BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI PHẠM THỊ QUỲNH NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT CỦA CHẾ PHẨM MOCA TỪNGUỔN Dược LIỆU SẴN CÓ TRONG NƯỚC (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DUỢC sĩ KHOÁ 1998 - 2003) Người hướng dẫn : DS Nguyễn Duy Thiệp PGS TS Nguyễn Xn Thắng Nơi thực : Bộ mơn Hố Sinh Thời gian thực hiện: Từ 3/2003 đến 5/2003 ĩ £Ờ9 GĂM ƠN Trong trình thực đề tài tốt nghiệp môn HOẢ Ỗ1NH, em nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ bảo Với lòng biết ơn chân thành sâu sắc, em xin gửi đến thầy: D.& NGUYÊN DUY THIỆP PGỔ.TỎ NGUYỄN ẪUÂN THANG, người hướng dẫn em tận tình chu đáo irong trình làm thực nghiệm Em xin cảm ơn thầy, cô mơn HOA ƠINH tạo điều kiện tốt để em hồn thành luận văn Em xin bày tỏ lịng biết ơn thầy, Trường đại học Dược Hà Nội dạy dỗ em suốt năm năm học vừa qua Kính chúc thầy tồn thể gia đình, bạn bè mạnh khoẻ hạnh phúc Hà Nội tháng 5/2003 ốlNii VIÊN: PỈ1ẠM THỊ QUỲNH MỤC LỤC LÒI CẢM ƠN Trang DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ Phần - Tổng quan 1.1 Bệnh Đái tháo đường (ĐTĐ) 1.1.1 Khái niệm phân loại .2 1.1.2 Dich tễ học bệnh ĐTĐ 1.1.3 Chẩn đoán 1.2 Thuốc điều trị bệnh ĐTĐ 1.2.1 Thuốc tân dược 1.2.2 Thuốc có nguồn gốc dược liệu PHẨN - THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 14 A - Nshiêrt cứu bào chế chè túi loc M O C A 14 2.1 Nguyên vật liệu phương pháp thực nghiệm 14 2.1.1 Nguyên vật liệu 14 2.1.2 Phương pháp thực nghiệm 14 1) Xây dựng công thức 14 2) Tiêu chuẩn chất lượng sở 15 3) Qui trình sản xuất chè túi lọc MOCA 17 4) Nghiên cứu độ ổn định thuốc 20 2.2 Kết nghiên cứu bào chế chè túi lọc MOCA 22 B - Nshiên cứu tác duns đưònz huyết chè túi loc M OCA 25 2.1 Nguyên vật liệu phương pháp thực nghiệm 25 2.1.1 Nguyên vật liệu 25 2.1.2 Phương pháp thực nghiệm 25 1) Điều chế dạng thuốc nghiên cứu 25 2) Định lượng Glucose huyết chuột phương pháp Folin-wu 26 3) Nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết hỗn hợp chuột bình thường 26 4) Nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết Mướp đắng chuột cống trắng gây tãng đường huyết thực nghiệm 26 5) Nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết Thổ phục linh chuột cống trắng gây tăng đường huyết thực nghiệm 27 6) Nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết hỗn hợp chuột cống trắng gây tăng đường huyết thực nghiệm 27 2.2 Kết thử tác dụng hạ đường huyết chè túi lọc MOCA 28 C-Bàn lu â n 38 PHẨN - KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 40 TẢI LIỆU THAM KHẲO DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DĐVN: Dược điển Việt Nam ĐTĐ: Đái tháo đường GH: Glucose huyết KSV: Kiểm soát viên KS: Kiểm soát KN: Kiểm nghiệm KNTP: Kiểm nghiệm thành phẩm KNBTP: Kiểm nghiệm bán thành phẩm NPTĐH: Nghiệm pháp tăng đường huyết P.E: Polyethylen TC: Tiêu cliuẩn TCCS: Tiêu chuẩn sở WHO: TỔ chức Y tế giới ĐẶT VẤN ĐỂ Đái tháo đường (ĐTĐ) biết từ khoảng 2000 năm trước công nguyên, đặc biệt phát triển năm gần Cùng với tim mạch, ung thư, ĐTĐ ba bệnh có số người mắc cao nhất, bệnh thường kèm với biến chứng cấp tính gây tử vong hay biến chứng lâu dài bệnh mạch máu, thận, mắt, thần kinh ảnh hưởng đến sức khoẻ khả lao động người Do bệnh ĐTĐ khơng vấn đề riêng ngành Y tế mà vấn đề chung tồn xã hội địi hỏi cần phải quan tâm nhiều Y học đại có nhiều thuốc tân dược điều trị ĐTĐ, hầu hết thuốc kèm theo tác dụng không mong muốn, đặc biệt sử dụng kéo dài, bệnh nhân suy gan, suy thận Viộc sử dụng cỏ làm thuốc chữa bệnh ĐTĐ có từ lâu, với đặc lính tác dụng khơng nhanh mạnh thuốc lân độc tính, tác dụng phụ mà hiệu điều trị lại tốt, phù hợp với yêu cầu điều trị lâu dài bệnh Kinh nghiệm sử dụng thuốc để điều trị ĐTĐ Việt Nam phong phú thể nhiều lliuốc, Ihuốc, có Mướp đắng (Momordica charinta L Cucurbitaceae ), Thổ phục linh (Smilax glabra L Smilaceae) Để khai thác cách có hiệu nguồn liệu sẵn có nước, đáp ứng nhu cầu chữa bệnh cho nhân dân, góp phán tự túc thuốc men, đặt vấn đề “Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết chế phẩm MOCA từ nguồn dược liệu sẵn có nước” với mục tiêu: > Nghiên cứu cơng thức, tiêu chuẩn kiểm nghiệm, qui trình sản xuất độ ổn định trà túi lọc MOCA từ hai dược liệu Mướp đắng Thổ phục lin h > Đánh giá tác dụng hạ đường huyết chế phẩm chuột cống trắng thực nghiệm PHẦN - TỔNG QUAN 1.1 Bệnh đái tháo đường (ĐTĐ) 1.1.1 Khái niêm phân loai Khái niệm [ĩ , 17,13,24,25]: Năm 1985, ĐTĐ WHO định nghĩa tình trạng tăng đường huyết mạn tính rối loạn chuyển hố Hydratcarbon, gây thiếu hụt tuyệt đối hay tương đối Insulin, kèm theo triệu chứng khát nhiều, tiểu nhiều, sút cân, dẫn đến mê tử vong không điều trị kịp thời dẫn tới biến chứng muộn tổn thương mạch máu, biến chứng thần kinh, nhiễm trùng Phân loại [1,25]: ^ ĐTĐ nguyên phát: • ĐTĐ typ (phụ thuộc Insulin) • ĐTĐ typ (khơng phụ thuộc Insulin) ĐTĐ typ không béo ĐTĐ khởi phát người trẻ ĐTĐ thứ phát: • Bệnh lý tuyến tụy: Viêm tụy mạn, viêm tụy cấp, nhiễm sắt tuỵ • Bệnh nội tiết khác: Hội chứng Cushing, Basedown, to đầu chi • Do thuốc hố chất: Các hormom, thuốc lợi tiểu, kháng viêm • Hội chứng di truyền: Turner, Klinefelter, bệnh glycogen • Các bệnh “Insulin”: Khuyết tật trình chuyển từ Pro-insulin sang Insulin, bất thường cấu trúc Insulin • ĐTĐ dinh dưỡng kém: ĐTĐ xơ, sỏi tụy, ĐTĐ thiếu hụt protein ĐTĐ người có thai ^ Rối loạn dung nạp Glucose: 1.1.2 Dỉch tễ hoc bênh ĐTĐ Bệnh phát triển với tốc độ cao Gần WHO lên tiếng báo động mối lo ngại tồn giới [17] Theo cơng bố WHO năm 1985, có 30 triệu người giới mắc bệnh ĐTĐ, năm 1994 98,9 triệu người Năm 2000 157,3 triệu người dự tính năm 2010 có 215,6 triệu người bị ĐTĐ [17, 11] Hội nghị ĐTĐ Singapore (12/1997) cho thấy số bệnh nhân bị ĐTĐ 10 nước điển sau: Tên nước An độ Trung quốc Mỹ Nga Nhật Indonesia Brazil Mecico Ukrain Pakistan Số bệnh nhân mắc bệnh (triệu người) Năm 1995 Năm 1997 19,4 57,2 16,0 37,6 17,9 21,9 8,9 12,2 6,3 8,5 4,5 12,4 4,9 11,6 3,8 11,7 3,6 8,8 4,3 14,5 Bệnh có xu hướng tăng rõ rệt theo thời gian tăng trưởng kinh tế Tỷ lệ mắc bệnh khác vùng lãnh thổ: Pháp 4,4%; Mỹ 6,6%; Thái lan 3,58%; Philippin 4,27%; Malaysia 3,01%; Hàn quốc 2% [11,17] Năm 1995 Châu Á có khoảng 62 triệu người bị ĐTĐ ước tính năm 2010 có khoảng 130 triệu người bị ĐTĐ WHO cảnh báo xuất đại dịch bệnh ĐTĐ Châu Á kỷ 21 [11] Ở Việt Nam ĐTĐ bệnh thường gặp có tỷ lệ tử vong cao bệnh nội tiết [1,25] Tỷ lệ mắc bệnh Hà Nội: 1,44% (năml990) Huế: 0,96% (năm 1993) Thành phố Hồ Chí Minh: 2,52% (năm 1992) [1] Điều tra gần cho thấy bệnh tăng lên nhanh khu vực nội thành: Năm 2000 tỷ lệ mắc bệnh nội thành Hà Nội 4%, Thành phố Hồ Chí Minh 4% [1,11 ] Theo WHO, tốc độ phát triển cuả bệnh liên quan đến tốc độ thị hố, thay đổi nhanh lối sống công nghiệp, điều kiện dinh dưỡng cải thiện với giảm vận động thể lực [11] Dịch tễ học bệnh ĐTĐ cho thấy không vấn đề quan tâm ngành Y tế mà vấn đề xã hội nghiêm trọng cần quan tâm ngành cấp người 1.1.3 Chẩn đoán [25,29] a ĐTĐ chẩn đoán xác định bệnh nhân có ba dấu hiệu sau: *^> Đường huyết thời điểm nào: Trên 11,1 mmol/1 (200mg/dl) kèm theo triệu chứng ăn nhiều, uống nhiều, tiểu nhiều, sút cân nhanh có đường niệu, có ceton niệu Glucose huyết lúc đói: Trên 6,9 mmol (126mg/dl), xét nghiệm lúc bệnh nhân nhịn đói 10 ^ Glucose huyết sau làm nghiệm pháp tăng đường huyết giờ: Trên l,lm m ol/l (200mg/dl) theo tiêu chuẩn WHO năm 1985 b.Các xét nghiệm cận lâm sàng chẩn đoán ĐTĐ: Trong bệnh ĐTĐ, xét nghiệm cận lâm sàng cần thiết, ngồi việc giúp cho chẩn đốn phân loại bệnh cịn có giá trị q trình theo dõi tiên lượng bệnh ^ Glucose huvết (GHÌ Xét nghiệm Glucose huyết gồm có: Định lượng đường huyết lúc đói nghiệm pháp tăng đường huyết (NPTĐH) Bảng 1.1: Tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh ĐTĐ Tổ chức y tế giói Glucose huyết (mmol/1) ĐTĐ Lúc đói GH >6,7 sau làm NPTĐH GH > 11,1 Rối loạn dung nạp Glucose 5,6 < GH 0,05 Ghi chú: Kết bảng giá trị trung bình chuột ± S e : p > 0,05 (Sự khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với thời điểm giờ) 28 — - 81 Õ E Lô chứng - - - L ô thử , «1) b 910 oo -C - I I — —— T II Thời gian (giờ) Hình 2.1: Ảnh hưởng dịch chiết hỗn hợp Glucose huyết chuột bình thường Kết bảng 2.1, hình 2.1 cho thấy: - Glucose huyết chuột lô chứng uống 15 ml nước cất/kg chuột lô thử uống 15ml dịch chiết hỗn hợp/kg thay đổi khơng đáng kể suốt q trình định lượng Mức hạ Glucose huyết thấp đạt sau lô chuột chứng lô chuột thử khác khơng có ý nghĩa thống kê (P > 0,05) 2.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng dich chiết Mướp đáng chuốt cống trắng gây tăng đường huyết thưc nghiêm Để nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết dịch Mướp đắng chuột cống trắng gây tăng đường huyết thực nghiệm, cho chuột lô thử uống dịch chiết hỗn hợp với liều 15mml/kg, sau giờ, xác định Glucose huyết chuột (thời điểm giờ), tiếp cho chuột uống Glucose 30% với liều g/kg Sau chuột uống Glucose, định lượng Glucose huyết chuột 0,5 lần vòng 2,5 Tiến hành tương tự với lô chuột chứng uống 15 ml nước cất/kg để so sánh Kết trình bày bảng 2.2 hình 2.2 % 29 Bảng 2.2: Anil hưởng dịch chiết Mướp đắng trôn chuộl cống Irắtig gây tăng đường huyết thực nghiệm N Lô chuột Glucose huyết iô (mmol/1) Thời giarf\^ Lô chứng Lô thử 6,39 ±0,3 í 6,31 ±0,18 0,5 10,23 ±0,80 *** 8,10 ± 0,19 12,41 ± 0,40 *** 9,33 ± 0,36 1,5 11,34 ±0,49 *** 8,99 ± 0,23 *** 9,23 ± 0,79 ** 7,07 ± 0,39 ** 2,5 7,67 ±0,49 * 6,22 ± 0,20 * 194,21 147,86 (giờ) %mức độ Glucose huyết lúc so với lúc Sự khác biệt mức độ GH cao lô thử chứng *** *** p< 0,001 < -► Ghi chú: Kết bảng giá trị trung bình chuột ± S e *** p