Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu thành phần của cây hoa bạch xà
Nguyễn tuấn quang nghiên cứu thành phần hoá học của cây bạch hoa xà (Plumbago zeylanica L. Plumbaginaceae) Khoá luận tốt nghiệp dược sỹ đại học Hướng dẫn khoa học: TS. Triệu Duy Điệt - Khoa Dược liệu - Bộ môn DHQS Hà Nội - 2003 Nội dung báo cáo gồm: - Đặt vấn đề. - tổng quan - nguyên vật liệu và phương pháp nghiên cứu. - Kết quả và bàn luận - Kết luận và kiến nghị. Đặt vấn đề Bạch hoa xà (Plumbago zeylanica L. Họ Đuôi công: Plumbaginaceae). Theo kinh nghiệm, nhân dân sử dụng cây này để chữa các bệnh ngoài da, các vết thương, vết bỏng với tác dụng nổi bật là kháng khuẩn và chống viêm. Theo các tài liệu cây Bạch hoa xà có chứa nhóm quinon trong đó chủ yếu là chất Plumbagin. Để nghiên cứu đầy đủ về thành phần hoá học của cây chúng em tiến hành chọn đề tài: " Nghiên cứu thành phần hoá học của cây Bạch hoa xà" với 2 mục tiêu: - Sơ bộ nghiên cứu thành phần hoá học trong các bộ phận của cây. - Xác định hàm lượng Plumbagin trong các bộ phận khác nhau của cây. tổng quan 1.1. Về cây BHX (Plumbago zeylanica L. Plumbaginaceae). - Đặc điểm thực vật. Hình 1.1: Cây Bạch hoa xà (Plumbago zeylanica L.) - Phân bố, thu hái, chế biến. - Thành phần hoá học. - Công dụng của BHX theo YHCT và theo KN dân gian. *Theo YHCT: BHX có vị cay, tính nóng, có tác dụng thông kinh hoạt huyết, sát khuẩn, tiêu viêm * ở nước ta: ông cha ta dùng cây BHX chữa mụn nhọt, hắc lào, chữa chai chân, sắc nước rửa vết thương, vết loét . - Tác dụng dược lý và ứng dụng lâm sàng của BHX. 1.2. Chất Plumbagin. 1.2.1. Cấu tạo:C 11 H 8 O 3 . 7 8 6 5 HO O O CH 3 1 2 3 4 Tên khoa học: 2 methyl - 5hydroxy - 1,4 naphtoquinon 1.2.2. Nguồn gốc phân lập. [0] CrO 3 /CH 3 COOH 0 0 1.2.3. Tính chất vật lý: 1.2.4. Tính chất hoá học: - Plumbagin bị khử hoá do SO2 tạo thành di phenol; SO2 OH OH O O HO CH3 CH3 HO - Acetyl hoá Plumbagin tạo thành dẫn xuất acetyl có màu vàng, t 0 nóng chảy: 117 - 118 0 C. - Tan trong dung dịch kiềm cho màu đỏ do tạo thành ion phenolat. - Cho màu đỏ với muối sắt III clorid. CH 3 COOH O O O O HO CH 3 CH 3 H 3 C-C-O O nguyên vật liệu và phương pháp NC 2.1. Nguyên vật liệu. - Cây Bạch hoa xà. - Dung môi, hoá chất, thuốc thử. - Dụng cụ thí nghiệm. 2.2. Phương pháp nghiên cứu. 2.2.1. Sơ bộ xác định các nhóm hoạt chất: bằng các phản ứng hoá học trong ống nghiệm (theo phương pháp phân tích của khoa dược liệu - Trường đại học dược Rumania). - Dịch chiết ether: flavonoid, quinon, alcaloid, tinh dầu, acid hữu cơ, phytosterol. - Dịch chiết cồn: quinon, flavonoid, alcaloid, acid hữu cơ, sterol, đường khử, tanin, anthocynosid. - Dịch chiết nước acid: alcaloid, tanin, đường khử, saponin 2.2.2. Định tính các nhóm hợp chất bằng SKLM. Lấy khoảng 1g dược liệu ở các bộ phận khác nhau của cây (rễ, thân, lá) đem chiết với cồn 90 0 , lấy dịch chiết chấm SK: - Bản mỏng dùng Silicagel G (của viện Kiểm nghiệm) chế tạo thành những bản mỏng có kích thước 5ì20 cm, hoạt hoá 110 o C trong 1 giờ. - Dung môi chạy SK với các hệ: I) Benzen - Methanol - Nước ( 15- 1- 4). II) Ether dầu - Ethyl acetat (7 - 3). III) Benzen - Methanol - Acid acetic ( 45-8-3 ). - Thuốc thử hiện màu: KOH 10%/cồn. 2.2.3. Chiết xuất phân nhóm hoạt chất quinon. Chiết xuất: Dùng dung môi là ethanol 90 o . Phân lập: Dùng phương pháp SK lớp chế hoá. 2.2.4. Sơ bộ nhận dạng Plumbagin và các hợp chất thông qua một số chỉ số lý hoá. - Thể chất: cảm quan, hình dạng tinh thể, màu sắc, độ tan. - Đo điểm chảy tinh thể: trên máy Boetius HMK ( Đức) tại bộ môn DHQS. - SKLM với 3 hệ dung môi khác nhau. - Đo phổ tử ngoại: trên máy Cintra 40 ( Australia ) tại bộ môn DHQS. 2.2.5. Định lượng Plumbagin trong các bộ phận của cây bằng phương pháp quang phổ tử ngoại. * Xây dựng đường chuẩn: A = k.C + b. * Xác định hàm lượng Plumbagin trong các bộ phận của cây (%)100. 10. 6 m nV k bA Công thức tính C% = [...]... Vậy:% Plumbagin trong: Rễ cây= 0,2955 0,0003 (%) Thân cây= 0,03494 0,0003 (%) Lá cây = 0,00789 0,00001 (%) Kết luận và kiến nghị 4.1 Sơ bộ nghiên cứu thành phần hoá học trong các bộ phận của cây Bạch hoa xà: - Rễ Bạch hoa xà có: Quinon, phytosterol, acid hữu cơ, đường khử và saponin - Thân Bạch hoa xà có: Quinon, phytosterol, acid hữu cơ, đường khử và saponin - Lá Bạch hoa xà có: Quinon và acid hữu... bộ phận của cây Sau khi đo được độ hấp thụ (A), theo phương trình: C% = A b V n k 100(%) 6 m.10 Với: k = 0,06728, b = 0,00281 V: thể tích ban đầu (100ml) n: hệ số pha loãng của các bộ phận của cây Rễ cây = 75 (lần) Thân cây = 5 (lần) Lá cây = 1,25 (lần) m: khối lượng mẫu đem chiết của các bộ phận của cây (Rễ: 30g; thân: 20g; lá: 20g) Sẽ tính được hàm lượng % Plumbagin trong các bộ phận của cây Kết... các bộ phận cây Bạch hoa xà có 2 chất thuộc nhóm quinon là P1 và P2 Chất P2 kết tinh thành tinh thể hình kim màu vàng cam Dựa vào các thông số lý, hoá (sắc ký lớp mỏng, điểm chảy tinh thể, phổ tử ngoại) đã sơ bộ xác định là Plumbagin Chất P1 do lượng quá ít chưa có điều kiện kết tinh được 4.2 Định lượng Plumbagin trong các bộ phận của cây cho kết quả: Rễ cây : 0,2955 0,0003 (%) Thân cây : 0,03494... thấy: trong các bộ phận của cây Bạch hoa xà có chứa hai chất thuộc nhóm Quinon 3.3 Chiết xuất và phân lập các chất nhóm hợp chất quinon 3.3.1 Chiết xuất Bột dược liệu (Rễ/thân/lá) Chiết bằng cồn 900 Dịch chiết cồn Thu hồi dung môi Cặn Tinh chế, hoà tan trong cồn Dung dịch cồn để phân lập Hình 3.2: Sơ đồ quy trình chiết xuất nhóm Quinon từ các bộ phận của cây 3.3.2 Phân lập các chất của nhóm Quinon bằng... của cây cho kết quả: Rễ cây : 0,2955 0,0003 (%) Thân cây : 0,03494 0,0003 (%) Lá cây : 0,00789 0,00001 (%) 4.3 Kiến nghị: Đề nghị tiếp tục nghiên cứu sâu thêm về thành phần hoá học trong các bộ phận riêng rẽ của cây Cải tiến quy trình chiết xuất và dung môi trong quá trình chiết xuất Plumbagin để nâng cao hiệu xuất của quá trình ...Kết quả và bàn luận 3.1 Sơ bộ xác định thành phần hoá học trong các bộ phận của cây STT 1 Các nhóm hợp chất cần tìm Quinon 2 Bảng 3.1 Kết quả định tính các nhóm hợp chất trong các bộ phận của cây BHX Ghi chú: (++): Phản ứng dương tính rõ (+): Phản ứng dương tính (-): Phản ứng âm tính * Nhận xét: Flavonoid 3 Phytosterol... cây (Rễ: 30g; thân: 20g; lá: 20g) Sẽ tính được hàm lượng % Plumbagin trong các bộ phận của cây Kết quả được trình bày ở bảng 3.4 Bảng 3.4 Kết quả độ hấp thụ (A) và nồng độ ( C ) tương ứng của rễ, thân, lá Bạch hoa xà ở bước sóng = 266nm Độ hấp thụ A Rễ A Thân CR (%) A CT (%) Lá A CL (%) Mẫu 1 0,7991 0,2959 0,9431 0,03494 0,8516 0,00788 Mẫu 2 0,7978 0,2954 0,9428 0,03493 0,8524 0,00789 Mẫu 3 0,7973 0,2952... ngoại trong ethanol 900 1.25 Abs 210 0 1.0 0.75 266 8 0.5 421 2 0.25 0.0 200 0 250 0 300 0 350 0 400 0 450 0 500 0 550 0 600 nm 0 Hình 3.6: Hình ảnh phổ tử ngoại của chất P2 trong ethanol 90o 3.5 Định lượng Plumbagin trong các bộ phận của cây bằng phư ơng pháp quang phổ tử ngoại 3.5.1 Kết quả xây dựng đường chuẩn Bảng 3.3 độ hấp thụ (A) ở bước sóng 266nm C (à g/ml) A 2 4 6 8 10 12 14 Mẫu 1 0,1379 0,2720... 9 Tinh dầu -Bay hơi - - - 10 Caroten - H 2 SO 4 10% - - - 11 Saponin + + - - Sinh bọt 3.2 Định tính nhóm hợp chất quinon bằng SKLM Hình 3.1: Sắc ký đồ của nhóm hợp chất quinon Bảng 3.2: Giá trị Rf x 100 của các vết trên SK đồ: Màu sắc Các vết Rf x 100 của các vết trên các hệ dung môi Soi dưới đèn tử ngoại Vàng I II III P1 Bình thường Vàng nhạt 20 36 62 P2 Vàng đậm Hồng đỏ 68 69 88 * Nhận xét: Các hệ... 3.2: Sơ đồ quy trình chiết xuất nhóm Quinon từ các bộ phận của cây 3.3.2 Phân lập các chất của nhóm Quinon bằng SK lớp chế hoá Vết P2 Vết P1 Hình 3.3: Sắc ký đồ trên lớp chế hoá của nhóm hợp chất quinon - Đánh dấu, cạo riêng các phần silicagel P1 và P2 Tiến hành tư ơng tự thu được 10 bản chế hoá - Bột silicagel chứa chất P1 và chất P2 đều được chiết bằng ethanol 900 (theo sơ đồ hình 3.4) Bột Silicagel