ỦY BAN NHÂN DÂN TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BÁO CÁO NGHIỆM THU (Đã chỉnh sửa theo góp ý của Hội đồng nghiệm thu) NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA CAO LINH CHI (Ganoderma lucidum) trong việc phụ hồi tình trạng suy giảm bạch cầu gây bởi các thuốc kháng ung thư CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI (Ký tên) PGS.TS. Trần Mạnh Hùng CƠ QUAN QUẢN LÝ CƠ QUAN CHỦ TRÌ (Ký tên/đóng dấu xác nhận) (Ký tên/đóng dấu xác nhận) THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2013 TÓM TẮT NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Đặt vấn đề Các thuốc hóa trị liệu ung thư gây tác dụng phụ lên nhiều hệ cơ quan, trong đó suy giảm bạch cầu do hóa trị đôi khi buộc phải ngưng điều trị. Đề tài này được tiến hành với mục tiêu “xây dựng các mô hình suy giảm bạch cầu trên chuột nhắt và ứng dụng để đánh giá tác động phòng ngừa suy giảm bạch cầu của cao linh chi và viên nang linh chi OPC”. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu là chuột nhắt trắng chủng Swiss albino, 6-8 tuần tuổi, phái đực, đạt tiêu chuẩn thử nghiệm. Các thuốc hóa trị ung thư như oxaliplatin, 5-FU, paclitaxel, carboplatin, doxorubicin và cyclophosphamid là những dược phẩm đang được sử dụng trên lâm sàng. Thử nghiệm thăm dò tác động gây suy giảm tổng lượng bạch cầu của các thuốc hóa trị ung thư để xây dựng mô hình suy giảm bạch cầu được thực hiện trên buồng đếm Neubauer. Thử nghiệm xây dựng mô hình suy giảm bạch cầu và đánh giá tác động của linh chi được thực hiện bằng phương pháp xác định các chỉ số bạch cầu trên máy xét nghiệm CELL-DYN 3700. Hàm lượng đường hòa tan trong polysaccharid của cao linh chi được xác định bằng phương pháp phenol- acid sulfuric và hàm lượng đường khử trong polysaccharid của cao linh chi được xác định bằng phương pháp acid 3,5-dinitro salicylic. Kết quả Polysaccharid của cao linh chi OPC chứa 25,07% đường hòa tan và 9,06% đường khử. Chúng tôi đã xây dựng được 3 mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng phối hợp oxaliplatin (5mg/kg, ip, ngày 0) + 5-FU (50 mg/kg, ip, ngày 0, 1) + leucovorin (50 mg/kg, ip, ngày 0, 1) hoặc bằng phối hợp paclitaxel (20 mg/kg, ip, ngày 0) + carboplatin (75 mg/kg, ip, ngày 0) hoặc bằng phối hợp cyclophosphamid (150 mg, ip, ngày 0) + doxorubicin (5 mg/kg, ip, ngày 0) với chỉ tiêu làm giảm trên 50% tổng lượng bạch cầu, bạch cầu trung tính và bạch cầu lympho. Mô hình cho đáp ứng với thuốc đối chứng là filgrastim ở liều 50 g/kg. Trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng oxaliplatin phối hợp với 5-FU và leucovorin, cao linh chi ở nồng độ 12,5% hay 25% hoặc viên nang linh chi ở liều tương ứng thể hiện tác động dự phòng và điều trị một phần suy giảm bạch cầu. Tuy nhiên, so với filgrastim (50 g/kg), tác động của linh chi thể hiện kém hơn trên các chỉ số tổng lượng bạch cầu và bạch cầu lympho. Ngoài ra, linh chi cũng thể hiện tác động dự phòng suy giảm tiểu cầu. Trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid phối hợp với doxorubicin, linh chi và viên nang linh chi thể hiện tác động dự phòng và điều trị suy giảm bạch cầu tùy thuộc liều lượng, trong đó ở nồng độ 25% linh chi thể hiện tác động tốt hơn filgrastim trên các chỉ số tổng lượng bạch cầu, bạch cầu trung tính và bạch cầu lympho. Chúng tôi cũng thu được kết quả tương tự về tác động dự phòng và điều trị suy giảm bạch cầu của linh chi trên mô hình paclitaxel phối hợp với carboplatin. Kết luận Các mô hình suy giảm bạch cầu đã xây dựng có ý nghĩa về mặt bệnh lý và có tính ứng dụng trong dược lý thực nghiệm để sàng lọc các thuốc dự phòng và điều trị suy giảm bạch cầu do thuốc hóa trị. Linh chi OPC có tác dụng dự phòng và hồi phục một phần tình trạng suy giảm bạch cầu do các thuốc hóa trị gây ra. Từ khóa: Linh chi OPC, oxaliplatin, 5-FU, carboplatin, paclitaxel, cyclophosphamid, doxorubicin, suy giảm bạch cầu. SUMMARY OF RESEARCH CONTENT Introduction Chemotherapeutic agents cause many adverse reactions, of those leukocytopenia is one of the most serious side effects that may delay or postpone chemotherapy. In this study, we developed mice models of chemotherapy-induced leukocytopenia and investigated the preventive effects of lingzhi extract and lingzhi preparation manufactured by OPC. Materials and methods Study was conducted in Swiss albino male mice, 6-8 weeks old and meeting criteria for experiment. Chemotherapeutic agents such as oxaliplatin, 5-FU, paclitaxel, carboplatin, cyclophosphamide and doxorubicin were from pharmaceutical formulations being used clinically. For developing leukocytopenia model, the determination of total white blood cell count was done by Neubauer hemocytometer. For investigating the effect of lingzhi in prevention and treatment of leukocytopenia, the determination of white blood cell indices was conducted in hematological analyzer CELL-DYN 3700. We applied phenol-sulfuric acid method for determination of soluble sugars and 3,5-dinitro salicylic reagent for determination of reducing sugars in polysaccharide content of lingzhi extracts. Results Polysaccharide in OPC dried lingzhi extract contained 25.07% of soluble sugars and 9.06% reducing sugars. Leukocytopenia models were successfully developed by the combination of oxaliplatin (5mg/kg, ip, day 0) + 5-FU (50 mg/kg, ip, day 0, 1) + leucovorin (50 mg/kg, ip, day 0, 1) or by paclitaxel (20 mg/kg, ip, day 0) + carboplatin (75 mg/kg, ip, day 0) or cyclophosphamide (150 mg/kg, ip, day 0) + doxorubicin (5 mg/kg, ip, day 0). These models showed reductions of more than 50% of total white blood cell-, lymphocyte- and neutrophil counts. Filgrastim (50 g/kg), a granulocyte-colony stimulating factor, exerted leukocyte-enhancing response. In mouse model of leukocytopenia induced by oxaliplatin plus 5-FU and leucovorin, lingzhi extracts at concentration of 12.5% or 25% or lingzhi capsule at equivalent doses showed partial prevention and treatment effects. However, these responses were weaker on total white blood cell- and lymphocyte count as compared with filgrastim (50 g/kg). In addition, lingzhi also exerted preventive effect on suppression of platelet count. In mouse model of leukocytopenia induced by cyclophosphamide plus doxorubicin, lingzhi extract and lingzhi capsule showed a dose-dependent response on prevention and treatment of leukocytopenia, of those, the concentration 25% showed better response toward filgrastim. We also obtained similar result of the effect of lingzhi in prevention and treatment of leukocytopenia in paclitaxel plus carboplatin model. Conclusions Leukocytopenia models mentioned above represented a significance in term of pathology and application in pharmacological experiment for screening drug candidates in prevention or treatment of chemotherapy-induced leukocytopenia. Lingzhi extract and preparation manufactured by OPC exerted partly preventive and recovering effects in leukocytopenia mice caused by chemotherapy. Key words: Lingzhi OPC, oxaliplatin, 5-FU, carboplatin, paclitaxel, cyclophosphamide, doxorubicin, leukocytopenia. MỤC LỤC Trang Danh sách các chữ viết tắt i Danh sách bảng ii Danh sách biểu đồ iii PHẦN MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1. Giới thiệu nấm linh chi 4 1.1.1. 1.1.1. Đặc điểm chủng loại và mô tả cây 4 1.1.2. Thành phần hóa học 5 1.2. Tổng quan tình hình nghiên cứu về linh chi (G. lucidum) thuộc lĩnh vực đề t ài 7 1.2.1. Các nghiên cứu ngoài nước 7 1.2.2. Các nghiên cứu trong nước 8 1.3. Các dòng bạch cầu 9 1.3.1. Bạch cầu hạt 10 1.3.2. Bạch cầu lympho 11 1.3.3. Bạch cầu đơn nhân 11 1.4. Suy giảm bạch cầu do thuốc 12 1.4.1. Các thuốc hóa trị ung thư 12 1.4.2. Các thuốc kháng giáp tổng hợp 14 1.4.3. Các loại thuốc khác 15 1.4.4. Yếu tố kích thích tạo bạch cầu 16 1.5. Các mô hình gây suy giảm bạch cầu thực nghiệm 17 1.5.1. Phối hợp oxaliplatin với 5-FU và leucovorin 18 1.5.2. Phối hợp paclitaxel và carboplatin 23 1.5.3. Phối hợp cyclophosphamid và doxorubicin 25 1.6. Cơ sở nghiên cứu tác dụng phục hồi tình trạng suy giảm bạch cầu của linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng thuốc hóa trị ung thư 28 1.7. Tính cấp thiết của đề tài 28 CHƯƠNG II: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1. Nội dung 1: xác định hàm lượng đường hòa tan và đường khử trong polysaccharid của cao khô linh chi OPC 30 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu 30 2.1.2. Mô tả nội dung 30 2.1.3. Phương pháp nghiên cứu 30 2.1.4. Sản phẩm nội dung cần đạt 32 2.2. Nội dung 2: Khảo sát mức độ gây suy giảm bạch cầu của 3 phối hợp oxaliplatin/5-FU/leucovorin, paclitaxel/carboplatin và cyclophosphamid/doxorubicin 33 2.2.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát mức độ gây suy giảm bạch cầu của oxaliplatin phối hợp 5-FU và leucovorin trên chuột nhắt 33 2.2.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát mức độ gây suy giảm bạch cầu của carboplatin và paclitaxel trên chuột nhắt 35 2.2.3. Thí nghiệm 3: Khảo sát mức độ gây suy giảm bạch cầu của cyclophosphamid và doxorubicin trên chuột nhắt 36 2.3. Nội dung 3: Xây dựng mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng 5-FU, oxaliplatin và leucovorin trên chuột nhắt 38 2.3.1. Phương pháp nghiên cứu 38 2.3.2. Các chỉ tiêu theo dõi 38 2.3.3. Sản phẩm nội dung cần đạt 38 2.4. Nội dung 4: Khảo sát tác dụng phòng ngừa suy giảm bạch cầu của linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng oxaliplatin phối hợp 5-FU và leucovorin 39 2.4.1. Phương pháp nghiên cứu 39 2.4.2. Các chỉ tiêu theo dõi 39 2.4.3. Sản phẩm nội dung cần đạt 39 2.5. Nội dung 5: Xây dựng mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng carboplatin và paclitaxel 40 2.5.1. Phương pháp nghiên cứu 40 2.5.2. Các chỉ tiêu theo dõi 40 2.5.3. Sản phẩm nội dung cần đạt 40 2.6. Nội dung 6: Khảo sát tác dụng phòng ngừa suy giảm bạch cầu của linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng carboplatin + paclitaxel 41 2.6.1. Phương pháp nghiên cứu 41 2.6.2. Các chỉ tiêu theo dõi 41 2.6.3. Sản phẩm nội dung cần đạt 41 2.7. Nội dung 7: Xây dựng mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid và doxorubicin 42 2.7.1. Phương pháp nghiên cứu 42 2.7.2. Các chỉ tiêu theo dõi 42 2.7.3. Sản phẩm nội dung cần đạt 42 2.8. Nội dung 8: Khảo sát tác dụng phòng ngừa suy giảm bạch cầu của linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid và doxorubicin 43 2.8.1. Phương pháp nghiên cứu 43 2.8.2. Các chỉ tiêu theo dõi 43 2.8.3. Sản phẩm nội dung cần đạt 43 CHƯƠNG III: KẾT QỦA VÀ THẢO LUẬN 44 3.1. Nội dung 1: Xác định hàm lượng polysaccharid, đường khử và đường hòa tan 44 3.1.1. Kết quả xác định hàm lượng polysaccharid 44 3.1.2. Kết quả xác định hàm lượng đường hòa tan trong polysaccharid 44 3.1.3. Kết quả xác định hàm lượng đường khử trong polysaccharid 45 3.2. Nội dung 2: Khảo sát mức độ gây suy giảm bạch cầu của 5-FU, oxaliplatin, carboplatin, paclitaxel, cyclophosphamid và doxorubicin 46 3.2.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát mức độ gây suy giảm bạch cầu của 5-FU và oxaliplatin trên chuột nhắt 46 3.2.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát mức độ gây suy giảm bạch cầu của carboplatin và paclitaxel trên chuột nhắt 49 3.2.3. Thí nghiệm 3: Khảo sát mức độ gây suy giảm bạch cầu của cyclophosphamid và doxorubicin trên chuột nhắt 51 3.3. Nội dung 3: Xây dựng mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng 5-FU, oxaliplatin và leucovorin trên chuột nhắt 52 3.4. Nội dung 4: Khảo sát tác dụng phòng ngừa suy giảm bạch cầu của linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng 5-FU + oxaliplatin + leucovorin 55 3.5. Nội dung 5: Xây dựng mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng carboplatin và paclitaxel 61 3.6. Nội dung 6: Khảo sát tác dụng phòng ngừa suy giảm bạch cầu của linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng paclitaxel và carboplatin 63 3.7. Nội dung 7: Xây dựng mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid và doxorubicin 69 3.8. Nội dung 8: Khảo sát tác dụng phòng ngừa suy giảm bạch cầu của linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid và doxorubicin 71 BÀN LUẬN 79 CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 83 PHỤ LỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT VIẾT TẮT THUẬT NGỮ TIẾNG VIẾT DD Dung dịch TT Thuốc thử DNS 3,5-dinitro salicylic 5-FU 5-Fluorouracil V Thể tích OD Mật độ quang Ip Tiêm phúc mạc MDA Malonyldialdehyd DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl FRAP Ferric ion Reducing Antioxidant Power (Năng lực khử Fe 3+ ) CCl 4 Carbon tetrachlorid DNA Desoxynucleotide acid (acid deoxynucleotid) DANH SÁCH BẢNG SỐ TÊN BẢNG SỐ LIỆU TRANG 1.1. Các hoạt chất chính của linh chi và tác dụng dược lý thực nghiệm 6 1.2. Các giá trị bình thường của bạch cầu ở người 9 1.3. Công thức bạch cầu ở chuột nhắt 10 1.4. Thời điểm tác động của các thuốc hóa trị trong chu kỳ tế bào 14 1.5. Phân độ suy giảm bạch cầu theo Viện Ung thư Quốc gia Mỹ (NCI) 14 3.1. Kết quả định lượng polysaccharide trong cao khô linh chi OPC 44 3.2. Kết quả xác định hàm lượng đường hòa tan trong mẫu thử 45 3.3. Kết quả xác định hàm lượng đường khử trong mẫu thử 46 3.4. Tổng lượng bạch cầu và các loại bạch cầu ở các lô thử nghiệm xây dựng mô hình oxaliplatin + 5-FU + leucovorin 53 3.5. Tổng lượng bạch cầu và các loại bạch cầu ở các lô thử nghiệm tác động dự phòng và điều trị của cao linh chi, viên nang linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng oxaliplatin + 5-FU + leucovorin 57 3.6. Tác động của linh chi đến số lượng hồng cầu và tiểu cầu trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng oxaliplatin + 5-FU + leucovorin 59 3.7 Tổng lượng bạch cầu và các loại bạch cầu ở các lô thử nghiệm xây dựng mô hình carboplatin + paclitaxel 61 3.8 Tổng lượng bạch cầu và các loại bạch cầu ở các lô thử nghiệm tác động dự phòng và điều trị của cao linh chi, viên nang linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng paclitaxel + carboplatin 65 3.9 Tác động của linh chi lên số lượng hồng cầu và tiểu cầu trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng paclitaxel + carboplatin 68 3.10 Tổng lượng bạch cầu và các loại bạch cầu ở các lô thử nghiệm xây dựng mô hình cyclophosphamid + doxorubicin 69 3.11 Tổng lượng bạch cầu và các loại bạch cầu ở các lô thử nghiệm tác động dự phòng và điều trị của cao linh chi, viên nang linh chi trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid + doxorubicin 74 DANH SÁCH HÌNH - BIỂU ĐỒ SỐ TÊN HÌNH - BIỂU ĐỒ TRANG 1.1. Các loại bạch cầu: bạch cầu lympho, bạch cầu ưa kiềm, bạch cầu ưa acid, bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân 12 1.2. Cơ chế tác động của oxaliplatin 19 1.3. Cơ chế tác động của 5-FU 20 3.1. Đường tuyến tính glucose chuẩn trong định lượng đường hòa tan 45 3.2. Đường tuyến tính glucose chuẩn trong định lượng đường khử 46 3.3. Tổng lượng bạch cầu xác định bằng buồng đếm Neubauer của các lô thử nghiệm sơ khởi trên mô hình oxaliplatin + 5-FU 47 3.4. Tác động gây suy giảm bạch cầu của oxaliplatin, 5-FU và leucovorin trong thử nghiệm sơ khởi 48 3.5. Tác động gây suy giảm bạch cầu của paclitaxel và carboplatin 50 3.6. Tác động gây suy giảm bạch cầu của cyclophosphamid và doxorubicin 51 3.7. Mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng oxaliplatin kết hợp với 5-FU và leucovorin 54 3.8. Tác động của linh chi lên số lượng tiểu cầu trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng oxaliplatin kết hợp với 5-FU và leucovorin 60 3.9 Mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng carboplatin kết hợp paclitaxel 62 3.10 Tác động của linh chi trên các chỉ số bạch cầu ở mô hình carboplatin + paclitaxel 66 3.11 Mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid kết hợp doxorubicin 70 3.12 Tác động của linh chi trên các chỉ số bạch cầu ở mô hình cyclophosphamid + doxorubicin 75 3.13 Tác động của linh chi lên số lượng hồng cầu trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid + doxorubicin 76 3.14 Tác động của linh chi lên số lượng tiểu cầu trên mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid + doxorubicin 76 1 PHẦN MỞ ĐẦU Tên đề tài: Nghiên cứu tác dụng của cao linh chi (Ganoderma Lucidum) trong việc phục hồi tình trạng suy giảm bạch cầu gây bởi các thuốc kháng ung thư Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS. Trần Mạnh Hùng Cơ quan chủ trì: Trung tâm Khoa học công nghệ Dược Sài Gòn (SAPHARCEN) Thời gian thực hiện đề tài: 20 tháng (từ 04/2012 đến 11/2013 Kinh phí được duyệt: 270.000.000 đồng (Hai trăm bảy mươi triệu đồng) Kinh phí đã cấp: 180.000.000 đồng (Một trăm tám mươi triệu đồng) theo TB số : 24/TB-SKHCN ngày 13/04/2012 Mục tiêu: (Theo đề cương đã duyệt) 1. Mô phỏng mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng các thuốc hóa trị ung thư trên chuột nhắt 2. Khảo sát tác dụng của Linh chi (Ganoderma lucidum) trong việc phục hồi tình trạng suy giảm bạch cầu gây bởi các thuốc kháng ung thư Nội dung: (Theo đề cương đã duyệt) 1. Xác định hàm lượng polysaccharid toàn phần trong cao khô linh chi nhằm qui ước liều lượng linh chi sử dụng trong các thử nghiệm dược lý. 2. Thiết lập 3 mô hình gây suy giảm bạch cầu thực nghiệm bằng sự phối hợp các thuốc 5-fuorouracil, oxaliplatin, carboplatin, paclitaxel, doxorubicin, và cyclophosphamid trên chuột nhắt dựa trên các phác đồ hóa trị thường sử dụng trong ung thư đại tràng, ung thư phổi và ung thư vú. 3. Áp dụng qui trình để đánh giá tác dụng của Linh chi trên từng loại thuốc gây suy giảm bạch cầu nhằm chứng minh tác dụng của Linh chi trên từng thông số: tổng lượng bạch cầu, bạch cầu trung tính, tiểu cầu và hồng cầu. [...]... suy giảm bạch cầu của cao linh chi hình gây suy giảm bạch cầu bằng và chế phẩm linh chi 5-FU + oxaliplatin Xây dựng mô hình gây suy giảm Đã xây dựng được mô hình: giảm >50% 5 bạch cầu bằng carboplatin + tổng lượng bạch cầu; giảm có ý nghĩa bạch paclitaxel cầu trung tính, bạch cầu lympho Khảo sát tác dụng phòng ngừa suy Đã xác định tác dụng dự phòng và điều trị 6 giảm bạch cầu của linh chi trên mô của. .. quả của sự điều chỉnh những bạch cầu bị phá hủy, còn non hay không bình thư ng được phóng thích ra máu [5] Hình 1.1 Các loại bạch cầu: a bạch cầu lympho, b bạch cầu ưa kiềm, c bạch cầu ưa acid, d bạch cầu trung tính, e bạch cầu đơn nhân[5] 1.4 Suy giảm bạch cầu do thuốc 1.4.1 Các thuốc hóa trị ung thư Các thuốc hóa trị gây độc tế bào là nguyên nhân phổ biến nhất dẫn đến tình trạng suy tủy cấp tính, thư ng... quan tình hình nghiên cứu về linh chi (G lucidum) thuộc lĩnh vực đề tài 1.2.1 Các nghiên cứu ngoài nước Cho đến nay, trên thế giới có khoảng trên 500 công trình nghiên cứu về Linh chi, tập trung chủ yếu trên 4 lĩnh vực sau: tác dụng điều hòa miễn dịch, tác dụng kháng ung thư, tác dụng trên chuyển hóa (làm giảm glucose huyết, làm giảm cholesterol) và tác dụng chống oxy hóa (giải độc gan, bảo vệ gan, kháng. .. lượng bạch cầu có thể cao hơn Số lượng bạch cầu tăng trong các bệnh nhiễm khuẩn cấp tính, đặc biệt tăng cao trong các bệnh bạch huyết cấp hoặc mạn tính và giảm trong trường hợp bị nhiễm độc, nhiễm xạ, suy tủy [5] Có nhiều cách phân loại bạch cầu, thông dụng nhất là chia thành ba nhóm: bạch cầu hạt (bạch cầu trung tính, ưa acid và ưa kiềm), bạch cầu lympho và bạch cầu đơn nhân Bảng 1.2 Các giá trị bình thư ng... 120%.[38] Bảng 1.3 Công thức bạch cầu ở chuột nhắt[38] Tổng lượng bạch cầu (trong 1 mm3 máu) Bạch cầu lympho (% ) 6000 – 15000 55 – 95 Bạch cầu trung tính (% ) 10 – 40 Bạch cầu đơn nhân (% ) 1–4 Bạch cầu ưa acid (% ) Bạch cầu ưa kiềm (% ) 0–4 0–1 1.3.1 Bạch cầu hạt Bạch cầu hạt (granulocyte) trước đây được gọi là bạch cầu đa nhân” do nhân tế bào thắt lại, chia nhiều thùy Bạch cầu hạt gồm ba loại, phân biệt... Doxorubicin hợp giảm > 50% tổng lượng bạch cầu; kết giảm có ý nghĩa bạch cầu trung tính, Cyclophosphamid bạch cầu lympho 2 Khảo sát tác dụng phòng ngừa suy giảm Đã xác định được tác dụng dự phòng bạch cầu của linh chi trên mô hình gây và điều trị suy giảm bạch cầu của suy giảm bạch cầu bằng doxorubicin cao linh chi và chế phẩm linh chi kết hợp cyclophosphamid 3 Tổng kết số liệu, viết báo cáo Báo cáo... hay chỉ tác động ở pha G0 (ví dụ như nitrosourea hay busulfan) gây ra một tình trạng suy giảm bạch cầu và hồi phục trễ hơn Sử dụng lặp lại các thuốc như BCNU (carmustin) có thể gây ra tình trạng suy giảm bạch cầu mạn tính Những loại thuốc này thể hiện độc tính đối với cả các tế bào sơ khai cũng như cả với các tế bào gốc của hệ tạo máu [73] 13 Bảng 1.4 Thời điểm tác động của các thuốc hóa trị trong chu... Kaposi.[1] Độc tính thư ng gặp của paclitaxel là gây suy tủy, đặc biệt là giảm bạch cầu trung tính, gây giới hạn liều dùng của paclitaxel Bạch cầu giảm thấp nhất sau 11 ngày và phục hồi 15-21 ngày sau mỗi liều Trong nghiên cứu tác động phục hồi suy giảm bạch cầu của sâm Ấn Độ Withania somnifera, Gupta và cộng sự (2 001) đã sử dụng paclitaxel để gây giảm bạch cầu trung tính trên chuột nhắt Sau khi tiêm tĩnh... hơn là để quá trễ.[45] 1.5 Các mô hình gây suy giảm bạch cầu thực nghiệm Những mô hình gây suy giảm bạch cầu thực nghiệm được thiết kế nhiều nhất trong giai đoạn 1980-1990 khi hàng loạt thuốc trị ung thư ra đời Các mô hình này giúp tiên đoán độc tính gây suy tủy của các thuốc hóa trị ung thư Schurig và cộng sự (1 985, 1986) đã mô phỏng hàng loạt các mô hình gây suy giảm bạch cầu bằng cisplatin, carboplatin,... nhất thuốc hóa trị[70,71] Sau đó, khi yếu tố kích thích dòng bạch cầu hạt (G-CSF: granulocyte-colony stimulating factor) ra đời, nhiều mô hình gây suy giảm bạch cầu đã được thiết kế để đánh giá tác dụng phục hồi dòng bạch cầu hạt của G-CSF Matsumoto và cộng sự (1 987, 1990) đã gây mô hình giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid để nghiên cứu khả năng phòng ngừa suy giảm bạch cầu và tình trạng nhiễm khuẩn của . hình gây suy giảm bạch cầu bằng các thuốc hóa trị ung thư trên chuột nhắt 2. Khảo sát tác dụng của Linh chi (Ganoderma lucidum) trong việc phục hồi tình trạng suy giảm bạch cầu gây bởi các thuốc. ( ã chỉnh sửa theo góp ý của Hội đồng nghiệm thu) NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA CAO LINH CHI (Ganoderma lucidum) trong việc phụ hồi tình trạng suy giảm bạch cầu gây bởi các thuốc kháng ung. giảm bạch cầu bằng cyclophosphamid + doxorubicin 76 1 PHẦN MỞ ĐẦU Tên đề tài: Nghiên cứu tác dụng của cao linh chi (Ganoderma Lucidum) trong việc phục hồi tình trạng suy giảm bạch cầu