BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI NGUYỄN QUỲNH DIỆP NGHIÊN cúu BÀI THUỐC THEO HƯỚNG ĐlÊư TRỊ BỆNH VIÊM GAN VIRUS Khoá luận tốt nghiệp Dược sĩ đại học khoá 2002-2007 Giáo viên hướng dẫn: TS Phùng Hoà Bình Nơi thực hiện: Bộ môn dược học cổ truyền Phòng Dược lý sinh hoá - Viện dược liệu Thời gian thực hiện: 3/2007 - 5/2007 -Tiiư-VIẸS’ Hà Nội, 5/2007 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn chân thành, em xin được gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất tới TS. Phùng Hòa Bình người đã tận tình hướng dẫn em hoàn thành đề tài trong thời gian vừa qua. Em cũng xin được gửi lời cảm ơn tới DS. Nguyễn Kim Phượng - trưởng phòng Dược lý Sinh hóa - Viện Dược liệu đã giúp đỡ em hoàn thành phần thử tác dụng dược lý. Đồng thời em cũng xin gửi lời cảm ơn tới các thầy cô trong bộ môn Dược học cổ truyền, các cán bộ trường Đại học Dược đã tạo điều kiện cho em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp. Cuối cùng em xin gửi lòi cảm ơn sâu sắc tới gia đình và bạn bè đã luôn động viên, giúp đỡ em trong thời gian thực hiện đề tài. Hà Nội tháng 5/2007 Sinh viên Nguyễn Quỳnh Diệp CHỮ, KÝ HIỆU VIẾT TẮT TRONG KHOÁ LUẬN A alcaloid B berberin clorid chuẩn CN công năng CT chủ tri dd dung dịch dm dung môi F flavonoid HH hòe hoa HNĐC hoàng nhân điều can MeOH methanol MNC mẫu nghiên cứu NT nhân trần p palmatin clorid chuẩn MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ 1 PHẦN 1: TỔNG QUAN 2 1.1. Khái quát về bệnh viêm gan virus 2 1.1.1. Theo y học hiện đại 2 1.1.1.1. Viêm gan virus cấp 2 - Cơ chế bệnh sinh 2 - Triệu chứng 2 - Điều trị 3 1.1.1.2. Viêm gan virus mạn 4 - Triệu chứng lâm sàng 4 - Điều trị 5 1.1.2. Theo y học cổ truyền 5 1.1.2.1. Nguyên nhân và cơ chế bệnh sinh 5 1.1.2.2. Triệu chứng và phương pháp điều trị 6 - Thể cấp tính 6 - Thể mạn tính 6 1.2. Đặc điểm cơ bản của các vị thuốc trong bài thuốc “Hoàng nhân điều can” 7 * Công thức bài thuốc 7 1.2.1. Nhân trần 8 1.2.2. Chỉ thực 8 1.2.3. Hương phụ 10 1.2.4. Mộc hương 11 1.2.5. Đan sâm 13 1.2.6. Hòe hoa 14 1.2.7. Hoàng bá bắc 16 1.3. Một số phương thuốc điều trị viêm gan virus 19 1.4. Một số dạng bào chế thuốc cổ truyền 21 1.4.1. Các dạng bào chế cổ truyền 21 1.4.2. Các dạng bào chế hiện đại 23 PHẦN 2: NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ú u 24 2.1. Dược liệu 24 2.2. Phưoíng tiện 24 2.2.1. Hóa chất 24 2.2.2. Động vật thí nghiệm 24 2.3. Phương pháp nghiến cứu 24 2.3.1. Nghiên cứu về hóa học 24 2.3.2. Thử tác dụng bảo vệ gan 25 2.3.3. Bào chế cao lỏng 25 PHẦN 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 26 3.1. Nghiên cứu về thành phần hóa học 26 3.1.1. Định tính 26 3.1.1.1. Định tính bằng phản ứng hóa học 26 - Flavonoid 26 - Alcaloid 26 3.1.1.2. Sắc ký lớp mỏng 28 - Flavonoid 28 - Alcaloid 32 3.1.2. Định lượng flavonoid toàn phần bằng phương pháp cân 34 3.2. Nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan của bài thuốc 34 3.3. Bào chế cao lỏng 37 3.4. Bàn luận 38 PHẦN 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 41 Phụ lục 1: Danh mục các bài thuốc điều trị chứng hoàng đản (do can đởm thấp nhiệt) Phụ lục 2: Các phương thuốc điều trị viêm gan Phụ lục 3: Các nhóm thuốc, vị thuốc thường dùng trong bài thuốc điều trị viêm gan vius đ ặ t v A í đ ề Gan là cơ quan lớn nhất trong cơ thể [33],[40]. Nó đóng một vai trò sống còn trong việc điều hòa các diễn tiến của sự sống. Cơ quan phức tạp này thực hiện nhiều chức năng thiết yếu cho cuộc sống như bài tiết mật [10],[40], biến đổi thức ăn thành những chất cần thiết cho sự sống và phát triển [13], tổng hợp và dự trữ nhiều chất quan trọng cho cơ thể [1 0 ], chuyển hoá các thuốc được hấp thu từ đường tiêu hoá thành dạng cơ thể có thể dùng được, giải độc và bài tiết các chất độc trong cơ thể [33],[10],[40]. Nghiên cứu thuốc để phục hồi, bảo vệ chức năng gan là một hướng nghiên cứu của các nhà y dược học. Trong y học cổ truyền, bệnh viêm gan virus được mô tả trong chứng hoàng đản [11]. Có rất nhiều bài thuốc được sử dụng điều trị chứng bệnh này. Từ kinh nghiệm sử dụng điều trị bệnh trên lâm sàng, chúng tôi sàng lọc, xây dựng một công thức bài thuốc theo nguyên lý y học cổ truyền trên cơ sở phân tích tác dụng theo y học cổ truyền. Bài thuốc được lấy tên là “Hoàng nhân điều can”. Với ý tưởng tìm hiểu tác dụng bài thuốc này, chúng tôi thực hiện đề tài: “Nghiên cứu bài thuốc theo hướng điều trị bệnh viêm gan virus” nhằm các mục tiêu: 1. Bước đầu nghiên cứu một số tác dụng dược lý liên quan đến tác dụng điều trị của bài thuốc. 2 . Nghiên cứu một số chỉ tiêu hỗ trợ kiểm nghiệm chế phẩm dịch nước sắc bài thuốc. Để thực hiện các mục tiêu trên, đề tài bao gồm các nội dung sau: 1 . Nghiên cứu về hoá học 2 nhóm hoạt chất alcaloid và Aavonoid. 2 . Nghiên cứu tác dụng dược lý của bài thuốc theo hướng điều trị viêm gan virus. 3. Nghiên cứu thăm dò chế phẩm dịch nước sắc bài thuốc. PHẦN 1: TỔNG QUAN 1.1. KHÁI QUÁT VỂ BỆNH VIÊM GAN VIRUS 1.1.1. Theo y học hiện đại Theo y học hiện đại, viêm gan virus là một bệnh nhiễm trùng toàn thân [30,202], có tổn thương thoái hoá, hoại tử tế bào gan và những tổn thương của mô đệm trong gan do phản ứng viêm gây nên [9,361]. Bệnh gây ra do 5 loại virus là A, B, c, D và E (virus D được xem là virus không hoàn chỉnh do đó muốn gây bệnh cần phối hợp với virus B hoặc C) [30,202]. Theo thống kê của Tổ chức Y thế thế giới (WHO) thì hiện nay trên thế giới có khoảng 2 tỉ người nhiễm siêu vi viêm gan [29,82]. Viêm gan A và E được gọi là viêm gan nhiễm trùng, viêm gan B và c gọi là viêm gan huyết thanh vì chủ yếu lây qua đường máu [30,202]. Viêm gan virus có 2 thể là thể cấp tính và thể mạn tính. 1.1.1.1. Viêm gan virus cấp * Cơ chế bệnh sinh [30,204] Tổn thương thường gặp trong viêm gan virus cấp là viêm hoại tử từng ổ tế bào gan, đồng thời vói sự đáp ứng của tế bào viêm đcfn nhân. Các khoảng cửa thâm nhiễm tế bào lympho và các tiểu mật quản tăng sinh. Các tế bào hoại tử được thay thế bằng các tế bào viêm đơn nhân. Các tế bào viêm bị trướng nước hoặc teo nhỏ lại, bào tương trở lên đồng nhất ưa acid, nhân tế bào bị hư biến thành thể ái toan. Bè gan bị phá vỡ với sự tăng sinh của các tế bào Kuffer và gây ra ứ mật. Nặng hcfn là hoại tử cầu nối và hoại tử đám hoặc mảng mà hậu quả là đưa đến sự sụp đổ từng mảng nhu mô gan gây nên tình trạng viêm gan bán cấp hoặc teo gan vàng cấp. * Triệu chứng - Lâm sàng ơiia làm 3 giai đoạn + Thòi kì trước vàng da: biểu hiện như một tình trạng cảm cúm, mệt mỏi, đau đầu, đau khớp, chán ăn, rối loạn tiêu hoá (nôn, ỉa cháy hoặc táo bón ) kéo dài 5-7 ngày trước khi xuất hiện vàng da. Sốt nhẹ 37,5 -38°c, ít khi sốt cao 39- 40°c Cảm giác tức, khó chịu vùng hạ sườn phải [13,128], [29,83], [30,43], [30,205]. + Thời kì vàng da: kéo dài khoảng 2-4 tuần, da và mắt vàng rõ, phân bạc màu, nước tiểu ít và vàng sậm, gan to, chắc, trofn láng, ấn đau, mệt mỏi, ủ rũ [29,84], [30,43], [30,206]. + Thời kì sau vàng da: các triệu chứng lâm sàng dần biến mất, bệnh nhân bắt đầu khoẻ lại, ăn ngon miệng, da và niêm mạc dần hết vàng, phân, nước tiểu trở lại bình thường. 3/4 số bệnh nhân lành bệnh, số còn lại có thể thành viêm gan mạn [30,206]. - Cận lâm sàng [30,206] + Men transaminase: gia tăng suốt thời kỳ vàng da nhưng mức độ tăng không hoàn toàn tỉ lệ với mức độ tổn thương gan. Thường cao gấp 10-20 lần bình thường và giảm dần trong thời kỳ phục hồi [13,128],[30,43]. + Billirubin; khi vàng da rõ có thể lên đến 20mg%, billimbin vẫn tiếp tục cao dù men transaminase giảm, trong phần lớn trường hợp trực tiếp và gián tiếp tương đương nhau [30,43]. + Phosphatase kiềm: tăng ít, 1-2 lần bình thường hoặc không tăng. + Albumin máu giảm và globulin tăng. + Tỉ lệ prothrombin giảm nhẹ, ít khi < 60%. + Đường máu giảm nhẹ trong 50% trưòỉng hợp. + Công thức máu: giảm nhẹ nhất là bạch cầu, lympho tăng. * Điều trị [30,211] Không có điều trị đặc hiệu viêm gan virus cấp, chủ yếu là các biện pháp hỗ trợ. - Chế độ ăn uống nghỉ ngoi: mục đích là cung cấp đủ năng lượng và chất bổ dưỡng cho bệnh nhân, khoảng 2000-2500 calo/ngày ( 300g glucid/ngày, 100- 150g protid/ngày, 50-60g lipid/ngày, nhiều nước hoa quả). Nếu bệnh nhân quá chán ăn thì có thể cho ăn qua đường ống thông miệng hoặc tiêm truyền. Cần kiêng rượu, tránh các thuốc độc cho gan, nhất là các thuốc an thần và kháng sinh. Trong giai đoạn vàng da, nghỉ ngcà là cần thiết vì bệnh nhân quá mệt. - Thuốc + Thuốc bổ: vitamin A,E,D,C, vitamin nhóm B + Thuốc bổ gan: Amorvita - hải sâm, Boganic, Arginine veyron, Atsso, Bifesin, Centasia, Chophytol, Eganin, Hepaphyl + Corticoid: không nên sử dụng nhiều do có nhiều tác dụng phụ có hại. + Thuốc kháng virus: viradabine, viramidine + Interferon: dùng sớm có thể ngăn ngừa chuyển thành mạn tính đối với viêm ganC. 1.1.1.2. Viêm gan mạn tính do virus Viêm gan mạn tính bao gồm nhiều bệnh có nguyên nhân khác nhau nhưng đều dẫn đến quá trình viêm mạn tính ở gan. Viêm gan mạn tính là bệnh gan có tổn thưoíig hoại tử và viêm, có hoặc không có kèm theo xơ hoá, diễn ra trong thời gian trên 6 tháng [14,113], [29,86], [30,213]. ở đây chỉ đề cập đến viêm gan mạn do virus. * Triệu chứng lâm sàng [13,128], [14,114], [30,218]. - Triệu chứng khởi đầu có thể biểu hiện những đợt rầm rộ như trong viêm gan cấp (1/3). Phần còn lại thường âm thầm, chỉ biểu hiện bcfi triệu chứng cơ năng chung là mỏi mệt, cảm giác nặng tức vùng hạ sườn phải, nhiều lúc có đau cơ, đau khớp hoặc nhiều lúc chỉ có cảm giác nhức mỏi chung chung. - Trong đợt tiến triển, các triệu chứng thưcỉng phong phú và rầm rộ hơn với sốt, vàng da vàng mắt, nước tiểu vàng hoặc sẫm màu, đau cơ đau khớp, và nhất là đau tức vùng gan. [...]... hiện ngoài gan: ban da, viêm tuyến giáp tự miễn, viêm mạch, viêm cầu thận - Giai đoạn sau khi đã có biến chứng xơ gan, các biểu hiện viêm thường giảm dần, thay vào đó là các triệu chứng của xơ gan cổ chướng và suy gan là nổi bật * Điều trị [14,126] - Interferon: chỉ định dùng + Viêm gan mạn đang hoạt động: transaminase tăng 1,5-2 lần bình thường, sinh thiết gan: viêm hoạt động + Thời điểm virus đang... ương, sau khi dùng thuốc hoạt động tự nhiên và các phản ứng của chuột đều bị ức chế 16 - Cao chiết bằng cồn 80% của các sản phẩm vỏ phellodendri được sao với cồn có tác dụng quét gốc tự do và chống peroxyd hoá lipid mạnh [23], NHẬN XÉT CHUNG Các vị thuốc trong bài đều có tác dụng liên quan đến bệnh viêm gan, đặc biệt là vị nhân trần Do đó việc nghiên cứu bài thuốc theo hướng điều trị viêm gan là rất khả... thường xảy ra sau khi mắc các bệnh viêm gan cấp (viêm gan virus, viêm gan do nhiễm độc ) hoặc tình trạng suy dinh dưỡng kéo dài - Triệu chứng: rối loạn tiêu hoá, đau tức vùng hạ sườn phải, ăn kém, sợ mỡ Trong các đợt tiến triển có sốt, vàng da, vàng mắt, đau tức vùng hạ sườn phải tăng lên - Điều trị; thể âm hoàng có 4 loại Với mỗi một loại lại có phương pháp điều trị và bài thuốc riêng + Can nhiệt tỳ... giật - Phương pháp điều trị: + Thể vàng da: thanh thấp nhiệt can đởm, nhuận tràng (nếu có táo bón) Bài thuốc: Siro nhuận gan + Thể nặng (cấp hoàng do teo gan cấp): thanh nhiệt táo thấp, lương huyết Hiện nay trong tình trạng bệnh nặng, nguy cấp thì phối hợp vói phương pháp điều trị của y học hiện đại Bài thuốc: Long đởm tả can thang + Thể không có vàng da: thanh nhiệt lợi thấp Bài thuốc: Ngũ linh tán... mộc lOg Ngõa lăng tử lOg Ngũ linh chi lOg CN: hoạt huyết, trừ ứ tắc CT: bệnh viêm gan mạn tính 1.4 MỘT SỐ DẠNG BÀO CHẾ THUỐC cổ TRƯYỂN 1.4.1 Các dạng bào chế cổ truyền Gồm các dạng thuốc thang, thuốc bột, thuốc hoàn, rượu thuốc, cao thuốc 1.4.1.1 Thuốc thang và dịch sắc [5,27] - Cấu tạo từ các vị thuốc đã được chế biến, phối ngũ theo phương pháp y học cổ truyền, được bào chế bằng cách sắc vói dm là... thuốc) - Đặc điểm thuốc thang; + Là dạng thuốc rất thông dụng, được dùng rộng rãi để phòng và trị nhiều loại bệnh, đối với các lứa tuổi và các loại bệnh hư, thực + Được hấp thu tương đối nhanh qua đường tiêu hoá [22,50] + Đặc trị cho cá thể bệnh nhân,dễ gia giảm cho phù hợp với tình trạng, diễn tiến bệnh, do đó có thể đưa lại hiệu quả điều trị cao, nhưng cũng gặp nhiều phiền hà trong bào chế 21 + Thuốc. .. giáng áp - Giảm đau, chống viêm 5 Hòe hoa - Thanh nhiệt bình can - Chống viêm - Chống viêm - Bảo vệ tế bào gan 6 Đan sâm - Hoạt huyết - Úc chế vi khuẩn - Bổ can tâm - Giảm những biến đổi bệnh lý trong trường hợp tổn thương gan cấp tính gây bởi CCI4 7 Hoàng bá bắc - Tư âm giáng hỏa - Thanh thấp nhiệt can đởm 18 - Kháng khuẩn 1.3 MỘT SỐ PHƯƠNG THUỐC có TÁC DỤNG ĐlỂU TRỊ VIÊM GAN VIRUS 1 Phương Hoàng liên... lợi thấp, kiện tỳ trừ thấp Bài thuốc: Nhân trần ngũ linh tán gia giảm + Can uất tỳ hư khí trệ: sơ can, kiện tỳ, lí khí Bài thuốc: Sài hồ sơ can thang gia giảm + Can âm bị thương tổn: tư dưỡng can âm + Khí trệ huyết ứ; sơ can lí khí, hoạt huyết Bài thuốc: Tứ vật đào hồng gia giảm 1.2 ĐẶC ĐIỂM C ơ BẢN CỦA CÁC VỊ THUỐC TRONG BÀI THUỐC “ HOÀNG NHÂN ĐIỂU CAN” * Công thức bài thuốc Nhân trần 20g Đan sâm... HBeAg +, HBV DNA + + Không có xơ gan mất bù + Không có chống chỉ định - Thuốc giống nucleoside thế hệ 2 Famciclovire và Lamivudine mới được dùng trong vài năm gần đây, khi interferon không có kết quả, Thuốc tác dụng tốt, kìm hãm sự nhân lên của virus, ngưòi bệnh chịu đựng thuốc tốt - Thimosine (Zadazine): tác dụng như interferon 1.1.2 Theo y học cổ truyền Bệnh viêm gan virus được miêu tả trong phạm vi... thường được dùng để trị bệnh cấp tính, một số để trị bệnh mạn tính hoặc bồi bổ cơ thể Đối với các vị thuốc thông thường (không độc, tính ôn, lương), điều trị cấp tính liều thường dùng 70-80g/ngày đến 150-200g/ngày Đối với các vị thuốc mạnh ( độc, tính đại hàn, hàn, nhiệt, đại nhiệt) thì liều dùng nhỏ hofn + Tác dụng của dạng thuốc thang là tác dụng tổng hợp của nhiều vị thuốc, nhóm thuốc để tăng hiệu . Aavonoid. 2 . Nghiên cứu tác dụng dược lý của bài thuốc theo hướng điều trị viêm gan virus. 3. Nghiên cứu thăm dò chế phẩm dịch nước sắc bài thuốc. PHẦN 1: TỔNG QUAN 1.1. KHÁI QUÁT VỂ BỆNH VIÊM GAN VIRUS 1.1.1 nhân điều can”. Với ý tưởng tìm hiểu tác dụng bài thuốc này, chúng tôi thực hiện đề tài: Nghiên cứu bài thuốc theo hướng điều trị bệnh viêm gan virus nhằm các mục tiêu: 1. Bước đầu nghiên cứu. thấp nhiệt) Phụ lục 2: Các phương thuốc điều trị viêm gan Phụ lục 3: Các nhóm thuốc, vị thuốc thường dùng trong bài thuốc điều trị viêm gan vius đ ặ t v A í đ ề Gan là cơ quan lớn nhất trong cơ