siêu rã[27]. - Methaq h. sabar đã thiết kế và đánh giá in vitro màng phim tan nhanh có chứa hệ phân tán rắn chứa Amlodipin. Để bào chế hệ phân tán rắn, tác giả đã sử dụng các 22 phương pháp bào chế khác nhau với các tỷ lệ khác nhau của polyethylen glycol (PEG 6000) hoặc polyvinyl pyrrolidon (PVP). Cốt màng phim tan nhanh được bào chế bằng cách sử dụng natri carboxy methyl cellulose (SCMC), hydroxypropyl methyl cellulose (HPMC), glycerin ở các tỷ lệ khác nhau. Các yếu tố khác ảnh hưởng đến tốc độ hòa tan của hệ phân tán rắn và màng phim tan nhanh cũng được nghiên cứu. Kết quả cho thấy tăng tỷ lệ PEG 6000 hoặc PVP trong hệ phân tán rắn sẽ làm tăng tốc độ giải phóng hoạt chất và phương pháp bốc hơi dung môi có tốc độ hòa tan tốt hơn phương pháp đun chảy. Còn đối với màng phim thì tăng tỷ lệ SCMC làm giảm đáng kể khả năng hòa tan, trong khi đó tăng tỷ lệ glycerin lại làm tăng đáng kể khả năng hòa tan[29]. - Mohemmed Tahir M Shaikh và cộng sự đã bào chế màng phim tan nhanh trong miệng chứa Amlodipin bằng phương pháp đồng hóa dung môi sử dụng nhiều lớp tá dược HPMC E để tạo màng. Sự tương thích của amlodipin besilat và các tá dược được xác nhận bằng kỹ thuật IR. Ảnh hưởng của các tỷ lệ khác nhau của polyme và tá dược hóa dẻo cũng được đánh giá in vitro. Kết quả cho thấy công thức chứa 250 mg HPMC E3 và 0,5 ml Propylen Glycol (PG) cho tỷ lệ giải phóng thuốc cao nhất sau 5 phút, 97,35% và đạt các tiêu chuẩn kỹ thuật của màng bao phim tan nhanh trong miệng[31]. 23 Chương 2. NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Nguyên liệu và thiết bị 2.1.1. Nguyên liệu Bảng 3: Nguyên liệu sử dụng cho nghiên cứu STT Tên nguyên liệu Nguồn gốc Tiêu chuẩn Nguyên liệu chính dùng cho nghiên cứu bào chế viên nang Amlodipin 5 mg 1 Amlodipin besilat (nguyên liệu) Ấn Độ DĐVN IV 2 Viên nang Amlor® 5mg Số lô: A346204, Công ty NSX: 30-04-2013, Pfizer PGM HD: 30-04-2016, Pháp sản SĐK: VN-10465xuất 10 3 Polyvinylpyrrolidone (PVP K30) Trung Quốc DĐVN IV 4 Pregelatinized starch (Era-gel) Thái Lan BP 2013 5 Tinh bột mì Pháp BP 2013 6 Comprecel M101 (Microcrystalline cellulose) Đài Loan BP 2013 7 Comprecel M102 (Microcrystalline cellulose) Đài Loan BP 2013 8 Tinh bột sắn Việt Nam DĐVN IV 9 Magnesi stearat Malaysia DĐVN IV 10 Natri starch glycolat (DST) Đài Loan BP 2013 11 Crosspovidon (Polyplasdon XL10) Ấn Độ BP 2013 12 Natri croscarmellose (Disolcel) Đài Loan BP 2013 13 Aerosil 200 Đức BP 2013 14 Vỏ nang số 2 Capsulgel Thái Lan Nhà sản xuất Nguyên liệu chính dùng cho đánh giá, kiểm nghiệm Viện Kiểm nghiệm DĐVN IV Dinatrihydrophosphat Merck Nhà sản xuất 3 Acid hydrocloric Merck Nhà sản xuất 4 Acid hydrocloric đặc Merck Nhà sản xuất 5 Acid phosphoric đặc Merck Nhà sản xuất 1 Amlodipin besilat (chuẩn) 2 24 6 Triethylamin Merck Nhà sản xuất 7 Acetonitril – HPLC Merck Nhà sản xuất 8 Methanol – HPLC Merck Nhà sản xuất 9 Kali dihydrophosphat Merck Nhà sản xuất 10 Kali clorid Merck Nhà sản xuất 11 Natri acetat Merck Nhà sản xuất 12 Acid acetic Merck Nhà sản xuất 13 Natri hydroxyd Merck Nhà sản xuất 14 Nước cất DĐVN IV 2.1.2. Thiết bị - Tủ sấy Memert UN - 55 - Máy nghiền búa SGF – 130 - Máy xay đa năng PHILIP - Máy sấy tầng sôi BDF - FBD5 - Tủ sấy tĩnh điện CLIPSAL - Máy xát hạt BDF-HGR2 - Máy trộn siêu tốc BPF-HSM5 - Máy dập viên xoay tròn 7 chày ZP7 - Máy đóng nang tự động KDF-2 - Tủ vi khí hậu BDF - 150 - Máy xác định tỷ trọng bột, cốm JV 1000 - Máy đo độ trơn chảy bột, cốm BEP 2 - Máy HPLC Hitachi CM 5000 - Máy hòa tan Electrolab EDT - 08LX - Máy đo quang phổ UV-VIS 1800 - Máy đóng nang tự động DJ 1200 - Máy quang phổ tử ngoại khả kiến UV 1800 - Cân điện tử shimadzu ELB 2000 - Cân điện tử shimadzu BL 320H 25 - Cân phân tích Mettler Toledo ML204/01 - Máy đo pH 900/Precisa - Máy đo độ trơn chảy YD - 1 - Máy đo tỷ trọng biểu kiến Pharma test - Máy thử độ tan rã BJ - 3 - Máy thử độ ẩm AMB 50 - Máy lắc siêu âm có nhiệt Elmasonic S100H - Thước kẹp điện tử - Các dụng cụ thí nghiệm 2.2. Nội dung nghiên cứu 2.2.1. Phương pháp bào chế viên nang amlodipin 5mg 2.2.1.1. Phương pháp tạo hạt khô: Bào chế viên nang amlodipin 5 mg theo phương pháp tạo hạt khô với các tá dược: comprecel M102, tá dược siêu rã, era-gel. Mỗi mẻ 500 viên. Viên nang amlodipin 5 mg được bào chế theo sơ đồ 1 26 Nghiền, rây Amlodipin, Sodium Starch Glycolate, Comprecel M102 Cân Trộn bột kép Era-gel Trộn Magnesi stearat Dập viên Xát hạt Sửa hạt Bao trơn Magnesi stearat Đóng nang Sơ đồ 1: Sơ đồ bào chế viên nang amlodipin 5 mg theo phương pháp tạo hạt bằng dập viên Các bước bào chế như sau: - Amlodipin besilat, Comprecel M102, Era-gel, tá dược trơn và các tá dược siêu rã rây qua cỡ rây 180 27 - Trộn đồng lượng amlodipin besilat với Comprecel M102, sau đó trộn với tá dược siêu rã và các tá dược dính khô, tá dược trơn cho đồng nhất - Dập viên trên máy dập ZP7, chày cối đường kính 13mm, dập viên để đạt lực gây vỡ viên khoảng 4 – 5KN. - Xát viên thành hạt qua rây 1000 (Cỡ mắt rây 1mm) - Tá dược trơn rây qua cỡ rây 125, trộn với hạt. - Đóng nang bằng tay/ máy đóng nang tự động KDF-2 với khối lượng viên dự kiến Mdk = 150mg/viên. Hạt được bào chế đem đóng nang trên máy đóng nang tự động: máy có 05 chặng tiếp liệu, mỗi chặng có 09 piston. Hạt được đóng thành thỏi đường kính 5,5 mm, chiều cao 10,5 mm và nhả vào nang số 2. - Viên sau khi bào chế được để ổn định 24h trong túi polyethylen, tránh ánh sáng để sử dụng cho các thực nghiệm đánh giá. 2.2.1.2. Phương pháp tạo hạt ướt: Bào chế viên nang amlodipin 5 mg theo phương pháp xát hạt ướt với các tá dược: Comprecel M101, tá dược siêu rã. Tá dược dính là era-gel, tinh bột, PVP/ nước cất. Mỗi mẻ 500 viên. 28 Viên nang amlodipin 5 mg được bào chế theo sơ đồ 2 Nghiền, rây Amlodipin, Sodium Starch Glycolate, Microcrystalline cellulose Cân Trộn bột kép Pregelatinized starch /Nước cất Nhào ẩm Xát hạt Sấy cốm Sửa hạt Magnesi stearat Trộn cốm khô Đóng nang Sơ đồ 2: Sơ đồ bào chế viên nang amlodipin 5 mg theo phương pháp tạo hạt ướt Các bước bào chế như sau: - Amlodipin besilat, comprecel M101, các tá dược siêu rã rây qua cỡ rây 180 - Trộn đồng lượng amlodipin besilat với comprecel M101, sau đó trộn với tá dược siêu rã cho đồng nhất - Phân tán era-gel trong nước cất thu được tá dược dính có nồng độ 5% 29 - Phối hợp tá dược dính với hỗn hợp bột để tạo khối ẩm - Xát hạt qua kích thước mắt rây 1mm - Sấy hạt ở nhiệt độ 55°C đến khi hạt có độ ẩm < 3% - Tá dược trơn rây qua cỡ rây 125, trộn với hạt khô. - Đóng nang bằng tay/ máy đóng nang tự động KDF-2 với khối lượng viên dự kiến Mdk = 150mg/viên. Hạt được bào chế đem đóng nang trên máy đóng nang tự động: máy có 05 chặng tiếp liệu, mỗi chặng có 09 piston, tốc độ đóng của mâm quay khoảng 1500 – 1800 Hz. - Viên sau khi bào chế được để ổn định 24h trong túi polyethylen, tránh ánh sáng để sử dụng cho các thực nghiệm đánh giá. 2.2.2. Phương pháp đánh giá 2.2.2.1. Phương pháp xác định kích thước tiểu phân của nguyên liệu amlodipin besilat Cân chính xác khoảng 25,0 g amlodipin besilat, cho vào các cỡ rây thích hợp, lắc theo chiều ngang quay tròn trong 25 phút. Cân đúng số lượng còn lại trên rây và số lượng thu được trên hộp hứng. Mỗi lô làm 03 lần, lấy kết quả trung bình. 2.2.2.2. Phương pháp đánh giá độ rã của viên: Thử theo phụ lục 11.6 Dược điển Việt Nam IV 2.2.2.3. Phương pháp đánh giá độ đồng đều khối lượng: Thử theo phụ lục 11.3. Phép thử đồng đều khối lượng - Dược điển Việt Nam IV 2.2.2.4. Phương pháp xác định tỷ trọng biểu kiến Tỷ trọng biểu kiến của khối bột, hạt được đo trên máy đo Pharma test. Mỗi mẫu làm 03 lần, tần số rung 50Hz, thời gian rung 5 phút. Tỷ trọng riêng biểu kiến được tính theo công thức: DBK = M V Trong đó: - DBK: tỷ trọng biểu kiến của khối bột (g/ml) - M: khối lượng của khối bột (g) - V: dung tích của khối bột (ml) 30 Trọng lượng bột chứa trong vỏ nang số 2 theo thiết kế công thức là 150mg/viên, vì dung tích vỏ nang số 2 là 0,37 ml do đó yêu cầu tỷ trọng biểu kiến > 0,40 (g/ml) 2.2.2.5. Xác định độ trơn chảy và tốc độ trơn chảy: a. Xác định tốc độ trơn chảy của hạt: Nguyên tắc xác định: một khối lượng xác định bột thích hợp (70 - 100g) được đổ vào một phễu đặt trên máy xác định tốc độ trơn chảy BEP - 2 có độ rung với tần số thích hợp, thời gian chảy hết khối bột qua phễu được máy tự động ghi báo tính ra độ trơn chảy hiển thị bằng gam/giây. b. Xác định độ trơn chảy của hạt được đánh giá thông qua chỉ số nén (Carr): Chỉ số carr = (V0 − Vt ) x 100 Vt Tỉ số Hausner = V0 Vt V0: thể tích ban đầu (ml) Vt: thể tích biểu kiến (ml) Chỉ số nén thấp tương đương với độ trơn chảy tốt Bảng 4: Tương quan giữa chỉ số nén và khả năng trơn chảy theo USP 37 Chỉ số nén (%) Độ trơn chảy < 10 Rất tốt 11-15 Tốt 16-20 Khá tốt 21-25 Tạm được 26-31 Kém 32-37 Rất kém >38 Rất rất kém Bảng 5: Tương quan giữa tỷ số Hausner và khả năng trơn chảy Khả năng trơn chảy Tỉ số Hausner 31 Rất tốt ≤ 1,18 Tốt 1,18 – 1,34 Kém ≥ 1,35 2.2.2.6. Xác định độ tan bão hòa nguyên liệu amlodipin besilat: - Cân 1 lượng amlodipin besilat nguyên chất, cho vào cốc có mỏ gồm khoảng 10ml môi trường cần khảo sát. - Tiến hành lắc siêu âm trên máy ở nhiệt độ 30°C ± 10C trong 2 tiếng. - Sau đó mang ly tâm/5phút. Dung dịch được lọc qua màng 0.45µm và pha loãng thích hợp rồi mang đo quang ở 360nm. 2.2.2.7. Phương pháp đo độ ẩm của hạt: Sử dụng cân xác định độ ẩm nhanh AMB 50. Mỗi lần thử 2g hạt cốm. Nhiệt độ sấy 50°C, sấy đến độ ẩm không đổi. 2.2.2.8. Phương pháp định lượng amlodipin trong viên nang: - Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao. Thuốc thử: Đạt tiêu chuẩn DĐVN IV. - Acetonitril (TT). - Triethylamin (TT). - Acid phosphoric đặc (TT). - Methanol (TT). - Dung dịch đệm phosphat pH = 3,0. Cách pha: Thêm 7ml triethylamin vào 1.000 ml nước và chỉnh về pH = 3,0 bằng acid phosphoric đặc, trộn đều rồi lọc qua màng lọc có kích thước 0,45m. Điều kiện sắc ký: - Cột Lichrosorb Rp 18 (250 x 4mm ; 10m). - Pha động: Acetonitril : Methanol : Dung dịch đệm phosphat pH = 3,0 (60 : 30 : 10) (Thay đổi tỷ lệ nếu cần) - Detector UV 237 nm. - Tốc độ dòng 2ml/ phút. 32 - Thể tích tiêm: 20l. Tiến hành: - Dung dịch chuẩn: Cân chính xác khoảng 35mg Amlodipin besilat chuẩn (tương đương khoảng 25mg Amlodipin base) hoà tan trong 100ml pha động. Hút chính xác 5ml dung dịch này pha loãng với pha động thành 25ml. Lọc qua màng lọc có kích thước 0,45m thu được dung dịch chuẩn. - Dung dịch thử: Cân 20 nang, tính khối lượng trung bình của bột thuốc trong nang, trộn đều và nghiền thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột thuốc có chứa khoảng 5mg amlodipin base, hoà tan trong 100ml pha động. Lọc qua giấy lọc, bỏ 20ml dịch lọc đầu, rồi lọc tiếp qua màng lọc có kích thước 0,45m thu được dung dịch thử. - Tiến hành tiêm lần lượt các dung dịch chuẩn và dung dịch thử vào hệ thống sắc ký. - Tính hàm lượng amlodipin base có trong viên dựa vào diện tích peak thu được của dung dịch chuẩn và dung dịch thử và hàm lượng của amlodipin besilat chuẩn. Hệ số chuyển đổi từ amlodipin besilat sang amlodipin base là 0,724638. 2.2.2.9. Phương pháp định lượng tạp chất liên quan: - Tiến hành bằng phương pháp sắc lý lỏng (Phụ lục 5.3 – DĐVN IV). - Điều kiện sắc ký: + Cột thép không gỉ (15 cm × 3,9 mm) được nhồi pha tĩnh C (5 m). + Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước sóng 237 nm. + Tốc độ dòng: 1,0 ml/min + Thể tích tiêm: 10 μl Dung dịch thử: Cân 20 viên và nghiền thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột viên tương ứng với khoảng 50 mg amlodipin, hòa tan trong pha động và pha loãng thành 50 ml với pha động. Dung dịch đối chiếu: Pha loãng 5,0 ml dung dịch thử thành 100,0 ml với pha động và pha loãng 5,0 ml dung dịch thu được thành 50,0 ml với pha động. 33 Dung dịch phân giải: Hòa tan 5 mg amlodipin besilat chuẩn trong 5 ml dung dịch hydrogen peroxyd đậm đặc (TT). Đun nóng ở 70 °C trong 45 phút. Cách tiến hành: Thời gian lưu tương đối giữa amlodipin và 3-ethyl 5-methyl(4RS)-4-(2clorophenyl)-6-methyl-2-[[2-[[2-(methylcarbamoyl)benzoyl]amino]ethoxy]methyl]-1,4-dihydropyridin-3,5dicarboxylat (tạp A) là khoảng 0,5. Tiêm dung dịch phân giải, phép thử chỉ có giá trị khi độ phân giải giữa pic tương ứng với amlodipin và tạp A ít nhất là 4,5. Tiêm dung dịch thử và dung dịch đối chiếu. Tiến hành sắc ký đối với dung dịch thử trong khoảng thời gian gấp 3 lần thời gian lưu của amlodipin. Trên sắc ký đồ của dung dịch thử, hai lần diện tích của pic tương ứng với tạp A không được lớn hơn diện tích của pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (0,5 %). Tổng diện tích của tất cả các pic tạp khác không được lớn hơn diện tích của pic chính trên trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (0,5 %). Bỏ qua pic tương ứng với benzen sulfonat (thời gian lưu tương đối khoảng 0,2) và bất kỳ pic nào có diện tích nhỏ hơn 0,1 lần diện tích của pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (0,05 %). 2.2.2.10. Phương pháp đánh giá mức độ và tốc độ hòa tan amlodipin: a. Xác định mức độ và tốc độ hoà tan của nguyên liệu, hạt, nang amlodipin bằng phép thử nghiệm hoà tan với các điều kiện như sau: - Sử dụng máy thử độ hoà tan thiết bị kiểu giỏ quay - Tốc độ: 75 vòng/ phút - Nhiệt độ môi trường hoà tan: 37°C ± 0,5°C - Môi trường hoà tan: 500 ml dung dịch acid hydrocloric 0,05M - Khối lượng mẫu thử: amlodipin nguyên liệu và viên nang tương ứng với 5mg amlodipin base * Tiến hành: - Cho mẫu thử vào cốc chứa môi trường hoà tan, cho máy hoạt động. Sau từng khoảng thời gian 5, 15, 30 phút lấy mẫu một lần. Mỗi lần hút chính xác 15ml dung dịch thử, lọc, bổ sung 15 ml HCl 0,05M vào cốc hoà tan. 34 - Mẫu vỏ nang rỗng: Lấy một vỏ nang rỗng, lau sạch bột thuốc trong nang, tiến hành thử trong cùng điều kiện với mẫu thử. - Mẫu chuẩn: Cân chính xác một lượng amlodipin besilat chuẩn tương ứng với khoảng 50mg amlodipin base vào bình định mức dung tích 100ml, thêm 50ml dung dịch acid hydrocloric 0,05M, lắc kỹ cho tan sau đó thêm vừa đủ bằng dung dịch acid hydrocloric 0,05M (TT). Hút chính xác 1ml dung dịch này pha loãng thành 50ml bằng dung dịch acid hydrocloric 0,05M. - Đo mật độ quang của dung dịch mẫu thử, dung dịch mẫu vỏ nang rỗng và dung dịch mẫu chuẩn ở bước sóng cực đại 360 nm, cốc đo dày 1 cm, mẫu trắng là dung dịch acid hydrocloric 0,05M. Mỗi mẫu thử 3 lần, lấy kết quả trung bình. - Dựa vào hiệu số giữa mật độ quang của mẫu thử và mẫu vỏ nang rỗng; mật độ quang của dung dịch chuẩn, hàm lượng của chuẩn để tính lượng amlodipin base hòa tan so với lượng ghi trên nhãn. Hệ số chuyển đổi từ amlodipin besilat sang amlodipin base là 0,724638. * Cách tính kết quả: - Nồng độ amlodipin chưa hiệu chỉnh ở lần hút thứ n: Cn = Dn0 x C0 x ∝ D0 + D0: Độ hấp thụ của dung dịch thử. + C0: Nồng độ dung dịch chuẩn (μg/ml). + D0: Độ hấp thụ của dung dịch chuẩn + α: Độ pha loãng (α = 1). + Nồng độ amlodipin sau khi hiệu chỉnh trong mẫu ở lần hút thứ n được tính theo công thức Nelson: n−1 V0 Cn = Cn0 + x ∑ Ci V i=1 Cn: Nồng độ hiệu chỉnh ở lần hút thứ n (μg/ml). Cn0: Nồng độ chưa hiệu chỉnh ở lần hút thứ n (μg/ml). V0: Thể tích dịch hoà tan đã hút (V0 = 15ml). V: Thể tích môi trường hoà tan (V = 500ml). 35 Ci (i = n - 1): Nồng độ chưa hiệu chỉnh ở lần hút thứ i (μg/ml). - Phần trăm amlodipin hoà tan tại thời điểm t được tính theo công thức: Cn x 500 x 100 1000 x m - Cn: Nồng độ hiệu chỉnh ở lần hút thứ n C% = - m: Hàm lượng amlodipin trong mẫu b. Xác định mức độ và tốc độ hoà tan của viên nang amlodipin trên In vitro theo hướng dẫn của FDA: - Thử độ hòa tan: theo hướng dẫn chung qui định trong Dược điển Mỹ 37 (Dissolution ) với một số điều kiện cụ thể như sau: - Thiết bị: giỏ quay - Tốc độ: 75 vòng/phút - Môi trường: 500 mL, 3 môi trường có pH 1,2; 4,5 và 6,8 - Nhiệt độ môi trường hoà tan: 370C  0,50C - Phương pháp định lượng: Thực hiện theo mục 2.2.2.9. Phương pháp đánh giá mức độ và tốc độ hòa tan amlodipin - Tiến hành: Thử trên 3 môi trường pH khác nhau. (pH1,2 ; pH4,5 ; pH6,8), ít nhất 12 viên trong một môi trường. Thời điểm lấy mẫu: 5 phút, 15 phút, 30 phút - Môi trường pH 1,2: 15 phút - Môi trường pH 4,5: 5, 15, 30 phút. - Môi trường pH 6,8: 5, 15, 30 phút. Đánh giá kết quả: - Trường hợp cả hai chế phẩm thuốc thử và thuốc đối chứng hòa tan rất nhanh trong môi trường nào đó (≥ 85% hàm lượng ghi nhãn hòa tan trong 15 phút) thì hai chế phẩm có độ hoà tan tương đương nhau, không cần phải so sánh biểu đồ hòa tan và hệ số f2. - Tính hệ số f2 36 f2 = 50 x log 100 x [ 1 + (1/n) t=1n (Rt – Tt)2]-0,5  trong đó: Rt và Tt lần lượt là phần trăm hòa tan tích lũy tại mỗi trong n điểm đã chọn của thuốc đối chứng và thuốc thử. Nếu hệ số f2 bằng 50 - 100, chế phẩm thử có độ hòa tan tương đương in vitro với chế phẩm đối chứng. 2.2.2.11. Đánh giá sơ bộ độ ổn định của viên nang amlodipin 5mg đã lựa chọn Tiến hành đánh giá độ ổn định của viên nang cần nghiên cứu trong các điều kiện sau: Mẫu 1: đóng trong vỉ nhôm - PVC; bảo quản tại phòng theo dõi độ ổn định có kiểm soát nhiệt độ và độ ẩm ở điều kiện: nhiệt độ 30°C ± 2°C; độ ẩm tương đối: 75% ± 5%. Mẫu 2: đóng trong vỉ nhôm - PVC, bảo quản ở điều kiện lão hoá cấp tốc: - Thiết bị bảo quản: tủ vi khí hậu. - Nhiệt độ: 40°C ± 2°C. - Độ ẩm tương đối: 75% ± 5%. Sau các khoảng thời gian bảo quản nhất định, tiến hành đánh giá các mẫu nghiên cứu dựa trên các chỉ tiêu: + Hình thức. + Hàm lượng dược chất. + Độ hoà tan dược chất. 2.2.2.12. Phương pháp xử lý số liệu Dữ liệu được tính toán nhờ phần mềm Excel 2013 (Microsoft., USA). Các thí nghiệm được tiến hành ba lần và biểu thị bằng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn. Dự đoán tuổi thọ của thuốc bằng phần mềm MINITAB 17 37 Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1. Khảo sát sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang với nồng độ dược chất - Đường chuẩn amlodipin được xây dựng trong môi trường pH khác nhau. (pH1,2 ; pH4,5 ; pH6,8) dùng để xác định độ hòa tan amlodipin trong viên - Cách tiến hành: Cân chính xác khoảng 50mg amlodipin chuẩn cho vào bình định mức 200ml, cho thêm khoảng 150ml HCl 0,05M, lắc siêu âm 15 phút. Bổ sung HCl 0,05M vừa đủ đến vạch được dung dịch gốc có nồng độ 25mg/ml. Từ dung dịch gốc tiến hành pha các dung dịch có dãy nồng độ 2,5; 5; 10; 15; 20; 25 µg/ml trong HCl 0,05M như sau: Dung dịch gốc Bình định mức Nồng độ (µg/ml) 1 ml  100 ml 2,5 2 ml  100 ml 5 4 ml  100 ml 10 6 ml  100 ml 15 8 ml  100 ml 20 10 ml  100 ml 25 Các dung dịch trên được lọc trong bằng giấy lọc sau đó tiến hành quét phổ hấp thụ của amlodipin trong dung dịch HCl 0,05M trong khoảng 190 - 900 nm để xác định bước sóng hấp thụ cực đại. Đo mật độ quang dãy dung dịch trên ở bước sóng hấp thụ cực đại (360 nm). Từ kết quả đo mật độ quang, xây dựng phương trình hồi qui thực nghiệm, vẽ đồ thị sự tương quan giữa nồng độ và mật độ quang của amlodipin trong các dung dịch tương ứng của dãy dung dịch amlodipin đã pha. Tương tự tiến hành với 2 môi trường pH 4,5 và pH 6,8 38 Để lựa chọn được khoảng nồng độ amlodipin phù hợp cho thử hòa tan, tiến hành đánh giá mối tương quan giữa nồng độ amlodipin và mật độ quang ở bước sóng λ = 360 nm. Xây dựng đường chuẩn của amlodipin bằng phương pháp đo quang phổ theo phương pháp ghi ở trên, kết quả được trình bày ở bảng 6; 7; 8 và hình 3; 4; 5 Bảng 6: Mật độ quang của dãy dung dịch chuẩn amlodipin trong môi trường pH = 1,2 Nồng độ (µg/ml) 5 10 15 20 25 Mật độ quang (D) 0,057 0,114 0,170 0,226 0,283 Môi trường pH: 1,2 0.35 y = 0.01128x + 0.00080 R² = 0.99999 Độ hấp thụ 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 0 5 10 15 20 25 30 Nồng độ ((µg/ml) Sơ đồ 3: Sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang với nồng độ amlodipin ở pH 1,2 Bảng 7: Mật độ quang của dãy dung dịch chuẩn amlodipin trong môi trường pH = 4,5 Nồng độ (µg/ml) 2,5 5 10 15 20 Mật độ quang (D) 0,147 0,313 0,637 0,969 1,279 39 Môi trường pH: 6,8 1.4 y = 0.06485x - 0.01196 R² = 0.99987 Độ hấp thụ 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 5 10 15 20 25 Nồng độ ((µg/ml) Sơ đồ 4: Sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang với nồng độ amlodipin ở pH 4,5 Bảng 8: Mật độ quang của dãy dung dịch chuẩn amlodipin trong môi trường pH = 6,8 Nồng độ (µg/ml) 2,5 5 10 15 20 25 Mật độ quang (D) 0,050 0,101 0,203 0,306 0,408 0,512 Môi trường pH: 6,8 0.6 y = 0.02052x - 0.00171 R² = 0.99999 Độ hấp thụ 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 5 10 15 20 25 Nồng độ ((µg/ml) Sơ đồ 5: Sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang với nồng độ amlodipin ở pH 6,8 Nhận xét: 40 30 Từ hình 3, 4, 5 cho thấy, giá trị độ hấp thụ quang tuyến tính với nồng độ amlodipin trong khoảng từ 2,5µg/ml tới 25µg/ml ở bước sóng 360 nm, với hệ số tương quan R2 ~ 1. Như vậy, xác định độ hòa tan amlodipin bằng phương pháp đo quang đảm bảo chính xác ở khoảng nồng độ từ 2,5µg/ml tới 25µg/ml. Tuy nhiên qua khảo sát ở pH 1,2 ở nồng độ 2,5 và 5 µg/ml cho kết quả mật độ quang thấp, không chính xác do đó khi định lượng cần thêm chuẩn. 3.2. Đánh giá độ hòa tan viên nang Amlor® và viên nang Amlodipin 5 mg công ty đang sản xuất: 3.2.1. Đánh giá độ hòa tan viên nang amlodipin 5mg công ty đang sản xuất: - Viên nang AMLOTHEPHAM (amlodipin 5 mg) lô sản xuất 001 có công thức sản xuất như sau: Hàm lượng (mg/1 viên) Thành phần (mg) Amlodipin besilat 6,95 Amidon (tinh bột mì) 66,00 Comprecel M101 67,00 Hồ tinh bột sắn 15% 30,00 Magnesi stearat 0,75 - Đánh giá viên nang AMLOTHEPHAM (amlodipin 5 mg) lô sản xuất 001 được đánh giá theo các phương pháp ghi ở mục 2.2.2.10. Kết quả được trình bày ở bảng 9, 10: Bảng 9: Kết quả đánh giá viên nang amlodipin 5mg Chỉ tiêu Kết quả Định lượng 99,8% Độ đồng đều khối lượng ± 2,6% Độ đồng đều hàm lượng 98,7% - 102,9% Độ rã 8,6 phút Bảng 10: Tỷ lệ % amlodipin hòa tan từ viên nang amlodipin theo thời gian 41 Môi trường pH 5 phút 15 phút 30 phút 1,2 64,1 67,1 69,7 4,5 55,9 64,4 70,1 6,8 43,2 51,4 55,4 3.2.2. Đánh giá độ hòa tan viên nang amlodipin 5mg công ty đang sản xuất: - Để làm cơ sở so sánh, chúng tôi tiến hành khảo sát độ hòa tan viên nang Amlor® 5mg; số đăng ký VN-10465-10; do công ty Pfizer PGM của Pháp sản xuất, số lô SX: A346204, Ngày sản xuất: 30-04-2013, Hạn dùng: 30-04-2016. - Tiến hành thử độ hòa tan theo mục 2.2.2.9, kết quả được trình bày ở bảng 11 Bảng 11: So sánh tỷ lệ phần trăm hòa tan amlodipin từ viên Amlor® 5mg và Amlodipin 5mg Môi trường pH Amlor® 5mg Amlodipin 5mg 1,2 Amlor® 5mg Amlodipin 5mg 4,5 Amlor® 5mg Amlodipin 5mg 6,8 5 phút 15 phút 30 phút 91,4 97,1 98,9 64,1 67,1 69,7 90,2 95,6 95,9 55,9 64,4 70,1 85,2 92,7 96,4 43,3 51,4 55,4 Nhận xét: Viên nang Amlor® 5mg có tỷ lệ phần trăm hòa tan của amlodipin tốt, sau 5 phút đã hòa tan trên 80%, sau 15 phút gần 100% dược chất hòa tan, sau 30 phút % dược chất hòa tan gần như không thay đổi so với thời điểm sau 15 phút. Độ hòa tan ở 3 môi trường gần tương đương nhau. 42 % giải phóng Amlor 105 95 85 75 65 55 45 35 25 15 5 -5 0 10 Amlothepharm 20 30 Thời gian (phút) % giải phóng Sơ đồ 6: Đồ thị độ hòa tan của viên nang Amlor® 5mg và amlodipin 5mg ở môi trường pH 1.2 105 95 85 75 65 55 45 35 25 15 5 -5 Amlor 0 10 Amlothepharm 20 30 Thời gian (phút) % giải phóng Sơ đồ 7: Đồ thị độ hòa tan của viên nang Amlor® 5mg và amlodipin 5mg ở môi trường pH 4,5 105 95 85 75 65 55 45 35 25 15 5 -5 Amlor 0 10 Amlothepharm 20 Thời gian (phút) 43 30 Sơ đồ 8: Đồ thị độ hòa tan của viên nang Amlor® 5mg và amlodipin 5mg ở môi trường pH 6,8 Kết luận: Viên nang AMLOTHEPHAM (Amlodipin 5mg) lô sản xuất 001 không tương đương hòa tan ở cả 3 môi trường so với viên nang Amlor® Ghi chú: Quan sát trong quá trình thử độ hòa tan thấy tình trạng: - Mẫu viên nang Amlor® 5mg trên giỏ quay không còn hạt cốm - Mẫu viên nang amlodipin 5mg trên giỏ quay còn nhiều hạt cốm (khối lượng khoảng 1/3) Sơ đồ 9: Mẫu viên nang Amlodipin 5mg trên giỏ quay sau thời điểm thử 30 phút 44 Sơ đồ 10: Mẫu viên nang Amlor® 5mg trên giỏ quay sau thời điểm thử 30 phút Nhận xét: Kết quả cho thấy viên AMLOTHEPHAM (amlodipin 5mg) không đạt độ hòa tan theo yêu cầu của tiêu chuẩn cơ sở và đặc biệt ở môi trường pH 6,8 độ hòa tan đạt thấp hơn nhiều so với viên nang Amlor® 5mg 3.3. Nghiên cứu các biện pháp cải thiện độ hòa tan của amlodipin từ viên nang 3.3.1. Đánh giá độ tan bão hòa của nguyên liệu amlodipin besilat: Tiến hành đánh giá độ tan bão hòa nguyên liệu amlodipin besilat theo phương pháp mục 2.2.2.6. Xác định độ tan bào hòa nguyên liệu amlodipin besilat thu được kết quả như sau: Bảng 12: Kết quả đánh giá độ tan bão hòa của nguyên liệu amlodipin besilat Độ tan bão hòa nguyên liệu amlodipin besilat mg/ml Nước pH 1,2 pH 4,5 pH 6,8 4,284 4,341 4,472 2,009 Kết quả cho thấy độ tan bão hòa của nguyên liệu amlodipin besilat phụ thuộc vào pH, ở pH 6,8 độ tan kém hơn ở pH 4,5 và 1,2. 45 3.3.2. Đánh giá ảnh hưởng của kích thước tiểu phân nguyên liệu đến tốc độ hòa tan của viên nang amlodipin 5mg: Tiến hành rây 100g amlodipin qua rây có kích thước mắt rây 0,090; 0,125; 0,180; 0,250mm đồng thời tiến hành nghiền mịn amlodipin bằng máy nghiền đa năng, đánh giá lại độ mịn bằng cách rây qua rây có kích thước mắt rây 0,090; 0,125; 0,180; 0,250mm, kết quả thu được thể hiện qua bảng 13: Bảng 13: Kết quả phân bố kích thước amlodipin trước khi xay và sau khi xay qua các cỡ rây 125 - 180 180 - 250 > 250 KTMR < 90 90 - 125 % khối lượng qua rây trước khi xay 7,04 11,26 6,78 60,24 24,32 % khối lượng qua rây sau khi xay 8,35 12,24 11,21 68.2 0 Từ kết quả trên nhận thấy nguyên liệu amlodipin trước khi nghiền mịn chưa đạt tiêu chuẩn bột mịn theo DĐVN IV. Nguyên liệu amlodipin được nghiền mịn, kiểm tra độ mịn qua rây 125, tiến hành bào chế viên nang amlodipin 5mg với công thức ở mục 3.2.1 và theo phương pháp ở mục 2.2.1, mẻ pha 500 viên. Sau đó đánh giá chỉ tiêu hàm lượng, độ rã và độ hòa tan của viên nang theo phương pháp ở mục 2.2.2.2 và 2.2.2.10 thu được kết quả như sau: - Hàm lượng: 100,3% - Độ rã: 7,8 phút - Độ hòa tan ở bảng 14 và hình 3.2 Bảng 14: % amlodipin hòa tan từ viên bào chế từ nguyên liệu nghiền mịn ở pH 1,2 và 6,8 Thời gian (phút) 5 15 30 % amlodipin hòa tan ở pH 1,2 72,2 79,2 83,4 % amlodipin hòa tan ở pH 6,8 68,8 73,2 81,9 46 85 75 % giải phóng 65 55 45 35 Viên bào chế từ nguyên liệu nghiền mịn Amlothepharm CT cũ 25 15 5 -5 0 5 10 15 20 25 30 35 Thời gian (phút) Sơ đồ 11: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ mẫu viên có nguyên liệu đã được nghiền mịn, thử ở pH 1,2 100 90 80 % giải phóng 70 60 50 40 Viên bào chế từ nguyên liệu nghiền mịn Amlothepharm CT cũ 30 20 10 0 0 5 10 15 20 25 30 35 Thời gian (phút) Sơ đồ 12: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ mẫu viên có nguyên liệu đã được nghiền mịn, thử ở pH 6,8 Từ kết quả trên nhận thấy: viên nang sử dụng nguyên liệu nghiền mịn có mức độ và tốc độ hòa tan của amlodipin ở 5 phút và 15 phút và 30 phút cao hơn so với viên cũ. Nghiền mịn nguyên liệu làm tăng mức độ và tốc độ hòa tan amlodipin. 47 3.3.3. Bào chế viên nang AMLOTHEPHAM (amlodipin 5mg) với các công thức tá dược dính khác nhau: Công thức cũ không đạt độ hòa tan có thành phần như mục 3.3.1, dựa trên công thức cũ đã có, giữ nguyên tá dược độn và tá dược trơn chỉ thay đổi loại tá dược dính. Tá dược dính là hồ tinh bột 15% trong quá trình quan sát thử độ rã và độ hòa tan thấy có hiện tượng rã lần 2 kém (còn nhiều hạt trên giỏ quay) do đó có thể cản trở giải phóng amlodipin ra khỏi hạt để hòa tan vào môi trường thử, có thể là do hồ tinh bột sắn với lượng hơi cao (15%) có độ kết dính khá lớn đã tạo nên các hạt cốm rắn, chắc dẫn đến khó phân tán trong môi trường thử độ hòa tan. Vì vậy cần phải giảm nồng độ tá dược dính trong các thí nghiệm tiếp theo. Dựa trên phân tích công thức cũ không đạt độ hòa tan ở trên, chúng tôi tiến hành khảo sát ảnh hưởng của các loại tá dược dính khác nhau ở nồng độ giảm xuống còn 5% đến độ hòa tan của viên nang amlodipin. Gồm 3 công thức khảo sát sau: Bảng 15: Các công thức viên nang amlodipin 5mg sử dụng các tá dược dính khác nhau Thành phần (mg) CT1 CT2 CT3 Amlodipin besilat 6,95 6,95 6,95 Amidon (tinh bột mì) 66,00 66,00 66,00 67,00 67,00 67,00 30,00 - - Dung dịch PVP 5% - 30,00 - Era-gel (Pregelatinized starch) 5% - - 30,00 0,75 0,75 0,75 Comprecel M101 (Microcrystalline cellulose) Hồ tinh bột 5% Magnesi stearat Viên nang được bào chế theo phương pháp ghi ở mục 2.2.2. Mỗi mẫu bào chế 500 viên sau đó được thử độ rã và độ hòa tan theo phương pháp ghi ở mục 2.3.1. Kết quả được trình bày ở bảng 16, bảng 17, sơ đồ 13 và 14. 48 Bảng 16: Độ rã của viên nang amlodipin 5mg bào chế từ các công thức tá dược dính khác nhau Công thức CT1 CT2 CT3 Độ rã (phút) 8,2 7,3 3,1 Bảng 17: % amlodipin hòa tan từ viên nang AMLOTHEPHAM CT1 đến CT3 ở pH = 1,2 và 6,8 pH 1,2 CT pH 6,8 15 phút 30 phút 5 phút 15 phút 30 phút 1 70.1 75.2 78.1 68.7 73.2 76.4 2 72.6 76.3 79.6 70.3 74.8 78.1 3 78.5 82.7 86.1 77.4 83.8 87.6 % giải phóng 5 phút 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 CT2 CT3 CT1 0 5 10 15 20 25 30 35 Thời gian (phút) Sơ đồ 13: Đồ thị % amlodipin hòa tan CT1 đến CT3 ở pH 1,2 49 % giải phóng 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 CT2 CT3 CT1 0 5 10 15 20 25 30 35 Thời gian (phút) Sơ đồ 14: Đồ thị % amlodipin hòa tan CT1 đến CT3 ở pH 6,8 Từ kết quả trên nhận thấy: viên nang sử dụng công thức có tá dược dính khác nhau có mức độ hòa tan của amlodipin khác nhau, ở 5 phút, 15 phút và 30 phút CT3 đều cao hơn so với CT1 và CT2. Qua quan sát thử độ rã và độ hòa tan đều thấy hiện tượng CT1 và CT2 để lại nhiều hạt cốm trên giỏ quay hơn CT3 chứng tỏ rã lần 2 kém hơn CT3. Như vậy có thể thấy dùng hồ tinh bột và PVP làm tá dược dính có hiện tượng làm chậm rã hạt cốm lần 2. Dùng tá dược dính hợp lý làm tăng mức độ và tốc độ hòa tan amlodipin. Vậy chọn tá dược dính là Era-gel (Pregelatinized starch) cho các nghiên cứu tiếp theo. 3.3.4. Sử dụng tá dược siêu rã Do độ hòa tan vẫn thấp hơn viên đối chiếu Amlor® 5mg nên chúng tôi tiếp tục tiến hành khảo sát thêm ảnh hưởng của các tá dược siêu rã khác nhau ở 3 tỷ lệ 3%, 6% và 9% đến độ hòa tan của viên nang amlodipin 5mg. Có 9 công thức khảo sát sau: Bảng 18: Các công thức viên nang amlodipin 5mg sử dụng tá dược siêu rã khác nhau Thành phần (mg) Amlodipin besilat CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 6,95 6,95 6,95 6,95 6,95 6,95 6,95 6,95 6,95 50 Microcrystallin cellulose 133,5 133,5 133,5 133,5 133,5 133,5 133,5 133,5 133,5 Pregelatinized starch 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 Magnesi stearat 0,75 0,75 0,75 0,75 0,75 0,75 0,75 0,75 0,75 Crosspovidon 3% 6% 9% - - - - - - Sodium starch glycolat - - - 3% 6% 9% - - - Natri croscarmellose - - - - - - 3% 6% 9% Viên nang được bào chế theo phương pháp ghi ở mục 2.2.1. Mỗi mẫu bào chế 500 viên sau đó được thử độ rã và độ hòa tan theo phương pháp ghi ở mục 2.2.2.3 và 2.2.2.9. Kết quả được trình bày ở bảng 19, bảng 20 và sơ đồ 15,16,17. Bảng 19: Độ rã của viên amlodipin 5 mg từ CT1 đến CT9 Công thức CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 Độ rã (phút) 4 3 4 2 2 2 4 5 4 Bảng 20: % amlodipin hòa tan từ các viên nang CT1 đến CT9 thử ở môi trường pH: 1,2; pH 4,5 và pH 6,8 Thời gian 5 phút 15 phút 30 phút pH 1,2 CT1 84,61 92,33 100,06 CT2 88,64 94,31 99,97 51 CT3 90,49 95,45 100,29 CT4 92,60 99,96 100,82 CT5 93,40 97,49 101,00 CT6 93,56 97,03 100,50 CT7 88,34 93,38 99,26 CT8 89,19 94,72 98,63 CT9 87,34 95,96 99,18 pH 4,5 CT1 80,24 91,17 95,22 CT2 82,14 93,07 96,16 CT3 91,12 92,23 94,47 CT4 93,25 98,17 99,58 CT5 92,87 96,34 100,12 CT6 90,37 95,89 98,92 CT7 83,21 90,14 95,06 CT8 84,22 93,01 96,14 CT9 81,17 90,28 94,36 pH 6,8 CT1 76,08 90,03 91,99 CT2 82,28 94,12 97,81 CT3 84,49 86,73 92,56 CT4 84,96 92,32 98,88 CT5 85,84 91,87 99,18 CT6 77,50 94,42 99,75 52 CT7 79,31 90,55 97,20 CT8 75,24 87,24 94,21 CT9 77,29 88,07 91,81 105 100 CT1 95 90 CT2 85 80 CT3 75 70 % giải phóng 65 CT4 60 55 CT5 50 45 CT6 40 35 30 CT7 25 20 CT8 15 10 CT9 5 0 0 5 10 15 20 25 30 35 Thời gian (phút) Sơ đồ 15: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ các mẫu viên CT1 đến CT9 ở pH 1,2 53 105 100 CT1 95 90 CT2 85 80 CT3 75 70 % giải phóng 65 CT4 60 55 CT5 50 45 CT6 40 35 30 CT7 25 20 CT8 15 10 CT9 5 0 0 5 10 15 20 25 30 35 Thời gian (phút) Sơ đồ 16: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ các mẫu viên CT1 đến CT9 ở pH 4,5 54 105 100 CT1 95 90 CT2 85 80 CT3 75 70 % giải phóng 65 CT4 60 55 CT5 50 45 CT6 40 35 30 CT7 25 20 CT8 15 10 CT9 5 0 0 5 10 15 20 25 30 35 Thời gian (phút) Sơ đồ 17: Đồ thị % amlodipin hòa tan từ các mẫu viên CT1 đến CT9 ở pH 6,8 Từ kết quả trên nhận thấy: - Sử dụng tá dược siêu rã làm giảm độ rã của viên, cải thiện đáng kể độ tan và tốc độ hòa tan của amlodipin, độ hòa tan của amlodipin sau 30 phút đạt trên 90%. - Viên nang có sử dụng tá dược siêu rã sodium starch glucolate cho kết quả tốt nhất, Crosscarmelose và crosspovidone có tốc độ hòa tan dược chất không khác nhau đáng kể. - Tốc độ hòa tan amlodipin khác nhau không đáng kể khi tỉ lệ sử dụng tá dược siêu rã từ thay đổi 3% lên 6% và 9%. - Công thức 4,5,6 có độ hòa tan ở cả 2 môi trường pH 1,2 và 6,8 cao hơn các công thức khác. Khi tăng tỉ lệ sodium starch glucolate lên 6% và 9% (CT5, CT6) có độ tan và tốc độ hòa tan amlodipin thay đổi không đáng kể so với tỷ lệ 3% (CT4). 55 Vậy công thức có sử dụng sodium starch glucolate với tỉ lệ 3% (CT4) được chọn để bào chế viên nang amlodipin 5mg. 3.3.5. Lựa chọn công thức bào chế viên nang amlodipin bằng cách đánh giá các chỉ tiêu khác của các công thức có tá dược siêu rã khác nhau: - Tiến hành đánh giá các chỉ tiêu khác của các công thức có tỷ lệ tá dược siêu rã 3% (CT1, CT4, CT7) để chọn ra công thức tiến hành các thí nghiệm tiếp theo, kết quả cụ thể như sau: Bảng 21: Tỷ trọng biểu kiến, độ trơn chảy, hệ số carr và hausner của CT1, CT4, CT7 Tốc độ trơn Tỷ số chảy hausner của hạt (g/giây) Độ Độ rã Tỷ đồng (phút) trọng đều biểu khối kiến lượng (±7,5%) V0 Vt Chỉ số nén carr CT1 0,30 0,39 23,1 0,77 3,78 0,39 -2,6 ÷ +3,5 4 CT4 0,32 0,41 21,9 0,78 4,08 0,41 -2,3 ÷ +3,4 2 CT7 0,30 0,38 21,1 0,79 3,54 0,38 -2,7 ÷ + 3,9 4 Kết quả trên cho thấy tỷ trọng biểu kiến, tốc độ trơn chảy, chỉ số carr và hausner, độ đồng đều khối lượng của ba công thức gần tương đồng nhau vì do tính chất của hạt cốm chủ yếu do thành phần tá dược độn quyết định. Dược chất và tá dược siêu rã chiếm lượng nhỏ (2%) do đó gần như không ảnh hưởng đến các chỉ số trên. Do kết quả độ hòa tan của ba loại tá dược siêu rã cho kết quả cao và gần tương đương nhau, nhưng công thức 4,5,6 có độ hòa tan ở cả 2 môi trường pH 1,2 và 6,8 cao hơn các công thức khác vì vậy CT4 với tỉ lệ sodium starch glycolat 3% được chọn để bào chế viên nang amlodipin 5mg. 56 3.3.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của phương pháp bào chế đến độ hòa tan của viên: Bào chế viên amlodipin 5mg theo CT4, phương pháp bào chế được thay đổi như sau: Tiến hành tạo hạt khô bằng phương pháp dập viên được mô tả ở mục 2.2.1.1. Tạo hạt khô bằng phương pháp dập viên, để nhằm tránh dược chất amlodipin bị tác động của nhiệt và độ ẩm trong quá trình tạo hạt ướt. Đánh giá chỉ tiêu độ rã và độ hòa tan của viên đã bào chế theo phương pháp ghi ở mục 2.2.2.2 và mục 2.2.2.9. Kết quả thu được độ rã, độ đồng đều khối lượng, phân bố kích thước hạt ở bảng 22 và độ hòa tan sau 30 phút ở bảng 23 Bảng 22: Kết quả độ rã, độ đồng đều khối lượng, phân bố kích thước hạt Độ rã (phút) Độ đồng đều khối lượng Phân bố kích thước hạt (%) >1mm 1-0,7mm 0,7-0,25 1,2m m 0,7÷ 1,2mm 0,3÷0,7 mm 1,2 mm 0,7÷ 1,2mm 0,3÷0,7 mm [...]... đảm bảo độ hòa tan và đáp ứng thử in vitro, trong đó chỉ tiêu độ hòa tan theo yêu cầu dược điển Mỹ 37 (tham khảo chuyên luận viên nén amlodipin besilat (> 80% sau 30 phút), chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài Nghiên cứu biện pháp cải thiện độ hòa tan của amlodipin besilat trong viên nang AMLOTHEPHAM với mục tiêu: 1 Cải tiến công thức và qui trình bào chế viên nang AMLOTHEPHAM (amlodipin 5mg) của công... Cảm quan và độ tan: Bột màu trắng hoặc gần như trắng Dễ tan trong methanol, hơi tan trong ethanol, khó tan trong nước (2,930,3mg/ml ở 370C và 1,91mg/ml ở 320C) và 2-propanol[4][17] Bảng 1: Độ tan của các dạng amlodipin besilat và amlodipin base trong nước ở nhiệt độ phòng[30] Dạng amlodipin Amlodipin besilat khan Amlodipin besilat monohydrat Amlodipin besilat dihydrat Amlodipin base Độ tan (mg/ml)... Định Viên nang Viên nang Viên nén Viên nén Viên nang Exforge 5/80 9 Lodopin Amlocen Lisonorm Amsyn 5 2.5 mg, 5 mg, 10 mg Merck Viên nén Amlodipin 5 mg Công ty TNHH MTV TW 3 Viên nang Amlodipin 5 mg Lisinopril 10 mg Gedeon Richter Viên nang Synmedic laboratories Ấn Độ Viên nang Amlodipin Amlodipin 5 mg Nhận xét: qua bảng 2 cho thấy, hầu hết các dạng bào chế của amlodipin trên thị trường là viên nén và viên. .. hưởng tới độ hòa tan và sự hấp thu của thuốc Đối tượng nghiên cứu của chúng tôi là viên nang amlothepham (amlodipin 5 mg) CTCPDVTYT Thanh Hóa đăng ký theo tiêu chuẩn cơ sở và USP 37 Tuy nhiên, qua nghiên cứu, sản phẩm viên nang amlothepham của Công ty có độ hòa tan kém (< 70%/30 phút) ở cả 3 môi trường pH thử in vitro (theo qui định của FDA) Theo Thông tư 08/2010/TT-BYT, amlodipin là thuốc nằm trong danh... cũng ảnh hưởng đến độ ổn định và hoà tan của viên[ 3] 1.2.3 Các biện pháp làm tăng độ hòa tan cho các dạng thuốc rắn Hiện nay, có rất nhiều kỹ thuật làm tăng độ hòa tan của dược chất cho các dạng thuốc rắn, nhưng trong khuôn khổ luận văn này chúng tôi chỉ đề cập đến các kỹ thuật đã được sử dụng trong quá trình nghiên cứu bao gồm: 14 1.2.3.1 Biện pháp tăng độ hoà tan và tốc độ hoà tan dược chất[1] Với... Sandoz Viên nén 5 mg Converam Perindopril arginin Servier Viên nén Amlodipin 10 mg Amlodipin 5 mg Valsartan 80 mg Exforge 10/160 Amlodipin 10 mg Novartis pharma Viên nén bao phim Valsartan 160 mg Normodipine Amlodipin 5 mg, 10 mg Gedeon Richter Viên nén Amlodipin 5 Amlodipin 5 mg Glomed Viên nang Amdipress Amlodipin 5 mg Traphaco Viên nang Apitim Amlodipin 5 mg Hậu Giang Viên nang Amlodipin Amlodipin... hợp của 2 tá dược siêu rã cho thời gian rã thấp nhất và độ hòa tan nhanh hơn, kết quả độ hòa tan là 87%[27] - N.Narasimha Rao và cộng sự đã bào chế viên nén giải phóng nhanh chứa Amlodipin besilat bằng phương pháp dập thẳng sử dụng các tá dược siêu rã có nguồn gốc tự nhiên như gôm, thạch biến tính Kết quả của nghiên cứu cho thấy độ hòa tan của Amlodipin besilat phụ thuộc pH và kích thước phân tử Tốc độ. .. xúc của dược chất với môi trường hòa tan tăng mạnh dẫn tới cải thiện độ rã, độ hòa tan của dược chất 1.2.3.6 Sử dụng tá dược siêu rã: Trong những năm gần đây, một vài nhóm tá dược mới xuất hiện gọi là tá dược siêu rã (TDSR), chúng làm giảm thời gian rã của viên, giúp làm tăng tốc độ hòa tan của dược chất, được sử dụng với tỷ lệ thấp (1-5%) trong thành phần viên nhưng vẫn đạt hiệu quả rã nhanh Cơ chế của. .. tốc độ hoà tan, một số loại ít ảnh hưởng, một số làm tăng tốc độ hoà tan như PVP có thể làm tăng tính thấm nên tăng tốc độ hoà tan của dược chất sơ nước, nhưng PVP hút ẩm mạnh nên có thể làm giảm độ ổn định của các dược chất dễ bị thuỷ phân Tá dược dính là yếu tố tạo hình chính của viên, giúp viên đảm bảo độ chắc nhưng sẽ làm viên khó rã nên ảnh hưởng đến độ hoà tan của viên Vì vậy cần nghiên cứu cẩn... nghiệm và viên amlor® 5mg 69 Sơ đồ 23: Đồ thị % amlodipin hòa tan ở pH 6,8 từ viên sản xuất ở qui mô phòng thí nghiệm và viên amlor® 5mg 70 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong những năm gần đây cùng với sự phát triển chung của nền kinh tế, ngành dược cũng có các bước phát triển nhất định, trong đó việc nghiên cứu, đánh giá độ hòa tan của các viên nén, viên nang nhằm đánh giá sinh khả dụng của sản phẩm ... giá độ hòa tan viên nang amlodipin 5mg công ty sản xuất 42 3.3 Nghiên cứu biện pháp cải thiện độ hòa tan amlodipin từ viên nang … 45 3.3.1 Đánh giá độ tan bão hòa nguyên liệu amlodipin. .. Amlodipin mg Glomed Viên nang Amdipress Amlodipin mg Traphaco Viên nang Apitim Amlodipin mg Hậu Giang Viên nang Amlodipin Amlodipin mg Bình Định Viên nang Viên nang Viên nén Viên nén Viên nang Exforge...BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI DS LÊ VĂN MẠNH NGHIÊN CỨU BIỆN PHÁP CẢI THIỆN ĐỘ HÒA TAN CỦA AMLODIPIN BESILAT TRONG VIÊN NANG AMLOTHEPHAM LUẬN VĂN DƯỢC SĨ CHUYÊN KHOA CẤP I CHUYÊN NGÀNH: