1 KHÁI QUÁT CHUNG VỀ LUẬN ÁN 1. Tính cấp thiết của luận án Nuôi tôm sú ở nước ta trong những năm gần đây đang gặp không ít khó khăn, dịch bệnh xảy ra ở nhiều vùng nuôi, gây thiệt hại đáng kể. Tôm he chân trắng (Litopenaeus vannamei), đối tượng nuôi có nhiều ưu điểm, đã được lựa chọn cho đa dạng hoá đối tượng nuôi ở nhiều quốc gia châu Á. Các công trình nghiên cứu về tôm he chân trắng (tôm chân trắng) trong điều kiện nuôi ở Việt Nam đến nay là chưa có nhiều. Vì thế, để phát triển nuôi tôm chân trắng tại Việt Nam ổn định và có hiệu quả cần phải có nghiên cứu, phân tích có tính khoa học và hệ thống về đối tượng này, đặc biệt là nghiên cứu để xây dựng quy trình kỹ thuật sản xuất giống và nuôi thương phẩm tôm chân trắng phù hợp với môi trường sinh thái và điều kiện sản xuất của Việt Nam là vấn đề cần thiết và cấp bách. Xuất phát từ từ những yêu cầu cấp thiết của thực tế nêu trên, luận án: “Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản nhân tạo và công nghệ sản xuất giống tôm he chân trắng Litopenaeus vannamei (Boone, 1931)” đã được thực hiện 2. Mục tiêu của luận án + Xác định một số đặc điểm sinh học sinh sản nhân tạo và các thông số kỹ thuật chủ yếu trong ương nuôi ấu trùng tôm chân trắng, làm cơ sở khoa học để xây dựng quy trình công nghệ sản xuất giống tôm chân trắng ở Việt Nam. + Tạo được nguồn tôm chân trắng bố mẹ F1-VN từ nguồn tôm Hawaii, không nhiễm mầm bệnh virus: TSV, IHHNV, WSSV, YHV, BP. 3. Nội dung nghiên cứu của luận án + Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản tôm chân trắng bố mẹ trong điều kiện nuôi nhân tạo. + Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống tôm chân trắng 2 + Nghiên cứu tạo đàn tôm chân trắng bố mẹ F1-VN có nguồn gốc từ Hawaii, không mang các mầm bệnh nguy hiểm: TSV, IHHNV, WSSV, YHV, BP. 4. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của luận án Nghiên cứu này nhằm cung cấp thêm những dẫn liệu khoa học về đặc điểm sinh học sinh sản của tôm chân trắng trong điều kiện nuôi nhân tạo, làm cơ sở để hoàn thiện qui trình công nghệ sản xuất giống nhân tạo tôm chân trắng trong điều kiện Việt Nam. Góp phần nâng cao chất lượng giống, hướng đến chủ động sản xuất giống nhân tạo tôm chân trắng nhằm phát triển ổn định nghề nuôi thương phẩm loài tôm này ở Việt Nam 5. Những đóng góp của luận án Đây là công trình nghiên cứu khoa học có hệ thống về sinh học sinh sản nhân tạo tôm chân trắng; là cơ sở khoa học để các nhà quản lý xây dựng qui chuẩn kỹ thuật về tôm bố mẹ, sản xuất giống nhân tạo tôm chân trắng. Lần đầu tiên tại Việt Nam đã nghiên cứu và tạo được đàn tôm bố mẹ thế hệ F1(F1-VN) không mang một số mầm bệnh nguy hiểm (WSSV, TSV, YHV, IHHNV, BP) từ đàn tôm nhập ở Hawaii (Hoa Kỳ), góp phần mở ra hướng sản xuất tôm chân trắng bố mẹ tại Việt Nam không mang mầm bệnh nguy hiểm, nâng cao chất lượng giống, nhằm phát triển nuôi tôm chân trắng ở Việt Nam. 6. Bố cục của luận án Luận án gồm 125 trang, trong đó có 37 bảng số liệu, 32 hình và được cấu trúc như sau: Mở đầu: 3 trang Chương 1: Tổng quan tài liệu 35 trang Chương 2: Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 24 trang Chương 3: Kết quả nghiên cứu và thảo luận 43 trang Kết luận và kiến nghị 3 trang Danh mục công trình công bố của tác giả 1 trang Tài liệu tham khảo: 16 trang (gồm 146 tài liệu tham khảo, trong đó có 29 tài liệu tiếng Việt và 117 tài liệu tiếng Anh) 3 CHƯƠNG 1 - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Một số đặc điểm sinh học của tôm chân trắng 1.1.1. Hệ thống phân loại: Tôm chân trắng Litopenaeus vannamei (Boone, 1931) được phân loại bởi khóa phân loại của Boone (1931). 1.1.2. Đặc điểm hình thái: Cấu tạo cơ thể được chia làm 2 phần: Phần đầu ngực và phần thân được đề cập bởi [50], [51], [55], [126], [131]. 1.1.3. Đặc điểm phân bố và tập tính sống: Được đề cập bởi [6], [38], [47], [55], [58], [92], [94], [136]. 1.1.4. Tính ăn và nhu cầu dinh dưỡng: Nghiên cứu xác định tính ăn và nhu cầu dinh dưỡng của tôm chân trắng đã được đề cập bởi [32], [33], [34], [52], [70], [80], [85], [93], [98], [99], [100], [102], [103], [104], [105], [113], [115], [122], [123], [136], [142] 1.1.5. Sinh trưởng và lột xác: Đề cập bởi [65], [106], [115], [135]. 1.1.6. Đặc điểm sinh sản: Được đề cập bởi [6], [11], [12], [48], [58], [63], [65], [87], [115], [135]. 1.2. Hiện trạng nuôi tôm chân trắng thương phẩm trên thế giới và việt nam 1.2.1. Trên thế giới: Sản lượng tôm chân trắng toàn cầu trong giai đoạn 2001-2010 đã tăng 10 lần [14]. Đến năm 2010, sản lượng của tôm chân trắng là 2.646.300 tấn, chiếm 83,93% trong tổng sản lượng tôm toàn cầu là 3.152.800 tấn. Trong đó, tổng sản lượng tôm chân trắng ở châu Á chiếm 85,78%. Các số liệu này đã chứng tỏ rằng, hiện loài tôm này đang chiếm tỷ phần quan trọng trong sản lượng tôm nuôi của mỗi quốc gia và thế giới. 1.2.2. Tại Việt Nam: Tôm chân trắng được di nhập từ Đài Loan, Hawaii và Trung Quốc về nuôi thử nghiệm đầu tiên vào năm 2001 tại Khánh Hòa, Phú Yên và Bạc Liêu [15], [16]. Những nghiên cứu về nuôi tôm chân trắng tại Việt Nam đã được đề cập trong luận án. 1.3. Một số nghiên cứu về sinh sản nhân tạo tôm chân trắng Các nghiên cứu về nuôi thành thục tôm chân trắng bố mẹ được đề cập bởi [3], [4], [24], [29], [40], [45], [63], [66], [90], [91], [94], [96], [101], [118], [133]; Về sản xuất giống nhân tạo tôm chân trắng được đề cập bởi [41], [42], [53], [64], [68], [69], [82], [83], [101], [114], [123], [135]. 1.4. Nghiên cứu về bệnh ở tôm chân trắng trên thế giới và Việt Nam 4 Tổ chức Thú y Thế giới (OIE) đã liệt kê các loại bệnh trên tôm chân trắng: Bệnh do virus gồm WSSV, YHV, TSV, BP và IHHNV. Ngoài ra, tôm chân trắng cũng mắc các bệnh do vi khuẩn, do kí sinh trùng, do nấm như đã được đề cập bởi [9], [12], [17], [41], [43], [44], [56], [59], [60], [61], [62], [67], [74], [75], [76], [77], [78], [88], [89], [108], [110], [111], [119], [128], [130], [144]. 1.5. Nghiên cứu về chọn giống tôm chân trắng Hiện nay có các hướng lớn được quan tâm trong chương trình chọn giống tôm chân trắng là chọn lọc được dòng tôm có tính trạng tăng trưởng vượt trội, có khả năng kháng bệnh cao (SPR) và không bị nhiễm các tác nhân gây bệnh nguy hiểm (SPF). Những nghiên cứu về chọn giống đã được đề cập bởi [39], [43], [60], [71], [77], [81], [84], [107], [110], [112], [134], [137], [138], [140], [142], [143], [146] . CHƯƠNG 2- VẬT LIỆU & PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu 2.1.1. Đối tượng: Tôm chân trắng L. vannamei (Boone,1931) 2.1.2. Thời gian: Từ 01/2004 đến12/2010 2.1.3. Địa điểm: Nghiên cứu được thực hiện tại Viện NC NTTS III, và các Trung tâm/cơ sở thuộc Viện III; Cơ sở sản xuất giống nhân tạo tôm sú tại Đường Đệ, phường Vĩnh Hòa, thành phố Nha Trang. 2.2. Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu cảa đề tài: đã được đề cập. 2.3. Phương pháp nghiên cứu 2.3.1. Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản của tôm chân trắng trong điều kiện nuôi nhân tạo. 2.3.1.1. Nghiên cứu sự phát triển buồng trứng và sức sinh sản của tôm chân trắng trong điều kiện nuôi vỗ. * Điều kiện thí nghiệm: Nhiệt độ 27–30 o C, pH 7,7– 8,4, độ mặn 28– 32 ‰. Thức ăn sử dụng gồm: Mực (50%), tôm ký cư (25%) và giun nhiều tơ (25%), với khẩu phần ăn chiếm 10-20% khối lượng thân/ngày. Tôm được cho ăn 3 lần/ngày. * Bố trí thí nghiệm: Được thể hiện như Hình 2.3 5 Hình 2.3: Thí nghiệm xác định sức sinh sản của tôm chân trắng 2.3.1.2. Xác định thời gian phát triển phôi của trứng và biến thái ấu thể tôm chân trắng: Theo các phương pháp nghiên cứu thường qui. 2.3.1.3. Xác định kích thước thành thục lần đầu của tôm mẹ:Theo [2]. 2.3.2. Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo 2.3.2.1. Ảnh hưởng của loại thức ăn đến sự thành thục của tôm chân trắng: Thí nghiệm được tiến hành theo Hình 2.4 Hình 2.4: Ảnh hưởng của loại thức ăn đến sự thành thục tôm chân trắng Tôm cái đã được tuyển chọn Nhóm tôm 35-40g/con (W=37,7±2,1g/con; BL=14,3 ± 0,8 cm) Nhóm tôm 41-45 g/con (W=42,3±1,5g/con; BL=14,7 ± 0,2 cm) Nhóm tôm 46-50 g/con (W=49,7±2,6g/con; BL=15,7 ± 0,4 cm) - M ỗ i nhóm kích thư ớ c có 100 con tôm; chăm sóc, qu ả n lý nh ư nhau. - Theo dõi quá trình phát triển của buồng trứng; giải phẫu và cho đẻ để xác định các chỉ tiêu sức sinh sản của tôm Giải phẫu Cho đẻ Giải phẫu Cho đẻ Giải phẫu Cho đẻ Mực tươi (100%) Mực tươi (50%) + giun nhi ề u tơ (50%) Mực tươi (50%)+giun nhiều tơ (25%) + tôm kí cư (25%) - S ố lư ợ ng tôm/b ể : 30 con ; Thí nghi ệ m đư ợ c l ặ p l ạ i 3 l ầ n - Nhiệt độ 27-30 o C, độ mặn: 28-32‰, pH: 7,7- 8,4. - Theo dõi t ỷ l ệ thành th ụ c và t ỷ l ệ tôm g iao v ĩ , s ứ c sinh s ả n th ự c t ế và t ỉ l ệ n ở Tôm thành thục sinh dục và cho đẻ Tôm b ố m ẹ đưa vào nuôi v ỗ , thu ầ n dư ỡ ng (W= 52,2 ± 2,8g/con; L=16,8 ± 0,6cm) 6 2.3.2.2. Ảnh hưởng của kỹ thuật cắt mắt đến sự thành thục tôm cái Thí nghiệm được tiến hành theo Hình 2.5 Hình 2.5: Ảnh hưởng của kỹ thuật cắt mắt đến sự thành thục tôm chân trắng 2.3.2.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ, độ mặn đến hoạt động giao vĩ và nở trứng của tôm bố mẹ: Thí nghiệm được thể hiện như Hình 2.6 Hình 2.6: Ảnh hưởng nhiệt độ, độ mặn đến hoạt động giao vĩ và nở trứng S ố tôm cái đ ã đư ợ c tuy ể n ch ọ n C ắ t mắt Không cắt C ắ t mắt Không cắt C ắ t mắt Không cắt C ắ t mắt Không cắt C ắ t mắt Không cắt C ắ t mắt Không cắt C ỡ tôm 26-30g/con C ỡ tôm 31- 35 g/con C ỡ tôm 36-40 g/con C ỡ tôm 41-45 g/con C ỡ tôm 46-50 g/con C ỡ tôm 51-60 g/con - Tôm cái đư ợ c c ắ t cu ố ng m ắ t b ằ ng cách th ắ t ch ỉ ở cu ố ng m ắ t. - Số lượng tôm/bể: 30 con. Thí nghiệm được lặp lại 3 lần - 27-30 o C, 28-32‰, pH: 7,7- 8,4; cùng chế độ chăm sóc và quản lý. - Theo dõi thời gian và tỷ lệ thành thục và tỷ lệ tôm giao vĩ - Theo dõi phát triển của buồng trứng, sức sinh sản thực tế, nở của trứng Tôm chân tr ắ ng b ố m ẹ (W=53,1 ± 0,9g/con) Ả nh hư ở ng c ủ a nhi ệ t đ ộ đ ế n ho ạ t đ ộ ng giao v ĩ v à n ở tr ứ ng Ả nh hư ở ng c ủ a đ ộ m ặ n đ ế n ho ạ t đ ộ ng giao v ĩ v à n ở tr ứ ng T ỷ l ệ tôm giao v ĩ T ỉ l ệ n ở c ủ a tr ứ ng th ụ S ứ c sinh s ả n th ự c t ế 23 - 24 o C 25 - 26 o C 27 - 28 o C 29 - 30 o C 25 - 26 ‰ 27 - 28 ‰ 29 - 30 ‰ 31 - 32 ‰ 7 2.3.2.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của kích cỡ đến sự thành thục và đẻ trứng của tôm chân trắng: Thí nghiệm theo sơ đồ Hình 2.7 Hình 2.7: Thí nghiệm xác định ảnh hưởng của kích cỡ đến sự thành thục và đẻ trứng của tôm chân trắng 2.3.2.5. Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ, độ mặn đến sự phát triển và tỷ lệ sống của ấu trùng tôm chân trắng:Thể hiện ở Hình 2.8 Hình 2.8: Ảnh hưởng nhiệt độ, độ mặn đến thời gian biến thái và tỷ lệ sống của ấu trùng tôm chân trắng Tôm cái đ ã đư ợ c tuy ể n ch ọ n Nhóm tôm 35-40g/con (W=37,7±2,1g/con; BL=14,3 ± 0,8 cm) Nhóm tôm 41-45 g/con (W=42,3±1,5g/con; BL=14,7 ± 0,2 cm) Nhóm tôm 46-50 g/con ( W=49,7±2,6g/con; BL=15,7 ± 0,4 cm) - Mỗi nhóm kích thước có 30 con tôm; chăm sóc, quản lý như nhau. - Theo dõi quá trình phát triển của buồng trứng; - Cho tôm đ ẻ đ ể xác đ ị nh các ch ỉ tiêu sinh h ọ c sinh s ả n Cho đ ẻ Cho đ ẻ Cho đ ẻ Ấu trùng Nauplii 4-5 tôm chân trắng khỏe mạnh Ảnh hưởng của nhiệt độ ( 0 C) đến thời gian biến thái và tỉ lệ s ố ng ấ u trùng Ảnh hưởng của độ mặn (‰) đến thời gian biến thái và tỉ lệ s ố ng ấ u trùng T ỷ l ệ s ố ng c ủ a ấ u trùng Th ờ i gian bi ế n thái c ủ a ấ u trùng 24-25 26-27 28-29 30-31 25-26 27-28 29-30 31-32 8 2.3.2.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của loại thức ăn đến sự sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng: Được thể hiện như Hình 2.9 Nghiệm thức A- A: thức ăn tảo tươi (Chaetoceros sp., Skeletonema costatum)+thức ăn tổng hợp (Lansy+Frippak); Nghiệm thức B- B: thức ăn tảo khô (Spirulina) + thức ăn tổng hợp (Lansy+Frippak); Nghiệm thức C- C: thức ăn tảo khô (Spirulina sp.) Hình 2.9: Ảnh hưởng thức ăn đến thời gian biến thái và tỷ lệ sống của ấu trùng tôm chân trắng + Trên bể composite 300 lít: Mật độ Nauplii nuôi: Đợt 1: 120 con/lít; Đợt 2: 140 con/lít; Đợt 3: 200 con/lít; Chế độ cho ăn các loại thức ăn khác nhau (A , B và C) ở giai đoạn Zoea và Mysis thể hiện ở Bảng 2.1. Bảng 2.1: Chế độ cho ăn của ấu trùng tôm chân trắng nuôi trong bể composit 300 lít với các nghiệm thức thức ăn khác nhau Lô A Lô B Lô C Chỉ tiêu Tảo tươi (vạn tb/ml) Lansy+Fri- ppak (mg/l) Tảo khô (mg/l) Lansy+Frip -pak (mg/l) Tảo khô (mg/l) Zoea Mysis 4 – 20 3 – 10 1,2 – 1,6 2,2 – 2,8 0,6 – 0,8 1,1 – 1,4 0,6 – 0,8 1,1 – 1,8 1,2 – 1,6 2,2 – 2,8 + Trên bể xi-măng 5,8m 3 : Mật độ Nauplii thả nuôi: 90 con/lít; thực nghiệm được tiến hành trên 3 đợt, bố trí 3 lô/đợt. Sử dụng loại thức ăn thích hợp (Tảo tươi+Lansy+Frippak), cho Zoea và Mysis ăn theo liều lượng thể hiện ở Bảng 2.2 Chu ẩ n b ị đi ề u ki ệ n và cho Nauplii vào thí nghi ệ m Ảnh hưởng của các loại thức ăn khác nhau đến sự phát triển của ấu trùng (giai đo ạ n Zoea, Mysis) Nauplii tôm kh ỏ e Nư ớ c đ ủ tiêu chu ẩ n thí nghi ệ m Xác định loại thức ăn thích hợp cho sự tăng trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng tôm chân tr ắ ng A B C 9 Bảng 2.2: Chế độ cho ăn của ấu trùng tôm chân trắng nuôi trong bể xi-măng 5,8 m 3 với loại thức ăn thích hợp Thức ăn Tổng hợp Tảo tươi (vạn tb/ml) Lansy (mg/l) Frippak (mg/l) Zoea Mysis 3 – 5 1 – 4 0,25 0,4 0,15 0,20 2.3.2.7. Nghiên cứu ảnh hưởng của mật độ nuôi đến sinh trưởng và tỉ lệ sống của ấu trùng tôm chân trắng: Được thể hiện như Hình 2.10 Hình 2.10: Ảnh hưởng mật độ nuôi đến tăng trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng tôm chân trắng + Trên bể composite 300 lít: Như Hình 2.10 + Trên bể xi măng 5,8m 3 : Thử nghiệm ở mật độ nuôi thích hợp (từ kết quả của thí nghiệm trong bể composite), mật độ ương nuôi: 100, 125, 130 và 155 N/lít 2.3.2.8. Thử nghiệm sản xuất giống nhân tạo tôm chân trắng tại cơ sở sản xuất * Điều kiện thí nghiệm: Thí nghiệm được bố trí trong bể xi-măng có V= 5,8 m 3 , mật độ 150 N/l; Thời gian cho ăn 3 giờ/lần; chế độ cho ăn, siphon - thay nước và sục khí được thể hiện ở Bảng 2.3 và Bảng 2.4 Nauplii tôm khỏe Nước đủ tiêu chuẩn thí nghi ệ m Chuẩn bị điều kiện và cho Nauplii vào thí nghi ệ m Xác định mật độ nuôi thích hợp cho sự tăng trư ở ng và t ỷ l ệ s ố n g c ủ a ấ u trùng tôm Mật độ nuôi 100 N / l Mật độ nuôi 125 N /l Mật độ nuôi 150 N /l Mật độ nuôi 200 N /l Mật độ nuôi 175 N/l 10 (luận án). Mỗi lô thí nghiệm được lặp lại 3 lần. Chế độ chăm sóc và quản lý trong quá trình ương nuôi ấu trùng là như nhau. * Các chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ sống của ấu trùng từ N-PL 12-14 ; Số lượng PL 12-14 sản xuất được. 2.3.2.9. Nghiên cứu ngưỡng chịu đựng với các yếu tố môi trường của hậu ấu trùng (Postlarvae) tôm chân trắng: Xác định ngưỡng độ mặn, và pH của PL 12 tôm chân trắng theo các phương pháp thường qui đã được trình bày trong luận án. 2.3.3. Nghiên cứu tạo nguồn tôm chân trắng bố mẹ F1-VN có nguồn gốc từ Hawaii, không mang các mầm bệnh nguy hiểm: TSV, IHHNV, WSSV, YHV, BP 2.3.3.1. Nghiên cứu tạo đàn tôm chân trắng bố mẹ F1-VN từ nguồn tôm được nhập tại Hawaii * Thời gian thực hiện: từ tháng 01/2008- 08/2010 * Địa điểm: Tại 02 Trung tâm thuộc Viện NC NTTS III. * Quy trình nuôi: Được thể hiện như Hình 2.11 của luận án 2.3.3.2. Đánh giá chất lượng tôm chân trắng bố mẹ F1-VN sản xuất được: Thông qua đánh giá khả năng sinh sản của tôm chân trắng bố mẹ F1-VN và qua các chỉ số nuôi thương phẩm của PL 12 từ tôm bố mẹ F1-VN. 2.3.4. Phưong pháp thu thập và xử lý số liệu 2.3.4.1. Phương pháp xác định sức sinh sản của tôm: Theo phương pháp Pravdin (1073). 2.3.4.2. Xác định tỷ lệ tôm giao vĩ, tỷ lệ tôm thành thục và tỷ lệ tôm mẹ đẻ trứng: Theo phương pháp thường quy 2.3.4.3. Xác định sự tăng trưởng và phát triển của ấu trùng, tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ nở của trứng, tỷ lệ sống của ấu trùng: Theo phương pháp thường quy. 2.3.4.4. Xác định các thông số môi trường: Như trong luận án. 2.3.4.5. Phương pháp thu thập và xử lý số liệu: Trên Microsoft Excel; phần mềm SPSS 17.0. 11 CHƯƠNG 3- KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1. MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC SINH SẢN NHÂN TẠO CỦA TÔM CHÂN TRẮNG 3.1.1. Sự phát triển buồng trứng và sức sinh sản của tôm chân trắng trong điều kiện nuôi vỗ 3.1.1.1. Sự phát triển buồng trứng tôm chân trắng Buồng trứng của tôm chân trắng nằm kéo dài từ mặt lưng phía trong vỏ đầu ngực đến đốt đuôi, được chia làm 5 giai đoạn (Hình 3.1) A-Tôm chân trắng mẹ mang trứng B-Túi tinh C-Buồng trứng D-Giai đoạn II E-Giai đoạn III Giai đoạn IV H-Giai đoạn V Hình 3.1: Các giai đoạn phát triển của buồng trứng tôm chân trắng 12 3.1.1.2. Sức sinh sinh sản của tôm chân trắng Kết quả đếm số lượng trứng của một số cá thể cái ở các kích thước khác nhau có buồng trứng đạt giai đoạn IV cho thấy sức sinh sản tuyệt đối với tôm chân trắng có mối quan hệ được thể hiện ở Hình 3.2. Hình 3.2: Tương quan giữa sức sinh sản tuyệt đối và kích thước của tôm chân trắng Hình 3.2 đã thể hiện có sự tương quan thuận giữa kích thước với sức sinh sản tuyệt đối của tôm mẹ. Tôm 39 g/con (BL=14,5 cm) đến 53g/con (BL=15,9cm) có sức sinh sản tuyệt đối từ 122.080÷175.160 trứng/cá thể; sức sinh sản tương đối từ 2.999÷3.409 trứng/g cá thể. Sức sinh sản thực tế được ghi ở Bảng 3.1. Bảng 3.1: Sức sinh sản thực tế của tôm chân trắng ở các nhóm kích thước khác nhau (số liệu trình bày là giá trị trung bình ±SD) Nhóm kích thước (g/con) Các chỉ tiêu 35–40 (n =30) 41- 45 (n = 30) 46 – 50 (n = 30) Số trứng/cá thể/lần đẻ (x 10 3 ) 113,7±20,6 a 142,4 ± 17,9 b 188,5 ± 14,1 c Số Nauplii/cá thể/lần đẻ (x 10 3 ) 58,3±15,4 a 74,5 ± 36,2 b 109,2 ± 25,5 c Ghi chú: Các chữ cái cùng dòng khác nhau thể hiện sự sai khác có ý nghĩa thống kê (p<0,05). R 2 110 120 130 140 150 160 170 180 35 40 45 50 55 Khối lượng thân (g) Soá tröùng/caù theå (x 1000) y = 3.1134x + 6.3854 = 0.8820 R 2 = 0.8075 110 120 130 140 150 160 170 180 14 14.5 15 15.5 16 Soá tröùng/caù theå (x 1000) y = 27.113x - 262.92 Chiều dài thân (cm) 13 Kết quả thể hiện ở Bảng 3.1 cho thấy, số lượng trứng trung bình của tôm cái/ lần đẻ và số Nauplii trung bình/cá thể tôm cái/lần đẻ cao dần theo kích thước của tôm mẹ và đạt cao nhất ở nhóm tôm cái có kích thước lớn nhất: 46 - 50g/con và cao hơn có ý nghĩa (p<0,05). Kết quả chứng minh rằng, khả năng sinh sản tăng khi kích thước tôm mẹ tăng. 3.1.2. Sự phát triển phôi của trứng và biến thái của ấu thể tôm chân trắng Kết quả theo dõi sự phát triển phôi trong điều kiện nhiệt độ 31- 32 o C được thể hiện ở hình 3.3 A-Trứng thụ tinh B-2 tế bào C-4 tế bào D-8 tế bào E-16 tế bào G-Phôi nang H-Phôi vị I-Lá phôi thứ 3 K-Đầu mầm phôi L-Mầm phôi M-mầm phụ N-Hình thành các chi O-Các phụ chi P-Tim bắt đầu cử động Q-Phôi thoát khỏi trứng R- Nauplii Hình 3.3: Các giai đoạn phát triển phôi của trứng tôm chân trắng Kết quả theo dõi sự biến thái ấu thể tôm chân trắng được thể hiện ở hình 3.4 14 Hình 3.4: Các giai đoạn biến thái ấu thể của tôm chân trắng 3.1.3. Kích thước tôm chân trắng mẹ tham gia sinh sản lần đầu Theo thống kê tuyến sinh dục đạt giai đoạn II-III-IV cao nhất ở nhóm có khối lượng 51–60g là 65% (Bảng 3.3). Bảng 3.3: Sự phát triển buồng trứng của tôm chân trắng theo nhóm khối lượng Wt (g) Tổng tỷ lệ % buồng trứng ở giai đoạn II-III-IV Tỷ lệ được điều chỉnh theo hệ số 100/65 < 18 0,0 0,00 18 – 25 6,5 10,00 26 – 30 25,8 39,69 31 – 35 32,5 50,00 36 – 40 51,6 79,38 41 – 45 57,8 88,92 46 – 50 59,5 91,54 51 – 60 65,0 100,00 N1 N2 M3 M2 Z2 Z1 N5 N3 Z3 PL N4 M1 15 Theo King (2001), cần phải chuyển sang 100% bằng cách tính tổng các giai đoạn và nhân với 100/65. Như vậy, đến nhóm khối lượng 31-35g mới có 50% số cá thể tham gia sinh sản và đây là nhóm có khối lượng cá thể tham gia sinh sản lần đầu. Tuy nhiên, các cá thể lớn hơn sẽ có thể có số lượng trứng nhiều hơn. 3.2. KỸ THUẬT SẢN XUẤT GIỐNG NHÂN TẠO TÔM CHÂN TRẮNG 3.2.1. Kỹ thuật nuôi vỗ thành thục tôm chân trắng trong điều kiện nuôi nhân tạo + Ảnh hưởng của loại thức ăn đến khả năng thành thục thục của tôm chân trắng Bảng 3.4: Ảnh hưởng của thức ăn đến sự thành thục, giao vĩ và đẻ trứng của tôm chân trắng (số liệu trình bày là giá trị trung bình ± ±± ± độ lệ chuẩn-SD) Chỉ tiêu Mực tươi Mực tươi (50%) + Tôm kí cư (50%) Mực tươi (50%) + Tôm kí cư (25%) + Giun (25%) Nhiệt độ nước ( o C) 27 – 28 27 – 28 27 – 28 Tỷ lệ tôm giao vĩ (%, ) 73,99±22,30 a 88,85±14,70 b 91,6±15,80 b Tỷ lệ tôm đẻ sau giao vĩ(%) 100 100 100 Nauplii/cáthể/lầnđẻ (10 3 ) 55,97 ± 8,29 a 95,25±10,11 b 130,63±21,30 c Tỷ lệ nở (%) 66,12±24,18 a 75,14±31,76 ab 85,32 ±24,26 b Ghi chú: Các chữ cái cùng dòng khác nhau thể hiện sự khác nhau có ý nghĩa thống kê (p<0,05) Kết quả từ Bảng 3.4 đã cho thấy, thức ăn mực tươi (50%) kết hợp với tôm kí cư (25%) và giun (25%) cho tỷ lệ giao vĩ, tỷ lệ nở và số lượng Nauplii sinh ra cao nhất, cao hơn có ý nghĩa thống kê (p<0,05) so với nghiệm thức khác. + Ảnh hưởng của kỹ thuật cắt mắt đến khả năng thành thục của tôm chân trắng: Kết quả theo dõi từ ngày thứ 1 đến thứ 10 được trình bày ở Bảng 3.5. 16 Bảng 3.5: Ảnh hưởng của việc cắt mắt đến khả năng thành thục của tôm trên các nhóm kích thước khác nhau (số liệu trình bày là giá trị trung bình ± ±± ± SD) Cắt mắt Không cắt mắt Kích thướ c (g/ cá thể) Tỉ lệ thành thục (%) Sốtrứng/cá thể/lần đẻ(10 3 ) Tỉ lệ nở (%) Tỉ lệ thành thục (%) Sốtrứng/cá thể/lầnđẻ (10 3 ) Tỉ lệ nở (%) 26-30 33,33 ± 0,41 74,15±30,89 28,45 ± 5,67 0 0 0 31- 35 35,27 ± 8,93 97,13±37,56 30,49 ± 2,16 0 0 0 36- 40 36,12 ± 5,29 103,70±20,60 37,08 ± 6,07 0 0 0 41- 45 38,45 ± 4,81 a 112,40±17,92 a 68,51± 30,82 a 0 0 0 46- 50 46,38 ± 7,67 ab 138,50 ±14,14 b 70,54±31,26 ab 0 0 0 51- 60 52,50 ± 6,99 b 141,03 ±13,61 b 83,43± 28,22 b 2,50±4,33 0 0 Ghi chú: Các chữ cái cùng cột khác nhau thể hiện sự sai khác có ý nghĩa thống kê (p<0,05). Kết quả từ Bảng 3.5 đã cho thấy, trong nhóm kích thước từ 26- 50g/con, tất cả mọi cá thể không được cắt mắt đều không lên trứng. Các nhóm tôm được cắt cuống mắt có kích thước lớn > 45g/cá thể có tỷ lệ thành thục, sức sinh sản thực tế, tỷ lệ nở tốt hơn so với các nhóm tôm được cắt mắt có kích thước <46g/con. + Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ, độ mặn đến sự giao vĩ và nở trứng của tôm chân trắng Bảng 3.6: Ảnh hưởng của nhiệt độ nước đến sự giao vĩ và tỷ lệ nở của trứng (số liệu trình bày là giá trị trung bình ± ±± ± SD) Nhiệt độ nước thí nghiệm ( o C) Chỉ tiêu 23-24 25-26 27-28 29-30 Tỉ lệ giao vĩ (%) 58,54 ± 9,39 a 82,94±13,47 b 96,14±2,22 b 87,10 ± 0,00 b Số trứng/cá thể /lầnđẻ (10 3 ) 14,53 ± 2,48 a 76,47±11,25 b 101,03±23,21 c 94,68 ± 15,01 c Tỷ lệ nở (%) 10,45±1,64 a 53,87±3,25 b 95,36 ± 2,54 c 86,79 ± 3,27 c Ghi chú: Các chữ cái cùng dòng khác nhau thể hiện sự sai khác có ý nghĩa thống kê (p<0,05). 17 Bảng 3.7: Ảnh hưởng của độ mặn đến sự giao vĩ, đẻ trứng và tỷ lệ nở của trứng (số liệu trình bày là giá trị trung bình ± ±± ±SD) Độ mặn thí nghiệm (‰) Chỉ tiêu 25-26 27-28 29-30 31-32 Tỉ lệ giao vĩ (%) 23,16 ±4,45 63,34±16,43 a 76,87±12,87 b 80,23±10,23 b Số trứng/cá thể/lầnđẻ (10 3 ) 0 34,23±27,35 a 87,24±16,78 b 88,65±15,34 b Tỷ lệ thụ tinh (%) 0 47,87±15,35 a 61,02±13,12 b 70,23±12,87 b Tỷ lệ nở (%) 0 35,07±23,12 a 46,72±23,43 ab 56,78±19,23 b Ghi chú: Các chữ cái cùng dòng khác nhau thể hiện sự sai khác có ý nghĩa thống kê (p<0,05). - Khoảng nhiệt độ thích hợp cho tơm chân trắng giao vĩ, đẻ trứng và đạt tỷ lệ nở cao là 27–30 o C. - Khoảng độ mặn 29-32‰ là phù hợp cho ni thành thục và cho đẻ tơm chân trắng. + Kết quả nghiên cứu về ảnh hưởng của kích cỡ tơm chân trắng đến sự thành thục và đẻ trứng trong điều kiện ni vỗ Hình 3.5: Tỷ lệ thành thục và tỷ lệ đẻ của tơm chân trắng ở các nhóm tơm mẹ có kích thước khác nhau Kết quả từ Hình 3.5 cho thấy ở hai nhóm tơm có kích thước lớn 41–45g/con và 46–50g/con có tỷ lệ thành thục và tỷ lệ đẻ trứng 0 20 40 60 80 100 35 - 40 41 - 45 46 - 50 Nhóm kích thước (g) Tỷ lệ thành thục (%) 0 20 40 60 80 100 35 - 40 41 - 45 46 - 50 Nhóm kích thước (g) Tỉ lệ đẻ róc (%) 0 20 40 60 80 100 35 - 40 41 - 45 46 - 50 Nhóm kích thước (g) Tỷ lệ đẻ (%) 0 10 20 30 40 50 60 35 - 40 41 - 45 46 - 50 Nhóm kích thước (g) Tỉ lệ đẻ có giao vó (%) 18 cao hơn so với tơm ở nhóm kích thước 35–40g/con. Tuy nhiên, đã khơng có sự khác biệt lớn về tỷ lệ đẻ có giao vĩ và tỷ lệ đẻ róc giữa ba nhóm kích thước. Như vậy, nhóm tơm mẹ có kích thước 41– 45g/con cho kết quả sinh sản tốt nhất (xét về 4 chỉ tiêu: Tỷ lệ thành thục, tỷ lệ đẻ, tỷ lệ đẻ có giao vĩ và tỷ lệ đẻ róc róc). Ngồi ra, hiệu quả sinh sản của tơm chân trắng ở các nhóm kích thước cũng được thể hiện ở Bảng 3.8. Bảng 3.8: Hiệu quả sinh sản của tơm chân trắng ở các nhóm kích thước khác nhau (số liệu trình bày là giá trị trung bình ± SD) Nhóm kích thước (g/con) Các chỉ tiêu 35 – 40 (n = 30) 41- 45 (n = 30) 46 – 50 (n = 30) Tỷ lệ thụ tinh (%) 39,0 ±26,7 a 41,3 ± 31,0 a 53,7 ± 30,5 b Tỷ lệ nở (%) 37,0±26,0 a 38,5±30,8 a 50,5 ±31,2 b Tỷ lệ sống từ N - Z1 (%) 92,3±10,1 a 93,6 ±4,6 a 93,1 ± 9,4 a Tỷ lệ sống từN-PL 12 (%) - 50,6 ± 6,2 58,4 ± 4,2 Thời gian từ khi cắt mắt đến lầnđẻ đầutiên (ngày) 8,0 ± 1,6 a 5,0 ± 1,5 b 11,0 ± 1,8 c Số lần đẻ của tơm cái/chu kỳ lột xác 1,2 ± 1,1 a 3,6 ± 0,9 b 1,3 ± 0,7 a Thời gian giữa hai lần đẻ (ngày) 4,0 ± 1,0 a 2,8 ± 0,7 b 4,0 ± 1,7 a Thời gian giữa hai lần lột xác (ngày) 16,0 ± 2,6 a 22,5 ±4,5 b 17,0 ± 2,1 c Ghi chú: Các chữ cái cùng dòng khác nhau thể hiện sự sai khác có ý nghĩa thống kê (p<0,05). Từ Bảng 3.8 cho phép kết luận rằng, tơm chân trắng có thể tham gia sinh sản và hiệu quả sinh sản tốt khi tơm đạt kích thước từ 41- 45g/con. Đây là nhóm kích thước có khả năng thành thục tốt và có hiệu quả sinh sản cao nhất. 3.2.2. Kết quả nghiên cứu ương ni ấu trùng tơm chân trắng 3.2.2.1. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ và độ mặn đến sự phát triển của ấu trùng tơm chân trắng Kết quả nghiên cứu được trình bày ở Bảng 3.9, Bảng 3.10. 19 Bảng 3.9: Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển ấu trùng tôm chân trắng (số liệu trình bày là giá trị trung bình±SD) Nhiệt độ thí nghiệm ( o C) Chỉ tiêu 24 – 25 26 – 27 28 – 29 30 – 31 Thời gian biến thái Z 1 -PL 1 (giờ) 253 ±10,23 a 245±9,23 ab 240 ± 8,56 ab 231 ± 6,87 b Tỷ lệ sống PL 8 (%) 34,67±10,65 a 45,78± 9,98 ab 55,06±9,81 b 65,35±8,34 c Bảng 3.10: Ảnh hưởng của độ mặn đến sự phát triển ấu trùng tôm chân trắng (số liệu trình bày là giá trị trung bình±SD) Độ mặn thí nghiệm (‰) Chỉ tiêu 25 – 26 27 – 28 29 – 30 31 - 32 Thời gian biế n thái Z 1 -PL 1 (giờ) 250±8,43 a 241±8,45 a 236±7,63 ab 228±4,87 b Tỷ lệ sống PL8 (%) 24,67±7,32 a 46,82±7,43 ab 56,16±6,22 c 67,25±3,66 c Ghi chú: Các chữ cái cùng dòng khác nhau thể hiện sự sai khác có ý nghĩa thống kê (p<0,05). Kết quả từ Bảng 3.9, Bảng 3.10 cho thấy, khi nhiệt độ càng cao (từ 24 đến 31 o C) thời gian biến thái của ấu trùng tôm càng ngắn, đồng thời để ương ấu trùng tôm phát triển nhanh, có tỷ lệ sống cao, thì nên ương nuôi ở độ mặn ban đầu từ 29-32‰. 3.2.2.2. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của loại thức ăn đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng tôm chân trắng Kết quả nghiên cứu đã cho thấy, dùng tảo tươi kết hợp với thức ăn tổng hợp (Lansy và Frippak) để ương nuôi ấu trùng tôm chân trắng (ở thể tích 300lít/bể) đã cho tỷ lệ sống, sinh trưởng cao hơn các loại thức ăn khác (tỷ lệ sống trung bình đến PL8 đạt 76,8%). Sau thí nghiệm, tổ hợp thức ăn tảo tươi kết hợp với thức ăn tổng hợp (Lansy và Frippak) đã được tiếp tục sử dụng để ương nuôi ấu trùng tôm chân trắng ở thể tích bể lớn hơn (5,8m 3 /bể). Kết quả cho thấy, tỷ lệ sống của ấu trùng khá cao (trung bình đạt 50%) đến giai đoạn PL8 và sinh trưởng tốt ở cả 3 đợt thử nghiệm. 20 3.2.2.3. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của mật độ nuôi đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng tôm chân trắng Ương ấu trùng tôm chân trắng với 5 nghiệm thức (100; 125; 150; 175 và 200 N/L) ở thể tích 300L/bể. Kết quả cho thấy, sự tăng trưởng của ấu trùng ở các mật độ ương khác nhau đã hầu như khác nhau không có ý nghĩa (p>0,05). Khoảng mật độ 100-200 N/L, mật độ ương nuôi càng thấp thì tỷ lệ sống của ấu trùng càng cao. Áp dụng mật độ ương nuôi thích hợp từ 100-150N/L vào trại sản xuất với bể xi măng (V=5,8m 3 ), kết quả cho thấy, ở mật độ ương 100-155N/L cho tốc độ tăng trưởng về chiều dài và khối lượng của ấu trùng là sai khác nhau không nhiều. Tỷ lệ sống ở mật độ 100- 155N/L đều >50% và có thể đưa vào thực tiễn sản xuất. 3.2.2.4. Kết quả thử nghiệm sản xuất giống nhân tạo tôm chân trắng Bảng 3.18: Kết quả thử nghiệm sản xuất giống nhân tạo tôm chân trắng Đợt thực nghiệm Thời gian (tháng/ năm) Tổng khố i nước nuôi (m 3 ) Tổng lượ ng Nauplii thả ( x 10 4 con) Tổng lượng P 12 – 14 xuất (x 10 4 con) Tỷ lệ sống trung bình từ N-PL 12 – 14 (%) Năm 2003 Đợt 1 7/2003 30 189 78 41,26 ± 5,63 Đợt 2 8/2003 15 120 59 49,16 ± 3,31 Đợt 3 9/2003 25 225 146 64,88 ± 5,34 Đợt 4 10/2003 35 240 127 52,62 ± 7,08 Đợt 5 11/2003 30 180 80 44,44 ± 4,56 Đợt 6 12/2003 35 634 334 52,68 ± 3,43 Tổng số 170 1588 824 51,89 Năm 2004 Đợt 1 2/2004 45 314 191 60,83 ± 3,67 Đợt 2 4/2004 30 337 210 62,31 ± 2,34 Đợt 3 5/2004 15 190 80 42,11 ± 8,97 Đợt 4 6/2004 25 245 135 55,10 ± 4,33 Đợt 5 11/2004 30 265 138 52,08 ± 4,27 Đợt 6 12/2004 20 205 109,6 53,46 ± 5,67 Tổng số 165 1456 863,6 59,31 [...]... F1-VN t ngu n tôm Hawaii K t qu theo dõi tăng trư ng và t l s ng nuôi h u b tôm chân tr ng trong b xi măng qua 8 tháng ư c th hi n Hình 3.11 K t qu theo dõi kh năng sinh s n c a tôm chân tr ng m F1VN nuôi Vi t Nam so v i tôm chân tr ng m nh p tr c ti p t Hawaii (B ng 3.25–lu n án) cho th y, các ch tiêu sinh s n c a àn tôm chân tr ng m có kh i lư ng t 37-39 g/con thu c nhóm tôm F1VN như: s c sinh s n th... nhau, không có s khác bi t áng k và không có s khác bi t l n khi so sánh v i k t qu nghiên c u c a Moss và c ng s (2007), Pruder (2005), Vi n H i dương Hawaii (OI) 3.3.2 ánh giá kh năng sinh s n c a tôm chân tr ng m F1-VN t o ư c t ngu n tôm Hawaii 23 K T LU N VÀ 24 XU T Ý KI N I K T LU N 1 c i m sinh h c sinh s n nhân t o c a tôm chân tr ng i u ki n nuôi v Bu ng tr ng c a tôm cái n m kéo dài t m t... ki n nuôi v , tôm ch thành th c và tham gia sinh s n khi ư c c t 1 bên cu ng m t 2.2 Nghiên c u ương nuôi u trùng tôm chân tr ng Nhi t , m n, th c ăn và m t ương nuôi có nh hư ng lên s sinh trư ng và bi n thái c a u trùng tôm chân tr ng u trùng tôm chân tr ng ã có s bi n thái và t t l s ng cao nh t 30- 310C, 29-32‰ và m t nuôi 100–150Nauplii/lít; v i th c ăn cho ăn các giai o n Zoea và Mysis là t o... Postlarvae 2 Nghiên c u k thu t s n xu t gi ng tôm chân tr ng 2.1 Nghiên c u k thu t nuôi thành th c c a tôm chân tr ng i u ki n nuôi v trong các b xi măng, tôm chân tr ng m thành th c, giao v , tr ng và có s c sinh s n th c t t t nh t 0 m n 29-32‰, và ư c s d ng th c ăn g m: nhi t 27-30 C, M c tươi + tôm ký cư + giun nhi u tơ (t l : 2:1:1) v i kh u ph n cho ăn 10-20% kh i lư ng thân tôm Trong i u... p 3 T o àn tôm chân tr ng b m F1-VN t ngu n tôm Hawaii Tôm PL ư c sinh ra t ngu n tôm b m nh p t Hawaii t kích c 35–40 g/con sau 8 tháng nuôi và cho sinh trư ng, t l s ng không có s khác bi t có ý nghĩa th ng kê (p>0,05) so k t qu ã thông báo c a Vi n H i dương Hawaii T c tăng trư ng bình quân/ngày t 0,15–0,28 g/ngày và t lê s ng t t 60–85% S c sinh s n tuy t i, s c sinh s n th c t c a àn tôm m F1-VN,... 51,89% (năm 2003) và 59,31% (năm 2004) K t qu này ã kh ng nh s n nh c a quy trình k thu t ư c áp d ng 3.2.3 K t qu nghiên c u ngư ng ch u ng m n và pH c a h u u trùng tôm chân tr ng + Ngư ng m n: PL12 tôm chân tr ng có th thu n n m n 0‰ T 0,5‰ tr lên tôm có th ph c h i ho t ng bình thư ng + Ngư ng pH: Ngư ng pH c a h u u trùng tôm chân tr ng là khá r ng, t 4,5-10 3.3 K T QU T O ÀN TÔM CHÂN TR NG B M F1-VN... c a phôi và t l s ng c a u trùng ra t àn tôm m F1-VN u cao hơn so v i àn tôm m và u trùng c a nó nh p vào Vi t Nam t Hawai àn u trùng t o ra t tôm m F1-VN u ư c xác nh âm tính v i các lo i virus nguy hi m như: TSV, WSSV, YHV, IHHNV và BP Postlarvae tôm chân tr ng ư c t o ra t àn b m F1-VN khi ưa vào nuôi thương ph m thâm canh ã có t l thành công cao (100%), t l s ng n khi thu ho ch t 73,7% và h u h... t , t l n và t l s ng c a h u u trùng n PL12 luôn cao hơn có ý nghĩa th ng kê (p . dung nghiên cứu của luận án + Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản tôm chân trắng bố mẹ trong điều kiện nuôi nhân tạo. + Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống tôm chân trắng 2 + Nghiên. nghệ sản xuất giống tôm he chân trắng Litopenaeus vannamei (Boone, 1931) đã được thực hiện 2. Mục tiêu của luận án + Xác định một số đặc điểm sinh học sinh sản nhân tạo và các thông số kỹ. pháp nghiên cứu 2.3.1. Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản của tôm chân trắng trong điều kiện nuôi nhân tạo. 2.3.1.1. Nghiên cứu sự phát triển buồng trứng và sức sinh sản của tôm chân