BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC PHÂN LẬP VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM TỪ ĐẤT VÙNG RỄ VÀ NỘI SINH RỄ CÂY DỪA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN NGUYỄN THỊ LIÊN NGUYỄN VĂN NGỌ MSSV: 3102757 LỚP: CNSH K36 Cần Thơ, Tháng 12/2013 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN (ký tên) SINH VIÊN THỰC HIỆN (ký tên) NGUYỄN THỊ LIÊN NGUYỄN VĂN NGỌ DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) LỜI CẢM TẠ Đề tài được hoàn thành với sự giúp đỡ quý báo của thầy cô, gia đình và các bạn sinh viên một thời gian dài. Tôi xin cảm tạ và biết ơn sâu sắc Cô Nguyễn Thị Liên đã tận tình hướng dẫn, truyền thụ những tri thức khoa học, tạo điều kiện tốt nhất giúp hoàn thành luận văn tốt nghiệp. Xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Nghiên Cứu Và Phát Triển Công Nghệ Sinh Học, Cô Nguyễn Thị Pha, Cô Trần Thị Xuân Mai phòng Công nghệ gen thực vật, anh Trần Văn Bé Năm phòng thí nghiệm Sinh học phân tử, các anh chị, các bạn, các em sinh viên đã chia sẻ kinh nghiệm, giúp đỡ nhiệt tình thời gian thực hiện đề tài. Xin cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Cần Thơ và các thầy cô đã tận tình giảng dạy, tạo điều kiện tốt cho được học tập và nghiên cứu tại trường suốt 3.5 năm vừa qua. Xin cảm ơn Cô Bùi Thị Minh Diệu và các bạn lớp Công Nghệ Sinh Học khóa 36 đã động viên, giúp đỡ quá trình học tập tại trường. Nhận ở lòng biết ơn sâu sắc và lời chúc sức khỏe, thành công cuộc sống. Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn chân thành, lòng tri ân sâu sắc đến cha mẹ đã sinh thành, nuôi dạy nên người và anh trai đã động viên giúp đỡ thời gian qua. Nguyễn Văn Ngọ Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 - 2013 Trường Đại Học Cần Thơ TÓM TẮT Trong phạm vi đề tài nghiên cứu đã phân lập được 70 dòng vi khuẩn cố định đạm từ rễ đất vùng rễ dừa môi trường thạch LGIP không đạm từ huyện Mỏ Cày Nam, huyện Châu Thành, Thị xã Bến Tre của tỉnh Bến Tre. Với 70 dòng phân lập đã được thử khả cố định đạm sau đó môi trường Burk không đạm lỏng, kết quả cho thấy tất cả 70 dòng phân lập được đều có khả cố định đạm với dòng MC.A.4.1 cho lượng đạm cao nhất 2,218mg/l dòng TP.B.2.1 cho lượng đạm thấp nhất 0,4mg/l. Sử dụng kỹ thuật PCR với cặp mồi nifH (nifH – R nifH – F) để khảo sát sự diện gen nifH của 30 dòng cho kết quả cố định đạm cao. Kết quả 18 dòng cho band gel agarose phù hợp với kích thước của gen nifH. Từ khóa: PCR, phân lập, rễ dừa, vi khuẩn cố định đạm, vi khuẩn nội sinh rễ dừa. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 - 2013 Trường Đại Học Cần Thơ MỤC LỤC  Trang PHẦN KÝ DUYỆT . LỜI CẢM TẠ TÓM TẮT i MỤC LỤC . ii DANH SÁCH BẢNG v DANH SÁCH HÌNH . vi TỪ VIẾT TẮT vii PHẦN I: GIỚI THIỆU . 1.1. Đặt vấn đề . 1.2. Mục tiêu của đề tài 1.3. Mục đích của đề tài . PHẦN II: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1. Giới thiệu Tỉnh Bến Tre ngành dừa Bến Tre 2.2. Sơ lược dừa . 2.2.1. Lịch sử dừa 2.2.2. Đặc điểm sinh học . 2.2.3. Các giá trị của dừa 2.3. Lược khảo vai trò của đạm và vi sinh vật cố định đạm 2.3.1. Đạm gì? 2.3.2. Vai trò của đạm 2.3.3. Chu trình nitơ tự nhiên . 10 2.3.4. Vi sinh vật cố định đạm . 10 2.3.5. Phân loại vi khuẩn cố định đạm 13 2.3.6. Một số nghiên cứu về vi sinh vật cố định đạm 16 2.4. Phân lập dòng vi sinh vật khiết . 19 2.4.1. Các thao tác vô trùng . 19 2.4.2. Một số dụng cụ dùng nghiên cứu . 19 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học ii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 - 2013 Trường Đại Học Cần Thơ 2.4.3. Phương pháp phân lập . 20 2.5. Khảo sát hình thái khuẩn lạc . 21 2.6. Nhuộm Gram . 22 2.6.1. Nguyên tắc nhuộm Gram . 22 2.6.2. Các yếu tố ảnh hưởng kết quả nhuộm Gram . 23 2.7. Khả cố định đạm và đo lượng đạm hình thành 23 2.8. Hệ thống gen nif . 24 2.9. Kỹ thuật PCR . 25 2.9.1. Nguyên tắc của kỹ thuật PCR 25 2.9.2. Các chu kỳ của phản ứng PCR 26 2.10. Kỹ thuật điện di . 28 PHẦN III: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP 30 3.1. Địa điểm và thời gian thực . 30 3.2. Phương tiện nghiên cứu 30 3.3. Phương pháp nghiên cứu 31 3.3.1. Thu mẫu và trữ mẫu . 31 3.3.3. Khảo sát hình thái khuẩn lạc và vi khuẩn 34 3.3.4. Nhuộm Gram . 34 3.3.5. Khả cố định đạm và đo lượng đạm hình thành . 35 3.3.6. Khảo sát sự hiện diện của gen nifH . 37 PHẦN IV: KẾT QUẢ THẢO LUẬN . 40 4.1. Kết quả phân lập và đặc điểm của dòng vi khuẩn . 40 4.2. Khả cố định đạm 45 4.3. Kết quả điện di sản phẩm PCR 50 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 53 5.1. Kết luận 53 5.2. Kiến nghị 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO . 54 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Thành phần môi trường 1. Bảng 14: Thành phần môi trường LGIP Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 - 2013 Trường Đại Học Cần Thơ 2. Bảng 15: Thành phần môi trường Burk 3. Bảng 16: Thành phần môi trường LB Phụ lục 2: Các kết quả 1. Bảng 17: Nguồn gốc của từng dòng vi khuẩn 2. Bảng 18: Kết quả xây dựng đường chuẩn ngày 3. Hình 18: Kết quả xây dựng đường chuẩn ngày 4. Bảng 19: Kết quả đo OD và giá trị đạm ngày 5. Bảng 20: Kết quả xây dựng đường chuẩn ngày 6. Hình 19: Kết quả xây dựng đường chuẩn ngày 7. Bảng 21: Kết quả đo OD và giá trị đạm ngày 8. Bảng 22: Kết quả xây dựng đường chuẩn ngày 9. Hình 20: Kết quả xây dựng đường chuẩn ngày 10. Bảng 23: Kết quả đo OD và giá trị đạm ngày Phụ lục 3: Các hình ảnh Phụ lục 4: Kết quả thống kê xử lý Minitab 1. So sánh khả cố định đạm vào ngày 2. So sánh khả cố định đạm vào ngày 3. So sánh khả cố định đạm vào ngày 4. So sánh khả cố định đạm giữa các dòng 5. So sánh khả cố định đạm của các dòng ở ba huyện 6. So sánh khả cố định đạm những dòng phân lập từ rễ và đất vùng rễ Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iv Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 - 2013 Trường Đại Học Cần Thơ DANH SÁCH BẢNG  Trang Bảng 1: Các đặc điểm sinh học dừa . Bảng 2: Giá trị khác của dừa . Bảng 3: Vị trí của các vi khuẩn cộng sinh một số trồng 15 Bảng 4: Các giai đoạn của phản ứng PCR . 26 Bảng 5: Các điều kiện phản ứng PCR 26 Bảng 6: Thành phần hóa chất ống nghiệm xây dựng đường chuẩn 36 Bảng 7: Thành phần hóa chất ống nghiệm đo OD mẫu 36 Bảng 8: Thành phần hóa chất thực hiện phản ứng PCR 38 Bảng 9: Các bước phản ứng PCR . 38 Bảng 10: Đặc điểm các dòng vi khuẩn . 41 Bảng 11: Các đặc điểm được thể hiện biểu đồ 43 Bảng 12: Kết quả đạm của các dòng vi khuẩn sau ngày đo 45 Bảng 13: Mẫu chọn chạy PCR . 51 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 - 2013 Trường Đại Học Cần Thơ DANH SÁCH HÌNH  Trang Hình 1: Bản đồ hành chính Tỉnh Bến Tre Hình 2: Cơ cấu diện tích dừa Bến Tre năm 2009 phân theo huyện (%) Hình 3: Cây dừa . Hình 4: Một số bộ phận của dừa Hình 5: Các giá trị kinh tế của dừa . Hình 6: Tóm tắt vai trò của nitơ . 10 Hình 7: Que cấy đầu tròn . 20 Hình 8: Cách phân lập đĩa petri 21 Hình 9: Thể hiện gen nif của Klebsiella pneumoniae 25 Hình 10: Mô phỏng sự chép phản ứng PCR . 27 Hình 11: Thể hiện cách thu mẫu 31 Hình 12: Biểu đồ thể hiện các đặc điểm khuẩn lạc, đặc điểm tế bào, sự chuyển động, Gram (%) 43 Hình 13: Hình ảnh khuẩn lạc một số dòng vi khuẩn 44 Hình 14: Tế bào vi khuẩn quan sát dưới kính hiển vi (độ phóng đại 400 lần, độ zoom 4X) 44 Hình 15: Kết quả nhuộm Gram của một số dòng vi khuẩn quan sát dưới kính hiển vi (độ phóng đại 400 lần, độ zoom 4X) 45 Hình 16: Khả cố định đạm của các dòng vi khuẩn qua các ngày ghi nhận giá trị đạm (%) 48 Hình 17: Kết quả điện di gel agarose kiểm tra sản phẩm PCR . 50 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học vi Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 - 2013 Trường Đại Học Cần Thơ TỪ VIẾT TẮT VK: Vi khuẩn. CĐĐ: Cố định đạm. STT: Số thứ tự. TP: Thành Phố. MC: Mỏ Cày. CT: Châu Thành. LB: Luria Broth. bp: Base pair, cặp bazo. Kb: Kilo base. Mb: Mega base. DNA: Deoxyribo nucleic acid. RNA: Ribonucleic acid. mg/l: Miligam/lít. nm: Nano mét. ppm: Parts per million. OD: Optical Density. PCR: Polymerase Chain Reaction. pH: Hydrogen power. EDTA: Ethylenediamine tetraacetic acid. TBE: Tris Boric acid EDTA. TE: Tris EDTA. dNTP: Doexyribonucleotide triphosphate. IAA: Indole acetic acid. GDP: Gross Domestic Product. USD: United States Dollar. NAD: Nicotine Adenine Dinucleotide. NADPH: Nicotine Adenine Dinucleotide Phosphate, Reduced. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học vii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học MC.B.1.7 0,011 0,015 0,017 0,876 1,146 1,281 MC.B.1.8 0,015 0,018 0,008 1,146 1,348 0,674 MC.B.2.1 0,009 0,018 0,015 0,741 1,348 1,146 10 MC.B.2.2 0,021 0,019 0,010 1,550 1,415 0,809 11 MC.B.2.3 0,030 0,039 0,029 2,157 2,763 2,089 12 MC.B.3.1 0,017 0,011 0,018 1,281 0,876 1,348 13 MC.B.3.2 0,037 0,036 0,034 2,629 2,561 2,426 14 MC.B.3.3 0,037 0,038 0,026 2,629 2,696 1,887 15 MC.B.3.4 0,033 0,034 0,041 2,359 2,426 2,898 16 MC.B.4.1 0,034 0,034 0,036 2,426 2,426 2,561 17 MC.B.4.2 0,040 0,055 0,065 2,831 3,842 4,516 18 MC.B.4.3 0,038 0,031 0,048 2,696 2,224 3,370 19 MC.B.4.4 0,037 0,029 0,033 2,629 2,089 2,359 20 MC.B.4.5 0,035 0,034 0,033 2,494 2,426 2,359 21 MC.A.1.1 0,008 0,018 0,012 0,674 1,348 0,944 22 MC.A.1.2 0,011 0,016 0,011 0,876 1,213 0,876 23 MC.A.1.3 0,013 0,014 0,010 1,011 1,078 0,809 24 MC.A.1.4 0,013 0,007 0,012 1,011 0,607 0,944 25 MC.A.2.1 0,023 0,008 0,008 1,685 0,674 0,674 26 MC.A.2.2 0,014 0,008 0,009 1,078 0,674 0,741 27 MC.A.2.3 0,012 0,009 0,017 0,944 0,741 1,281 28 MC.A.2.4 0,012 0,013 0,011 0,944 1,011 0,876 29 MC.A.3.1 0,012 0,008 0,008 0,944 0,674 0,674 30 MC.A.3.2 0,045 0,041 0,049 3,168 2,898 3,437 31 MC.A.3.3 0,013 0,015 0,004 1,011 1,146 0,404 32 MC.A.4.1 0,036 0,046 0,047 2,561 3,235 3,303 33 MC.A.4.2 0,009 0,006 0,007 0,741 0,539 0,607 34 MC.A.4.3 0,012 0,010 0,016 0,944 0,809 1,213 35 MC.A.4.4 0,016 0,008 0,003 1,213 0,674 0,337 36 MC.A.4.5 0,010 0,005 0,007 0,809 0,472 0,607 37 TP.B.1.1 0,021 0,020 0,012 1,550 1,483 0,944 38 TP.B.1.2 0,005 0,005 0,001 0,472 0,472 0,202 39 TP.B.2.1 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 40 TP.B.2.2 0,030 0,026 0,025 2,157 1,887 1,820 41 TP.B.2.3 0,001 0,001 0,002 0,202 0,202 0,270 42 TP.B.2.4 0,001 0,001 0,003 0,202 0,202 0,337 43 TP.A.1.1 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 44 TP.A.1.2 0,025 0,020 0,021 1,820 1,483 1,550 45 TP.A.1.3 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 46 TP.A.1.4 0,008 0,020 0,015 0,674 1,483 1,146 47 TP.A.2.1 0,005 0,001 0,001 0,472 0,202 0,202 48 TP.A.2.2 0,021 0,020 0,021 1,550 1,483 1,550 49 CT.A.1.1 0,003 0,001 0,002 0,337 0,202 0,270 50 CT.A.1.2 0,003 0,004 0,001 0,337 0,404 0,202 51 CT.A.1.3 0,001 0,019 0,007 0,202 1,415 0,607 52 CT.A.2.1 0,003 0,005 0,023 0,337 0,472 1,685 53 CT.A.2.2 0,001 0,004 0,001 0,202 0,404 0,202 54 CT.A.2.3 0,015 0,025 0,033 1,146 1,820 2,359 55 CT.A.2.4 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 56 CT.A.2.5 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 57 CT.A.2.6 0,001 0,001 0,002 0,202 0,202 0,270 58 CT.A.2.7 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 59 CT.A.2.8 0,025 0,026 0,027 1,820 1,887 1,955 60 CT.A.3.1 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 61 CT.A.3.2 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 62 CT.B.1.1 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 63 CT.B.1.2 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 64 CT.B.1.3 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 65 CT.B.2.1 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 66 CT.B.2.2 0,027 0,053 0,024 1,955 3,707 1,752 67 CT.B.2.3 0,001 0,012 0,001 0,202 0,944 0,202 68 CT.B.2.4 0,013 0,007 0,032 1,011 0,607 2,292 69 CT.B.3.1 0,001 0,001 0,001 0,202 0,202 0,202 70 CT.B.3.2 0,002 0,001 0,001 0,270 0,202 0,202 71 Đối chứng -0,002 -0,002 -0,002 7,265 7,265 7,265 Phụ lục 3: Các hình ảnh Hình 21: Khuẩn lạc dòng CT.A.2.6 Hình 23: Kết quả nhuộm Gram dòng MC.A.1.2 Hình 25: Khuẩn lạc dòng CT.A.2.6 Hình 22: Khuẩn lạc dòng MC.B.3.3 Hình 24: Kết quả nhuộm Gram dòng TP.A.1.2 Hình 26: Khuẩn lạc dòng MC.B.2.2 Phụ lục 4: Kết quả thống kê xử lý Minitab 1. So sánh khả cố định đạm vào ngày 1: One-way ANOVA: MC.B.1.1, MC.B.1.2, MC.B.1.3, MC.B.1.4, MC.B.1.5, MC.B.1.6, . Source Factor Error Total DF 69 140 209 SS 67.346 38.909 106.254 MS 0.976 0.278 F 3.51 P 0.000 S = 0.5272 R-Sq = 63.38% R-Sq(adj) = 45.33% Level MC.B.1.1 MC.B.1.2 MC.B.1.3 MC.B.1.4 MC.B.1.5 MC.B.1.6 MC.B.1.7 MC.B.1.8 MC.B.2.1 MC.B.2.2 MC.B.2.3 MC.B.3.1 MC.B.3.2 MC.B.3.3 MC.B.3.4 MC.B.4.1 MC.B.4.2 MC.B.4.3 MC.B.4.4 MC.B.4.5 MC.A.1.1 MC.A.1.2 MC.A.1.3 MC.A.1.4 MC.A.2.1 MC.A.2.2 MC.A.2.3 MC.A.2.4 MC.A.3.1 MC.A.3.2 MC.A.3.3 MC.A.4.1 MC.A.4.2 MC.A.4.3 MC.A.4.4 MC.A.4.5 TP.B.1.1 TP.B.1.2 TP.B.2.1 TP.B.2.2 TP.B.2.3 TP.B.2.4 TP.A.1.1 TP.A.1.2 TP.A.1.3 TP.A.1.4 TP.A.2.1 TP.A.2.2 CT.A.1.1 Mean 1.0257 1.1905 1.2317 1.3416 1.3828 0.9708 0.9571 0.8609 1.0532 1.2867 1.4927 1.0807 1.4103 1.6575 1.5201 1.2592 1.4240 1.5476 1.6575 1.6300 1.2729 1.2180 2.5227 1.5888 1.6025 2.1107 1.6437 3.1407 1.4652 1.5476 1.4652 1.9459 3.8273 1.6849 1.7261 1.4927 0.9571 0.7511 0.7923 1.5201 1.2043 0.6549 1.2180 1.2729 1.0944 1.1081 1.6163 3.2643 1.3279 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev +---------+---------+---------+--------(----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*-----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 StDev 0.1447 0.2483 0.2681 0.0714 0.1427 0.2060 0.1324 0.1259 0.2141 0.1715 0.1715 0.1037 0.3504 0.2517 0.0629 0.2884 0.3520 0.3930 0.5624 0.2884 0.1665 0.2506 1.1286 0.2884 0.2923 0.8140 0.1324 1.9264 0.3372 0.2294 0.1648 0.1037 2.9137 0.2681 0.7385 0.2483 0.1324 0.1259 0.1947 0.4228 0.9048 0.0238 0.4857 0.1665 0.2141 0.1447 0.1858 0.0629 0.1037 CT.A.1.2 CT.A.1.3 CT.A.2.1 CT.A.2.2 CT.A.2.3 CT.A.2.4 CT.A.2.5 CT.A.2.6 CT.A.2.7 CT.A.2.8 CT.A.3.1 CT.A.3.2 CT.B.1.1 CT.B.1.2 CT.B.1.3 CT.B.2.1 CT.B.2.2 CT.B.2.3 CT.B.2.4 CT.B.3.1 CT.B.3.2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1.2317 1.3828 1.4240 1.4927 1.8635 1.6437 1.6025 1.6712 1.8223 2.5501 1.8772 1.4652 0.8884 0.8609 0.7511 1.0669 1.6849 0.7373 1.8909 0.7236 0.9845 0.3356 0.0824 0.0824 0.1903 0.0951 0.1947 0.1715 0.2702 0.1324 0.2114 0.2884 0.1090 0.4282 0.2804 0.1903 0.4328 0.3894 0.1324 0.3092 0.0824 0.4002 (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) (----*----) +---------+---------+---------+--------0.0 1.2 2.4 3.6 Pooled StDev = 0.5272 Grouping Information Using Fisher Method MC.A.4.2 TP.A.2.2 MC.A.2.4 CT.A.2.8 MC.A.1.3 MC.A.2.2 MC.A.4.1 CT.B.2.4 CT.A.3.1 CT.A.2.3 CT.A.2.7 MC.A.4.4 CT.B.2.2 MC.A.4.3 CT.A.2.6 MC.B.4.4 MC.B.3.3 MC.A.2.3 CT.A.2.4 MC.B.4.5 TP.A.2.1 CT.A.2.5 MC.A.2.1 MC.A.1.4 MC.A.3.2 MC.B.4.3 TP.B.2.2 MC.B.3.4 CT.A.2.2 MC.A.4.5 MC.B.2.3 CT.A.3.2 MC.A.3.3 MC.A.3.1 CT.A.2.1 MC.B.4.2 MC.B.3.2 CT.A.1.3 MC.B.1.5 MC.B.1.4 N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Mean 3.8273 3.2643 3.1407 2.5501 2.5227 2.1107 1.9459 1.8909 1.8772 1.8635 1.8223 1.7261 1.6849 1.6849 1.6712 1.6575 1.6575 1.6437 1.6437 1.6300 1.6163 1.6025 1.6025 1.5888 1.5476 1.5476 1.5201 1.5201 1.4927 1.4927 1.4927 1.4652 1.4652 1.4652 1.4240 1.4240 1.4103 1.3828 1.3828 1.3416 Grouping A A B A B B C B C D C D E C D E C D E C D E C D E C D E C D E D E D E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L M M M M M M M M M M M M M M M M M N N N N N N N N N N N N N N N N O O O O O O O O O O O O CT.A.1.1 MC.B.2.2 MC.A.1.1 TP.A.1.2 MC.B.4.1 CT.A.1.2 MC.B.1.3 TP.A.1.1 MC.A.1.2 TP.B.2.3 MC.B.1.2 TP.A.1.4 TP.A.1.3 MC.B.3.1 CT.B.2.1 MC.B.2.1 MC.B.1.1 CT.B.3.2 MC.B.1.6 TP.B.1.1 MC.B.1.7 CT.B.1.1 CT.B.1.2 MC.B.1.8 TP.B.2.1 CT.B.1.3 TP.B.1.2 CT.B.2.3 CT.B.3.1 TP.B.2.4 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1.3279 1.2867 1.2729 1.2729 1.2592 1.2317 1.2317 1.2180 1.2180 1.2043 1.1905 1.1081 1.0944 1.0807 1.0669 1.0532 1.0257 0.9845 0.9708 0.9571 0.9571 0.8884 0.8609 0.8609 0.7923 0.7511 0.7511 0.7373 0.7236 0.6549 E E E E F F F F F F F F F F F F G G G G G G G G G G G G G G G G H H H H H H H H H H H H H H H H H I I I I I I I I I I I I I I I I I I J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O Means that not share a letter are significantly different. Fisher 95% Individual Confidence Intervals All Pairwise Comparisons Simultaneous confidence level = 0.01% 2. So sánh khả cố định đạm vào ngày 2: One-way ANOVA: MC.B.1.1, MC.B.1.2, MC.B.1.3, MC.B.1.4, MC.B.1.5, MC.B.1.6, . Source Factor Error Total DF 69 140 209 S = 0.7340 Level MC.B.1.1 MC.B.1.2 MC.B.1.3 MC.B.1.4 MC.B.1.5 MC.B.1.6 MC.B.1.7 MC.B.1.8 MC.B.2.1 MC.B.2.2 MC.B.2.3 MC.B.3.1 MC.B.3.2 MC.B.3.3 MC.B.3.4 N 3 3 3 3 3 3 3 SS 78.023 75.430 153.454 MS 1.131 0.539 F 2.10 P 0.000 R-Sq = 50.84% R-Sq(adj) = 26.62% Mean 0.4865 0.5609 0.5460 0.6947 1.0812 0.5460 0.7690 0.5311 0.5757 0.4419 1.3488 0.6352 1.0812 1.0069 1.3339 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -----+---------+---------+---------+---(----*-----) (-----*----) (-----*----) (-----*----) (----*-----) (-----*----) (----*-----) (-----*----) (-----*----) (-----*-----) (-----*-----) (----*-----) (----*-----) (-----*----) (-----*----) StDev 0.0928 0.2011 0.1180 0.2867 0.3888 0.0000 0.1608 0.2867 0.0681 0.1566 0.1784 0.0446 0.3367 0.2108 0.6072 MC.B.4.1 MC.B.4.2 MC.B.4.3 MC.B.4.4 MC.B.4.5 MC.A.1.1 MC.A.1.2 MC.A.1.3 MC.A.1.4 MC.A.2.1 MC.A.2.2 MC.A.2.3 MC.A.2.4 MC.A.3.1 MC.A.3.2 MC.A.3.3 MC.A.4.1 MC.A.4.2 MC.A.4.3 MC.A.4.4 MC.A.4.5 TP.B.1.1 TP.B.1.2 TP.B.2.1 TP.B.2.2 TP.B.2.3 TP.B.2.4 TP.A.1.1 TP.A.1.2 TP.A.1.3 TP.A.1.4 TP.A.2.1 TP.A.2.2 CT.A.1.1 CT.A.1.2 CT.A.1.3 CT.A.2.1 CT.A.2.2 CT.A.2.3 CT.A.2.4 CT.A.2.5 CT.A.2.6 CT.A.2.7 CT.A.2.8 CT.A.3.1 CT.A.3.2 CT.B.1.1 CT.B.1.2 CT.B.1.3 CT.B.2.1 CT.B.2.2 CT.B.2.3 CT.B.2.4 CT.B.3.1 CT.B.3.2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 0.8433 1.4826 1.5569 1.2893 1.4083 0.9623 0.4122 0.7541 0.6352 0.4271 0.5311 0.4419 0.6798 0.4122 1.8989 0.3527 1.6759 1.2001 0.3973 1.6759 4.0248 0.3081 0.1446 0.2041 1.1555 0.2041 0.5757 0.2487 0.7541 0.1446 0.2784 0.1743 0.6947 0.2635 0.1743 0.2635 0.1892 0.2338 0.7690 0.1446 0.2041 0.2189 0.1892 1.2893 0.3825 0.2338 1.3637 0.1446 0.6947 0.1446 1.1853 0.1446 1.2150 0.8285 0.2338 0.0681 0.3964 0.1434 0.1122 0.5013 0.2200 0.0772 0.5321 0.2317 0.1434 0.2456 0.2200 0.2483 0.2676 0.1566 0.0928 0.2613 0.4913 0.0681 2.1502 5.4339 0.1566 0.0000 0.1030 0.1689 0.0681 0.7467 0.1434 0.0257 0.0000 0.0446 0.0515 0.1434 0.1689 0.0515 0.2060 0.0446 0.0446 0.1180 0.0000 0.0515 0.0515 0.0772 0.2688 0.4120 0.1545 0.0257 0.0000 0.1287 0.0000 0.1363 0.0000 0.0446 0.1434 0.1545 (-----*----) (-----*----) (----*-----) (-----*----) (----*-----) (----*-----) (-----*----) (-----*-----) (----*-----) (-----*----) (-----*----) (-----*-----) (-----*----) (-----*----) (-----*----) (----*-----) (----*-----) (-----*-----) (-----*----) (----*-----) (-----*----) (-----*-----) (-----*-----) (----*-----) (-----*----) (----*-----) (-----*----) (-----*----) (-----*-----) (-----*-----) (-----*----) (----*-----) (-----*----) (-----*----) (----*-----) (-----*----) (----*-----) (-----*----) (----*-----) (-----*-----) (----*-----) (----*-----) (----*-----) (-----*----) (-----*----) (-----*----) (----*-----) (-----*-----) (-----*----) (-----*-----) (-----*----) (-----*-----) (----*-----) (-----*----) (-----*----) -----+---------+---------+---------+---0.0 1.5 3.0 4.5 Pooled StDev = 0.7340 Grouping Information Using Fisher Method MC.A.4.5 MC.A.3.2 MC.A.4.4 MC.A.4.1 MC.B.4.3 MC.B.4.2 N 3 3 3 Mean 4.0248 1.8989 1.6759 1.6759 1.5569 1.4826 Grouping A B B C B C B C D B C D E MC.B.4.5 CT.B.1.1 MC.B.2.3 MC.B.3.4 MC.B.4.4 CT.A.2.8 CT.B.2.4 MC.A.4.2 CT.B.2.2 TP.B.2.2 MC.B.1.5 MC.B.3.2 MC.B.3.3 MC.A.1.1 MC.B.4.1 CT.B.3.1 CT.A.2.3 MC.B.1.7 TP.A.1.2 MC.A.1.3 TP.A.2.2 CT.B.1.3 MC.B.1.4 MC.A.2.4 MC.A.1.4 MC.B.3.1 TP.B.2.4 MC.B.2.1 MC.B.1.2 MC.B.1.6 MC.B.1.3 MC.B.1.8 MC.A.2.2 MC.B.1.1 MC.A.2.3 MC.B.2.2 MC.A.2.1 MC.A.3.1 MC.A.1.2 MC.A.4.3 CT.A.3.1 MC.A.3.3 TP.B.1.1 TP.A.1.4 CT.A.1.3 CT.A.1.1 TP.A.1.1 CT.B.3.2 CT.A.3.2 CT.A.2.2 CT.A.2.6 CT.A.2.5 TP.B.2.1 TP.B.2.3 CT.A.2.1 CT.A.2.7 CT.A.1.2 TP.A.2.1 CT.B.2.3 CT.B.2.1 CT.B.1.2 CT.A.2.4 TP.A.1.3 TP.B.1.2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1.4083 1.3637 1.3488 1.3339 1.2893 1.2893 1.2150 1.2001 1.1853 1.1555 1.0812 1.0812 1.0069 0.9623 0.8433 0.8285 0.7690 0.7690 0.7541 0.7541 0.6947 0.6947 0.6947 0.6798 0.6352 0.6352 0.5757 0.5757 0.5609 0.5460 0.5460 0.5311 0.5311 0.4865 0.4419 0.4419 0.4271 0.4122 0.4122 0.3973 0.3825 0.3527 0.3081 0.2784 0.2635 0.2635 0.2487 0.2338 0.2338 0.2338 0.2189 0.2041 0.2041 0.2041 0.1892 0.1892 0.1743 0.1743 0.1446 0.1446 0.1446 0.1446 0.1446 0.1446 B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I Means that not share a letter are significantly different. Fisher 95% Individual Confidence Intervals All Pairwise Comparisons Simultaneous confidence level = 0.01% 3. So sánh khả cố định đạm vào ngày 3: One-way ANOVA: MC.B.1.1, MC.B.1.2, MC.B.1.3, MC.B.1.4, MC.B.1.5, MC.B.1.6, . Source Factor Error Total DF 69 140 209 S = 0.3347 Level MC.B.1.1 MC.B.1.2 MC.B.1.3 MC.B.1.4 MC.B.1.5 MC.B.1.6 MC.B.1.7 MC.B.1.8 MC.B.2.1 MC.B.2.2 MC.B.2.3 MC.B.3.1 MC.B.3.2 MC.B.3.3 MC.B.3.4 MC.B.4.1 MC.B.4.2 MC.B.4.3 MC.B.4.4 MC.B.4.5 MC.A.1.1 MC.A.1.2 MC.A.1.3 MC.A.1.4 MC.A.2.1 MC.A.2.2 MC.A.2.3 MC.A.2.4 MC.A.3.1 MC.A.3.2 MC.A.3.3 MC.A.4.1 MC.A.4.2 MC.A.4.3 MC.A.4.4 MC.A.4.5 TP.B.1.1 TP.B.1.2 TP.B.2.1 TP.B.2.2 TP.B.2.3 TP.B.2.4 TP.A.1.1 TP.A.1.2 TP.A.1.3 TP.A.1.4 TP.A.2.1 TP.A.2.2 CT.A.1.1 CT.A.1.2 CT.A.1.3 N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 SS 168.948 15.685 184.633 MS 2.449 0.112 F 21.86 P 0.000 R-Sq = 91.50% R-Sq(adj) = 87.32% Mean 0.6515 0.8762 1.1683 1.0335 2.8757 0.9661 1.1009 1.0559 1.0784 1.2581 2.3365 1.1683 2.5387 2.4039 2.5612 2.4713 3.7295 2.7634 2.3590 2.4264 0.9885 0.9885 0.9661 0.8537 1.0110 0.8313 0.9885 0.9436 0.7639 3.1678 0.8537 3.0330 0.6291 0.9885 0.7414 0.6291 1.3255 0.3819 0.2022 1.9546 0.2247 0.2471 0.2022 1.6176 0.2022 1.1009 0.2921 1.5277 0.2696 0.3145 0.7414 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+---------+---------+---------+-------(--*---) (--*--) (--*--) (---*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*---) (--*---) (--*--) (--*--) (--*--) (--*---) (---*--) (--*--) (--*--) (---*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*---) (--*--) (--*--) (--*--) (--*---) (--*---) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*---) (--*--) (--*--) (--*---) (--*--) (--*--) (---*--) (--*--) StDev 0.1030 0.1783 0.4488 0.4734 0.2552 0.1696 0.2059 0.3459 0.3089 0.3949 0.3712 0.2552 0.1030 0.4488 0.2938 0.0778 0.8481 0.5759 0.2696 0.0674 0.3392 0.1946 0.1403 0.2167 0.5837 0.2167 0.2724 0.0674 0.1557 0.2696 0.3949 0.4100 0.1030 0.2059 0.4420 0.1696 0.3325 0.1557 0.0000 0.1783 0.0389 0.0778 0.0000 0.1783 0.0000 0.4063 0.1557 0.0389 0.0674 0.1030 0.6177 CT.A.2.1 CT.A.2.2 CT.A.2.3 CT.A.2.4 CT.A.2.5 CT.A.2.6 CT.A.2.7 CT.A.2.8 CT.A.3.1 CT.A.3.2 CT.B.1.1 CT.B.1.2 CT.B.1.3 CT.B.2.1 CT.B.2.2 CT.B.2.3 CT.B.2.4 CT.B.3.1 CT.B.3.2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 0.8313 0.2696 1.7749 0.2022 0.2022 0.2247 0.2022 1.8872 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 2.4713 0.4493 1.3031 0.2022 0.2247 0.7424 0.1167 0.6078 0.0000 0.0000 0.0389 0.0000 0.0674 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 1.0749 0.4280 0.8796 0.0000 0.0389 (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) (---*--) (--*--) (--*--) (--*--) (--*--) -+---------+---------+---------+-------0.0 1.2 2.4 3.6 Pooled StDev = 0.3347 Grouping Information Using Fisher Method MC.B.4.2 MC.A.3.2 MC.A.4.1 MC.B.1.5 MC.B.4.3 MC.B.3.4 MC.B.3.2 MC.B.4.1 CT.B.2.2 MC.B.4.5 MC.B.3.3 MC.B.4.4 MC.B.2.3 TP.B.2.2 CT.A.2.8 CT.A.2.3 TP.A.1.2 TP.A.2.2 TP.B.1.1 CT.B.2.4 MC.B.2.2 MC.B.3.1 MC.B.1.3 MC.B.1.7 TP.A.1.4 MC.B.2.1 MC.B.1.8 MC.B.1.4 MC.A.2.1 MC.A.2.3 MC.A.1.2 MC.A.4.3 MC.A.1.1 MC.A.1.3 MC.B.1.6 MC.A.2.4 MC.B.1.2 MC.A.1.4 MC.A.3.3 MC.A.2.2 CT.A.2.1 MC.A.3.1 N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Mean 3.7295 3.1678 3.0330 2.8757 2.7634 2.5612 2.5387 2.4713 2.4713 2.4264 2.4039 2.3590 2.3365 1.9546 1.8872 1.7749 1.6176 1.5277 1.3255 1.3031 1.2581 1.1683 1.1683 1.1009 1.1009 1.0784 1.0559 1.0335 1.0110 0.9885 0.9885 0.9885 0.9885 0.9661 0.9661 0.9436 0.8762 0.8537 0.8537 0.8313 0.8313 0.7639 Grouping A B B C B C D B C D C D C D D E D E D E D E D E D E E F F F F F G F G G H G H I G H I J H I J H I J H I J I J I J I J I J I J J J J J J J J K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N N O O O O O O O O O O O O O P P P P P P Q Q Q R Q R Q R S MC.A.4.4 CT.A.1.3 MC.B.1.1 MC.A.4.2 MC.A.4.5 CT.B.2.3 TP.B.1.2 CT.A.1.2 TP.A.2.1 CT.A.1.1 CT.A.2.2 TP.B.2.4 CT.B.3.2 CT.A.2.6 TP.B.2.3 CT.B.3.1 CT.B.2.1 CT.B.1.3 CT.B.1.2 CT.B.1.1 CT.A.3.2 CT.A.3.1 CT.A.2.7 CT.A.2.5 CT.A.2.4 TP.A.1.3 TP.A.1.1 TP.B.2.1 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 0.7414 0.7414 0.6515 0.6291 0.6291 0.4493 0.3819 0.3145 0.2921 0.2696 0.2696 0.2471 0.2247 0.2247 0.2247 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 0.2022 M N O M N O N O N O N O O P P P P P P P Q Q Q Q Q Q Q Q R R R R R R R R R S S S S S S S S S S S S S S S T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T T Means that not share a letter are significantly different. Fisher 95% Individual Confidence Intervals All Pairwise Comparisons Simultaneous confidence level = 0.01% 4. So sánh khả cố định đạm giữa dòng: One-way ANOVA: MC.B.1.1, MC.B.1.2, MC.B.1.3, MC.B.1.4, MC.B.1.5, MC.B.1.6, . Source Factor Error Total DF 69 140 209 S = 0.6930 Level MC.B.1.1 MC.B.1.2 MC.B.1.3 MC.B.1.4 MC.B.1.5 MC.B.1.6 MC.B.1.7 MC.B.1.8 MC.B.2.1 MC.B.2.2 MC.B.2.3 MC.B.3.1 MC.B.3.2 MC.B.3.3 MC.B.3.4 MC.B.4.1 N 3 3 3 3 3 3 3 3 SS 57.257 67.237 124.493 MS 0.830 0.480 F 1.73 P 0.003 R-Sq = 45.99% R-Sq(adj) = 19.37% Mean 0.7213 0.8759 0.9820 1.0232 1.7799 0.8276 0.9423 0.8160 0.9024 0.9956 1.7260 0.9614 1.6767 1.6894 1.8051 1.5246 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev ----+---------+---------+---------+----(-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) StDev 0.2763 0.3148 0.3789 0.3236 0.9609 0.2439 0.1664 0.2653 0.2832 0.4797 0.5336 0.2859 0.7644 0.6991 0.6614 0.8458 MC.B.4.2 MC.B.4.3 MC.B.4.4 MC.B.4.5 MC.A.1.1 MC.A.1.2 MC.A.1.3 MC.A.1.4 MC.A.2.1 MC.A.2.2 MC.A.2.3 MC.A.2.4 MC.A.3.1 MC.A.3.2 MC.A.3.3 MC.A.4.1 MC.A.4.2 MC.A.4.3 MC.A.4.4 MC.A.4.5 TP.B.1.1 TP.B.1.2 TP.B.2.1 TP.B.2.2 TP.B.2.3 TP.B.2.4 TP.A.1.1 TP.A.1.2 TP.A.1.3 TP.A.1.4 TP.A.2.1 TP.A.2.2 CT.A.1.1 CT.A.1.2 CT.A.1.3 CT.A.2.1 CT.A.2.2 CT.A.2.3 CT.A.2.4 CT.A.2.5 CT.A.2.6 CT.A.2.7 CT.A.2.8 CT.A.3.1 CT.A.3.2 CT.B.1.1 CT.B.1.2 CT.B.1.3 CT.B.2.1 CT.B.2.2 CT.B.2.3 CT.B.2.4 CT.B.3.1 CT.B.3.2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 2.2120 1.9560 1.7686 1.8216 1.0746 0.8729 1.4143 1.0259 1.0135 1.1577 1.0247 1.5880 0.8804 2.2048 0.8906 2.2182 1.8855 1.0236 1.3811 2.0488 0.8636 0.4259 0.3995 1.5434 0.5443 0.4926 0.5563 1.2149 0.4804 0.8291 0.6942 1.8289 0.6203 0.5735 0.7959 0.8148 0.6654 1.4691 0.6635 0.6696 0.7049 0.7379 1.9089 0.8206 0.6337 0.8181 0.4026 0.5493 0.4712 1.7805 0.4438 1.4697 0.5848 0.4810 1.3145 0.6993 0.5434 0.5354 0.1723 0.4152 0.9657 0.4996 0.5877 0.8388 0.6017 1.3511 0.5361 0.8523 0.5571 0.7184 1.7057 0.6445 0.5546 1.7649 0.5151 0.3056 0.3401 0.4000 0.5716 0.2162 0.5735 0.4346 0.5325 0.4770 0.8007 1.3110 0.6127 0.5743 0.5616 0.6176 0.7167 0.6079 0.8494 0.8079 0.8368 0.9391 0.6307 0.9195 0.7202 0.5839 0.3980 0.3019 0.5167 0.6483 0.2964 0.3675 0.3354 0.4361 (-------*-------) (-------*------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (------*-------) (------*-------) (-------*-------) (-------*------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (------*-------) (-------*-------) (-------*-------) (-------*-------) ----+---------+---------+---------+----0.0 1.0 2.0 3.0 Pooled StDev = 0.6930 Grouping Information Using Fisher Method MC.A.4.1 MC.B.4.2 MC.A.3.2 MC.A.4.5 MC.B.4.3 CT.A.2.8 MC.A.4.2 N 3 3 3 Mean 2.2182 2.2120 2.2048 2.0488 1.9560 1.9089 1.8855 Grouping A A A A B A B C A B C D A B C D TP.A.2.2 MC.B.4.5 MC.B.3.4 CT.B.2.2 MC.B.1.5 MC.B.4.4 MC.B.2.3 MC.B.3.3 MC.B.3.2 MC.A.2.4 TP.B.2.2 MC.B.4.1 CT.B.2.4 CT.A.2.3 MC.A.1.3 MC.A.4.4 TP.A.1.2 MC.A.2.2 MC.A.1.1 MC.A.1.4 MC.A.2.3 MC.A.4.3 MC.B.1.4 MC.A.2.1 MC.B.2.2 MC.B.1.3 MC.B.3.1 MC.B.1.7 MC.B.2.1 MC.A.3.3 MC.A.3.1 MC.B.1.2 MC.A.1.2 TP.B.1.1 TP.A.1.4 MC.B.1.6 CT.A.3.1 CT.B.1.1 MC.B.1.8 CT.A.2.1 CT.A.1.3 CT.A.2.7 MC.B.1.1 CT.A.2.6 TP.A.2.1 CT.A.2.5 CT.A.2.2 CT.A.2.4 CT.A.3.2 CT.A.1.1 CT.B.3.1 CT.A.1.2 TP.A.1.1 CT.B.1.3 TP.B.2.3 TP.B.2.4 CT.B.3.2 TP.A.1.3 CT.B.2.1 CT.B.2.3 TP.B.1.2 CT.B.1.2 TP.B.2.1 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1.8289 1.8216 1.8051 1.7805 1.7799 1.7686 1.7260 1.6894 1.6767 1.5880 1.5434 1.5246 1.4697 1.4691 1.4143 1.3811 1.2149 1.1577 1.0746 1.0259 1.0247 1.0236 1.0232 1.0135 0.9956 0.9820 0.9614 0.9423 0.9024 0.8906 0.8804 0.8759 0.8729 0.8636 0.8291 0.8276 0.8206 0.8181 0.8160 0.8148 0.7959 0.7379 0.7213 0.7049 0.6942 0.6696 0.6654 0.6635 0.6337 0.6203 0.5848 0.5735 0.5563 0.5493 0.5443 0.4926 0.4810 0.4804 0.4712 0.4438 0.4259 0.4026 0.3995 A A A A A A A A A A A A A A A A A A B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D D E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E E F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F F G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H H I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I I J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K K L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L L M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M M Means that not share a letter are significantly different. Fisher 95% Individual Confidence Intervals All Pairwise Comparisons Simultaneous confidence level = 0.01% 5. So sánh khả cố định đạm của dòng ở ba huyện: Data Display Row 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 MC 0.721 0.876 0.982 1.023 1.780 0.828 0.942 0.816 0.902 0.996 1.726 0.961 1.677 1.689 1.805 1.525 2.212 1.956 1.769 1.822 1.075 0.873 1.414 1.026 1.014 1.158 1.025 1.588 0.880 2.205 0.891 2.218 1.886 1.024 1.381 2.049 TP 0.864 0.426 0.400 1.543 0.544 0.493 0.556 1.215 0.480 0.829 0.694 1.829 CT 0.620 0.574 0.796 0.815 0.665 1.469 0.664 0.670 0.705 0.738 1.909 0.821 0.634 0.818 0.403 0.549 0.471 1.781 0.444 1.470 0.585 0.481 Descriptive Statistics: MC, TP, CT Variable MC TP CT N 36 12 22 N* 0 Variable MC TP CT Maximum 2.2182 1.829 1.9089 Mean 1.3531 0.823 0.8218 SE Mean 0.0791 0.135 0.0914 StDev 0.4745 0.469 0.4287 Minimum 0.7213 0.400 0.4026 One-way ANOVA: MC, TP, CT Source Factor Error Total DF 67 69 S = 0.4596 SS 4.930 14.155 19.086 MS 2.465 0.211 R-Sq = 25.83% F 11.67 P 0.000 R-Sq(adj) = 23.62% Q1 0.9471 0.483 0.5675 Median 1.1161 0.625 0.6675 Q3 1.7771 1.127 0.8187 Level MC TP CT N 36 12 22 Mean 1.3531 0.8228 0.8218 StDev 0.4745 0.4686 0.4287 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev --------+---------+---------+---------+(-----*-----) (----------*----------) (-------*-------) --------+---------+---------+---------+0.75 1.00 1.25 1.50 Pooled StDev = 0.4596 Grouping Information Using Fisher Method MC TP CT N 36 12 22 Mean 1.3531 0.8228 0.8218 Grouping A B B Means that not share a letter are significantly different. Fisher 95% Individual Confidence Intervals All Pairwise Comparisons Simultaneous confidence level = 87.89% 6. So sánh khả cố định đạm những dòng phân lập từ rễ và đất vùng rễ: Data Display Row 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 Đất Rễ vùng rễ 0.721 1.075 0.876 0.873 0.982 1.414 1.023 1.026 1.780 1.014 0.828 1.158 0.942 1.025 0.816 1.588 0.902 0.880 0.996 2.205 1.726 0.891 0.961 2.218 1.677 1.886 1.689 1.024 1.805 1.381 1.525 2.049 2.212 0.556 1.956 1.215 1.769 0.480 1.822 0.829 0.864 0.694 0.426 1.829 0.400 0.620 1.543 0.574 0.544 0.796 0.493 0.815 0.818 0.665 0.403 1.469 0.549 0.664 0.471 0.670 1.781 0.705 0.444 0.738 1.470 1.909 0.585 0.821 35 0.481 0.634 Descriptive Statistics: Rễ, Đất vùng rễ Variable Rễ Đất vùng rễ N 35 N* Mean SE Mean StDev Minimum Q1 Median 1.0937 0.0936 0.5538 0.3995 0.5493 0.9423 1.0968 0.0853 0.5046 0.4804 0.6942 0.8906 35 Variable Rễ Đất vùng rễ Q3 Maximum 1.6894 2.2120 1.4143 2.2182 One-way ANOVA: Rễ, Đất vùng rễ Source Factor Error Total DF 68 69 SS 0.000 19.085 19.086 MS 0.000 0.281 F 0.00 P 0.980 S = 0.5298 R-Sq = 0.00% R-Sq(adj) = 0.00% Level Rễ Đất vùng rễ Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev N Mean StDev ---------+---------+---------+---------+ 35 1.0937 0.5538 (-----------------*-----------------) 35 1.0968 0.5046 (-----------------*-----------------) ---------+---------+---------+---------+ 1.00 1.10 1.20 1.30 Pooled StDev = 0.5298 Grouping Information Using Fisher Method Đất vùng rễ Rễ N Mean Grouping 1.0968 A 35 1.0937 A 35 Means that not share a letter are significantly different. Fisher 95% Individual Confidence Intervals All Pairwise Comparisons Simultaneous confidence level = 95.00% [...]... về cây dừa vẫn còn hạn chế Đặc biệt là mối quan hệ của cây dừa với vi sinh vật nói chung và vi sinh vật cố định đạm nói riêng Xuất phát từ thực tiễn trên, đề tài Phân lập vi khuẩn cố định đạm từ đất vùng rễ và nội sinh rễ cây dừa được thực hiện nhằm khảo sát sự tồn tại của vi sinh vật cố định đạm nội sinh trong rễ dừa và trong đất vùng rễ. .. vật) Loại sinh vật đó là một số vi sinh vật sẽ được đề cập cụ thể sau 2.3.4 Vi sinh vật cố định đạm a Vi sinh vật cố định đạm là gì? Vi sinh vật cố định đạm (hay vi sinh vật cố định nitơ) là các vi sinh vật có khả năng cố định nitơ tự do Đó là các vi khuẩn sống cộng sinh ở cây họ đậu, một số vi khuẩn lam sống cộng sinh ở bèo hoa dâu, một số khác... Ethylene Các vi khuẩn cố định nitơ sống cộng sinh với các cây họ đậu chỉ có thể cố định được đạm khí trời khi chúng ở trong các nốt rễ Có 5 giai đoạn xâm nhiễm của vi khuẩn nốt rễ + Giai đoạn 1: Nhận biết giữa vi khuẩn và cây chủ và sự gắn vi khuẩn vào lông rễ + Giai đoạn 2: Sự xâm nhập của vi khuẩn vào lông rễ và sự thành lập sợi nhiễm + Giai đoạn 3: Vi khuẩn. .. sinh trên một số cây trồng Vi khuẩn Rễ, lá Mía Rễ, thân, lá Củ, rễ Rễ, thân, trái Ngũ cốc Rễ, thân, hạt Mía Rễ, thân Cây cọ dầu Rễ, thân, trái Lúa Rễ Ngũ cốc Rễ, thân, lá, hạt Mía Rễ, thân Cỏ Rễ, thân, lá Cây cọ dầu Rễ, thân Mía Rễ, thân, lá Lúa Rễ, thân, lá Mía Rễ, thân, lá Cỏ voi Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Rễ, thân, hạt, nhựa nguyên Cây cọ dầu Gluconacetobacter... với cây không thuộc họ đậu và vi khuẩn cố định nitơ sống tự do trong đất (Nguyễn Hữu Hiệp và Cao Ngọc Điệp, 2012) a Vi khuẩn cộng sinh với cây họ đậu Một trong số mối tương tác giữa cây và vi khuẩn quan trọng và thích thú nhất là giữa cây họ đậu và các vi khuẩn cố định nitơ Gram âm Các giống vi khuẩn Rhizobium, Bradyrhizobium, Sinorhizobium, Mesorhizobium và Azorhizobium... trong đất, sẽ tấn công tiêu diệt các chủng Bradyrhizobium nhiễm thực khuẩn thể, do đó có thể làm giảm khả năng cố định nitơ của cây đậu Trường hợp này nên dùng các chủng vi khuẩn kháng thực khuẩn thể 2.3.5 Phân loại vi khuẩn cố định đạm Có ba nhóm vi khuẩn có thể sử dụng dạng đạm này của không khí là vi khuẩn cộng sinh với cây họ đậu, vi khuẩn cộng sinh. .. nhiên pH đất thích hợp nhất từ 5,5 - 7 Vùng bị khô hạn hay ngập úng không thích hợp cho cây dừa Vùng mặn dừa có trái nhỏ 2.2.3 Các giá trị của cây dừa (Hình 5, Bảng 2) Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 7 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 - 2013 Trường Đại Học Cần Thơ Cây dừa Trái dừa Thân dừa Vỏ dừa Xơ dừa Mụn dừa Gáo dừa Lá, hoa, rễ Cơm dừa. .. các nốt rễ sẽ nhỏ có màu hơi xanh hay trắng và không thể cố định N Khi nốt rễ hữu hiệu thì nốt rễ to, có màu đỏ và có thể cố định N b Vi khuẩn cố định nitơ với cây không thuộc họ đậu Dobereiner và Ruschel (1958) phân lập được loài vi khuẩn Beijerinckia fluminensis cố định nitơ sống ở vùng rễ cây mía trồng ở vùng nhiệt đới đã cho thấy một tiềm năng cố định nitơ... định đạm nội sinh trong rễ dừa và trong đất vùng rễ dừa 1.2 Mục tiêu của đề tài Phân lập, tuyển chọn những dòng vi khuẩn có khả năng cố định đạm từ đất vùng rễ và sống nội sinh trong rễ cây dừa Tiếp theo khảo sát khả năng cố định đạm của các dòng vi khuẩn đã phân lập Sau đó tuyển chọn những dòng cố định đạm cao và thực hiện phản ứng PCR để khảo sát... trong rễ chính qua sợi nhiễm + Giai đoạn 4: Thành lập các bacteroids bên trong tế bào cây và tiến hành giai đoạn cố định nitơ + Giai đoạn 5: Cây và vi khuẩn tiếp tục phân cắt và hình thành nốt rễ trưởng thành Ngay cả khi một dòng Rhizobium có thể nhiễm vào một loại cây họ đậu nhất định nó không phải luôn luôn có thể tạo được các nốt rễ cố định N Nếu dòng vi khuẩn . 2.3.1. Đm là gì? 9 2.3.2. Vai tr ca đm 9 2.3.3. Chu trnh nitơ trong t nhiên 10 2.3.4. Vi sinh vt c đnh đm 10 2.3.5. Phân loi vi khun c đnh đm 13 2.3.6. Mt s nghiên cu v vi sinh. 6: Tm tt vai tr ca nitơ 10 Hnh 7: Que cy đu trn 20 Hnh 8: Cch phân lp trên đa petri 21 Hnh 9: Th hin gen nif ca Klebsiella pneumoniae 25 Hnh 10: Mô phng s sao chp trong. ngt, l và mn. n Tre, 3,00% Châu nh, 10, 92% ch, 1,54% y Nam, 25,25% y c, 13,93% ng Trôm, 25,18% nh i, 10, 89% Ba Tri, 2,74% nh , 6,53% nh 2: