TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN KHOA VẬT LÝ-VẬT LÝ KỸ THUẬT CHUYÊN NGÀNH QUANG HỌC  ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP NANO VÀNG VÀ KHẢO SÁT KHẢ NĂNG GẮN KẾT VỚI KHÁNG THỂ KHÁNG VI KHUẨN E.COLI O157 1 GVHD: TS. Lâm Quang Vinh HVTH: Phan Thị Cẩm Huệ Hồ Thị Thanh Nhàn Nguyễn Thị Minh Trang MỤC LỤC 1. MỞ ĐẦU 2. TỔNG QUAN VỀ NANO VÀNG 3. CÁC PHƯƠNG PHÁP TỔNG HỢP HẠT NANO VÀNG BIẾN TÍNH BỀ MẶT 3.1 Phương pháp Turkevich 3.2 Phương pháp Perrault 3.3 Phương pháp Brust 3.4 Phương Pháp Martin 4. TỔNG HỢP NANO VÀNG ĐƯỢC BIẾN TÍNH BỀ MẶT VỚI MHDA & MCU 4.1Hóa chất 4.2 Dụng cụ 4.3 Quy trình tổng hợp 4.2Đánh giá kết quả 5. TỔNG HỢP NANO VÀNG ĐƯỢC BIẾN TÍNH BỀ MẶT VỚI MPA 5.1Hóa chất 5.2Dụng cụ 5.3Quy trình tổng hợp 5.4Đánh giá kết quả 6. KẾT LUẬN MỞ ĐẦU Phương pháp khử hóa học chế tạo hạt nano vàng từ axit cloroauric (HAuCl 4 .3H 2 O) và gắn kết kháng thể kháng vi khuẩn E. coli O157 lên trên hạt nano vàng. Các phương pháp phân tích như phổ hấp thụ được ứng dụng để đánh giá các tính chất của các hạt nano vàng. Hơn nữa, 2 khả năng gắn kết giữa kháng thể kháng vi khuẩn E. coli O157 với hạt nano vàng chế tạo ra được chứng minh thông qua kính hiển vi truyền qua TEM. Các hạt nano vàng với những đặc tính như không độc, dễ tương tác sinh học và có các tính chất quang học và điện tử đặc biệt, điều này theo các tài liệu tham khảo cho biết do hiệu ứng kích thước lượng tử tạo nên, đang thu hút nhiều nhà khoa học trong và ngoài nước trong việc đưa các hạt nano này ứng dụng trong các lĩnh vực y sinh học như chẩn đoán, cảm biến, lâm sàng. Vấn đề mà các nhà khoa học đang quan tâm là tạo ra các hạt nano vàng có kích thước nhỏ, phân bố kích thước đồng đều và đáp ứng yêu cầu trong việc gắn kết với các phần tử sinh học nhằm triển khai ứng dụng các hạt nano này vào các lĩnh vực khác nhau đặc biệt ứng dụng trong việc làm tăng độ nhạy trong cảm biến sinh học sử dụng linh kiện vi cân tinh thể thạch anh (QCM) trong phát hiện các vi khuẩn độc hại và các mục đích khác trong y sinh. Phương pháp phân tích này so với các phương pháp phân tích sinh học thông thường như đếm tế bào trên kính hiển vi, đếm khuẩn lạc trên dĩa thạch, đầu dò enzym, ELISA, kít chuẩn PCR có các ưu điểm như: phát hiện vi khuẩn ở nồng độ thấp, thời gian thử nghiệm nhanh và chính xác. Hiện nay tại Việt Nam, vấn đề an toàn vệ sinh thực phẩm là vấn đề hết sức quan trọng và cần thiết vì ảnh hưởng đến trực tiếp đến sức khỏe con người mà còn gây thiệt hại về kinh tế, là gánh nặng cho gia đình và xã hội. Theo thống kê của Cục An Toàn Thực Phẩm – Bộ Y Tế Việt Nam, hơn 5.500 người ngộ độc thực phẩm năm 2012 ở Việt Nam. Có nhiều nguyên nhân khác nhau gây ra ngộ độc thực phẩm, trong đó nguyên nhân do ô nhiễm vi sinh vật chiếm tỉ lệ khá cao. Một trong những vi sinh vật gây bệnh được chú ý nhiều nhất là E. coli O157 vì là nguyên nhân gây ra các bệnh tiêu chảy nặng, nhiễm trùng huyết, nhiễm trùng tiết niệu và viêm màng não trẻ sơ sinh. Trong công việc hiện tại, chúng tôi tiến hành chế tạo hạt nano vàng được biến tính bề mặt với nhóm thiol và khảo sát khả năng gắn kết với kháng thể kháng vi khuẩn E.coli O157. Bên cạnh đó, khả năng gắn kết các hạt nano vàng sau khi chế tạo ra với kháng thể kháng vi khuẩn E. coli O157 được đánh giá bằng phổ hấp thụ và kính hiển vi truyền qua TEM. TỔNG QUAN VỀ HẠT NANO VÀNG Từ buổi bình minh của lịch sử loài người, vàng có thể nói là bề nổi của một nền văn minh. Hơn 3.000 năm trước, tại Ai Cập và Trung Quốc con người đã ý thức vàng là kim loại 3 quý, đã biết khai thác, gia công vàng tạo ra các đồ trang sức quý giá và được xem như một thế chấp cụ thể dự trữ cho sự phồn thịnh của một triều đại. Giá trị về mỹ thuật hay kinh tế của vàng cho đến ngày hôm nay vẫn không có nhiều thay đổi, nhưng trong nền công nghệ nano hiện đại với những tiềm năng ứng dụng quan trọng của hạt nano vàng trong quang học, quang điện tử và y học, vàng nano có lẽ còn quí giá hơn vàng khối trên quan điểm thực dụng nhằm phụng sự cho cuộc sống và hạnh phúc con người. Ở trạng thái khối, trong các áp dụng quang học hay quang điện tử, vàng hữu dụng cho lắm thì chỉ dùng làm gương phản chiếu. Tuy nhiên, vàng nano cho con người một lĩnh vực nghiên cứu và ứng dụng hoàn toàn mới lạ. Khi sóng điện từ tác dụng lên hạt nano vàng, tùy vào kích cỡ của hạt sóng điện từ sẽ có tác dụng sóng tuân theo hiệu ứng "cộng hưởng plasmon" của các điện tử tự do bề mặt và có tác dụng hạt khi kích cỡ của vàng nhỏ hơn 2 nm và sự phát huỳnh quang xảy ra tuân theo qui luật lượng tử như hạt bán dẫn CdSe. Đặc điểm của kim loại là sự hiện hữu dày đặt của những điện tử tự do. Đây cũng là nguyên nhân của sự bóng loáng bề mặt, truyền điện và truyền nhiệt ưu việt của kim loại. Khi kim loại như vàng và bạc ở dạng hạt nano, hạt không còn màu vàng hay bạc "cố hữu" ở trạng thái khối mà phát ra nhiều màu sắc khác nhau tùy vào kích cỡ và hình dạng. Điều này đi ngược lại những hiểu biết thường thức trong cuộc sống hàng ngày. Hai chiếc nhẫn vàng được nấu chảy và gia công thành một chiếc nhẫn to gấp đôi thì vẫn là chiếc nhẫn màu vàng. Thật ra, màu sắc của hạt nano vàng và bạc từ dung dịch huyền phù đã được người La Mã áp dụng vào thế kỷ 4. Người ta còn pha chế hạt nano vàng với thủy tinh để làm kính màu đỏ "ruby" trang trí cho cửa sổ thánh đường. Mặc dù hạt nano vàng đã được áp dụng hơn 1.700 năm, sự đổi màu của hạt chỉ được làm sáng tỏ vào năm 1908 bởi nhà khoa học Đức, Gustav Mie, qua lời giải dựa trên phương trình sóng điện từ Maxwell cho bài toán về sự hấp thụ và tán xạ của sóng trên bề mặt của các hạt hình cầu. Vì vậy, sự hiển thị màu sắc của hạt nano vàng có đường kính từ vài chục đến vài trăm nanomét không trực tiếp liên quan đến sự lượng tử hóa năng lượng vì sóng điện từ tác động lên những điện tử tự do bề mặt hạt mang đặc tính sóng có cơ bản lý thuyết dựa trên phương trình Maxwell. 4 Sự thay đổi màu sắc của hạt nano vàng ở các kích thước khác nhau (Dr. Michael Cortie, University of Technology, Sydney, Australia) Màu vàng quen thuộc của vàng là sự hấp thụ ánh sáng màu xanh của phổ mặt trời và phát ra màu vàng. Nhưng khi vàng được thu nhỏ cho đến kích cỡ nhỏ hơn bước sóng của vùng ánh sáng thấy được (400 - 700 nm), theo Mie hiện tượng "cộng hưởng plasmon bề mặt" (surface plasmon resonance, SPR) xảy ra. Đây là do tác động của điện trường của sóng điện từ (ánh sáng) vào các điện tử tự do trên bề mặt của hạt nano. Điện trường làm phân cực hạt, dồn điện tử về một phía tạo ra hai vùng, vùng mang điện tích âm và vùng mang điện tích dương. Vì bản chất sóng nên điện trường dao động làm cho sự phân cực bề mặt dao động theo. Sự dao động này được gọi là "plasmon". Đám mây điện tích trên bề mặt hạt cũng sẽ dao động lúc âm lúc dương theo nhịp điệu và cường độ của điện trường. Ở một kích thước và hình dáng thích hợp của hạt nano, độ dao động (tần số) của đám mây điện tích sẽ trùng hợp với độ dao động của một vùng ánh sáng nào đó. Sự cộng hưởng xảy ra và vùng ánh sáng này sẽ bị các hạt nano hấp thụ. Đây là một hiện tượng đặc biệt cho vàng và bạc nhưng không thấy ở các kim loại khác như sắt, bạch kim hay palladium. Sự phân cực điện tử bề mặt của hạt hình cầu do điện trường của sóng điện từ SPR có bước sóng hấp thụ trong khoảng 520 nm (sóng màu xanh) và ít bị ảnh hưởng của kích thước hạt trong phạm vi từ 9 đến 22 nm. Các hạt nano hấp thụ ánh sáng xanh sẽ hiển thị màu đỏ. Khi nhìn lại kính "ruby" đỏ mà cổ nhân đã chế tạo từ mấy trăm năm trước, ta nhận ra ngay những hạt nano vàng được chế tạo theo phương thức cổ truyền có kích thước 9 - 22 nm. Khi hạt càng lớn thì bước sóng hấp thụ có bước sóng dài hơn và khi đến kích thước 99 nm, hạt hấp thụ sóng màu vàng (bước sóng 575 nm) và hiển thị màu xanh. 5 Sự phân cực của điện tử bề mặt do điện trường của sóng điện từ Đường kính hạt (nm) Bước sóng hấp thụ (nm) 9 517 15 520 22 521 48 533 99 575 Với một sáng kiến độc đáo, một nhóm nghiên cứu tại Rice University (Mỹ) đã phủ vàng lên hạt nano silica (thủy tinh) tạo nên vỏ nano vàng (nanoshell). Điều chỉnh đường kính hạt silica đến 210 nm và độ dày của vàng làm di chuyển sự hấp thụ sóng điện từ bởi SPR đến vùng tia cận hồng ngoại (bước sóng 800 - 2.200 nm). Phương pháp phủ vàng lên hạt thủy tinh silica tạo ra một vật liệu lai với khả năng hấp thụ sóng bởi SPR về phía vùng phổ của những bước sóng dài hơn vùng hồng ngoại, tiến về sóng terahertz, vi ba, những dải sóng rất quan trọng trong công nghệ truyền thông. Trong dải sóng này, tiềm năng ứng dụng của loại hạt nano lai trong các dụng cụ quang điện tử gần như vô hạn. 6 Sự phát huỳnh quang ánh sáng xanh của hạt nano vàng chứa 8 nguyên tử vàng Hiệu ứng SPR sẽ biến mất khi vật liệu trở lại trạng thái khối. Khi các hạt nano vàng tập tích đến độ lớn micromét, màu vàng nguyên thủy của kim loại vàng sẽ xuất hiện trở lại. Ngược lại, hiệu ứng SPR cũng sẽ biến mất khi hạt nano nhỏ hơn 2 nm. Ở thứ nguyên này, ta đi vào thế giới lượng tử. Giống như chấm lượng tử bán dẫn được đề cập bên trên, năng lượng được lượng tử hóa thành các mức rời rạc. Sóng điện từ giờ đây có tác dụng hạt (quang tử). Nhóm của giáo sư Robert Dickson (Georgia Institute of Techology, Mỹ) đã tạo ra những hạt nano (chấm lượng tử) vàng với kích thước thật chính xác chứa 5, 8, 13, 23 và 31 nguyên tử. Đây là những hạt phát huỳnh quang trong đó chùm 31 nguyên tử có đường kính lớn nhất khoảng 1 nm. Những hạt này được xử lý bề mặt để hòa tan được trong nước. Trong dung dịch nước, theo thứ tự kích thước từ nhỏ đến lớn khi được kích hoạt những hạt này có khả năng phát ra tia tử ngoại, ánh sáng xanh, xanh lá cây, đỏ và tia hồng ngoại. So với chấm lượng tử bán dẫn CdSe chứa vài trăm đến hơn 1.000 nguyên tử, chấm lượng tử vàng nhỏ hơn với vài chục nguyên tử và không có độc tính như Cd. Vì vậy, tiềm năng áp dụng trong y học rất lớn. 7 CÁC PHƯƠNG PHÁP TỔNG HỢP HẠT NANO VÀNG BIẾN TÍNH BỀ MẶT 1. Phương pháp Turkevich. Phương pháp này được phát minh bởi J. Turkevich và các cộng sự vào vào năm 1951 và sau đó được cải tiến bởi G. Frens vào những năm 1970. Đây là phương pháp tổng hợp phổ biến nhất trong việc tạo ra các hạt nano vàng có đường kính từ 10 – 20 nm do tính đơn giản và hiệu quả của nó. Trong phương pháp tổng hợp này dung dịch HAuCl 4 .3H 2 O được khuấy trộn và gia nhiệt trong dung môi là H 2 O đến nhiệt độ sôi trước khi nhỏ giọt dung dịch sodium citrate vào để khử các ion Au thành nguyên tử Au. Sodium citrate ngoài khả năng khử muối vàng chloride còn có chức năng bao bọc các hạt vàng để tránh sự kết tụ của các hạt nano vàng. Để tạo ra các hạt nano vàng lớn hơn, yêu cầu một lượng ít hơn citrate (có thể dưới 0.05%, một lượng nhỏ hơn sẽ không thể kích thích phản ứng khử hết các ion Au 3+ ). Việc khử trong một lượng natri citrate sẽ làm giảm lượng ion citrate sẵn có cho việc bọc xung quanh hạt nano vàng, điều này sẽ làm cho các hạt nhỏ kết đám với nhau và tạo nên những hạt lớn hơn (cho đến khi tổng diện tích bề mặt của các hạt trở nên đủ nhỏ để được bọc bởi tất cả các ion citrate tồn tại trong dung dịch). Phương trình phản ứng của muối vàng HAuCl 4 với sodium citrate Na 3 C 6 H 5 O 7 được đề xuất bởi Kumar: 2HAuCl 4 + 3Na 3 C 6 H 5 O 7 → 2Au 0 + 3Na 2 C 5 H 6 O 5 + 3NaCl + 5Cl - + 5H + + 3CO 2 2. Phương pháp Perrault. Phương pháp này được phát minh bởi Perrault và Chan trong năm 2009, sử dụng hydroquione C 6 H 4 (OH) 2 để khử HAuCl 4 trong dung dịch có chứa sẵn các hạt nano vàng. Phương pháp này tương tự với phương pháp sử dụng trong việc phát triển film tạo ảnh, trong đó các hạt bạc bên trong film lớn dần lên trong khi có sự bổ sung của các nguyên tử bạc được khử ngay trên bề mặt. Tương tự như thế, các hạt nano vàng có thể đóng vai trò là chất cầu nối với hydroquinone để xúc tác việc khử các ion vàng trên bề mặt. Sự tồn tai các chất ổn định như các ion citrate có thể tạo ra việc mọc các hạt có kiểm soát. Phương pháp này có thể tạo ra các hạt nano với kích thước rất lớn trong khoảng 30-250 nm. 8 3. Phương pháp Brust. Phương pháp này được phát hiện bởi Brust và Schiffrin vào đầu những năm 1990 và có thể được sử dụng để tổng hợp các hạt nano vàng trong dung môi hữu cơ mà thông thường không thể trộn lẫn trong nước (như toluene). Phản ứng đặc trưng của phương pháp giữa axit chloauric và tetraoctylammonium bromide (TOAB) trong toluene và natri borohydrate đóng vai trò lần lượt như chất chống kết tủa và chất khử. Các hạt nano vàng chế tạo theo phương pháp này có kích thước trung bình 5-6 nm. NaBH 4 đóng vai trò tác nhân khử, trong khi TOAB đóng vai trò là chất xúc tác chuyển pha và chất làm bền. Một điều quan trọng là TOAB không bọc xung quanh hạt nano một cách vững chắc, nhưng dung dịch sẽ bị kết tủa sau khoảng thời gian 2 tuần. Để hạn chế hiện tượng này, một tác nhân làm bền mạnh có thể được sử dụng như thiol (alkanethiol), có thể liên kết cộng hóa trị với hạt nano vàng, tạo ra một dung dịch gần như vĩnh cửu. Alkanethiol bảo vệ hạt nano vàng có thể bị kết tủa nhưng sau đó sẽ được hòa tan lại. Một số tác nhân chuyển pha có thể duy trì việc bọc với các hạt nano sau khi đã làm sạch, việc này có thể gây ảnh hưởng đến thuộc tính vật lý của hạt như tính tan. 4. Phương pháp Martin. Phương pháp này được phát minh bởi nhóm Martin vào năm 2010, phương pháp này tạo ra các hạt nano vàng dạng “trần” trong nước bằng việc khử HAuCl 4 với NaBH 4 . Mặc dù không sử dụng các chất hoạt động bề mặt như citrate, các hạt nano vàng phân tán rất bền. Phân bố kích thước gần như đơn phân tán với đường kính có thể chính xác và tái tổng hợp trong khoảng 3.2 đến 5.2 nm. Chìa khóa cho việc làm bền HAuCl 4 và NaBH 4 trong dung dịch stock với HCl và NaOH lần lượt trong hơn 3 tháng và hơn 3 giờ. Hơn nữa, tỷ số của các ion NaBH 4 - NaOH với HAuCl 4 -HCl phải được kiểm soát chính xác trong vùng gọi là “sweet zone”. Các hạt nano “trần” được bọc với một đơn lớp 1-dodecanethiol và sau đó chuyển pha thành hexane bằng việc lắc hỗn hợp của nước, acetone và hexane trong 30 giây. Do đó, tất các sản phẩm phản ứng kết hợp tồn tại ở pha nước-acetone. Lượng 1-dodecanethiol chỉ chiếm 10% nguyên tử vàng trong tổng số. Tất cả các quy trình phản ứng này chỉ mất dưới 10 phút. 9 TỔNG HỢP NANO VÀNG ĐƯỢC BIẾN TÍNH BỀ MẶT VỚI MHDA & MCU Hóa chất: Tetrachloroauric acid trihydrate (HAuCl 4 .3H 2 O) 5mM, 11-mercapto-1-undecanol (HO(CH 2 ) 11 SH) (MCU) (97%), 16-mercaptohexadecanoic acid (MHDA) (90%), Ethanol CH 3 CH 2 OH (99.7%), Sodium tetrahydridoorate (NaBH 4 )14mM, Axit clohydric (HCl) 1M. Dụng cụ: Becher 250ml, pipet, cá từ, bếp khuấy từ, cân điện tử, máy quay li tâm, tủ sấy, hệ thống làm lạnh. Quy trình tổng hợp: Sử dụng phương pháp Martin Bước 1: Pha loãng 10.58mg NaBH 4 trong 20ml H 2 O để có được dung dịch NaBH4 14mM. Bước 2: Khuấy trộn 20ml HAuCl4.3H2O 5mM trong 200ml ethanol . Bước 3: Hòa tan 55.18mg 11-mercapto-1-undecanol và 8.65mg 16- mercaptohexadecanoic acid vào dung dịch đang khuấy. Bước 4: Thực hiện làm lạnh hỗn hợp dung dịch trên đến 0 o C. Sau khi dung dịch được làm lạnh ta nhỏ giọt 20ml NaBH 4 14mM vào. Quan sát sự đổi màu của dung dịch ta sẽ thấy hỗn hợp nhanh chóng chuyển sang màu nâu đen. Sau 3h khuấy ta để dung dịch kết tủa xuống đáy lọ. 10 [...]... hạt nano vàng biến tính bề mặt với nhóm thiol Điều này có thể kết luận các hạt nano vàng đã gắn kết thành công với kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 Đánh giá sự gắn kết các hạt vàng lên kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 dựa vào kết quả TEM 23 Hình (A) Kết quả TEM của vi khuẩn E coli O.157, (B) kết quả TEM của hạt nano vàng gắn kết kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 Hình (A) là kết quả TEM... GIÁ KẾT QUẢ GẮN KẾT HẠT NANO VÀNG LÊN KHÁNG THỂ KHÁNG VI KHUẨN E COLI O.157 Phân tích phổ UV – Vis hạt nano vàng gắn kết kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 Hình phổ UV–Vis dung dịch nano vàng gắn kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 Hình 3.12 Là kết quả đo phổ UV – Vis của hạt nano vàng đã gắn kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 và hạt nano vàng chưa gắn kháng thể Trên đồ thị xuất hiện đỉnh phổ... khuẩn E coli Hình phổ FTIR của các hạt nano vàng gắn kết kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 Hình trên là kết quả phổ FTIR của hạt nano vàng gắn kết kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157, hạt nano biến tính bề mặt với nhóm thiol và hạt nano vàng chưa gắn kết Từ phổ đồ của hình 3.13, ta thấy các liên kết tại đỉnh 1087.67 cm-1 của hạt nano vàng gắn kết kháng thể có cường độ yếu hơn các liên kết tại... dung dịch nano vàng đã được chế tạo thành công với dạng hình cầu, kính thước hạt nano vàng dao động từ 10-20 nm Bên cạnh đó, chúng tôi đã thành công trong vi c gắn kết kháng thể kháng vi khuẩn E coli O157 lên hạt nano vàng Điều này đã được chứng minh thông qua các hình TEM và các kết quả từ phổ hấp thụ UV-VIS và FT-IR khảo sát sự gắn kết kháng thể kháng vi khuẩn E coli O157 lên hạt nano vàng 24 ... TEM của vi khuẩn E coli O.157 và hình (B) là kết quả TEM của các hạt nano vàng gắn kết kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 Dựa vào hình (B) ta nhận thấy bề mặt của vi khuẩn E coli O.157 đã bị thay đổi, xuất hiện những chấm nhỏ li ti xung quanh bề mặt và những chấm lớn hơn ở bên trong Điều này chứng tỏ các hạt nano vàng sau khi được biến tính đã gắn kết lên kháng thể kháng vi khuẩn E coli O.157 KẾT LUẬN... nano vàng, Au đã thay thế H trong liên kết S-H để hình thành liên kết Au-S Đánh giá hạt nano vàng biến tính với MPA dựa trên kết quả TEM Kết quả TEM của các hạt nano vàng biến tính bề mặt với MPA Dựa vào ảnh TEM, các hạt nano vàng không có dạng hình cầu tròn mà bị phân tán thành những hạt có kích thước nhỏ hơn Kết quả cho thấy các hạt nano vàng đã gắn kết với MPA 21 ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ GẮN KẾT HẠT NANO VÀNG... của kháng thể vi khuẩn E coli O.157 Ngoài ra không xuất hiện đỉnh hấp thu của hạt nano vàng tại vị trí 529 nm Điều này là do tỉ lệ nồng độ kháng thể lớn hơn rất nhiều so với lượng nano vàng, nên các kháng thể bao phủ gần như hoàn toàn bề mặt của hạt nano vàng làm cho đỉnh hấp thu đặc trưng của hạt nano vàng không xuất hiện trên phổ 22 Phân tích phổ FTIR của hạt nano vàng gắn kháng thể kháng vi khuẩn E. .. NaCl nhỏ vào 1ml dung dịch nano vàng, lặp lại 3 lần, mỗi lần cách nhau 30 phút Bước 3: Sau đó thêm 100µl BSA vào 1ml dung dịch nano vàng và lắc ủ trong 2 giờ Bước 4: Cho vi khuẩn vào dung dịch nano vàng với tỉ lệ 1:1, sau đó bảo quản ở điều kiện 4 0C cho đến khi cần thí nghiệm 16 ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ HẠT NANO VÀNG & HẠT NANO VÀNG BIẾN TÍNH Đánh giá hạt nano vàng dựa trên ảnh TEM Hình (A) Kết quả TEM của... hạt nano vàng biến tính bề mặt với MHDA & MCU 1290 98 680 76 2849 75 1695 38 2 2915 86 Hình phổ FTIR của 16-mercaptohexadecanoic acid (MHDA) Dựa trên phổ FTIR của 16-mercaptohexadecanoic acid và 11-mercapto-1-undecanol ta có thể xác định các liên kết đặc trưng có trong 2 hợp chất này, từ đó so sánh với phổ IR của các hạt nano vàng biến tính với nhóm thiol Phổ FTIR của 16-mercaptohexadecanoic acid thể. .. liệu chúng tôi tạo ra là hạt nano vàng với cấu trúc lập phương tâm mặt Đánh giá phổ UV – Vis của hạt nano vàng biến tính bề mặt với MPA Hình phổ UV – Vis của hạt nano vàng biến tính bề mặt với MPA Dựa vào hình trên, hình dạng phổ hấp thu của hạt nano vàng sau khi được biến tính đã có sự thay đổi, không đỉnh phổ hấp thu đặc trưng của các hạt nano vàng vì lúc này các hạt nano vàng đã được phân tán ra rất . THUẬT CHUYÊN NGÀNH QUANG HỌC  ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP NANO VÀNG VÀ KHẢO SÁT KHẢ NĂNG GẮN KẾT VỚI KHÁNG THỂ KHÁNG VI KHUẨN E. COLI O157 1 GVHD: TS. Lâm Quang Vinh HVTH: Phan Thị Cẩm Huệ Hồ Thị. tiết niệu và vi m màng não trẻ sơ sinh. Trong công vi c hiện tại, chúng tôi tiến hành chế tạo hạt nano vàng được biến tính bề mặt với nhóm thiol và khảo sát khả năng gắn kết với kháng thể kháng vi khuẩn. khuẩn E. coli O157. Bên cạnh đó, khả năng gắn kết các hạt nano vàng sau khi chế tạo ra với kháng thể kháng vi khuẩn E. coli O157 được đánh giá bằng phổ hấp thụ và kính hiển vi truyền qua TEM. TỔNG