BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ****************** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP ENZYME AMYLASE TỪ NẤM Aspergillus niger VÀ Mucor TRÊN MÔI TRƯỜNG LÊN MEN BÁN RẮN Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực hiện: NGUYỄN BÁ PHƯƠNG THẢO Niên khóa: 2005 – 2009 Tháng 08 năm 2009 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ****************** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP ENZYME AMYLASE TỪ NẤM Aspergillus niger VÀ Mucor TRÊN MÔI TRƯỜNG LÊN MEN BÁN RẮN Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực hiện TS. VŨ VĂN ĐỘ NGUYỄN BÁ PHƯƠNG THẢO CN. ĐỖ THỊ TUYẾN Tháng 08 năm 2009 LỜI CẢM ƠN Trước tiên em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy Vũ Văn Độ và cô Đỗ Thị Tuyến đã hết lòng hướng dẫn, giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho em trong suốt quá trình thực hiện đề tài. Xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đối với quý thầy cô trong Khoa Công Nghệ Sinh Học – trường đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh cũng như quý thầy cô là giáo viên thỉnh giảng tại các khoa, trường, viện nghiên cứu đã tận tình giảng dạy em trong thời gian học tập tại trường. Xin chân thành cảm ơn đến ban lãnh đạo Viện sinh học Nhiệt Đới, quý cô, chú, anh, chị và các bạn sinh viên đang công tác và làm việc tại viện công nghệ sinh học nhiệt đới, và đội bảo vệ đã giúp đỡ em trong quá trình thực hiện đề tài. Xin gửi lời cảm ơn đến các bạn lớp DH05SH, đại học chính quy khóa 2005 -2009 đã quan tâm và động viên tôi trong thời gian học tập và thực hiện đề tài. Cuối cùng, con xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến ba, mẹ và những người thân trong gia đình đã động viên, giúp đỡ và chia sẻ cùng với con trong thời gian qua. Nguyễn Bá Phương Thảo iii TÓM TẮT Enzyme amylase là một enzyme có thể tìm thấy ở rất nhiều sinh vật. Hiện nay, ezyme này được ứng dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực như nông nghiệp, công nghiệp và y học. Mục tiêu đề tài là nghiên cứu khả năng tạo enzyme amylase của nấm Aspergillus niger và Mucor và những yếu tố tác động đến khả năng tạo amylase của chúng. Đề tài đã thu được một số kết quả về sự tác động của các yếu tố môi trường đến khả năng sinh tổng hợp enzyme amylase từ nấm Aspergillus niger và Mucor. Aspergillus niger khi sinh trưởng và tổng hợp enzyme amylase trên môi trường bán rắn với cơ chất là cám gạo bổ sung thêm trấu và bã đậu nành chịu tác động của rất nhiều yếu tố môi trường như tỷ lệ cơ chất, pH môi trường, thời gian nuôi cấy, nhiệt độ, độ ẩm, nồng độ dinh dưỡng và tỷ lệ giống. Đề tài đã nghiên cứu sự tác động của các yếu tố môi trường nêu trên đầu tiên là ở mức độ riêng lẻ từng yếu tố, sau đó là sự tương tác qua lại của những yếu tố có ảnh hưởng mạnh đến sự tổng hợp enzyme. Kết quả thu được cho thấy với những môi trường có tỷ lệ Cám gạo: trấu: bã đậu nành (2:1:1), pH 5, thời gian nuôi cấy là 28 giờ, nhiệt độ 35 0 C, độ ẩm 55%, 2 lần nồng độ dinh dưỡng, tỷ lệ giống 0,8*10 8 bt/g là tối ưu cho Aspergillus niger sinh tổng hợp amylase. Khả năng tổng hợp enzyme amylase từ Mucor khi sinh trưởng trên môi trường bán rắn với cơ chất là cám gạo bổ sung thêm trấu và bã đậu nành chịu tác động của rất nhiều yếu tố môi trường như tỷ lệ cơ chất, pH môi trường, thời gian nuôi cấy, nhiệt độ, độ ẩm, nồng độ dinh dưỡng và tỷ lệ giống. Đề tài đã nghiên cứu sự tác động của các yếu tố môi trường nêu trên đầu tiên là ở mức độ riêng lẻ từng yếu tố, sau đó là sự tương tác qua lại của những yếu tố có ảnh hưởng mạnh đến sự tổng hợp enzyme. Kết quả thu được cho thấy với những môi trường có tỷ lệ Cám gạo: trấu: bã đậu nành (2:1:1), pH 5, thời gian nuôi cấy là 32 giờ, nhiệt độ 30 0 C, độ ẩm 55%, 3 lần nồng độ dinh dưỡng, tỷ lệ giống 1,6*10 8 bt/g là tối ưu cho Mucor sinh tổng hợp amylase. iv SUMMARY Enzyme amylase can be found in many living organisms. Nowadays, this is applied in many domains, such as agriculture, industry and medicine. The purpose of the survey is to find out Aspergillus niger and Mucor’s ability to produce enzyme amylase, and some factors can affect this ability. Finally, the survey has some following results The first, for Aspergillus niger, they are born and grow up on semi-solid environments including rice bran, rice rind, and soya residuum. Growing up and biosynthesized enzyme ability of A. niger depend on environment factors, such as ratio of rice bran to rice rind and to soya residuum, time, humidity, nutritious concentration, and ratio of spore. The survey finds out affect of environment factors in individual of each and compose of some factors, which have stronger affect. Results showed with environments have ratio of rice bran to rice rind and to soya residuum is 2:1:1; after 28 hours at 35 0 C with 55% humidity, double nutritious concentration and ratio of 0,8*10 8 spore to one g environment is the most suitable for Aspergillus niger to biosynthesize enzyme amylase on semi-solid fermatable environment. The second, for Mucor, they are born and grow up on semi-solid environments including rice bran, rice rind, and soya residuum. Growing up and biosynthesized enzyme ability of A. niger depend on environment factors, such as ratio of rice bran to rice rind and to soya residuum, time, humidity, nutritious concentration, and ratio of spore. The survey finds out affect of environment factors in individual of each and compose of some factors, which have stronger affect. Results showed with environments have ratio of rice bran to rice rind and to soya residuum is 2:1:1, after 32 hours at 30 0 C with 55% humidity, treble nutritious concentration and ratio of 1,6*10 8 spore to one g environment is the most suitable for Mucor to biosynthesize enzyme amylase on semi-solid fermatable environments. v MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN iii TÓM TẮT iv MỤC LỤC vi DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT xii Hình 2.1 Cấu trúc phân tử của amylose Error: Reference source not found xiii Đồ thị 4.14 Hoạt tính và hàm lượng theo các nồng độ giống của Mucor Error: Reference source not found xiv DANH SÁCH CÁC BẢNG xv Chương 1 1 MỞ ĐẦU 1 1.1. Đặt vấn đề 1 Chương 2 3 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 2.1. Giới thiệu sơ lược về enzyme 3 2.1.1. Khái niệm chung về enzyme 3 2.1.2. Tính chất ưu việt của enzyme 3 2.2. Tổng quan về enzyme amylase 4 2.2.1. Amylase 4 2.2.2. Phân loại 4 2.2.3. Đặc tính và cơ chế tác dụng của 3 loại amylase thông dụng 4 2.2.3.1. α-amylase 4 2.2.3.2. β-amylase 5 2.2.3.3. γ-amylase (hay gluoamylase hoặc α-1,4 glucan-glucanhydrolase) 6 2.2.4.1. Thực vật 6 2.2.4.2. Vi sinh vật 7 2.2.5. Ứng dụng 7 2.2.5.1. Ứng dụng trong công nghệ thực phẩm 7 2.2.5.2. Trong công nghiệp dệt, giấy 8 vi 2.2.5.3. Trong y học 8 2.2.5.4. Trong nông nghiệp 9 2.2.5.5. Trong công nghệ tẩy rửa 9 2.2.6. Cơ chất của enzyme amylase 9 2.2.6.1. Tinh bột 9 Tinh bột là một chất bột vô định hình, màu trắng, không tan trong nước lạnh nhưng khi đun nóng sẽ có khả năng tan trong nước. Tinh bột là carbonhydrate ở thực vật chủ yếu trong các loại củ như khoai mì, khoai tây, khoai lang , và là chất dự trữ năng lượng quan trọng. 9 Hình 2.1 Cấu trúc phân tử của amylose. (Wikipedia.com). 10 2.2.6.2. Glycogen 11 Hình 2.3 Cấu trúc phân tử glycogen. (Wikipedia.com). 11 2.3. Giới thiệu về nấm mốc Aspergillus niger và Mucor 12 2.3.1. Nấm mốc Aspergillus niger 12 2.3.2. Nấm mốc Mucor 13 2.4. Nuôi cấy vi sinh vật tổng hợp amylase 14 2.4.1. Sinh tổng hợp enzyme cảm ứng 14 2.4.2. Ảnh hưởng của các yếu tố dinh dưỡng đối với quá trình sinh tổng hợp enzyme amylase 14 2.4.2.1. Nguồn carbon 14 2.4.2.2. Nguồn Nitơ 14 2.4.2.3. Các nguyên tố khoáng 15 2.4.2.4. Nhiệt độ nuôi cấy 16 2.4.2.5. pH ban đầu 16 2.4.2.6. Độ ẩm 16 2.4.2.7. Môi trường không khí 16 2.5. Môi trường lên men bán rắn 17 2.5.1. Cám gạo 17 2.6. Phương pháp nuôi cấy vi sinh vật sản xuất enzyme 18 2.6.1. Phương pháp nuôi cấy bề mặt 18 2.6.2. Phương pháp nuôi cấy chìm 19 2.7.2. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình li trích 20 vii Chương 3 21 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 3.1. Thời gian và địa điểm thí nghiệm 21 3.2. Vật liệu thí nghiệm 21 3.2.1. Đối tượng thí nghiệm 21 3.2.2. Cơ chất 21 3.3. Phương pháp nghiên cứu 21 3.3.1. Phương pháp cấy truyền 21 3.3.2. Phương pháp nhân giống cấp 2 (giữ giống trên môi trường lúa) 22 3.3.3. Phương pháp mô tả hình thái A. niger và Mucor 23 3.3.3.1. Quan sát hình thái đại thể 23 3.3.4. Xác định trực tiếp số lượng bào tử nấm sợi bằng buồng đếm hồng cầu 23 3.3.6. Phương pháp lên men bán rắn để thu nhận enzyme amylase 25 3.3.7. Phương pháp xác định hàm lượng amylase 26 Phương pháp này dựa trên sự thay đổi bước sóng hấp thụ cực đại của thuốc thử Coomassie Brilliant Blue khi tạo phức với protein. Trong dung dịch mang tính acid, khi chưa kết hợp với protein thì thuốc nhuộm có bước sóng hấp thụ cực đại ở 465 nm, khi kết hợp với protein thì thuốc nhuộm hấp thụ cực đại ở bước sóng 595 nm. Độ hấp thụ ở bước sóng 595 nm có liên hệ một cách trực tiếp với nồng độ protein. Đặc biệt nếu có mặt các acid amin nhân thơm sẽ bắt màu mạnh hơn. Phương pháp này có độ nhạy cao cho phép phát hiện tới vài µg protein/ml, dễ thực hiện và tiết kiệm thời gian. 26 Bảng 3.1 Các bước tiến hành tạo dung dịch albumin chuẩn 27 3.3.8. Phương pháp xác định hoạt tính amylase 28 Enzyme amylase là enzyme thủy phân tinh bột. Nó phân cắt amylose và amylopectin của tinh bột thành các loại đường maltose, glucose,…Hoạt tính của enzyme amylase được xác định dựa trên sự thay đổi màu sắc của phức hợp tinh bột – iod trước và sau khi thủy phân. Mật độ quang của phức hợp tinh bột – iod sẽ được đo ở bước sóng 595 nm trên máy đo quang phổ. 28 Hóa chất cần thiết cho thí nghiệm này bao gồm dung dịch Lugol, dung dịch đệm Na- acetate 50 mM ở pH 5, dung dịch hồ tinh bột 1%. Dung dịch này được pha bằng cách viii cân 1 g tinh bột tan cho vào berche đựng 100 ml dung dịch đệm, đun cách thủy cho sôi trong 5 phút, khuấy đều cho tan. 28 3.3.9. Phương pháp quy hoạch thực nghiệm 29 3.3.10. Phương pháp bố trí và xử lí số liệu thí nghiệm 29 Chương 4 30 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 4.1. Khả năng sinh tổng hợp amylase của nấm mốc Aspergillus niger trên môi trường lên men bán rắn 30 4.1.1. Nấm mốc A .niger 30 Hình 4.1 Hình ảnh đại thể và vi thể của A. niger. (a)hình ảnh đại thể, (b) hình ảnh vi thể. 30 4.1.2. Ảnh hưởng của tỷ lệ cám gạo: bã đậu nành: trấu 30 Đồ thị 4.1 Biểu diễn hoạt tính amylase và hàm lượng protein từ canh trường nuôi cấy A. niger với các tỷ lệ cơ chất khác nhau. 31 4.1.3. Ảnh hưởng của pH 32 Đồ thị 4.2 Biểu diễn hoạt tính amylase và hàm lượng protein từ môi trường nuôi cấy A. niger với các pH môi trường ban đầu khác nhau. 33 4.1.4. Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy 34 Đồ thị 4.3 Biểu diễn hoạt tính enzyme và hàm lượng protein từ canh trường nuôi cấy A. niger với các mốc thời gian thu nhận khác nhau. 34 4.1.5. Ảnh hưởng của nhiệt độ 35 th 4.4 Bi u di n ho t tính amylase và hàm l ng protein t canh tr ng nuôiĐồ ị ể ễ ạ ượ ừ ườ c y A. niger v i các nhi t đ nuôi c y khác nhau.ấ ớ ệ ộ ấ 36 4.1.6. Ảnh hưởng của độ ẩm ban đầu 37 Đồ thị 4.5 Biểu diễn hoạt tính amylase và hàm lượng protein từ canh trường nuôi cấy A. niger với các độ ẩm môi trường ban đầu khác nhau. 37 4.1.7. Ảnh hưởng của nồng độ dinh dưỡng 38 4.1.8. Ảnh hưởng của tỷ lệ giống 39 4.2. Khả năng sinh tổng hợp amylase của nấm mốc Mucor trên môi trường lên men bán rắn 41 4.2.1. Nấm mốc Mucor 41 Hình 4.2 Hình ảnh đại thể của Mucor. (a)hình ảnh đại thể, (b) hình ảnh vi thể. 42 ix Hình ảnh vi thể quan sát được cho thấy Mucor có cuống bào tử phân nhánh và mọc lên ở bất kì chỗ nào của sợi nấm, bào tử đính nằm trong bọc bào tử. Bọc bào tử dạng tròn hoặc hình quả lê, chứa nhiều bào tử ở phía trong. 42 4.2.2. Ảnh hưởng của tỷ lệ cám gạo: bã đậu nành: trấu 42 4.2.3. Ảnh hưởng của pH 43 Đồ thị 4.9 Biểu diễn hoạt tính amylase và hàm lượng protein từ canh trường nuôi cấy Mucor với các pH môi trường khác nhau. 44 4.2.5. Ảnh hưởng của nhiệt độ 47 Đồ thị 4.11 Biểu diễn hoạt tính amylase và hàm lượng protein từ canh trường nuôi cấy Mucor với các nhiệt độ nuôi cấy khác nhau. 47 4.2.6. Ảnh hưởng của độ ẩm ban đầu 48 4.2.7. Ảnh hưởng của nồng độ dinh dưỡng 49 Đồ thị 4.13 Biểu diễn hoạt tính amylse và hàm lượng protein từ canh trường nuôi cấy Mucor với các nồng độ dinh dưỡng trong môi trường khác nhau. 50 Nồng độ dinh dưỡng X3 là thích hợp nhất cho sự tổng hợp enzyme amylase. Ở nồng độ dinh dưỡng này, hàm lượng protein và hoạt tính amylase thu được đều cao nhất (43,391 mg và 488,279 UI/g CT). Sau đó thì hàm lượng và hoạt tính đều giảm dần, có thể là do nông độ thẩm thấu của môi trường ảnh hưởng lên Mucor. 50 4.2.8. Ảnh hưởng của tỷ lệ giống 51 4.3. Qui hoạch thực nghiệm 53 4.3.1. Xác định giá trị tối ưu của một số yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp amylase của A. niger và Mucor 53 4.3.1.2. Xác định giá trị tối ưu của một số yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp amylase của Mucor 58 Bảng 4.4 Mã hóa các biến số các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp amylase của Mucor 58 Bảng 4.5 Ma trận kế hoạch hóa đối với TĐY-24 58 Bảng 4.6 Hoạt lực amylase của Mucor theo thực nghiệm và theo phương trình hồi qui 59 Vì t13, t124 và t1234 đều nhỏ hơn 4,3 (t(0,05;2)) nên b13, b124 và b1234 bị loại ra khỏi phương trình hồi qui do không có ý nghĩa. 61 Chương 5 63 x [...]... 1.2 Yêu cầu - Xác định các giá trị tối ưu của các yếu tố môi trường ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp enzyme amylase của hai chủng thí nghiệm - Xác định mối tương quan giữa các yếu tố môi trường có tác động mạnh đến khả năng tổng hợp amylase của hai chủng thí nghiệm 1.3 Nội dung - Khảo sát khả năng tổng hợp amylase của hai chủng thí nghiệm - Khảo sát sự ảnh hưởng của các yếu tố như tỷ lệ cơ chất,... tôi chọn đề tài “Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp enzyme amylase từ nấm mốc Aspergillus niger và Mucor trên môi trường lên men bán rắn nhằm xây dựng điều kiện môi trường tối ưu cho hai chủng nghiên cứu tạo enzyme nhiều và có hoạt tính cao cũng như điều kiện để thu nhận enzyme tốt nhất Đề tài đã được thực hiện tại phòng các chất có hoạt tính sinh học - viện Sinh Học Nhiệt Đới,... và tổng hợp các enzyme amylase của vi sinh vật Và các nguyên tố khoáng này cần được bổ sung vào môi trường theo tỷ lệ thích hợp để kích thích sự sinh tổng hợp amylase Nếu môi trường thiếu hoặc thừa khoáng đều có ảnh hưởng đến sự tạo enzyme của các vi sinh vật Mg2+ có ảnh hưởng đến độ bền nhiệt Thiếu MgSO 4 sẽ có ảnh hưởng xấu đến sự tổng hợp enzyme amylase của nấm sợi Khi đó sự tổng hợp α -amylase sẽ... vật dựa trên sự chuyển hoá của hàng loạt các phản ứng dựa theo những trình tự xác định Khi nhiệt độ tăng sẽ ảnh hưởng đến quá trình sinh trưởng và phát triển của vi sinh vật vì thế nó có ảnh hưởng đến sự sinh tổng hợp enzyme của chúng 2.4.2.5 pH ban đầu pH của môi trường cũng có ảnh hưởng rất lớn đến sự phát triển và khả năng sinh tổng hợp amylase từ vi sinh vật pH của môi trường có những ảnh hưởng rất... ứng gọi là enzyme cảm ứng Amylase cũng là một enzyme thuộc hệ enzyme cảm ứng Enzym amylase chỉ được sinh ra khi nấm mốc sinh trưởng trên môi trường có chứa tinh bột 2.4.2 Ảnh hưởng của các yếu tố dinh dưỡng đối với quá trình sinh tổng hợp enzyme amylase 2.4.2.1 Nguồn carbon Để vi sinh vật tổng hợp enzyme amylase, trong môi trường nhất thiết phải có chất cảm ứng là tinh bột Tinh bột trong môi trường có... pháp lên men bán rắn, vi sinh vật phát triển trên bề mặt môi trường, nhận chất dinh dưỡng từ hạt môi trường, rồi sinh tổng hợp ra enzyme ngoại bào và nội bào Các enzyme ngoại bào sẽ thẩm thấu vào trong các hạt môi trường, còn enzyme nội bào sẽ nằm trong sinh khối vi sinh vật Phương pháp này có ưu điểm là hàm lượng và hoạt tính enzyme cao, chế phẩm dễ sấy khô, ít bị giảm hoạt tính, dễ vận chuyển và sử... nguyên tố vi lượng cũng có ảnh hưởng đến sự sinh tổng hợp enzyme amylase như coban, mangan, đồng, thủy ngân, vân vân Chúng có thể có khả năng kích thích tạo amylase như coban, Ca, nitơ, hoặc cũng có thể có tác dụng kìm hãm sự tổng hợp enzyme này như thủy ngân 2.4.2.4 Nhiệt độ nuôi cấy Nhiệt độ là yếu tố có ảnh hưởng mạnh mẽ đến sự phát triển và tổng hợp enzyme của vi sinh vật Hoạt động của các loài vi sinh. .. nấm sợi này sinh trưởng ở nhiệt độ tối thiểu là 6 - 8oC, tối đa là 45 - 470C, tối ưu là 30 - 370C, sinh trưởng trong môi trường có độ ẩm tối thiểu là 23% Độ ẩm môi trường thích hợp để lên men bán rắn là 50 - 65%, chỉ sinh trưởng và phát triển trong sự có mặt của O2 và pH tối ưu từ 4 - 6,5 A niger là nấm sợi chịu khô, bào tử đính có thể nảy mầm trong điều kiện môi trường có thế nước 0,77 ở 35 0C A niger. .. vi sinh vật sản xuất enzyme Hiện nay trên thế giới chủ yếu áp dụng hai phương pháp sản xuất enzyme là nuôi cấy bề mặt (lên men bán rắn) và nuôi cấy chìm 2.6.1 Phương pháp nuôi cấy bề mặt Là phương pháp nuôi cấy mà vi sinh vật sẽ mọc trên bề mặt môi trường Trong nuôi cấy bề mặt vi sinh vật sẽ được nuôi cấy trên môi trường lỏng hoặc môi trường đặc (còn gọi là môi trường len men bán rắn) , nhưng chủ yếu. .. cấy, pH môi trường ban đầu, nồng độ dinh dưỡng, và tỷ lệ giống đến khả năng sinh tổng hợp amylase của hai chủng thí nghiệm - Tối ưu hóa các yếu tố trên bằng phương pháp quy hoạch thực nghiệm nhằm tìm ra điều kiện nuôi cấy và thành phần môi trường tối ưu cho hai chủng trên sinh ra lượng amylase cao 2 Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu sơ lược về enzyme 2.1.1 Khái niệm chung về enzyme Enzyme là . được. Trên cơ sở đó, chúng tôi chọn đề tài “Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp enzyme amylase từ nấm mốc Aspergillus niger và Mucor trên môi trường lên men bán rắn . amylase của A. niger và Mucor 53 4.3.1.2. Xác định giá trị tối ưu của một số yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp amylase của Mucor 58 Bảng 4.4 Mã hóa các biến số các yếu tố ảnh hưởng. Aspergillus niger và Mucor và những yếu tố tác động đến khả năng tạo amylase của chúng. Đề tài đã thu được một số kết quả về sự tác động của các yếu tố môi trường đến khả năng sinh tổng hợp enzyme amylase