Đang tải... (xem toàn văn)
ĐẶT VẤN ĐỀ Dioxin là một nhóm các hợp chất hữu cơ độc hại, là sản phẩm phụ không mong muốn của một số ngành công nghiệp hóa chất và đốt cháy các sản phẩm hữu cơ. Với dặc tính không hòa tan trong nước, khó thoái hóa nên trong môi trường bị ô nhiễm, dioxin lắng đọng trong đất, cặn bùn và tích trữ sinh học vào một số loại động vật có trong chuỗi thức ăn của con người. Khi xâm nhập vào cơ thể con người, dioxin tích lũy chủ yếu ở các mô mỡ trong cơ thể và đào thải rất chậm [1]. Dioxin tác động đến quá trình sinh sản và phát triển, gây rối loạn hệ thống miễn dịch và nội tiết của cơ thể ngay cả khi chỉ có hàm lượng rất nhỏ. Nó tác động đến nhiều cơ quan, hệ cơ quan trong cơ thể gây ra những rối loạn bệnh lý phức tạp và đa dạng, điều đó làm giảm tuổi thọ ở những người bị phơi nhiễm cũng như con cái họ ở những thế hệ kế tiếp trong tương lai [2]. Trong cuộc chiến tranh tại Việt Nam giai đoạn 1961 đến 1972 quân đội Mỹ đã rải một lượng lớn các chất diệt cỏ có tạp nhiễm một lượng lớn dioxin trong thành phần xuống nhiều vùng rộng lớn ở miền Nam Việt Nam, nhằm mục đích phát quang để phá hủy nơi ẩn lấp của quân đội giải phóng chiến đấu ở miền Nam Việt Nam [3]. Do đặc tính bền vững của dioxin, cho đến nay tác động của nó đã và vẫn đang gây nên những hậu quả nghiêm trọng đối với sức khoẻ con người và môi trường sống ở Việt Nam, đặc biệt các bà mẹ và trẻ em tại các khu vực phơi nhiễm dioxin. Dioxin ảnh hưởng tới bào thai từ rất sớm qua nhau thai. Những trẻ nhỏ tiếp xúc với dioxin sẽ bị ảnh hưởng về phát triển thể chất và tâm thần [2], [4],[5]. Phơi nhiễm dioxin gây các tác dụng độc hại mà một trong số đó là tác động trên hệ thống nội tiết. Bên cạnh đó, với đặc tính ưa lipid của dioxin nên ở người mẹ cho con bú, dioxin và các đồng phân của nó chủ yếu tập trung vào sữa mẹ. Như vậy, sữa mẹ là một con đường thải trừ dioxin chủ yếu. Nồng độ dioxin trong sữa mẹ phụ thuộc vào mức độ tiếp xúc và loại đồng phân dioxin. Mặt khác, dioxin và polychlorinated biphenyls (PCBs) đã được chứng minh là tích lũy trong tuyến thượng thận khi xâm nhập vào cơ thể. Đồng thời làm thay đổi tổng hợp hormon steroid vỏ thượng thận theo liều lượng và thời gian tác động. Tuy nhiên, những tác động của dioxin trên hormon steroid thượng thận chưa được điều tra kỹ lưỡng và chỉ thông qua đánh giá trên thực nghiệm. Hơn nữa, chưa có nhiều nghiên cứu về nồng độ dioxin trong chiến tranh liên quan đến hormon streroid trong huyết thanh, đặc biệt là nồng độ hormon steroid trong nước bọt ở người mẹ và trẻ em sống ở khu vực điểm nóng dioxin Việt Nam. Vì vậy, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài “nghiên cứu sự thay đổi nồng độ hormon steroid trong nước bọt, sữa và huyết thanh trên những người sống tại vùng phơi nhiễm chất da cam/dioxin ở Việt Nam” với mục tiêu: 1. Xác định nồng độ dioxin trong sữa của những người mẹ sống tại Phù Cát - Bình Định. 2. Xác định nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ và con, trong sữa và huyết thanh của người mẹ sống tại Phù Cát - Bình Định. 3. Tìm hiểu mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt, sữa và huyết thanh với nồng độ dioxin trong sữa của những người mẹ.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC HÀ NỘI ĐÀO VĂN TÙNG NGHIÊN CỨU SỰ THAY ĐỔI NỒNG ĐỘ HORMON STEROID TRONG NƯỚC BỌT, SỮA VÀ HUYẾT THANH TRÊN NHỮNG NGƯỜI SỐNG TẠI VÙNG PHƠI NHIỄM CHẤT DA CAM/DIOXIN Ở VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Chuyên ngành: Hoá sinh y học Mã số: 62720112 Hướng dẫn 1:TS. Đặng Đức Nhu Hướng dẫn 2: GS. TS. Teruhiko Kido HÀ NỘI, 2015 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành chương trình nghiên cứu sinh và viết luận án này, em đã nhận được sự hướng dẫn, giúp đỡ nhiệt tình của quý thầy cô. Cho phép em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: GS. TS. Teruhiko Kido, Trưởng Khoa Khoa học sức khỏe, Viện đào tạo Y dược và Khoa học sức khỏe, Trường Đại Học Kanazawa, thầy đã tận tình giúp đỡ, cho em kiến thức và kinh nghiệm, đồng thời hỗ trợ phương tiện kinh phí để đề tài được thực hiện. TS. Đặng Đức Nhu, Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, thầy đã tận tình hướng dẫn giúp đỡ, động viên và tạo mọi điều kiện thuận lợi để em thực hiện đề tài và hoàn thành luận án. PGS. TS. Phạm Thiện Ngọc, GS. TS. Tạ Thành Văn Bộ Môn Hóa sinh, Trường Đại học Y Hà Nội, thầy đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ và truyền thụ cho em những kiến thức quý báu để thực hiện đề tài. Tôi xin trân trọng cảm ơn: Ban Giám Hiệu, Phòng Đào tạo sau Đại học, Ban 10-80, tập thể Bộ môn Hóa sinh Trường Đại Học Y Hà Nội đã tạo điều kiện thuận lợi cho em trong suốt quá trình học tập tại trường. Ban Giám Đốc, Khoa Sinh hóa Bệnh viện Việt Tiệp Hải Phòng đã luôn quan tâm ủng hộ, tạo điều kiện thuận lợi trong suốt quá trình học tập. Trân trọng biết ơn sự chia sẻ, giúp đỡ và động viên sâu sắc của gia đình, bạn bè và đồng nghiệp. LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận án là trung thực, do tôi thực hiện và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ một công trình nghiên cứu nào khác. Đào Văn Tùng DANH MỤC VÀ KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT ACTH : Adrenocorticotropic Hormone Kích tố vỏ thượng thận Adion : Androtenedion AND : Acid Deoxyribo Nucleic AhR : Aryl hydrocarbon Receptor Thụ thể Aryl hydrocarbon ARN : Acid Ribonucleic mARN : messenger Acid Ribonucleic IARC : International Agency for Research on Cancer Cơ quan nghiên cứu Quốc tế về ung thư CAH : Congenital Adrenal Hyperplasia Tăng sản thượng thận bẩm sinh CDC : Centers for Disease Control and Prevention Trung tâm kiểm soát và phòng ngừa dịch bệnh Hoa Kỳ CLIA : Chemiluminescent Immuno Assay Xét nghiệm miễn dịch hóa phát quang DDI : Daily Dioxin Intake Lượng dioxin tiêu thụ hàng ngày DHEA : Dehydroepiandrosteron DHEA-S : Dehydroepiandrosterone Sulfate DR CALUX : Dioxin Response Chemically Activated Luciferase gene Expression Kỹ thuật cảm biến sinh học tế bào để định lượng dioxin E1 : Estron E2 : Estradiol ECL : Electrode Chemi Luminescence Kỹ thuật điện hóa phát quang EGFR : Epidermal Growth Factor Receptor Thụ thể phát triển biểu bì ELISA : Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kỹ thuật miễn dịch enzym FIA : Fluoroimmunoassay Xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang FSH : Follicle-Stimulating Hormone Kích thích tố nang trứng 3β-HSD : 3β hydroxysteroid dehydrogenase 17β-HSD : 17β-hydroxysteroid dehydrogenase HRGC/HRMS : High-resolution gas chromatography/high-resolution mass Hệ thống sắc ký khí khối phổ có độ phân giải cao IL : Interleukin IOM : Institute of Medicine Viện hàn lâm Khoa học Hoa Kỳ LC-MS/MS : Liquid Chromatography–Mass Spectrometry- Mass Spectrometry Hệ thống sắc ký lỏng khối phổ song song LH : Luteinizing Hormone Kích thích tố thể vàng NIOSH : National Institute for Occupational Safety and Health Viện nghiên cứu Sức khỏe và Bảo hộ lao động Hoa Kỳ P 450 SCC : Men tách chuỗi bên cholesterol (CYP11A1) P 450 C11β : 11β- Hydroxylase (CYP11B1) P 450 C11AS : Aldosteron Synthetase (CYP11B2) P 450 C17 : 17α-Hydroxylase (CYP17) P 450 C19β : 11β- Hydroxylase (CYP19A1) P 450 C21 : 21β- Hydroxylase (CYP21A2) RIA : Radioimmunoassay kỹ thuật miễn dịch phóng xạ SECA : The Southern Early Childhood Association TEQ : Toxic Equivalent TEFs : Toxic Equivalency Factor T 4 : Thyroxin T 3 : Triiodothyronin TCDD : 2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-para-dioxin TCDF : 2,3,7,8-tetrachlorodibenzofuran TNF : Tumor Necrosis Factor cytokine thuộc yếu tố gây hoại tử PCBs : Polychlorinate biphenyls. PCDD : Polychlorinated dibenzo-para-dioxins PCDFs : Polychlorinated dibenzofuran ppt : parts-per-trillion Một phần nghìn tỷ WHO : World Health Organization Tổ chức Y tế Thế giới U.S EPA : United States Environmental Protection Agency Cơ quan bảo vệ môi trường Hoa Kỳ PGHS-2 : Prostaglandin-Encoperoxide H 2 synthase-2 MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cảm ơn Lời cam đoan Danh mục chữ viết tắt Mục lục Danh mục các bảng Danh mục các biểu đồ Danh mục các hình ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 3 1.1. Hormon steroid 3 1.1.1. Đại cương hormon steroid 3 1.1.2. Các loại hormon steroid 4 1.1.3. Tổng hợp hormon steroid 7 1.1.4. Tác dụng sinh học 9 1.1.5. Một số phương pháp định lượng hormon steroid 11 1.2. Chất độc da cam/dioxin 17 1.2.1. Công thức hóa học 18 1.2.2. Tính chất lý học, hóa học của dioxin 19 1.2.3. Các nguồn ô nhiễm 21 1.2.4. Chuyển hóa và bài tiết 22 1.2.5. Cơ chế tác động 24 1.2.6. Lịch sử ô nhiễm dioxin ở Việt Nam 27 1.2.7. Ảnh hưởng của dioxin đối với sức khỏe con người 28 1.2.8. Một số phương pháp định lượng dioxin 39 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 43 2.1. Khu vực nghiên cứu 43 2.2. Đối tượng nghiên cứu 44 2.2.1. Tiêu chuẩn lựa chọn 46 2.2.2. Tiêu chuẩn loại trừ 46 2.3. Phương pháp nghiên cứu 46 2.4. Các quy trình và kỹ thuật nghiên cứu 46 2.4.1. Quy trình lấy mẫu 46 2.4.2. Kỹ thuật định lượng dioxin trong sữa 50 2.4.3. Kỹ thuật định lượng hormon steroid bằng kỹ thuật sắc ký lỏng khối phổ kép 52 2.5. Ước tính lượng dioxin hấp thụ hàng ngày ở trẻ bú sữa mẹ 55 2.6. Địa điểm phân tích 55 2.7. Xử lý số liệu nghiên cứu 56 2.8. Đạo đức nghiên cứu 57 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 58 3.1. Đặc điểm chung 58 3.1.1. Đặc điểm chung của mẹ 58 3.1.2. Đặc điểm chung của con 59 3.2. Nồng độ dioxin trong sữa mẹ 61 3.3. Nồng độ hormon steroid trong nước bọt 67 3.3.1. Nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ tại thời điểm con từ 4 đến 16 tuần tuổi 67 3.3.2. Nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ tại thời điểm sau một năm cho con bú 70 3.3.3. Nồng độ hormon steroid trong nước bọt của trẻ tại thời điểm 3 tuổi 73 3.4. Nồng độ hormon steroid trong sữa và huyết thanh của mẹ 75 3.4.1. Nồng độ hormon steroid trong sữa mẹ tại thời điểm con từ 4 đến 16 tuần tuổi 75 3.4.2. Nồng độ hormon steroid trong huyết thanh của mẹ tại thời điểm sau một năm cho con bú 77 3.5. Tỷ lệ nồng độ hormon steroid trong nước bọt và huyết thanh của mẹ sau một năm cho con bú 80 3.6. Mối tương quan giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid 82 3.6.1. Mối tương quan giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid trong nước bọt 82 3.6.2. Mối tương quan giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid trong sữa và huyết thanh của mẹ 85 3.7. Mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt với hormon steroid trong sữa và huyết thanh 87 3.7.1. Mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ với hormon steroid trong sữa tại thời điểm con từ 4 đến 16 tuần tuổi 87 3.7.2. Mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ với hormon steroid trong huyết thanh tại thời điểm sau một năm cho con bú 88 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 89 4.1. Đặc điểm chung 89 4.1.1. Đặc điểm của khu vực nghiên cứu 89 4.1.2. Đặc điểm của đối tượng nghiên cứu 90 4.2. Nồng độ dioxin trong sữa mẹ 92 4.3. Mô hình đáp ứng liều giữa dioxin và hormon steroid 94 4.4. Nồng độ hormon steroid trong nước bọt 98 4.4.1. Nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ 98 4.4.2. Nồng độ hormon steroid trong nước bọt của con 101 4.4. Nồng độ hormon steroid trong sữa và huyết thanh của mẹ 106 4.4.1. Nồng độ hormon steroid trong sữa mẹ tại thời điểm con từ 4 đến 16 tuần tuổi 106 4.4.2. Nồng độ hormon steroid trong huyết thanh của mẹ tại thời điểm sau một năm cho con bú 107 4.5. Tỷ lệ nồng độ hormon steroid trong nước bọt và huyết thanh của người mẹ sau một năm cho con bú 108 4.6. Mối liên quan giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid 110 4.7. Mối liên quan giữa nồng độ dioxin trong sữa mẹ với chỉ số cơ thể trẻ 113 4.8. Mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt với hormon steroid trong sữa và huyết thanh 117 KẾT LUẬN 120 KIẾN NGHỊ 123 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC [...]... tôi tiến hành nghiên cứu đề tài nghiên cứu sự thay đổi nồng độ hormon steroid trong nước bọt, sữa và huyết thanh trên những người sống tại vùng phơi nhiễm chất da cam/dioxin ở Việt Nam” với mục tiêu: 1 Xác định nồng độ dioxin trong sữa của những người mẹ sống tại Phù Cát - Bình Định 2 Xác định nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ và con, trong sữa và huyết thanh của người mẹ sống tại Phù Cát... giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid trong sữa và huyết thanh của mẹ 85 3.7 Mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt với hormon steroid trong sữa và huyết thanh 87 3.7.1 Mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ với hormon steroid trong sữa tại thời điểm con từ 4 đến 16 tuần tuổi 87 3.7.2 Mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong. .. 4.4.1 Nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ 98 4.4.2 Nồng độ hormon steroid trong nước bọt của con 101 4.4 Nồng độ hormon steroid trong sữa và huyết thanh của mẹ 106 4.4.1 Nồng độ hormon steroid trong sữa mẹ tại thời điểm con từ 4 đến 16 tuần tuổi 106 4.4.2 Nồng độ hormon steroid trong huyết thanh của mẹ tại thời điểm sau một năm cho con bú 107 4.5 Tỷ lệ nồng độ hormon. .. sánh nồng độ các hormon steroid trong sữa những người mẹ sinh con thứ ở Kim Bảng và Phù Cát 76 Bảng 3.22 So sánh nồng độ hormon steroid trong huyết thanh của mẹ ở Kim Bảng và Phù Cát 77 Bảng 3.23 So sánh nồng độ hormon steroid trong huyết thanh người mẹ sinh con đầu lòng ở Kim Bảng và Phù Cát 78 Bảng 3.24 So sánh nồng độ hormon steroid trong huyết thanh những người mẹ sinh con thứ ở. .. sánh nồng độ các hormon steroid trong sữa những người mẹ sinh con thứ ở Kim Bảng và Phù Cát 76 Bảng 3.22 So sánh nồng độ hormon steroid trong huyết thanh của mẹ ở Kim Bảng và Phù Cát 77 Bảng 3.23 So sánh nồng độ hormon steroid trong huyết thanh người mẹ sinh con đầu lòng ở Kim Bảng và Phù Cát 78 Bảng 3.24 So sánh nồng độ hormon steroid trong huyết thanh những người mẹ sinh con thứ ở. .. sánh nồng độ hormon steroid trong nước bọt của những người mẹ ở Kim Bảng và Phù Cát 70 Bảng 3.14 So sánh nồng độ hormon steroid trong nước bọt người mẹ sinh con đầu lòng ở Kim Bảng và Phù Cát 71 Bảng 3.15 So sánh nồng độ hormon steroid trong nước bọt những người mẹ sinh con thứ ở Kim Bảng và Phù Cát 72 Bảng 3.16 So sánh nồng độ hormon steroid trong nước bọt của trẻ ở Kim Bảng và Phù... sánh nồng độ hormon steroid trong nước bọt của những người mẹ ở Kim Bảng và Phù Cát 70 Bảng 3.14 So sánh nồng độ hormon steroid trong nước bọt người mẹ sinh con đầu lòng ở Kim Bảng và Phù Cát 71 Bảng 3.15 So sánh nồng độ hormon steroid trong nước bọt những người mẹ sinh con thứ ở Kim Bảng và Phù Cát 72 Bảng 3.16 So sánh nồng độ hormon steroid trong nước bọt của trẻ ở Kim Bảng và Phù... dioxin trong sữa những người mẹ sinh con đầu lòng và con thứ 66 Bảng 3.10 So sánh nồng độ các hormon steroid trong nước bọt của những người mẹ ở Kim Bảng và Phù Cát 67 Bảng 3.11 So sánh nồng độ các hormon steroid trong nước bọt những người mẹ sinh con đầu lòng ở Kim Bảng và Phù Cát 68 Bảng 3.12 So sánh nồng độ các hormon steroid trong nước bọt những người mẹ sinh con thứ ở Kim Bảng và Phù... 75 3.4.2 Nồng độ hormon steroid trong huyết thanh của mẹ tại thời điểm sau một năm cho con bú 77 3.5 Tỷ lệ nồng độ hormon steroid trong nước bọt và huyết thanh của mẹ sau một năm cho con bú 80 3.6 Mối tương quan giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid 82 3.6.1 Mối tương quan giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid trong nước bọt ... dioxin trong sữa những người mẹ sinh con đầu lòng và con thứ 66 Bảng 3.10 So sánh nồng độ các hormon steroid trong nước bọt của những người mẹ ở Kim Bảng và Phù Cát 67 Bảng 3.11 So sánh nồng độ các hormon steroid trong nước bọt những người mẹ sinh con đầu lòng ở Kim Bảng và Phù Cát 68 Bảng 3.12 So sánh nồng độ các hormon steroid trong nước bọt những người mẹ sinh con thứ ở Kim Bảng và Phù . TÙNG NGHIÊN CỨU SỰ THAY ĐỔI NỒNG ĐỘ HORMON STEROID TRONG NƯỚC BỌT, SỮA VÀ HUYẾT THANH TRÊN NHỮNG NGƯỜI SỐNG TẠI VÙNG PHƠI NHIỄM CHẤT DA CAM/DIOXIN Ở VIỆT NAM LUẬN. giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt với hormon steroid trong sữa và huyết thanh 87 3.7.1. Mối tương quan giữa nồng độ hormon steroid trong nước bọt của mẹ với hormon steroid trong sữa tại. quan giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid trong nước bọt 82 3.6.2. Mối tương quan giữa nồng độ dioxin trong sữa với nồng độ hormon steroid trong sữa và huyết thanh của