Đang tải... (xem toàn văn)
đánh giá khả năng đáp ứng miễn dịch đối với protein MBP - VT2eB trên heo
[...]... trên MBP- VT2e trên heo con theo mẹ và đánh giá độ an - toàn của dịch tiêm - Khảo sát liều TCID50 của độc tố VT2e trên tế bào vero - Khảo sát hiệu giá kháng thể kháng MBP- VT2e theo phƣơng pháp khuyếch tán trên thạch Khảo sát hiệu giá kháng thể kháng MBP- VT2e bằng phƣơng pháp trung hòa độc tố - trên tế bào vero 3.3 VẬT LIỆU THÍ NGHIỆM 3.3.1 Vật liệu và thú thí nghiệm - Heo con theo mẹ: 25 con - Máu heo. .. trƣng trên tế bào đích Do đó khi tiêm protein MBP- VT2eB trên heo thì heo sẽ tạo ra kháng thể chống lại tiểu phần B của độc tố VT2e Do đó, độc tố này không có khả năng liên kết với các thụ thể đặc hiệu trên tế bào gốc nên mất khả năng gây bệnh Dựa trên phản ứng trung hòa độc tố verotoxin trên tế bào vero, có thể xác định hiệu giá kháng huyết thanh Nhờ đó đánh giá đƣợc khả năng gây đáp ứng miễn dịch của protein. .. buffer saline) - Sodium azid NaN3 - Protein tái tổ hợp MBP- VT2eB - Đệm borat - Formol - Thuốc nhuộm xanh methylene - Nƣớc cất 3.3.3 Dụng cụ thí nghiệm - Syringe vô trùng 1ml và 5ml - Effendof 1,5ml - Tủ cấy vô trùng - Máy li tâm lạnh - Tủ ấm CO2 - Đĩa polystyren 96 giếng - Miếng plastic dán đĩa polystyren - Chai nuôi tế bào Roux 25, 80cm2 - Pippete man - Pippete Pasteur - Đầu côn 1000 l,100 l - Ống thủy... xuất ra loại protein của gen kháng nguyên làm vacxin Protein này còn đƣợc gọi là protein tái tổ hợp dùng sản xuất vacxin tái tổ hợp [3] 2.1.2.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến đáp ứng miễn dịch [4] Bản thân túc chủ Những loài khác nhau thì khả năng đáp ứng miễn dịch khác nhau Ở những cá thể khác nhau thì tính sinh miễn dịch cũng khác nhau, do: Di truyền: ngƣời ta có thể tăng khả năng đáp ứng miễn dịch bằng... có khả năng đáp ứng miễn dịch cao Tùy cơ địa của từng cá thể mà có thể có hiện tƣợng dị ứng khi gây miễn dịch Tuổi: thú quá nhỏ thì khả năng đáp ứng miễn dịch không cao do hệ thống cơ quan miễn dịch của thú chƣa phát triển hoàn chỉnh Hơn nữa những thú nhỏ đều có kháng thể do mẹ truyền nên những kháng thể này có thể trung hòa kháng nguyên đƣa vào Tình trạng sức khỏe: những thú khỏe mạnh khả năng đáp. .. gây miễn dịch trên hai qui trình khác nhau thì khả năng gây đáp ứng miễn dịch khác nhau Mỗi một loại kháng nguyên thích hợp với một qui trình gây miễn dịch riêng Đối với những kháng nguyên yếu thì phải tuân theo một qui trình miễn dịch nghiêm ngặt và phải chủng nhiều lần mới có hiệu quả Trong khi đó những kháng nguyên mạnh thì chỉ cần chủng một lần Hiệu ứng cộng lực kháng nguyên Các nhà miễn dịch. .. độc tố SLT-I và SLT-II chỉ liên kết với Gal 1-4 Gal -4 Glc 1-1 Cer (globotriosyl ceramid- Gb3), trong khi độc tố VT2e liên kết với cả Gb3 và GalNAc 1-3 Gal 14Gal 1-4 Glc 1-Cer (globotetraosyl ceramid-Gb4), Gal 1-3 GalNAc 1-3 Gal 114Gal 1-aGlc 1-1 Cer (globopenosyl- Gb5) trên tế bào vero [13] Các tế bào của lớp nội mô ở heo nhạy cảm với độc tố VT2e Và độc tố này gây ra những tổn thƣơng chủ yếu trên lớp nội mô... đáp ứng miễn dịch cao hơn những thú bị bệnh hay sức khỏe yếu Do đó chỉ gây miễn dịch với những thú có sức khỏe tốt , không mắc các bệnh truyền nhiễm khác Chế độ dinh dƣỡng: những thú đƣợc nuôi dƣỡng tốt sẽ đáp ứng miễn dịch tốt hơn những thú không đƣợc chăm sóc tốt Kháng nguyên Tính lạ kháng nguyên Đáp ứng miễn dịch xảy ra khi có sự khác biệt chủng loài giữa kháng nguyên và túc chủ Khả năng đáp ứng. .. tinh 3ml - Máng nhựa tiệt trùng - Kính hiển vi soi ngƣợc IOD3 - Máy Spectrophotomer - Buồng đếm hồng cầu GASSALEM - Tủ lạnh 2-8 oC, tủ lạnh -2 0oC - Đĩa petri 3cm - Dụng cụ đục lỗ - Lò microwave - Cân phân tích 19 20 3.4 PHƢƠNG PHÁP 3.4.1 Bố trí thí nghiệm - Tiến hành khảo sát trên 5 lô, số lƣợng heo con 5 cá thể/lô, phân bố ngẫu nhiên từ heo con lớn nhất trong bầy của 5 nái: Lô 1: lô đối chứng không... của dịch lọc vi khuẩn đối với tế bào vero Đối chứng (-) 1: giếng chỉ chứa môi trƣờng nuôi cấy tế bào Đối chứng (-) 2: giếng có dịch lọc canh khuẩn E coli DH5α không chứa độc tố VT2e 24 25 - Kết quả ghi nhận: nồng độ TCID50 là nồng độ gây chết 50% tế bào vero nghĩa là giá trị OD 50% so với OD của giếng đối chứng (-) 1 3.4.6 Thực hiện phản ứng trung hòa độc tố [8], sơ đồ 3.2 Tiến hành ủ độc tố với 123doc.vn
