Bài giảng : TIẾP CẬN VẤN ĐỀ PHÁT HIỆN TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG CÁC THỰC PHẨM CÓ NGUỒN GỐC TỪ ĐỘNG VẬT PART 6 pdf

9 362 1
Bài giảng : TIẾP CẬN VẤN ĐỀ PHÁT HIỆN TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG CÁC THỰC PHẨM CÓ NGUỒN GỐC TỪ ĐỘNG VẬT PART 6 pdf

Đang tải... (xem toàn văn)

Thông tin tài liệu

Kiểmtrachấtlượng đĩachuẩnbị XÁC ĐỊNH MIC 0,6258 1,257 2,56 55 6,674 103 µg/mlSolution XÁC ĐỊNH MIC 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 25.00 37.50 50.00 62.50 75.00 87.50 100.00 112.50 125.00 137.50 150.00 162.50 175.00 Lương kháng sinh chuẩn/đĩa (ng) Độ r ộ ng vòng vô khu ẩ n quanh đĩ a gi ấ y (mm) Danofloxacine Oxolinic acid Difloxacine Ciprofloxacine Norfloxacine Enrofloxacine Flumequine Sulfadiazine Sulfadimethoxine Sulfamethoxazole Chlortetracycline Oxytetracycline Tetracycline Độ rộngvòngvôkhuẩnquanh đĩa giấybiến độngtuỳ theo lượngkhángsinhcótrong50 µldungdịchchuẩn Qui trìnhtáchchiết Lớptrên đượcà đĩa 3 ± 0,1g tômnghiền 5 ml acetonitrile/acetone(70/30: V/V) Lắc đảo đầutrong10 phút Lytâmtốc độ3000 vòng/phúttrong10 phút ở 15°C ThuhồiLớptrên được Làmbayhơi đếnkhô=«SAVANT» or khi N 2 40°C Phầnchấtkhôcònlại đượcthuhồitrong200 µlmethanol Lytâmtốc độ3000 vòng/phúttrong10 phút ở 15°C 3 gam tôm/200 µl methanol 50µl chứa0,75 gamtôm Xác địnhkhối lượngmẫutômbénhất cầnlấychomộtlầntáchchiết Khối lượngmẫutômbé nhấtcầnlấy(QME)/phân tích Qui trìnhtáchchiết Giớihạnnồng độ tối đa (LMR) QMI (ngtrong50 µl/đĩa) QME (g) = QMI * LMR -1 Phương pháphiểuchỉnhphươngpháp Chuẩnhoá theo QĐ 2002/657/CE -LCR, AFSSA, FOUGERES NA (Âmtínhtheo qui định)FN (Âmtínhgiả)Âmtính FP (Dươngtínhgiả) PA (Dươngtínhtheo qui định) Dươngtính Mẫuthựcsựâmtính (N-) (mẫutrắng) Mẫuthựcsựdươngtính (N+) (mẫucủngcố) Kếtquả test PA Độ nhạy (%)= x 100 N + NA Độ đặchiệu (%)= x 100 N - PA + NA Độ xácthực (%)= x 100 N OùN = N + + N - Xác địnhLOD: MIC à mẫutrắngcủngcốgầnvớiMIC à <5% âmtính NGUYÊN LÝ CỦAKÍT ELISA (FLUORO)QUINOLONES 2 HOURS DO CER CUNG CẤP Giántiếp-Canhtranh (FLUORO)QUINOLONES 2 HOURS CER _ BỈ ThànhphầncủamộtKit 1. Mộtplate 96 giếngcóphủ KT tinhsạchcủacừukhánglạiKT cónguồn gốcthỏ 2. 7 lọ cóchứadungdịchchuẩn(KN): 1, 0.5, 0.3, 0.2, 0.1, 0.05 và0 ng/ml 3. DungdịchchứaKN cógắnvớimengâyphản ứngtạomàu(Peroxide cọnugatednorfloxacin) 4. Lọ chứaKT cónguồngốctừthỏ đặchiệuvới KN được đông khô 5. 1 lọ 18 ml Substrate/chromogen(thamgiaphản ứngtạomàu perocide/TMB) 6. 50 ml dungdịch đệmphaloãngpH 7,4 -10x 7. Dungdịchdừngphản ứngH 2 SO 4 6N 8. 50 ml dungdịch đệm để rửa-10x 9. TàiliệuthôngsốkỹthuậtcủaKit . MIC 0 ,62 58 1,257 2, 56 55 6, 674 103 µg/mlSolution XÁC ĐỊNH MIC 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6. 0 25.00 37.50 50.00 62 .50 75.00 87.50 100.00 112.50 125.00 137.50 150.00 162 .50 175.00 Lương kháng sinh. BỈ ThànhphầncủamộtKit 1. Mộtplate 96 giếngcóphủ KT tinhsạchcủacừukhánglạiKT c nguồn gốcthỏ 2. 7 lọ cóchứadungdịchchuẩn(KN ): 1, 0.5, 0.3, 0.2, 0.1, 0.05 và0 ng/ml 3. DungdịchchứaKN cógắnvớimengâyphản ứngtạomàu(Peroxide cọnugatednorfloxacin) 4 rộngvòngvôkhuẩnquanh đĩa giấybiến độngtuỳ theo lượngkhángsinhc trong5 0 µldungdịchchuẩn Qui trìnhtáchchiết Lớptrên đượcà đĩa 3 ± 0,1g tômnghiền 5 ml acetonitrile/acetone(70/3 0: V/V) Lắc đảo đầutrong10 phút Lytâmtốc

Ngày đăng: 27/07/2014, 20:20

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan