Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn đại học tháI nguyên khoa khoa học tự nhiên và xã hội Đề tài sinh viên nghiên cứu khoa học đánh giá các tính chất lý hóa của cellulase từ chủng vi sinh vật phân lập từ suối nớc nóng Chuyên ngành : Hóa Sinh Giáo viên hớng dẫn : ThS. Trịnh Đình Khá Sinh viên thực hiện : Đinh Thị Hồng Trang Lớp : Công nghệ Sinh B2K3 (Đề tài thực hiện tại phòng thí nghiệm Sinh học khoa KHTN&XH) Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Nội dung chính của báo cáo 1. Mở đầu 2. Mục tiêu nghiên cứu 3. Tổng quan tài liệu 4. Vật liệu và phơng pháp nghiên cứu 5. Kết quả nghiên cứu và thảo luận 6. Kết luận và đề nghị Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn Më ®Çu Lý do chän ®Ò tµi • Cellulase là một trong những loại enzyme có vai trò rất quan trọng trong nhiều lĩnh vực đời sống, sản xuất của con người. • Việc nghiên cứu để tìm ra các enzyme chịu nhiệt và bền nhiệt có vai trò quan trọng, quyết định khả năng ứng dụng của chúng. • Đã có nhiều công trình nghiên cứu về enzyme bền nhiệt nói chung và cellulase chịu nhiệt nói riêng từ các nguồn vi sinh vật khác nhau. • Các vi sinh vật suối nước nóng là nguồn khai thác tiềm năng để sản xuất enzyme này. • Hiện nay các nghiên cứu về vi sinh vật suối nước nóng của Việt Nam còn chưa được quan tâm đúng mức và còn hạn chế. • Xuất phát từ những lý do trên, chúng tôi chọn đề tài: “Đánh giá các tính chất lý hóa của cellulase từ chủng vi sinh vật phân lập từ suối nước nóng”. Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn Môc tiªu nghiªn cøu 1. Phân lập các chủng vi sinh vật từ các suối nước nóng 2. Tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả năng sinh tổng hợp cellulase cao 3. Đánh giá các tính chất lý hóa của cellulase. Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn Tæng quan tµi liÖu 1.1. Khái niệm Cellulase Hình 1.1. Sơ đồ thủy phân mối liên kết β-1,4-O-glycoside của cellulase Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn 1.2. Cơ chất của Cellulase Hình 1.2. Cấu trúc cellulose và mạng lưới liên kết hydro Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn Hình 1.3. Cấu trúc cellulose Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn 1.3. Cơ chế thủy phân của cellulase Enzyme C 1 Cellulose kết tinh Cellulose vô định hình Enzyme C x Oligome r Enzyme C x Enzyme C 1 Cellobiose Cellobiase Glucose Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn 1.4. Khả năng ứng dụng của cellulase 1.4.1. Trong công nghiệp  Trong công nghiệp thực phẩm  Trong công nghiệp sản xuất thức ăn gia súc  Trong công nghiệp sản xuất dung môi hữu cơ  Trong công nghiệp sản xuất giấy và bột giấy  Trong công nghiệp sản xuất chất tẩy rửa  Trong công nghiệp dệt 1.4.2. Trong nông nghiệp 1.4.3. Trong bảo vệ môi trường 1.4.4. Trong công nghệ sinh học Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn vËt liÖu vµ ph¬ng ph¸p 2.1. VËt liÖu Bảng 2.1. Mẫu nước suối nước nóng dùng phân lập các chủng vi sinh vật Stt Tên mẫu Địa điểm suối nước nóng Ngày lấy mẫu Nhiệt độ 1 CP1 Cẩm Thạch - Cẩm Phả Quảng Ninh Ngày 5 tháng 7 năm 2007 40 0 C 2 CP2 Quang Hanh - Cẩm Phả Quảng Ninh Ngày 28 tháng 7 năm 2007 45 0 C 3 CP3 Quang Hanh - Cẩm Phả Quảng Ninh Ngày 8 tháng 10 năm 2007 45 0 C 4 PT La Phù - Thanh Thủy Phú Thọ Ngày 12 tháng 8 năm 2007 46 0 C [...]...Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn 2.2 Phơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Phơng pháp phân lập vi sinh vật 2.2.2 Phơng pháp nuôi cấy vi sinh vật để thu nhận enzyme 2.2.3 Phơng pháp xác định hoạt tính cellulase 2.2.4 Phơng pháp xác định hoạt độ cellulase 2.2.5 Phơng pháp xác định tính chất lý hoá của cellulase * Xỏc nh thi gian phn ng ti u * Xỏc nh nhit phn ng ti... chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn KT LUN 1 ó phõn lp c 61 chng vi sinh vt, trong ú cú 32 chng vi khun, 28 chng x khun, 1 chng nm Trong s 61 chng vi sinh vt cú 32 chng cú kh nng sinh tng hp cellulase 2 ó tuyn chn c chng vi khun: CP3.2, CP3.4, CP3.8 v PT.5 cú hot tớnh cellulase mnh Chng CP3.4 cú hot tớnh cellulase mnh nht c chn tin hnh cỏc nghiờn cu tip theo 3 Chng CP3.4 cú kh nng tng hp cellulase mnh nht... cellulase ca cỏc chng vi sinh vt Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn 3.4 KH NNG SINH CELLULASE THEO THI GIAN Bng 3.3 nh hng ca thi gian nuụi cy ti kh nng sinh tng hp cellulase ca chng CP3.4 Thi gian (gi) 18 Hot tớnh tng i (%) 22 24 26 0,43 0,008 Hot tớnh (IU/ml) 20 0,74 0,012 0,87 0,009 0,67 0,004 0,50 0,007 120 100 80 60 40 20 0 16 18 20 22 24 26 28 Thi gian (gi) Hỡnh 3.4 Kh nng sinh tng hp cellulase. .. liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn 3.2 TUYN CHN CC CHNG VI SINH VT SINH TNG HP CELLULASE BNG PHNG PHP NH TNH Mnh 6.6% 22.9% 45.9% Tng i mnh Trung bỡnh Yu 9.9% 14.7% Khụng cú hot tớnh Hỡnh 3.1 T l (%) ca cỏc chng vi sinh vt sui nc núng cú hot tớnh cellulase khỏc nhau Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Chng CP3.4 cú ng kớnh vũng phõn gii ln nht (HT = 33 mm) (Hỡnh 3.2) Hỡnh 3.2 Hot tớnh cellulase ca chng... kh nng sinh tng hp cellulase ca chng CP3.4 ti u húa kh nng sinh enzyme ca chng ny 3 Tip tc ỏnh giỏ cỏc tớnh cht lý húa ca cellulase ca chng CP3.4 4 Nghiờn cu to enzyme tỏi t hp v nghiờn cu ng dng cellulase ca chng CP3.4 Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Xin chân thành cảm ơn ! Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Mt s hỡnh nh v cellulase Cu trỳc cellulase ca T fusca Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn... s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Cu trỳc Cellulase ca B agaradhaerens Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Cu trỳc Endo-Beta-1,4-Glucanase ca Acetobacter Xylinum Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Mụ hỡnh cellulase hot ng trờn b mt cellulose Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Mụ hỡnh cellulase thy phõn cellulose Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Cu trỳc cellulase ca T fusca Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn... wWw.SinhHc.edu.vn STT Tờn chng Hot tớnh (IU/ml) 1 CP3.1 0,12 0,001 2 CP3.2 0,25 0,002 3 CP3.3 0,07 0,005 4 CP3.4 0,64 0,006 5 CP3.5 0,07 0,003 6 CP3.6 0,10 0,002 7 CP3.7 0,08 0,001 8 CP3.8 0,13 0,007 9 PT.5 0,11 0,010 10 PT.6 0,16 0,004 Bng 3.2 Hot tớnh cellulase ca mt s chng vi sinh vt phõn lp t sui nc núng ối nh H oạ t tí t- ơng đ (100% ) 3.3 TUYN CHN CC CHNG VI SINH VT SINH TNG HP CELLULASE. .. cellulase mnh nht sau 22 gi nuụi cy 4 Cellulase ca chng CP3.4 phn ng ti u thi gian 5 phỳt, nng c cht 1,0% (w/v) CMC, nhit 650C v pH = 7,5 5 Cỏc ion kim loi kho sỏt u c ch hot tớnh cellulase ca chng CP3.4 theo cỏc mc khỏc nhau: ion Mn2+ c ch mnh nht, ion Cu2+ kỡm hóm nh nht Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn NGH 1 Tip tc phõn lp cỏc chng vi sinh vt sinh tng hp cellulase t nhiu ngun sui nc núng khỏc... Xỏc nh nhit phn ng ti u * Xỏc nh nng c cht phn ng ti u * Xỏc nh pH phn ng ti u * nh hng ca ion kim loi n hot tớnh cellulase 2.2.6 Phơng pháp xử lý số liệu theo thống kê sinh học trên Excel Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn Kết quả và Thảo luận 3.1 KT QU PHN LP Bng 3.1 Cỏc chng vi sinh vt phõn lp c trờn cỏc mụi trng khỏc nhau v hot tớnh ca chỳng Stt Tờn chng Mụi trng phõn lp Hot tớnh Loi 1 CP1.1... (%) Thi gian (phỳt) 120 100 80 60 40 20 0 0 5 10 15 20 25 30 35 Thi gian (phỳt) Hỡnh 3.5 nh hng ca thi gian phn ng n hot tớnh cellulase ca chng CP3.4 Ti liu chia s ti: wWw.SinhHc.edu.vn 3.5.2 nh hng ca nng c cht n hot tớnh cellulase Bng 3.5 nh hng ca nng c cht n hot tớnh cellulase Hot tớnh (IU/ml) Nng CMC (%) Hot tớnh (IU/ml) 0,3 0,18 0,007 1,5 0,22 0,008 0,5 0,30 0,005 2,0 0,50 0,102 1,0 0,93 . nghiªn cøu 1. Phân lập các chủng vi sinh vật từ các suối nước nóng 2. Tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả năng sinh tổng hợp cellulase cao 3. Đánh giá các tính chất lý hóa của cellulase. . riêng từ các nguồn vi sinh vật khác nhau. • Các vi sinh vật suối nước nóng là nguồn khai thác tiềm năng để sản xuất enzyme này. • Hiện nay các nghiên cứu về vi sinh vật suối nước nóng của Vi t. • Xuất phát từ những lý do trên, chúng tôi chọn đề tài: Đánh giá các tính chất lý hóa của cellulase từ chủng vi sinh vật phân lập từ suối nước nóng . Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHc.edu.vn