Đang tải... (xem toàn văn)
1 1. MỞ ĐẦU Việc sử dụng cây cỏ để chữa bệnh đã có từ rất lâu đời. Qua quá trình đấu tranh với thiên nhiên để sinh tồn, kinh nghiệm tích lũy được không những giúp cho con người biết lợi dụng tính chất của cây cỏ để làm thức ăn mà còn biết dùng làm thuốc để chữa bệnh. Các phương thuốc dân gian này cứ thế được truyền từ đời này sang đời khác mà ít có cơ sở khoa học. Cùng với sự phát triển của khoa học, ngành hóa học hợp chất thiên nhiên ra đời không chỉ giúp giải đáp về thế giới cây cỏ thiên nhiên với muôn vàn bí ẩn cùng khả năng chữa bệnh diệu kỳ và lành tính mà còn góp phần đưa nền y học cổ truyền tiếp cận với y học hiện đại. Bằng những phương pháp hóa học cổ điển và phương pháp phổ nghiệm hiện đại, các nhà hóa học hợp chất thiên nhiên không ngừng cô lập và xác định cấu trúc các cấu tử có trong thực vật, động vật và vi sinh vật. Việc này không chỉ cung cấp cho khoa học những hiểu biết về mặt hóa thực vật mà còn giúp cho ngành y dược học tìm được những hợp chất có hoạt tính sinh học có khả năng đề kháng cũng như chữa bệnh hữu hiệu. Ngày nay, thế giới hiện đại đang có xu hướng quay về với các hợp chất thiên nhiên có trong cây cỏ nhằm khai thác kinh nghiệm y học cổ truyền và hạn chế tối đa việc đưa các hóa chất tổng hợp vào cơ thể. Xu thế này cùng với những thành công bước đầu đã đạt được và những tiềm năng to lớn của nước ta về mặt tài nguyên thiên nhiên là những cơ sở quan trọng để chúng ta đẩy mạnh nghiên cứu về hợp chất thiên nhiên - một lĩnh vực nhiều triển vọng. Trong phạm vi đề tài này, chúng tôi khảo sát thành phần hóa học cây còng nước (Calophyllum dongnaiense Pierre) thuộc họ Bứa (Guttiferae), một họ lớn có nhiều ứng dụng trong đời sống, đặc biệt là trong y học cổ truyền.
ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRỊNH THỊ DIỆU BÌNH KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ VÀ CÀNH CÂY CÒNG NƯỚC (Calophyllum dongnaiense Pierre) LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC TP HỒ CHÍ MINH - 2009 1 1. MỞ ĐẦU Việc sử dụng cây cỏ để chữa bệnh đã có từ rất lâu đời. Qua quá trình đấu tranh với thiên nhiên để sinh tồn, kinh nghiệm tích lũy được không những giúp cho con người biết lợi dụng tính chất của cây cỏ để làm thức ăn mà còn biết dùng làm thuốc để chữa bệnh. Các phương thuốc dân gian này cứ thế được truyền từ đời này sang đời khác mà ít có cơ sở khoa học. Cùng với sự phát triển của khoa học, ngành hóa học hợp chất thiên nhiên ra đời không chỉ giúp giải đáp về thế giới cây cỏ thiên nhiên với muôn vàn bí ẩn cùng khả năng chữa bệnh diệu kỳ và lành tính mà còn góp phần đưa nền y học cổ truyền tiếp cận với y học hiện đại. Bằng những phương pháp hóa học cổ điển và phương pháp phổ nghiệm hiện đại, các nhà hóa học hợp chất thiên nhiên không ngừng cô lập và xác định cấu trúc các cấu tử có trong thực vật, động vật và vi sinh vật. Việc này không chỉ cung cấp cho khoa học những hiểu biết về mặt hóa thực vật mà còn giúp cho ngành y dược học tìm được những hợp chất có hoạt tính sinh học có khả năng đề kháng cũng như chữa bệnh hữu hiệu. Ngày nay, thế giới hiện đại đang có xu hướng quay về với các hợp chất thiên nhiên có trong cây cỏ nhằm khai thác kinh nghiệm y học cổ truyền và hạn chế tối đa việc đưa các hóa chất tổng hợp vào cơ thể. Xu thế này cùng với những thành công bước đầu đã đạt được và những tiềm năng to lớn của nước ta về mặt tài nguyên thiên nhiên là những cơ sở quan trọng để chúng ta đẩy mạnh nghiên cứu về hợp chất thiên nhiên - một lĩnh vực nhiều triển vọng. Trong phạm vi đề tài này, chúng tôi khảo sát thành phần hóa học cây còng nước (Calophyllum dongnaiense Pierre) thuộc họ Bứa (Guttiferae), một họ lớn có nhiều ứng dụng trong đời sống, đặc biệt là trong y học cổ truyền. 2 2. TỔNG QUAN 2.1 Họ Bứa Họ Bứa (Măng Cụt, Guttiferae hay Clusiaceae) gồm khoảng 50 chi với hơn 1000 loài, phân bố ở vùng nhiệt đới nóng và ẩm như Nam Á, Đông Nam Á, một số ít mọc ở Nam Mỹ và Châu Phi. Chúng có thể là đại mộc, tiểu mộc hay bụi nhỏ, có đặc điểm là thường tiết ra nhựa màu vàng hay màu trắng [1]. Tại Việt Nam, theo GS. Phạm Hoàng Hộ, họ Bứa có 62 loài phân bố rải rác khắp đất nước [2]. 2.2 Chi Calophyllum 2.2.1 Đặc điểm thực vật và công dụng Calophyllum là một trong những chi lớn nhất của họ Bứa gồm khoảng 200 loài phân bố rộng rãi ở các rừng nhiệt đới. Chúng thuộc thân gỗ, lõi chắc và bền nên được ứng dụng nhiều trong xây dựng và đóng thuyền [1]. Chi Calophyllum ở Việt Nam có 15 loài. Các loài này được trồng hoặc mọc hoang rải rác ở các vùng khác nhau từ bắc tới nam, ví dụ như mù u (C. inophyllum), còng nước (C. dongnaiense), còng tía (C. calaba), còng trắng (C. dryobalanoides), còng da (C. membranaceum) [2]. Chi Calophyllum có nhiều công dụng trong y học cổ truyền. Nhựa mù u thường được dùng trị ghẻ và các bệnh ngoài da khác như mụn sẹo, nấm tóc. Đặc biệt dầu mù u có đặc tính làm liền sẹo, giúp vết thương mau lành, nhất là đối với các vết bỏng. Rễ cây còng trắng (C. dryobalanoides) được dùng làm thuốc tẩy xổ. Rễ và lá cây còng da (C. membranaceum) có tác dụng trị thấp khớp, đau nhức xương lưng, tay và chân, viêm gan, vàng da, trị vết thương chảy máu và một số bệnh ở phụ nữ [2]. 3 2.2.2 Thành phần hóa học Nhiều nhóm hợp chất khác nhau được sinh tổng hợp từ chi Calophyllum như xanthon, coumarin, flavonoid, biflavonoid, chromanon và terpenoid. Trong đó xanthon và coumarin là hai nhóm hợp chất tiêu biểu được tìm thấy nhiều nhất. Năm 2000, Morel cùng các cộng sự đã cô lập được nhiều xanthon, trong đó có bốn hợp chất mới là caledonixanthon A-D (1-4) từ cao diclorometan của vỏ cây C. caledonicum thu hái ở New Caledonia [3]. (1) O O O HO O O O (2) (3) O O O HO O O OH OH OCH 3 OH (4) Từ rễ cây C. blancoi trồng ở Đài Loan, nhóm nghiên cứu của Shen đã tìm thấy ba pyranoxanthon mới là blancoxanthon (5), acetyl blancoxanthon (6) và 3- hydroxyblancoxanthon (7) vào năm 2004 [4]. 4 O OO OH OH (5) (6) OO OH OAc O (7) O OO OH OH OH Đến năm 2008, các xanthon mới vẫn tiếp tục được tìm thấy từ chi Calophyllum. Điển hình là pinetoxanthon (8) do Adonis cùng các cộng sự cô lập từ vỏ và lá cây C. pinetorum thu hái ở Cuba [5]. Bên cạnh đó, nhóm nghiên cứu của Chen ở thuộc Đại học Hainan, Trung Quốc cũng cô lập được một pyranoxanthon mới là mebraxanthon A (9) từ cao etannol của thân cây C. membranaceum [6]. (9) O O OH OH OHO (8) O OH O OH OH Coumarin hiện diện khá phổ biến trong chi Calophyllum. Năm 2003, Ito cùng cộng sự đã tìm ra ba coumarin mới từ vỏ thân cây C. brasiliense là brasimarin A (10), B (11) 5 và C (12) [7]. Cũng vào năm này, một coumarin mới là isorecedensolid (13) đã được nhóm nghiên cứu của Shen cô lập từ cao aceton của hạt cây C. blancoi [8]. O O O OHO O O OHO O HO (10) (11) O O OH O O (12) (13) O O O O HO Các acid chromanon với khung cơ bản là hệ thống vòng 2,3-dimetylchromanon được tìm thấy khá nhiều trong chi Calophyllum và là nhóm hợp chất đặc trưng cho chi này. Điển hình là acid pinetoric I (14) và acid pinetoric II (15), hai acid chromanon mới do Alarcón cùng các cộng sự cô lập vào năm 2008 từ cây C. pinetorum [5]. Bên cạnh đó là các dẫn xuất của acid chromanon như acid 5-O-acetat apetalic (16) và ester metyl của acid apetalic (17) do nhóm của Shen tìm thấy ở hạt cây C. blancoi [8]. 6 (15)(14) O O O OH HOOC O O O OH COOH (16) O O O OCOCH 3 COOH (17) O O O OH COOCH 3 Năm 2004, từ vỏ cây C. brasiliense thu hái ở Mexico, Cottiglia và các cộng sự tại Đại học Cagliari, Italy đã xác định được cấu trúc của sáu acid chromanon mới, hai trong số đó là acid brasiliensophyllic A (18) và acid isobrasiliensophyllic A (19) [9]. O O O OH HOOC O O O OH HOOC (18) (19) Một số biflavonoid cũng hiện diện trong chi này, chẳng hạn như pyranoamentoflavon 7,4-dimetyl eter (20) và 6-(3-metyl-2-butenyl)amentoflavon 7 (21), là hai trong số bốn biflavonoid do Cao cùng các cộng sự thuộc Đại học Quốc gia Singapore tìm ra năm 1997 từ lá cây C. venulosum [10]. (20) O O H 3 CO OH OH O OH O O OCH 3 O O HO OH OH O OH O OH HO (21) Năm 1999, một biflavonoid mới là pancibiflavonol (22) được Ito cùng các cộng sự cô lập từ cao etanol của vỏ cây C. panciflorum [11]. 8 (22) O O OH HO OH O HO OH OH O OH OH Các dẫn xuất acylphloroglucinol được tìm thấy trong chi Calophyllum như sundaicumon A (23) và B (24) được nhóm của Cao cô lập từ cây C. sundaicum vào năm 2005. Những dẫn xuất này hầu như chỉ tìm thấy trong họ Guttiferae nhưng ít khi được tìm thấy trong chi Calophyllum [12]. (24) O O COOH O O HO (23) O O COOH O O HO OH HO Terpenoid tìm thấy trong chi Calophyllum chủ yếu là các triterpen. Kết quả nghiên cứu của Chen cùng cộng sự vào năm 2008 cho thấy lá cây C. membranaceum sinh tổng hợp ra hai triterpen là friedelin (25) và canophyllol (26) [6]. 9 CH 2 OH O (26) O (25) Gracilipen (27), một triterpen dị vòng cũng đã được Cao cùng các cộng sự tìm ra vào năm 1997 từ cây C. gracilipes [13]. (27) O H H 2.2.3 Hoạt tính sinh học Trong y học hiện đại, các nghiên cứu cho thấy một số hợp chất cô lập từ chi Calophyllum có hoạt tính sinh học thú vị chẳng hạn như (+)-calanolid A (28) và (-)- calanolid B (29) thể hiện hoạt tính kháng virus HIV-1 RT hữu hiệu [14]. (29) O O O O OH (28) O O O O OH [...]... Nguyễn Trí Hiếu thuộc Đại học KHTN Tp HCM khảo sát vỏ cây còng nước (C dongnaiense) thu hái ở Lâm trường Mã Đà, tỉnh Đồng Nai và cô lập được acid blancoic (39), acid isoblancoic (40) và acid chapelieric (41) [18] COOH COOH O O O O O OH (39) O OH (40) COOH O O O OH (41) 14 3 NGHIÊN CỨU 3.1 Giới thiệu chung Trong đề tài này, chúng tôi khảo sát thành phần hóa học của lá cây còng nước thu hái ở Thảo Cầm... cao 20 cm, to 40 cm ở gốc, gỗ đo đỏ Lá có phiến tròn dài thon, to 20×4.5 cm, gân phụ mảnh, nhiều, khít nhau; cuống 1-1.5 cm Phát hoa là chùm ở nách lá và ngọn nhánh; hoa trắng, cánh hoa cao khoảng 1 cm; tiểu nhụy nhiều Quả nhân cứng, hình cầu, to 2 cm Cây phân bố chủ yếu ở Biên Hòa và Đồng Nai [2] 2.3.2 Các nghiên cứu hóa học trước đây Thành phần hóa học của cây còng nước chưa được nghiên cứu trên thế... khảo sát cành còng nước thu hái ở Vườn Quốc gia Lò Gò-Xa Mát, tỉnh Tây Ninh Mẫu lá cây (800 g) được trích với eter dầu hỏa và sau đó với acetat etyl Thu hồi dung môi thu được cao eter dầu hỏa (27 g, CDLH) và cao acetat etyl (33 g, CDLE) Tương tự, tiến hành trích mẫu cành còng nước (1 kg) lần lượt với eter dầu hỏa và sau đó với acetat etyl rồi thu hồi dung môi thu được cao eter dầu hỏa (40 g, CDH) và. .. (32 g, CDE) 3.2 Kết quả và bàn luận Sắc ký cột cao eter dầu hỏa của lá còng nước (27 g) trên silica gel thu được chín phân đoạn (CDLH1-9) SKC phân đoạn 5 (CDLH5) và phân đoạn 8 (CDLH8), chúng tôi thu được hai hợp chất có mã số là CDLH5.6.2.2 (39) và CDLH8.8.6 (42) Tương tự, SKC cao acetat etyl của lá còng nước (33 g) thu được chín phân đoạn (CDLE1-9) Khảo sát phân đoạn 6 (CDLE6) và phân đoạn 9 (CDLE9)... biflavonoid do Ito cùng cộng sự cô lập từ vỏ thân cây C panciflorum đều có khả năng ức chế virus Epstein Barr (EBV-EA), trong đó garcinianin (37) và talbotaflavon (38) thể hiện hoạt tính mạnh nhất [11] 12 OH HO O OH OH O HO O OH (37) OH O OH HO O OH OH O HO (38) O OH OH O 2.3 Còng nước (Calophyllum dongnaiense Pierre) Cây còng nước có tên khoa học là Calophyllum dongnaiense Pierre, thuộc họ Bứa (Măng cụt,... -COOH ở dây nhánh và bốn nhóm metyl trong khung cơ bản thì R còn lại bốn nhóm metylen và một nhóm metyl Như vậy R1 là một nhóm n-pentyl So sánh số liệu phổ với tài liệu tham 17 khảo [18] cho thấy CDLH5.6.2.2 là acid blancoic (39) Acid này đã được cô lập từ vỏ cây C blancoi vào năm 1964 [19], vỏ cây C brasiliense năm 1974 [20] và vỏ cây C dongnaiense năm 2009 [18] Số liệu phổ 1H và 13C NMR của acid blancoic... H-2) và 2.54 (1H, m, H-3)] Ngoài ra còn có tín hiệu của một nhóm metin gắn vào nhóm thế rút điện tử [δH 3.70 (1H, m, H-19), một nhóm metylen gắn vào nhóm thế rút điện tử [δH 2.85 (dd, J= 15.5 và 8.5 Hz) và 2.71 (dd, J= 15.5 và 6.5 Hz), H2-20], một nhóm metyl cuối dây [δH 0.85 (3H, t, J= 6.8 Hz, H3-26)] và một số proton ở vùng từ trường cao Phổ DEPT90 và DEPT135 (Phụ lục 4) cho thấy sự hiện diện của. .. (43), CDLE9.5 (44) và CDLE9.6.2 (45) SKC cao eter dầu hỏa cành còng nước (40 g) thu được tám phân đoạn (CDH1-8) SKC phân đoạn 4 (CDH4) thu được hợp chất có mã số là CDH4.3 (46) Tiếp tục SKC cao acetat etyl cành còng nước (33 g) thu được tám phân đoạn (CDE1-8) Khảo sát phân đoạn 5 (CDE5) thu được ba hợp chất có mã số lần lượt là CDE5.2.3 (47), CDE5.1.4 (48), CDE5.1.5 (49) Sau đây là phần biện luận để... H-3 và H-5)], hai proton hương phương ghép cặp meta [H 5.93 (1H, br s, H-6) và 6.03 (1H, br s, H-8)], hai proton hương phương cô lập [H 6.63 (1H, s, H-3) và 6.40 (1H, d, s, H-6)], một nhóm metin [H 5.53 (1H, dd, J= 14.0 và 2.5 Hz, H-2) và một nhóm metylen [H 3.27 (1H, dd, J= 15.5 và 14.0 Hz) và 2.77 (1H, dd, J= 15.5 và 2.5 Hz), H2-3) 31 Phổ DEPT90 và DEPT135 cho thấy sự hiện diện của. .. nhất và đơn vị flavonoid thứ hai được xác định nhờ vào tương quan HMBC của H-2 với carbon hương phương trí hoán ở C 105.6 của vòng A (C-8) Tương quan này cũng giúp suy ra độ lệch hóa học của C-7 (C 162.2) 33 6' 8 HO 8a O 2 5' 1' 4' 7 6 5 4a OH 3 4 OH 3' 2' H O 2''' 8'' HO 8''a O 7'' 3''' 4''' 2'' 1''' 6'' 5'' 4''a OH 3'' 6''' OH 5''' 4'' O Hình 8 Tương quan HMBC của H-2 với C-8 Về mặt hóa học . ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRỊNH THỊ DIỆU BÌNH KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ VÀ CÀNH CÂY CÒNG NƯỚC (Calophyllum dongnaiense. khảo sát thành phần hóa học của lá cây còng nước thu hái ở Thảo Cầm Viên Sài Gòn. Ngoài ra chúng tôi cũng khảo sát cành còng nước thu hái ở Vườn Quốc gia Lò Gò-Xa Mát, tỉnh Tây Ninh. Mẫu lá. Quả nhân cứng, hình cầu, to 2 cm. Cây phân bố chủ yếu ở Biên Hòa và Đồng Nai [2]. 2.3.2 Các nghiên cứu hóa học trước đây Thành phần hóa học của cây còng nước chưa được nghiên cứu trên thế