Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu được thực hiện nhằm phân lập, định danh và kiểm tra độc lực của các gốc vi khuẩn Streptococcus phân lập được trên cá rô phi, điêu hồng, tai tượng và lia thia, tại TP. HCM và một số tỉnh lân cận. Kết quả cho thấy tỷ lệ phân lập được vi khuẩn Streptococcus là 40,32 %, trong đó tỷ lệ các loài lần lượt là S. agalactiae (84 %), S. difficilis (12 %), S. iniae (4 %), S. uberis (0 %). Kết quả thử độc lực cho thấy vi khuẩn gây chết cá rô phi ở liều công độc từ 1 – 2 x 107 cfu liều công cá, tỷ lệ chết từ 40 – 80 % qua 7 ngày theo dõi.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH ********* PHẠM HÀO QUANG PHÂN LẬP VÀ GIÁM ĐỊNH VI KHUẨN STREPTOCOCCUS GÂY BỆNH TRÊN CÁ NƯỚC NGỌT CÓ VẢY TẠI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VÀ MỘT SỐ TỈNH LÂN CẬN LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP TP. Hồ Chí Minh, Tháng 9/ 2013 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH ********* PHẠM HÀO QUANG PHÂN LẬP VÀ GIÁM ĐỊNH VI KHUẨN STREPTOCOCCUS GÂY BỆNH TRÊN CÁ NƯỚC NGỌT CÓ VẢY TẠI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VÀ MỘT SỐ TỈNH LÂN CẬN Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS. TS. NGUYỄN NGỌC HẢI TS. TRẦN XUÂN HẠNH TP. Hồ Chí Minh Tháng 9/ 2013 PHÂN LẬP VÀ GIÁM ĐỊNH VI KHUẨN STREPTOCOCCUS GÂY BỆNH TRÊN CÁ NƯỚC NGỌT CÓ VẢY TẠI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VÀ MỘT SỐ TỈNH LÂN CẬN PHẠM HÀO QUANG Hội đồng chấm luận văn 1. Chủ tịch: PGS. TS. NGUYỄN NGỌC TUÂN Công ty UV Việt Nam 2. Thư ký: TS. TRẦN THỊ BÍCH LIÊN Hội Chăn nuôi Thú y 3. Phản biện 1: TS. LÊ HỒNG PHƯỚC Viện NC NTTS II 4. Phản biện 2: PGS. TS. TRẦN ĐÌNH TỪ Hội Thú Y Việt Nam 5. Ủy viên: PGS. TS. NGUYỄN VĂN KHANH Hội Chăn Nuôi Thú Y TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH HIỆU TRƯỞNG i LÝ LỊCH CÁ NHÂN Họ và tên: Phạm Hào Quang Ngày sinh: 07 / 04 / 1980 Nơi sinh: TP. Hồ Chí Minh Họ tên Cha: Phạm Văn Thọ Họ tên Mẹ: Võ Thị Hoa Quá trình học tập - Năm 1998: Tốt nghiệp phổ thông trung học tại trường PTTH Bùi Thị Xuân, TP. Hồ Chí Minh - Năm 2004: Tốt nghiệp ngành Bác sỹ thú y tại Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh - Năm 2009: Học Cao học Thú y tại Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh Tình trạng gia đình: đã kết hôn Địa chỉ liên lạc Email: phamhaoquang74@yahoo.com Điện thoại: 0983 024 854 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng được công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả iii LỜI CẢM ƠN Xin chân thành cảm ơn PGS. TS. Nguyễn Ngọc Hải và TS. Trần Xuân Hạnh đã tận tình hướng dẫn tôi thực hiện đề tài này, cùng cảm ơn đến các cộng sự tại Bộ môn Nghiên cứu Vi trùng – Công ty Navetco đã giúp đỡ tôi trong suốt thời gian qua. Gửi đến vợ và con những tình cảm trìu mến nhất! Phạm Hào Quang iv TÓM TẮT Nghiên cứu được thực hiện nhằm phân lập, định danh và kiểm tra độc lực của các gốc vi khuẩn Streptococcus phân lập được trên cá rô phi, điêu hồng, tai tượng và lia thia, tại TP. HCM và một số tỉnh lân cận. Kết quả cho thấy tỷ lệ phân lập được vi khuẩn Streptococcus là 40,32 %, trong đó tỷ lệ các loài lần lượt là S. agalactiae (84 %), S. difficilis (12 %), S. iniae (4 %), S. uberis (0 %). Kết quả thử độc lực cho thấy vi khuẩn gây chết cá rô phi ở liều công độc từ 1 – 2 x 10 7 cfu / liều công cá, tỷ lệ chết từ 40 – 80 % qua 7 ngày theo dõi. v SUMMARY This study was carried out to isolate, identify and test virulence of Streptococcus isolates in Tilapia, Red tilapia and other fish species in HCM City and other neighboring provinces. The result shows that the general Streptococcus isolation rate was 40,32 %, in which each species shares in succession as following: S. agalactiae (84 %), S. difficilis (12 %), S. iniae (4 %), S. uberis (0 %). After a 7 day monitoring, the collected virulent testing result shows that Tilapia (Oreochromis niloticus) died at a challenge dose of 1 – 2 x 10 7 cfu, with mortality vary from 40 % to 80 %. vi MỤC LỤC 1. Đặt vấn đề 1 2. Mục tiêu 2 Chương 1 3 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Vi khuẩn Streptococcus 3 1.1.1. Hình thái 3 1.1.2. Điều kiện nuôi cấy 3 1.1.3. Danh pháp và định danh 4 1.1.4. Yếu tố độc lực 5 1.1.5. Đặc tính sinh hóa 9 1.1.6. Một số loài Streptococcus thường gặp trên cá 10 1.1.7. Bệnh do vi khuẩn Streptococcus 11 1.2. Một số loài cá nước ngọt có vảy được nuôi phổ biến tại Việt Nam 12 1.2.1. Cá rô phi 12 1.2.2. Cá tai tượng 14 1.5. Một số nghiên cứu về vi khuẩn Streptococcus và vaccine Streptococcus trên cá 18 Chương 2 21 2.1. Thời gian và địa điểm 21 vii CÁC TỪ VIẾT TẮT CAMP Cyclic Adenosin Mono Phosphate CbpA Cholin binding protein A CBPs Cholin binding proteins FbsA Fibrinogen binding protein IdeS IgG degrading enzyme of Streptococcus pyogenes Lmb Lamining binding protein PavA Pneumococcal adherence and virulence factor A PCR Polymerase Chain Reaction PspA Pneumococcal surface protein A RPS Relative Percentage of Survival SIC Streptococcal inhibitor of complement mediated lysis SLO Streptolysin O SLS Streptolysin S SpeB Streptoccocal pyrogenic exotoxin B Spes Streptococcal pyrogenic exotoxins viii [...]... vào Vi t Nam năm 1974 từ Đài Loan Cá rô phi đỏ (Red Tilapia), có màu hồng được nhập vào Vi t Nam năm 1985 từ Malaysia b Đặc điểm hình thái Cá rô có thân hình màu hơi tím, vảy sáng bóng, có 9 – 2 sọc đậm song song nhau từ lưng xuống bụng Vi đuôi có màu sọc đen sậm song song từ phía trên xuống phía dưới và phân bổ khắp vi đuôi Vi lưng có những sọc trắng chạy song song trên nền xám đen Vi n vi lưng và vi. .. mặn: cá rô phi là loài rộng muối, có khả năng sống được trong môi trường nước sông, suối, đập tràn, hồ ao nước ngọt, nước lợ và nước mặn có độ muối từ 0 – 40 % Trong môi trường nước lợ (độ mặn 10 – 25 ‰) cá tăng trưởng nhanh, mình dày, thịt thơm ngon Độ pH: môi trường có độ pH từ 6,5 – 8,5 thích hợp cho cá rô phi, nhưng cá có thể chịu đựng trong môi trường nước có độ pH thấp bằng 4 13 Oxy hòa tan: cá. .. giác ngứa ngáy, vận động mạnh trên mặt nước, bơi lội cuồng dại, cường độ bắt mồi giảm Phân bố và lan truyền bệnh: rận cá Caligus phân bố ở vùng nước ngọt và cửa sông (nước lợ) chúng ký sinh nhiều loài cá nuôi, cá rô phi nuôi mật độ dày, rận cá ký sinh và đã gây chết cá hàng loạt như ở các đầm nước lợ hoặc nước ngọt ở Hải Phòng, Ninh Bình, Quảng Ninh, Bến Tre (Bùi Vi ̣t Hùng, 2007) 1.4 Kỹ thuật PCR... gồm: • Phân lập vi khuẩn Streptococcus • Xác định giống bằng kỹ thuật PCR • Xác định loài bằng kỹ thuật PCR, có 4 loài được quan tâm nghiên cứu: Streptococcus iniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus uberis, Streptococcus difficilis − Nội dung 2: Xác định độc lực của các gốc vi khuẩn đã được phân lập nói trên 21 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phân lập vi khuẩn Streptococcus. .. đồ 2.1 Sơ đồ phân lập và định danh vi khuẩn Streptococcus .24 Sơ đồ 2.2 Sơ đồ định danh vi khuẩn bằng kỹ thuật PCR 26 Bảng 2.2 Các cặp mồi sử dụng cho phản ứng PCR 29 Sơ đồ 2.3 Xác định độc lực của gốc vi khuẩn Streptococcus phân lập 30 Bảng 2.3 Bố trí thí nghiệm xác định độc lực của vi khuẩn trên cá rô phi 32 Bảng 3.1 Số gốc vi khuẩn phân lập được... nuôi cá trên địa bàn các tỉnh Tiền Giang, Đồng Nai, Bình Dương và Thành phố HCM Địa điểm phân lập vi khuẩn và làm thí nghiệm: Trung tâm nghiên cứu Thú y – Công ty Navetco 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu Vi khuẩn Streptococcus phân lập từ cá rô phi, điêu hồng, tai tượng, lia thia 2.2 Nội dung nghiên cứu − Nội dung 1: Phân lập và định danh vi khuẩn Streptococcus trên các... biến, cá rô phi vằn đơn tính lớn nhanh từ tháng đầu đến tháng thứ 5 – 6 1.2.2 Cá tai tượng a Nguồn gốc và tên gọi Danh pháp: Họ: Osphronemidae Phân họ: Osphroneminae Chi: Osphronemus Loài: Osphronemus goramy b Môi trường sống Cá tai tượng sống ở ao hồ, đầm nước ngọt, cá có cơ quan hô hấp nên cá sống được ở nước tù, bẩn, thiếu oxy (hàm lượng oxy 3 mg / lit) Cá tai tượng sống được ở nước lợ,... Vi ̣t Nam 1.2.1 Cá rô phi a Nguồn gốc và tên gọi Cá rô phi hiện đang nuôi phổ biến ở Vi t Nam thuộc: Bộ cá vược – Perciforms Họ – Cichlidae 12 Giống – Oreochromis Loài – Cá rô phi vằn O niloticus Hiện nay có 3 loài chính được phổ biến tại Vi t Nam là: Cá rô phi cỏ Oreochromis mossambicus, được nhập vào Vi t Nam năm 1953 qua ngã Thái Lan Cá rô phi vằn (Rô phi Đài Loan, O niloticus) được nhập vào... hiện các bệnh di truyền, nhận dạng, chẩn đoán những bệnh nhiễm trùng, tách dòng gene, và xác định huyết thống 1.5 Một số nghiên cứu về vi khuẩn Streptococcus và vaccine Streptococcus trên cá Năm 2002, Klesius và cộng tác vi n đã nghiên cứu vaccine Streptococcus iniae, vaccine đơn giá đa chủng Vaccine được tạo ra từ xác tế bào và các thành 18 phần ngoại bào của vi khuẩn Streptococcus. .. bò bị bệnh vi m vú Streptococcus agalactiae được xếp vào nhóm B theo bảng phân loại Lancefield Có 9 serotype kháng nguyên capsule Theo Jafar và ctv (2009), Streptococcus agalactiae chiếm tỷ lệ cao (92,9 %) trong các vi khuẩn phân lập từ đợt dịch trên cá tại vi nh Kuwait năm 2001, qua đó cho thấy vai trò gây bệnh của vi khuẩn này Ngoài ra, còn có các loài Streptococcus