BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  LÊ THỊ PHƯƠNG DUNG ðÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG, XÁC ðỊNH SỰ TỒN DƯ KHÁNG SINH VÀ MỨC NHIỄM KHUẨN TRONG SỮA BÒ TRÊN ðỊA BÀN HUYỆN BA VÌ - HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI – 2013 BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  LÊ THỊ PHƯƠNG DUNG ðÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG, XÁC ðỊNH SỰ TỒN DƯ KHÁNG SINH VÀ MỨC NHIỄM KHUẨN TRONG SỮA BÒ TRÊN ðỊA BÀN HUYỆN BA VÌ - HÀ NỘI CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y Mà NGÀNH : 60.64.01.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC : TS. TRỊNH ðÌNH THÂU HÀ NỘI – 2013 Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ii LỜI CAM ðOAN - Tôi xin cam ñoan số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và chưa từng ñược bảo vệ một học vị nào trước ñây. - Tôi xin cam ñoan mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn này ñã ñược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn này ñã ñược ghi rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày 31 tháng 12 năm 2013 Lê Thị Phương Dung Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp iii LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, khoa Thú y cùng các thầy cô giáo trong nhà trường ñã tạo ñiều kiện cho tôi ñược tiếp cận với những kiến thức khoa học về nông nghiệp trong 2 năm học ở trường. ðể hoàn thành luận văn này, ngoài sự cố gắng của bản thân, tôi xin chân thành cảm ơn sâu sắc thầy giáo hướng dẫn khoa học TS. Trịnh ðình Thâu bộ môn Giải phẫu – Tổ chức và các thầy cô giáo trong bộ môn. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh ñạo và cán bộ nhân viên Trung tâm nghiên cứu bò và ñồng cỏ Ba Vì; nhân viên thú y các xã và các hộ chăn nuôi bò sữa trên ñịa bàn huyện Ba Vì ñã giúp ñỡ tôi trong thời gian thực tập vừa qua. Nhân dịp hoàn thành luận văn, một lần nữa tôi xin ñược bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới nhà trường, các thầy cô giáo, cơ quan, bạn bè ñồng nghiệp cùng gia ñình, người thân ñã ñộng viên, tạo ñiều kiện giúp ñỡ tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu thực hiện ñề tài. Hà Nội, ngày 31 tháng 12 năm 2013 Tác giả Lê Thị Phương Dung Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp iv MỤC LỤC LỜI CAM ðOAN ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii ðẶT VẤN ðỀ 1 Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1 Tình hình phát triển chăn nuôi bò sữa trên thế giới và Việt Nam 4 1.1.1 Tình hình phát triển chăn nuôi bò sữa trên thế giới 4 1.1.2 Tình hình phát triển chăn nuôi bò sữa ở Việt Nam 5 1.2 Sữa tươi và ñặc tính của sữa tươi 9 1.2.1 Thành phần của sữa 9 1.2.2 Tính chất của sữa 12 1.3 Hệ vi sinh vật trong sữa 13 1.3.1 Hệ vi sinh vật trong sữa 13 1.3.2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước 19 1.4 Sự tồn dư kháng sinh trong sữa tươi 20 1.4.1 Khái niệm về tồn dư kháng sinh 20 1.4.2 Tình hình nghiên cứu về tồn dư kháng sinh trong sữa trên thế giới và ở Việt Nam 21 1.4.3 Tác hại của tồn dư kháng sinh trong sữa bò 24 1.4.4 Một số kháng sinh dùng cho bò sữa 25 Chương 2 NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Nội dung 27 2.1.1 ðiều tra tình hình chăn nuôi, khai thác và tiêu thụ sữa tươi tại Ba Vì. 27 2.1.2 Kiểm tra một số chỉ tiêu chất lượng sữa bò tươi ở Ba Vì 27 2.1.3 Xác ñịnh sự ô nhiễm một số vi khuẩn trong sữa bò tươi ở Ba Vì 27 Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp v 2.1.4 Xác ñịnh sự tồn dư kháng sinh trong sữa tươi 27 2.2 Vật liệu 27 2.3 Phương pháp nghiên cứu 27 2.3.1 ðiều tra, thu thập thông tin, tài liệu 27 2.3.2 Phương pháp lấy mẫu (theo TCVN 6400 - 1998) 27 2.3.3 Phương pháp kiểm tra một số chỉ tiêu chất lượng sữa tươi 27 2.3.4 Phương pháp xác ñịnh sự ô nhiễm vi sinh vật trong sữa 30 2.3.5 Xác ñịnh tồn dư kháng sinh trong sữa bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LCMS/MS) 34 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 36 Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 37 3.1 Tình hình chăn nuôi, khai thác và tiêu thụ sữa tươi ở hà nội và trên ñịa bàn huyện Ba Vì 37 3.2 Khảo sát một số chỉ tiêu chất lượng sữa tươi ở Ba Vì 47 3.2.1 Kết quả kiểm tra ñộ tươi của sữa bằng phương pháp cảm quan và thử cồn 75 o 47 3.2.2 Kết quả ñánh giá ñộ nhiễm khuẩn của sữa bằng phản ứng hoàn nguyên xanh methylen 49 3.2.3 Kết quả kiểm tra một số chỉ tiêu: mỡ sữa, protein, vật chất khô không mỡ và tỷ trọng sữa 50 3.3 Kiểm tra sự ô nhiễm một số vi khuẩn trong sữa lấy tại trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi trên ñịa bàn huyện Ba Vì 52 3.3.1 Kết quả kiểm tra tổng số vi khuẩn hiếu khí trong sữa 52 3.3.2 Kết quả kiểm tra vi khuẩn E.coli trong mẫu sữa lấy tại các trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi. 54 3.3.3 Kết quả kiểm tra vi khuẩn Salmonella trong mẫu sữa lấy tại các trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi 56 3.3.4 Kết quả kiểm tra vi khuẩn Staphylococcus aureus trong các mẫu sữa lấy tại các trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi. 57 Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp vi 3.3.5 Tổng hợp kết quả kiểm tra sự ô nhiễm vi khuẩn trong sữa lấy tại các cơ sơ thu gom và cửa hàng sữa tươi trên ñịa bàn huyện Ba Vì 59 3.4 Kết quả kiểm tra tồn dư kháng sinh Ampicillin, Cloxacillin, Oxytetracycline trong các mẫu sữa lấy tại trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi. 62 3.4.1 Các loại kháng sinh ñược sử dụng nhiều trong ñiều trị bệnh cho bò sữa 62 3.4.2 Kết quả kiểm tra tồn dư kháng sinh Ampicillin, Cloxacillin, Oxytetracycline trong sữa 63 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 68 1 Kết luận 68 2 ðề nghị 68 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 PHỤ LỤC 722 Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp vii DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 1.1 Số lượng ñàn bò sữa của Việt Nam 2001-2012 6 1.2 Phân bố ñàn bò sữa theo vùng sinh thái 7 1.3 Sản lượng sữa tươi sản xuất hàng năm từ 2004-2012 8 1.4 Thành phần hóa học của sữa bò 10 2.1 Tiêu chuẩn ñánh giá chất lượng sữa bằng phản ứng xanhmetylen 29 3.1 Số lượng và sản lượng ñàn bò sữa Hà Nội 38 3.2 Tình hình chăn nuôi bò sữa toàn thành phố Hà Nội tháng 3/2013 39 3.3 Tình hình chăn nuôi bò sữa của huyện Ba Vì tháng 3/2013 42 3.4 Số lượng và sản lượng ñàn bò sữa huyện Ba Vì 43 3.5 Kết quả kiểm tra ñộ tươi của sữa tươi trên ñịa bàn huyện Ba Vì 48 3.6 Kết quả ñánh giá ñộ nhiễm khuẩn của sữa trên ñịa bàn huyện Ba Vì bằng phản ứng hoàn nguyên xanh methylen 50 3.7 Kết quả kiểm tra các chỉ tiêu mỡ sữa, protein, vật chất khô không mỡ và tỷ trọng của sữa tươi trên ñịa bàn huyện Ba Vì 51 3.8 Kết quả xác ñịnh tổng số vi khuẩn hiếu khí trong 1ml sữa tươi lấy tại các trạm thu gom và các cửa hàng sữa tươi. 53 3.9 Kết quả kiểm tra vi khuẩn E.coli trong mẫu sữa lấy tại các trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi 55 3.10 Kết quả kiểm tra vi khuẩn Salmonella trong sữa 56 3.11 Kết quả kiểm tra vi khuẩn Staphylococcus aureus trong các mẫu sữa lấy từ trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi 58 3.12 Tổng hợp kết quả kiểm tra chỉ tiêu vi sinh vật trong sữa (Tổng số vi khuẩn, E.coli, Salmonella, Staphylococcus aureus) 59 3.13 Tần suất sử dụng các kháng sinh thường dùng cho bò sữa trên ñịa bàn huyện Ba Vì (tháng 3/2013) 63 3.14 Kết quả kiểm tra tồn dư kháng sinh trong mẫu sữa lấy tại một số trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi trên ñịa bàn huyện Ba Vì 64 3.15 So sánh hàm lượng tồn dư kháng sinh với quy ñịnh của Bộ y tế 65 Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp viii DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 3.1 Số lượng bò sữa của thành phố Hà Nội và huyện Ba Vì 44 3.2 Sản lượng sữa tươi của thành phố Hà Nội và huyện Ba Vì 44 3.3 Kết quả kiểm tra sự ô nhiễm vi khuẩn trong sữa lấy tại các trạm thu gom và cửa hàng sữa tươi 60 3.4 Sắc ký ñồ kháng sinh Oxytetracycline tồn dư trong sữa 64 Trường ðại Học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp 1 ðẶT VẤN ðỀ 1. Tính cấp thiết của ñề tài Hiện nay, cùng với sự phát triển của ñời sống kinh tế, những mặt hàng có chất lượng và có giá trị dinh dưỡng ñang ngày càng ñược người tiêu dùng quan tâm, trong ñó nhu cầu tiêu thụ sữa tươi của người dân cũng tăng cao. Nắm bắt xu thế ñó, trong những năm qua, Chính phủ ñã ban hành nhiều chính sách khuyến khích sản xuất nông nghiệp, các chính sách hỗ trợ phát triển ñàn bò sữa nên ñã ñạt ñược nhiều thành công ñáng kể. ðàn bò sữa ñã tăng cả về số lượng và chất lượng, sản lượng sữa ñã ñáp ứng ñược khoảng 30% nhu cầu tiêu dùng trong nước. Tổng ñàn bò sữa hàng năm tăng nhanh với tốc ñộ tăng bình quân giai ñoạn 2001-2005 ñạt 24,93%/năm (Cục Chăn nuôi, 2007). Mức tiêu thụ sữa cũng ngày càng tăng. Năm 1990 lượng sữa tiêu thụ bình quân/người/năm ở Việt Nam chỉ ñạt 0,47 kg ñã tăng lên 8 kg vào năm 2000 và 14,8 kg vào năm 2010. Tuy nhiên, sản lượng sữa sản xuất hàng năm nước ta mới ñáp ứng ñược 28%-30% nhu cầu tiêu thụ sữa trong nước. Ước tính mức tiêu thụ sữa bình quân ñầu người năm 2015 ñạt 20-21 kg/người/năm, năm 2020 là 27- 28kg/người/năm (ðỗ Kim Tuyên, 2010). Sữa là một loại thực phẩm bổ dưỡng, chứa ñầy ñủ các chất dinh dưỡng cần thiết cho mọi lứa tuổi, nhất là với người già, trẻ em, người bệnh. Khi sữa trở thành thực phẩm thiết yếu hàng ngày thì vấn ñề chất lượng sữa càng ñược người tiêu dùng quan tâm. Nếu sữa tươi và các sản phẩm từ sữa không ñảm bảo chất lượng và vệ sinh an toàn thì ảnh hưởng không nhỏ tới sức khỏe và tâm lý người tiêu dùng. Chất lượng vệ sinh an toàn thực phẩm nói chung và chất lượng sữa nói riêng trong ñời sống hiện nay là yêu cầu thiết yếu, ñóng vai trò quan trọng trong nhiều vấn ñề kinh tế, xã hội. Ở nước ta hiện nay với phương thức chăn nuôi hộ gia ñình và trang trại nhỏ, kiến thức về chăn nuôi thú y, phòng bệnh còn hạn chế, vì vậy bệnh trên bò sữa vẫn diễn ra phức tạp, nhất là các bệnh về sinh sản và viêm vú, nên vẫn phải dùng kháng sinh ñiều trị trong thời gian khai thác sữa. ðiều này dẫn ñến khả [...]... tâm c a thành ph và các công ty s a Tuy nhiên chăn nuôi còn nh l và b nh trên ñàn bò s a v n chưa ñư c ki m soát ch t ch T nh ng cơ s trên ñây, chúng tôi l a ch n và ti n hành nghiên c u ñ tài: “ðánh giá ch t lư ng, xác ñ nh s t n dư kháng sinh và m c nhi m khu n trong s a bò trên ñ a bàn huy n Ba Vì - Hà N i” 2 M c tiêu nghiên c u, ý nghĩa c a ñ tài - Tìm hi u ñư c th c tr ng chăn nuôi bò s a và kh... Chlotetracyclin t n dư trong gan và th n v i t l tương ñương nhau 8,8% (Vi Th Thanh Th y, 2011) Khi s d ng kháng sinh trong phòng và ñi u tr viêm vú cho bò cũng r t có kh năng gây t n dư kháng sinh trong s a và gây ra các tác h i nghiêm tr ng như: gây d ng cho nh ng ngư i nh y c m v i kháng sinh khi u ng s a; t o ra dòng vi khu n gây viêm vú kháng l i kháng sinh; kháng sinh t n dư trong s a c ch vi Trư... lư c c a Nhà nư c, k t h p v i s hư ng ng c a các cơ s chăn nuôi bò s a 1.4.3 Tác h i c a t n dư kháng sinh trong s a bò S có m t c a kháng sinh t n dư trong s a, th t là v n ñ khó ch p nh n vì liên quan tr c ti p ñ n s c kh e ngư i tiêu dùng Theo P.T.Tybor và c ng s (1999), kháng sinh t n dư trong th t và s a có th gây d ng và m t s v n ñ khác v s c kh e con ngư i, ñ ng th i cũng là m t trong các... nghiên c u v t n dư kháng sinh trong s a trên th gi i ð xác ñ nh m c ñ t n dư kháng sinh trong thú s n nói chung và trong s a nói riêng, ngư i ta thư ng áp d ng các phương pháp ñ nh tính và ñ nh lư ng M t s phương pháp ñ nh tính có th cho phép ñ nh hư ng lo i kháng sinh t n dư trong th c ph m Tác gi Boeckman và Carlson (1998) cho bi t các xét nghi m nhanh Trư ng ð i H c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn... ch n không có dư ng tính gi và âm tính gi , phát hi n ñư c hàm lư ng r t nh các kháng sinh và hormone t n dư trong th c ph m Vi c sàng l c t n dư kháng sinh trong s a cơ s s n xu t là r t c n thi t Khi áp d ng ñi u này, th c t các m u t n dư kháng sinh ñư c xác ñ nh là r t th p (Ron Erskine, 1996) Theo thông báo c a Michigan Dairy Review (T8/1996), t l s a ñư c phát hi n có t n dư kháng sinh là kho ng... n s a Kháng sinh còn làm gi m b t mùi v và ñ axit trong h n h p s n ph m c a vi c s n xu t bơ, làm gi m quá trình ñông t c a s a M t tác h i nghiêm tr ng hơn c a vi c t n dư kháng sinh trong th c ph m nói chung và trong s a nói riêng là s xu t hi n và gia tăng c a vi khu n ñ kháng kháng sinh trên toàn c u, ñ c bi t vi khu n ñ kháng kháng sinh có th lây truy n t ñ ng v t sang ngư i Hi n tư ng kháng. .. ngư i ñang ñi u tr b nh mà nó còn có m t trong cơ th ngư i kh e m nh trong c ng ñ ng Trong chăn nuôi kháng sinh thư ng dùng v i li u th p nhưng th i gian dài, do ñó kháng sinh tích lũy trong ng tiêu hóa Kháng sinh th i ra theo ch t bài ti t, vào ñ t còn ti p t c gây nh hư ng ñ n h vi sinh v t trong ñ t Như v y, s d ng kháng sinh cho ñ ng v t, s t n dư kháng sinh trong thú s n ch là ph n n i c a t ng băng... tiêu th s a tươi t i Ba Vì 2.1.2 Ki m tra m t s ch tiêu ch t lư ng s a bò tươi Ba Vì 2.1.3 Xác ñ nh s ô nhi m m t s vi khu n trong s a bò tươi Ba Vì 2.1.4 Xác ñ nh s t n dư kháng sinh trong s a tươi 2.2 V t li u M u ki m nghi m là các m u s a thu th p t i m t s trung tâm thu gom s a và c a hàng bán s a tươi trên ñ a bàn huy n Ba Vì 2.3 Phương pháp nghiên c u 2.3.1 ði u tra, thu th p thông tin, tài li... ng s s a b vi ph m vì có t n dư kháng sinh (Ron Erskine, 1996) 1.4.2.2 Tình hình nghiên c u v t n dư kháng sinh trong s a Vi t Nam Vi t Nam, t n dư kháng sinh trong s n ph m th t c a ngành chăn nuôi ñã ñư c phát hi n t nh ng năm 2004 và gây ñư c s quan tâm c a gi i khoa h c Trư ng ð i H c Nông Nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p 22 Nh ng nghiên c u v t n dư kháng sinh t i Vi t Nam... hơn ñó là nguyên nhân xu t hi n và gia tăng c a vi khu n ñ kháng kháng sinh trên toàn c u, ñ c bi t vi khu n ñ kháng kháng sinh có th lây truy n t ñ ng v t sang ngư i Hi n nay, Ba Vì là m t vùng chăn nuôi tr ng ñi m c a thành ph Hà N i, ñàn bò s a 6.553 con, chi m 55,36% t ng ñàn bò s a thành ph (Trung tâm phát tri n chăn nuôi Hà N i, 2013) v i 1.540 h chăn nuôi ðàn bò s a ñư c t p trung phát tri n . ñề tài: “ðánh giá chất lượng, xác ñịnh sự tồn dư kháng sinh và mức nhiễm khuẩn trong sữa bò trên ñịa bàn huyện Ba Vì - Hà Nội . 2. Mục tiêu nghiên cứu, ý nghĩa của ñề tài - Tìm hiểu ñược. LÊ THỊ PHƯƠNG DUNG ðÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG, XÁC ðỊNH SỰ TỒN DƯ KHÁNG SINH VÀ MỨC NHIỄM KHUẨN TRONG SỮA BÒ TRÊN ðỊA BÀN HUYỆN BA VÌ - HÀ NỘI CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y Mà NGÀNH. chăn nuôi bò sữa và khả năng khai thác, tiêu thụ sữa trên ñịa bàn huyện Ba Vì. - ðánh giá ñược một số chỉ tiêu chất lượng sữa tươi; mức ñộ nhiễm khuẩn; sự tồn dư kháng sinh trong sữa. Trường