ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN  ĐỖ THỊ MỸ LIÊN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA BA LOÀI THUỘC CHI BOERHAAVIA, HỌ BÔNG PHẤN (NYCTAGINACEAE) Chuyên ngành: Hóa hữu cơ Mã số: 62 44 27 01 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Thành phố Hồ Chí Minh, 2014 Công trình được hoàn thành tại: Trường Đại học Khoa học Tự nhiên TpHCM Người hướng dẫn khoa học: GS. TS. NGUYỄN KIM PHI PHỤNG GS. TS DOMINIQUE GUILLAUME Phản biện 1: PGS. TS. Trần Hùng Phản biện 2: PGS. TS. Phạm Đình Hùng Phản biện 3: PGS. TS. Trần Công Luận Phản biện độc lập 1: PGS. TS. Trần Công Luận Phản biện độc lập 2: TS. Đào Thanh Sơn Luận án sẽ được bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án họp tại Trường Đại học Khoa học Tự nhiên TpHCM vào lúc 9 giờ ngày 19 tháng 6 năm 2014 Có thể tìm hiểu luận án tại thư viện: - Thư viện khoa học tổng hợp TpHCM - Thư viện Trường Đại học Khoa học Tự nhiên TpHCM. 1 MỞ ĐẦU Việt Nam là nước nhiệt đới, có nguồn thực vật phong phú và đa dạng, còn nhiều loài cây mà thế giới chưa biết đến. Một trong ba loài cây thuộc chi Boerhaavia (Nyctaginaceae) lựa chọn nghiên cứu trong luận án là loài chưa được tác giả nào khảo sát về thành phần hoá học, dược tính trên thế giới cũng như ở Việt Nam. Trong khi đó, có loài cây cùng chi với chúng như cây Nam sâm bò Boerhaavia diffusa L. đã được sử dụng trong dân gian để chữa thấp khớp, bệnh lậu, bệnh về gan, thận, tiểu đường, có khả năng làm trấn tĩnh thần kinh, giảm stress, tăng khả năng đề kháng; các hợp chất rotenoid trong cây có hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư vú. Nội dung chính được thực hiện trong luận án này là khảo sát thành phần hóa học của ba loài cây: Nam sâm bò Boerhaavia diffusa L., Nam sâm bò đỏ Boerhaavia diffusa var sub và Nam sâm đứng Boerhaavia erecta L. Qua tìm kiếm thông tin trên Sciencedirect.com và nhất là bằng phần mềm Scifinder, chúng tôi nhận thấy trên thế giới, đã có một số nghiên cứu trên loài Nam sâm bò B. diffusa L., về cây Nam sâm đứng B. erecta L. chỉ có 01 tài liệu khảo sát về thành phần hoá học bằng HPLC kết hợp với MS và chưa thấy có tài liệu nào về cây B. diffusa var sub. Với tinh thần mong mong muốn góp phần tìm hiểu mối liên hệ giữa thành phần hóa học và dược tính của 03 cây thuộc chi Boerhaavia, chúng tôi tiến hành nghiên cứu ly trích các hoạt chất từ ba cây B. diffusa, B. diffusa var sub và B. erecta và khảo sát khả năng ức chế enzyme acetylcholinesrteraseae cũng như hoạt tính sinh học ức chế các dòng tế bào ung thư của các cao trích và các hợp chất cô lập được. Kết quả đạt được của luận án sẽ góp phần làm sáng tỏ hóa – thực vật của chi Boerhaavia. Bên cạnh đó, những thử nghiệm hoạt tính sinh học cũng được thực hiện trên các hợp chất tinh khiết cô lập được, góp phần nâng cao giá trị ứng dụng của luận án. Chúng tôi chọn thử nghiệm hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase và hoạt tính gây độc trên ba dòng tế 2 bào ung thư vú (MCF–7), ung thư cổ tử cung (HeLa), ung thư phổi (NCI-H 460) vì những thử nghiệm này có thể thực hiện tại Việt Nam. ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN Trong phần cô lập các hợp chất tinh khiết từ ba loài thuộc chi Boerhaavia, chúng tôi đã cô lập được 55 hợp chất, trong đó có 16 hợp chất mới. Kết quả thử hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesrteraseae cho thấy các cao trích và các hợp chất tinh khiết của ba loài này có hoạt tính yếu hoặc không có hoạt tính. Kết quả sang lọc thử hoạt tính sinh học ức chế các dòng tế bào ung thư cho thấy các hợp chất rotenoid có hoạt tính mạnh trên dòng tế bào ung thư vú (MCF-7) và ung thư cổ tử cung (HeLa). BỐ CỤC CỦA LUẬN ÁN Luận án gồm 254 trang, với phần nội dung chính 137 trang được phân ra thành các phần như sau: Chương 1: Tổng quan (14 trang), Chương 2: Thực nghiệm (15 trang), Chương 3: Kết quả và bàn luận (89 trang), Kết luận và kiến nghị (6 trang), Tài liệu tham khảo (11 trang, với 84 tài liệu tham khảo). Riêng phần Phụ lục có 117 trang gồm 234 các phổ về 1D và 2DNMR, phổ MS. Toàn bộ luận án có 25 bảng, 7 hình ảnh và 3 sơ đồ. Danh mục công trình với một quyển riêng, gồm 02 bài báo đã đăng trong tạp chí quốc tế (Chemical Pharmaceutical Bulletin và Phytochemistry Letters), 02 bài báo đăng trong tạp chí chuyên ngành trong nước (Tạp chí Hoá học và Tạp chí Phát Triển Khoa Học và Công Nghệ), 01 bài báo đăng trong Hội nghị chuyên ngành hoá học. NỘI DUNG CỦA LUẬN ÁN CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN Tổng hợp các tài liệu nghiên cứu về trước của các tác giả trong và ngoài nước, trên các nội dung: mô tả thực vật, những nghiên cứu về dược học và những nghiên cứu về hóa học. Các tài liệu tham khảo cho thấy trên thế giới, chi Boerhaavia có 40 loài, nhưng chỉ có 4 loài được khảo sát về dược tính và hoá học và trong số này, 3 loài Boerhaavia diffusa L. được khảo sát nhiều nhất. Loài này được sử dụng trong dân gian để chữa các bệnh về gan, thận, tiểu đường, làm trấn tĩnh thần kinh, giảm stress, tăng khả năng đề kháng, chữa ung thư. Các nghiên cứu cho biết các hợp chất rotenoid trong cây có hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư CHƯƠNG 2. THỰC NGHIỆM Chương 2 liệt kê các hóa chất và thiết bị thí nghiệm, cùng với cơ quan đo phổ nghiệm cũng như thực hiện các thử nghiệm hoạt tính sinh học. 2.1 Trích ly và cô lập các hợp chất 2.1.1 Điều chế các loại cao Rễ cây nam sâm bò thân-lá xanh B. diffusa L. và cây nam sâm bò thân lá đỏ được thu hái ở ven bờ biển Phú Hải, Mũi Né, thành phố Phan Thiết, tỉnh Bình Thuận và được định danh bởi TS. Võ Văn Chi. Phần bộ phận trên mặt đất của cây nam sâm đứng Boerhaavia erecta L. được thu hái ở phường Linh Trung, Quận Thủ Đức, TP. HCM và được định danh bởi Cố DS. Phan Đức Bình. Mẫu tiêu bản được lưu trữ tại Bộ môn Hoá hữu cơ, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên, ký hiệu mẫu US-A001, US-A003 và US-A002. Mẫu được sấy khô, cắt nhỏ, xay nhuyễn và trích bằng phương pháp ngâm dầm ở nhiệt độ phòng, dung dịch được lọc qua giấy lọc và thu hồi dung môi ở áp suất thấp, có được cao thô metanol. Phần cao thô methanol tiếp tục được hòa tan vào nước sau đó được chiết lỏng–lỏng lần lượt với các dung môi có độ phân cực tăng dần, đuổi dung môi dưới áp suất thấp môi thu được các cao tương ứng. 2.1.2 Trích ly, cô lập các hợp chất từ ba loài thuộc chi Boerhaavia Việc trích ly và cô lập được thực hiện bằng sắc ký cột cổ điển với silica gel pha thường hoặc pha đảo RP-18 kết hợp với sắc ký bản mỏng. Sử dụng kỹ thuật kết tinh để tinh chế các hợp chất. 4 2.2 Thử nghiệm hoạt tính sinh học 2.2.1 Thử nghiệm hoạt tính ức chế acetylcholinesterase in vitro Khảo sát tác động ức chế enzyme acetylcholinesterase in vitro của các cao chiết cũng như các hợp chất cô lập được thực hiện theo phương pháp Ellman, 1961. Mẫu được gửi thử nghiệm tại Bộ môn Dược lý- Dược lâm sàng. Khoa Dược. Trường Đại học Y Dược TP. Hồ Chí Minh. 41 đường Đinh Tiên Hoàng. Quận 1, TP. Hồ Chí Minh. Qui trình thử nghiệm dựa theo tài liệu của Ellman. Cơ sở khoa học của phương pháp Ellman: Sử dụng đĩa 96 giếng, đo độ hấp thu bằng máy Elisa Multiskan Ascent. Để khảo sát hoạt tính ức chế acetylcholinesterase, 5,5’-dithio-bis(2-nitrobenzoic) acid (thuốc thử Ellman) được sử dụng làm chất nền và bị enzyme acetylcholinesterase thủy Hình 2.4. Sắc ký đồ HPLC cao metanol bộ phận trên mặt đất của loài thân-lá đỏ (a) và của loài thân-lá xanh (b) của B. diffusa. Hình 2.1. Cây nam sâm bò thân lá xanh Hình 2.2: Cây nam sâm bò thân lá đỏ Hình 2.3: Cây nam sâm đứng (b) (a) 34 35 5 phân tạo thành 2-nitrobenzoate-5-mecaptothiocholine and 5-thio-2- nitrobenzoate tạo màu vàng, sau đó đo màu ở bước sóng 412 nm. Phương pháp này có ưu điểm: đơn giản, chính xác, nhanh, thích hợp cho phân tích tự động, thực hiện được trên nhiều mẫu thử. Qui trình thực hiện: Các giếng sau khi cho các hoá chất cần thiết vào, được ủ 15’, rồi tiến hành đo ở bước sóng 412 nm liên tục trong 10 lần, mỗi lần 16 giây. Mỗi thí nghiệm được lặp lại 3 lần. 2.2.2 Thử nghiệm hoạt tính ức chế in vitro trên ba dòng tế bào ung thư người trên các hợp chất cô lập từ ba loài cây khảo sát Hoạt tính gây độc tế bào kháng lại 3 dòng tế bào ung thư (Hela, MCF-7 và NCI-H460) của các mẫu là các hợp chất tinh sạch được thực hiện ở nồng độ 100  g/mL, sử dụng chất nhuộm Sulforhodamine B (SRB) và chất chứng dương là camptothecin. Mẫu được gửi thử nghiệm tại Bộ môn Di truyền. Khoa Sinh. Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên. 227 đường Nguyễn Văn Cừ. Quận 5, TP. Hồ Chí Minh. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Kết quả khảo sát cấu trúc hóa học Từ các nguyên liệu nghiên cứu là bộ phận của ba loài cây như trình bày trong chương 2, chúng tôi đã cô lập được 55 hợp chất, trong đó có 16 hợp chất mới. Cấu trúc hóa học của các hợp chất cô lập được xác định bằng cách phân tích các dữ liệu phổ nghiệm IR, MS, 1D và 2D–NMR, đo năng lực triền quang và nhiệt độ nóng chảy, kết hợp so sánh với tài liệu tham khảo, đã được trình bày chi tiết trong quyển luận án. Các hợp chất được phân loại theo 8 nhóm, như sau: Nhóm A: 12a-Hydroxyrotenoid (5 hợp chất: 2 mới và 3 đã biết) Nhóm B: Dehydrorotenoid (10 hợp chất: 5 mới và 5 đã biết) Nhóm C: Coumaronochromonoid (4 hợp chất: 2 mới và 2 đã biết) Nhóm D: Flavonoid (9 hợp chất đã biết) Nhóm E: Hợp chất nitrogen (3 hợp chất đã biết) 6 Nhóm F: Hợp chất phenolic (12 hợp chất: 2 mới và 10 đã biết) Nhóm G: Terpenoid và steroid (6 hợp chất: 1 mới và 5 đã biết) Nhóm H: Hợp chất khác (6 hợp chất: 3 mới và 3 đã biết) Quyển tóm tắt luận án chỉ trình bày khảo sát cấu trúc hóa học của một vài hợp chất rotenoid mới. Rotenoid là đặc trưng của chi Boerhaavia. 3.1.1 Khảo sát cấu trúc hoá học của Boeravinone K (54) Hợp chất số 54 được cô lập từ phân đoạn EA.B3 của loài B. erecta  Khối phổ: ESI-MS (ghi nhận ion dương): m/z 345.1 [M+H] + (tính toán lý thuyết cho C 18 H 16 O 7 + H, 345.097).  Phổ 1 H, 13 C-NMR: Trình bày trong Bảng 3.1 và 3.2 Boeravinone K hay 8-methoxy-10-demethoxycoccineone E (54) được cô lập ở dạng hình kim màu vàng nhạt. Khối phổ ESI-MS cho mũi ion phân tử giả ở m/z 345.1 [M+H] + . Phổ 1 H–NMR cho thấy có 16 protons và phổ 13 C-NMR cho thấy có 18 tín hiệu. Điều này phù hợp với kết quả khối phổ cho biết công thức phân tử của hợp chất 54 là C 18 H 16 O 7 . Phổ 1 H-NMR cho thấy các tín hiệu của hệ thống ABC [  H 4.68 (1H, dd, J = 9.0, 7.0 Hz, H- 6a), 4.52 (1H, m, H-6), 4.50 (1H, dd, J = 9.5, 3.5 Hz, H-6)], cho biết 54 có sự hiện diện của nhóm –O–CH–CH 2 –O–. Phổ 1 H-NMR cũng cho 4 tín hiệu phù hợp với vòng A của rotenoid,  H 8.33 (1H, dd, J = 8.0, 1.5 Hz, H- 1), 7.07 (1H, dt, J = 8.0, 1.0 Hz, H-2), 7.33 (1H, dt, J = 8.0, 1.5 Hz, H-3) và 6.93 (1H, dd, J = 8.0, 1.0 Hz, H-4). Phổ cũng cho thấy tín hiệu một nhóm hydroxyl kiềm nối (  H 11.72, s), một proton vòng thơm (  H 6.19, s), hai nhóm methoxy [  H 3.91 (3H, s) và 3.83 (3H, s)]. Phổ 13 C–NMR của 54 cho thấy sự hiện diện của nhóm chức ketone (  C 192.9), bảy carbon vòng thơm loại tứ cấp (  C 161.7, 161.4, 154.9, 152.1, 129.4, 118.6, 101.4), năm carbon thơm loại methine (  C 131.2, 131.1, 121.5, 117.5, 94.1), một carbon methine (  C 76.4), một carbon tứ cấp bão hoà (  C 66.2), một carbon methylene (  C 61.6) và hai nhóm methoxy  C 61.5 và 56.4. 7 Dạng phổ NMR của 54 rất giống với phổ của hợp chất coccineone E, là hợp chất trong đó các carbon C-9 và C-10 mang nhóm methoxy và C-11 mang nhóm OH. Phổ HMBC của 54 cho thấy sự tương quan giữa hydrogen của nhóm OH kiềm nối (  H 11.72) tại C-11 với các tín hiệu carbon tại  C 161.4 (C-11), 101.4 (C-11a), 94.1 (C-10). Tín hiệu ở  H 6.19 cho tương quan với tín hiệu tại  C 161.4 (C-11), 101.4 (C-11a), 129.4 (C-8), vì thế proton này là H-10. Sự hiện diện của nhóm methoxy tại C-8 làm ảnh hưởng đến sự chẻ mũi của các tín hiệu proton H-6a và H-6. Trong coccineone E, giá trị độ dịch chuyển hoá học và sự chẻ mũi của các proton này là (CDCl 3 )  H 4.77 (dd, 10.0 ax-ax , 5.5 ax-eq Hz) cho H-6a, 4.48 (t, 10.0 Hz) cho H-6 và 4.44 (dd, 10.0 gem , 5.5 eq-ax Hz) cho H-6. Trong hợp chất 54, giá trị độ dịch chuyển hoá học và sự chẻ mũi của các proton (CDCl 3 ) của H-6a và H-6 lần lượt là  H 4.68 (dd, J = 9.0, 7.0 Hz), 4.52 (m) và 4.50 (dd, J = 9.5, 3.5 Hz). Hoá lập thể của hai vòng súc hợp B/C được xác định nhờ vào phân tích giá trị hằng số ghép J của H-6a và H 2 -6 cũng như giá trị độ dịch chuyển hoá học của H-1. Cấu hình trans sẽ cho giá trị J H-6a , H-6 4.5 Hz và J H-6a , H-6 11.0 Hz như trong boeravinone C, hoặc như (6aS,12aS)-12a- hydroxyelliptone, trong khi dó, cấu hình cis sẽ cho J H-6a , H-6 3.2 Hz và J H- 6a , H-6 1.0 Hz như trong clitoriacetal, hoặc 5-deoxy-(2R,3R,11S)-11-O-- glucopyranosylclitoriacetal. Hơn nữa, với cấu hình trans, giá trị độ dịch chuyển hoá học của H-1 vào khoảng  H 8.0 và với cấu hình cis vào khoảng  H 7.0. Phổ 1 H-NMR của 54, H-1 cộng hưởng ở  H 8.33 như vậy A/B có cấu hình trans. Như thế, cấu trúc hoá học của 54 được đề nghị là trans- 6a,12a-dihydro-11,12a-dihydroxy-8,9-dimethoxy[1]benzopyrano[3,4-b][1] benzopyran-12(6H)-one hay Boeravinone K. 8 3.1.2 Khảo sát cấu trúc hoá học của Boeravinone R (55) Hợp chất số 55 được cô lập từ phân đoạn C2 của loài B. diffusa thân-lá xanh.  Khối phổ: ESI-MS (ghi nhận ion dương) m/z 351.0 [M+Na] + (tính toán lý thuyết cho C 18 H 16 O 6 + Na, 351.08).  Phổ 1 H, 13 C-NMR: Trình bày trong Bảng 3.1 và 3.2 Phổ 1 H–NMR của hợp chất 55 cho thấy có 16 protons và phổ 13 C-NMR cho thấy có 18 tín hiệu, phù hợp với công thức phân tử cho bởi khối phổ là C 18 H 16 O 6 . Phổ 1 H-NMR cũng cho biết hợp chất 55 có chứa nhóm –O–CH–CH 2 –O– nhờ các tín hiệu của hệ thống ABC [  H 4.78 (1H, dd, 11.5, 4.5 Hz, H-6a), 4.49 (1H, m, H-6), 4.40 (1H, dd, 10.0, 4.5 Hz, H- 6)]. Phổ 1 H-NMR cũng cho 4 tín hiệu phù hợp với vòng A của rotenoid tại  H 8.34 (1H, dd, 8.0, 2.0 Hz, H-1), 7.02 (1H, ddd, 8.0, 8.0, 1.5 Hz, H-2), 7.31 (1H, ddd, 8.5, 7.5, 1.5 Hz, H-3) và 6.88 (1H, dd, 8.5, 1.5 Hz, H-4). Ngoài ra phổ còn cho thấy tín hiệu một OH kiềm nối (  H 11.95, s), một proton vòng thơm (  H 6.21, s), một nhóm methoxy ở  H 3.93 (3H, s) và một nhóm methyl ở  H 1.97 (3H, s). Phổ 13 C–NMR của 55 cho thấy sự hiện diện của nhóm chức ketone (  C 195.3), bảy carbon vòng thơm loại tứ cấp (  C 166.5, 162.2, 161.2, 155.8, 120.9, 106.3, 98.5), năm carbon thơm loại methine (  C 132.6, 131.1, 121.4, 117.6, 94.1), một carbon carbinol (  C 76.9), một carbon tứ cấp bão hoà (  C 66.6), một carbon methylene (  C 62.2) và thêm một nhóm methoxy (  C 61.5) cùng một nhóm methyl (  C 56.4). Dạng phổ NMR của 55 rất giống với phổ của hợp chất boeravinone C, là hợp chất trong đó C-9 mang nhóm methoxy, C-10 mang nhóm methyl và C-11 mang nhóm OH. Phổ HMBC của 55 cho thấy proton của nhóm OH kiềm nối (  H 11.95), gắn tại C-11 có tương quan với các tín hiệu tại  C 162.2 (C-11), 98.5 (C-11a), 106.3 (C-10). Tín hiệu tại  H 6.21 có tương quan với tín hiệu tại  C 161.2 (C-7a), 166.5 (C-9), 106.3 (C-10), 98.5 (C- 11a), nên đó là H-8. [...]... trúc hoá học của 59 được trình bày trong phần kết luận 3.2 Kết quả thử nghiệm hoạt tính sinh học Kết quả thử hoạt tính sinh học trên vài loại cao chi t và hợp chất tinh sạch được trình bày trong bảng 3.5 và 3.6 CHƯƠNG 4 KẾT LUẬN VÀ HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO Kết quả khảo sát hành phần hóa học Từ ba loài cây Boerhaavia, chúng tôi đã cô lập được 55 hợp chất (các hợp chất cùng tìm thấy được trong ba loài. .. được tính là một hợp chất), trong đó có 16 hợp chất mới  Từ loài Boerhaavia diffusa thân-lá xanh, đã cô lập được 11 hợp chất,  Từ loài B diffusa thân-lá đỏ, đã cô lập được 21 hợp chất,  Từ loài B erecta đã cô lập được 34 hợp chất, Kết quả thử nghiệm hoạt tính sinh học Thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ở nồng độ 100 g/ml (Bảng 3.5), đã tìm thấy ba hợp chất loại rotenoid (11, 21, 54) có hoạt tính. .. hằng số ghép của H-6a là 11.5 và 4.5 Hz cho biết vị trí trục của H-6a so với hai vòng B và C Vì vậy, cấu trúc hoá học của 55 được đề nghị là trans-6a,12a-dihydro-11,12a-dihydroxy-9-methoxy-10-methyl[1] benzopyrano[3,4-b][1]benzopyran-12(6H)-one hay boeravinone R 3.1.3 Khảo sát cấu trúc hoá học của Boeravinone N (56) Hợp chất số 56 được cô lập từ phân đoạn EA.B4 của loài B diffusa thân-lá đỏ, và phân đoạn... (11, 21, 54) có hoạt tính tốt trên dòng tế bào MCF–7 và ba hợp chất (11, 21, 57) có hoạt tính tốt trên dòng tế bào HeLa Thử nghiệm hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase ở ba nồng độ: 1.0 mg/ml, 0.5 mg/ml, 0.25 mg/ml (Bảng 3.6), kết quả cho thấy không có cao chi t hoặc hợp chất nào có hoạt tính này 13 Bảng 3.1: Dữ liệu phổ 1H-NMR của 11, 21 và hợp chất mới 54, 55, 56, so sánh với số liệu trong... tín hiệu của nhóm OH kiềm nối (11-OH) và có xuất hiện thêm tín hiệu của các proton của một phân tử đường ở vùng 4.9 to 3.3 ppm So sánh phổ 13C-NMR của 56 và 10-demethylboeravinone C cũng cho kết quả tương tự, xác nhận có tín hiệu của một phần đường β–D–glucopyranosyl với proton anomer tại H 4.85 (d, J = 8.0 Hz) Phổ HMBC cho thấy phần đường này gắn vào aglycone tại C–11 nhờ mối tương quan của proton... proton tại H 4.40 và 4.49 (H-6) cho tương quan 2,3 J với C-4a (C 155.8), C-12a (C 66.6) và C-6 (C 62.2) Tín hiệu của nhóm methoxy tại H 3.93 tương quan với C-9 ( 166.5) và tín hiệu của nhóm methyl tại H 1.97 tương quan với C-10 (C 106.3) Hoá lập thể của hai vòng súc hợp B/C được xác định nhờ vào phân tích giá trị hằng số ghép J của H-6a, H2-6 cũng như giá trị độ dịch chuyển hoá học của H-1 như trong... nhất là ở C-6 và nhóm methoxy thứ nhì ở C-10 Cấu trúc hoá học của 57 là 9,11dihydroxy-6,10-dimethoxy[1]benzopyrano[3,4-b][1]benzopyran-12(6H)one hay boeravinone P 3.1.5 Khảo sát cấu trúc hoá học của Boeravinone Q (59) Hợp chất số 59 được cô lập từ phân đoạn EA.D2 của loài B erecta  Sáp màu trắng  []25D +58 (c=0.001, MeOH)  Khối phổ: HR-ESI-MS (ghi nhận ion dương) m/z 529.1375 [M+Na]+ (tính toán lý... Proton này được gán cho H-6’, và như thế tín hiệu tại H 7.11 và 6.98 được lần lượt gán cho H-5’ và H-4’ nhờ vào phổ H–1H COSY của 59 Phổ đồ NMR của 59 rất giống với phổ của hợp chất mirabijalone C, là một rotenoid trong đó vòng B bị mở (hợp chất này được cô lập từ cây Mirabilis jalapa) Tromg mirabijalone C, phần đường glucose được gắn vào C-3’ trong khi đó, ở hợp chất 59, phần đường gắn tại C-2’ Nhóm... trí ortho của vòng A cản trở sự quay tự do quanh nối đơn 1’–3, dẫn đến hệ quả là tạo ra hai đồng phân loại atropisomer (aR)- và (aS) Vì vậy, phân tử thuộc loại biphenyl có trục thủ tính, và như thế, hai proton của nhóm –CH2OH gắn tại C-2 không tương đương, sẽ cộng hưởng khác nhau trong phổ 1H-NMR tại H 4.34 (1H, d, J = 13.5 Hz, CH2a) và 4.43 (1H, d, J = 14.0 Hz, CH2b) Vậy, cấu trúc hoá học của 59 được... mũi đôi tại H 4.34 và 4.43 (J = 14.0 Hz), mỗi tín hiệu một proton Carbon mang hai proton gem này cộng hưởng ở C 60.9 trong phổ 13C-NMR, vậy đây là nhóm –CH2OH Phổ HMBC của 59 xác định nhóm -CH2OH gắn tại C-2 của aglycone do sự tương quan của hai tín hiệu này với tín hiệu ở C 165.6 (C-2) và 119.3 (C-3) Phổ HMBC cũng cho thấy mối tương quan của ba proton liền kề nhau trong vòng A của khung rotenone . ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN  ĐỖ THỊ MỸ LIÊN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA BA LOÀI THUỘC CHI BOERHAAVIA, HỌ. boeravinone Q. Cấu trúc hoá học của 59 được trình bày trong phần kết luận. 3.2 Kết quả thử nghiệm hoạt tính sinh học Kết quả thử hoạt tính sinh học trên vài loại cao chi t và hợp chất tinh sạch. trong và ngoài nước, trên các nội dung: mô tả thực vật, những nghiên cứu về dược học và những nghiên cứu về hóa học. Các tài liệu tham khảo cho thấy trên thế giới, chi Boerhaavia có 40 loài,