Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… i BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI        KHƯƠNG THỊ THANH THÙY NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ðỔI MÔ BỆNH HỌC CỦA CÁ RÔ ðỒNG (Anabas testudineus Bloch, 1792) BỊ BỆNH ðEN THÂN LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : NUÔI TRỒNG THUỶ SẢN Mã số : 60.62.03.01 Người hướng dẫn khoa học : 1.TS. Phan Thị Vân 2.TS. ðặng Thị Lụa HÀ NỘI - 2013 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu nằm trong ñề tài “Nghiên cứu bệnh ñen thân trên cá rô ñồng nuôi thâm canh và biện pháp phòng trị” bởi Viện thủy sản 1. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng ñược ai công bố trong bất kì công trình nào khác. Tôi xin cam ñoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, ban lãnh ñạo viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản 1, phòng thông tin hợp tác quốc tế và ñào tạo, trung tâm nghiên cứ quan trắc và cảnh báo môi trường dịch bệnh thủy sản khu vực miền Bắc – Viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản 1 ñã hướng dẫn và tạo ñiều kiện thuận lợi giúp ñỡ tôi hoàn thành khóa học cao học. Tôi xin bảy tỏ lòng biết ơn sâu sắc ñến TS. Phan Thị Vân, TS. ðặng Thị Lụa ñã tận tình hướng dẫn tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn tốt nghiệp. Tôi xin chân thành cảm ơn tới chị Nguyễn Thị Thu Hà, anh ðào Xuân Trường, ñã hỗ trợ trong thu mẫu và xử lý mẫu. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới bố mẹ và những người thân trong gia ñình cùng bạn bè, ñồng nghiệp cho sự thành công của luận văn. Hà Nội, ngày 04 tháng 05 năm 2013 Khương Thị Thanh Thùy Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… iii MỤC LỤC Lời cam ñoan………………………………………………………………….i Lời cảm ơn……………………………………………………………………ii Mục lục………………………………………………………………………iii Danh mục bảng……………………………………………………………… v Danh mục hình……………………………………………………………….vi Danh mục viết tắt……………………………………………………………vii MỞ ðẦU 1 CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Một số ñặc ñiểm sinh học của cá Rô ñồng 3 1.1.1. Phân loại 3 1.1.2. Phân bố 3 1.1.3. ðặc ñiểm hình thái 4 1.1.4. ðặc ñiểm sinh sản 4 1.2. Sự phân bố và tình hình nuôi cá Rô ñồng trên thế giới và Việt Nam 4 1.3. Tình hình nghiên cứu bệnh trên cá Rô ñồng 5 1.3.1. Tình hình nghiên cứu bệnh trên cá Rô ñồng ở thế giới 5 1.3.2. Tình hình nghiên cứu bệnh trên cá Rô ñồng ở Việt Nam 8 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 2.1. Nội dung nghiên cứu 10 2.2. Thời gian, ñối tượng và ñịa ñiểm nghiên cứu 10 2.3. Phương pháp nghiên cứu 10 2.3.1 Thu mẫu 12 2.3.2. Cố ñịnh mẫu 12 2.3.3. Phương pháp xử lý mẫu 13 2.3.4. ðúc mẫu 13 2.3.5. Cắt mẫu 14 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… iv 2.3.6. Nhuộm mẫu 14 2.3.7. ðọc kết quả 15 2.3.8. Phương pháp xử lý số liệu 15 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 16 3.1. Dấu hiệu bệnh lý cá bị bệnh ñen thân 16 3.2. Biển ñổi cấu trúc mô mang của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 17 3.2.1. Cấu trúc mang cá Rô ñồng bình thường 17 3.2.2. Biển ñổi cấu trúc mô mang của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 19 3.3. Biến ñổi cấu trúc mô gan của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 22 3.3.1. Cấu trúc gan cá Rô ñồng bình thường 22 3.3.2. Biến ñổi cấu trúc mô gan của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 24 3.4. Biến ñổi cấu trúc mô thận của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 28 3.4.1. Cấu trúc thận cá Rô ñồng bình thường 28 3.4.2. Biến ñổi cấu trúc mô thận của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 29 3.5. Biển ñối cấu trúc biến ñổi mô não của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 32 3.5.1. Cấu trúc mô não bình thường 32 3.5.2. Cấu trúc biến ñổi mô não của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 33 3.6. Thảo luận 34 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ðỀ XUẤT 36 4.1. Kết luận 36 4.2. ðề xuất 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO…………………………………………………….38 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… v DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Số liệu mẫu phân tích 12 Bảng 3.2: Quy trình xử lý mẫu 13 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.1: Anabas testudineus (Bloch, 1792)………………………………….3 Hình 3.1: Biểu hiện bên ngoài của cá Rô ñồng khỏe và ñen thân 16 Hình 3.2: Gan cá Rô ñồng bị bệnh thân 17 Hình 3.3: Cấu trúc mang cá rô ñồng (H&E, 10X) 18 Hình 3.4: Cấu trúc sợi mang thứ cấp (H&E, 100x) 19 Hình 3.5: Hiện tượng xuất huyết ở sợi mang sơ cấp (vòng elip) (H&E, 40X) 19 Hình 3.6: Sợi mang thứ cấp bị mòn cụt (mũi tên) (H&E, 10X) 20 Hình 3.7: Hiện tượng tăng sinh ở mô mang cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân (H&E, 40X) 20 Hình 3.8: Thể vùi xuất hiện trên các sợi mang thứ cấp mô mang cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân (mũi tên) (H&E, 40X) 21 Hình 3.9: Thể vùi xuất hiện trên các sợi mang thứ cấp mô mang cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân (mũi tên) (H&E, 100X) 21 Hình 3.10: Các mao mạch trong gan cá Rô ñồng bình thường (H&E, 40X) 23 Hình 3.11: Ống gan tụy trong gan cá Rô ñồng bình thường (H&E, 100X) 23 Hình 3.12: Hiện tượng xuất huyết trên mô gan cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân (mũi tên), (H&E, 40X) 25 Hình 3.13: Ống gan tụy sưng và xuất huyết (mũi tên) (H&E, 40X) 25 Hình 3.14: Ống gan tụy bị teo tạo khoảng không (mũi tên) (H&E, 10X) 26 Hình 3.15: Ống gan tụy bị hoại tử (vòng elip)(H&E, 40X) 26 Hình 3.16: Mô gan xuất hiện không các bào (H&E, 40X) 27 Hình 3.17: Thận trước cá Rô ñồng (H&E, 100X) 29 Hình 3.18: Các tế bào máu xâm nhập vào trong các xoang thận (mũi tên). (H&E, 40X) 30 Hình 3.19: Ống thận bị teo nhỏ lại, không xếp xít lại nhau (mũi tên). (H&E, 40X) 30 Hình 3.20: Thận bị hoại tử (mũi tên) (H&E, 40) 31 Hình 3.21: Cấu mô não bình thường (H&E, 40X) 32 Hình 3.22: Chất trắng xuất hiện không bào 33 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… vii DANH MỤC VIẾT TẮT H&E: Hematocyline và Eosin MBV: Monodon Type Baculovirus NN : Nông Nghiệp NTTS: Nuôi Trồng Thủy Sản PTNN: Phát Triển Nông Thôn TT: Trung Tâm TSV: Taura Syndrrome Virus VNN: Viral Nervous Necrosis YHV: Yellow Head Disease WSBV: White Spot Baculovirus Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… 1 MỞ ðẦU Cá Rô ñồng Anabas testudineus (Bloch, 1792) là một loài cá bản ñịa của Việt Nam, rất ñược ưa chuộng trên thị trường trong nước vì thịt thơm ngon phù hợp với thị hiếu của người dân. Hiện nay, lượng cá Rô ñồng trong tự nhiên giảm ñáng kể do ñiều kiện môi trường bị ô nhiễm và ñặc biệt là quá trình khai thác của con người. Từ khi vấn ñề sản xuất giống ñược giải quyết, cá Rô ñồng ñược xem là ñối tượng nuôi kinh tế có nhiều triển vọng. Tuy nhiên cùng với các hoạt ñộng thủy sản phát triển thì tình hình dịch bệnh ngày càng có chiều hướng gia tăng. Dịch bệnh là một trong những mối ñe dọa lớn nhất ñối với ngành công nghiệp nuôi trồng thủy sản thâm canh, gây thiệt hại kinh tế lớn cho người nuôi là ñiều khó tránh khỏi. Cá Rô ñồng giai ñoạn ương giống thường bị bệnh ñen thân. Kết quả phỏng vấn nhanh các hộ nuôi có cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân cho thấy tỷ lệ thiệt hại do bệnh ñen thân gây ra từ 40 – 70%, nhưng cũng có trường hợp lên ñến 90 – 100% (Kết quả của chưa công bố Trung tâm Quan trắc, Viện Nuôi trồng thủy sản 1, 2011). Hiện nay, bệnh ở cá Rô ñồng như bệnh nấm nhớt và bệnh ñen thân nhất là bệnh ñã gây nhiều thiệt hại cho các mô hình nuôi cá Rô thâm canh, nếu chỉ dựa vào những hình thái tổn thương bên ngoài mà không có các dữ liệu khác về bệnh lý của cá thì thường khó có thể kết luận chính xác về tác nhân gây bệnh. Mặc dù, ñã có nhiều công trình nghiên cứu về ñặc ñiểm sinh lý, sinh hóa, sinh sản nhân tạo. Các công trình nghiên cứu về bệnh trên cá Rô ñồng nhất là mô bệnh học còn hạn chế. Bệnh ñen thân trên cá rô ñồng cho ñến nay vẫn chưa có công trình nghiên cứu nào ñã ñề cập ñến. Tác nhân gây ra bệnh chưa ñược làm rõ. Chính vì vậy, bộ NN và PTNN ñã giao cho Viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản 1 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp…………… 2 chủ trì ñề tài “Nghiên cứu bệnh ñen thân trên cá rô ñồng nuôi thâm canh và biện pháp phòng trị”. Là một phần nội dung của ñề tài, tôi tiến hành ñề tài nhỏ: “Nghiên cứu sự biến ñổi mô bệnh học của cá Rô ñồng (Anabas testudineus) bị bệnh ñen thân”. ðề tài thực hiện với mục tiêu và nội dung như sau: Mục tiêu nghiên cứu Xác ñịnh ñược sự biến ñổi cấu trúc mô mang, mô gan, mô thận, mô não của cá Rô ñồng (Anabas testudineus) bị bệnh ñen thân; góp phần xác ñịnh nguyên nhân, tác nhân gây bệnh. [...]... PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 N i dung nghiên c u - Nghiên c u s bi n ñ i c u trúc mô mang c a cá Rô ñ ng b b nh ñen thân - Nghiên c u s bi n ñ i c u trúc mô gan c a cá Rô ñ ng b b nh ñen thân - Nghiên c u s bi n ñ i c u trúc mô th n c a cá Rô ñ ng b b nh ñen thân - Nghiên c u s bi n ñ i c u trúc mô não c a cá Rô ñ ng b b nh ñen thân 2.2 Th i gian, ñ i tư ng và ñ a ñi m nghiên c u Th i gian nghiên c u:... chưa có báo cáo thông báo v tác nhân vi rút gây b nh trên cá Rô ñ ng, ngo i tr Kanchanakhan và ctv (1999) khi nghiên c u v tác nhân cơ h i l loét (EUS) trên cá ñã phân l p ñư c tác nhân vi rút Rhadovirus t cá Rô ñ ng b EUS (Kanchanakhan và ctv, 1999) Ngoài ra khi nghiên c u nh hư ng c a các y u t môi trư ng, Saenphet và ctv (2009) ñã nghiên c u s bi n ñ i mô b nh h c c a gan, mang, th n cá Rô ñ ng s... Cá b b nh có bi u hi n toàn thân ph l p tr ng ñ c, v y cá xù x , ph ng r p, ñôi khi xu t hi n bi u hi n xu t huy t trên thân cá Ngoài các hi n tư ng b nh nêu trên, cá Rô ñ ng nuôi còn ñư c thông báo là b b nh ñen thân Khác v i b nh n m nh t, b nh ñen thân thư ng x y ra giai ño n ñ u c a chu kỳ nuôi, sau khi cá th hương 1 – 2 tháng Bi u hi n c a cá b b nh ñen thân, vì th ngư i nuôi g i là b nh ñen thân. .. k thu t s n xu t gi ng nhân t o cá Rô ñ ng tr nên ph bi n ñ c bi t v i gi ng cá Rô “ñ u vuông” sinh trư ng nhanh v i năng su t r t cao, ngh nuôi cá Rô ñ ng phát tri n nhanh chóng nhi u nơi trên c nư c K t khi nghiên c u cho ñ nhân t o thành công cá Rô ñ ng có th cung c p khá ch ñ ng ngu n cá gi ng cho nhu c u nuôi thương ph m cá Rô ñ ng nư c ta thì phong trào nuôi cá Rô ñ ng cũng phát tri n m nh m ts... ng kh e và ñen thân Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p…………… 16 A B Hình 3.2: Gan cá Rô ñ ng b b nh thân 3.2 Bi n ñ i c u trúc mô mang c a cá Rô ñ ng b b nh ñen thân 3.2.1 C u trúc mang cá Rô ñ ng bình thư ng Mang cá Rô có 4 ñôi cung mang n m dư i n p mang, m i cung mang g m có các s i mang sơ c p x p thành hai hàng d c xương cung mang ð i x ng v i các s i mang sơ... LI U 1.1 M t s ñ c ñi m sinh h c c a cá Rô ñ ng 1.1.1 Phân lo i Nghành : Chordata L p: Actinopterygii B : Perciformes H : Anabantidae Gi ng: Anabas Loài: Anabas testudineus (Bloch, 1792) Hình 2.1: Anabas testudineus (Bloch, 1792) 1.1.2 Phân b Cá Rô ñ ng thư ng sinh s ng ñư c các lo i hình m t nư c: ru ng lúa, ao, mương, rãnh, hào, ñ m, sông r ch Trên th gi i, cá Rô phân b trong kho ng vĩ ñ 28° b c... Hình 3.16: Mô gan xu t hi n không các bào (H&E, 40X) Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p…………… 27 3.4 Bi n ñ i c u trúc mô th n c a cá Rô ñ ng b b nh ñen thân 3.4.1 C u trúc th n cá Rô ñ ng bình thư ng Th n cá Rô n m d c s ng lưng trong xoang cơ th và phía trên c a bóng hơi Cơ quan này ñư c chia thành hai ph n: th n trư c bao g m mô t o máu, mô b ch huy t và mô n i... Dương và B c Giang cho th y cá b b nh ñen thân có các d u hi u b nh lý như sau: Cá Rô ñ ng bình thư ng: có màu xanh t xám ñ n nh t, ph n b ng có màu sáng hơn ph n lưng, v i m t ch m màu th m ñuôi và ch m khác sau mang Các g c a v y và vây có màu sáng (Hình 2: 4,5, a) D u hi u bên ngoài c a cá Rô ñ ng b b nh ñen thân: toàn thân cá chuy n màu ñen, bơi không ñ nh hư ng, b ăn, cá thư ng n i ñ u, bơi l ñ... u: cá b nh có bi u hi n gan nh t nh t ho c xu t huy t có th sưng (Hình 3.2 A, B) Cá Rô ñ ng thư ng b m c b nh ñen thân giai ño n sau khi th cá hương 1 - 2 tháng, kích thư c 4 – 5 cm và cá có hi n tư ng ch t nhanh Cá Rô ñ ng b b nh ñen thân cho th y t l thi t h i do b nh ñen thân gây ra t 40 – 70%, nhưng cũng có trư ng h p lên ñ n 90 – 100% 3 5a b c d 5 2 1 4 Hình 3.1: Bi u hi n bên ngoài c a cá Rô. .. nuôi cá Rô ñ ng thâm canh b t ñ u v i di n tích ch kho ng 10 ha vào năm 2009 Năm 2010, di n tích nuôi tăng lên 200 ha, tăng 20% so v i năm trư c và năng su t trung bình c a toàn t nh ñ t 12 t n/ ha (Thông tin t Chi c c Th y s n t nh H i Dương) 1.3 Tình hình nghiên c u b nh trên cá Rô ñ ng 1.3.1 Tình hình nghiên c u b nh trên cá Rô ñ ng Do cá Rô ñ ng chưa ñư c nuôi ph bi n th gi i nhi u nư c nên các nghiên . PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu sự biến ñổi cấu trúc mô mang của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân. - Nghiên cứu sự biến ñổi cấu trúc mô gan của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân. . - Nghiên cứu sự biến ñổi cấu trúc mô thận của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân. - Nghiên cứu sự biến ñổi cấu trúc mô não của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân. 2.2. Thời gian, ñối tượng và ñịa ñiểm nghiên. ñồng bị bệnh ñen thân 19 3.3. Biến ñổi cấu trúc mô gan của cá Rô ñồng bị bệnh ñen thân 22 3.3.1. Cấu trúc gan cá Rô ñồng bình thường 22 3.3.2. Biến ñổi cấu trúc mô gan của cá Rô ñồng bị bệnh