BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI LƢƠNG THỊ THU HẰNG TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC NGOÀI DA DỰA TRÊN KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI – 2014 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI LƢƠNG THỊ THU HẰNG TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC NGOÀI DA DỰA TRÊN KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Ngƣời hƣớng dẫn: 1. PGS.TS. Thái Nguyễn Hùng Thu 2. TS. Nguyễn Thành Hải Nơi thực hiện: 1. Bộ môn Hóa phân tích và Độc chất 2. Bộ môn Dược lâm sàng Trường đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI – 2014 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới: PGS.TS. Thái Nguyễn Hùng Thu TS. Nguyễn Thành Hải Là những ngƣời thầy đã trực tiếp hƣớng dẫn và tận tình chỉ bảo để tôi hoàn thành khóa luận này. Tôi xin cảm ơn các thầy cô tại Bộ môn Hóa phân tích và Độc chất và bộ môn Dƣợc lâm sàng đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian thực hiện khóa luận này. Tôi xin cảm ơn Ban giám hiệu, các phòng ban, các thầy cô giáo và cán bộ nhân viên trƣờng đại học Dƣợc Hà Nội - những ngƣời đã dạy bảo và giúp đỡ tôi trong suốt 5 năm học tập dƣới mái trƣờng này. Cuối cùng, tôi xin gửi những tình cảm thân thƣơng nhất tới gia đình, bạn bè, tập thể lớp A7K64 và N1K64 đã luôn ở bên quan tâm, chia sẻ và động viên tôi vƣợt qua mọi khó khăn trong quá trình học tập và thực hiện khóa luận. Hà Nội, ngày 12 tháng 5 năm 2014 Sinh viên Lƣơng Thị Thu Hằng MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ 1 Chƣơng 1. TỔNG QUAN VỀ VAI TRÒ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC 3 1.1. KHÁI NIỆM SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC 3 1.2. VAI TRÕ CỦA SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC TRONG QUẢN LÝ CHẤT LƢỢNG THUỐC TRÊN THỊ TRƢỜNG 5 1.3. THỬ NGHIỆM TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC 6 1.4. MỘT SỐ QUY ĐỊNH TẠI CÁC QUỐC GIA VỀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC 7 Chƣơng 2. TỔNG QUAN VỀ KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO TRÊN DA VÀ ƢU NHƢỢC ĐIỂM CỦA KỸ THUẬT 14 2.1. TÓM TẮT VỀ LỊCH SỬ PHÁT TRIỂN CỦA KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO 14 2.2. NGUYÊN LÝ CỦA KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO 16 2.2.1. Nguyên lý 16 2.2.2. Kim thăm dò 18 2.2.3. Dịch truyền vào 21 2.2.4. Định lƣợng các phân tử thuốc 22 2.2.4.1. Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) 22 2.2.4.2. Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS) 25 2.2.5. Hiệu chỉnh kết quả thu đƣợc 25 2.2.5.1. Phương pháp No- net - flux (NNF) 27 2.2.5.2. Phương pháp ngoại suy tốc độ dòng chảy (ZFR) 28 2.2.5.3. Phương pháp thẩm tách ngược (RD) 29 2.3. QUY TRÌNH CHUNG CỦA KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO TRONG NGHIÊN CỨU Y DƢỢC HỌC 30 2.4. ƢU NHƢỢC ĐIỂM CỦA KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO 30 2.4.1. Ƣu điểm 30 2.4.2. Nhƣợc điểm 31 Chƣơng 3. TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC NGOÀI DA 33 3.1. SỰ CẦN THIẾT PHẢI ĐO NỒNG ĐỘ THUỐC TỰ DO TẠI DỊCH KẼ MÔ DA 33 3.2. TRIỂN KHAI ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC NGOÀI DA VỚI KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO 34 3.2.1. Đối tƣợng nghiên cứu 35 3.2.2. Các thuốc đƣợc sử dụng trong nghiên cứu 35 3.2.3. Thiết kế nghiên cứu 37 3.2.4. Chuẩn bị kim thăm dò 38 3.2.5. Cấy kim thăm dò trên da 39 3.2.6. Định lƣợng bằng phƣơng pháp thích hợp 40 3.2.7. Thống kê, tính toán và báo cáo kết quả thu đƣợc 41 3.3. MỘT SỐ NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC NGOÀI DA DỰA VÀO KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO 42 3.3.1. Xác định sinh khả dụng của clobetasol propionat 42 3.3.2. Đánh giá tƣơng đƣơng sinh học 44 3.3.2.1. Đánh giá tương đương sinh học của các chế phẩm lidocain tại chỗ 44 3.3.2.2. Đánh giá tương đương sinh học tại chỗ của các loại kem acyclovir 46 3.3.2.3. Đánh giá tương đương sinh học các chế phẩm oxytetracyclin HCl và so sánh với phương pháp băng tước 50 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 1. KẾT LUẬN 55 2. KIẾN NGHỊ 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO [...]... giá sinh khả dụng và tương đương sinh học của thuốc ngoài da dựa trên kỹ thuật thẩm tách micro với 3 mục tiêu: 1 Tổng quan về vai trò đánh giá sinh khả dụng và tương đương sinh học của thuốc 2 Tổng quan về kỹ thuật thẩm tách micro trên da và ưu nhược điểm của kỹ thuật 3 Tổng quan về phương pháp đánh giá sinh khả dụng và tương đương sinh học của thuốc ngoài da dựa trên kỹ thuật thẩm tách micro Trên cơ... kết quả thu đƣợc của đề tài này, chúng tôi hy vọng sẽ giúp ích cho các nhà nghiên cứu Dƣợc có thể tiến hành triển khai việc đánh giá sinh khả dụng và tƣơng đƣơng sinh học của các chế phẩm thuốc ngoài da tại Việt Nam 3 Chƣơng 1 TỔNG QUAN VỀ VAI TRÒ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC 1.1 KHÁI NIỆM SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC Trong dƣợc học, sinh khả dụng (bioavailability... đánh giá 2 sinh khả dụng và tƣơng đƣơng sinh học của thuốc Phƣơng pháp này đã đƣợc công nhận bởi các nhà sản xuất Dƣợc phẩm và các cơ quan quản lý nhƣ Cơ quan quản lý Thuốc và Thực phẩm Hoa Kỳ (FDA) [92] Với những ƣu điểm vƣợt trội của kỹ thuật thẩm tách micro trong việc nghiên cứu dƣợc học nói chung và thuốc ngoài da nói riêng, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài Tổng quan về phương pháp đánh giá sinh. .. tiêm và đƣờng uống mà ít đề cập đến việc đánh giá sinh khả dụng và tƣơng đƣơng sinh học của các thuốc dùng ngoài da, đặc biệt tại Việt Nam, trong khi những thuốc này ngày càng đƣợc sử dụng phổ biến với các tác dụng nhanh tại chỗ mà ít tác dụng phụ toàn thân Việc tìm đƣợc một phƣơng pháp giúp hỗ trợ đánh giá sinh khả dụng và tƣơng đƣơng sinh học của các thuốc dùng ngoài da này là hết sức cần thiết Kỹ thuật. .. các chỗ phồng rộp da Gần đây, một phƣơng pháp ứng dụng mới có thể áp dụng để đánh giá tƣơng đƣơng sinh học và sinh khả dụng của các thuốc ngoài da, đó là kỹ thuật thẩm tách micro (Microdialysis - MD) Kỹ thuật thẩm tách micro là một công cụ lấy mẫu rất hữu ích có thể đƣợc sử dụng trên in vivo để biết đƣợc sự thay đổi nồng độ của các phân tử tự do nằm trong khoảng kẽ hoặc ngoại bào dựa trên sự khuếch tán... thuật thẩm tách micro đƣợc giới thiệu dƣới đây sẽ là một công cụ đắc lực để giúp giải quyết vấn đề này 14 Chƣơng 2 TỔNG QUAN VỀ KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO TRÊN DA VÀ ƢU NHƢỢC ĐIỂM CỦA KỸ THUẬT 2.1 TÓM TẮT VỀ LỊCH SỬ PHÁT TRIỂN CỦA KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO Xuất hiện từ những năm 60 của thế kỷ XX, kỹ thuật thẩm tách micro (microdialysis) dựa trên sự khuếch tán thụ động các chất qua màng thẩm tách theo... khả dụng và tƣơng đƣơng sinh học giữa các thuốc đó có nhƣ nhau hay không, đó là chƣa kể đến hiệu lực và tính an toàn của thuốc Hơn nữa, hàng ngày trên các trang tin trong và ngoài nƣớc đƣa những tin về loại thuốc A hay thuốc B không đủ tiêu chuẩn, trong đó cũng đề cập đến tƣơng đƣơng sinh học Do vậy, vai trò đánh giá sinh khả dụng và tƣơng đƣơng sinh học vừa có ý nghĩa khoa học, vừa là hành lang pháp. .. biệt là các thuốc ngoài da khi việc đo nồng độ thuốc ở dịch kẽ mô da sẽ phản ánh đúng hơn mức độ phân bố thuốc tại mô da 15 Hình 2.1 Các mô đích tác dụng của thuốc trên người đã được thực hiện nghiên cứu lâm sàng dựa trên kỹ thuật thẩm tách micro Qua những thập kỷ sử dụng, kỹ thuật thẩm tách micro ngày càng đƣợc ứng dụng rộng rãi, đặc biệt cho nghiên cứu dƣợc phẩm và y học lâm sàng Từ khóa “Microdialysis”... chuẩn của cộng đồng châu Âu EMEA-CPMP về hƣớng dẫn sinh khả dụng và tƣơng đƣơng sinh học của thuốc (London, tháng 7.2001): 2 chế phẩm đƣợc xem là có tƣơng đƣơng sinh học nếu sinh khả dụng và hiệu quả tác dụng của chúng sau khi dùng cùng liều phân tử gam là nhƣ nhau, cả về hiệu lực của thuốc và tính an toàn Khoảng tin cậy 90% sự chuyển dạng sinh học tự nhiên tƣơng đƣơng giữa 2 chế phẩm, nồng độ thuốc. .. thuốc đang lƣu hành có uy tín trên thị trƣờng [1] Trong đề tài này, chúng tôi đánh giá về sinh khả dụng của các thuốc ngoài da là dùng khái niệm về sinh khả dụng tƣơng đối Tương đương sinh học (Bioequivalence - BE): Hai chế phẩm của cùng một hoạt chất, cùng liều dùng, cùng đƣờng đƣa thuốc đƣợc coi là tƣơng đƣơng sinh học khi 3 đại lƣợng: F%, Tmax (tốc độ) và Cmax (cƣờng độ) dao động ở mức độ cho phép . TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI LƢƠNG THỊ THU HẰNG TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC NGOÀI DA DỰA TRÊN KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO KHÓA. TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI LƢƠNG THỊ THU HẰNG TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƢƠNG ĐƢƠNG SINH HỌC CỦA THUỐC NGOÀI DA DỰA TRÊN KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO KHÓA. HỌC CỦA THUỐC NGOÀI DA DỰA VÀO KỸ THUẬT THẨM TÁCH MICRO 42 3.3.1. Xác định sinh khả dụng của clobetasol propionat 42 3.3.2. Đánh giá tƣơng đƣơng sinh học 44 3.3.2.1. Đánh giá tương đương sinh