Khảo sát sự biến đổi 4-allylpyrocatechol diacetate và Chavibetol acetate thành Chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper bete l.)

106 470 2
Khảo sát sự biến đổi 4-allylpyrocatechol diacetate và Chavibetol  acetate thành Chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper bete l.)

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Việt Nam nằm trong vùng nhiệt đới ẩm, gió mùa, rất thuận lợi cho thực vật phát triển, trong đó có cây trầu. Ở Thành phố Hồ Chí Minh, trầu trồng nhiều ở Hóc Môn, nổi tiếng là 18 thôn vườn trầu. Cây trầu có nguồn gốc ở miền Trung và Đông Malaysia, được trồng phổ biến ở các nước nhiệt đới Châu Á, việc trồng trầu gắn liền với tập tục ăn trầu và làm thuốc chữa bệnh trong dân gian. Riêng ở Việt Nam, cây trầu đã đi vào truyền thuyết dân tộc, không thể thiếu trong nền văn hóa dân gian Việt Nam. Theo đông phương và y học cổ truyền, lá trầu có vị cay, nồng, tính ấm, mùi thơm hắc. Trong nước, chủ yếu người ta chỉ dựa vào truyền khẩu dân gian để nói lên tác dụng của lá trầu và cũng chỉ mới có vài nghiên cứu về tách chiết tinh dầu từ lá trầu. Cho đến nay, vẫn chưa có công trình nghiên cứu sâu nào về thành phần hóa học và sự chuyển đổi giữa các hợp chất phenolic chính trong tinh dầu lá trầu. Do đó, đề tài này mong muốn góp phần nghiên cứu sâu hơn về cấu trúc các dẫn xuất phenolic chính trong tinh dầu lá trầu đồng thời khảo sát sự biến đổi của các hợp chất phenolic tùy theo phương thức xử lý lá trước khi chưng cất lá trầu. Thử nghiệm tính kháng oxi hóa của các hợp chất phenolic chính này.

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN  TRẦN NGUYỄN NGỌC CHÂU KHẢO SÁT SỰ BIẾN ĐỔI 4-ALLYLPYROCATECHOL DIACETATE VÀ CHAVIBETOL ACETATE THÀNH CHAVIBETOL TRONG TINH DẦU LÁ TRẦU HÓC MÔN (PIPER BETE L.) Chuyên ngành: Hóa hữu cơ Mã số : 60 44 27 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÓA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: 1. GS.TS CHU PHẠM NGỌC SƠN 2. TS. NGUYỄN TRUNG NHÂN Tp. Hồ Chí Minh, 2012 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành được luận văn này tôi đã nhận được rất nhiều sự động viên, ủng hộ và sự giúp đỡ tận tình của người thân, thầy cô và bạn bè. Em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến GS.TS.Chu Phạm Ngọc Sơn, GS Nguyễn Xích Liên, TS. Nguyễn Thị Ánh và TS.Nguyễn Trung Nhân những người thầy cô đã tận tụy, nhiệt tình hướng dẫn tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp đỡ em trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu. Em xin chân thành cảm ơn chú Huỳnh Kỳ Trân, chị Hà Mỹ Thuận, anh Nguyễn Khoa Nam, các anh chị Viện công nghệ đào tạo và phát triển, công ty mỹ phẩm Thorakao và công ty sắc ký Hải Đăng đã tạo điều kiện tốt, truyền đạt kinh nghiệm quý báu trong quá trình nghiên cứu thực hiện đề tài. Em xin cảm ơn quý Thầy, Cô Khoa Hóa đặc biệt là Quý Thầy Cô bộ môn Hóa hữu cơ đã hết lòng giảng dạy và truyền đạt cho em nhiều kiến thức khoa học bổ ích cũng như phương pháp nghiên cứu khoa hoc. GS.Võ Văn Chi, đã giúp em xác định tên khoa học của cây Trầu Không. Cuối cùng, là sự biết ơn sâu sắt đối với gia đình là nguồn động viên to lớn, luôn sát cánh và tạo mọi điều kiện tốt nhất cho con trong từng chặng đường đi qua cho đến khi hoàn thành luận văn này. DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT  Ký hiệu, chữ viết tắt Ý nghĩa APC (4-allylpyrocatechol) Là một thành phần phenolic có trong lá trầu CHV (chavibetol) Là một thành phần phenolic có mặt trong tinh dầu lá trầu HTCO% (hoạt tính chống oxi hóa) % khả năng chống oxi hóa của chất chống oxi hóa MIC (minimum inhibitory concentration) Nồng độ chất tối thiểu có khả năng tiêu diệt hoặc ức chế sự phát triển của vi sinh vật DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) Gốc tự do sử dụng trong phương pháp thử hoạt tính bắt gốc tự do TLC (thin layer chromatography) Phương pháp sắc ký bản mỏng MeOH (methanol) Dung môi, sử dụng trong thử hoạt tính thu gom gốc tự do và trong phân tích GC-MS (Gas Chromatography-Mass Spectrometry) Phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ LC-MS/MS (Liquid Chromatography- Tandem Mass Spectrometry) Phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ 2 lần NMR : phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy) DEPT : Distortionless Enhancement by Polarization Transfer HSQC : tương quan H-C qua 1 nối (Heteronuclear Single Quantum Coherence) HMBC : tương quan H-C qua 2, 3 nối (Heteronuclear Multiple Bond Coherence) s : mũi đơn (singlet) d : mũi đôi (doublet) dd : mũi đôi - đôi (doublet-doublet) m : mũi đa (multiplet) J : hằng số ghép (coupling constant) STT : số thứ tự DANH MỤC CÁC BẢNG  Bảng 1.1: Thành phần hoá học của lá trầu 5 Bảng 2.1: Quy trình test MDA 41 Bảng 3.1: Thành phần hoá học của lá trầu Hóc Môn 42 Bảng 3.2: Thành phần hóa học của tinh dầu lá trầu già và non vùng Hóc Môn 43 Bảng 3.3: Hiệu suất và phần trăm các hợp chất phenolic trong tinh dầu theo cách xử lý lá trầu trước khi chưng cất 44 Bảng 3.4: Dữ liệu phổ NMR của hợp chất APC. 49 Bảng 3.5 : Dữ liệu phổ NMR của hợp chất 1 53 Bảng 3.6: Dữ liệu phổ 1 H NMR, 13 C NMR của C1 và chavibetol được ghi trong cùng dung môi chloroform 54 Bảng 3.7: Dữ liệu phổ NMR của hợp chất 3 57 Bảng 3.8: Số liệu đường chuẩn của chavibetol 58 Bảng 3.9: Số liệu đường chuẩn của chavibetol acetate 58 Bảng 3.10: Số liệu đường chuẩn của 4-allypyrocatechol diacetate 58 Bảng 3.11: Số liệu đường chuẩn của APC 59 Bảng 3.12: Kết quả phân tích mẫu tinh dầu từ lá trầu tươi 60 Bảng 3.13: Kết quả so sánh sự chuyển đổi ở lá tươi 62 Bảng 3.14: Kết quả phân tích mẫu tinh dầu từ lá trầu khô 63 Bảng 3.15: Kết quả so sánh của lá khô 64 Bảng 3.16: Kết quả phân tích mẫu tinh dầu từ lá trầu chưng cất bằng vi sóng 65 Bảng 3.17: Kết quả so sánh của lá tươi chưng cất vi sóng 66 Bảng 3.18: Thành phần tinh dầu trước và sau chưng cất lại của muối bão hòa 68 Bảng 3.19: Kết quả phân tích mẫu tinh dầu từ lá tươi có thêm MgCl 2 69 Bảng 3.20: Kết quả so sánh của lá tươi chưng cất không muối có thêm MgCl 2 69 Bảng 3.21: Kết quả phân tích mẫu tinh dầu từ lá tươi chưng cất không muối tại pH=8 70 Bảng 3.22: Kết quả so sánh của lá tươi trong nước có pH=8 71 Bảng 3.23: So sánh khả năng bắt gốc tự do DPPH của 4 mẫu và acid ascorbic 74 Bảng 3.24: So sánh ức chế peroxy hóa lipid của 4 mẫu và acid ascorbic 76 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ  Hình 1.1: Hình thái bên ngoài của cây trầu 2 Hình 1.2: Lá trầu 2 Hình 1.3: Hoa trầu 2 Hình 1.4 Hình ảnh cây trầu và vườn trầu của nhà Ông Tư Kích, tại địa chỉ: 56/1A Nguyễn Thị Sóc, tổ 5, ấp Hưng Lân, xã Bà Điểm, Huyện Hóc Môn. 4 Hình 1.5: Khối phổ của eugenol, isoeugenol và chavibetol trong thư viện NIST 11 Hình 1.6: Tâm hoạt động của enzyme. 20 Hình 1.7: Sơ đồ biểu diễn trung tâm hoạt động enzyme và vách kỵ thủy. 21 Hình 1.8: Metyl hóa tại vị trí meta đuôi R của L-DOPA tránh xa vách kỵ nước. 23 Hình 1.9A: O-metyl hóa xảy ra tại nhóm –OH vị trí para 24 Hình 1.9C: O-metyl hóa xảy ra tại nhóm –OH vị trí meta 24 Hình 2.1: Hệ thống chưng cất tinh dầu dùng trong nghiên cứu 27 Hình 2.2: Thiết bị phân tích sắc ký khí ghép khối phổ GC-MS một tứ cực và sắc ký lỏng ghép khối phổ LC-MS/MS ba tứ cực 28 Hình 2.3: Sơ đồ chưng cất tinh dầu lá trầu bằng phương pháp truyền thống lôi cuốn theo hơi nước 29 Hình 2.4: Sơ đồ cách xử lý mẫu lá tươi trước khi chưng cất để theo dõi sự biến đổi của các dẫn xuất phenolic chính trong tinh dầu lá trầu 36 Hình 2.5: Sơ đồ cách xử lý mẫu lá khô trước khi chưng cất để theo dõi sự biến đổi của các dẫn xuất phenolic chính trong tinh dầu lá trầu 37 Hình 2.6 : Phương trình phản ứng của DPPH 38 Hình 2.7 : Phương trình phản ứng của MDA 40 Hình 3.1: Sắc đồ GC-MS của hợp chất APC do chúng tôi cô lập được 46 Hình 3.2: Sắc đồ và khối phổ MSMS của hợp chất 4-allylpyrocatechol 6 47 Hình 3.3: Cơ chế phân mảnh của APC 48 Hình 3.4: Các tương quan HMBC của hợp chất APC 49 Hình 3.5: Sắc đồ GC-MS của hợp chất Chavibetol do chúng tôi cô lập được 51 Hình 3.6: Các tương quan HMBC của hợp chất 1 52 Hình 3.7: Các tương quan HMBC của hợp chất 3 56 Hình 3.8: Đồ thị biểu diễn khả năng bắt gốc tự do DPPH của 4 mẫu nghiên cứu 75 Hình 3.9: Đồ thị biểu diễn khả năng ức chế peroxy hóa lipid của 4 mẫu nghiên cứu 77 MỤC LỤC  Trang số Lời cám ơn i Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt ii Danh mục các bảng iii 3 3 Danh mục các hình vẽ, đồ thị iv Mở đầu 1 CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 2 1.1. Đặc điểm thực vật 2 1.1.1. Mô tả thực vật 2 1.1.2. Phân bố sinh thái 3 1.2. Thành phần hóa học của cây trầu 5 1.2.1. Thành phần hoá học của cây trầu 5 1.2.2. Thành phần hóa học của tinh dầu lá trầu 8 1.2.2.1 Thành phần hợp chất phenolic trong lá trầu được nghiên cứu trên thế giới 8 1.2.2.2. Thành phần hợp chất phenolic trong lá trầu được nghiên cứu tại Việt Nam 9 1.3. Hoạt tính sinh học và công dụng 12 1.3.1. Hoạt tính sinh học của lá trầu 12 1.3.2. Công dụng của lá trầu 16 1.3.2.1. Theo y học cổ truyền 16 1.3.2.2.Theo y học hiện đại 17 1.4 Tổng quan về Catechol O-methyltransferase 18 1.4.1. Cơ chế phản ứng 18 1.4.2. Cấu trúc tâm hoạt động 20 1.4.3. Độ chọn lọc của phản ứng 20 CHƢƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1. Nguyên liệu, hóa chất, dụng cụ và các thiết bị đo đạc 26 2.1.1. Nguyên liệu 26 2.1.2. Hóa chất 26 2.1.3. Dụng cụ và các thiết bị đo đạc 27 2.2. Phƣơng pháp nghiên cứu 29 2.2.1. Trích ly tinh dầu lá trầu bằng phương pháp truyền thống lôi cuốn theo hơi nước 29 2.2.2. Các phương pháp xác định thông số nghiên cứu 30 2.2.2.1.Xác định hàm lượng tinh dầu có trong lá trầu 30 2.2.2.2.Phân tích thành phần hóa học của tinh dầu lá trầu bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ GC-MS 31 2.2.2.3.Cô lập 4-allylpyrocatechol (APC),chavibetol (CHV) bằng phương pháp sắc ký cột và điều chế dẫn xuất. 31 2.2.2.4.Định lượng APC trong phần nước còn lại sau khi đã chưng cất lấy tinh dầu lá trầu bằng phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ LC-MS/MS 33 2.2.2.5. Định lượng chavibetol, chavibetol acetate, 4-allylpyrocatechol diacetate trong tinh dầu bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ GC/MS 34 2.2.3. Theo dõi sự biến đổi của các thành phần phenolic chính trong tinh dầu lá trầu theo các cách xử lý lá trước khi chưng cất 35 2.2.4. Khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa 38 2.2.4.1. Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro bằng thử nghiệm DPPH. 38 2.2.4.2. Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro bằng thử nghiệm malonyl dialdehyd 39 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 42 3.1. Thành phần hóa học của lá trầu Hóc Môn 42 3.2. Khảo sát sự thay đổi của phần trăm chất 1,2 và 3 với cách xử lý lá trầu trƣớc khi chƣng cất 44 3.2.1. Khảo sát sơ bộ sự thay đổi 44 3.2.2. Điều chế các chất chuẩn 45 [...]... diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) Nghiên cứu gần đây của nhóm nghiên cứu trong đó có chúng tôi tại Viện Phát triển Công nghệ và Đào tạo đã xác định rõ ràng bằng cách so sánh với chuẩn là các phenolic chính trong tinh dầu của lá trầu (Piper betle L.) của huyện Hóc Môn, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam[28] gồm chavibetol 1, chavibetol acetate 2 và 4-allylpyrocatechol. .. béo trong thân và lá cây[24] Methyl hexacos-7-enoate 6,9-heptacosadiene Pentadecyl 8-hydroxytridecanoate HVCH: Trần Nguyễn Ngọc Châu 7 Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) Pentatriacontanol CH3(CH2)34OH CH3(CH2)4CH=CHCH2CH=CH-(CH2)16CH3 6,9-Heptacosadiene 1.2.2 Thành phần hóa học của tinh dầu lá trầu. .. cho vào nước với tỉ lệ khối lượng (1 nguyên liệu : 4 nước), cho hỗn hợp nguyên liệu và nước vào lò vi sóng ở chế độ công suất 600 W, thời gian chưng cất là 10 phút, hiệu suất tinh dầu thu được là 0,45% HVCH: Trần Nguyễn Ngọc Châu 9 Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) (tính theo khối lượng lá tươi), thành. .. và là thành phần chính quan trọng nhất, thành phần này có mặt nhiều nhất ở loài “bangla” 63,31% Cũng ở loài trầu “bangla”, tác giả Rathee J.S và cộng sự[ 35] trích ly các thành phần lá HVCH: Trần Nguyễn Ngọc Châu 8 Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) khô của cây trầu bằng dung môi ethanol, thu được cao... 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) Quả mọng tròn và cũng có lông ở đỉnh Tinh dầu của nó có màu vàng nhạt, hương thơm nồng, khi nếm có vị nóng và cay 1.1.2 Phân bố sinh thái: Cây trầu có nguồn gốc ở miền Trung và Đông Malaysia, được trồng phổ biến ở các nước nhiệt đới Châu Á, việc trồng trầu gắn liền với tập tục ăn trầu và làm thuốc... ethyl acetate, HVCH: Trần Nguyễn Ngọc Châu 10 Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) n-butanol Ở phân đoạn ethyl acetate tác giả cô lập được 2 hợp chất stigmast-5-en3-β-ol và furo[2,3-C]acridin-5-hydroxy-6-one  - Qua các tài liệu trên, có thể rút ra một số nhận xét nhƣ sau: Các cấu tử chính của tinh dầu trầu. .. Nên đặt dây trầu dưới đất, ở cạnh một cây đang sống hay cận tường, có thể làm giàn để dây trầu leo bám và phát triển HVCH: Trần Nguyễn Ngọc Châu 3 Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.)  Cách chăm sóc Cây trầu trồng từ 3 – 4 năm thì ra hoa, quả Muốn cho cây trầu luôn tốt thì phải đủ độ ẩm và thỉnh thoảng... cả chất chống oxi hóa tổng hợp như BHT và BHA  Tính kháng khuẩn của lá trầu Là khả năng tiêu diệt hoặc ức chế sự phát triển của vi khuẩn (thường là vi khuẩn gây bệnh có hại) HVCH: Trần Nguyễn Ngọc Châu 13 Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) Tính kháng khuẩn của trầu được quyết định bởi hàm lượng các... ngoài cơ thể (trong uống ngoài thoa) Lá trầu thường dùng để trị hàn thấp, nhức mỏi, đau dạ dày, ăn uống không tiêu, bụng đầy hơi, vết thương nhiễm trùng có mủ, sưng đau, hen suyễn khi thời tiết thay HVCH: Trần Nguyễn Ngọc Châu 16 Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) đổi, nhức đầu, khó thở, nấu thành cao... chính này HVCH: Trần Nguyễn Ngọc Châu 1 Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu lá trầu Hóc Môn (Piper betel L.) CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN  1.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT CÂY TRẦU [1][3][6][7][8][23] 1.1.1 Mô tả thực vật: Cây trầu nằm trong hệ thống phân loại thực vật như sau: - Bộ : Piperales - Họ : Hồ tiêu (Piperaceae) - Chi : Piper - Loài : Piper . thể l m giàn để dây trầu leo bám và phát triển. Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu l trầu Hóc Môn (Piper betel L. ) . DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ L C Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu l trầu Hóc Môn (Piper betel L. ) HVCH: Trần Nguyễn. α-Tocopherol Aristololactam 4-Allyl resorcinol Stigmast-4-en-3,6-dione Khảo sát sự biến đổi 4-allypyrocatechol diacetate và chavibetol acetate thành chavibetol trong tinh dầu l trầu Hóc Môn

Ngày đăng: 04/02/2015, 12:46

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan