Đang tải... (xem toàn văn)
ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm gan A (VGA) là bệnh truyền nhiễm do vi rút viêm gan A gây nên. Bệnh phổ biến với 1,5 triệu người mắc mới hàng năm trên toàn thế giới và có thể dự phòng được bằng vắc xin [33], [51], [72], [94]. Việt Nam là quốc gia nằm trong vùng lưu hành cao của vi rút viêm gan A nên nhu cầu sử dụng vắc xin viêm gan A là rất lớn [5], [9]. Nhằm thực hiện chiến lược dự phòng viêm gan A, Việt Nam đã sản xuất thành công vắc xin viêm gan A bất hoạt từ nuôi cấy tế bào thận khỉ tiên phát Maccaca mulatta. Vắc xin này đã phát huy được tính hiệu quả, an toàn, đáp ứng được phần lớn nhu cầu vắc xin viêm gan A trong nước [18], [24], [25]. Tuy nhiên, công nghệ sản xuất vắc xin này còn một số hạn chế vì tế bào thận khỉ Maccaca mulatta phải chọn lọc qua việc kiểm soát chặt chẽ các vi rút ngoại lai, khó mở rộng về quy mô sản xuất. Xu hướng hiện nay trên thế giới là sử dụng vắc xin viêm gan A bất hoạt sản xuất trên tế bào lưỡng bội phổi người (MRC5 - Medical Research Council). Sử dụng dòng tế bào này để sản xuất vắc xin có ưu điểm : - Tế bào MRC5 có nguồn gốc từ người nên sử dụng dòng tế bào này để sản xuất vắc xin sẽ hạn chế được nguy cơ dị ứng cho người. - Sử dụng tế bào MRC5 để sản xuất vắc xin thì có thể chủ động và dễ mở rộng quy mô sản xuất. - Dòng tế bào này đã được kiểm tra chất lượng và cấp phép sản xuất nhiều loại vắc xin trên thế giới với chất lượng tốt. - Sử dụng dòng tế bào MRC5 để sản xuất vắc xin thay thế cho quy trình sản xuất vắc xin từ tế bào thận khỉ sẽ tránh phải sử dụng động vật là nguyên liệu đầu vào cho sản xuất. Hiện nay, chỉ có một số hãng dược phNm lớn như Glaxo Smith Kline, Merck Sharp & Dohme, Aventis Pasteur sản xuất thành công vắc xin VGA trên tế bào lưỡng bội, nhưng giá thành rất cao. Hơn nữa, việc chuyển giao công nghệ sản xuất các loại vắc xin nói chung và vắc xin VGA nói riêng vào Việt Nam còn khó khăn. Để tiến tới tự lực sản xuất vắc xin viêm gan A trên tế bào MRC5 ở Việt Nam nhằm đáp ứng được nhu cầu vắc xin phòng bệnh cho cộng đồng cả về số lượng, chất lượng và giá thành, đề tài: “Nghiên cứu phát triển vắc xin viêm gan A bất hoạt trên dòng tế bào MRC5 ở quy mô phòng thí nghiệm” được tiến hành với 3 mục tiêu: 1. Thích ứng chủng vi rút viêm gan A HM 175 trên tế bào MRC5 để sản xuất vắc xin viêm gan A. 2. Xây dựng quy trình sản xuất vắc xin viêm gan A bất hoạt trên nuôi cấy tế bào MRC5 quy mô phòng thí nghiệm. 3. Đánh giá chất lượng vắc xin viêm gan A trong quá trình sản xuất và vắc xin thành phm.
Bộ giáo dục và đào tạo bộ quốc phòng Học viện quân y NGUYễN THị VÂN QUỳNH NGUYễN THị VÂN QUỳ NGUYễN THị VÂN QUỳNH NGUYễN THị VÂN QUỳNH NGUYễN THị VÂN QUỳNH Lê thanh sơn A. Nghiên cứu áp dụng nội soi ổ bụng trong B. xác định tổn thơng giảI phẫu bệnh và khả năng phẫu thuật ung th 1/3 dới dạ dày giai đoạn tiến triển luận án tiến sĩ y học B GIO DC V O TO B QUC PHềNG HC VIN QUN Y NGUYN THN VN QUNH Nghiên cứu PHáT TRIểN VắC XIN VIÊM GAN A BấT HOạT Nghiên cứu PHáT TRIểN VắC XIN VIÊM GAN A BấT HOạTNghiên cứu PHáT TRIểN VắC XIN VIÊM GAN A BấT HOạT Nghiên cứu PHáT TRIểN VắC XIN VIÊM GAN A BấT HOạT TRÊN DòNG Tế BàO MRC5 ở QUY MÔ PHòNG THí NGHIệM TRÊN DòNG Tế BàO MRC5 ở QUY MÔ PHòNG THí NGHIệMTRÊN DòNG Tế BàO MRC5 ở QUY MÔ PHòNG THí NGHIệM TRÊN DòNG Tế BàO MRC5 ở QUY MÔ PHòNG THí NGHIệM luận án tiến sĩ y học Hà nội - 2015 B GIO DC V O TO B QUC PHềNG HC VIN QUN Y NGHIấN CU PHT TRIN VC XIN VIấM GAN A BT HOT TRấN DềNG T BO MRC5 QUY Mễ PHềNG TH NGHIM Chuyên ngành: Vi sinh y học Mã số: 62 72 01 15 luận án tiến sĩ y học Cán bộ hớng dẫn luận án: GS. TSKH. Nguyễn thu vân Ts. đỗ tuấn đạt Hà nội - 2015 Lời cảm ơn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc tới Gíao s, Tiến sĩ khoa học Nguyễn Thu Vân Nguyễn Thu Vân Nguyễn Thu Vân Nguyễn Thu Vân Chủ tịch Hội đồng khoa học, Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1; Tiến sĩ Đỗ Tuấn Đạt Tiến sĩ Đỗ Tuấn Đạt Tiến sĩ Đỗ Tuấn Đạt Tiến sĩ Đỗ Tuấn Đạt Giám đốc Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1 là những ngời thầy hớng dẫn, luôn tận tình chỉ bảo và trực tiếp sát cánh cùng tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài. Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám đốc Công ty Vắc xin và Sinh phẩm Ban Giám đốc Công ty Vắc xin và Sinh phẩm Ban Giám đốc Công ty Vắc xin và Sinh phẩm Ban Giám đốc Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1 số 1 số 1 số 1 - - Bộ Y tế, Bộ Môn Khoa Vi Sinh Y Bộ Y tế, Bộ Môn Khoa Vi Sinh YBộ Y tế, Bộ Môn Khoa Vi Sinh Y Bộ Y tế, Bộ Môn Khoa Vi Sinh Y học học học học Bệnh viện Quân y 103, Ban Bệnh viện Quân y 103, Ban Bệnh viện Quân y 103, Ban Bệnh viện Quân y 103, Ban Giám đốc Học viện Quân y v Giám đốc Học viện Quân y vGiám đốc Học viện Quân y v Giám đốc Học viện Quân y và Phòng Sau đại học à Phòng Sau đại họcà Phòng Sau đại học à Phòng Sau đại học đã cho phép và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi hoàn thành đề tài nghiên cứu này. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể cán bộ, nhân viên Phòng Quản lý chất Phòng Quản lý chất Phòng Quản lý chất Phòng Quản lý chất lợng, Phòng Công nghệ cao, Xởng Sản xuất vắc xin viêm gan A, Phòng lợng, Phòng Công nghệ cao, Xởng Sản xuất vắc xin viêm gan A, Phòng lợng, Phòng Công nghệ cao, Xởng Sản xuất vắc xin viêm gan A, Phòng lợng, Phòng Công nghệ cao, Xởng Sản xuất vắc xin viêm gan A, Phòng Chăn nuôi động Chăn nuôi động Chăn nuôi động Chăn nuôi động vật thí nghiệm vật thí nghiệm vật thí nghiệm vật thí nghiệm Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1 Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1 Công ty Vắc xin và Sinh phẩm số 1 đã nhiệt tình ủng hộ, giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện và hoàn thành bản luận án này. Tôi xin cảm ơn Phòng Thí nghiệm viêm gan vi rút, Trung tâm Dự phòng và kiểm soát bệnh (CDC) đã giúp đỡ chúng tôi trong việc giải trình tự gen vi rút viêm gan A -HM175 hệ chủng gốc giống. Xin chân thành cảm ơn các bạn đồng nghiệp đã đóng góp công sức cũng nh động viên tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài. Cuối cùng, tôi xin dành tình cảm sâu nặng nhất cảm ơn gia đình, nguồn động lực, luôn cổ vũ, động viên và chia sẻ, giúp tôi hoàn thành tốt quá trình học tập, công tác và nghiên cứu. Nguyễn Thị Vân Quỳnh Nguyễn Thị Vân QuỳnhNguyễn Thị Vân Quỳnh Nguyễn Thị Vân Quỳnh LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu trong đề tài luận án là một phần số liệu trong công trình nghiên cứu có tên: “Nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ sản xuất vắc xin viêm gan A trên nuôi cấy tế bào MRC5 ở quy mô phòng thí nghiệm”. Kết quả công trình này là thành quả nghiên cứu của tập thể mà tôi là chủ nhiệm đề tài. Tôi đã được toàn bộ các thành viên trong nhóm nghiên cứu đồng ý cho phép sử dụng đề tài này vào trong luận án để bảo vệ lấy bằng tiến sĩ. Các số liệu, kết quả nêu trong luận án là trung thực và chưa từng được công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả luận án Nguyễn Thị Vân Quỳnh MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa Lời cảm ơn Lời cam đoan Mục lục Các chữ viết tắt Danh mục các bảng Danh mục các hình Danh mục các biểu đồ ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 3 1.1. Những hiểu biết hiện nay về vi rút viêm gan A 3 1.1.1. Đặc điểm sinh học của vi rút viêm gan A 3 1.1.2. Đặc điểm sinh bệnh học, dịch tễ viêm gan vi rút A 10 1.1.3. Các biện pháp dự phòng 12 1.2. Các loại vắc xin viêm gan A và quy trình sản xuất 15 1.2.1. Các loại vắc xin viêm gan A 15 1.2.2. Tình hình sản xuất vắc xin viêm gan A ở Việt Nam 19 1.2.3. Quy trình sản xuất vắc xin viêm gan A bất hoạt trên nuôi cấy tế bào MRC5 20 1.3. Các phương pháp kiểm tra chất lượng vắc xin viêm gan A 24 1.3.1. Kiểm tra nguồn nguyên liệu sử dụng cho sản xuất vắc xin 24 1.3.2. Kiểm tra chất lượng vắc xin viêm gan A trong quá trình sản xuất 28 1.3.3. Kiểm tra chất lượng vắc xin thành phNm 29 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.1. Vật liệu 33 2.1.1. Chủng vi rút 33 2.1.2. Các dòng tế bào 33 2.1.3. Vắc xin viêm gan A mẫu chuNn Quốc gia 34 2.1.4. Động vật thí nghiệm 34 2.1.5. Môi trường, hóa chất, sinh phNm 34 2.1.6. Dụng cụ, trang thiết bị 35 2.2. Phương pháp nghiên cứu 36 2.2.1. Thích ứng vi rút viêm gan A HM175 trên tế bào MRC5 37 2.2.2. Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất vắc xin viêm gan A bất hoạt trên nuôi cấy tế bào MRC5 quy mô phòng thí nghiệm 44 2.2.3. Phương pháp kiểm tra chất lượng vắc xin viêm gan A trên nuôi cấy tế bào MRC5 trong quá trình sản xuất và vắc xin thành phNm 48 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 57 3.1. Kết quả thích ứng vi rút viêm gan A HM175 trên tế bào MRC5 57 3.1.1. Tối ưu hoá điều kiện nuôi cấy cho HAV HM175 trên tế bào MRC5 trong môi trường có huyết thanh 57 3.1.2. Kết quả cấy truyền thích ứng 60 3.1.3. Kết quả sản xuất chủng giống và kiểm tra chất lượng chủng 60 3.2. Kết quả xây dựng quy trình sản xuất vắc xin viêm gan A bất hoạt trên nuôi cấy tế bào MRC5 quy mô phòng thí nghiệm 67 3.2.1. Kết quả nuôi cấy và chuNn bị tế bào MRC5 67 3.2.2. Kết quả gây nhiễm, nuôi cấy và thu hoạch vi rút 68 3.3. Kết quả sản xuất thử nghiệm và kiểm tra chất lượng trong quá trình sản xuất và vắc xin thành ph)m 73 3.3.1. Kết quả kiểm tra trong quá trình sản xuất 73 3.3.2. Kết quả kiểm tra chất lượng vắc xin thành phNm 77 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 82 4.1. Thích ứng chủng 4.1.1. Ưu điểm của tế bào MRC5 trong sản xuất vắc xin 83 83 4.1.2. Nguồn gốc và chất lượng tế bào MRC5 sử dụng để thích ứng chủng và sản xuất vắc xin. 85 4.1.3. Chủng vi rút viêm gan A 86 4.1.4. Kỹ thuật lựa chọn để thích ứng chủng 86 4.1.5. Lựa chọn các điều kiện nuôi cấy tối ưu 88 4.1.6. Chất lượng chủng giống vi rút viêm gan A cho sản xuất vắc xin 89 4.2. Xây dựng quy trình sản xuất vắc xin viêm gan A trên MRC5 91 4.2.1. Quy trình nuôi cấy tế bào 92 4.2.2. Gây nhiễm vi rút 93 4.2.3. Quy trình nuôi cấy và thu hoạch vi rút 95 4.2.4. Tinh sạch hỗn dịch vi rút 4.2.5. Bất hoạt vi rút 96 98 4.3. Chất lượng vắc xin viêm gan A sản xuất thử nghiệm 4.4. Ưu điểm, hạn chế và tính mới của nghiên cứu 4.4.1. Ưu điểm 4.4.2. Hạn chế 4.4.3. Tính mới của nghiên cứu 99 106 106 107 108 KẾT LUẬN 109 KIẾN NGHN 111 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN 112 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Tiếng Anh/ nghĩa tiếng việt ADN Desoxyribonucleic acid (Axít desoxyribonucleic) ARN Ribonucleic acid (Axít ribonucleic) CDC Centers of Diseases Control and Prevention (Trung tâm dự phòng và kiểm soát bệnh – Mỹ) ECACC The European Collection of Cell Cultures (Ngân hàng tế bào châu Âu) ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay (Kỹ thuật miễn dịch gắn men) FBS Fetal Bovine Serum (Huyết thanh bê bào thai) FDA Food and Drug Administration (Ủy ban Quản lý thực phNm và thuốc) HAV Hepatitis A virus (Vi rút viêm gan A) Ig Immunoglobulin (Globulin miễn dịch) IRIVs Immunopotentiating Reconstituted Influenza Virosomes (Virosome vi rút cúm tái tạo có tính miễn dịch cao) KD Kilodalton (Kilô dalton) MCB Master cell bank (Tế bào giống gốc) MEM Minimum Essential Medium (môi trường tối thiểu) MOI Multiplicity of Infection (Liều gây nhiễm) MRC5 Medical Reseach Council 5 (Tế bào lưỡng bội phổi người) MSV Master seed virus (Chủng vi rút giống gốc) MT Môi trường P Passage (Đời cấy truyền) PCR Polymerase chain reaction (Phản ứng chuỗi polymerase) PFU Plaque Forming Unit ( Đơn vị tạo đám hoại tử) PPLO Pleuropneumonia Like Organism SIV Simian Immunodeficiency virus (Vi rút gây suy giảm miễn dịch ở khỉ) VABIOTECH Công ty Vắc xin và Sinh phNm số 1 VGA Viêm gan A WCB Working cell bank (Ngân hàng tế bào sản xuất) WSV Working seed virus (Chủng vi rút giống sản xuất) WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế thế giới) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 1.1 Các vắc xin viêm gan A bất hoạt được lưu hành 16 1.2 Các tiêu chuNn của vắc xin viêm gan A 30 3.1 Hiệu giá vi rút theo thời gian hấp phụ 59 3.2 Hiệu giá vi rút qua các đời cấy truyền 60 3.3 Hệ thống chủng giống cho sản xuất vắc xin viêm gan A trên MRC5 60 3.4 Kết quả kiểm tra vô khuNn chủng giống gốc (MSV) và chủng giống sản xuất (WSV) 63 3.5 Kết quả kiểm tra hiệu giá và tính ổn định chủng 64 3.6 Kết quả kiểm tra tác nhân ngoại lai trên chủng 65 3.7 Kết quả kiểm tra tính sinh miễn dịch của chủng 66 3.8 Hiệu giá vi rút ở các môi trường duy trì 68 3.9 Hiệu giá vi rút ở các liều khác nhau trên môi trường LH3E 69 3.10 Hiệu giá vi rút trên MRC5 ở môi trường không chứa huyết thanh 71 3.11 Nuôi cấy và chuNn bị tế bào MRC5 của các loạt sản xuất thử nghiệm 73 3.12 Hiệu giá vi rút của 3 loạt sản xuất thử nghiệm 74 3.13 Kết quả kiểm tra hiệu giá sau cô đặc thNm tích hỗn dịch vi rút 75 3.14 Kết quả kiểm tra bất hoạt vi rút 3 loạt vắc xin viêm gan A 75 3.15 Kết quả kiểm định các loạt bán thành phNm 76 3.16 Kết quả thử nghiệm vô khuNn 3 loạt vắc xin viêm gan A 77 3.17 Kết quả kiểm tra chất gây sốt trên thỏ của vắc xin viêm gan A 78 3.18 Kết quả kiểm tra an toàn chung của vắc xin trên chuột nhắt 78 3.19 Kết quả kiểm tra an toàn chung vắc xin trên chuột lang 79 3.20 Kết quả kiểm tra công hiệu của 3 loạt vắc xin 80 3.21 Kết quả kiểm tra các thành phần hóa học trong vắc xin 80 4.1 Các vắc xin vi rút sản xuất trên MRC5 84 [...]... trên tế bào MRC5 để sản xuất vắc xin viêm gan A 2 Xây dựng quy trình sản xuất vắc xin viêm gan A bất hoạt trên nuôi cấy tế bào MRC5 quy mô phòng thí nghiệm 3 Đánh giá chất lượng vắc xin viêm gan A trong quá trình sản xuất và vắc xin thành ph m 3 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Những hiểu biết hiện nay về vi rút viêm gan A 1.1.1 Đặc điểm sinh học c a vi rút viêm gan A Vi rút VGA (Hepatitis A virus - HAV) được... VGA nói riêng vào Việt Nam còn khó khăn Để tiến tới tự lực sản xuất vắc xin viêm gan A trên tế bào MRC5 ở Việt Nam nhằm đáp ứng được nhu cầu vắc xin phòng bệnh cho cộng đồng cả về số lượng, chất lượng và giá thành, đề tài: Nghiên cứu phát triển vắc xin viêm gan A bất hoạt trên dòng tế bào MRC5 ở quy mô phòng thí nghiệm được tiến hành với 3 mục tiêu: 1 Thích ứng chủng vi rút viêm gan A HM 175 trên tế. .. dự phòng được bằng vắc xin [33], [51], [72], [94] Việt Nam là quốc gia nằm trong vùng lưu hành cao c a vi rút viêm gan A nên nhu cầu sử dụng vắc xin viêm gan A là rất lớn [5], [9] Nhằm thực hiện chiến lược dự phòng viêm gan A, Việt Nam đã sản xuất thành công vắc xin viêm gan A bất hoạt từ nuôi cấy tế bào thận khỉ tiên phát Maccaca mulatta Vắc xin này đã phát huy được tính hiệu quả, an toàn, đáp ứng được... toàn cao c a loại vắc xin này Đây là loại vắc xin ch a vi rút VGA bị bất hoạt bởi formallin Hiện nay, trên thế giới các nhà sản xuất vắc xin VGA bất hoạt trên dòng tế bào MRC5 sử dụng các chủng vi rút khác nhau như HM175, GBM, CR236, RG-SB [50], [84] 16 Bảng 1.1 Các vắc xin viêm gan A bất hoạt được lưu hành Vắc xin Chủng Tế bào Kháng nguyên (Hãng sản xuất) Vi rút GBM MRC5 160 đơn vị HAV EPAXAL BERNA®... nNy chồi qua những vị trí trên màng tế bào chủ ra ngoài 8 Vi rút viêm gan A trong nuôi cấy tế bào: Nuôi cấy vi rút VGA trên tế bào giữ vai trò quan trọng trong nghiên cứu vi rút này Để có thể phát triển trên các tế bào ngoài tế bào đích (tế bào gan) , vi rút VGA cần phải trải qua quá trình thích ứng với sự tăng trưởng trong nuôi cấy tế bào Năm 1979, Phillip J Provost và Maurice R Hilleman là những... cầu vắc xin viêm gan A trong nước [18], [24], [25] Tuy nhiên, công nghệ sản xuất vắc xin này còn một số hạn chế vì tế bào thận khỉ Maccaca mulatta phải chọn lọc qua việc kiểm soát chặt chẽ các vi rút ngoại lai, khó mở rộng về quy mô sản xuất Xu hướng hiện nay trên thế giới là sử dụng vắc xin viêm gan A bất hoạt sản xuất trên tế bào lưỡng bội phổi người (MRC5 - Medical Research Council) Sử dụng dòng tế. ..DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Tên hình Trang 1.1 Hình ảnh vi rút viêm gan A dưới kính hiển vi điện tử 4 1.2 Cấu trúc vi rút viêm gan A 4 1.3 Cấu tạo hệ gen c a vi rút viêm gan A 5 1.4 Sự nhân lên c a vi rút viêm gan A trong tế bào gan 7 1.5 Diễn biến huyết thanh học trong bệnh viêm gan A 11 2.1 Tiêm phúc mạc kiểm tra an toàn chung trên chuột nhắt và chuột lang 52 2.2 Tiêm tĩnh mạch tai thỏ kiểm tra chất... kiến c a tiêm vắc xin là thấp hơn năm lần so với dùng globulin miễn dịch tại các khu vực có nguy cơ trong 10 năm [47] 1.2 Các loại vắc xin viêm gan A và quy trình sản xuất 1.2.1 Các loại vắc xin viêm gan A Nuôi cấy thành công vi rút VGA trên tế bào (in vitro) mở ra sự phát triển các vắc xin VGA sống giảm độc lực và bất hoạt Vắc xin VGA được đăng ký sử dụng lần đầu tiên tại Mỹ năm 1995, hiện nay một... bằng vắc xin là biện pháp chủ động có hiệu quả, do đó nhu cầu dùng vắc xin VGA trong nước rất lớn Năm 2002 Việt Nam đã sản xuất thành công vắc xin VGA bất hoạt từ nuôi cấy tế bào thận khỉ tiên phát Maccaca mulatta (PMMK) Qui trình sản xuất vắc xin trên tế bào thận khỉ tiên phát gồm: gây nhiễm chủng sản xuất HM175 vào tế bào thận khỉ tiên phát l lớp Các tế bào thận khỉ dùng trong sản 20 xuất vắc xin VGA... thử nghiệm phòng thí nghiệm, thực đ a lâm sàng cho kết quả tốt về tính an toàn và sinh miễn dịch [5], [25] Hiện nay vắc xin này đang được sử dụng tại Việt Nam với khoảng 300.000 liều mỗi năm Tuy nhiên sản xuất vắc xin này phải phụ thuộc vào nguồn tế bào thận khỉ tiên phát Maccaca mulatta có hạn, do đó hạn chế trong việc mở rộng sản xuất với quy mô lớn 1.2.3 Quy trình sản xuất vắc xin viêm gan bất hoạt . GAN A BấT HOạT Nghiên cứu PHáT TRIểN VắC XIN VIÊM GAN A BấT HOạTNghiên cứu PHáT TRIểN VắC XIN VIÊM GAN A BấT HOạT Nghiên cứu PHáT TRIểN VắC XIN VIÊM GAN A BấT HOạT TRÊN DòNG Tế BàO MRC5 ở. DòNG Tế BàO MRC5 ở QUY MÔ PHòNG THí NGHIệM TRÊN DòNG Tế BàO MRC5 ở QUY MÔ PHòNG THí NGHIệMTRÊN DòNG Tế BàO MRC5 ở QUY MÔ PHòNG THí NGHIệM TRÊN DòNG Tế BàO MRC5 ở QUY MÔ PHòNG THí NGHIệM . Thích ứng vi rút viêm gan A HM175 trên tế bào MRC5 37 2.2.2. Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất vắc xin viêm gan A bất hoạt trên nuôi cấy tế bào MRC5 quy mô phòng thí nghiệm 44 2.2.3.