nhau thai Có mt trên màng các t bào B chín - - - - - - + - + Gn vào th th ca t bào thc bào dành cho Fc ca kháng th ++ +/- ++ + - - ? - - Vn chuy n qua màng nhy - - - - ++ ++ + - - Gây thoát ht các t bào mast - - - - - - - + - Kháng thể IgG IgG có n cao nht trong huyt thanh, chim khong 80% tng globulin min dch trong huyt thanh. Phân t IgG là mt monomer gm có hai chui nng ( và hai chui nh hoc ( hoc (. Trng phân t ca IgG khong 150.000 Da, hng s lng 7S, vì vy IgG có th thy c  trong lòng mch và  ngoài lòng mch. Có 4 lp nh IgG  u theo n gim dn ca chúng trong huyt thanh: IgG1 (9 mg/ml), IgG2 (3 mg/ml) IgG3 (1 mg/ml), và IgG4 (0,5 mg/ml). Bn lp nh c mã hoá bi 4 gene vùng hnh chui nng (gene CH) khác nhau mà có 90 - 95% trình t ADN gi phân bit lp nh này vi lp nh c ca vùng bn l, s  trí ca các cu disulfide liên chui ni các chui nng . S khác bit v acid amine gia các lp nh ct tính sinh hc ca phân t có nhng khác nhau. IgG1, IgG3 và IgG4 có th chuyn vn d c bo v thai phát trin. Mt s lp nh IgG có th hot hoá b th mc dù hiu qu ca chúng khác nhau. Lp nh IgG3 hot hoá b th hiu qu nht, tip theo là IgG1 rn IgG2 còn IgG4 thì không có kh t hoá b tht kháng th opsonin do chúng có th gn vào th th dành cho Fc có trên b mi thi tu theo lp nh: IgG1 và IgG3 có ái lc cao vi th th dành cho Fc, trong khi IgG4 có ái lc y và IgG2 có ái lc rt yu. Kháng thể IgM IgM chim 5 - 10% tnng globulin min dch huyt thanh, có n khong 1 mg/ml. IgM monomer xut hin  trên b mt t bào B (SIgM). Loi c phát hin  trên b mt ca 90% s t bào B trong máu ngoi vi và có vai trò sinh ht th th dành cho kháng nguyên. IgM do t bào plasma tit ra có cu t monomer ni vi nhau bi các cu disulfide gia các lãnh vc cu C tn cùng chui n monomer này b trí sao cho phn Fc quay v phía trung tâm ca pentamer và 10 v trí kt hp kháng nguyên quay ra phía ngoi vi ca pentamer. Mi mt pentamer có thêm mt chuc gi là chui J. Chui J có vai  hình thành pentamer. Chui c gn vi các gc cystein  u C tn cùng ca 2 trong s 10 chui nng bng cu disulfide. IgM là lp globulin min du tiên xut hing lu vi mt p globulin min dc tng hp  tr u trúc pentamer cp kháng th này có mt s tính cht riêng bit. Hoá tr ca phân t  trí kt hp kháng nguyên. Mt phân t IgM có th gn vi 10 hapten nhi vi nhng kháng nguyên ln, do s hn ch v không gian nên IgM ch có th gn vi 5 phân t trong cùng mt thy phân t IgM có tính "hám" i globulin min dch khác. Tính cht này ca IgM o ra kh  kt hp vt virus và hng cu. Ví d khi hng cc  vi các kháng th c hiu chúng s p li vi nhau trong mc gi là hit.  xy ra cùng mt mng phân t IgM cn thit nh  ng phân t n 1.000 l trung hoà các ving IgM ng IgG. IgM có hiu qu c hot hoá b th. S hot hoá b th i phi có 2 mnh Fc rt gn nhau, phân t IgM u này vì vy chúng hot hoá mnh. c ln - trng phân t 900.000, hng s lng 19S - nên IgM ch có trong lòng mch và có n rt thp  dch gian bào. S có mt ca chui J làm cho phân t có th kt hp vi các th th trên t bào tit và c chuyn vn qua hàng rào biu mô vào dch tit. Mc dù IgA là lp kháng th chính có trong dch tit globulin min dch tit b sung. Kháng thể IgA Mc dù IgA ch chim 10 - 15% tng globulin min dch trong huyt p globulin min dch chính trong dch ngoi tia, c bc mt, dch nhy khí ph qung tit niu sinh dng tiêu hoá. Trong huyt thanh IgA tn ti d n ti d tetramer. IgA trong dch ngoi tic gi là IgA tit, tn ti dng dimer hoc tetramer, có thêm chui polypeptide J và mt chui polypeptide nc gi là mnh tit. Chui J ging vi chui J ca IgM pentamer cn thit cho quá trình polymer hoá ca IgA huyt thanh ln IgA tit. Mnh tit là mt polypeptide 70.000 Da do t bào biu mô ca màng nhng tiêu hoá, hô hp, trong hc mt, tuyc bt nhng tit niu, và t cung sng IgA tit c sinh ra trong mi ngày lng ca bt k globulin min dch nào khác. T bào plasma tit IgA tp trung  b mt màng nhy dc theo hng tràng. Có khong 2,5x1010 t bào plasma tit IgA, l ng t bào plasma ca tu ch lympho và lách cng li. Mi ngày có khong 300 mg IgA tic tit ra dc theo hng tràng. Mnh tit cn thit cho s chuyn vn IgA dimer qua t bào biu mô nhy vào dch tit nhy . IgA có th gn mt cách cht ch vi th th trên b mt t bào biu mô nhy dành cho phân t globulin min dch polymer. Phc hp th th - IgA s c nhn chìm v m trong mt bng ri c chuyn vn qua t bào ti mt phía trong lòng ng. Tng s liên hp v th c phân ct bi enzyme và mt phn th th s tr thành mnh tit. Mnh tit c gc gii phóng cùng vi phân t IgA dimer vào dch tit. S có mt ca mnh tit còn có tác dng bo v phân t IgA không b tác dng ca các enzyme thu phân protein có trong dch tit phân hu. Ch c chuyn vn qua t bào biu mô nhi ta gi thit rng th th dành cho globulin min dn dng chui J ca phân t dimer. Vì vy ngoài IgA tit thì  c chuyn vn vào dch tit nhy. IgA tit còn có mt cht sc quan trng trong vic sinh ra min dch ti ch cng hô hp, tit niu sinh dng  phn ln các vi sinh vt gây bnh xâm nh. IgA tit gn vi các cu trúc ca b mt vi khun hon các vi sinh vt gn vào t bào nhy. Vì vy IgA tit có tác dn s nhim virus và c ch quá trình xâm nhp ca vi khun. Kháng thể IgE Mc dù IgE có n trong huyt thanh rt nh, ch i ta có th nhn bic qua hong sinh hc ca chúng. Các kháng th IgE gây ra các phn ng quá mn thc thì vi nhng tính cht ca s mc phn vi u tiên chng minh rng có mt thành phn trong huyt thanh gây ra các phn ng d ng. Các tác gi y huyt thanh ca mi b d ng tiêm trong da cho mi không b d p vào cùng v trí tiêm huyt thanh thì thy xut hin mt qu và  (gi Phn t tên là phn ng PK (vit tt ca hai ch Prausnitz và  nghim sinh h phát hin hot tính ca IgE.  chng nhà khoa hn m thc s có mt ca IgE trong huyt thanh. H ly huyt thanh t m b d ng gây min dch cho th  c kháng huyt thanh kháng isotype. Kháng huyt thanh ca th c phn ng vi tng lp kháng th ci t vào th IgA, IgM và IgD. Bng cách này các kháng th ng vi IgG, IgA, IgM và IgD s b ta cùng vi kháng c loi b khi huyt thanh th. Phn còn li là kháng th c hiu vi mt lp kháng th t. Kháng th kháng isotype này hoá ra li phong b hoàn toàn phn ng PK. Kháng th mi này t tên là globulin min dch E (ch E là bt ngun t kháng nguyên E ca mt loi phn hoa có kh p kháng th này). Phân t IgE gm hai chui nng epsilon (() và hai chui nh (hoc ( hoc ().Mi phân t IgE có hai cu disulfide ni chui nng vi chui nh và hai cu disulfide ni chui nng vi chui nng. Trng phân t 180.000, hng s lng 8S, thi gian bán phân hu khong 2 - 3 ngày. IgE rt d b bin tính khi x lý bng các tác nhân kh hoc bng nhit. Ví d  56 ºC trong 30 phút thì IgE  bin tính. IgE gn vi các th th dành cho Fc trên b mt bch cu ái kim  máu ngoi vi và t bào mast  n lên b mt các t bào này thì các v trí kt hp kháng nguyên  phn Fab ca IgE vn có th gn vi kháng nguyên và kháng nguyên s ni các phân t IgE k nhau li. S liên kt chéo ca các phân t n vi th th bn hing thoát bng ca bch cu ái kim và t bào mast làm gii phóng các cht trung gian hoá ht trung gian hot m thm mao mch giúp cho các kháng th i thc bào d dàng lt qua thành mch  n nh xâm nhp  (da, niêm mc). Do tác dm mao mch mà h thng [IgE - t bào mast - các amin hot mi canh ca" ti nh . Tuy nhiên khi hing thoát bng xy ra quá mng amine hot mch c gii phóng quá nhiu và rm r thì s làm xut hin các triu chng d ng. Ngoài ra s thoát bng ca t bào mast b làm gii phóng các cht trung gian hoá hc có tác dng chiêu m các loi t bào khác  chng li ký sinh trùng. Kháng thể IgD c phát hin lu tiên  mt bnh nhân b b mà protein  ca bnh nhân này không phn ng vi kháng huyt thanh kháng isotype kháng li cu ly protein  này gây min dch cho th c kháng huyt thanh phn ng vi mt lp kháng th mi có trong huyng vi nng  thp. Lp kháng th c gi là IgD có n khong 30 mg/ml huyt thanh chim 0,2% tng globulin min dch huyt thanh. Phân t IgD có hai chui nng delta (d) và hai chui nh (hoc k hoc ni vi nhau bng các cu liên chuu liên chui ni chui nng vi chui nh và mt cu ni chui nng vi chui nng. Trng phân t 170.000 - 200.000, hng s lng là 7S. T tng h 100 l hoá nhanh (thi gian bán phân hu là vài ba ngày) và rt d b thu phân bi enzyme plasmin trong t d b bin cht bi nhit và acid ngay c  m mà IgG, IgA hoc IgM không b ng gì. c ca IgD. Trong huyt thanh nhi b nhim khun mc hiu cho mt loi nào. IgD có trong kháng th kháng nhân, kháng tuyn giáp, kháng c t bch cu. IgD không kt hp b th, không gây phn v th ng trên da chuc nhau thai. t lp Ig xut hin trên màng các t bào B chín và vì vng nó có cht hoá t bào B bi kháng nguyên. BÀI 7. CYTOKINE Mi Cytokine gin th minh ha liên quan vi IL1 và TNF. áp ng min dch có nhiu loi t bào khác nhau, ch yu là các t bào dng lympho, các t bào viêm và các t bào to máu khác. Nhng c tp xy ra gia các t bào này vc thc hin thông qua mc gi chung là các  nói lên vai trò c bào vi t bào. Các cytokine là các protein hou hoà có trng phân t thc ch tit bi các t bào bch cu và nhiu loi t  ng vi mt s kích thích. Các cytokine tham gia vào s u hoà phát trin ca các t bào min dng thi có mt s ng trc tip lên ngay bn thân t t ra chúng. Nu các hormone làm nhim v truyt thông tin ca h thng ni tit thì các cytokine làm nhim v truyt thông tin ca h thng min dch. Tuy vy, khác vi hormone  ch nu hormone th hin hiu qu ca nó trên ng nt hormone thì nhìn chung các cytokine li hot ng ti chúng ta tn hong sinh hc và cu trúc ca các cytokine và các th th ca chúng, quá trình dn truyn tín hiu bi các th th dành cho cytokine, vai trò ca các bng v cytokine  bnh sinh ca mt s bnh, và kh  dng các cytokine hoc các th th cu tr. Các tính chất chung của cytokine Các cytokine gn vào các th th c hiu dành cho chúng trên màng các t ng dn truyn tín hiu vào bên trong t bào và cui cùng di biu hin gene ca t  bào nào s là t c th hin bi s có mt ca các th th c hiu dành cho cytokine trên b mt t bào ng thì ái lc gia cytokine và th th dành cho cytokine là rt cao vi h s phân tách (dissociation ng t 10 -10 n 10 -12 M. Chính vì có ái lc cao mà cytokine có ng sinh hc ngay c  các n rt thp ti mc picomole. Hong ca các cytokine có th phân thành các lot s cytokine hong theo kiu tự tiết  bám lên chính t t ra chúng; Mt s khác th hin hong theo kiu cận tiết  bào lân cn; Và mt s ng hp các cytokine th hin hong kiu nội tiết  là chúng bám vào các t bào   ti và thi gian cng min dch bng cách kích thích hoc c ch s  sinh ca các t bào khác nhau hoc bu hoà s tit các kháng th hoc các cytokine khác. Tác dng ca các cytokine có th theo các kiu đa dụng  là các cytokine gây ra các hot tính sinh hc khác nhau trên các t  khác nhau; đồng dụng cytokine khác nhau có th gây ra nhng ch u này làm cho khó có th qui mt hot tính sinh hc bic cho mt lohiệp đồng (synergy), có ng thì gây ra hiu qu lng tác ng ca tng riêng l; hoc đối kháng (antogonism), tc là mt cytokine này có tác dng c ch mt cytokine khác . Hong ca mt cytokine trên mt t ng nhìn chung s u hoà s xut hin ca các th th dành cho cytokine và xut hin các cytokine mi, nhng cytokine mi này s ng trên các t bào khác to nên mt phn ng dây chuyn. Bc hiu ca mt lympho bào vi mt kháng nguyên s n hot tính ca hàng lot t bào cn thit cho vic sinh ra mng min dch hu hiu. Ví d, các cytokine do các t bào T H hot hoá tit ra s n hot tính ca các t bào B, t bào T C , t i thc bào, bch cu ht, các t bào gc to y có th hot hoá toàn b h thng các t bào min dch. i ta v c hiu ca hoc hiu cng min dc chng minh mt cách rõ rt. Ðic tit ra t các t t hoá hong theo kic hiu trong quá trình ng min dch? Rõ ràng là cn phi có nh v bm c hiu cng min dc duy trì. Mt trong nh  là s u hoà nghiêm ngt vic xut hin các th th dành cho cytokine trên t ng các th th dành cho cytokine ch xut hin trên t bào sau khi t c này s hot c hiu bc hn ch i vi các lympho bào mn cm kháng nguyên. M c hiu là s cn thit c bào vi t  sn xuc các n hu hiu ca mt cytokine tp xúc t bào vi t bào. ng hp t bào Th, mt t bào ch yu tit cytokine, s  bào cht ch ch xy ra khi th th ca t bào T nhn dc mt phc hp kháng nguyên-phân t MHC trên b mt t bào trình din kháng nguyên thích hi thc bào, t bào có tua, hoc lympho B. Các cytokine tit ra ti p xúc t bào s c mt n   ng trên t bào  Sự phát hiện và tinh chế các cytokine Vào gia nhi ta bu phát hin ra các cytokine khi nuôi cy in vitro các t bào lympho khác c ni ca nhng nuôi cy này có cha nhng yu t mang hot tính sinh hc có kh u hoà s t hoá và chín ca các loi t bào dng lympho khác nhau. Ngay i ta phát hin thy rng các yu t này - ngày nay gi là các lymphokine - có th sinh ra bng cách nuôi lympho bào và hot hoá chúng bng kháng nguyên hoc bng các chc hiu ( kháng nguyên). Sự phân biệt về mặt chức năng của các cytokine Sau nhng phát hii n thy nhiu loi yu t mang hot tính sinh hc có trong dc ni nuôi lympho bào. Do s dng h thng phát hii ta nhn thy các king chc u lymphokine, và mi chc t yu t duy nhi ca các lymphokine ngày càng nhiu và tu thuc vào hot tính sinh hc ca chúng. Ðó là các yu t: - Yu t hot hoá lympho bào (Lympho Activating Factor - LAF). - Yu t ng t bào T (T-Cell Growth Factor - TCGF). - Yu t ng t bào B (B-Cell Growth Factor - BCGF). - Yu t thay th t bào T (T-Cell Replacing Factor - TRF). - Yu t gây bit hoá t bào B (B-Cell Differentiation Factor - BDF). - Yu t gây hot hoá t bào B (B-Cell Activating Factor - BAF). - Protein kích thích phân bào (Mitogenic Protein - MP). - Yu t kích thích phân bào thymo bào (Thymocyte Mitogenic Factor - TMF). Rt nhiu tài liu tham kht yu t n di ty các cytokine sinh ra trong các h thng sinh hc khác nhau có th gp li thành mt s nhóm nhnh theo cha chúng c tinh ch hoc clone hoá (bng 11.1). Bảng 1: Một số yếu tố do các lympho bào và các đại thực bào hoạt hoá tiết ra được xác nh bng các th nghim ch ng vi chúng Tên cũ gọi theo chức năng Viết tắt Lymphokine tương ứng - Yu t hot hoá t bào B B-Cell Activating Factor - Yu t bit hoá t bào B B-Cell Differentiation Factor - Cht gây st ni sinh Endogenous Pyrogen - Hematopoietin 1 - Yu t hot hoá lympho bào Lymphocyte-Activating Factor - Protein kích thích phân bào Mytogenic Protein - Yu t A sinh tinh bt trong huyt thanh Serum Amyloid A Inducer - Yu t III thay th t bào T BAF BDF EP HP-1 LAF MP SAA inducer TRF-III Interleukin 1 [...]... hoạt hoá đại thực bào trong phản ứng quá mẫn muộn Tiểu quần thể Th2 chế tiết IL -4 và IL-5, châm ngòi cho đáp ứng tạo kháng thể thể dịch Việc chế tiết IL-10 bởi tiểu quần thể Th2 ức chế tiểu quần thể Th1 sản xuất cytokine là do cytokine này có vai trò trung tâm trong việc điều hoà đáp ứng miễn dịch thể dịch và đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào Các tiểu quần thể Th1 và Th2 và vai trò của IL-10 trong... phần tạo nên phản ứng viêm tại chỗ bao gồm việc kích thích các tế bào mast phát triển và bài tiết histamine Interleukin 4 (IL -4) IL -4 là một cytokine khác có phổ hoạt tính sinh học rộng trên một số loại tế bào đích (bảng 11 .4) Hình như những nghiên cứu rõ ràng nhất về hoạt tính sinh học của chúng là những nghiên cứu chứng minh ảnh hưởng của chúng với sự hoạt hoá, sự tăng sinh và sự biệt hoá của các tế... thành tế bào plasma để tiết ra IgG1 Trong vòng 4 năm người ta đã clone hoá được gene mã hoá yếu tố biệt hoá (BCDF-I) và nhận thấy hai hoạt tính ban đầu mô tả là yếu tố sinh trưởng tế bào B và yếu tố biệt hoá tế bào B hoá ra đều là tác dụng của cùng một protein mà ngày nay được đặt tên là interleukin 4 Bảng 11 .4: Các hoạt tính sinh học của interleukin 4 Tế bào đích Tế bào lympho B Tác dụng - Ðồng kích... trong giai đoạn tế bào B sinh sản, IL -4 hoạt động như một yếu tố biệt hoá bằng cách điều hoà sự bật mở gene mã hoá IgG1 và IgE Vì vậy IL -4 còn được đặt tên là yếu tố cảm ứng “bật mở” Interleukin 5 (IL-5) Giống như IL -4, IL-5 có tác dụng kích thích cả sự tăng sinh lẫn sự biệt hoá của tế bào B Yếu tố này thúc đẩy sự sản xuất IgA Hình như nó có tác ụng hiệp đồng với IL -4 để thúc đẩy việc sản xuất IgE IL-5... đối với các tế bào bình thường (hình 11.7) Cơ chế tác dụng gây độc đặc hiệu của TNF-α đối với khối u cho đến nay vẫn còn chưa hiểu hết Những thành tựu sử dụng TNF-α trong miễn dịch trị liệu ung thư sẽ được đề cập đến trong chương miễn dịch trong ung thư TNF-α không chỉ có tác dụng gây hoại tử khối u mà nó còn đóng một vai trò quan trọng trong sự phát triển của một đáp ứng viêm hữu hiệu có tác dụng thanh... thương được tiếp diễn Cytokine này còn là một chất điều biến miễn dịch tiềm năng có rất nhiều tác dụng đa chiều hướng Chẳng hạn TGF-( ức chế hoạt tính của một số cytokine khác như IL-2, IL -4, IFN-( và TNF Sự chế tiết các cytokine bởi các tiểu quần thể tế bào TH Như đã đề cập trước, gần đây người ta đã phân biệt được hai tiểu quần thể TH có CD4+ của chuột nhắt dựa vào sự chế tiết các lymphokine in vitro... mast Kích thích tăng trưởng IL -4 có những hiệu quả khác nhau trên tế bào B ở những giai đoạn khác nhau của chu trình tế bào Ðối với những tế bào B nhỉ ngơi, IL -4 hoạt động như một yếu tố hoạt hoá, kích thích các tế bào nghỉ ngơi thành các tế bào lớn và tăng khả năng xuất hiện các phân tử MHC lớp II Tiếp theo sự hoạt hoá bởi kháng nguyên hoặc các chất kích thích phân bào, IL -4 hoạt động như một yếu tố sinh... hành tinh chế cytokine từ dịch nổi nuôi cấy Trong phần lớn các trường hợp người ta cô đặc cytokine bằng lọc màng và tiếp theo bằng kỹ thuật sắc k{ trao đổi ion, lọc gel, kỹ thuật tập trung đẳng điện và sắc ký lỏng cao áp (HPLC) Sau mỗi bước tinh chế người ta phải xác định lại mức độ hoạt tính sinh học của cytokine Việc tinh chế IL-2 là một ví dụ điển hình Thử nghiệm sinh học quyết định trong quá trình... lượng đủ lớn các sản phẩm tinh khiết dùng cho các nghiên cứu sâu hơn về cấu trúc và chức năng của các protein quan trọng này Bảng 11.3 và 11 .4 tóm lược các hoạt tính sinh học chủ yếu của các cytokine có tầm quan trọng nhất Interleukin 1 (IL-1) Hoạt tính sinh học của IL-1 lần đầu tiên được Gery I, Gershon R K và Waksman B H mô tả vào năm 1970 Họ đã chỉ ra rằng không thể sử dụng đơn thuần PHA, một chất... định Khi sử dụng hệ thống thử nghiệm này để đánh giá hoạt tính sinh học của các cytokine đã phát hiện từ trước có các chức năng khác nhau, người ta đã phát hiện thấy rằng trước đây tưởng như có rất nhiều cytokine và mỗi một cytokine được đặt tên theo hoạt tính sinh học của nó, nhưng thực ra đó lại chỉ là một cytokine có các hoạt tính sinh học khác nhau Vì vậy người ta đã đưa ra một bảng thuật ngữ chuẩn . 4 lp nh IgG  u theo n gim dn ca chúng trong huyt thanh: IgG1 (9 mg/ml), IgG2 (3 mg/ml) IgG3 (1 mg/ml), và IgG4 (0,5 mg/ml). Bn lp nh c mã hoá bi 4. lp nh ct tính sinh hc ca phân t có nhng khác nhau. IgG1, IgG3 và IgG4 có th chuyn vn d c bo v thai phát trin. Mt. khác nhau. Lp nh IgG3 hot hoá b th hiu qu nht, tip theo là IgG1 rn IgG2 còn IgG4 thì không có kh t hoá b tht kháng th opsonin do chúng