luận án đã sửa báo cáo tốt nghiệp đại học, chuyên nhành công nghệ sinh học

64 738 0
  • Loading ...
    Loading ...
    Loading ...

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Tài liệu liên quan

Thông tin tài liệu

Ngày đăng: 23/04/2015, 14:32

Bệnh cúm gia cầm là bệnh truyền nhiễm cấp tính gây bệnh ở hầu hết gia cầm như gà, vịt, chim… đặc biệt là ở người với tốc độ lây lan nhanh chóng. Nguyên nhân gây bệnh là do virus cúm type A thuộc họ Orthomyxoviridae gây ra, virut này tồn tại dưới dạng phân type dựa trên quan hệ kháng nguyên H (Hemagglutinin) và N (Neuraminidae).Virus A thích nghi hầu như với mọi loại vật chủ và hệ gen của chúng luôn biến đổi, định kỳ do vậy rất dễ lây nhiễm và trở thành đại dịch. Trong số những chủng virus cúm A thì virus cúm AH5N1 có độc lực rất mạnh chúng gây nguy hiểm cho cả người và động vật. Dịch cúm bùng phát nhanh, chúng gây ra hậu quả rất nghiêm trọng làm ảnh hưởng tới tính mạng con người cũng như gây thiệt hại cho người chăn nuôi và xa hơn là gây thiệt hại tới nền kinh tế quốc dân. Bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao HPAI (High Pathogenic Avian Influenza) được tổ chức dịch tễ thế giới (OIE) xếp vào bảng A các bệnh truyền nhiễm cấp tính và cực kỳ nguy hiểm. Cúm AH5N1 được phát hiện ở nước ta vào khoảng tháng 122003. Từ cuối năm 2003 trở lại đây bệnh cúm gia cầm đã, đang và dự đoán trong nhiều năm nữa sẽ là mối nguy hiểm cho sự phát triển của nền chăn nuôi nước ta và đặc biệt hơn là cho cả cộng đồng. Đã có hàng triệu gia cầm bị tiêu hủy và hàng chục người tử vong cho dịch cúm. Do đó việc phòng chống dịch cúm gia cầm là một trong những chương trình phòng chống dịch bệnh cấp quốc gia. Các biện pháp phòng chống dịch bệnh được áp dụng ngay từ đầu như tiêu hủy đàn gia cầm, cấm lưu thông, tiêu thụ sản phẩm, kiểm soát giết mổ đã phần nào hạn chế được dịch bệnh. Tuy nhiên rất tốn kếm và hiệu quả thì chưa được như mong muốn khi mà điều kiện nước ta còn rất nhiều hộ gia đình chăn nuôi nhỏ lẻ, điều kiện vệ sinh, chăm sóc và phòng bệnh chưa tốt. Ngoài các biện pháp về an toàn sinh học trong chăn nuôi đã kể trên thì việc sử dụng vacxin tiêm phòng để tạo đáp ứng miễn dịch chủ động chống lại bệnh cúm là một biện pháp tích cực trong việc phòng và chống bệnh. Mặc dù vậy do đặc tính của dịch cúm AH5N1 là lây lan rất nhanh và gây chết cho động vật trong thời gian ngắn nên việc đưa vacxin kháng virus cúm vào cơ thể động vật cần phải có thời gian để vacxin kết hợp với kháng nguyên của cơ thể tạo nên kháng thể mới có tác dụng do vậy vẫn có thể gây thiệt hại cho người chăn nuôi.Việc nghiên cứu và sản xuất ra kháng thể để khi đưa vào cơ thể động vật có tác dụng nhanh kháng virus cúm AH5N1 là đề tài cần nghiên cứu KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI ĐẶT VẤN ĐỀ Chăn nuôi gia cầm là nghề truyền thống của nước ta và là nguồn thu nhập chính đối với phần lớn các hộ gia đình ở nông thôn cũng như các trang trại chăn nuôi lớn. Phát triển ngành chăn nuôi nói chung và chăn nuôi gia cầm nói riêng trở thành ngành sản xuất hàng hóa, từng bước đáp ứng nhu cầu thực phẩm cho tiêu dùng trong nước và xuất khẩu là một quan điểm phát triển ngành chăn nuôi đến năm 2020 đã được Chính Phủ phê duyệt. Chăn nuôi gia cầm trở thành một nghề không thể thiếu trong cơ cấu sản xuất nông nghiệp Quốc gia. Theo số liệu thống kê tại thời điểm 1/10/2009 của tổng cục thống kê thì tổng số đàn gia cầm của Việt Nam có khoảng 280,18 triệu con. Cùng với sự phát triển của các ngành nghề khác thì chăn nuôi cũng đang phát triển nhanh cả về số lượng cũng như chất lượng. Bên cạnh đó thì chăn nuôi cũng phải đối mặt với nhiều rủi ro như lãi suất thấp, giá cả bấp bênh, tổng chi phí đầu vào và chi phí đầu ra có biên độ hẹp…, cùng với đó là dịch bệnh và nguy cơ xảy ra đại dịch là rất cao trong đó có nguy cơ xảy ra dịch cúm A/H5N1 do người chăn nuôi không tuân thủ chặt chẽ điều kiện chăn nuôi cũng như quy trình kiểm dịch. Bệnh cúm gia cầm là bệnh truyền nhiễm cấp tính gây bệnh ở hầu hết gia cầm như gà, vịt, chim… đặc biệt là ở người với tốc độ lây lan nhanh chóng. Nguyên nhân gây bệnh là do virus cúm type A thuộc họ Orthomyxoviridae gây ra, virut này tồn tại dưới dạng phân type dựa trên quan hệ kháng nguyên H (Hemagglutinin) và N (Neuraminidae).Virus A thích nghi hầu như với mọi loại vật chủ và hệ gen của chúng luôn biến đổi, định kỳ do vậy rất dễ lây nhiễm và trở thành đại dịch. Trong số những chủng virus cúm A thì virus cúm A/H5N1 có độc lực rất mạnh chúng gây nguy hiểm cho cả người và động vật. Dịch cúm TRẦN THẾ ANH 1 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI bùng phát nhanh, chúng gây ra hậu quả rất nghiêm trọng làm ảnh hưởng tới tính mạng con người cũng như gây thiệt hại cho người chăn nuôi và xa hơn là gây thiệt hại tới nền kinh tế quốc dân. Bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao HPAI (High Pathogenic Avian Influenza) được tổ chức dịch tễ thế giới (OIE) xếp vào bảng A các bệnh truyền nhiễm cấp tính và cực kỳ nguy hiểm. Cúm A/H5N1 được phát hiện ở nước ta vào khoảng tháng 12/2003. Từ cuối năm 2003 trở lại đây bệnh cúm gia cầm đã, đang và dự đoán trong nhiều năm nữa sẽ là mối nguy hiểm cho sự phát triển của nền chăn nuôi nước ta và đặc biệt hơn là cho cả cộng đồng. Đã có hàng triệu gia cầm bị tiêu hủy và hàng chục người tử vong cho dịch cúm. Do đó việc phòng chống dịch cúm gia cầm là một trong những chương trình phòng chống dịch bệnh cấp quốc gia. Các biện pháp phòng chống dịch bệnh được áp dụng ngay từ đầu như tiêu hủy đàn gia cầm, cấm lưu thông, tiêu thụ sản phẩm, kiểm soát giết mổ đã phần nào hạn chế được dịch bệnh. Tuy nhiên rất tốn kếm và hiệu quả thì chưa được như mong muốn khi mà điều kiện nước ta còn rất nhiều hộ gia đình chăn nuôi nhỏ lẻ, điều kiện vệ sinh, chăm sóc và phòng bệnh chưa tốt. Ngoài các biện pháp về an toàn sinh học trong chăn nuôi đã kể trên thì việc sử dụng vacxin tiêm phòng để tạo đáp ứng miễn dịch chủ động chống lại bệnh cúm là một biện pháp tích cực trong việc phòng và chống bệnh. Mặc dù vậy do đặc tính của dịch cúm A/H5N1 là lây lan rất nhanh và gây chết cho động vật trong thời gian ngắn nên việc đưa vacxin kháng virus cúm vào cơ thể động vật cần phải có thời gian để vacxin kết hợp với kháng nguyên của cơ thể tạo nên kháng thể mới có tác dụng do vậy vẫn có thể gây thiệt hại cho người chăn nuôi.Việc nghiên cứu và sản xuất ra kháng thể để khi đưa vào cơ thể động vật có tác dụng nhanh kháng virus cúm A/H5N1 là đề tài cần nghiên cứu. TRẦN THẾ ANH 2 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI Chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu đề tài “ Nghiên cứu, sản xuất kháng thể kháng virus cúm A/H5N1chủng NIBGR – 14 phục vụ trong phòng trị bệnh “. Với mong muốn góp phần làm giảm thiệt hại cho người chăn nuôi và đặc biệt hơn là sản xuất được kháng thể kháng virus cúm A/H5N1 phục vụ trong phòng và trị bệnh. Đề tài có những mục tiêu cụ thể sau: - Nghiên cứu quy trình sản xuất kháng thể kháng virus cúm A/H5N1 qua thỏ và lòng đỏ trứng gà. - Sản xuất được kháng thể phục vụ trong phòng trị bệnh. Đề tài được nghiên cứu tại Cơ sở Hóa sinh Dược Thú y, Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội. TRẦN THẾ ANH 3 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI PHẦN I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Giới thiệu chung về bệnh cúm gia cầm. 1.1.1. Khái niệm về bệnh cúm gia cầm: Bệnh cúm ở gia cầm (Avian Influenza) còn gọi là bệnh cúm gà hay cúm loài chim. Là một bệnh truyền nhiễm gây ra bởi virus cúm type A thuộc họ Orthomyxoviridae. Virus cúm gia cầm gây bệnh cho gà, vịt, ngan, ngỗng, gà tây, chim cút, đà điểu, các loài chim cảnh và chim hoang dã. Và nguy hiểm hơn bệnh có thể lây sang người và một số loài thú khác. Trước đây bệnh này còn được gọi là bệnh dịch tả gà (fowl plague) nhưng từ hội nghị quốc tế lần thứ nhất về bệnh cúm gia cầm tại Beltsville - Mỹ năm 1981 đã thay thế tên này bằng tên bệnh cúm gia cầm độc lực cao (HPAI - Highty Pathogenic Avian Inluenza) để chỉ các virus cúm type A có độc lực mạnh, gây lây lan nhanh, tỷ lệ tử vong cao [2]. 1.1.2. Lịch sử bệnh cúm gia cầm: Năm 412 trước công nguyên, Hippocrates đã mô tả về bệnh cúm. Năm 1680 một vụ đại dịch cúm đã được mô tả kỹ và từ đó đến nay đã xảy ra 31 vụ đại dịch. Trong hơn 100 năm qua đã xảy ra 4 vụ đại dịch cúm vào các năm 1889, 1918, 1957, 1968. Bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao (HPAI) được phát hiện lần đầu tiên ở Italia vào năm 1878 và được đặt tên là bệnh dịch hạch gà, bệnh gây tỷ lệ tử vong rất cao ở đàn gia cầm. TRẦN THẾ ANH 4 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI Đến năm 1901, virus bệnh nguyên được Centanny Samnozzi xác định là một tác nhân virus qua lọc. Nhưng phải đến năm 1955 mới xác định được virus đó chính là virus cúm type A (H7N1 và H7N7) gây chết nhiều gà, gà tây và các loài khác. Qua nhiều năm nghiên cứu các nhà khoa học đã phát hiện ra rằng bệnh dịch nghiêm trọng nhất xảy ra với gà là những chủng gây bệnh cao thuộc phân type H5 và H7 như ở Scotland năm 1959 là H5N1, ở Mỹ năm 1983 - 1984 là H5N2. Cuối thập kỷ 60, phân type H1N1 đã phát hiện ở lợn và có liên quan đến những ổ dịch ở gà tây với biểu hiện đặc trưng là những triệu chứng ở đường hô hấp và giảm năng suất [2]. Vào giữa thế kỷ 20, bệnh đã xuất hiện ở hầu hết các nước Châu Âu, Nga, Bắc Phi, Trung Đông Châu Á, Nam và Bắc Mỹ. Virus cúm gia cầm subtype H5 đã được tìm thấy ở Canada vào năm 1966 và vùng Wisconsin thuộc nước Mỹ năm 1968. Từ năm 1977, nhiều subtype thuộc virus cúm A như H5 và H7 đã được phân lập và mô tả. Trong năm 1972, virus cúm gia cầm đã được phát hiện từ vịt chạy đồng qua chương trình giám sát virus bệnh Newcastle và theo dõi chim hải âu ở Australia. Đầu năm 1996, bệnh cúm gia cầm được thông báo ở trên ngỗng. Năm 1997, dịch xảy ra ở Hồng Kông, được xác định là do virus H5N1 gây ra và đã phải tiêu huỷ khoảng 1,5 triệu con gà [26]. 1.2. Tình hình dịch cúm A/H5N1. 1.2.1. Tình hình dịch cúm gia cầm A/H5N1 trên thế giới: Cúm A/H5N1 là một virus có độc lực cao, và gây bệnh trên người trong các vụ dịch cúm gà những năm 1996 - 2008, đặc biệt ác liệt là do virus cúm A/H5N1 thể độc lực cao (HPAI, highly pathogenic avian influenza) gây ra kể từ năm TRẦN THẾ ANH 5 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI 2003 cho đến nay và phát sinh nhiều nhóm, phân nhóm (clade) có độc lực rất cao. Chủng virus cúm A/H5N1 được phát hiện lần đầu tiên gây bệnh dịch trên gà tại Scotland vào năm 1959. Từ đó cho đến nay, H5 và N1 đã có thay đổi lớn xét về cấu trúc thành phần gen và kháng nguyên miễn dịch. Sau gần 40 năm không phát hiện, cúm A/H5N1 xuất hiện tại Quảng Đông (1996), và Hồng Kông (1997) với biến đổi sâu sắc, không những gây chết gia cầm mà còn thích ứng và gây chết người bệnh. Có thể coi dòng virus cúm A/H5N1 từ 1996 đến nay là cúm A/H5N1 hiện đại mới xuất hiện. Đặc biệt, từ 2003 đến nay, virus H5N1 gây ra dịch cúm trên gia cầm tại Hồng Kông, Trung Quốc và lây lan sang hàng chục quốc gia trên thế giới ở châu Á, châu Âu và châu Phi. Cúm A/H5N1 giai đoạn 2003 đến nay, cơ bản về cấu trúc vẫn như trước đó, nhưng xét về độc lực (tính gây bệnh), loài vật chủ nhiễm bệnh, tính kháng nguyên - miễn dịch và mức độ truyền lây có nhiều nét đặc trưng hơn và khác với nhiều biến chủng H5N1 trước đây. Từ cuối 2005, cúm A/H5N1, chủ yếu là các chủng virus thuộc phân dòng Thanh Hải (nguồn gốc vùng Bắc Trung Quốc) bắt đầu lan sang một số nước vùng Trung Á, trong đó có Nga, rồi tràn ngập Đông Âu và xâm nhập vào các nước vùng Tiểu Á, bao gồm Thổ Nhĩ Kỳ, các nước Bắc- Trung Phi, đặc biệt Ai Cập và Nigeria là các nước chịu thiệt hại nhiều nhất. Nhằm ngăn chặn dịch bệnh lây lan, trong hơn mười năm qua, trên thế giới đã có hàng trăm triệu gia cầm đã bị tiêu hủy, gây thiệt hại nặng nề cho ngành chăn nuôi và kinh tế. Đặc biệt, số người nhiễm và tử vong do virus cúm A/H5N1 mỗi năm một cao hơn, theo thống kê số người bị nhiễm cúm gia cầm H5N1 báo cáo với Tổ chức Y tế thế giới (WHO), từ năm 2003 đến tháng 6/2008, đã có tới 385 trường hợp mắc cúm A/H5N1, trong đó, 243 trường hợp đã tử vong chiếm tới 63,11%. Việt Nam và Indonesia là các 2 quốc gia có số người nhiễm và tử vong cao nhất do virus cúm TRẦN THẾ ANH 6 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI A/H5N1 trên thế giới. Trong số 16 nước có người chết do cúm gia cầm, Indonesia và Việt Nam được WHO xác định là quốc gia “điểm nóng” có thể cúm A/H5N1 có được các điều kiện thuận lợi để tiến hóa thích nghi lây nhiễm và trở thành virus của người [24]. 1.2.2 Tình hình dịch cúm A/H5N1 tại Việt Nam: Dịch cúm gia cầm A/H5N1 bùng phát tại Việt Nam vào cuối tháng 12/2003 ở các tỉnh phía Bắc, sau đó đã nhanh chóng lan tới hầu hết các tỉnh, thành trong cả nước chỉ trong một thời gian ngắn. Đây là lần đầu tiên dịch cúm gia cầm A/H5N1 xảy ra tại Việt Nam, có tới hàng chục triệu gia cầm bị tiêu hủy, gây thiệt hại nặng nền tới nền kinh tế quốc dân. Tính đến nay (tháng 10/2008), dịch cúm gia cầm liên tục tái bùng phát hàng năm tại nhiều địa phương trong cả nước, có thể phân chia thành các đợt dịch lớn như sau: - Đợt dịch thứ nhất từ tháng 12/2003 và 30/3/2004: dịch cúm xảy ra ở các tỉnh Hà Tây, Long An và Tiền Giang. Dịch bệnh lây lan rất nhanh, chỉ trong vòng hai tháng đã xuất hiện ở 57/64 tỉnh thành trong cả nước. Tổng số gà và thủy cầm mắc bệnh, chết và tiêu hủy hơn 43,9 triệu con, chiếm 17% tổng đàn gia cầm. Trong đó, gà chiếm 30,4 triệu con, thủy cầm 13,5 triệu con. Ngoài ra, có ít nhất 14,8 triệu chim cút và các loài khác bị chết hoặc tiêu hủy. Đặc biệt, có 3 người được xác định nhiễm virus cúm A/H5N1 và cả 3 đã tử vong trong đợt dịch này. [11] - Đợt dịch thứ 2 từ tháng 4 đến tháng 11/2004: dịch bệnh tái phát tại 17 tỉnh, thời gian cao điểm nhất là trong tháng 7, sau đó giảm dần đến tháng 11/2004 chỉ còn một điểm phát dịch. Tổng số gia cầm tiêu hủy được thống kê trong vụ dịch này là 84.078 con. Trong đó, có gần 56.000 gà; 8.132 vịt; và TRẦN THẾ ANH 7 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI 19.950 con chim cút. Và đã có tới 27 người mắc bệnh virus cúm A/H5N1, trong đó có 9 ca tử vong. [11]. - Đợt 3 từ tháng 12/2004 cho đến tháng 12/2005: dịch cúm gà xảy ra trên 36 tỉnh/thành trong cả nước. Số gia cầm bị tiêu hủy được Cục Thú y thống kê là 1,846 triệu con (gồm 470.000 gà, 825.000 thủy cầm và 551.000 chim cút). Vào những tháng cuối năm 2005, dịch cúm gà xảy ra trong tháng 10/2005 lan nhanh trong gần 40 tỉnh/thành và giảm dần trong tháng 12/2005. [21]. - Năm 2006, do áp dụng chương trình tiêm chủng rộng rãi cho đàn gia cầm trong cả nước, cùng với các biện pháp phòng chống dịch quyết liệt, dịch cúm A/H5N1 không xảy ra ở Việt Nam. Mặc dù vậy, đến 06/12/2006 dịch cúm gia cầm A/H5N1 đã tái bùng phát ở Cà Mau, sau đó lan sang các tỉnh Bạc Liêu, Hậu Giang, Vĩnh Long và Cần Thơ. [11]. - Năm 2007, dịch bệnh tái phát tại Hải Dương vào ngày 17/2/2007 và được khống chế sau một tháng. Tuy nhiên, đến ngày 01/5/2007 dịch bệnh tiếp tục tái phát tại Nghệ An, sau đó lan sang nhiều tỉnh/thành trong cả nước. Theo báo cáo của Cục Thú y (Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn) đến ngày 10/6/2007 dịch đã xảy ra trên 16 tỉnh/thành và chỉ được khống chế hoàn toàn vào tháng 8/2007. - Những tháng đầu năm 2012, theo báo cáo của Cục Thú y dịch cúm gia cầm đã xuất hiện ở một số tỉnh/thành như: Kom Tum, Thanh Hóa, Hà Tĩnh, Hà Nội, Quảng Nam và đến nay cơ bản đã khống chế được dịch. [11]. - Theo thống kê của Cục Thú y, từ ngày 26/12/2003 đến ngày 31/3/2010 nước ta đã có 59 người chết/117 trường hợp nhiễm bệnh. 1.2.3. Những kết quả nghiên cứu đã đạt được về bệnh cúm gia cầm ở Việt Nam. TRẦN THẾ ANH 8 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI 1.2.3.1. Sự lưu hành virus cúm gia cầm ở Việt Nam[5]. Virus cúm gia cầm H5N1 gây bệnh cho gia cầm ở Việt Nam có nguồn gốc từ Trung Quốc thuộc gennotyp Z. Virus cúm H5N1 có tính kháng nguyên rất đa dạng từ khi xuất hiện tại Việt Nam và đã xuất hiện một số chủng có tính kháng nguyên hoàn toàn khác và được phân vào nhóm kháng nguyên HA Clade 2 hoặc Genotyp G. Virus H5N1 có thể tồn tại lâu hơn trong môi trường so với các loại virus cúm khác. Điều quan trọng là trong điều kiện môi trường bình thường (nước sông suối, ở nhiệt độ 20 - 30 0 C) virus chỉ bị mất hoạt lực sau 90 giờ, trong môi trường có chất hữu cơ virus có thể tồn tại lâu hơn. Đối với virus trong cơ thể gia cầm bệnh được chôn dưới đất chúng chỉ giữ được tính gây nhiễm không quá 5 ngày. Để làm nâng cao tính nhạy cảm của phương pháp chẩn đoán nên chẩn đoán virus cúm bằng phương pháp RT-PCR, trong đó xác định virus type A trước (thông qua xác định gen M) sau đó mới xét nghiệm các đặc tính subtype khác. Đã phát hiện cầy hương tại rừng Cúc Phương bị chết do virus H5N1. Điều này cho thấy cần phải có các biện pháp an toàn sinh học cho các vườn quốc gia và nhất là các sở thú. Đã chế tạo thành công kháng nguyên HA H5N1 dùng trong giám sát huyết thanh cúm gia cầm. Mặt khác cũng đã chế tạo thành công kháng huyết thanh kháng H5N1 dùng trong nghiên cứu và chẩn đoán bệnh. Đã khảo sát chất sát trùng Alpha Terpineol từ tinh dầu tràm có khả năng sát khuẩn và làm giảm sự nhân lên của virus H5N1 trên môi trường tế bào. TRẦN THẾ ANH 9 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI 1.2.3.2. Kết quả nghiên cứu phát triển vacxin phòng bệnh cúm gia cầm tại Việt Nam: Đã nghiên cứu thành công: - Quy trình sản xuất vacxin cúm A/H5N1. - Quy trình bảo quản và sử dụng vacxin cúm A/H5N1. - Quy trình tiếp truyền giống gốc và sản xuất giống cấp một. 1.3. Dịch tễ học cúm gia cầm. 1.3.1. Phân loại: Virus nói riêng cũng như virus cúm nói chung thường được phân loại chủ yếu theo tính kháng nguyên. Khi dùng phản ứng kết tủa trên thạch hoặc kết hợp bổ thể người ta thấy có 3 nhóm virus khác nhau và đặt tên cho 3 nhóm là virus A, B, và C. Dùng phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu người ta thấy virus type A lại có nhiều loại khác nhau. Trên cơ sở kết quả của phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu, khi phát hiện ra rằng kháng thể kháng ngưng kết hồng cầu là kháng thể được tạo ra để chống lại protein HA nhưng không ức chế toàn bộ các virus type A. Từ đó virus type A được chia ra các type phụ (subtype) trên cơ sở có phản ứng HI đặc hiệu. Cho đến năm 2004 tổng số subtype chia theo khả năng ngưng kết hồng cầu là 16. Cũng như vậy với protein NA, người ta phát hiện ra 9 loại NA có tính kháng nguyên khác nhau và được đặt tên là từ N1 cho đến N9. Virus cúm type A là kết quả sự tổ hợp giữa 2 loại protein này. Chính vì vậy chúng ta có virus cúm đặt tên là HxNy. Việc phân loại virus như trên do ủy ban định danh quốc tế tiến hành [6]. Có 2 kiểu phân loại virus cúm dòng Châu Á (theo quy định của WHO) đó là: TRẦN THẾ ANH 10 Lớp: KSCNSH 0802-K15 [...]... với các chất ngoại lai, các kháng thể có thể ngăn cản sự tiếp xúc của mầm bệnh với tế bào TRẦN THẾ ANH 28 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI đích của chúng Phức hợp kháng nguyên - kháng thể sau đó bị các tế bào đại thực bào "nuốt" và phân hủy Kháng thể sau khi gắn vào kháng nguyên làm cho kháng nguyên này dễ dàng bị các tế bào thực bào gồm đại thực bào và các tế bào Leucocyte... trình diện kháng nguyên thông qua các phân tử MHC loại I và MHC loại II TRẦN THẾ ANH 27 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI Miễn dịch tế bào chống virus với khả năng nhận biết kháng nguyên đặc hiệu của virus và kháng nguyên của các tế bào bị nhiễm virus, nhận biết phức hợp kháng nguyên - MHC và các tế bào đích/ tế bào bị nhiễm virus Kháng thể: Nhìn chung các kháng thể đặc... KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI ứng HI với kháng huyết thanh chuẩn để giám định chính xác type H của virus Hoặc bằng phương pháp RT - PCR (Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction) để xác định cả type H và type N Phát hiện kháng thể: Phản ứng huyết thanh học dùng để phát hiện kháng thể đặc hiệu với virus cúm gia cầm sau 7 ngày nhiễm bệnh Có nhiều kỹ thuật dùng để giám sát chẩn đoán... hiện kháng thể Để đánh giá được hiệu giá kháng thể thì ta cần phải làm phản ứng ngưng kết hồng cầu (HA) để chuẩn độ kháng nguyên và xác định hiệu giá HA Dựa trên cơ sở đó ta thực hiện phản ứng HI là phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu và phát hiện kháng thể 2.4.5.1 Phản ứng HA  Vật liệu + Dịch niệu phôi gà + Đĩa 96 giếng đáy chữ V TRẦN THẾ ANH 35 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC... TCD8 gây độc cũng sản sinh IFN-γ và cả TNFα để kìm hãm sự nhân lên của virus, làm tăng sự bộc lộ các phân tử MHC loại I và hoạt hóa tế bào đại thực bào TRẦN THẾ ANH 30 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI PHẦN II ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu - Vacxin nhũ dầu cúm gia cầm đã vô hoạt, chủng NIBRG-14 do công ty Thuốc Thú y... thế giới đã có 19 chủng cúm A của loài lông vũ được phân lập có độc lực cao thuộc loại HPAI, trong đó, một số đã lây nhiễm và thích ứng gây bệnh trên người [24] 1.3.7.2 Sức đề kháng của virus: Virus cúm type A tương đối nhạy cảm với các chất hóa học như fomalin, axit pha loãng, ete, sodium desoxycholat, hydroxylamon, [2] TRẦN THẾ ANH 16 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ... xoang bụng tích nước hoặc viêm dính 1.5.3 Các phương pháp chẩn đoán phòng thí nghiệm Chẩn đoán xét nghiệm cúm gia cầm được thực hiện bằng cách: phát hiện trực tiếp các protein hay gen cấu trúc virus cúm trong bệnh phẩm hoặc chẩn đoán gián tiếp bằng phát hiện kháng thể kháng virus cúm Phát hiện kháng nguyên: Mẫu bệnh phẩm để phát hiện kháng nguyên có thể lấy bằng tăm bông ngoáy khí quản, lỗ huyệt, phân... khoa học đã thống nhất chia virus cúm làm 3 loại: - Loại virus có độc lực cao: Nếu sau 10 ngày tiêm tĩnh mạch cho gà mà làm chết 75 - 100% gà thực nghiệm, virus gây cúm gà phải làm chết 20% số gà mẫn cảm thực nghiệm và phát triển tốt trên môi trường tế bào xơ phôi gà và tế bào thận trong điều kiện môi trường nuôi cấy không có trypsin TRẦN THẾ ANH 15 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC... NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu - Vacxin nhũ dầu cúm gia cầm đã vô hoạt, chủng NIBRG-14 do công ty Thuốc Thú y TW kết hợp với Viện Công Nghệ Sinh Học sản xuất 2.2 Nội dung nghiên cứu - Sản xuất kháng thể kháng virus cúm A/H5N1 - Đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng của kháng thể như vô trùng, thuần khiết, an toàn, độ dài miễn dịch, điều kiện bảo quản cũng như hiệu lực vacxin - Ứng dụng trong phòng trị... Thụy Điển đã phân lập virus cúm type A H4N1, chồn mắc bệnh 100% nhưng chỉ chết 3% Phân type này đang lưu hành trong các loài gia cầm [1] Vịt nuôi cũng bị nhiễm virus cúm nhưng ít phát bệnh do vịt có sức đề kháng với virus bệnh, kể cả những chủng có độc lực cao gây bệnh nặng cho gà tây Tuy TRẦN THẾ ANH 17 Lớp: KSCNSH 0802-K15 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI nhiên năm 1961 ở Nam Phi đã phân . thú. Đã chế tạo thành công kháng nguyên HA H5N1 dùng trong giám sát huyết thanh cúm gia cầm. Mặt khác cũng đã chế tạo thành công kháng huyết thanh kháng H5N1 dùng trong nghiên cứu và chẩn đoán. và cả 3 đã tử vong trong đợt dịch này. [11] - Đợt dịch thứ 2 từ tháng 4 đến tháng 11/2004: dịch bệnh tái phát tại 17 tỉnh, thời gian cao điểm nhất là trong tháng 7, sau đó giảm dần đến tháng 11/2004. biệt hơn là sản xuất được kháng thể kháng virus cúm A/H5N1 phục vụ trong phòng và trị bệnh. Đề tài có những mục tiêu cụ thể sau: - Nghiên cứu quy trình sản xuất kháng thể kháng virus cúm A/H5N1 qua
- Xem thêm -

Xem thêm: luận án đã sửa báo cáo tốt nghiệp đại học, chuyên nhành công nghệ sinh học, luận án đã sửa báo cáo tốt nghiệp đại học, chuyên nhành công nghệ sinh học, luận án đã sửa báo cáo tốt nghiệp đại học, chuyên nhành công nghệ sinh học, PHẦN I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU, Địa điểm nghiên cứu:, Túi Fabricius xuất huyết, Sau khi gây miễn dịch 4 lần ở các ngày thứ 1, ngày thứ 7, ngày thứ 14, 21 và ngày thứ 35, chúng tôi tiến hành lấy máu gà, chắt huyết thanh đồng thời lấy trứng của chúng để kiểm tra hàm lượng kháng thể virus cúm A/H5N1 bằng phản ứng HI. Hàm lượng kháng thể

Mục lục

Xem thêm