LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS. Phùng Thị Vinh, người thầy đã tận tụy hướng dẫn, chỉ bảo tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu thực hiện đề tài. Xin chân trọng cảm ơn Ban giám hiệu nhà trường, cảm ơn các thầy cô Phòng Đào tạo sau đại học, Bộ môn Phân tích cùng các bộ môn khác của trường Đại học Dược Hà nội đã tạo điều kiện tốt cho tôi trong quá trình học tập tại trường. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung Ương, Trung tâm đánh giá tương đương sinh học nơi tôi công tác đã luôn quan tâm và tạo điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành nhiệm vụ học tập và nghiên cứu trong thời gian vừa qua. Cuối cùng tôi xin cảm ơn gia đình, đồng nghiệp, bạn bè đã luôn luôn động viên, chia sẻ, khích lệ và giúp đỡ để tôi có thể có kết quả như ngày hôm nay. Trần Hoàng Học viên cao học khóa 12, chuyên ngành Kiểm nghiệm thuốc – Độc chất MỤC LỤC 1.3.1. Trên thế giới 14 DANH MỤC BẢNG BIỂU - Gliclazid là thuốc chống đái tháo đường nhóm sulfonylurea. Tác dụng chủ yếu của thuốc là kích thích tế bào beta tuyến tụy giải phóng insulin. 10 - Gliclazid dễ hấp thu qua đường tiêu hóa. Nồng độ đỉnh của thuốc đạt sau khi uống khoảng 2 – 4 giờ với thuốc qui ước và khoảng 7 giờ với thuốc giải phóng chậm. Thuốc gắn mạnh với protein huyết tương 85 – 94 %. Thời gian tác dụng kéo dài 12 giờ hoặc hơn. Gliclazid được chuyển hóa mạnh ở gan thành những sản phẩm không còn hoạt tính. Hầu hết các chất chuyển hóa là dẫn chất của acid carboxylic, chưa tìm thấy chất nào có hoạt tính được tìm thấy trong máu. Thuốc chưa biến đổi và các chất chuyển hóa đào thải chủ yếu qua nước tiểu 60 – 70 %; khoảng 10 – 20 % qua phân ở dạng chuyển hóa. Thời gian bán thải của gliclazid khoảng 10 – 12 giờ. 10 Chỉ định. 10 - Gliclazid được chỉ định trong đái tháo đường không phụ thuộc insulin typ 2 mà chế độ ăn kiêng đơn thuần không kiểm soát được glucose huyết. 10 - Gliclazid dùng cho người cao tuổi bị đái tháo đường. 10 Chống chỉ định. 10 - Đái tháo đường phụ thuộc insulin typ 1. 10 - Hôn mê hay tiền hôn mê do đái tháo đường. 10 - Suy gan nặng, suy thận nặng. 10 - Có tiền sử dị ứng với sulfonamid và các sulfonylurea khác. 10 - Phối hợp với viên miconazol. 10 - Nhiễm khuẩn nặng hoặc chấn thương nặng, phẫu thuật lớn. 10 Một số phản ứng ADR có thể xảy ra khi dùng thuốc. 10 ● Thường gặp, ADR > 1/100: 10 - Thần kinh trung ương: Đau đầu. 11 - Tiêu hóa: Rối loạn tiêu hóa, buồn nôn. 11 - Da: Phát ban. 11 ● Ít gặp, 1/1000 < ADR < 1/100 11 - Rối loạn máu (thường hồi phục): Giảm tiểu cầu, mất bạch cầu hạt, giảm bạch cầu, thiếu máu. 11 - Da: Phản ứng da, niêm mạc. 11 ● Hiếm gặp, ADR < 1/1000 11 - Thần kinh trung ương: Trạng thái lơ mơ, vã mồ hôi. 11 - Tim mạch: Tăng tần số tim. 11 - Da: Tái xanh. 11 - Tiêu hóa: Nôn, đói cồn cào. 11 1.2.2. Một số chế phẩm gliclazid giải phóng chậm có trên thị trường. 11 1.2.3. Một số phương pháp định lượng Gliclazid trong dịch sinh học. 11 Qua các tài liệu tham khảo ta có một số phương pháp định lượng được tóm tắt như sau: 12 Bảng 1.2: Tóm tắt một số phương pháp định lượng Gliclazid bằng phương pháp HPLC. 12 1.3.1. Trên thế giới 14 Dựa trên nguyên tắc chất nội chuẩn cho vào chất cần phân tích với mục đích làm giảm sai số trong quá trình sử lý mẫu đến quá trình phân tích. Do vậy chất nội chuẩn phải có công thức phân tử tương tự như chất phân tích, tính chất lý hóa tương tự nhau để trong quá trình xử lý chiết, tách, chạy sắc ký dễ dàng hơn. 20 Khảo sát trên mẫu chuẩn GLI hòa tan trong pha động, mẫu huyết tương trắng và mẫu thử tự tạo GLI nồng độ 2,5 µg/mL chuẩn trong huyết tương trắng (nồng độ xấp xỉ Cmax). 21 c). Phương pháp chiết pha rắn (Rắn – lỏng) [5]. 22 38 38 Hình 3.2: Phổ hấp thụ của GLI 38 Hình 3.3: Phổ hấp thụ của IS 38 Bảng 3.11: Kết quả xác định độ phù hợp của hệ thống sắc ký 44 45 45 Hình 3.13: Sắc ký đồ huyết tương trắng 45 Hình 3.14: Sắc ký đồ huyết tương trắng có pha IS 45 DANH MỤC HÌNH VẼ - Gliclazid là thuốc chống đái tháo đường nhóm sulfonylurea. Tác dụng chủ yếu của thuốc là kích thích tế bào beta tuyến tụy giải phóng insulin. 10 - Gliclazid dễ hấp thu qua đường tiêu hóa. Nồng độ đỉnh của thuốc đạt sau khi uống khoảng 2 – 4 giờ với thuốc qui ước và khoảng 7 giờ với thuốc giải phóng chậm. Thuốc gắn mạnh với protein huyết tương 85 – 94 %. Thời gian tác dụng kéo dài 12 giờ hoặc hơn. Gliclazid được chuyển hóa mạnh ở gan thành những sản phẩm không còn hoạt tính. Hầu hết các chất chuyển hóa là dẫn chất của acid carboxylic, chưa tìm thấy chất nào có hoạt tính được tìm thấy trong máu. Thuốc chưa biến đổi và các chất chuyển hóa đào thải chủ yếu qua nước tiểu 60 – 70 %; khoảng 10 – 20 % qua phân ở dạng chuyển hóa. Thời gian bán thải của gliclazid khoảng 10 – 12 giờ. 10 Chỉ định. 10 - Gliclazid được chỉ định trong đái tháo đường không phụ thuộc insulin typ 2 mà chế độ ăn kiêng đơn thuần không kiểm soát được glucose huyết. 10 - Gliclazid dùng cho người cao tuổi bị đái tháo đường. 10 Chống chỉ định. 10 - Đái tháo đường phụ thuộc insulin typ 1. 10 - Hôn mê hay tiền hôn mê do đái tháo đường. 10 - Suy gan nặng, suy thận nặng. 10 - Có tiền sử dị ứng với sulfonamid và các sulfonylurea khác. 10 - Phối hợp với viên miconazol. 10 - Nhiễm khuẩn nặng hoặc chấn thương nặng, phẫu thuật lớn. 10 Một số phản ứng ADR có thể xảy ra khi dùng thuốc. 10 ● Thường gặp, ADR > 1/100: 10 - Thần kinh trung ương: Đau đầu. 11 - Tiêu hóa: Rối loạn tiêu hóa, buồn nôn. 11 - Da: Phát ban. 11 ● Ít gặp, 1/1000 < ADR < 1/100 11 - Rối loạn máu (thường hồi phục): Giảm tiểu cầu, mất bạch cầu hạt, giảm bạch cầu, thiếu máu. 11 - Da: Phản ứng da, niêm mạc. 11 ● Hiếm gặp, ADR < 1/1000 11 - Thần kinh trung ương: Trạng thái lơ mơ, vã mồ hôi. 11 - Tim mạch: Tăng tần số tim. 11 - Da: Tái xanh. 11 - Tiêu hóa: Nôn, đói cồn cào. 11 1.2.2. Một số chế phẩm gliclazid giải phóng chậm có trên thị trường. 11 1.2.3. Một số phương pháp định lượng Gliclazid trong dịch sinh học. 11 Qua các tài liệu tham khảo ta có một số phương pháp định lượng được tóm tắt như sau: 12 Bảng 1.2: Tóm tắt một số phương pháp định lượng Gliclazid bằng phương pháp HPLC. 12 1.3.1. Trên thế giới 14 Dựa trên nguyên tắc chất nội chuẩn cho vào chất cần phân tích với mục đích làm giảm sai số trong quá trình sử lý mẫu đến quá trình phân tích. Do vậy chất nội chuẩn phải có công thức phân tử tương tự như chất phân tích, tính chất lý hóa tương tự nhau để trong quá trình xử lý chiết, tách, chạy sắc ký dễ dàng hơn. 20 Khảo sát trên mẫu chuẩn GLI hòa tan trong pha động, mẫu huyết tương trắng và mẫu thử tự tạo GLI nồng độ 2,5 µg/mL chuẩn trong huyết tương trắng (nồng độ xấp xỉ Cmax). 21 c). Phương pháp chiết pha rắn (Rắn – lỏng) [5]. 22 38 38 Hình 3.2: Phổ hấp thụ của GLI 38 Hình 3.3: Phổ hấp thụ của IS 38 Bảng 3.11: Kết quả xác định độ phù hợp của hệ thống sắc ký 44 45 45 Hình 3.13: Sắc ký đồ huyết tương trắng 45 Hình 3.14: Sắc ký đồ huyết tương trắng có pha IS 45 NHỮNG CHỮ VIẾT TẮT ANOVA : Phân tích phương sai AUC : Diện tích dưới đường cong AUMC : Diện tích dưới đường cong nồng độ - thời gian x thời gian BCS : Hệ thống phân loại sinh dược học BMI : Chỉ số khối cơ thể Cτ : Nồng độ thuốc tại thời điểm τ C av : Nồng độ thuốc trung bình ở trạng thái ổn định : C max : Nồng độ thuốc tốt đa C min : Nồng độ thuốc tối thiểu ở trạng thái ổn định CV% : Hệ số biến thiên DF : Dao động nồng độ thuốc trong huyết tương EMS : Trung bình bình phương của sai số FDA : Cục quản lý thuốc và thực phẩm Mỹ GCP : Thực hành tốt lâm sàng GLI : Gliclazid GLP : Thực hành tốt phòng thí nghiệm GMP : Thực hành tốt sản xuất thuốc HPLC : Sắc ký lỏng hiệu năng cao HQC : Mẫu kiểm tra nồng độ cao HT : Huyết tương IS : Glibenclamid (nội chuẩn) Kel : Hằng số tốc độ thải trừ LLOQ : Giới hạn định lượng dưới LQC : Mẫu kiểm tra nồng độ thấp MeCN : Acetonitril MQC : Mẫu kiểm tra nồng độ trung bình MR : Giải phóng chậm MRT : Thời gian lưu trú trung bình NTN : Người tình nguyện QC : Mẫu kiểm tra R : Thuốc đối chứng SD : Độ lệch chuẩn SKD : Sinh khả dụng T : Thuốc thử T 1/2 : Thời gian bán thải TB : Trung bình TDKD : Tác dụng kéo dài TĐSH : Tương đương sinh học T max : Thời gian đạt nồng độ thuốc tối đa WHO : Tổ chức Y tế thế giới τ : Khoảng cách liều * Các đơn vị đo lường được viết tắt như sau - Đơn vị đo chiều dài Centimet : cm Milimet : mm Micromet : µm Nanomet : nm - Đơn vị đo khối lượng Gam : g Miligam : mg Microgam : µg - Đơn vị đo thể tích Lít : L Mililit : mL Microlit : µL [...]... dạng giải phóng chậm, nghiên cứu sinh khả dụng còn cần để chứng tỏ quá trình giải phóng dược chất chậm trong cơ thể và giúp kiểm soát nồng độ thuốc trong máu Để đánh giá một cách đích thực chất lượng của chế phẩm Gliclazid sản xuất trong nước, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài: Nghiên cứu Tương đương sinh học viên nén Gliclazid giải phóng chậm sản xuất ở Việt Nam theo mô hình thử đơn liều và đa liều ... dựng và thẩm định phương pháp phân tích Gliclazid trong huyết tương người bằng phương pháp HPLC 2 Đánh giá tương đương sinh học cho chế phẩm gliclazid giải phóng chậm sản xuất trong nước so với Diamicron® MR 30 mg 3 Phần 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VÀ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC 1.1.1 Khái niệm chung - Sinh khả dụng: là thông số biểu thị tỷ lệ thuốc vào được vòng tuần hoàn chung ở dạng... thực hiện nghiên cứu như hướng dẫn về thẩm định phương pháp nghiên cứu, hướng dẫn về xử lý và bảo quản mẫu sinh học và xem xét miễn thử SKD và TĐSH in vivo cho các thuốc dạng rắn [15], [18], [19], [35] Dược điển Mỹ ban hành chuyên luận " Hướng dẫn nghiên cứu tương đương sinh học in vivo ", kèm theo quy trình thử cho một số chế phẩm cụ thể, trong đó có 2 thuốc giải phóng chậm (Diclofenac và Pentoxyphillin)... đồng ý của NTN 1.2.3.3 Thuốc thử và thuốc đối chứng - Thuốc thử: Thuốc dùng trong nghiên cứu SKD và TĐSH phải được sản xuất theo tiêu chuẩn GMP Chế phẩm được lấy từ lô sản xuất công nghiệp Nếu mẫu thử lấy từ lô sản xuất thử (pilot) thì cỡ lô này không được dưới 10% cỡ lô sản xuất chuẩn Các mẫu thuốc dùng trong nghiên cứu phải được kiểm tra chất lượng trước khi đưa vào thử - Thuốc đối chứng: Là các... với liều đã dùng (F%), tốc độ (T max) và mức độ (Cmax) thuốc thâm nhập được vào vòng tuần hoàn chung Sinh khả dụng invivo được biểu thị dưới 2 khái niệm: Sinh khả dụng tuyệt đối và sinh khả dụng tương đối, trong đó sinh khả dụng tương đối thường được dùng nhiều hơn trong nghiên cứu phát triển các sản phẩm thuốc generic [1], [4], [13] - Tương đương sinh học: hai thuốc được gọi là tương đương sinh học. .. còn đang được xem xét Trên thế giới, hầu hết các nước có nền công nghiệp Dược phát triển đều đã có quy chế rõ ràng về yêu cầu dữ liệu tương đương sinh học trong việc cấp phép lưu hành, đồng thời ban hành các hướng dẫn nghiên cứu về lĩnh vực này Tuy nhiên, qui chế đăng ký thuốc của nước ta vẫn chưa yêu cầu về tương đương sinh học và sinh khả dụng Khái niệm về sinh khả dụng và tương đương sinh học. .. xét tiền sử bệnh và các xét nghiệm cơ bản NTN phải có khả năng hiểu các thông tin về nghiên cứu và tự viết bản 7 tình nguyện tham gia nghiên cứu NTN tự nguyện tham gia nghiên cứu và ký vào Bản cam kết tình nguyện tham gia nghiên cứu theo mẫu được Hội đồng đạo đức thông qua Các thông tin về NTN và kết quả xét nghiệm, nghiên cứu sẽ được giữ bí mật trong hồ sơ nghiên cứu Tên, địa chỉ, hình ảnh NTN sẽ không... trong nghiên cứu y sinh học Bản quy chế này quy định cụ thể các hoạt động của hội đồng theo chuẩn mực GCP hiện hành Trong thời gian gần đây, trường đại học Dược Hà Nội đã thực hiện một số nghiên cứu bào chế dạng phóng thích kéo dài: bào chế viên Nifedipin, Salbutamol, Ketoprofen, Theophylin… Một số nghiên cứu khác về tương đương điều trị cũng đã bước đầu đề cập đến như nghiên cứu đánh giá tương đương. .. cùng một dược chất nhưng khác nhau về mặt hóa học (base, muối, este …) hoặc khác nhau về dạng thuốc hay hàm lượng [13] - Nghiên cứu đơn liều: nghiên cứu được thực hiện để đánh giá các thông số dược động học sau khi dùng một liều duy nhất [19] - Nghiên cứu đa liều ở trạng thái ổn định: nghiên cứu thực hiện để đánh giá các thông số DĐH trong một khoảng liều ở trạng thái ổn định Cho người tình nguyện dùng... thị trường trong nước, các chế phẩm chứa gliclazid đã được lưu hành và sử dụng trong điều trị, phần lớn là các thuốc nhập ngoại Gần đây, một số cơ sở sản xuất trong nước đã và đang nghiên cứu sản xuất các chế phẩm có chứa gliclazid, trong đó có cả những dạng thuốc giải phóng chậm như Glidin (Công ty Dược phẩm Vellpharm) Tuy nhiên, chất lượng của các chế phẩm sản xuất trong nước chưa được khẳng định,