BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THỦY NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ FLAVONOID TỪ LÁ CÂY Ô ĐẦU TRỒNG Ở TỈNH HÀ GIANG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI-2014 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THỦY NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ FLAVONOID TỪ LÁ CÂY Ô ĐẦU TRỒNG Ở TỈNH HÀ GIANG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn :   Nơi thực hiện :   HÀ NỘI - 2014 LỜI CẢM ƠN  ,     TS. Nguyễn Quốc Huy, ThS. Vũ Đức Lợi,      ,   DS Tạ Khắc Công ,      Sinh viên  MỤC LỤC     1  2  2  3  3  6         AVONOID TRONG CHI ACONITUM 12           15  15  16  16  17  17  17   17  18   21  21  21  21 Á  23  24  31  32 32 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DM : dung môi. CHCl 3 : chloroform. EtOAc : ethyl acetat. EtOH : ethanol. MeOH : methanol.   DANH MỤC CÁC HÌNH A.burnatii, A.variegatum……………………………………………………………………… 4  A.angustifoliu   Hình 2.2.   Hình 3.1.  AlCl 3 21 Hình 3.2.  acid boric/ oxalic (2:1) 22 Hình 3.3.  23 Hình 3.4.  26 DANH MỤC CÁC BẢNG 1.  Aconitu 6        kaempferol     Aconitum 8  Aconitum 11    1 H-NMR(500MHz) và 13 C-NMR(125MHz) F3 24  1 H-NMR(500MHz) và 13 C-NMR(125MHz) F6 27 1 ĐẶT VẤN ĐỀ                                                   * , ROO *    -  -       Nghiên cứu chiết xuất, phân lập một số flavonoid từ lá cây Ô đầu trồng ở tỉnh Hà Giang”.  1. C  2.  flavonoid . 2 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN 1.1. Đặc điểm thực vật Aconitum  Aconitum  [8]:    Hoàng liên (Ranunculales)  Chi Aconitum L. Chi Aconitum là  Aconitum  (subgenera) là [10], [5]: - Phân chi Aconitum L. - Phân chi Lycotonum (DC.) Petermann - Phân chi Gymnaconitum (Stapf.) Rapaics. Aconitum     -  - - Lai Châu [5], [9]. 3 -        Lào Cai có tên A. carmichaeli Debx [5]. 1.2. Thành phần hóa học  Aconitum L  Alcaloid diterpenoid: aconitin, lappaconin, ranaconin  và các amin (dopamin, N  methyladrenalin, tyramin, ), ngoài ra còn có          M A.burnatii, A.variegatum  [...]... dịch chiết methanol từ lá cây ô đầu với thuốc thử acid boric/ oxalic (2:1) Như vậy từ kết quả định tính và hình ảnh sắc ký lớp mỏng của dịch chiết methanol cho thấy trong lá ô đầu có mặt nhóm hợp chất flavonoid 3.2 Chiết xuất, phân lập flavonoid từ lá cây Ô đầu 1,5 kg lá Ô đầu sau khi thu hái được làm sạch, sấy khô ở nhiệt độ 60 0C Lá Ô đầu sau đó được ngâm chiết trong ethanol (4 lần x 5lít/lần) Dịch chiết. .. 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Nghiên cứu định tính flavonoid trong lá cây Ô đầu 2.3.1.1 Định tính flavonoid bằng các phản ứng hoá học đặc trưng [3] * Nguyên tắc: Dùng các phản ứng hóa học đặc trưng của nhóm chất flavonoid để xác định sự có mặt của nhóm chất này trong nguyên liệu lá cây Ô đầu ở Hà Giang * Cách tiến hành: - Chuẩn bị dịch chiết: Cân khoảng 5g bột nguyên liệu lá cây Ô đầu cho vào bình... Mẫu dùng cho nghiên cứu hóa học là lá cây Ô đầu, thu hái tại huyện Quản Bạ, tỉnh Hà Giang Lấy lá cây khi cây đã ra hoa (lá còn tươi) Nguyên liệu lá cây Ô đầu được loại bỏ tạp chất, rửa sạch, để ráo nước, thái nhỏ, sấy khô ở 600C, bảo quản trong túi polyetylen kín, khô ráo 16 Hình 2.1 Mẫu tiêu bản giám định tên khoa học 2.2 Nguyên liệu, hóa chất và thiết bị nghiên cứu 22 hiết bị - Cân phân tích (Shimadzu... Một s flavo oid phâ lập đượ từ hi A o it m Theo các nghiên cứu gần đây trên thế giới, một số flavonoid đã được phân lập từ các bộ phận trên mặt đất của nhiều loài thuộc chi Aconitum, các flavonoid phân lập được chủ yếu là dẫn chất của : Kaempferol và Quercetin Một số flavonoid thuộc 2 nhóm chất này được trình bày ở bảng 1.1 và 1.2 * Nhóm dẫn chất Quercetin Các dẫn chất của Quercetin được phân lập từ. .. Cao chiết EtOAC (15g) Rửa giải bằng sắc ký cột Phân đoạn C Phân đoạn E Chất F3 Chất F6 Hình 2.2 Quy trình chiết xuất, phân lập các hợp chất từ lá cây Ô đầu 21 CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Định tính flavonoid trong lá cây Ô đầu 3 Đị h tí h bằ phả ứ hóa họ Định tính flavonoid bằng các phản ứng hóa học đặc trưng đã xác định sơ bộ sự có mặt flavonoid có trong dược liệu Bảng 3.1 Kết quả các phản ứng... cho khô, đặt vào bình sắc ký đã bão hòa dung môi Sau khi triển khai lấy bản mỏng ra khỏi bình, sấy nh cho bay hết dung môi Phát hiện vết ở ánh sáng thường và ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 254 nm, 366 nm và sau khi phun thuốc thử là dung dịch AlCl3 trong cồn 96% lên bản mỏng, sấy khô ở nhiệt độ 1100C rồi quan sát dưới ánh sáng thường 2.3.2 Chiết xuất, phân lập hợp chất trong lá cây Ô đầu + Phân lập các... TƯỢNG, NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Mẫu nghiên cứu thực vật là cây Ô đầu còn tươi, có đủ thân, rễ, hoa, lá, quả, được thu hái tại huyện Quản Bạ, tỉnh Hà Giang Mẫu đã được giám định tên khoa học là: Aconitum carmichaeli Debeaux, họ Hoàng Liên - Ranunculaceae Được lưu mẫu tại Phòng tiêu bản cây thuốc trường Đại Học Dược Hà Nội, mã số tiêu bản: HNIP/18057/14 do PGS.TS... bằng các hệ dung môi có độ phân cực tăng dần (n-Hexan : EtOAc) với nồng độ 24 EtOAc tăng từ 0-100%, (EtOAc : MeOH) với nồng độ MeOH tăng từ 0-80%, thu được 130 phân đoạn nhỏ, trong một số phân đoạn kiểm tra bằng sắc ký bản mỏng cho kết quả tương tự nhau được gộp lại thành các phân đoạn lớn hơn có kí hiệu là: C, E Sơ đồ chiết xuất, phân lập đã được trình bày ở mục 2.3.2, hình 2.2 Phân đoạn C (4.2g)... hóa ở 110oC trong 1h - Dung môi rửa giải: dùng hệ dung môi có độ phân cực tăng dần: n-hexan: EtOAc với nồng độ EtOAc tăng từ 0-100%, EtOAc : MeOH tăng từ 0-80% - Nhồi cột: Nhồi cột theo phương pháp nhồi cột ướt Cho một lượng vừa đủ dung môi rửa giải vào silicagel đã hoạt hóa, phân tán đều silica gel trong cốc có mỏ, loại hết bọt khí rồi đổ từ từ thành dòng vào cột theo thành cột chảy xuống Rửa thành... cộng hưởng từ hạt nhân một chiều và 2 chiều 20 Lá Ô đầu sấy khô, xay thô (5-10mm) Ngâm trong EtOH 96% (4 lần) Dịch chiết ethanol Cất thu hồi DM dưới áp suất giảm Cao chiết ethanol Kiềm hóa bằng Na2CO3, lọc loại tạp Dịch lọc Acid hóa bằng dd HCl + dd NaCl bão hòa Dịch lọc được acid hóa Chiết 3 lần bằng ethylacetat, cất thu hồi DM dưới áp suất giảm Cao chiết EtOAC (15g) Rửa giải bằng sắc ký cột Phân đoạn . ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THỦY NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ FLAVONOID TỪ LÁ CÂY Ô ĐẦU TRỒNG Ở TỈNH HÀ GIANG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI-2014 . NỘI-2014 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THỦY NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ FLAVONOID TỪ LÁ CÂY Ô ĐẦU TRỒNG Ở TỈNH HÀ GIANG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người.   Nghiên cứu chiết xuất, phân lập một số flavonoid từ lá cây Ô đầu trồng ở tỉnh Hà Giang .  1. C 