ngng ĐẠI HỌC THÁI NGUN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐẶNG THỊ TRANG NHUNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC THÂN CÂY NGŨ VỊ VẢY CHỒI (SCHISANDRA PERULATA GAGNEP.), HỌ SCHISANDRACEAE Ở SA PA - LÀO CAI LUẬN VĂN THẠC SĨ HỐ HỌC Thái Ngun - 2013 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ ĐẠI HỌC THÁI NGUN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐẶNG THỊ TRANG NHUNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC THÂN CÂY NGŨ VỊ VẢY CHỒI (SCHISANDRA PERULATA GAGNEP.), HỌ SCHISANDRACEAE Ở SA PA - LÀO CAI Chun ngành: Hố học Hữu cơ Mã số : 60440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ HỐ HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS. NGUYỄN QUYẾT TIẾN Thái Ngun - 2013 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ LỜI CẢM ƠN Bản luận văn này được hồn thành tại phòng Hoạt chất Sinh học, Viện Hóa học - Viện Hàn lâm Khoa học và Cơng nghệ Việt Nam. Tơi xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc của mình tới TS. Nguyễn Quyết Tiến, TS. Phạm Thị Hồng Minh, PGS.TS Phạm Văn Thỉnh những người thầy đã chỉ ra hướng nghiên cứu, hướng dẫn tận tình, động viên và giúp đỡ từng bước đi của tơi trong q trình nghiên cứu thực hiện luận văn. Xin chân thành cảm ơn Phòng Hoạt chất Sinh học, Phòng Nghiên cứu Cấu trúc phân tử -Viện Hóa học đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành các kế hoạch nghiên cứu. Nhân dịp này, tơi cũng xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Ban Lãnh đạo Khoa Hóa, Khoa Sau đại học - Trường Đại học Sư phạm Thái Ngun đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành bản luận văn này. Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Bố, Mẹ tơi, những người thân trong gia đình và các đồng nghiệp đã giúp đỡ, động viên tơi rất nhiều trong q trình thực hiện luận văn. Thái Ngun, tháng 04 năm 2013 Tác giả Đặng Thị Trang Nhung Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan đây là cơng trình nghiên cứu của riêng tơi, các số liệu, kết quả nêu trong luận văn này là trung thực và chưa từng được ai cơng bố trong bất kỳ cơng trình nào khác. Tác giả Đặng Thị Trang Nhung Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ i MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn Lời cam đoan Mục lục i Danh mục các kí hiệu, các chữ viết tắt ii Danh mục các bảng iii Danh mục các hình iv Danh mục các sơ đồ v Danh mục các phụ lục vi MỞ ĐẦU 1 Chương 1. TỔNG QUAN 2 1.1. Khái qt về các thực vật chi Schisandra 2 1.2. Thành phần hóa học các lồi thuộc chi Schisandra 3 1.2.1. Các hợp chất lignan 3 1.2.1.1. Các hợp chất cyclolignan 3 1.2.1.2. Các hợp chất epoxylignan 8 1.2.2. Các hợp chất tecpenoit 11 1.2.2.1. Các hợp chất tritecpen lacton 12 1.2.2.2. Các hợp chất tritecpen khung lanostan 21 1.3. Hoạt tính sinh học của các hợp chất tritecpenoit và lignan 23 1.3.1. Hoạt tính sinh học của các hợp chất tritecpenoit 23 1.3.2. Hoạt tính sinh học của các hợp chất lignan 27 Chương 2 THỰC NGHIỆM 31 2.1. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu 31 2.1.1. Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu 31 2.1.2. Phương pháp ngâm chiết và phân lập các hợp chất từ dịch chiết 31 2.1.3. Phương pháp xác định cấu trúc hố học các chất phân lập được 32 2.2. Dụng cụ, hóa chất và thiết bị nghiên cứu 32 2.2.1. Dụng cụ, hóa chất 32 2.2.2. Thiết bị nghiên cứu 33 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 2.3. Thu nhận các dịch chiết từ cây Ngũ vị vảy chồi 34 2.3.1. Thu nhận các dịch chiết 34 2.3.2. Khảo sát định tính các dịch chiết 35 2.3.2.1. Phát hiện các hợp chất sterol 35 2.3.2.2. Phát hiện các ancaloit 36 2.3.2.3. Phát hiện các flavonoit 36 2.3.2.4. Phát hiện các cumarin 36 2.3.2.5. Định tính các glucosit tim 37 2.3.2.6. Định tính các saponin 37 2.3.2.7. Định tính các tanin 37 2.4. Phân lập và tinh chế các chất 38 2.4.1. Cặn dịch chiết n-hexan của cây Ngũ vị tử vảy chồi (SPH) 38 2.4.1.1. Hợp chất β-sitosterol (SPH1) 39 2.4.1.2. Hợp chất (7S,8R,8’R,7’R) -3,4,3’,4’-dimethylene dioxy-7,7’- epoxylignan (SPH2) 39 2.4.1.3. Hợp chất 3,4-dimetoxy-3’,4’- metylendioxi-7,7’-epoxi-lignan (SPH3) 40 2.4.1.4. Hợp chất 2,3-dihydroxypropyl hexacosanoat (SPH4) 40 2.4.2. Cặn dịch chiết diclometan của cây Ngũ vị vảy chồi (SPD) 41 2.4.2.1. Hợp chất axit meso-dihydroguaiaretic (SPD1) 41 2.4.2.2. Hợp chất 2,3-dihydroxypropyl 28-hydroxyoctacosanoat (SPD2) 41 2.4.3. Cặn dịch chiết etyl axetat của cây Ngũ vị vảy chồi (SPE) 42 2.4.3.1. Hợp chất β-sitosterol 3-O-β-D-glucopyranosit (SPE1) 42 2.4.3.2. Hợp chất 3,5,7,3’,4’-pentahydroxy-flavan (SPE2) 43 Chương 3 THẢO LUẬN KẾT QUẢ 44 3.1. Ngun tắc chung 44 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 3.2. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong các dịch chiết khác nhau của cây Ngũ vị vảy chồi 44 3.2.1. Các hợp chất sterol 45 3.2.1.1. Hợp chất β-sitosterol (SPH1) 45 3.2.1.2. Hợp chất β-sitosterol 3-O-β-D-glucopyranosit (SPE1) 45 3.2.2. Các hợp chất lignan 47 3.2.2.1. Hợp chất (7S,8R,8’R,7’R) -3,4,3’,4’-dimethylene dioxy-7,7’- epoxylignan (SPH2) 47 3.2.2.2. Hợp chất 3,4-dimetoxy-3’,4’-metylendioxi -7,7’-epoxi- lignan (SPH3) 56 3.2.2.3. Hợp chất axit meso-dihydroguaiaretic (SPD1) 63 3.2.3. Các hợp chất glycerit 71 3.2.3.1. Hợp chất 2,3-dihydroxypropyl 28-hydroxyoctacosanoat (SPD2) 71 3.2.3.2. Hợp chất 2,3-dihydroxypropyl hexacosanoat (SPH4) 78 3.2.4. Hợp chất flavonoit 82 KẾT LUẬN 90 CÁC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC ĐÃ CƠNG BỐ 91 TÀI LIỆU THAM KHẢO 92 PHỤ LỤC PL1 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN  Các phương pháp sắc ký CC : Column Chromatography GC : Gas Chromatography SKLM : Sắc ký lớp mỏng  Các phương pháp phổ ESI-MS : Electrospray Ionization Mass Spectroscopy FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy NMR : Nuclear Magnetic Resonance 1 H-NMR : 1 H-Nuclear Magnetic Resonance 13 C-NMR : 13 C- Nuclear Magnetic Resonance DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HMQC : Heteronuclear Multiple - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear Multiple - Bond Correlation Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ iii DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1. Danh sách một số lồi thực vật chi Ngũ vị tử 2 Bảng 2.1. Khối lượng các cặn chiết thu được từ cây Schisandra perulata 35 Bảng 2.2. Kết quả định tính các nhóm chất trong cây Schisandra perulata 38 Bảng 3.1. Độ dịch chuyển hóa học 13 C NMR của SPH1 và SPE1 46 Bảng 3.2. Các số liệu NMR và các tương tác xa trong SPH2 49 Bảng 3.3. Các số liệu NMR và các tương tác xa trong SPH3 57 Bảng 3.4. Các số liệu NMR và các tương tác xa trong SPD1 64 Bảng 3.5 . Số liệu phổ NMR và các tương tác xa của SPD2 72 Bảng 3.6 . Số liệu phổ NMR và các tương tác xa của SPE2 83 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ iv DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1. Cây Ngũ vị vảy chồi 31 Hình 2.2. Quả Ngũ vị vảy chồi 31 Hình 3.2. Cấu trúc hóa học của SPH2 49 Hình 3.2.1. Phổ FT–ICR–MS của SPH2 50 Hình 3.2.2. Phổ 1 H–NMR của SPH2 51 Hình 3.2.3. Phổ 13 C–NMR của SPH2 52 Hình 3.2.4. Phổ 13 C–DEPT của SPH2 53 Hình 3.2.5. Phổ HSQC của SPH2 54 Hình 3.2.6. Phổ HMBC của SPH2 55 Hình 3.3. Cấu trúc hóa học của SPH3 57 Hình 3.3.1. Phổ 1 H–NMR của SPH3 58 Hình 3.3.2. Phổ 13 C–NMR của SPH3 59 Hình 3.3.3. Phổ 13 C–DEPT của SPH3 60 Hình 3.3.4. Phổ HSQC của SPH3 61 Hình 3.3.5. Phổ HMBC của SPH3 62 Hình 3.4. Cấu trúc hóa học của SPD1 63 Hình 3.4.1. Phổ LC–ESI–MS của SPD1 65 Hình 3.4.2. Phổ 1 H–NMR của SPD1 66 Hình 3.4.3. Phổ 13 C–NMR của SPD1 67 Hình 3.4.4. Phổ 13 C–DEPT của SPD1 68 Hình 3.4.5. Phổ HSQC của SPD1 69 Hình 3.4.6. Phổ HMBC của SPD1 70 Hình 3.5. Cấu trúc hóa học của SPD2 71 Hình 3.5.1. Phổ 1 H–NMR của SPD2 73 Hình 3.5.2. Phổ 13 C–NMR của SPD2 74 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ [...]... hóa, những kết quả này rất có giá trị trong việc sử dụng cây thuốc cổ truyền của Trung Quốc [15] Về thành phần hóa học của cây Schisandra perulata cho biết sự có mặt của các hợp chất lignan cùng với tritecpenoit và một số hợp chất khác [44] Do vậy, chúng tơi đã chọn đề tài với tên: Nghiên cứu thành phần hố học thân cây Ngũ vị vảy chồi (Schisandra perulata Gagnep.), họ Schisandraceae ở Sapa - Lào Cai ... tượng nghiên cứu để tìm hiểu thành phần hóa học với mục đích tìm ra những hợp chất có hoạt tính sinh học làm sáng tỏ việc sử dụng cây này trong dân gian, đưa ra hướng bảo tồn và sử dụng hiệu quả cây dược liệu q này Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 2 Chương 1 TỔNG QUAN CÁC THỰC VẬT CHI NGŨ VỊ TỬ (SCHISANDRA) VÀ THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA CHÚNG 1.1 Khái qt về các thực vật chi Schisandra Cây. .. vị vảy chồi có tên khoa học Schisandra perulata Gagnep được sử dụng làm thuốc bổ [45] Hiện nay, ở Việt Nam chưa có cơng trình cơng bố nào về thành phần hóa học của cây này cũng như việc sử dụng nó trong y học Ở Trung Quốc người ta thường hay sử dụng cây Schisandra perulata chữa bệnh gan, mật Mới đây các nhà khoa học Trung Quốc đã nghiên cứu về tác dụng dược lý dịch chiết từ cây này cho thấy nó có tác... Ngũ vị vảy chồi với danh pháp khoa học là Schisandra perulata Gagnep., chi Ngũ vị tử (Schisandra) , họ Ngũ vị (Schisandraceae), bộ Hồi (Illiciales), lớp Hai lá mầm (Magnoliopsida), ngành Thực vật hạt kín (Magnoliophyta), giới Thực vật (Plantae) Hiện nay, chi Ngũ vị tử (Schisandra) có khoảng 25 lồi [72] Cây thường mọc trên sườn núi hoặc dọc theo bờ sơng tại một số nơi ở Việt Nam từ Cao Bằng, Lào Cai, ... Schisandra bicolor 16 Schisandra pubescens 4 Schisandra chinensis 17 Schisandra plena 5 Schisandra elongata 18 Schisandra randiflora 6 Schisandra glabra 19 Schisandra repanda 7 Schisandra glaucescens 20 Schisandra rubriflora 8 Schisandra gracilis 21 Schisandra sphaerandra 9 Schisandra henryi 22 Schisandra sphenanthera 10 Schisandra incarnata 23 Schisandra tomentella 11 Schisandra lancifolia 24 Schisandra... Schisandra viridis 12 Schisandra micrantha 25 Schisandra wilsoniana 13 Schisandra neglecta Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 3 Cây Ngũ vị vảy chồi là thực vật dây leo cao, có thể mọc dài tới 6-7m; chồi có 3-4 vảy cao bao lấy Lá ở nhánh ngắn, có phiến bánh bò hay xoan, hai đầu nhọn, to 10-15 x 5-9 cm, khơng long, gân- phụ 6-8 cặp; cuống đến 5cm Hoa 1-2 ở nách các vảy của chồi, cọng 2-6 cm;... tổng hợp hóa dược, hoặc cấu trúc của chúng được sử dụng như các chất dẫn đường để tìm kiếm các dẫn xuất mới, có hoạt tính cao phục vụ việc phát triển thuốc chữa bệnh Trong đó, các lồi thực vật chi Ngũ vị tử (Schisandra) trong họ Ngũ vị (Schisandraceae) ở Việt Nam nói chung còn ít được nghiên cứu Phần lớn các lồi thực vật ở chi này hầu hết đều là nguồn ngun liệu làm thuốc có giá trị Cây Ngũ vị vảy chồi. .. Ngũ vị tử còn được dùng trong những lĩnh vực khác như bảo vệ gan, tác dụng lên hệ thần kinh, chữa bệnh đường hơ hấp, đường tiêu hóa, …[17] 1.2 Thành phần hóa học các lồi thuộc chi Schisandra Cho đến nay đã có khoảng 25 lồi thực vật chi Schisandra được nghiên cứu hố thực vật [72], đã phân lập và nhận dạng được nhiều chất, thuộc các nhóm chất khác nhau Thành phần hóa học chính của các lồi chi Ngũ vị tử... 3.7.3 Phổ 13C–DEPT của SPE2 87 Hình 3.7.4 Phổ HSQC của SPE2 88 Hình 3.7.5 Phổ HMBC của SPE2 89 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ v DANH MỤC SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1 Ngâm chiết mẫu cây Ngũ vị vảy chồi (Schisandra perulata) 34 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ vi DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC Trang Phụ lục 1 Các phổ của SPH1 .PL1 Phụ lục 1.1 Phổ... phân bố ở Ấn Độ, Trung Quốc, Hoa Kỳ, Nhật Bản, Hàn Quốc, [31] Quả khơ của chúng được dùng trong y học [16] Chi Schisandra được gọi là Ngũ vị tử vì quả của nó có đủ năm vị cơ bản: mặn, ngọt, chua, cay, đắng; nghĩa là "quả tạo ra năm vị" Bảng 1.1 Danh sách một số lồi thực vật chi Ngũ vị tử STT Tên lồi STT Tên lồi 1 Schisandra arisanensis 14 Schisandra perulata 2 Schisandra axillaries 15 Schisandra propinqua . chọn đề tài với tên: Nghiên cứu thành phần hố học thân cây Ngũ vị vảy chồi (Schisandra perulata Gagnep. ), họ Schisandraceae ở Sapa - Lào Cai làm đối tượng nghiên cứu để tìm hiểu thành phần. TRANG NHUNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC THÂN CÂY NGŨ VỊ VẢY CHỒI (SCHISANDRA PERULATA GAGNEP. ), HỌ SCHISANDRACEAE Ở SA PA - LÀO CAI Chun ngành: Hố học Hữu cơ Mã số :. ĐẠI HỌC THÁI NGUN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐẶNG THỊ TRANG NHUNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC THÂN CÂY NGŨ VỊ VẢY CHỒI (SCHISANDRA PERULATA GAGNEP. ), HỌ SCHISANDRACEAE